RU2133964C1 - Способ дифференциальной диагностики омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита - Google Patents
Способ дифференциальной диагностики омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита Download PDFInfo
- Publication number
- RU2133964C1 RU2133964C1 RU97109395A RU97109395A RU2133964C1 RU 2133964 C1 RU2133964 C1 RU 2133964C1 RU 97109395 A RU97109395 A RU 97109395A RU 97109395 A RU97109395 A RU 97109395A RU 2133964 C1 RU2133964 C1 RU 2133964C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hemorrhagic fever
- borne encephalitis
- omsk hemorrhagic
- tick
- antigens
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности вирусологии, точнее к дифференциальной лабораторной диагностике омской геморрагической лихорадки (ОГЛ) и клещевого энцефалита (КЭ). Проводят постановку серологической реакции связывания комплемента, при этом в качестве диагностикумов используются растворимые антигены вирусов омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита, не дающие перекрестных реакций с гетерологичными антителами, которые получают путем обработки мочевиной боратно-солевых или сахарозо-ацетоновых антигенов вирусов омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита, имеющих титр комплементсвязывающей активности не ниже 1 : 160. Способ обеспечивает повышение точности дифференциальной диагностики заболеваний ОГЛ и КЭ у людей в РСК за счет использования в качестве диагностикумов комплементсвязывающих, неструктурных белков вирусов ОГЛ и КЭ - растворимых антигенов, не дающих перекрестных реакций с гетерологичными антителами, что представляется возможным при использовании других диагностических препаратов. 1 табл.
Description
Изобретение относится к вирусологии, точнее к дифференциальной лабораторной диагностике омской геморрагической лихорадки (ОГЛ) и клещевого энцефалита (КЭ).
Известно использование реакции связывания комплемента (РСК) для диагностики ОГЛ и КЭ у больных людей с применением инфекционных боратно-солевых (БСА) или сахарозо-ацетоновых антигенов (САА) вирусов ОГЛ и КЭ (Федорова Т. Н. и др. //Методические указания по дифференциальной эпидемиологической и серологической диагностике клещевого энцефалита и омской геморрагической лихорадки. - Омск, 1972. - 10 с.). Однако ввиду антигенной близости вирусов ОГЛ и КЭ дифференциация в РСК с БСА и САА этих вирусов видоспецифических антител в сыворотках крови больных вызывает значительные затруднения. Видовую специфичность обнаруженных антител оценивают по разнице их титров с БСА или САА вирусов ОГЛ и КЭ, причем достоверной считают четырехкратную и более высокую разницу. Низкая дифференцирующая способность БСА и САА вынуждает к повторным постановкам РСК, причем выявить достоверную разницу титров антител зачастую не удается, так как она колеблется от опыта к опыту.
Задача изобретения - повышение точности дифференциальной диагностики заболеваний ОГЛ и КЭ у людей в РСК.
Технический результат - усовершенствование лабораторной диагностики ОГЛ и КЭ, а следовательно, создание предпосылок для оптимизации противоэпидемических и лечебно-профилактических мероприятий в отношении данных инфекций.
Новым в достижении поставленной задачи является то, что в качестве диагностикумов ОГЛ и КЭ в РСК используют растворимые антигены (РА) вирусов ОГЛ и КЭ.
Показано, что представители комплекса клещевого энцефалита обладают способностью синтезировать неструктурный растворимый антиген (Smith T.J., Holt D. //Bull. Wild Hith Org. 1961, 24, 749-795). Нами впервые выявлена циркуляция в крови людей в период заболевания ОГЛ и КЭ антител, специфичных к неструктурным растворимым антигенам вирусов ОГЛ и КЭ. Нами также показана чрезвычайно высокая специфичность РА вирусов ОГЛ и КЭ при дифференцировании видоспецифических антител в РСК, которая проявляется в отсутствии перекрестных реакций при их использовании в качестве диагностикумов.
Способ осуществляется следующим образом. Для получения РА используют САА или БСА вирусов ОГЛ и КЭ. К САА или БСА добавляют сухую мочевину (мочевина чда, 6691-67, молекулярный вес 60 H2NCONH2) до конечной концентрации 8М. Чтобы получить такую концентрацию, надо на каждые 10 мл САА или БСА добавить 4,8 г мочевины. При растворении мочевины температура смеси резко снижается. Однако процесс растворения должен быть быстрым, чтобы не было участков с избыточной концентрацией детергента. Химический стакан с обрабатываемым антигеном помещают в водяную баню с температурой 37-40oC, всю навеску мочевины добавляют сразу и встряхивают стакан 3-4 раза. Мочевина должна растворится в течение 10-15 секунд. Антиген с растворившейся мочевиной тотчас помещают в термостат (37oC) на 30 минут, после чего пипеткой собирают его в диализный мешочек. Диализуют в течение 20-24 часов против 100 объемов боратного буферного раствора pH 9,0 (производства Томского НПО "Вирион") при 4oC для удаления мочевины из препарата.
Чтобы получить РА с титром, достаточным для использования в РСК, необходимо учитывать следующее: обработка мочевиной снижает титр комплементсвязывающей активности в 2-4 раза, поэтому для получения РА можно использовать исходные САА или БСА с титром не ниже 1:160. РА сохраняют свою активность при 4oC в течение 2-х месяцев.
РА вирусов КЭ и ОГЛ используют для дифференциального выявления в РСК видоспецифических антител к вирусам КЭ и ОГЛ в сыворотках крови больных людей, взятых в начальном периоде заболевания и реконвалесценции. РА вирусов КЭ и ОГЛ вступают во взаимодействие в РСК только с гомологичными антителами, что позволяет их четко идентифицировать без перекрестных реакций.
