RU2117944C1 - Способ определения антиокислительной активности в условиях динамического диспергирования - Google Patents
Способ определения антиокислительной активности в условиях динамического диспергирования Download PDFInfo
- Publication number
- RU2117944C1 RU2117944C1 RU93036228A RU93036228A RU2117944C1 RU 2117944 C1 RU2117944 C1 RU 2117944C1 RU 93036228 A RU93036228 A RU 93036228A RU 93036228 A RU93036228 A RU 93036228A RU 2117944 C1 RU2117944 C1 RU 2117944C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- incubation
- concentration
- iodine
- antioxidant activity
- dilution
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Способ может быть использован в лабораторных исследованиях. Исследование препарата проводят, четырехкратно спектрофотометрируя продукты йодметрической реакции в присутствии органической кислоты и катализатора, измеряют оптическую прозрачность неокрашенной суспензии и образовавшегося цветового компонента. Результаты измерений вносят в расчетную формулу антиокислительной активности исследуемого препарата. Повышается чувствительность при исследовании препаратов, образующих суспензию. 1 табл.
Description
Изобретение относится к фармакологии, а именно к способам лабораторных исследований.
Цель изобретения - повышение чувствительности способа в условиях образующейся суспензии.
Известен способ определения антиокислительной активности липидов [1], заключающийся в исследовании растворителя липидов (смеси хлороформа с ледяной уксусной кислотой), окисляющегося субстрата (спиртового раствора йодистого калия) и катализатора (спиртового раствора перекиси водорода), которые вместе с антиоксидантом или контрольным раствором обеспечивают йодметрическую реакцию, контролируемую двукратно для вычисления основного показателя.
Недостатками способа являются образование суспензии при исследовании некоторых препаратов и в связи с этим низкая чувствительность.
Для исключения указанных недостатков предложен способ определения антиокислительной активности препаратов, образующих во время контакта с реагентами суспензию.
Для проведения исследования готовят 5 препаратов и составов. Ледяную уксусную кислоту, ксилол и диэтиловый эфир смешивают между собой в соотношении 1:4:1 (раствор N 1), 96o-ный этиловый спирт смешивают с йодистым калием (раствор N 2), образуя 0,7%-ный спиртовой раствор; 40%-ную перекись водорода смешивают с 96o этиловым спиртом в соотношении 1:30 (раствор N 3); диэтиловый эфир (препарат N 5) используют вне составов.
Определение антиокислительной активности проводят на основе спектрофотометрических данных реакции при длине волны 420 нм.
В кювету спектрофотометра с термостатическим устройством, поддерживающим температуру 35oC, наливают 1,0 мл раствора N 1, а затем последовательно 0,2 мл раствора N 3, 0,2 мл препарата N 5 и 0,3 мл препарата N 5. Полученную смесь встряхивают в течение 2 мин и смешивают с 0,5 мл 96o этилового спирта, после чего фотоколориметрируют или спектрофотометрируют. Измеренная оптическая прозрачность в % представляет собой эквивалент прозрачности по йоду и оценивает степень дисперсности (Iэкв.) неокрашенной жидкости. Затем к смеси приливают 0,2 мл раствора N 2, инкубируют при температуре 35oC в течение 3 мин и спектрофотометрируют, регистрируя оптическую прозрачность в % цветной суспензии. Далее смесь инкубируют еще 10 мин и регистрируют оптическую прозрачность. Жидкость переносят в водяную баню для инкубации в течение 12-24 ч, после чего определяют окончательную оптическую прозрачность суспензии. Полученные показатели последовательно вводят в форму вычисления концентрации йода, которую получают путем аппроксимации данных калибровочной кривой:
где
X - оптическая прозрачность суспензии в %.
где
X - оптическая прозрачность суспензии в %.
Определяют коэффициент резервной концентрации k
где
Imax - максимальная концентрация йода, полученная через 12-24 ч инкубации;
I10 - концентрация йода, полученная через 10 мин инкубации;
I3 - концентрация йода, полученная через 3 мин инкубации;
Iэкв. - эквивалент концентрации йода по неокрашенной суспензии.
