RU2137132C1 - Способ аллергодиагностики глпс (геморрагической лихорадки с почечным синдромом) показателем повреждаемости нейтрофилов (ппн) - Google Patents
Способ аллергодиагностики глпс (геморрагической лихорадки с почечным синдромом) показателем повреждаемости нейтрофилов (ппн) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2137132C1 RU2137132C1 RU96113267A RU96113267A RU2137132C1 RU 2137132 C1 RU2137132 C1 RU 2137132C1 RU 96113267 A RU96113267 A RU 96113267A RU 96113267 A RU96113267 A RU 96113267A RU 2137132 C1 RU2137132 C1 RU 2137132C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- index
- hemorrhagic fever
- neutrophil
- ppn
- renal syndrome
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Использование: в медицине, а именно в аллергодиагностике. Осуществляют постановку теста показателя повреждаемости нейтрофилов (ППН). Инкубируют кровь с аллергеном. Готовят мазки. Окрашивают их цитохимическим методом на липиды. Вычисляют ППН по формуле. При значении ППН 0,55 ± 0,02 и выше диагностируют геморрагическую лихорадку с почечным синдромом. Способ обеспечивает сокращение времени лабораторной диагностики ГЛПС.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к аллергодиагностике ГЛПС.
Известны способы аллергодиагностики с помощью показателя повреждаемости нейтрофилов при многих инфекционных заболеваниях бактериальной и вирусной этиологии (Гаврилов В.А., 1971; Фрадкин В.А. 1975, 1985) и др. Самым близким техническим решением является (1). Аллергены для теста ППН.
Выпускается ряд наименований препаратов для диагностики путем постановки теста ППН. Тест заключается в оценке амебиодной активности нейтрофилов крови больных, которую рассматривают как начальную фазу их повреждения. При инкубации крови высокосенсибилизированных лиц в смеси со специфическим аллергеном реакция нейтрофилов заметно усиливается.
Для этого исследования требуются две порции крови по 0,08 мл каждая (при необходимости использования 2 аллергенов берут 3 порции крови). Кровь, взятую микропипеткой из места прокола кожи, переносят в опытную и контрольную пробирку. Перед этим на дно опытной пробирки вносят 0,02 мл аллергена в смеси с антикоагулянтом (0,8 мл аллергена с 0,2 мл 25% раствора цитрата натрия). Контрольная пробирка должна содержать 0,02 мл 5% раствора цитрата натрия. В течение 2 ч кровь инкубируют при 38oC, затем из каждой пробирки готовят мазки. После подсыхания их фокусируют, а затем подвергают гистохимической обработке. С целью обнаружения внутриклеточого гликогена (по Шабадашу) ядро лейкоцитов докрашивают гематоксилином. Эти операции выполняют в соответствии с методическими указаниями, прилагаемыми к каждой коробке с аллергеном.
Оценивают реакцию по результатам микроскопии и иммерсионной системой 100 нейтрофилов. При подсчете клетки делят на две категории - нормальные и поврежденные (в состоянии амебоидной активности).
Результат диагностики выражают формулой
где 1 - число обнаруженных поврежденных нейтрофилов в опытном мазке, 2 - аналогичное число в контрольном препарате. При правильно проведенном контроле число поврежденных нейтрофилов не превышает 10%. У здоровых несенсибилизированных людей выраженность ППН при внесении в кровь аллергенов не превышает индекса 0,1.
где 1 - число обнаруженных поврежденных нейтрофилов в опытном мазке, 2 - аналогичное число в контрольном препарате. При правильно проведенном контроле число поврежденных нейтрофилов не превышает 10%. У здоровых несенсибилизированных людей выраженность ППН при внесении в кровь аллергенов не превышает индекса 0,1.
Целью данного изобретения является сокращение времени лабораторных исследований.
Указанная цель достигается применением известного способа аллергодиагностики с помощью показателя повреждаемости нейтрофилов /ППН/ впервые при ГЛПС /геморрагической лихорадке с почечным синдромом/.
Способ осуществляется следующим образом.
Под наблюдением находилось 10 больных ГЛПС в возрасте от 18 до 45 лет (все мужчины). У 2 больных ГЛПС протекала в тяжелой форме с развитием анурии и подключением гемодиализа. У 8 больных заболевание проходило в форме средней тяжести. Постановка ППН проводилась в динамике болезни /лихорадочный олигурический, полиурический и реконвалесцентный периоды/. Препарат для проведения теста ППН был приготовлен в отделе геморрагических лихорадок НИИ полиомиелита и вирусных энцефалитов г. Москва.
С целью регистрации /ин витро/ реактивных изменений, происходящих под влиянием аллергена /антигена/ в клетке лейкоцита, мы пользовались методикой, описанной Фрадкиным В.А. /1985/ в нашей модификации.
