RU2098114C1 - Препарат, воздействующий на функциональную активность клеток эукариот и прокариот - Google Patents
Препарат, воздействующий на функциональную активность клеток эукариот и прокариот Download PDFInfo
- Publication number
- RU2098114C1 RU2098114C1 RU95101449A RU95101449A RU2098114C1 RU 2098114 C1 RU2098114 C1 RU 2098114C1 RU 95101449 A RU95101449 A RU 95101449A RU 95101449 A RU95101449 A RU 95101449A RU 2098114 C1 RU2098114 C1 RU 2098114C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- drug
- polysaccharide
- effect
- cells
- preparation
- Prior art date
Links
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 45
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 claims abstract description 30
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 claims abstract description 18
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 18
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 18
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 claims abstract description 18
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 13
- 241001633600 Ungernia Species 0.000 claims abstract description 13
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 3
- 210000003850 cellular structures Anatomy 0.000 claims abstract 2
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 claims description 44
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 22
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 5
- 230000004936 stimulating Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001747 exhibiting Effects 0.000 abstract 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 7
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N acetic acid ethyl ester Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000002257 embryonic structures Anatomy 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 235000017471 coenzyme Q10 Nutrition 0.000 description 5
- 230000001965 increased Effects 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- ACTIUHUUMQJHFO-UPTCCGCDSA-N Coenzyme Q10 Chemical compound COC1=C(OC)C(=O)C(C\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CCC=C(C)C)=C(C)C1=O ACTIUHUUMQJHFO-UPTCCGCDSA-N 0.000 description 4
- 230000001738 genotoxic Effects 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 3
- 229940035936 Ubiquinone Drugs 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001146 hypoxic Effects 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 239000002609 media Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000035806 respiratory chain Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 2
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N D-Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 229940088598 Enzyme Drugs 0.000 description 2
- 241000234271 Galanthus Species 0.000 description 2
- 210000004698 Lymphocytes Anatomy 0.000 description 2
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N Nicotinamide adenine dinucleotide Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N Rimantadine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(C(N)C)C3 UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 2
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 230000002715 bioenergetic Effects 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 102000022270 cytochrome c family Human genes 0.000 description 2
- 108091010617 cytochrome c family Proteins 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 231100000025 genetic toxicology Toxicity 0.000 description 2
- 231100000024 genotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 244000144980 herd Species 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N nicotinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N oxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 2
- IKEHOXWJQXIQAG-UHFFFAOYSA-N 2-tert-butyl-4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 IKEHOXWJQXIQAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NALREUIWICQLPS-UHFFFAOYSA-N 7-imino-N,N-dimethylphenothiazin-3-amine;hydrochloride Chemical compound [Cl-].C1=C(N)C=C2SC3=CC(=[N+](C)C)C=CC3=NC2=C1 NALREUIWICQLPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001015 Abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 208000005298 Acute Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000499945 Amaryllis Species 0.000 description 1
- 241000931365 Ampelodesmos mauritanicus Species 0.000 description 1
- 241000722818 Aralia Species 0.000 description 1
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 1
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 description 1
- 230000037227 Blood Loss Effects 0.000 description 1
- 210000004556 Brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000170 Cell Membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 Cell Wall Anatomy 0.000 description 1
- 235000015256 Chionanthus virginicus Nutrition 0.000 description 1
- 102000003914 Cholinesterases Human genes 0.000 description 1
- 108090000322 Cholinesterases Proteins 0.000 description 1
- 240000004784 Cymbopogon citratus Species 0.000 description 1
- 235000017897 Cymbopogon citratus Nutrition 0.000 description 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 1
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 108091006133 Electron carriers Proteins 0.000 description 1
- 241000490050 Eleutherococcus Species 0.000 description 1
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 1
- 102000003983 Flavoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010057573 Flavoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 206010017758 Gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000192130 Leuconostoc mesenteroides Species 0.000 description 1
