RU2147318C1 - Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5241 used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals - Google Patents
Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5241 used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals Download PDFInfo
- Publication number
- RU2147318C1 RU2147318C1 RU99117161A RU99117161A RU2147318C1 RU 2147318 C1 RU2147318 C1 RU 2147318C1 RU 99117161 A RU99117161 A RU 99117161A RU 99117161 A RU99117161 A RU 99117161A RU 2147318 C1 RU2147318 C1 RU 2147318C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- fur
- wild animals
- pseudomonas aeruginosa
- vaccine
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарии и предназначено для производства вакцинных препаратов против синегнойной инфекции пушных зверей, преимущественно песцов и лисиц. The invention relates to the field of biotechnology and veterinary medicine and is intended for the production of vaccines against pseudomonas infection of fur animals, mainly arctic foxes and foxes.
Синегнойная инфекция распространена повсеместно, наносит значительный экономический ущерб звероводству и представляет опасность здоровью людей. В зверосовхозах ежегодно регистрируются энзоотипии среди норок, песцов и лисиц. Зарегистрированы случаи болезни у кроликов, нутрий, хорей. В последние годы стали отмечать синегнойную инфекцию у собак домашнего содержания. Pseudomonas infection is ubiquitous, causing significant economic damage to animal farming and poses a danger to human health. In fur farms, enzootypes among minks, arctic foxes and foxes are recorded annually. Cases of the disease have been reported in rabbits, nutria, trochees. In recent years, a Pseudomonas infection has been observed in dogs of domestic maintenance.
Патология при синегнойной инфекции как у людей, так и у животных очень разнообразна - поражение репродуктивной системы, септические процессы в организме, поражение желудочно-кишечного тракта у молодых животных, поражение молочных желез и т.д. У лисиц и песцов она протекает с поражениями гениталий и сопровождается нарушением процесса беременности - абортами, рассасыванием эмбрионов, пропустованием самок. The pathology of Pseudomonas infection in both humans and animals is very diverse - damage to the reproductive system, septic processes in the body, damage to the gastrointestinal tract in young animals, damage to the mammary glands, etc. In foxes and arctic foxes, it occurs with lesions of the genitals and is accompanied by a violation of the pregnancy process - abortion, resorption of embryos, and the passage of females.
Возбудитель псевдомоноза обладает серотиповой вариабельностью, поэтому эффективность специфической профилактики определяется полнотой антигенного состава входящих в вакцину компонентов. The causative agent of pseudomonosis has serotypic variability, therefore the effectiveness of specific prophylaxis is determined by the completeness of the antigenic composition of the components included in the vaccine.
Известен вакцинный штамм Pseudomonas aeruginosa PA-7 второго серотипа, используемый для изготовления анатоксин-вакцины против синегнойной инфекции (SU N 1202109, опубл. 15.06.86). Known vaccine strain Pseudomonas aeruginosa PA-7 of the second serotype used for the manufacture of toxoid vaccines against Pseudomonas aeruginosa (SU N 1202109, publ. 15.06.86).
Однако известный штамм не содержит антигены возбудителя псевдомоноза пушных зверей и не обеспечивает формирования иммунитета против синегнойной инфекции пушных зверей. However, the known strain does not contain antigens of the causative agent of pseudomonosis of fur animals and does not provide immunity against Pseudomonas infection of fur animals.
Наиболее близким аналогом является штамм Pseudomonas aeruginosa N 202 шестого серотипа, входящий в состав инактивированной вакцины против псевдомоноза пушных зверей, преимущественно норок ("Ветеринарные препараты". Справочник, под ред. Д.Ф. Осидзе. М.: Колос, 1981, с. 306-308). The closest analogue is the sixth serotype strain Pseudomonas aeruginosa N 202, which is part of the inactivated vaccine against pseudomonosis of fur animals, mainly minks ("Veterinary preparations". Handbook, edited by DF Osidze. M .: Kolos, 1981, p. 306-308).
Однако известный производственный штамм имеет нестабильные вирулентные и иммуногенные свойства и, более того, не позволяет профилактировать псевдомоноз песцов и лисиц, вызываемый возбудителями других серовариантов. However, the known production strain has unstable virulent and immunogenic properties and, moreover, does not prevent the pseudomonosis of arctic foxes and foxes caused by pathogens of other serovariants.
