RU2130263C1 - Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата против грибных заболеваний растений - Google Patents
Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата против грибных заболеваний растений Download PDFInfo
- Publication number
- RU2130263C1 RU2130263C1 RU97116653A RU97116653A RU2130263C1 RU 2130263 C1 RU2130263 C1 RU 2130263C1 RU 97116653 A RU97116653 A RU 97116653A RU 97116653 A RU97116653 A RU 97116653A RU 2130263 C1 RU2130263 C1 RU 2130263C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- cells
- plants
- fungal diseases
- pseudomonas species
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Изобретение относится к сельскому хозяйству и биотехнологии . Штамм Pseudomonas species 7Г2К выделен из ризосферы диких злаковых растений. Депонирован в НИИ "Коллекция культур микроорганизмов" ГНЦ ВБ "Вектор" под номером В-695. Для получения препарата против грибных заболеваний растений штамм выращивают на различных питательных средах при 28 - 30°С в течение 10 - 12 ч до концентрации 1010 - 1111 кл/мл. Затем клетки смывают водой или буферным раствором, разводят до титра клеток 106 - 107 в мл и полученную суспензию используют для защиты растений от фитопатогенов. Штамм проявляет антагонистические свойства против грибов рода Phytopthora, Fusarium, Alternaria, Rhizoctonia, не требователен к питательным средам, отличается активным метаболизмом и высокой продуктивностью. 2 табл.
Description
Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и биотехнологии и касается штамма, который оказывает антагонистическое действие на фитопатогенные грибы и поэтому может быть использован для защиты от них сельскохозяйственных растений.
Известен штамм Pseudomonas putida, подавляющий рост фитопатогенного гриба Fusarium oxysporurm (Патент США N 4714614 кл. 424-93, 1987). Однако отсутствуют сведения о его спектре действия на другие фитопатогены.
Известен штамм Pseudomonas cepacia, активный против ряда фитопатогенных грибов (Патент ЕПВ N 0257756, кл. A 01 N 63/00, 1987). Однако не имеется сведений о действии этого штамма на такие широко распространенные и вредоносные возбудители болезней растений, как Alternaria spp.. HeIminthosporium, Botrylis, Fusarium.
Наиболее ближайшим к заявляемому штамму - прототипом, является штамм бактерий pseudomonas putida BKM В-1743Д, подавляющий рост фитопатогенных грибов рода Fusarium (Патент 1805849 RU, кл. A 01 N 63/00, опубл. 30.03.93; БИ N 12). Известный штамм выделен из ризосферы дикорастущих злаков в Республике Армения. Для получения препарата, используемого для защиты растений от грибов рода Fusarium и бактерий Erwinia, штамм выращивают на МПБ на качалке при 30oC в течение 16-18 часов до концентрации 109 кл/мл. Обработку семян производят из расчета 106-107 клеток на 1 г семян. Недостатком известного штамма является низкая продуктивность и узкий спектр антагонистического действия.
Технической задачей изобретения является получение нового природного штамма с широким спектром действия на возбудителей грибных заболеваний растений.
Поставленная задача достигается выявлением и использованием штамма Pseudomonas species 7Г2К, выделенного из ризосферы диких злаков, произрастающих на черноземных почвах в Ордынской лесостепи Новосибирской области.
Основными критериями отбора служили высокая продуктивность и подавление роста основных фитопатогенов с/х культур в лабораторных и полевых условиях. В качестве селектирующих факторов использованы также способность к быстрому росту и устойчивость к широкому спектру токсических веществ окружающей среды.
Полученный штамм Pseudomonas species 7Г2К депонирован в НИИ "Коллекция культур микроорганизмов" ГНЦ ВБ "Вектор" под регистрационным номером В-695. Штамм хранится в лиофильно высушенном состоянии.
Штамм Pseudomonas Sp 7Г2К характеризуется следующими признаками:
Морфологические признаки.
Морфологические признаки.
Палочковидные подвижные клетки с пучком полярных жгутиков, размером 0,7 • (1,7-3,8) мкм, большинство бактерий объединены в пары или кластеры, грамотрицательные, спор не образуют. Морфология колоний на питательных средах определялась после роста в течение 2-3 суток роста при 28-30oC. Колонии на мясо-пептонном агаре (МПА.) бежевые, сильно выпуклые, крупные 10-12 мм. Пигмент зеленый, диффундирующий в среду. Под ультрафиолетовым светом (260 нм) вокруг колоний наблюдается флуоресцирующая зеленая зона. На МПА с LB бульоном колонии беловатые, густослизистые, выпуклые, крупные. На диагностических средах Кинга: Кинг А - пигмент отсутствует. Кинг Б - интенсивный зеленый.
