RU2141665C1 - Method of detection of tuberculosis mycobacterium - Google Patents
Method of detection of tuberculosis mycobacterium Download PDFInfo
- Publication number
- RU2141665C1 RU2141665C1 RU98107285A RU98107285A RU2141665C1 RU 2141665 C1 RU2141665 C1 RU 2141665C1 RU 98107285 A RU98107285 A RU 98107285A RU 98107285 A RU98107285 A RU 98107285A RU 2141665 C1 RU2141665 C1 RU 2141665C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sowing
- mixture
- detection
- pathological material
- treatment
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области микробиологии и может быть использовано для выявления микобактерий туберкулеза в патологическом материале от людей и животных. The invention relates to the field of microbiology and can be used to detect mycobacterium tuberculosis in pathological material from humans and animals.
Уже известен способ выявления микобактерий туберкулеза, включающий обработку патологического материала серной, соляной, щавелевой кислотами или щелочами с последующим посевом на плотные питательные среды (1). A method for detecting mycobacterium tuberculosis is already known, including the treatment of pathological material with sulfuric, hydrochloric, oxalic acids or alkalis, followed by sowing on solid nutrient media (1).
Известен также способ выявления микобактерий туберкулеза методом люминесцентной микроскопии (ЛЮМ), включающий обработку патологического материала в течение 20 - 24 часов раствором тринатрий фосфата, посев на плотную питательную среду с последующим изготовлением мазков и их окраской смесью аурамина и родамина по БОЮ (2, 3). Однако известный способ сложен в осуществлении, так как требует корректировки pH перед посевом патологического материала и перед изготовлением мазков для ЛЮМ. Кроме того, пары тринатрий фосфата раздражают дыхательные пути обслуживающего персонала, портят оборудование; а его раствор выщелачивает стеклянную посуду, делая ее непригодной к употреблению. There is also a method for the detection of tuberculosis mycobacteria by luminescence microscopy (LUM), which includes treating pathological material for 20-24 hours with a solution of trisodium phosphate, plating on a solid nutrient medium, followed by making smears and staining them with a mixture of auramine and rhodamine according to BFU (2, 3) . However, the known method is difficult to implement, since it requires adjusting the pH before sowing the pathological material and before making smears for LUM. In addition, vapors of trisodium phosphate irritate the respiratory tract of maintenance personnel, spoil equipment; and its solution leaches glassware, making it unusable.
В качестве прототипа рассматривается способ выявления микобактерий туберкулеза методом посева и ЛЮМ, включающий использование для обработки посевного материала хлоргексидина биглюконикума в концентрации 0,05 - 0,2% в течение 20 - 24 ч (4). As a prototype, a method for detecting mycobacterium tuberculosis by the method of inoculation and LUM is considered, including the use of bigluconicum chlorhexidine at a concentration of 0.05 - 0.2% for 20 to 24 hours for the treatment of inoculum (4).
Рассматриваемый способ-прототип достаточно эффективен, однако его использование ограничено, так как дезинфектант, используемый в способе-прототипе, слабо разрушает некротизированные ткани, что затрудняет выход из них в осадок микобактерий туберкулеза, а это отрицательно влияет на результативность посева и ЛЮМ. The prototype method under consideration is quite effective, but its use is limited, since the disinfectant used in the prototype method weakly destroys necrotic tissues, which makes it difficult to get mycobacterium tuberculosis out of them, and this negatively affects the seeding and LUM.
Цель изобретения - повышение эффективности при упрощении и снижении трудоемкости способа. The purpose of the invention is to increase efficiency while simplifying and reducing the complexity of the method.
Поставленная цель достигается тем, что посевной материал обрабатывают в течение 18 - 24 ч при 29 - 37oC препаратом Пливасепт в концентрации 0,08%, который смешивают с ферментом имозимазой в соотношении 100:1, а pH смеси доводят введением натрия бикарбоната до 0,7 - 8,2.This goal is achieved by the fact that the seed is treated for 18-24 hours at 29 - 37 o C with the preparation Plivacept at a concentration of 0.08%, which is mixed with the enzyme imimazim in a ratio of 100: 1, and the pH of the mixture is adjusted by introducing sodium bicarbonate to 0 7-8.2.
