RU2083666C1 - Method of preparing the dry bacterial preparation - Google Patents
Method of preparing the dry bacterial preparation Download PDFInfo
- Publication number
- RU2083666C1 RU2083666C1 RU95113405A RU95113405A RU2083666C1 RU 2083666 C1 RU2083666 C1 RU 2083666C1 RU 95113405 A RU95113405 A RU 95113405A RU 95113405 A RU95113405 A RU 95113405A RU 2083666 C1 RU2083666 C1 RU 2083666C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bifidobacteria
- biomass
- milk
- acidophilus
- strains
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, микробиологической и пищевой промышленности и может быть использовано для производства сухого препарата для нормализации микрофлоры кишечника у детей и взрослых, профилактики острых желудочно-кишечных заболеваний, для повышения иммунитета организма, а также в качестве добавки к питанию. The invention relates to medicine, the microbiological and food industries and can be used to produce a dry preparation for normalizing the intestinal microflora in children and adults, for the prevention of acute gastrointestinal diseases, for increasing the body's immunity, and also as an additive to food.
Преимущества сухих бактериальных препаратов по сравнению с кисломолочными продуктами заключается в более длительном сроке их хранения, удобстве транспортирования и применения. The advantages of dry bacterial preparations in comparison with fermented milk products is a longer shelf life, ease of transportation and use.
Известен способ получения биопрепарата, содержащего живые клетки консорциума ацидофильных культур Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6007 (АС-1) и сухого микробного полисахарида, привнесенного биомассой кефирных грибков, используемой в качестве защитной среды при сублимационной сушке биомассы консорциума. A known method of producing a biological product containing live cells of an acidophilic culture consortium of Lactobacillus acidophilus VKPM B-6007 (AC-1) and a dry microbial polysaccharide introduced by kefir fungus biomass, used as a protective environment for freeze-drying of a consortium biomass.
В качестве накопительной питательной среды для наращивания биомассы консорциума L. acidophilus АС-1 используют обезжиренное молоко с содержанием сухих веществ 16-18 мас. и лимоннокислый натрий в количестве 0,6-0,8 мас. смесь стерилизуют при температуре 112oC (0,5 ати) в течение 7-10 мин и охлаждают до 37oC. Заквашивают закваской, приготовленной на консорциуме L. acidophilus АС-1, перемешивают, сквашивают в течение 5-6 ч до кислотности 60-80oT, смешивают с прогретой биомассой кефирных грибков и сушат сублимационной сушкой (Ru, патент N 2001580, кл. C 23 C 9/12, C 12 N 1/20, опубл. 1993).Skim milk with a solids content of 16-18 wt.% Is used as a storage medium for increasing the biomass of the consortium L. acidophilus AC-1. and sodium citrate in an amount of 0.6-0.8 wt. the mixture is sterilized at a temperature of 112 o C (0.5 ati) for 7-10 minutes and cooled to 37 o C. Fermented with a starter prepared in a consortium of L. acidophilus AC-1, mixed, fermented for 5-6 hours to acidity 60-80 o T, mixed with warmed biomass of kefir fungi and freeze-dried (Ru, patent N 2001580, class C 23 C 9/12, C 12
К недостаткам данного способа получения биопрепарата относится то, что предлагается только одна питательная среда для наращивания биомассы; используется один вид бактерий (представителей нормальной микрофлоры кишечника); не проводится корректировка pH перед сублимационной сушкой, что отрицательно сказывается на выживаемости бактерий. The disadvantages of this method of obtaining a biological product include the fact that it offers only one nutrient medium for increasing biomass; one type of bacteria is used (representatives of normal intestinal microflora); pH adjustment is not performed before freeze-drying, which negatively affects bacterial survival.