- 241001306755 Leuzea Species 0.000 description 1
- 210000004185 Liver Anatomy 0.000 description 1
- 206010027339 Menstruation irregular Diseases 0.000 description 1
- 235000003805 Musa ABB Group Nutrition 0.000 description 1
- 240000008790 Musa x paradisiaca Species 0.000 description 1
- 229940052665 NADH Drugs 0.000 description 1
- 108020005203 Oxidases Proteins 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 241000167859 Pedicularis Species 0.000 description 1
- 235000015266 Plantago major Nutrition 0.000 description 1
- 229920000903 Polyhydroxyalkanoate Polymers 0.000 description 1
- 206010040026 Sensory disturbance Diseases 0.000 description 1
- 206010040984 Sleep disease Diseases 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 description 1
- 229940098465 Tincture Drugs 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 230000024126 agglutination involved in conjugation with cellular fusion Effects 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloids Natural products 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- BWKOZPVPARTQIV-UHFFFAOYSA-N azanium;hydron;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate Chemical compound [NH4+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC([O-])=O BWKOZPVPARTQIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000010352 biotechnological method Methods 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 235000012970 cakes Nutrition 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 description 1
- 229940048961 cholinesterase Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 230000000816 effect on animals Effects 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 231100000446 genotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 235000005035 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth media Substances 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003284 homeostatic Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic Effects 0.000 description 1
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 description 1
- 230000002232 neuromuscular Effects 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic Effects 0.000 description 1
- 201000005617 ovarian disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004535 ovarian dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 231100000543 ovarian dysfunction Toxicity 0.000 description 1
- 230000036961 partial Effects 0.000 description 1
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003058 plasma substitute Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective Effects 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000004223 radioprotective Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 description 1
- 230000035812 respiration Effects 0.000 description 1
- 230000027756 respiratory electron transport chain Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 231100000486 side effect Toxicity 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 150000003669 ubiquinones Chemical class 0.000 description 1
- 238000007738 vacuum evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к биохимии. Предложен полисахарид общей формулы (C6H12O6)3-12•K0,2-5, имеющий характеристический максимум в ультрафиолетовой области при 267-276 нм, способный воздействовать на функциональную активность клеток и клеточных структур. Полисахарид оказался перспективным в качестве лечебно-профилактического или стимулирующего препарата для применения в медицине, ветеринарии, прикладной биотехнологии. Полисахарид выделен из растения Унгерния Виктора, содержится в ряде других растений. Может быть получен водной экстракцией биомассы каллусной ткани при ее культивировании (каллус получается из растений рода Унгерния (Унгерния Виктора, Унгерния Северцева). 2 з.п.ф-лы, 4 ил.
Description
Изобретение относится к биохимии, а именно к препаратам, воздействующим на функциональную активность клеток и клеточных систем, в частности, в условиях неблагоприятных внешних воздействий, в частности в фазе роста в условиях нехватки питательных веществ, а также оказывающим на клетку оздоровительное или лечебно-профилактическое воздействие.
Среди биологически-активных веществ, обладающих воздействием на функционирование биоэнергетических систем клеток и нашедших практическое применение, известны такие препараты как цитохром C, убихинон, ионол.
В частности, убихинон (коэнзим Q) в дозе 200 мг/кг веса оказывает нормализующее воздействие на клетки в условиях некоторых гипоксий, являясь природным переносчиком электронов и занимая центральное место в цепи ферментов электронного транспорта, реагируя с тремя ферментными системами: НАД H2-оксидазой, сукцинат-CoO-редуктазой и системой цитохромов (Микробиология, 1979, 48, N 6, М. Г.И.Андреева "Влияние убихинонов и их аналогов на активность ферментов дыхательной цепи", с. 969-974). Однако узкая область использования, сложная технология получения (многостадийный химический синтез или экстракция из микроорганизмов с последующим концентрированием и очисткой), относительно невысокая эффективность затрудняют использование убихинона.
Ионол (2,6-ди-(трет-бутил-4-метилфенол) является антиоксидантом, это ингибитор синтеза RNK и свободно-радикальных процессов.
Препарат цитохром C выделен биологическим путем, структура не установлена. Препарат воздействует не процессы тканевого дыхания.
Применение названных препаратов ограничено относительно невысокими защитными возможностями при воздействии на клетку стрессовых воздействий, а также недостаточно нормализующими гомеостатическими свойствами при наличии в клетке негативных отклонений, вызванных указанными воздействиями, сложной технологией получения, высокой себестоимостью.