Препарат "Пливасепт" 5% - нейтральный раствор с поверхностно-активным веществом для дезинфекции кожи и предметов выпускается фирмой "Плива-Загреб" Республики Хорватия. 100 мл раствора содержит 5 г хлоргексидина глюконата. Пливасепт 5% представляет собой слегка желтоватый раствор, оказывающий сильное бактерицидное действие на многие грамположительные и грамотрицательные бактерии. При приготовлении соответствующих разведений из жесткой воды поверхностно-активное вещество (оксиэтилированный жирный спирт) предотвращает образование осадка. Средство также способствует лучшему проникновению действующего вещества хлоргексидина в глубокие слои кожи в месте применения. Пливасепт 5% применяется в разведении с водой и этиловым спиртом в соответствующих концентрациях. Готовые водные разведения Пливасепта 5%, содержащие до 1% хлоргексидина глюконата, можно стерилизовать в автовклаве при 120oC в течение 30 мин. Водные растворы можно готовить в стерильной воде.The drug "Plivacept" 5% - a neutral solution with a surfactant for disinfection of skin and objects produced by the company "Pliva-Zagreb" of the Republic of Croatia. 100 ml of the solution contains 5 g of chlorhexidine gluconate. Plivacept 5% is a slightly yellowish solution that has a strong bactericidal effect on many gram-positive and gram-negative bacteria. When preparing appropriate dilutions from hard water, a surfactant (ethoxylated fatty alcohol) prevents the formation of sediment. The tool also promotes better penetration of the active substance chlorhexidine into the deeper layers of the skin at the place of use. Plivacept 5% is used in dilution with water and ethyl alcohol in appropriate concentrations. Ready-made dilutions of Plivacept 5%, containing up to 1% chlorhexidine gluconate, can be autoclaved at 120 ° C for 30 minutes. Aqueous solutions can be prepared in sterile water.
Имозимаза (протеолитическая активность ПЕ/мл, 60) выпускается медико-биологическим центром научной фирмы "Биосиб" (Новосибирск) во флаконах, содержащих 10 мл фермента. Imosimase (proteolytic activity of PE / ml, 60) is produced by the biomedical center of the scientific firm Biosib (Novosibirsk) in bottles containing 10 ml of the enzyme.
В соответствии с предлагаемым способом 1000 мл препарата "Пливасепт" в концентрации 0,08% смешивают с 10 мл фермента (содержимое 1 флакона), т.е. в соотношении 100:1 с доведением pH смеси введением натрия бикарбоната до 7,2 - 8,2 и ее последующим использованием для обработки патологического материала, который помещают в стерильные флаконы и заливают равным объемом смеси. In accordance with the proposed method, 1000 ml of the drug "Plivacept" at a concentration of 0.08% is mixed with 10 ml of the enzyme (contents of 1 bottle), i.e. in a ratio of 100: 1 with adjusting the pH of the mixture by introducing sodium bicarbonate to 7.2 - 8.2 and its subsequent use for the treatment of pathological material, which is placed in sterile vials and filled with an equal volume of the mixture.
Новизна предлагаемого способа заключается в использовании для обработки посевного материала препарата Пливасепт в концентрации 0,08%, который смешивают с ферментом имозимазой с доведением pH смеси введением в нее натрия бикарбоната до 7,2 - 8,2. Фермент имозимаза длительно гидролизуют денатурированные белки патологического материала, оставляя микобактерии в жизнеспособном состоянии, что повышает результативность посева мокроты, а pH смеси и режимы обработки патологического материала являются оптимальными для действия фермента. В этом состоит новый технический результат, находящийся в причинно-следственной связи с существенным признаком. Существенный признак совпадает с отличительным. The novelty of the proposed method lies in the use of the drug Plivacept at a concentration of 0.08% for processing the seed, which is mixed with the enzyme imimazimaz to adjust the pH of the mixture by adding sodium bicarbonate to 7.2 - 8.2. The imosimase enzyme hydrolyzes the denatured proteins of the pathological material for a long time, leaving mycobacteria in a viable state, which increases the efficiency of sputum culture, and the pH of the mixture and the treatment regimes of the pathological material are optimal for the action of the enzyme. This is a new technical result, which is in a causal relationship with an essential feature. The essential attribute coincides with the distinguishing one.
