RU2139090C1 - Способ получения туберкулезного анатоксина - Google Patents
Способ получения туберкулезного анатоксина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2139090C1 RU2139090C1 RU99100826A RU99100826A RU2139090C1 RU 2139090 C1 RU2139090 C1 RU 2139090C1 RU 99100826 A RU99100826 A RU 99100826A RU 99100826 A RU99100826 A RU 99100826A RU 2139090 C1 RU2139090 C1 RU 2139090C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- formalin
- days
- mixture
- added
- culture fluid
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 24
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 title abstract description 3
- SGNXVBOIDPPRJJ-PSASIEDQSA-N 1-[(1r,6r)-9-azabicyclo[4.2.1]non-4-en-5-yl]ethanone Chemical compound CC(=O)C1=CCC[C@@H]2CC[C@H]1N2 SGNXVBOIDPPRJJ-PSASIEDQSA-N 0.000 title abstract 2
- 239000003948 anatoxin Substances 0.000 title abstract 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 50
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract description 9
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 8
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 6
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 claims description 16
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 claims description 9
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 abstract description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 6
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 abstract description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 5
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 5
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- XMYQHJDBLRZMLW-UHFFFAOYSA-N methanolamine Chemical group NCO XMYQHJDBLRZMLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение предназначено для специфической профилактики инфекционных заболеваний животных. Выращивают микобактерии туберкулеза и подвергают их деструкции. Отделяют культуральную жидкость. Добавляют к ней формалин в два этапа: вначале до концентрации его в смеси 0,3-0,4% и инкубацией при 37-40°С в течение 7-10 суток, затем до конечной концентрации формалина в смеси 0,5-0,6% и инкубацией при 44-46°С в течение 5-8 суток. Деструкцию микобактерий туберкулеза можно проводить гамма облучением Co60 дозой (1-2)•106R. По завершении процесса детоксикации к культуральной жидкости добавляют гидроокись алюминия. В качестве целевого продукта используют осадок, образовавшийся после центрифугирования или отстоя. Его расфасовывают и подвергают автоклавированию. Изобретение позволяет увеличить сроки хранения анатоксина до 3-5 лет. 1 з.п.ф-лы.
Description
Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к ветеринарии, и может быть использовано в технологии получения биологических препаратов для специфической профилактики инфекционных заболеваний животных.
Известен способ получения туберкулезного анатоксина путем выращивания микобактерий туберкулеза с последующей их деструкцией, отделением культуральной жидкости, добавлением к ней формалина, сорбцией целевого продукта на гидроокиси алюминия и его стерилизацией автоклавированием. (Патент РФ N 2053791, МКИ6 A 61 K 39/04. Способ получения анатоксина, БИ N 4, 1996). В известном способе к культуральной жидкости добавляют формалин одномоментно из расчета 1 мг на 1 мл анатоксина.
Недостатком известного способа является получение туберкулезного анатоксина плохого качества (содержание в нем высокой концентрации токсина и формалина - токсических для организма веществ) с небольшим сроком хранения.
Целью предлагаемого изобретения является увеличение сроков хранения целевого продукта.
Поставленная цель достигается в способе получения туберкулезного анатоксина путем выращивания микобактерий туберкулеза с последующей их деструкцией, отделением культуральной жидкости, добавлением к ней формалина, сорбцией целевого продукта на гидроокиси алюминия и стерилизацией автоклавированием тем, что формалин добавляют вначале до концентрации его в смеси 0,3-0,4% и инкубацией при температуре (37-40oC в течение 7-10 суток, а затем до конечной концентрации формалина в смеси 0,5-0,6% с последующей инкубацией при 44-46oC в течение 5-8 суток.
Поставленная цель достигается также тем, что деструкцию микобактерий туберкулеза проводят гамма облучением Co60 дозой (1-2)•106R.
В патентной и научно-технической литературе не известны технические решения, аналогичные заявляемому, что позволяет сделать вывод о соответствии предложения условию патентоспособности - "новизна".