Наиболее близким к предложенному по достигаемому техническому результату является способ получения биопрепарата "Бифацид", состоящего из живых клеток L.acidophilus АТ и Bifidobac adolescentis В-1, предназначенного для непосредственного употребления или в качестве добавки в питание для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний, дисбактериоза кишечника. Closest to the proposed technical result achieved is a method of obtaining a biological product "Bifacid", consisting of living cells of L. acidophilus AT and Bifidobac adolescentis B-1, intended for direct use or as an additive in food for the prevention and treatment of gastrointestinal diseases, intestinal dysbiosis.
Способ предусматривает приготовление питательной среды, стерилизацию среды, охлаждение до температуры термостатирования, заквашивание и сквашивание, смешивание полученных биомасс с защитной средой, розлив во флаконы или лотки и сублимационную сушку (ТУ 10-02-02-789-92 на биопрепарат "Бифацид". Госстандарт N 2862 от 10.02.92). The method involves preparing a nutrient medium, sterilizing the medium, cooling to a temperature of thermostating, fermenting and ripening, mixing the obtained biomass with a protective medium, pouring it into bottles or trays and freeze-drying (TU 10-02-02-789-92 for the biological product "Bifacid". Gosstandart N 2862 from 02.10.92).
К недостаткам способа можно отнести то, что для наращивания биомасс исходных культур используют среды, традиционные для каждого из видов. Так, для выращивания бифидобактерий готовят кукурузно-лактозную среду, а для ацидофильных палочек стерильное обезжиренное молоко. Причем через установленные сроки производственно-ценные свойства штаммов требуют проверки. При получении биопрепарата применяют по одному штамму ацидофильных бактерий и бифидобактерий. The disadvantages of the method include the fact that to build up the biomass of the original cultures, mediums traditional for each species are used. So, for the cultivation of bifidobacteria, a corn-lactose medium is prepared, and for acidophilic sticks, sterile skim milk. Moreover, after a specified time, the production-valuable properties of the strains require verification. Upon receipt of the biological product, one strain of acidophilic bacteria and bifidobacteria is used.
Предложенный способ получения сухого бактериального препарата заключается в том, что при получении биомассы бактерий из молочнокислых бактерий используют штаммы Lactobacillus acidophilus АТ-41, АТ-44, АГ-7, или сочетание одного или двух штаммов L.acidophilus с 1-2-мя дополнительными штаммами бифидобактерий видов Bifidobacterium longum и Bifidobacterium bifidum, обладающих аналогичными свойствами; для наращивания биомасс как ацидофильных палочек, так и бифидобактерий используют универсальную питательную среду, содержащую в равных количествах молочную сыворотку и гидролизованное молоко, натрий лимоннокислый, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий фосфорнокислый двузамещенный, сульфат марганца, α-цистин и воду дистиллированную, pH среды 7,1-7,3 или смесь обезжиренного молока с содержанием сухих веществ 14-16 мас. с 0,75 мас. лимоннокислого натрия для ацидофильных палочек и ту же смесь, но дополнительно содержащую 5 мас. гидролизованного молока для наращивания биомассы бифидобактерий. The proposed method for producing a dry bacterial preparation is that when obtaining bacterial biomass from lactic acid bacteria, Lactobacillus acidophilus AT-41, AT-44, AG-7 strains, or a combination of one or two L.acidophilus strains with 1-2 additional strains of bifidobacteria of the species Bifidobacterium longum and Bifidobacterium bifidum having similar properties; To build biomasses of both acidophilic bacilli and bifidobacteria, a universal nutrient medium is used, containing equal amounts of whey and hydrolyzed milk, sodium citrate, monosubstituted potassium phosphate, disubstituted sodium phosphate, manganese phosphate, pH 7-cystine, distilled water and 1-7.3 or a mixture of skim milk with a solids content of 14-16 wt. with 0.75 wt. sodium citrate for acidophilus sticks and the same mixture, but additionally containing 5 wt. hydrolyzed milk to increase the biomass of bifidobacteria.
Для наращивания биомассы бифидобактерий рекомендуется использовать обезжиренное молоко с добавлением 5 мас. гидролизованного молока, но в этом случае для проведения сублимационного замораживания потребуется введение защитной среды. To increase the biomass of bifidobacteria, it is recommended to use skim milk with the addition of 5 wt. hydrolyzed milk, but in this case, the introduction of a freezing medium will require the introduction of a protective environment.