Способ осуществляется следующим образом. The method is as follows.
Готовят 0,08%-ный раствор препарата Пливасепт, который смешивают с ферментом имозимазой в соотношении 100:1. В полученную смесь вводят натрия бикарбонат до получения pH 7,2 - 8,2. Патологический материал помещают в стерильные флаконы, заливают равным объемом полученной смеси, гомогенизируют на встряхивателе и оставляют на 18 - 24 ч при 29 - 31oC, высевают на плотную питательную среду. Посев и окраску мазков для ЛЮМ проводят без корректировки pH посевного материала.Prepare a 0.08% solution of the drug Plivacept, which is mixed with the enzyme imosimase in a ratio of 100: 1. Sodium bicarbonate is added to the resulting mixture until a pH of 7.2 - 8.2 is obtained. Pathological material is placed in sterile vials, poured with an equal volume of the mixture, homogenized on a shaker and left for 18-24 hours at 29-31 ° C, seeded on a solid nutrient medium. Sowing and coloring smears for LUM are carried out without adjusting the pH of the seed.
Пример 1. Осуществление способа. Example 1. The implementation of the method.
Раствор для обработки посевного материала готовят следующим образом: 16 мл препарата Пливасепт доливают дистиллированной водой до 1000 мл, смешивают с 10 мл фермента имозимазы и добавляют 5,0 г натрия бикарбоната, тщательно перемешивают. Мокроту, собранную в специальные флаконы, заливают равным объемом приготовленного раствора, гомогенизируют на встряхивателе и оставляют на 18 - 24 ч при 29 - 31oC. Затем производят посев на плотную питательную среду, изготовление мазков, которые окрашивают для ЛЮМ смесью аурамина и родамина по БОЮ.The seed treatment solution is prepared as follows: 16 ml of the drug Plivacept is added with distilled water to 1000 ml, mixed with 10 ml of the imosimase enzyme and 5.0 g of sodium bicarbonate is added, mixed thoroughly. Sputum collected in special bottles is poured with an equal volume of the prepared solution, homogenized on a shaker and left for 18-24 hours at 29-31 o C. Then, sowing is performed on a solid nutrient medium, smears are made, which are stained for LUM with a mixture of auramine and rhodamine according to BATTLE.
С 27.01.97 г. по 17.03.97 г. предлагаемым способом выявляли микобактерии туберкулеза в 2030 пробах мокроты от больных туберкулезом людей I группы диспансерного учета. Результаты представлены в таблице 1. From 01/27/97 to 03/17/97, the proposed method revealed mycobacterium tuberculosis in 2030 sputum samples from patients with tuberculosis in people of the first group of the dispensary. The results are presented in table 1.
Пример 2. Подтверждение осуществимости способа. Example 2. Confirmation of the feasibility of the method.
Для обработки посевного материала 16 мл препарата Пливасепт доливают дистиллированной водой до 1000 мл и тщательно перемешивают. Мокроту, собранную в специальные флаконы, заливают равным объемом приготовленного препарата. Выявление микобактерий проводят, как в примере 1. Перед посевом и изготовлением мазка корректируют pH каждого образца. В таблице 2 приводятся результаты выявления микобактерий в 1100 образцах мокроты от больных туберкулезом людей I группы диспансерного учета. To process the seed, 16 ml of the drug Plivacept is added to 1000 ml with distilled water and mixed thoroughly. Sputum collected in special bottles is poured with an equal volume of the prepared preparation. The detection of mycobacteria is carried out, as in example 1. Before sowing and manufacturing a smear adjust the pH of each sample. Table 2 shows the results of the detection of mycobacteria in 1100 sputum samples from patients with tuberculosis in people of the first group of the dispensary.