Известно применение для подобных целей препаратов, как правило экстрактов и настоек растительного происхождения настойки лимонника, женьшеня, левзеи, радиолы розовой, аралии, элеутерококка (Машковский М.Д. Лекарственные средства, М. Медицина, 1985, т. 1, с. 137-143).
Недостатком указанных соединений является то, что они обладают возбуждающим действием, имеют ограниченный спектр применения, достаточно дефицитны и относительно малоэффективны в связи с низкими концентрациями активного начала в получаемых растворах.
Среди препаратов, получаемых из растительного сырья, воздействующих на функциональную активность клеток, известен, в частности, и галактомин, выделяемый из клубней подснежника Воронова, амарилисов, а также содержащийся в листьях Ungernia Victoris. Препарат является ингибитором холинэстеразы, способствует нервно-мышечной проводимости, показан при двигательных и чувствительных нарушениях (Шарков П.Л. и др. Вестник рентгенологии и радиологии, 1974, N 2, с. 41-45. Авдусалатов А. Алкалоиды Pediculari, Ungernia, Galanthus, Авт.дисс.д.х.н. Ташкент, 1972).
Недостатком препарата является относительно высокая токсичность, узкий спектр действия.
Наиболее близкими по структуре к заявляемому является препарат полисахаридов полиглюкин, имеющий молекулярную массу 60000±10000, получаемый гидролизом декстрана из сахарозы с использованием L.mesenteroides. Препарат имеет общую формулу (C6H12O6)n, где n 300-400, и используется в качестве плазмозаменителя, в частности при шоке и кровопотере (Машковский М.Д. Лекарственные средства. М. 1985, т.2, с.100).
Недостатком указанных полисахаридов является недостаточное по эффективности воздействие и узкое по спектру воздействие на функциональную активность клеток.
В основу изобретения положена задача нахождения вещества, обладающего более эффективным воздействием, в первую очередь стимулирующим и регуляторным, на функционирование клеток эукариот и прокариот и сочетающего высокую эффективность, широкий спектр действия и минимум побочных отрицательных эффектов при введении в организм эффективных количеств препарата.
Эта задача решается использованием полисахарида общей формулы (C6H12O6)nKm, где n 3-12, m 0,2-5. Полисахарид является порошком, хорошо растворимым в воде и спирте, имеет характеристические пики в ультрафиолете в области 267-276 нм.
Данное соединение было получено из экстракта каллусной ткани Ungernia Victoria (растения третичного периода, эндемического для Гиссарской долины (Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений СССР, М. 1976, с.317)), однако в микроколичествах содержится в различных частях этого растения, а также некоторых других растений, например подорожнике, унгернии Северцева, амарилисе. Наряду с природным сырьем полисахарид получают культивированием с использованием биотехнологических методов ткани указанных растений.
Проведенные эксперименты, в частности, с помощью методов масс-спектроскопии показали, что полученный активный препарат содержал смесь полисахаридов различной мол. м. (540-2200), имеющих по данным количественного анализа содержание C, H и O, соответствующее моносахаридному звену при одновременном наличии в препарате в зависимости от источника получения полисахарида 1,3-10% K, что соответствует заявленному соотношению ингредиентов в формуле.
Выделение отдельных фрагментов полисахаридной смеси и их более детальный анализ не проводился из-за низкого содержания активного начала в получаемом экстракте, характеризуемом долями процента. Вместе с тем, как показали эксперименты, обработка клеточных систем водными или водно-спиртовыми растворами, содержащими 10-5-10-12 г/л, оказывает эффективное воздействие на их функционирование.
Изучение свойств препарата, получившего условное наименование "Влаирин", проводилось на клетках бактерий, человека, тканях и клеточных системах, а также живом организме в целом.
Препарат "Влаирин" выделялся как экстракцией (условия) биомассы Ungernia victoris (нативный препарат), так и экстракцией каллусной растительной ткани растений рода Ungernia (Ung. victoris, Ung. Sewerzawoe).
Для нативного препарата характеристичным являлась общая формула (C6H12O6)nKm при n 3-8, m 0,2-1,0, для препарата, полученного культивированием, как правило, n 3-12, m 2,0-5,0.
Сопоставление хроматограмм УФ-спектров, масс-спектров и данных электрофореза (фиг. 1-3) показало сходность набора компонентов смесей при различии соотношений входящих в них ингредиентов.