Наличие последней потребуется в случае наращивания биомассы обеих культур на универсальной питательной среде, содержащей в качестве основы смесь молочной сыворотки и гидролизованного молока. The presence of the latter will be required if the biomass of both crops is increased on a universal nutrient medium containing, as a basis, a mixture of whey and hydrolyzed milk.
Использование в качестве питательной среды стерильного обезжиренного молока с массовой долей сухих веществ 14-16% с лимоннокислым натрием и гидролизованным молоком позволяет улучшить качество и увеличить срок хранения получаемого биопрепарата за счет использования повышенного содержания белков молока в качестве защитного фактора для клеток бифидобактерий от воздействия температурных режимов сублимационной сушки. The use of sterile skim milk with a mass fraction of solids of 14-16% with sodium citrate and hydrolyzed milk as a nutrient medium allows to improve the quality and increase the shelf life of the resulting biological product by using an increased content of milk proteins as a protective factor for bifidobacteria cells from the influence of temperature conditions freeze-drying.
Молочная сыворотка (подсырная или творожная, можно использовать сухую) является источником лактозы для развития ацидофильных бактерий. Whey (cheese or cottage cheese, you can use dry) is a source of lactose for the development of acidophilic bacteria.
Раздельное культивирование ведут при температуре (37±1)oC до достижения кислотности 60-70oT и жизнеспособных клеток в 1 см3 109-1013 каждой культуры, смешивают накопленную биомассу культурацидофильной палочки и бифидобактерий в соотношении 1:1, проводят коррекцию pH 5%-ным раствором аммиака до 6,0-6,4, охлаждают до температуры (5±3)oC и лиофильно высушивают разлитый препарат. Хранят препарат в течение одного года при температуре 2-8oC.Separate cultivation is carried out at a temperature of (37 ± 1) o C until reaching an acidity of 60-70 o T and viable cells in 1 cm 3 10 9 -10 13 of each culture, the accumulated biomass of the culture of acidophilus bacillus and bifidobacteria in a ratio of 1: 1 is mixed, correction is carried out
Применение предлагаемого способа позволяет получить препарат "Бифацид", обладающий комплексом свойств, присущих как ацидофильным бактериям, так и бифидобактериям. The application of the proposed method allows to obtain the drug "Bifacid" with a complex of properties inherent in both acidophilic bacteria and bifidobacteria.
Используемые для получения препарата специально подобранные штаммы обладают высокой антагонистической активностью, характеризующейся подавлением развития патогенных и условнопатогенных микроорганизмов, что способствует восстановлению бифидобактерий и лактобактерий в кишечнике; штаммы обладают устойчивостью к фенолу, желчи, поваренной соли и антибиотикам, что характеризует их способность выживать и развиваться в кишечнике людей на фоне антибиотикотерапии. Specially selected strains used to obtain the drug have high antagonistic activity, characterized by a suppression of the development of pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms, which helps to restore bifidobacteria and lactobacilli in the intestine; strains are resistant to phenol, bile, sodium chloride and antibiotics, which characterizes their ability to survive and develop in the intestines of people against the background of antibiotic therapy.