На МПА - косяках штрих светло-бежевый, блестящий, выпуклый, пигмент зеленый.
Физиолого-биохимические свойства.
По отношению к кислороду - облигатный аэроб, метаболизм дыхательный. В факторах роста не нуждается. Образует аргининдигидрогеназу и оксидазу. Крахмал и целлюлозу не гидролизует.
Оптимальная температура роста 28-30oC; растет при 5oC и не растет при 42oC. Хорошо растет в пределах pH среды от 6,5 до 7,5. Устойчив к NaCl: до 2%-ной концентрации.
В качестве источника углерода использует глюкозу, глицерин, маннит и не усваивает рафинозу, сорбит, дульцит, инулин.
Штамм устойчив к ампициллину (200 мкг/мл), рифамницину (50 мкг/мл), новобиоцину (50 мкг/мл), хлорамфениколу (100 мкг/мл), канамицину (100 мкг/мг) и чувствителен к тетрациклину (10 мкг/мл).
Штамм не обладает инфекционным и общетоксическим эффектом. Штамм не обладает фитопатогенной активностью, о чем свидетельствует отсутствие мацерации на ломтиках картофеля и некротических пятен на листьях табака при нанесении на них уколом суспензии живых клеток штамма.
Штамм идентифицирован:
1) по первоисточнику H.Stolp., D.Gadkari in "The prokaryotes". Berlinea, 1981, v.1., ch. 61, р.719-741.
1) по первоисточнику H.Stolp., D.Gadkari in "The prokaryotes". Berlinea, 1981, v.1., ch. 61, р.719-741.
2) по определителю Kried N.R. et all. Beregey's mannual of Systemat Bacteriology. London, '984, v.1.
Для культивирования Pseudomonas species 7Г2К применяют среду LB следующего состава:
Пептон - 10,0
Дрожжевой экстракт - 5,0
NaCI - 10,0
Вода дистиллированная - Остальное
Культивирование, проводят при 28-30oC в течение 10-12 ч до достижения плотности культуры 1010-1011 клеток на 1 мл. Полученную суспензию разводят до титра 106-107 кл/мл и используют для защиты растений от фитопатогенов.
Пептон - 10,0
Дрожжевой экстракт - 5,0
NaCI - 10,0
Вода дистиллированная - Остальное
Культивирование, проводят при 28-30oC в течение 10-12 ч до достижения плотности культуры 1010-1011 клеток на 1 мл. Полученную суспензию разводят до титра 106-107 кл/мл и используют для защиты растений от фитопатогенов.
Определяющим отличием предлагаемого штамма от прототипа является более широкий спектр действия на возбудителей грибных заболеваний растений.
Пример 1. Получение биомассы.
Перед началом работы клетки штамма Pseudomonas Sp. 7Г2К пересевают на агаризованную среду, помещают в термостат на 30oC. После 18-20 часовой инкубации подросшие клетки пересевают в колбы с LB-бульоном и проводят культивирование при 30oC с аэрацией при перемешивании в течение 12 ч до достижения плотности суспензии (5-9)•1010 жизнеспособных клеток/мл суспензии.
Для выращивания бактерий можно также использовать картофельный агар, для смывания - физиологический раствор или стерильную воду.
Пример 2. Изучение антагонистической активности нового штамма Pseudomonas sp. 7Г2К. Культуру бактерий высевали сплошным "газоном" на поверхность питательного агара (МПА с 2% глицерина или среда Кинга Б) и выращивали при 28oC в течение 2-3 суток. Затем вырезали диски агаризованной среды (агаровые блочки) с культурой нового штамма и размещали на сплошной "газон" тест культуры (фитопатогенного гриба). Для получения сплошного "газона" среду Чапека или картофельный агар засевали глубинным способом тест-культурой из расчета около 100 спор на мл среды. Чашки со сплошным "газоном" тест-культуры фитопатогенного гриба с нанесенными на него агаровыми блочками с клетками нового штамма Pseudomonas sp. В-695 помещали в термостат при 28-30oC на 3-6 суток. Учет проводили по зонам отсутствия или подавления роста гриба вокруг диска с клетками штамма. Результаты приведены в табл. 1 и свидетельствуют о широком спектре антагонистического действия нового штамма относительно фитопатогенных грибов.