В микропипетку набрали кровь из пальца в количестве 0,08 мл и вносили в пробирку с 0,02 мл аллергена в смеси с антикоагулянтом (0,8 мл аллергена с 0,2 мл 25% раствора цитрата натрия). Контрольная пробирка должна содержать 0,02 мл 5% раствора цитрата натрия. Куда вносилось 0,08 мл крови. Затем в течение 2 часов кровь инкубируют при 30oC. затем из каждой пробирки готовят мазки. После подсыхания их фиксируют, а затем красят цитохимическим методом на липиды по методу Шихена и Сторей, 1949 г.
Показатель повреждаемости нейтрофилов вычисляли по формуле
где H - количество лейкоцитов с выраженным клазматозом и лейкоцитозов в опыте, H1 - количество таких же элементов в контроле, 100 - число сосчитанных в каждом мазке нейтрофилов.
где H - количество лейкоцитов с выраженным клазматозом и лейкоцитозов в опыте, H1 - количество таких же элементов в контроле, 100 - число сосчитанных в каждом мазке нейтрофилов.
Средняя величина ППН здоровых лиц /студенты, сотрудники больницы/ составила 0,06 ± 0,005 (контрольная группа).
У больных ГЛПС отмечалось достоверное повышение ППН. Так, в лихорадочном периоде показатель ППН составил 0,55 ± 0,02; в периоде олигоурии 0,78 ± 0,01; в периоде полиурии - 0,88 ± 0,03 и в реконвалесцентном периоде он оставался стабильным 0,85 ± 0,02, т.е. ППН при ГЛПС во все периоды болезни был достоверно выше, чем у лиц контрольной группы /P < 0,001/.
Морфологические изменения в нейтрофилах, подвергавшихся клазматозу и лейкоцитозу, характеризовались следующими этапами: изменением липидных гранул в околоядерных зонах и концентрацией их по периферии клетки с образованием наиболее насыщенных участков. Появление амебоидных выпячиваний, где липиды утрачивали свою гранулярную структуру. Помимо дегенеративных процессов в цитоплазме грубые изменения и в ядрах клетки. Подчас видны одномоментно разорванные лейкоциты /явления анафилактического шока клетки/. Деформированные и распавшиеся клетки имеют отшнурованные участки с липидными суданофильными включениями. Связь с клеткой утончается и они отшнуровываются от клетки. Протоплазма клетки при этом просветляется.
Известно, что в патогненезе инфекционного заболевания имеется сенсибилизация не только кожных покровов /см. кожные аллергические пробы /специфическим антигеном/ аллергеном /, но и интимных структур организма включая клеточный уровень. К сожалению, внутрикожная аллергическая проба при ГЛПС пока не разработана, но описанный нами способ может занять достойное место в аллергодиагностике ГЛПС, как экспрессный. На постановку ППН уходит 4 часа, а иммуноферментный 12 часов.
Источники информации:
1. Справочник по применению бактериальных и вирусных препаратов, под редакцией проф. С.Г.Дзагурова и д.м.н. Ф.Ф.Резепова, м. 1975 стр. 61.
1. Справочник по применению бактериальных и вирусных препаратов, под редакцией проф. С.Г.Дзагурова и д.м.н. Ф.Ф.Резепова, м. 1975 стр. 61.
2. Гаврилов В.А., Попов П.Н. Сравнительное изучение аллергии у больных бактериальной дизентерией реакцией повреждения лейкоцитов и внутрикожной пробой Цуверкалова. сб. Актуальные вопросы инфекционной патологии (тезисы конференции 18-20 мая 1971 года), Ставрополь 1971, стр. 106.