В таблице 3 сравниваются результаты выявления микобактерий туберкулеза после обработки посевного материала препаратом Пливасепт (пример 2) и в соответствии с предлагаемым способом (пример 1). Table 3 compares the results of the detection of Mycobacterium tuberculosis after treatment of the inoculum with Plyasept (example 2) and in accordance with the proposed method (example 1).
Как видно из таблицы 3, предлагаемый способ обеспечивает сокращение (до 10,4% по сравнению с 23,8%) числа положительных находок методом ЛЮМ, неподтвержденных посевом. As can be seen from table 3, the proposed method provides a reduction (up to 10.4% compared with 23.8%) of the number of positive finds by the LUM method, not confirmed by sowing.
Пример 3. Сравнительная эффективность предлагаемого и известного способов. Example 3. The comparative effectiveness of the proposed and known methods.
В таблице 4 приводятся результаты выявления микобактерий туберкулеза в 1286 образцах мокроты от больных туберкулезом людей I группы диспансерного учета и обработкой посевного материала хлоргексидином биглюконикумом в концентрации 0,05%. Перед посевом и изготовлением мазков корректируют pH каждого образца. Table 4 shows the results of the detection of mycobacterium tuberculosis in 1286 sputum samples from patients with tuberculosis in people of the dispensary group I group and the treatment of seed with chlorhexidine bigluconicum at a concentration of 0.05%. Before sowing and making smears, the pH of each sample is adjusted.
Из таблицы 4 видно, что предлагаемый способ значительно сокращает (до 10,4% по сравнению с 23,5%) число неподтвержденных посевом положительных выявлений микобактерий туберкулеза методом ЛЮМ. Кроме того, уменьшается число образцов, в мазках которых находят лишь единичные микробактерии, что значительно повышает информативность ЛЮМ. Наличие бактериальной массы обеспечивает изучение вида микобактерий и их лекарственной чувствительности. Проведенные исследования подтверждают эффективность предлагаемого способа. Так, сочетание положительных находок методом посева и методом ЛЮМ составляет в предлагаемом способе 62,8% по сравнению с 54,0% в известном способе. From table 4 it can be seen that the proposed method significantly reduces (up to 10.4% compared to 23.5%) the number of positive cases of mycobacterium tuberculosis that are not confirmed by culture using the LM method. In addition, the number of samples is reduced, in the smears of which only single microbacteria are found, which significantly increases the information content of LUM. The presence of bacterial mass provides a study of the type of mycobacteria and their drug sensitivity. The studies confirm the effectiveness of the proposed method. So, the combination of positive findings by the method of sowing and the method of LUM is in the proposed method, 62.8% compared with 54.0% in the known method.
Источники информации, принятые во внимание:
1. Туберкулез сельскохозяйственных животных /Под ред. В.П. Шишкова и В. П. Урбана - М.: Агропромиздат, 1991, с. 114 и 115.Sources of information taken into account:
1. Tuberculosis of farm animals / Ed. V.P. Shishkova and V.P. Urban - M .: Agropromizdat, 1991, p. 114 and 115.
2. О повышении качества ЛЮМ при исследовании патологического материала для обнаружения микобактерий туберкулеза. Методические рекомендации Минздрава СССР, - 18.10.89, N 21-08/11-297. 2. On improving the quality of LUM in the study of pathological material for the detection of mycobacterium tuberculosis. Methodical recommendations of the Ministry of Health of the USSR, - 10/18/89, N 21-08 / 11-297.
3. Современные методы лабораторной диагностики туберкулеза. - М.: 1992. 3. Modern methods of laboratory diagnosis of tuberculosis. - M .: 1992.