Только сочетание заявленных режимов в определенной последовательности позволяет достичь эффект, указанный в цели изобретения, т.е. заявленный способ удовлетворяет условию патентоспособности - "изобретательский уровень", в частности, проведение добавления формалина в два этапа при определенных соотношениях компонентов позволило получить неочевидный положительный эффект. Нами впервые установлено, что в течение первого этапа добавления формалина при низких его концентрациях происходит взаимодействие свободных аминогрупп и в первую очередь лизина. При этом образуются метилоламинные группы. На втором этапе в реакции участвуют активные радикалы циклических аминогрупп, содержащие фенольные, гуанидиновые и индольные группы - это тирозин, аргинин, гистидин и триптофан. Эти группы прочно соединяются за счет активных атомов водорода с метилоламинными группами остатков лизина через метиленовые мостики. При этом блокирование формалином активных радикалов токсина приводит к его детоксикации (обезвреживанию) и образованию полимеров. Следовательно, добавление формалина в два этапа приводит к двум процессам: собственно к детоксикации токсина и стабилизации образовавшегося полимера, которая достигается внесением новой порции формалина и повышением температуры реакционной смеси. Обратное превращение анатоксина в токсин в условиях предлагаемого способа исключено.
Способ используют для получения биологических препаратов специфической профилактики инфекционных заболеваний животных, поэтому заявленное предложение соответствует условию патентоспособности - "промышленная применимость".
Предлагаемое изобретение иллюстрируется на следующих примерах.
Пример 1. Микобактерии туберкулеза выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 60 дней. Затем проводят автоклавирование при 1,0 атм в течение 120 минут, а отделение культуральной жидкости проводят фильтрованием. Детоксикацию проводят добавлением к культуральной жидкости формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,3% и инкубацией при 37oC в течение 7 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,5% и инкубацией смеси при 44oC в течение 5 суток. По завершении процесса детоксикации к культуральной жидкости добавляют, как и в известном способе, гидроокись алюминия в конечной концентрации 1 мг/мл.
Через 12 часов после отстоя надосадочную жидкость удаляют (50% объема всей жидкости), а оставшийся осадок (целевой продукт) расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками и повторно подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.
Пример 2. Микобактерии туберкулеза выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 55 дней. Затем проводят гамма облучение Co60 1•106R. Отделение культуральной жидкости проводят фильтрованием. Детоксикацию проводят добавлением к культуральной жидкости формалина в два этапа: вначале до концентрации его в смеси 0,4% и инкубацией при температуре 40oC в течение 10 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,6% и инкубацией смеси при 46oC в течение 8 суток. По завершении процесса детоксикации к культуральной жидкости добавляют, как и в известном способе, гидроокись алюминия в конечной концентрации 1 мг/мл.
Сразу после центрифугирования надосадочную жидкость удаляют (50% объема всей жидкости), а оставшийся осадок (целевой продукт) расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.
Пример 3. Микобактерии туберкулеза выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 60 дней. Затем проводят гамма облучение Co60 дозой 2•106R. Отделение культуральной жидкости проводят фильтрованием. Детоксикацию проводят добавлением к культуральной жидкости формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,3% и инкубацией при 37oC в течение 7 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,5% и инкубацией смеси при 44oC в течение 5 суток. По завершении процесса детоксикации к культуральной жидкости добавляют, как и в известном способе, гидроокись алюминия в конечной концентрации 1 мг/мл.
Через 12 часов после отстоя надосадочную жидкость удаляют (50% объема всей жидкости), а оставшийся осадок (целевой продукт) расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.
Пример 4. Микобактерии туберкулеза выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 55 дней. Затем проводят автоклавирование при 1,0 атм в течение 180 минут, а отделение культуральной жидкости проводят фильтрованием. Детоксикацию проводят добавлением к культуральной жидкости формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,4% и инкубацией при 40oC в течение 10 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,6% и инкубацией смеси при 46oC в течение 8 суток. По завершении процесса детоксикации к культуральной жидкости добавляют, как и в известном способе, гидроокись алюминия в конечной концентрации 1 мг/мл.
Сразу после центрифугирования надосадочную жидкость удаляют (50% объема всей жидкости), а оставшийся осадок (целевой продукт) расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.
Предлагаемый способ позволяет увеличить сроки хранения целевого продукта с 6 месяцев до 3-5 лет, т.е. в 5-10 раз.