Одновременное введение в препарат штаммов Lactobacillus и Bifidobacterium, вегетирующих в разных зонах кишечника, отличающихся антагонистической активностью и устойчивостью к антибиотикам позволяет усилить лечебную эффективность препарата. Штаммы Bifidobacterium выделены из фецес здорового ребенка, Lactobacillus из фецес здорового человека. Селекцию отобранных штаммов проводили по физиолого-биохимическим свойствам, обусловливающих их лечебно-профилактический эффект:
активности и энергии кислотообразования;
антагонистической активности по отношению к кишечным палочкам, шигеллам Зонне и Флекснера, коагулазоположительным стафилококкам, палочкам протея и др. гибель которых составляла 90-10% при совместном культивировании со штаммами в течение 72 ч;
устойчивости к антибиотикам, широко используемым в медицине (оксациллину, мономицину, канамицину, гентамицину, полимиксину, стрептомицину, левомицитину и нистатину);
устойчивости к 0,4-0,6% фенола в молоке;
устойчивости к 2-4% aC в молоке;
устойчивости к 20-30% желчи в молоке;
способности к росту при pH 8,3;
урожайности.The simultaneous introduction of the drug strains of Lactobacillus and Bifidobacterium vegetating in different areas of the intestine, characterized by antagonistic activity and resistance to antibiotics, can enhance the therapeutic effectiveness of the drug. Bifidobacterium strains isolated from feces of a healthy child, Lactobacillus from feces of a healthy person. The selection of the selected strains was carried out according to the physiological and biochemical properties that determine their therapeutic and prophylactic effect:
activity and energy of acid formation;
antagonistic activity against Escherichia coli, Shigella Sonne and Flexner, coagulase-positive staphylococci, Proteus bacilli and other deaths of which was 90-10% when co-cultured with strains for 72 hours;
resistance to antibiotics widely used in medicine (oxacillin, monomycin, kanamycin, gentamicin, polymyxin, streptomycin, levomycetin and nystatin);
resistance to 0.4-0.6% phenol in milk;
resistance to 2-4% aC in milk;
resistance to 20-30% of bile in milk;
growth ability at pH 8.3;
productivity.
Устойчивость штаммов и препарата, получаемого на их основе, представлена в табл. 1. The stability of the strains and the drug obtained on their basis are presented in table. one.
Устойчивость к антибиотикам представлена в табл. 2. Antibiotic resistance is presented in table. 2.
Максимальные дозы антибиотиков в крови, при которых происходит рост штаммов и их комбинации в препарате "Бифацид"
Пример 1. 4 дм3 обезжиренного молока с массовой долей сухих веществ 16% и с 0,75% лимоннокислого натрия разливают по 400 см3 во флаконы или колбы, при этом в 5 флаконов дополнительно вносят 5% гидролизованного молока, стерилизуют при температуре 112oC в течение 12 мин, охлаждают до температуры 38oC. В 5 флаконов со стерильным обезжиренным молоком с массовой долей сухих веществ 16% и 0,75% лимоннокислого натрия вносят 1% чистой культуры ацидофильных бактерий L. acidophilus AT-41, а в 5 флаконов со стерильным обезжиренным молоком с массовой долей сухих веществ 16% 0,75% лимоннокислого натрия и 5% гидролизованного молока вносят 5% чистой культуры B.adolescentis B-1 и культивируют при температуре 37oC; ацидофильную культуру выращивают в течение 8 ч, а бифидобактерии 14 ч до образования сгустка с кислотностью 65oT. В стерильной емкости смешивают полученную биомассу ацидофильных бактерий и бифидобактерий в соотношении 1:1, тщательно перемешивают, корректируют pH 5%-ным раствором аммиака до 6,2 и охлаждают до температуры 5oC. Полученную смесь тщательно перемешивают и разливают в стерильные флаконы или лотки, которые помещают в сублимационную установку. Замораживание проводят при -30oC в течение 4 ч, сушку проводят в течение 18 ч при температуре досушивания препарата не выше 30oC. Флаконы стерильно укупоривают, а массу, высушенную на лотках, расфасовывают в пакеты. Хранят готовый препарат при температуре не выше 6oC в течение 12 месяцев. В дозе препарата должно быть не менее 108 живых клеток ацидофильных бактерий и бифидобактерий.The maximum doses of antibiotics in the blood at which the strains grow and their combination in the drug "Bifacid"