Задачей изобретения является получение штамма Pseudomanas aeruginosa для изготовления эффективной вакцины против псевдомоноза пушных зверей независимо от серологического профиля возбудителя. The objective of the invention is to obtain a strain of Pseudomanas aeruginosa for the manufacture of an effective vaccine against pseudomonosis of fur animals, regardless of the serological profile of the pathogen.
Технический результат изобретения заключается в получении нового штамма Pseudomonas aeruginosa 5241, способного продуцировать основные факторы патогенности в оптимальных значениях и позволяющий изготовить вакцину против любых серовариантов синегнойной палочки не только для песцов и лисиц, но и других восприимчивых к данной инфекции зверей и животных.The technical result of the invention is to obtain a new strain of Pseudomonas aeruginosa 524 1 , capable of producing the main pathogenicity factors in optimal values and allowing to produce a vaccine against any serovariants of Pseudomonas aeruginosa not only for arctic foxes and foxes, but also other animals and animals susceptible to this infection.
Сущность изобретения: штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa 5241 выделен от самки песца з/с "Айнажи" и депонирован в коллекции штаммов - возбудителей заболеваний пушных зверей музея бактериальных и вирусных культур Научно-исследовательского института пушного звероводства и кролиководства (НИИПЗК) им. В.А. Афанасьева и имеет регистрационный номер 5241.The inventive bacterial strain Pseudomonas aeruginosa 524 1 isolated from female foxes s / s "Ainazhi" and deposited in the collection of strains - pathogens of fur-bearing animals of the Museum of Bacterial and Viral Cultures of the Scientific Research Institute of Fur Breeding and Rabbit Farming (NIIPZK) them. V.A. Afanasyev and has a registration number 524 1 .
Штамм Ps.aeruginosa 5241 предназначен в качестве продуцента экзотоксина A при изготовлении специфического иммунного препарата против синегнойной инфекции песцов и лисиц.Strain Ps.aeruginosa 524 1 is intended as a producer of exotoxin A in the manufacture of a specific immune preparation against Pseudomonas infection of foxes and foxes.
Штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa НИИПЗК N 5241 характеризуется следующими признаками и свойствами.The bacterial strain Pseudomonas aeruginosa NIIPZK N 524 1 is characterized by the following features and properties.
Генетические маркеры:
Серовариант 04 (Habs)
Пиоцинотип 231211
Фаготип 188. 1; F-8, 119•(68); CoL-11; 73.Genetic markers:
Serovariant 04 (Habs)
Piocinotype 231211
Phagotype 188. 1; F-8, 119 • (68); CoL-11; 73.
Штам 5241 токсичный, слизеобразующий, с высокой адгезивной активностью.Strain 524 1 is toxic, mucus-forming, with high adhesive activity.
Морфологические свойства. Производственная культура представляет собой тонкие прямые грамотрицательные палочки, размером 2-3 • 0,5 микрона. Палочки подвижные, монотрихи, спор не образуют, в мазках располагаются поодиночке и рядами. Morphological properties. The industrial culture consists of thin straight gram-negative bacilli, measuring 2-3 • 0.5 microns. The rods are movable, monotrichi, do not form a spore, in strokes are located singly and in rows.
Культуральные свойства. Аэроб, оптимальная температура роста при 32-37oC, сохраняет способность к росту и размножению при 42oC. Растет почти на всех питательных средах с pH 8,0. На поверхности МПБ образует характерную серовато-серебристую пленку. Образует пигмент пиоцианин. Лучшей средой культивирования является бульон Мартена с добавлением 0,5% глютамата натрия и 1% глицерина. На МПА образует S- и R-формы, с преобладанием S-форм.Cultural properties. Aerob, the optimum growth temperature at 32-37 o C, retains the ability to grow and reproduce at 42 o C. It grows on almost all nutrient media with a pH of 8.0. On the surface of the MPB forms a characteristic grayish-silver film. Forms pigment pyocyanin. The best cultivation medium is Marten broth with the addition of 0.5% sodium glutamate and 1% glycerol. On MPA forms S- and R-forms, with the predominance of S-forms.