4. Использование ЛЮМ для диагностики бактериовыделения у больных туберкулезом. Методические рекомендации Минздрава РСФСР и НИИтуберкулеза. - М.: 1981. 4. The use of LUM for the diagnosis of bacterial excretion in patients with tuberculosis. Methodical recommendations of the Ministry of Health of the RSFSR and the Research Institute of Tuberculosis. - M .: 1981.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU98107285A RU2141665C1 (en) | 1998-04-14 | 1998-04-14 | Method of detection of tuberculosis mycobacterium |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU98107285A RU2141665C1 (en) | 1998-04-14 | 1998-04-14 | Method of detection of tuberculosis mycobacterium |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2141665C1 true RU2141665C1 (en) | 1999-11-20 |
Family
ID=20204899
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU98107285A RU2141665C1 (en) | 1998-04-14 | 1998-04-14 | Method of detection of tuberculosis mycobacterium |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2141665C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2613366C1 (en) * | 2016-01-11 | 2017-03-16 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России) | Method of culture diagnosis of tuberculosis infection |
| RU2739402C2 (en) * | 2018-10-08 | 2020-12-23 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ФПИ" Минздрава России) | Method for detecting tuberculosis mycobacterium from contaminated tissues |
| RU2759413C1 (en) * | 2018-10-08 | 2021-11-12 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ФПИ" Минздрава России) | Method for detecting mycobacterium tuberculosis from resected lung tissue |
-
1998
- 1998-04-14 RU RU98107285A patent/RU2141665C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Использование ЛЮМ для диагностически бактериовыделения из больных туберкулезом. Методические рекомендации Минздрава РСФСР и НИИтурберкулеза. - М.: Медицина, 1981. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2613366C1 (en) * | 2016-01-11 | 2017-03-16 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России) | Method of culture diagnosis of tuberculosis infection |
| RU2739402C2 (en) * | 2018-10-08 | 2020-12-23 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ФПИ" Минздрава России) | Method for detecting tuberculosis mycobacterium from contaminated tissues |
| RU2759413C1 (en) * | 2018-10-08 | 2021-11-12 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ФПИ" Минздрава России) | Method for detecting mycobacterium tuberculosis from resected lung tissue |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Middlebrook et al. | Studies on isoniazid and tubercle bacilli, III. The isolation, drug-susceptibility, and catalase-testing of tubercle bacilli from isoniazid-treated patients | |
| Fairbrother et al. | A Text-book of Bacteriology | |
| EP3384915B1 (en) | Carrimycin for the treatment of mycobacterium tuberculosis infections | |
| Jordan | A text-book of general bacteriology | |
| US10793823B2 (en) | Microbiological growth media and methods of using the same | |
| Sullivan et al. | Practical aerobic membrane filtration blood culture technique: clinical blood culture trial | |
| CN101485300B (en) | Method for cultivating Acrobeloides nanus | |
| RU2141665C1 (en) | Method of detection of tuberculosis mycobacterium | |
| CN109370908A (en) | A kind of culture of chicken coccidial oocyst and save liquid and its application | |
| CN109593114B (en) | Limax antibacterial peptide, extraction method and application thereof | |
| RU2190220C1 (en) | Method for finding tuberculosis micobacteria | |
| Hirsch | The resistance of tubercle bacilli to the bactericidal action of benzalkonium chloride (Zephiran®) | |
| Baracco et al. | Pulmonary nocardiosis | |
| CN111088313B (en) | Reagent for rapidly fixing cell count of tetrahymena thermophila and counting method thereof | |
| US5198114A (en) | Dolomitic activated carbon filter | |
| EA013519B1 (en) | Antibacterial or pediculicidal preparation comprising allicin | |
| CN108721248A (en) | A kind of preparation method, product and the application of pH response type nanos silver assembly | |
| Fairbrother | A text-book of medical bacteriology | |
| RU2158758C2 (en) | Nutrient medium for accumulation of listeria | |
| RU2415944C2 (en) | Method for detecting tuberculosis mycobacteria in resected lung tissue | |
| Leblanc et al. | Some microbiological studies of two species of aphids, Aphis fabae Scop. and Macrosiphum pisi (Harris)(Hemiptera, Homoptera: Aphididae) | |
| RU2719723C1 (en) | Wound healing liniment, containing bacteriostatic metabolites trichoderma atrobrunneum f-1434 and sum of buckwheat bioflavonoids | |
| RU2700163C1 (en) | Method for preparing a biologically active antiseptic preparation and an antiseptic preparation based thereon | |
| RU2203317C2 (en) | Method of detection of bacillus anthracis in milk | |
| RU2332452C2 (en) | Composition for obtaining nutrient medium for recovery and cultivation of mycobacteria |