Сопоставление биологической активности фракций различного происхождения показало идентичность воздействия на клеточные системы в таких тестах, как радиозащитное действие, заживляющее воздействие на раневую поверхность, стимулирующее воздействие на рост клеток и привес молодняка птиц, что позволяет рассматривать препарат независимо от источника его происхождения как единое изобретение.
Механизм воздействия препарата "Влаирин" на клетку в настоящее время окончательно не установлен, однако полученные данные позволяют предположить, что воздействие на клетку обусловлено сочетанием репарационного воздействия на клеточные мембраны с ускорением осмотических процессов, включая K-Na обмен через стенку клетки вследствие появления дополнительной поляризации ее фрагментов. Одновременно можно предполагать, что вводимый полисахарид способен ингибировать радикальные и перекисные процессы в тканях и связывать некоторые токсические метаболиты.
Опыты, проведенные на животных, показали, что препарат характеризуется полной безвредностью, отсутствием мутагенного, канцерогенного, генотоксического действия.
В частности, LD50 при пероральном применении установить не удалось, т.к. введение препарата в дозах, превышающих эффективную в 20 тысяч раз, не оказало негативного действия на животных.
Генотоксичность препарата была изучена с помощью SOS-хромотеста (Quillardet P. Huisman O. Hofnung M. SOS chromotest, a direct assay of induction of an SOS function in Escherichia coli K-12 to measure genotoxicity. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1982, 79, p. 5971-5975. Quillardet P. Hofnung M. The SOS chromotest, a colorimetric bacterial assay for genotoxins; procedures. Mutat. Res. 1985 147, p.67-68. Labsystems Oy (1988). Bio SOS. Software User' s Guide.)
Тест включал в себя ДНК-повреждающую и SOS-индуцирующую активность, УФ-мутагенез, индукцию профагов и т.д.
Тест включал в себя ДНК-повреждающую и SOS-индуцирующую активность, УФ-мутагенез, индукцию профагов и т.д.
Тест проводился на микробиологическом анализаторе "Bioscreen" (Labsystems) с использованием штамма E.coli PQ 37.
В результате проведенных экспериментов было показано, что препарат не является генотоксичным в концентрациях по крайней мере до 3,8 мг/мл, что более чем в 5000 раз превышает эффективную дозу.
Способ получения и области применения вещества иллюстрируются примерами.
Пример 1. Получение нативного препарата.
1 кг растения Унгерния Виктора, собранного в Гиссарской долине, промывали 4 л воды водопроводной, после чего ополаскивали 300 мл дистиллированной воды, после чего измельчали на части размером 3-5 мм и экстрагировали в течении 6 ч 1 л дистиллированной воды при комнатной температуре.
Полученный после экстракции нерастворимый осадок шрот отделяли, а экстракт поступал на стадию очистки от органических кислот и фенольных соединений.
На стадии очистки 0,8 л экстракта обрабатывали в сепараторе 0,5 л этилацетата при pH 2,0 и скорости перемешивания 1-3 об/мин 0,6 л органического слоя отделяли и отправляли на регенерацию этилацетата, а 0,5 л водного остатка смешивали с 0,5 л этанола.
Полученный раствор содержал 0,2 мг активного вещества и использовался для проведения испытаний.
Активное вещество, выделенное методом вакуумного упаривания нескольких порций концентрата, представляло собой смесь полисахаридов общей формулы (C6H12O6)3-8•K0,8
Ультрафиолетовый спектр, имеющий максимум при 267-276 нм и масс-спектроскопия полимера приведены на фиг. 1, 2.
Ультрафиолетовый спектр, имеющий максимум при 267-276 нм и масс-спектроскопия полимера приведены на фиг. 1, 2.
Также обработка, проведенная с использованием в качестве источника сырья растение Унгерния Северцева, позволила получить 0,05 мг активного начала, содержащего 65% полисахарида общей формулы (C6H12O6)4-10•K0,2 имеющего аналогичный спектр.
Пример 2. 1 кг каллусной ткани Унгерния, здоровой и неповрежденной грибами или бактериями, промывался 5 объемами воды для удаления остатков культуральной среды, а затем обрабатывался по методике примера 1. Полученный экстракт содержал 0,05 мг полисахарида общей формулы (C6H12O6)3-12•K5.