где
Imax - максимальная концентрация йода, полученная через 12-24 ч инкубации;
I10 - концентрация йода, полученная через 10 мин инкубации;
I3 - концентрация йода, полученная через 3 мин инкубации;
Iэкв. - эквивалент концентрации йода по неокрашенной суспензии.
Вычисляют антиокислительную активность исследуемого препарата:
где
I10 - концентрация йода, полученная через 10 мин инкубации;
I3 - концентрация йода, полученная через 3 мин инкубации;
2,4 - общий объем реакционной смеси (мл);
12 - поправочный коэффициент;
n - кратность разведения;
0,3 - коэффициент компрессии разведения;
10 - продолжительность инкубации (мин);
0,2 - объем антиоксиданта (мл);
k - коэффициент резервной концентрации.
где
I10 - концентрация йода, полученная через 10 мин инкубации;
I3 - концентрация йода, полученная через 3 мин инкубации;
2,4 - общий объем реакционной смеси (мл);
12 - поправочный коэффициент;
n - кратность разведения;
0,3 - коэффициент компрессии разведения;
10 - продолжительность инкубации (мин);
0,2 - объем антиоксиданта (мл);
k - коэффициент резервной концентрации.
Составные части реакционной смеси действуют следующим образом.
Раствор N 1 представляет собой среду разведения и растворения до образования суспензии. Раствор N 2 является основным субстратом окисления и источником йода в реакции. Раствор N 3 представляет собой катализатор окисления в среде органических соединений. Диэтиловый эфир и этиловый спирт гомогенизируют суспензию и предотвращают быстрое оседание. Встряхивание дает наиболее мелкодисперсную суспензию.
Предложенную формулу расчета антиокислительной активности объясняются следующим образом.
В основе формулы лежит величина, изменяющаяся в течение определенного времени, значение которой растет с увеличением абсолютных концентраций йода, а также их разницы. Для стандартизации исходного уровня активности в формуле присутствует объем реакционной смеси. Учитывая эффект разведения, заключающийся в увеличении разницы абсолютных показателей концентраций йода и, следовательно, антиокислительной активности, в формулу введен коэффициент компрессии разведения, приводящий в соответствие показатели разной концентрационной активности. Поправочный коэффициент приводит в соответствие антиокислительную активность по данным АОА образцового препарата (оливкового масла). Коэффициент резервной концентрации обеспечивает расширение диапазона АОА при появлении суспензии во время исследования путем обратно пропорционального сдвига собственных значений к величине Iэкв..
Способ иллюстрирует следующий пример четырехкратного измерения оптической прозрачности и полученный результат антиокислительной активности гепарина, представленные в таблице.
Claims (1)
- Способ определения антиокислительной активности препарата в условиях динамического диспергирования, включающий проведение йодметрической реакции с инкубацией в присутствии органической кислоты и катализатора с последующей спектрофотометрией, отличающийся тем, что перед проведением иодметрической реакции определяют эквивалент Iэкв., концентрации йода по неокрашенной суспензии, а в процессе проведения йодметрической реакции измеряют концентрацию йода в окрашенной суспензии через 3 мин инкубации, 10 мин инкубации и 12 - 24 ч инкубации и, учитывая общий объем реакционной смеси, поправочный коэффициент, кратность разведения антиоксиданта (исследуемого препарата), коэффициент компрессии разведения исследуемого препарата, продолжительность инкубации и коэффициент резервной концентрации, вычисляют антиокислительную активность АОА по формуле
где I3 - концентрация йода, полученная через 3 мин инкубации и рассчитанная по универсальной для всех концентраций формуле, мкмоль,
где X - оптическая прозрачность суспензии, %:
I10 - концентрация йода, полученная через 10 мин инкубации;
2,4 - общий объем реакционной смеси, мл;
12 - поправочный коэффициент;
n - кратность разведения исследуемого препарата;