Claims (1)
- Способ аллергодиагностики геморрагической лихорадки с почечным синдромом путем подсчета нейтрофилов, отличающийся тем, что осуществляют постановку теста показателя повреждаемости нейтрофилов (ППН), включающего инкубацию крови с аллергеном и приготовление мазков, окрашенных цитохимическим методом на липиды, после чего вычисляют ППН по формуле
(H - Н1)/100,
где Н - количество лейкоцитов с выраженным клазматозом и лейкоцитозом в опыте,
Н1 - количество тех же элементов в контроле,
100 - число сосчитанных в каждом мазке нейтрофилов,
и при его значении 0,55 ± 0,02 и выше диагностируют геморрагическую лихорадку с почечным сундромом.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU96113267A RU2137132C1 (ru) | 1996-07-02 | 1996-07-02 | Способ аллергодиагностики глпс (геморрагической лихорадки с почечным синдромом) показателем повреждаемости нейтрофилов (ппн) |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU96113267A RU2137132C1 (ru) | 1996-07-02 | 1996-07-02 | Способ аллергодиагностики глпс (геморрагической лихорадки с почечным синдромом) показателем повреждаемости нейтрофилов (ппн) |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU96113267A RU96113267A (ru) | 1997-11-27 |
RU2137132C1 true RU2137132C1 (ru) | 1999-09-10 |
Family
ID=20182646
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU96113267A RU2137132C1 (ru) | 1996-07-02 | 1996-07-02 | Способ аллергодиагностики глпс (геморрагической лихорадки с почечным синдромом) показателем повреждаемости нейтрофилов (ппн) |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2137132C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2449278C1 (ru) * | 2011-01-20 | 2012-04-27 | Ирина Игоревна Васильева | Способ прогноза развития нейтропении, вызванной комбинированной противовирусной терапией, у больных хроническим гепатитом с |
RU2698320C1 (ru) * | 2019-05-15 | 2019-08-26 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ ранней дифференциальной диагностики геморрагической лихорадки с почечным синдромом и обострения хронического пиелонефрита |
-
1996
- 1996-07-02 RU RU96113267A patent/RU2137132C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
1. Фрадкин В.А. Диагностика аллергия реакциями нейтрофилов крови. -М.: Медицина, 1985, с. 11, 84. 2. Справочник терапевта. Под ред. Н.Р. Палева -М.: Медицина, 1995, т. 2, с. 454. 3. Справочник по применению бактериальных и вирусных препаратов. Под ред. С.Г. Дзагурова Ф.Ф. Резепова -М., 1975, с. 61. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2449278C1 (ru) * | 2011-01-20 | 2012-04-27 | Ирина Игоревна Васильева | Способ прогноза развития нейтропении, вызванной комбинированной противовирусной терапией, у больных хроническим гепатитом с |
RU2698320C1 (ru) * | 2019-05-15 | 2019-08-26 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ ранней дифференциальной диагностики геморрагической лихорадки с почечным синдромом и обострения хронического пиелонефрита |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Jensen-Jarolim et al. | Atopic dermatitis of the face, scalp, and neck: type I reaction to the yeast Pityrosporum ovale? | |
Perera et al. | Small intestinal biopsy | |
Fessel | ANA-negative systemic lupus erythematosus | |
CN101027557A (zh) | 用于细胞信号途径的细胞计数分析的全血制备 | |
JP2000505551A (ja) | 生物学的材料の特性の分光学的決定 | |
DE69027882T2 (de) | Messung der Reaktivität von Lymphozyten gegenüber spezifischen Antigenen im Blut | |
Dwenger et al. | Bronchoalveolar lavage fluid and plasma proteins, chemiluminescence response and protein contents of polymorphonuclear leukocytes from blood and lavage fluid in traumatized patients | |
DE69731982T2 (de) | Verfahren zur messung der lymphozytenfunktion | |
CN111549091B (zh) | 一种嗜碱性粒细胞活化、脱颗粒的测试方法 | |
DE60035286T2 (de) | Verfahren zum Nachweis von Zelltod mittels Cytochrom C. | |
Fulford et al. | Leucocyte migration and cell-mediated immunity in syphilis. | |
GB1560729A (en) | Counting of leucocytes | |
CN112080560A (zh) | Cd177在制备诊断胆道闭锁的产品中的应用 | |
Affronti et al. | Serodiagnostic test for tuberculosis | |
RU2137132C1 (ru) | Способ аллергодиагностики глпс (геморрагической лихорадки с почечным синдромом) показателем повреждаемости нейтрофилов (ппн) | |
EP2016416B1 (de) | In vitro verfahren zur erkennung und früherkennung und zur begleitenden kontrolle der therapie von arznei- und suchtmittelinduzierten leberschäden | |
Jepson et al. | Decreased in vivo and in vitro erythropoiesis induced by plasma of ten patients with thymoma, lymphosarcoma, or idiopathic erythroblastopenia | |
EP1711831B1 (de) | Diagnose von sepsis durch selektive bestimmung der konzentration der cu/zn superoxiddismutase (cu/zn sod) in patientenproben | |
Berger et al. | Cirrhotic hyperglobulinemia: increased rates of immunoglobulin synthesis by circulating lymphoid cells | |
Mizoguchi et al. | Detection of hypersensitivity to drugs by lymphocyte cultures in drug-induced allergic hepatitis | |
DE60038557T2 (de) | Assay | |
RU2256916C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза органов дыхания | |
DE69319064T2 (de) | Biologisch aktives Reagens, hergestellt aus Aldehydgruppen enthaltendem Polymer, Testausrüstung, analytisches Element und Anwendungsmethoden | |
Chiesara et al. | Chromosome damage in heroin-marijuana and marijuana addicts | |
RU2063041C1 (ru) | Способ определения снижения устойчивости организма больных лейкозами к инфекции |