Характеристический спектр и результаты масс-спектроскопии приведены на фиг. 3-4.
Пример 3. воздействие препарата "Влаирин" на функциональную активность клеток.
Эксперименты по воздействию препарата "Влаирин" проводились на системах перевиваемых клеток человека Hela и бласттрансформированных лимфоцитах по методике (Засухина Г. Д. и др. Вопросы вирусологии, 1981, N 1. с. 94-96; Hangerfort D.A. Stein. Techn. 1965, v. 40, p. 333-338).
Клетки Hela выращивали в стационарных условиях (Засухина) в течение 48-72 ч, после чего в среду вносили препарат в различных разведениях и считывали количество клеток, выросших в матрасах через 48 ч. Было установлено, что добавка 10-4 препарата повышает количество клеток на 10±5% 10-5 на 30±7% 10-7 на 3±3%
Дальнейшие эксперименты проводили с концентрацией препарата 10-5 на матрасах объемом 100 мл по 100 клеток на матрасе. Количество клеточных колоний определяли через 14 дней прокрашиванием красителем Гимза. В результате было установлено, что число колоний возросло с 66±5 до 87±7 (на 32%), причем число колоний, содержащих более 50 клеток увеличилось с 4 до 10.
Дальнейшие эксперименты проводили с концентрацией препарата 10-5 на матрасах объемом 100 мл по 100 клеток на матрасе. Количество клеточных колоний определяли через 14 дней прокрашиванием красителем Гимза. В результате было установлено, что число колоний возросло с 66±5 до 87±7 (на 32%), причем число колоний, содержащих более 50 клеток увеличилось с 4 до 10.
Лимфоциты культивировали по обычной методике (Hangerfort). Через 1 ч после стимуляции клеток ФГА в среду вводили препарат в концентрации 10 мкл/л (разведение 10-5). На 66 часу роста число клеток по сравнению с контролем возросло на 25±7%
Полученные эксперименты показали, что применение препарата "Влаирин" стимулирует рост клеток человека, в частности, повышая их пролиферативную активность.
Полученные эксперименты показали, что применение препарата "Влаирин" стимулирует рост клеток человека, в частности, повышая их пролиферативную активность.
Пример 4. Влияние препарата "Влаирин" (культ.) на активность ферментов дыхательной цепи изучали на кроликах массой 1,5-3,5 кг по оценке состояния ферментов цепи передачи электронов мозговой ткани кроликов при гипоксии и в ранний восстановительный период. Гипоксическое состояние достигалось забором крови. На стадии трансфузии контрольной группы вводили кровь, обогащенную кислородом.
В табл. 1 представлены данные по отношению концентраций окисленной формы флавопротеинов к восстановительной форме NADH (K), парциальному давлению кислорода 
окислительно-восстановительному потенциалу крови (EMB) при введении водного раствора 10-5 г/мл названного препарата в дозе 35 мг/кг, а также по потреблению глюкозы (Сгл) и содержанию молочной кислоты (Смк) при введении 10 мг/кг указанного раствора.
Полученные данные показали, что введение препарата вызывает немедленный запуск ферментов дыхательной цепи.
Пример 5. Противовирусную активность препарата "Влаирин" и ремантадина исследовали на развивающихся куриных эмбрионах.
В аллантоисную полость одиннадцатидневных куриных эмбрионов вводили по 0,2 мл раствора нативного препарата в дистиллированной воде (доза препарата 10-6 мг/кг). Второй партии эмбрионов вводили препарат сравнения - ремантадин в оптимально рекомендуемой дозе 4 мг/кг. Объем вводимого препарата также 0,2 мл. Контрольной серии эмбрионов вводили равный объем воды. Затем эмбрионы инкубировали в термостате при 37oС в течение 2 ч, вводили вирус болезни Ньюкастла NDV штамм H в дозе 10 ИД/0,1 мл. Инфицированные эмбрионы дополнительно инкубировали в термостате 48 ч и определяли наличие в них вируса по реакции агглютинации. Результаты представлены в табл. 2.
Пример 6. Препарат "Влаирин" (культуральный) был испытан в опытах по откармливанию бройлеров на Братцевской птицефабрики Московской области.