Способ иллюстрируется следующим примером.
Пример. Сыворотки крови от больных людей с подозрением на арбовирусные инфекции, взятые в начальном периоде заболевания и реконвалесценции, исследуют в РСК с использованием РА, приготовленных из штамма вируса КЭ Софьин и штамма вируса ОГЛ Боголюбовка. Результаты исследования парных сывороток больных представлены в таблице.
Как видно из таблицы РА обладают в РСК наибольшей специфичностью, что позволяет четко отдифференцировать антитела к вирусу ОГЛ от антител к вирусу КЭ.
Эффективность заявляемого способа доказана при расшифровке эпидемических вспышек заболеваний неясной этиологии среди населения юга Сибири в 1988-1996 гг. Оценку видовой принадлежности антител (ОГЛ или КЭ) проводили по результатам комплекса методов - РТГА с САА и БСА, РБН и (или) РН на микрокультуре СПЭВ, РСК с САА, БСА и РА. В ряде случаев диагноз у больных подтверждали вирусологически.
Claims (1)
- Способ дифференциальной диагностики омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита, включающий постановку серологической реакции связывания комплемента, отличающийся тем, что в качестве диагностикумов используют растворимые антигены вирусов омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита, не дающие с гетерологичными антителами перекрестных реакций, которые получают путем обработки мочевиной боратно-солевых или сахарозо-ацетоновых антигенов вирусов омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита, имеющих титр комплементсвязывающей активности не ниже 1:160.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU97109395A RU2133964C1 (ru) | 1997-06-06 | 1997-06-06 | Способ дифференциальной диагностики омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU97109395A RU2133964C1 (ru) | 1997-06-06 | 1997-06-06 | Способ дифференциальной диагностики омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU97109395A RU97109395A (ru) | 1999-05-27 |
RU2133964C1 true RU2133964C1 (ru) | 1999-07-27 |
Family
ID=20193815
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU97109395A RU2133964C1 (ru) | 1997-06-06 | 1997-06-06 | Способ дифференциальной диагностики омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2133964C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2450274C1 (ru) * | 2010-12-24 | 2012-05-10 | Федеральное государственное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Способ ранней диагностики заболевания геморрагической лихорадкой эбола у лиц, предположительно инфицированных указанным вирусом |
-
1997
- 1997-06-06 RU RU97109395A patent/RU2133964C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
1. Федорова Т.Н. и др. Методические указания по дифференциальной эпидемиологической и серологической диагностике клещевого энцефалита и омской геморрагической лихорадки. - Омск, 1972, 10 с. 2. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология./Под ред. Л.Б.Борисова и А.М.Смирновой. - М.: Медицина, 1994, с.238, с.392-395. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2450274C1 (ru) * | 2010-12-24 | 2012-05-10 | Федеральное государственное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Способ ранней диагностики заболевания геморрагической лихорадкой эбола у лиц, предположительно инфицированных указанным вирусом |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Busch et al. | Impact of specimen handling and storage on detection of hepatitis C virus RNA | |
EP0029063A1 (en) | Detection of non-a, non-b hepatitis associated antigen | |
Parida et al. | The application of new techniques to the improved detection of persistently infected cattle after vaccination and contact exposure to foot-and-mouth disease | |
JP2009537013A6 (ja) | フラビウイルス特異的抗体の検出のための抗原捕捉抗デングIgA ELISA(ACA−ELISA) | |
JP2009537013A (ja) | フラビウイルス特異的抗体の検出のための抗原捕捉抗デングIgAELISA(ACA−ELISA) | |
CN107513101B (zh) | 猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体酶联免疫检测试剂盒 | |
RU2133964C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита | |
US3826821A (en) | Reagents for the diagnosis of infectious mononucleosis and preparation of same | |
Slenczka et al. | A critical study of monkey sera for the presence of antibody against the Marburg virus | |
US4296024A (en) | Human immune serum globulin with high hepatitis A antibody titer | |
Goldwasser et al. | Preparation and use of erythrocyte-globulin conjugates to Lassa virus in reversed passive hemagglutination and inhibition | |
US3777014A (en) | Method and reagents for the diagnosis of viral diseases | |
AU649473B2 (en) | Enterovirus peptides | |
US3959456A (en) | Diagnostic slide test for infectious mononucleosis | |
JP2001501835A (ja) | ポリメラーゼ連鎖反応テストサンプルの精製方法 | |
KR101857417B1 (ko) | 효소면역기법을 이용한 일본뇌염바이러스에 대한 항체 검출 방법 | |
Eckels et al. | Hepatitis A virus hemagglutination and a test for hemagglutination inhibition antibodies | |
Ito et al. | Evaluation of RAST as an immunological method for diagnosis of multilocular echinococcosis. | |
RU2133622C1 (ru) | Способ обнаружения антител к ядерному белку вируса гепатита с | |
CN110669112B (zh) | 猪口蹄疫病毒a型抗体酶联免疫检测试剂盒 | |
RU2194993C2 (ru) | Способы ускоренной диагностики гепатита с, основанные на обнаружении гемагглютининов вируса гепатита с и антител к ним в рга и ртга в крови людей | |
Dolovich et al. | Antibody Responses to Hemodialysis‐Related Antigens in Chronic Hemodialysis Patients | |
RU2142134C1 (ru) | Тест-система для обнаружения антител к ядерному белку вируса гепатита с класса igm | |
RU2085214C1 (ru) | Способ получения сывороток, содержащих антитела против вируса марбург | |
RU2061959C1 (ru) | Набор для дифференциальной диагностики омской геморрагической лихорадки и клещевого энцефалита |