Биохимическая активность. Высокая кислотообразующая активность в отношении глюкозы и галактозы; в аэробных условиях расщепляет сахара с образованием глюконовой кислоты без газа, разжижает желатин, свертывает молоко, не вызывает образования индола и сероводорода. Образует цитохромоксидазу, вызывает гидролиз ацетамида. Biochemical activity. High acid-forming activity against glucose and galactose; under aerobic conditions it breaks down sugars to form gluconic acid without gas, liquefies gelatin, coagulates milk, and does not cause the formation of indole and hydrogen sulfide. It forms cytochrome oxidase, causes hydrolysis of acetamide.
Вирулентные свойства. При внутрибрюшинном введении белым мышам LD/50 составляет 2,5•108 KOE/мл.Virulent properties. When administered intraperitoneally to white mice, the LD / 50 is 2.5 • 10 8 KOE / ml.
Антигенные свойства. Штамм вырабатывает экзотоксин A, щелочную протеазу, эластазу, внеклеточную слизь, обладает адгезивными свойствами. Antigenic properties. The strain produces exotoxin A, an alkaline protease, elastase, extracellular mucus, and has adhesive properties.
Токсигенные свойства. В жидкой питательной среде вырабатывает экзотоксин A (титр в РПГА 1:128), щелочную протеазу (показатель гидролиза казеина 112), эластазу (в РП 1:16). Внеклеточную слизь в МПБ и на МПА. Титр адгезина в РГА 1:256. Toxigenic properties. In a liquid nutrient medium, it produces exotoxin A (titer in RPGA 1: 128), alkaline protease (indicator of hydrolysis of casein 112), elastase (in RP 1:16). Extracellular mucus in the MPB and MPA. The adhesion titer in the RSA is 1: 256.
Хранение штамма. При температуре 6±2oC в ампулах в лиофилизированном состоянии более трех лет; в пробирках в столбике полужидкого агара, приготовленного на бульоне Мартена с добавлением 0,5%-ного глютамата натрия и 1%-ного глицерина, под вазелиновым маслом в течение трех месяцев; в пробирках на скошенном агаре не более 14 дней.Strain storage. At a temperature of 6 ± 2 o C in ampoules in a lyophilized state for more than three years; in test tubes in a column of semi-liquid agar prepared on Marten broth with the addition of 0.5% sodium glutamate and 1% glycerol, under liquid paraffin for three months; in test tubes on mowed agar no more than 14 days.
Контроль за состоянием штамма. Контролируют морфологические, биохимические, культуральные и вирулентные свойства не реже 1 раза в три месяца. Антигенные свойства (экзотоксин A) проверяют перед производством иммунного препарата. Monitoring the status of the strain. Morphological, biochemical, cultural and virulent properties are monitored at least once every three months. Antigenic properties (exotoxin A) are tested before production of the immune preparation.
Титр экзотоксина A в РПГА с использованием эритроцитов, сенсибилизированных иммуноглобулином, выделенным из моновалентной антитоксической сыворотки, должен быть не менее 1:128. The titer of exotoxin A in RPHA using erythrocytes sensitized with immunoglobulin isolated from monovalent antitoxic serum should be at least 1: 128.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами. The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. Штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa 5241 культивируют на бульоне Мартена или синтетической среде при 32oC в течение 18-20 часов при постоянном встряхивании на шуттель-аппарате. По истечении срока инкубации культуру проверяют на чистоту роста в мазках, окрашенных по Грамму.Example 1. The bacterial strain Pseudomonas aeruginosa 524 1 is cultivated on Marten broth or synthetic medium at 32 o C for 18-20 hours with constant shaking on a shuttle machine. At the end of the incubation period, the culture is checked for cleanliness of growth in smears stained by Gram.