Препарат задавался цыплятам с кормовой смесью с 5 по 360-ые сутки из расчета 0,085 г/кг веса в стаде из 500 голов молодняка кур породы Ломен Браун. На 35-е сутки вскармливания средний вес курицы составил 350±9 (контроль 335±11), петушка 430±12 (410±9).
Отмечалось, что количество птиц с поврежденным опереньем в опыте на 20% ниже, чем в контроле.
Падеж в опытном стаде отсутствовал, в контроле он составил 0,5%
Пример 7. Воздействие препарата "Влаирин" на функциональную деятельность организма.
Пример 7. Воздействие препарата "Влаирин" на функциональную деятельность организма.
а) Больная К. возраст 23 г. обратилась в поликлинику с жалобами на нерегулярные менструации с болевым синдромом, отсутствие беременности на протяжении двух лет супружества. Диагноз лечащего врача: дисфункция яичников. Лечение препаратом "Влаирин" (нативный) проводилось в течение двух месяцев перорально по 5 капель 3 раза в день. По прошествии курса лечения у пациентки наступила беременность, проходившая в последующем без существенных осложнений и завершившаяся нормальными родами.
б) Больная Н. 71 лет обратилась в июле 1993 г в поликлинику по поводу возрастной депрессии, общего упадка сил (невозможность передвигаться), расстройства сна, отсутствие аппетита. Лечение препаратом "Влаирин" перорально 3 раза в день по 4 капли проводилось в течение 1,5 мес. Уже через 2 недели лечения больная почувствовала значительное улучшение состояния. По окончании лечения у пациентки наблюдалось полное восстановление функций (нормализовался сон и аппетит, способность к передвижению). Она способна полностью обслуживать себя, включая обеспечение продуктами и уборку дома. До настоящего времени осложнения и жалобы отсутствуют.
в) Больной К. обратился с просьбой о помощи по поводу неоперабельного рака печени и желудка (диагноз поставлен после операции). Состояние больного: расстройство пищеварения, острые боли в области печени и всего живота. Прогноз отрицательный.
Лечение препаратом "Влаирин" проводится периодически повторяющимися курсами по 2 мес приема препарата по 8 капель экстракта 3 раза в день перорально, затем 1 мес перерыв, на протяжении 1,5 лет. В настоящее время пациент трудоспособен (режим труда общий), жалобы отсутствуют.
Пример 9. Воздействие препарата "Влаирин" (культуральный) на микроорганизмы на примере бактерий.
Эксперимент проводили на клетках микроорганизма рода Escherichia coli штамм М-17, выращенных на глюкозо-минеральной питательной среде следующего состава (г/л): KH2PO4 1,0; Na2HPO4•12H2O 1,0; NaCl 5,0; Na2CO3 2,0, MgSO4•7H2O 0,1; цитрат аммония 4,4; никотиновая кислота 0,005; глюкоза 0,3.
Было проведено изучение электрокинетического потенциала клеточной популяции до и после введения заявляемого препарата для живых и мертвых клеток названных микроорганизмов.
Результаты проведенного испытания показали, что при введении в культуру препарата в дозе 10-8 мг/л подвижность клеток микроорганизма Escherichia coli возрастает на 2.4 мв (по сравнению с контрольной клеточной популяцией, не испытывающей влияния препарата).
При дозе 10-5 мг/л подвижность клеток возрастает на 7,3 мв (по сравнению с контрольной популяцией).
Таким образом, введение препарата повышает форетическую подвижность живых клеток, что связано с изменением их биоэнергетических функций.
Claims (3)
1. Полисахарид общей формулы
(C6H1 2O6)nKm,
где n 3 12;
m 0,2 5,
имеющий характеристический максимум в ультрафиолетовой области при 267 - 276 нм, в качестве препарата, оказывающего воздействие на функциональную активность клеток и клеточных структур.
(C6H1 2O6)nKm,
где n 3 12;
m 0,2 5,
имеющий характеристический максимум в ультрафиолетовой области при 267 - 276 нм, в качестве препарата, оказывающего воздействие на функциональную активность клеток и клеточных структур.
2. Полисахарид по п. 1, отличающийся тем, что он выделен из биомассы Ungernia victoris.