Example 1. 4 dm 3 skim milk with a mass fraction of solids of 16% and 0.75% sodium citrate are poured into 400 cm 3 into bottles or flasks, while 5 bottles of additional hydrolyzed milk are added to 5 bottles, sterilized at a temperature of 112 o C for 12 min, cooled to a temperature of 38 o C. In 5 bottles with sterile skim milk with a mass fraction of solids of 16% and 0.75% sodium citrate make 1% of a pure culture of acidophilic bacteria L. acidophilus AT-41, and 5 vials with sterile skim milk with a mass fraction of solids of 16% 0.75% onnokislogo sodium and 5% hydrolyzed milk introduce 5% of a pure culture B.adolescentis B-1 and cultured at 37 o C; acidophilus culture is grown for 8 hours, and bifidobacteria 14 hours before the formation of a clot with an acidity of 65 o T. In a sterile container mix the obtained biomass of acidophilus bacteria and bifidobacteria in a ratio of 1: 1, mix thoroughly, adjust the pH with a 5% ammonia solution to 6 , 2 and cooled to a temperature of 5 o C. The resulting mixture is thoroughly mixed and poured into sterile vials or trays, which are placed in a sublimation unit. Freezing is carried out at -30 o C for 4 hours, drying is carried out for 18 hours at a drying temperature of the drug not higher than 30 o C. The vials are sterilely sealed, and the mass dried on trays is packaged. Store the finished product at a temperature not exceeding 6 o C for 12 months. The dose of the drug should be at least 10 8 living cells of acidophilic bacteria and bifidobacteria.
Пример 2. 4 дм3 обезжиренного молока разливают в 10 флаконов или колб по 400 см3 в каждой, при этом в 5 флаконов дополнительно вносят 5% гидролизованного молока, стерилизуют при температуре 112oC в течение 15 мин, охлаждают до 38oC. В 5 флаконов со стерильным обезжиренным молоком вносят 1% чистой культуры ацидофильных палочек L. acidophilus AT-44, а в 5 флаконов со стерильным обезжиренным молоком и 5% гидролизованного молока вносят 5% чистой культуры бифидобактерий B. adolescentis B-1 и сквашивают при температуре 37oC; ацидофильную культуру выращивают в течение 9 ч, а бифидобактерии 16 ч до образования сгустка с кислотностью 60oT. В стерильной емкости смешивают полученную биомассу ацидофильных бактерий и бифидобактерий в соотношении 1: 1, тщательно перемешивают, корректируют pH 5%-ным раствором аммиака до pH 6,2 и охлаждают до температуры 8oC. Затем полученный комплексный препарат смешивают в соотношении 6: 4 с защитной средой. В качестве защитной среды используют сахарозо-желатиновую среду. Полученную смесь тщательно перемешивают и разливают в стерильные флаконы или лотки, которые помещают в сублимационную установку. Замораживание проводят при -30oC в течение 4 ч, сушку проводят в течение 20 ч при температуре досушивания препарата не более 30oC. Флаконы стерильно укупоривают, а массу, высушенную на лотках, расфасовывают в пакеты. Хранят готовый препарат при температуре 6oC. В дозе препарата должно быть не менее 108 живых клеток ацидофильных бактерий и бифидобактерий.Example 2. 4 dm 3 skim milk is poured into 10 bottles or flasks of 400 cm 3 each, while 5 bottles of hydrolyzed milk are additionally added to 5 bottles, sterilized at a temperature of 112 o C for 15 min, cooled to 38 o C. In 5 vials with sterile skim milk, 1% of the pure culture of acidophilus bacilli L. acidophilus AT-44 is added, and in 5 vials of sterile skim milk and 5% of hydrolyzed milk, 5% of the pure culture of bifidobacteria B. adolescentis B-1 is added and fermented at a temperature 37 o C; acidophilus culture is grown for 9 hours, and bifidobacteria 16 hours before the formation of a clot with an acidity of 60 o T. In a sterile container mix the obtained biomass of acidophilus bacteria and bifidobacteria in a ratio of 1: 1, mix thoroughly, adjust the pH with a 5% ammonia solution to pH 6.2 and cooled to a temperature of 8 o C. Then the resulting complex preparation is mixed in a ratio of 6: 4 with a protective environment. As a protective medium using sucrose-gelatin medium. The resulting mixture is thoroughly mixed and poured into sterile vials or trays, which are placed in a sublimation unit. Freezing is carried out at -30 o C for 4 hours, drying is carried out for 20 hours at a drying temperature of the preparation of not more than 30 o C. The bottles are sterilized and the mass dried on trays is packaged. Store the finished product at a temperature of 6 o C. The dose of the drug should be at least 10 8 living cells of acidophilic bacteria and bifidobacteria.