Далее из выросшей культуры отбирают пробу, центрифугируют ее при 6000 об/мин в течение 20 мин. Надосадочную жидкость сливают и исследуют на содержание: экзотоксина A в реакции преципитации (РП) с антитоксической сывороткой и/или на щелочную протеазу в реакции гидролиза казеина и/или на эластазу в РП с моновалентной антиэластазной сывороткой. Титры должны составлять: экзотоксина A - не ниже 1:4, щелочной протеазы - не ниже 1:32, эластазы - не ниже 1:16. Next, a sample is taken from the grown culture, centrifuged at 6000 rpm for 20 minutes. The supernatant is drained and examined for the content of: exotoxin A in a precipitation reaction (RP) with antitoxic serum and / or an alkaline protease in casein hydrolysis and / or elastase in a RP with monovalent antelastase serum. Titles should be: exotoxin A - not lower than 1: 4, alkaline protease - not lower than 1:32, elastase - not lower than 1:16.
После контроля выросшей культуры на токсигенность и протеолитическую активность отделенную бакмассу подвергают инактивации любым известным способом и добавляют адъювант, например гидроокись алюминия. After controlling the grown culture for toxigenicity and proteolytic activity, the separated bacmass is inactivated by any known method and an adjuvant, for example aluminum hydroxide, is added.
Пример 2. Полученную по примеру 1 вакцину проверяют на безвредность на 9 песцах. Вакцину вводят внутримышечно в область бедра правой лапы в дозах: трем песцам по 1,0 мл, трем - по 2,0 мл и трем - по 3,0 мл. Example 2. Obtained in example 1, the vaccine is checked for harmlessness on 9 Arctic foxes. The vaccine is administered intramuscularly in the thigh area of the right paw in doses: three foxes, 1.0 ml each, three - 2.0 ml each and three - 3.0 ml each.
Проводят ежедневное наблюдение за песцами в течение 7 дней с индивидуальным прощупыванием места инъекции. Термометрию песцов проводят дважды на 2-ой и 4-ый дни после введения препарата. Conduct daily monitoring of Arctic foxes for 7 days with individual probing of the injection site. Thermometry of arctic foxes is carried out twice on the 2nd and 4th days after drug administration.
Результаты исследования показали, что все песцы вели себя обычно, корм поедали полностью, агрессивность не наблюдалась. Температура тела была в пределах нормы - 37-39oC. При прощупывании места инъекции вакцины не было обнаружено опухания конечности, болезненности.The results of the study showed that all Arctic foxes behaved normally, completely ate food, aggressiveness was not observed. Body temperature was within the normal range - 37-39 o C. When probing the injection site of the vaccine, no swelling of the limb or soreness was detected.
Пример 3. Полученной вакциной иммунизируют песцов на ферме, не благополучной по синегнойной инфекции, для исследования влияния иммунизации на результаты воспроизводства, поскольку основная патология при синегнойной инфекции проявляется именно в период воспроизводства. Example 3. The resulting vaccine is used to immunize Arctic foxes on a farm that is not favorable for Pseudomonas aeruginosa to study the effect of immunization on reproduction results, since the main pathology in Pseudomonas aeruginosa is manifested precisely during the reproduction period.
В данном хозяйстве среди песцов отмечаются случаи абортов, пропустования самок, рождение мертвых щенков. При этом у абортированных самок на последних сроках беременности (за неделю до срока щенности) при бактериологическом исследовании была выделена культура синегнойной палочки 03 и 09 сероваров. In this household, there are cases of abortion, omission of females, and the birth of dead puppies among arctic foxes. Moreover, in aborted females in the last stages of pregnancy (one week before the gestation period), bacteriological examination revealed a culture of Pseudomonas aeruginosa 03 and 09 serovars.
Полученной по примеру 1 вакциной иммунизируют 50 самок песцов внутримышечно в дозе 1,5 мл. В качестве контроля служат другие 50 самок, аналогичные по возрасту, окрасу и условиям содержания и кормления. Obtained according to example 1, the vaccine is immunized with 50 female foxes intramuscularly at a dose of 1.5 ml. Another 50 females, similar in age, color, and conditions of keeping and feeding, serve as control.