Claims (2)
1. Способ получения туберкулезного анатоксина путем выращивания с последующей деструкцией микобактерий туберкулеза, отделением культуральной жидкости, добавлением к ней формалина, сорбцией целевого продукта на гидроокиси алюминия и его стерилизацией автоклавированием, отличающийся тем, что формалин добавляют в начале до концентрации его в смеси 0,3 - 0,4% с инкубацией при 37 - 40oС в течение 7 - 10 суток, а затем до конечной концентрации формалина в смеси 0,5 - 0,6% с последующей инкубацией при 44 - 46oС в течение 5 - 8 суток.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что деструкцию микобактерий туберкулеза проводят гамма-облучением Co60 дозой (1 - 2) • 106R.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99100826A RU2139090C1 (ru) | 1999-01-26 | 1999-01-26 | Способ получения туберкулезного анатоксина |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99100826A RU2139090C1 (ru) | 1999-01-26 | 1999-01-26 | Способ получения туберкулезного анатоксина |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2139090C1 true RU2139090C1 (ru) | 1999-10-10 |
Family
ID=20214709
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU99100826A RU2139090C1 (ru) | 1999-01-26 | 1999-01-26 | Способ получения туберкулезного анатоксина |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2139090C1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2230569C2 (ru) * | 2001-06-21 | 2004-06-20 | Закрытое акционерное общество "АгроБизнесЦентр" "AgroBusinessCentre" | Способ получения туберкулезного анатоксина |
| RU2360697C1 (ru) * | 2008-04-15 | 2009-07-10 | ФГОУ ВПО Курская государственная сельскохозяйственная академия им. профессора И.И. Иванова | Способ получения туберкулезного анатоксина |
| RU2392002C2 (ru) * | 2008-04-02 | 2010-06-20 | ФГОУ ВПО Курская государственная сельскохозяйственная академия им. профессора И.И. Иванова | Способ получения туберкулезного анатоксина |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU173381A (ru) * | 1964-06-11 | 1965-08-25 |
-
1999
- 1999-01-26 RU RU99100826A patent/RU2139090C1/ru active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU173381A (ru) * | 1964-06-11 | 1965-08-25 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2230569C2 (ru) * | 2001-06-21 | 2004-06-20 | Закрытое акционерное общество "АгроБизнесЦентр" "AgroBusinessCentre" | Способ получения туберкулезного анатоксина |
| RU2392002C2 (ru) * | 2008-04-02 | 2010-06-20 | ФГОУ ВПО Курская государственная сельскохозяйственная академия им. профессора И.И. Иванова | Способ получения туберкулезного анатоксина |
| RU2360697C1 (ru) * | 2008-04-15 | 2009-07-10 | ФГОУ ВПО Курская государственная сельскохозяйственная академия им. профессора И.И. Иванова | Способ получения туберкулезного анатоксина |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TW580392B (en) | Process for preparing synthetic soil-extract materials and medicaments based thereon | |
| CA2986915C (en) | Microbiota restoration therapy (mrt) compositions and methods of manufacture | |
| CA2796409A1 (en) | Process for preparing an immunoglobulin composition | |
| RU2139091C1 (ru) | Способ получения стафилококковой анатоксин-вакцины | |
| RU2139090C1 (ru) | Способ получения туберкулезного анатоксина | |
| EP2373332A1 (en) | Process for production of vaccines | |
| KR940004541B1 (ko) | 트레포네마 히오디센테리아 박테린의 제조방법 | |
| RU2139089C1 (ru) | Способ получения туберкулина | |
| RU2230569C2 (ru) | Способ получения туберкулезного анатоксина | |
| RU2229893C2 (ru) | Способ получения стафилококковой анатоксин-вакцины | |
| AU2008234080B2 (en) | Production of a viable, storable worm egg suspension | |
| US3208909A (en) | Anaerobic process for production of a gel-adsorbed anthrax immunizing antigen | |
| RU2016574C1 (ru) | Способ энтеросорбции | |
| RU2070819C1 (ru) | Способ получения вакцины против эшерихиоза телят | |
| RU2043772C1 (ru) | Способ получения сыворотки, антиадгезивной и антитоксической против эшерихиоза сельскохозяйственных животных | |
| US6338849B1 (en) | Process of preparing immunoglobulin for intravenous injection by viruses double-sterilized without adding any protectant | |
| RU2039571C1 (ru) | Способ изготовления ассоциированной вакцины против ботулизма и псевдомоноза норок | |
| RU2096042C1 (ru) | Способ получения поливалентной вакцины против лептоспироза животных | |
| RU2738671C1 (ru) | Способ получения и очистки биологически активного вещества, продуцируемого бифидобактериями | |
| RU1347224C (ru) | Способ изготовления сыворотки против сибирской язвы | |
| RU2179860C1 (ru) | Способ получения стафилококкового анатоксина | |
| EA202190638A1 (ru) | Способ получения вакцины гемофильной тип в конъюгированной | |
| RU2147892C1 (ru) | Способ получения препарата на основе вирусно-бактериальных штаммов из местного очага для приготовления ассоциированной вакцины или поливалентной гипериммунной сыворотки против заболеваний крупного рогатого скота | |
| RU2538624C1 (ru) | Способ получения туберкулина для массовой диагностики и профилактики туберкулеза | |
| RU2115432C1 (ru) | Способ получения туберкулезного анатоксина |