Пример 3. В ферментеры вносят универсальную питательную среду, стерилизуют, охлаждают до температуры 40oC. В один ферментер вносят 8% чистой культуры бифидобактерий (B.adolescentis B-1), в другой ферментер вносят 3% чистой культуры ацидофильных бактерий (L.acidophilus AT-41). Культивирование ведут при температуре 37oC с периодической коррекцией pH до 5,8, после чего на бактофуге получают биомассу с содержанием 109-1012 живых клеток в 1 г или 1 см3. Полученную биомассу бифидобактерий и ацидофильных бактерий смешивают в соотношении 1:1, корректируют pH до 6,0, после чего смешивают с защитной средой (сахарозо-желатиновая), разливают во флаконы или на лотки и сушат методом сублимации. После сушки флаконы стерильно укупоривают; массу, высушенную на лотках, расфасовывают в пакеты. Хранят готовый препарат при температуре 6oC. В дозе препарата должно быть не менее 108 живых клеток ацидофильных бактерий и 108 живых клеток бифидобактерий.Example 3. A universal nutrient medium is added to the fermenters, sterilized, cooled to a temperature of 40 o C. 8% of a pure culture of bifidobacteria (B. adolescentis B-1) is added to one fermenter, 3% of a pure culture of acidophilic bacteria (L. acidophilus AT-41). Cultivation is carried out at a temperature of 37 o C with periodic pH adjustment to 5.8, after which a biomass containing 10 9 -10 12 living cells in 1 g or 1 cm 3 is obtained in the bactofuge. The resulting biomass of bifidobacteria and acidophilus bacteria is mixed in a 1: 1 ratio, adjusted to pH 6.0, then mixed with a protective medium (sucrose-gelatin), poured into bottles or trays and dried by sublimation. After drying, the bottles are sealed sterilely; the mass dried on the trays, packaged in bags. Store the finished product at a temperature of 6 o C. The dose of the drug should be at least 10 8 live cells of acidophilic bacteria and 10 8 live cells of bifidobacteria.
Пример 4. 4,8 дм3 обезжиренного молока с массовой долей сухих веществ 14% и с 0,75% лимоннокислого натрия разливают по 400 см3 во флаконы или колбы, при этом в 6 флаконов дополнительно вносят 5% гидролизованного молока, стерилизуют при температуре 112oC в течение 10 мин, охлаждают до температуры 38oC. Во флаконы со стерильным обезжиренным молоком с массовой долей сухих веществ 14% и с 0,75% лимоннокислого натрия вносят по 1% чистых культур ацидофильных палочек: в 2 флакона штамм L.acidophilus AT-41; в 2 флакона L. acidophilus AT-44; в 2 флакона - L.acidophilus АГ-7. Во флаконы со стерильным обезжиренным молоком с массовой долей сухих веществ 14% с 0,75% лимоннокислого натрия и 5% гидролизованного молока вносят по 5% чистых культур бифидобактерий: в 2 флакона штамм B.longum B-1; в 2 флакона штамм B. bifidum ВКБ-21; в 2 флакона штамм B. bifidum ГСБ-15. После чего культивирование ведут при температуре 37oC; ацидофильные культуры выращивают в течение 9 ч, а бифидобактерии 16 ч. до образования сгустка с кислотностью 65oT. В стерильной емкости смешивают полученную биомассу ацидофильных бактерий и бифидобактерий в соотношении 1:1, тщательно перемешивают, корректируют pH 5% -ным раствором аммиака до 6,0 и охлаждают до температуры 6oC. Полученную смесь тщательно перемешивают и разливают в стерильные флаконы или на лотки, которые помещают в сублимационную установку. Замораживание проводят при -35oC в течение 4 ч, сушку проводят в течение 18 ч при температуре досушивания препарата не выше 30oC. Флаконы стерильно укупоривают, а массу, высушенную на лотках, расфасовывают в пакеты. Хранят готовый препарат при температуре 6oC в течение 12 мес. В дозе препарата должно быть не менее 108 живых клеток ацидофильных бактерий и бифидобактерий.Example 4. 