Установлено, что применение вакцины повысило плодовитость песцов опытной группы на 0,7 щенка. Вакцина предотвратила рассасывание плодов у некоторых самок опытной группы, в то время как у некоторых самок контрольной группы был зарегистрирован приплод всего в 4-5 щенков. Это чаще всего обусловлено рассасыванием плодов в первой половине беременности. It was found that the use of the vaccine increased the fecundity of the foxes of the experimental group by 0.7 puppies. The vaccine prevented the resorption of the fruit in some females of the experimental group, while in some females of the control group the offspring was registered in only 4-5 puppies. This is most often due to resorption of the fetus in the first half of pregnancy.
Таким образом, вакцина на основе штамма 5241 позволит предотвратить скрытые потери при воспроизводстве пушных зверей в хозяйствах, не благополучных по синегнойной инфекции.Thus, the vaccine based on strain 524 1 will prevent hidden losses during the reproduction of fur animals in farms that are not successful in Pseudomonas aeruginosa.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99117161A RU2147318C1 (en) | 1999-08-12 | 1999-08-12 | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5241 used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99117161A RU2147318C1 (en) | 1999-08-12 | 1999-08-12 | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5241 used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2147318C1 true RU2147318C1 (en) | 2000-04-10 |
Family
ID=20223577
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99117161A RU2147318C1 (en) | 1999-08-12 | 1999-08-12 | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5241 used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2147318C1 (en) |
-
1999
- 1999-08-12 RU RU99117161A patent/RU2147318C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Гвоздяк Р.И., Яковлева Л.М. Об особенностях патогенности Pseudomonas Aeruginosa. В: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.-М.: Медицина, 1987, N3, с. 3 - 6. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Jones et al. | Vibrios (Vibrio jejuni, n. sp.) associated with intestinal disorders of cows and calves | |
RU2169193C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5142 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
Adlam et al. | Natural and experimental staphylococcal mastitis in rabbits | |
RU2428202C1 (en) | Associated vaccine against anaerobic enterotoxemia and colibacillosis diarrhea in calves | |
RU2147318C1 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5241 used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals | |
RU2147317C1 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 4992, used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals | |
RU2169190C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5292 used for making vaccine against pseudomonosis in fur wild animals | |
RU2169189C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 4762 used for making vaccine against pseudomonosis in fur wild animals | |
RU2169765C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5002 used for preparing vaccine against fur wild animal pseudomonosis | |
RU2169766C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa лo1 used for preparing vaccine against fur wild animal pseudomonosis | |
RU2169764C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5132 used for preparing vaccine against fur wild animal pseudomonosis | |
RU2169191C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5291 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
RU2169192C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa ло3 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
RU2169195C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5271 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
RU2169188C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 4492 used for making vaccine against fur wild animal pseudomonosis | |
RU2169194C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5211 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
CN110075289A (en) | A kind of haemophilus parasuis, Streptococcus suis and Actinobacillus pleuropneumoniae triple inactivated vaccine and its application | |
RU2263143C2 (en) | Strain of bacterium streptococcus pyogenes 289 used for preparing vaccine against streptococcosis in fur animal | |
RU1092947C (en) | Strain pseudomonas acruginosa sepotype 11 n 48 used for obtaining pseudomonous antigen | |
RU2521651C1 (en) | STRAINS OF BACTERIA Moraxella bovoculi "SH-CH6 N-DEP" USED TO MANUFACTURE DIAGNOSTIC PREPARATIONS AND VACCINES AGAINST INFECTIOUS KERATOCONJUNCTIVITIS OF CATTLE | |
CN110124022A (en) | A kind of mycoplasma hyopneumoniae and haemophilus parasuis, Streptococcus suis, Actinobacillus pleuropneumoniae tetrad inactivated vaccine and its application | |
US3980523A (en) | Method of propagating microorganisms | |
RU2098128C1 (en) | Mixed vaccine for control over sheep limb illness | |
RU2098127C1 (en) | Mixed vaccine for control over cattle necrobacteriosis | |
RU2268933C1 (en) | STRAIN Haemophilus parasuis SK-1 AS PATHOGEN OF SWINE HEMOPHILEOUS POLYSEROSITIS FOR PREPARING DIAGNOSTIC AND VACCINE PREPARATIONS |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20040813 |