0,3 - коэффициент компрессии разведения исследуемого препарата;
10 - продолжительность инкубации, мин;
0,2 - объем исследуемого препарата, мл;
k - коэффициент резервной концентрации, рассчитанный по формуле
где Imax - максимальная концентрация йода, полученная через 12 - 24 ч инкубации;
Iэкв - эквивалент концентрации йода.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU93036228A RU2117944C1 (ru) | 1993-07-13 | 1993-07-13 | Способ определения антиокислительной активности в условиях динамического диспергирования |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU93036228A RU2117944C1 (ru) | 1993-07-13 | 1993-07-13 | Способ определения антиокислительной активности в условиях динамического диспергирования |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU93036228A RU93036228A (ru) | 1996-10-10 |
RU2117944C1 true RU2117944C1 (ru) | 1998-08-20 |
Family
ID=20145029
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU93036228A RU2117944C1 (ru) | 1993-07-13 | 1993-07-13 | Способ определения антиокислительной активности в условиях динамического диспергирования |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2117944C1 (ru) |
-
1993
- 1993-07-13 RU RU93036228A patent/RU2117944C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
1. SU 656614 A1 (Одесский НИИ стоматологии и Бассейновая СЭС Черноморского водздравотдела), 11.07.77, G 01 N 33/16. 2. SU 1422152 A1 (Ленинградский санитарно-гигиенический медицинский ин), 07.09.88, G 01 N 33/49. 3. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Okimoto et al. | A novel fluorescent probe diphenyl-1-pyrenylphosphine to follow lipid peroxidation in cell membranes | |
US3689364A (en) | Sensitive color indicators for lipase determinations | |
US4448889A (en) | Fluid analysis | |
EP1525471B1 (en) | Agent for detecting malondialdehyde, method of making the same, and test kit for use thereof | |
RU2117944C1 (ru) | Способ определения антиокислительной активности в условиях динамического диспергирования | |
Lopez-Martinez et al. | Simple spectrophotometric determination of tinidazole in formulation and serum | |
JPH06103309B2 (ja) | 血中のヘモグロビン測定のための試薬および方法 | |
Jones et al. | Measurement of urine porphyrins and porphyrinogens | |
US4211531A (en) | Colorimetric cholesterol assay | |
Sommers et al. | Direct determination of total serum cholesterol by use of double-wavelength spectrophotometry | |
Zargoosh et al. | Evaluation of antioxidant capacity of hydrophilic and hydrophobic antioxidants using peroxyoxalate chemiluminescence reaction of the novel furandicarboxylate derivative | |
Hermanto et al. | Transparent Membrane of Polyelectrolyte Complex Doped with 2, 6-Dichlorophenol-Indophenol as an Optical Sensor for Colorimetric Measurements of Ascorbic acid. | |
CN112129949A (zh) | 一种视黄醇结合蛋白检测试剂盒、其制备方法和使用方法 | |
US3348920A (en) | Reagent and method for the quantitative determination of bilirubin | |
RU2771851C1 (ru) | Экспресс-способ определения цефтриаксона в плазме крови и смешанной слюне больных COVID-19 | |
RU2517489C1 (ru) | Способ определения пикамилона | |
SU1045127A1 (ru) | Способ определени антиокислительной активности вещества | |
SU1314254A1 (ru) | Способ определени винной кислоты в образцах технических продуктов | |
RU2268476C2 (ru) | Способ количественного определения белка в биологических жидкостях | |
SU656614A1 (ru) | Способ определени антиокислительной активности липидов | |
SU1165995A1 (ru) | Способ определени 1,8-диоксиантрахинона | |
Berzas Nevado et al. | Rapid spectrophotometric method for determining erythrosine, amaranth and tartrazine in ternary mixtures | |
SU1711082A1 (ru) | Способ определени супероксиддисмутазной активности в крови | |
SU1720004A1 (ru) | Способ определени альбумин-глобулинового коэффициента крови | |
Bahjat et al. | Development of Spectrophotometric Method for The Determination of Mesalazine as Pure Form and in Tablets |