4.8 dm 3 skim milk with a mass fraction of solids of 14% and 0.75% sodium citrate are poured into 400 cm 3 into bottles or flasks, with 6 additional bottles containing 5% hydrolyzed milk being sterilized at a temperature 112 o C for 10 min, cooled to a temperature of 38 o C. In vials with sterile skim milk with a mass fraction of solids of 14% and 0.75% sodium citrate, 1% of pure cultures of acidophilic sticks are added: in 2 bottles strain L .acidophilus AT-41; in 2 bottles of L. acidophilus AT-44; in 2 bottles - L. acidophilus AG-7. In vials with sterile skim milk with a mass fraction of solids of 14% with 0.75% sodium citrate and 5% hydrolyzed milk, 5% of pure cultures of bifidobacteria are added: in 2 bottles B.longum B-1 strain; in 2 bottles of strain B. bifidum VKB-21; in 2 bottles of strain B. bifidum GSB-15. After which the cultivation is carried out at a temperature of 37 o C; acidophilic cultures are grown for 9 hours, and bifidobacteria 16 hours before the formation of a clot with an acidity of 65 o T. In a sterile container, the obtained biomass of acidophilic bacteria and bifidobacteria is mixed in a ratio of 1: 1, mix thoroughly, and adjust the pH with a 5% ammonia solution to 6.0 and cooled to a temperature of 6 o C. The resulting mixture is thoroughly mixed and poured into sterile bottles or trays, which are placed in a sublimation unit. Freezing is carried out at -35 o C for 4 hours, drying is carried out for 18 hours at a drying temperature of the preparation not higher than 30 o C. The bottles are sterilized and the mass dried on trays is packaged. Store the finished product at a temperature of 6 o C for 12 months. The dose of the drug should be at least 10 8 living cells of acidophilic bacteria and bifidobacteria.
Пример 5. В ферментеры вносят универсальную питательную среду, стерилизуют, охлаждают до температуры 38oC. В один ферментер вносят 3% штаммов L. acidophilus АТ-41; во второй ферментер 3% штамма L. acidophilus АТ-44; в третий ферментер вносят 5% чистой культуры B. adolescentis В-1, а в четвертый 5% B. longum ВГБ-21. Культивирование ведут при температуре 37oC с периодической коррекцией pH до 5,6. После чего на бактофуге получают биомассу с содержанием 1010-1012 живых клеток в 1 г или 1 см3. Полученную биомассу бифидобактерий и ацидофильных бактерий смешивают в равных количествах, корректируют pH до 6,0, затем смешивают с защитной средой (сахарозо-желатиновая), разливают во флаконы или на лотки и сушат методом сублимации. После сушки флаконы стерильно укупоривают; массу, высушенную на лотках, расфасовывают в пакеты. Хранят готовый препарат при температуре 6oC. В дозе препарата должно быть не мене 108 живых клеток ацидофильных бактерий и 108 живых клеток бифидобактерий.Example 5. A universal nutrient medium is introduced into the fermenters, sterilized, cooled to a temperature of 38 ° C. 3% of L. acidophilus AT-41 strains are added to one fermenter; in the
Биопрепарат "Бифацид" прошел клиническую апробацию в рамках "Программы государственных испытаний биопрепарата "Бифацид" на взрослых и детях", утвержденной заместителем председателя федеральной комиссии по МИБП и дез. средствам. Результаты апробации показали выраженный клинический и терапевтический эффект препарата, при использовании его для лечения желудочно-кишечных инфекций, коррекции микробиоценоза кишечника и др. Bifacid biological product has been clinically tested within the framework of the "Bifacid" Biological Product Testing Program for Adults and Children, approved by the Deputy Chairman of the Federal Commission on MIBP and Des. means. Testing results showed a pronounced clinical and therapeutic effect of the drug, when used for the treatment of gastrointestinal infections, correction of intestinal microbiocenosis, etc.