Пример 3. В производственных условиях АОЗТ "Раздольное" Коченевского р-на Новосибирской области изучили влияние препарата на основе суспензии клеток нового штамма Pseudomonas sp. 7Г2К на снижение степени поражения мягкой яровой пшеницы Новосибирская 67 и Новосибирская 89 корневыми гнилями. Для этого провели предпосевную обработку семян из расчета: 50 мл суспензии клеток предлагаемого штамма (титр 1010 клеток/мл) на 1000 кг зерна. Контрольные семена пшеницы обрабатывали водой. Сев Новосибирской 67 провели по злаковым травам на площади 200 га (контроль - сев по кукурузе), а сев Новосибирской 89 провели по зерновым на площади 372 га (контроль - сев по злаковым травам). Испытания препарата на основе предлагаемого штамма проведены в условиях длительной холодной засухи мая-июня 1997 года.
Результаты приведены в табл. 2.
Из табл. 2 видно, что обработка семян пшеницы суспензией клеток нового штамма позволяет снизить заболеваемость растений корневыми гнилями на 10,4-18,6% и увеличить урожай пшеницы на 5 ц/га (33,3%).
Claims (1)
- Штамм бактерий Pseudomonas species НИИ ККМ ГНЦ ВБ "Вектор" И-695 для получения препарата против грибных заболеваний растений.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU97116653A RU2130263C1 (ru) | 1997-09-30 | 1997-09-30 | Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата против грибных заболеваний растений |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU97116653A RU2130263C1 (ru) | 1997-09-30 | 1997-09-30 | Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата против грибных заболеваний растений |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2130263C1 true RU2130263C1 (ru) | 1999-05-20 |
Family
ID=20197814
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU97116653A RU2130263C1 (ru) | 1997-09-30 | 1997-09-30 | Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата против грибных заболеваний растений |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2130263C1 (ru) |
-
1997
- 1997-09-30 RU RU97116653A patent/RU2130263C1/ru not_active IP Right Cessation
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR100197077B1 (ko) | 항균성 미생물제제, 그 제조방법 및 처리방법 | |
US5994117A (en) | Use of Bacillus Subtilis as an endophyte for the control of diseases caused by fungi | |
JP2829325B2 (ja) | 抗菌・抗線虫剤、植物細胞活性剤及びそのための微生物 | |
RU2529958C1 (ru) | Штамм азотфиксирующих бактерий pseudomonas sp. для получения биопрепарата против заболеваний пшеницы, вызываемых фитопатогенными грибами, и повышения урожайности | |
KR100397796B1 (ko) | 항균성 미생물제제와 그의 용도 | |
CN108559716B (zh) | 一株防治辣椒疫病的高效生防菌株及其应用 | |
RU2130263C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата против грибных заболеваний растений | |
RU2130261C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от фитопатогенных микроорганизмов | |
RU2307158C2 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis М1, ОБЛАДАЮЩИЙ ФУНГИЦИДНОЙ И ФУНГИСТАТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ ПО ОТНОШЕНИЮ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ БОЛЕЗНЕЙ КУЛЬТУРНЫХ РАСТЕНИЙ | |
EP0380649B1 (en) | Biological inoculant effective against aphanomyces | |
RU2121271C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas lemoignei для получения препарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от грибных фитопатогенов в процессе вегетации и при хранении урожая | |
JP2005151887A (ja) | 土壌病害の防除剤および防除方法 | |
KR101972068B1 (ko) | 식물 생육 촉진 효과, 환경 장해에 대한 식물 내성 유도 효과, 및 식물병 억제 효과를 갖는 로다노박터 그리시니스 t01e-68 균주 및 이의 용도 | |
RU2203945C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas aureofaciens для получения препарата против заболеваний пшеницы, вызываемых грибными фитопатогенами | |
RU2130262C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата против возбудителей заболеваний растений | |
RU2149552C1 (ru) | Консорциум штаммов-антагонистов для борьбы с бактериальными и грибковыми болезнями растений | |
SU1688818A1 (ru) | Штамм гриба АRтнRовотRYS DIGoSpoRa FReS. дл получени препарата против галловых нематод | |
RU2815318C1 (ru) | Штамм спорообразующих бактерий Bacillus thuringiensis spp. morrisoni, обладающий инсектоакарицидной, фунгицидной и стимулирующей рост растений активностью | |
CN116496924B (zh) | Bacillus rugosus YC25及在烟草病害防控中的应用 | |
JP2955642B2 (ja) | キサントモナス属に属する新拮抗細菌sb−k88とそれを利用したテンサイ健苗育成方法 | |
JP2872317B2 (ja) | アファノマイセスに対して有効な生物学的接種原 | |
JP2884488B2 (ja) | 新規微生物菌株を用いたイネ苗の立枯性病害防除剤及び防除方法 | |
KR100269417B1 (ko) | 아스코키타속에 속하는 미생물 및 그 용도 | |
RU2084152C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для защиты растений от фитопатогенных бактерий | |
RU2032345C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus licheniformis для получения препарата против белой гнили подсолнечника |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20131001 |