3. Полисахарид по п.1, отличающийся тем, что выделен из каллусной ткани растений рода Ungernia.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95101449A RU2098114C1 (ru) | 1995-02-03 | 1995-02-03 | Препарат, воздействующий на функциональную активность клеток эукариот и прокариот |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95101449A RU2098114C1 (ru) | 1995-02-03 | 1995-02-03 | Препарат, воздействующий на функциональную активность клеток эукариот и прокариот |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU95101449A RU95101449A (ru) | 1997-02-27 |
| RU2098114C1 true RU2098114C1 (ru) | 1997-12-10 |
Family
ID=20164454
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU95101449A RU2098114C1 (ru) | 1995-02-03 | 1995-02-03 | Препарат, воздействующий на функциональную активность клеток эукариот и прокариот |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2098114C1 (ru) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2151600C1 (ru) * | 1999-10-20 | 2000-06-27 | ЗАО НПФ "Гемма-Б" | Биологически активный протеогликан растительного происхождения и способ его получения |
-
1995
- 1995-02-03 RU RU95101449A patent/RU2098114C1/ru active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU95101449A (ru) | 1997-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Alsberg et al. | Contributions to the study of maize deterioration: biochemical and toxicological investigations of Penicillium puberulum and Penicillium stoloniferum | |
| AU2004276123B2 (en) | Fermentation and culture method, fermented plant extract, fermented plant extract powder and composition containing the fermented plant extract | |
| RU2040932C1 (ru) | Препарат, влияющий на тканевой обмен и применение штамма гриба fusarium sambucinum fuckel var ossicolum (berk.et curf) bilai для его получения | |
| Gizaw et al. | Phytochemical screening and in vitro antifungal activity of selected medicinal plants against Candida albicans and Aspergillus niger in West Shewa Zone, Ethiopia | |
| Riker et al. | Atypical and pathological multiplication of cells approached through studies on crown gall | |
| US6896907B2 (en) | Use of bioactive fraction from cow urine distillate (‘go-mutra’) as a bio-enhancer of anti-infective, anti-cancer agents and nutrients | |
| Kusuda et al. | Studies on the pathogenesis of streptococcal infection in cultured yellowtails Seriola spp.: the fate of Streptococcus sp. bacteria after inoculation | |
| RU2098114C1 (ru) | Препарат, воздействующий на функциональную активность клеток эукариот и прокариот | |
| CN1187059C (zh) | 刺激黑色素合成的组合物及其制备方法 | |
| György | The water-soluble vitamins | |
| DE3118148A1 (de) | Antiallergisches praeparat und verfahren zu seiner herstellung | |
| Siben et al. | Studying efficiency of the method of treating nematodoses in sheep | |
| KR100624101B1 (ko) | 노루궁뎅이 버섯의 추출물을 포함하는 알코올 분해 촉진용조성물 | |
| Iyengar et al. | Plumbago zeylanica L.(Chitrak) a gastrointestinal flora normaliser | |
| KR20150073438A (ko) | 미생물을 이용한 단삼 발효산물을 제조하는 방법 | |
| RU2698201C1 (ru) | Разработка противогрибковой мази на основе сальвина | |
| JP2819041B2 (ja) | アマチャ由来抗変異原性作用剤 | |
| JP2004099613A (ja) | 自己免疫疾患治療用ガノデルマルシダム胞子 | |
| RU2432957C2 (ru) | Способ получения средства, обладающего гастрозащитной активностью | |
| AU2005237162B2 (en) | Pharmaceutical composition containing cow urine distillate and an antibiotic | |
| WO1995020650A1 (fr) | Souche de trichoderma harzianum rifai, procede d'obtention de l-lysine-alpha-oxidase en tant qu'inhibiteur d'activite virale et bacterienne, immunomodulateur et agent de cicatrisation de la peau | |
| EP0078859B1 (en) | An antianaemic agent and a process for producing the same | |
| Jiyil et al. | Antimicrobial Activity of Methanolic, Aqueous and Partially Purified Protein of Young and Matured Leaves of Guiera senegalensis (Moshi Medicine) | |
| Rawa’a et al. | The Effect of Alkaloid Extract of Teucrium Polium L. Against Some Pathogenic Bacteria of Urinary Tracts and on Pyelonephritis Induced in Rats | |
| Williams | Water-soluble vitamins |