На основании положительных результатов клинической апробации биопрепарата "Бифацид" разработана инструкция по его применению в медицинской практике. Фармакопейным комитетом предложено разработать и утвердить фармакопейную сталью на биопрепарат "Бифацид" с целью широкого внедрения его в медицинскую практику. Based on the positive results of clinical testing of the biopreparation "Bifacid", instructions for its use in medical practice have been developed. The Pharmacopoeia Committee proposed to develop and approve the pharmacopoeia steel for the biological product "Bifacid" in order to widely introduce it into medical practice.
Claims (1)
Натрий лимоннокислый 5,8 6,2
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 2,3 2,7
Калий фосфорнокислый однозамещенный 1,8 2,2
Сульфат магния 0,12 0,15
α - Цистин 0,12 0,2
а также, мл/л:
Сыворотка молочная 240 260
Молоко гидролизованное 240 260
Вода дистиллированная Остальное
pН смешанной биомассы устанавливают равным 6,0 6,4 и охлаждают ее перед сублимационным высушиванием до 2 8oС.A method of obtaining a bacterial preparation "Bifacid", which involves preparing a nutrient medium, heat treatment it, cooling to incubation temperature, introducing lactic acid cultures of Lactobacillus acidophilus AT and Bifidobacterium B-1, separate cultivation with the accumulation of bacterial biomass, mixing them in equal amounts and freeze-drying characterized in that of lactic acid bacteria using strains of Lactibacillus acidophilus AT-41, AT-44, AG-7, or a combination of one or two strains of Lactobacillus acidophilus with 1 2-nd additional GOVERNMENTAL strains bifidobacteria species Bifidobacterium longum and Bifidobacterum bifidum, having similar properties, for the accumulation of biomass acidophilus cultures, a mixture of skim milk with a solids content of 14 16 wt. with 0.75 wt. sodium citrate, for the accumulation of biomass of bifidobacteria using a mixture of skim milk with a solids content of 14 to 16 wt. with 0.75 wt. sodium citrate and 5 wt. hydrolyzed milk, or for the accumulation of biomass of acidophilic cultures and bifidobacteria, a nutrient medium containing components, g / l:
Sodium citrate 5.8 6.2
Disubstituted sodium phosphate 2.3 2.7
Potassium phosphate monosubstituted 1.8 2.2
Magnesium Sulfate 0.12 0.15
α - Cystine 0.12 0.2
as well as ml / l:
Milk whey 240 260
Hydrolyzed milk 240 260
Distilled water
pH mixed biomass set equal to 6.0 6.4 and cool it before freeze-drying to 2 8 o C.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95113405A RU2083666C1 (en) | 1995-07-27 | 1995-07-27 | Method of preparing the dry bacterial preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95113405A RU2083666C1 (en) | 1995-07-27 | 1995-07-27 | Method of preparing the dry bacterial preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2083666C1 true RU2083666C1 (en) | 1997-07-10 |
| RU95113405A RU95113405A (en) | 1997-07-20 |
Family
ID=20170738
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU95113405A RU2083666C1 (en) | 1995-07-27 | 1995-07-27 | Method of preparing the dry bacterial preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2083666C1 (en) |
-
1995
- 1995-07-27 RU RU95113405A patent/RU2083666C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Авторское свидетельство РФ N 2001580, кл. A 23 C 9/12, 1993. 2. ТУ Ю-02-02-789-92 на биопрепарат "Бифацид" - Госстандарт N 2862 от 10.02.92. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101927859B1 (en) | Method for improving the stability and coating efficiency of probiotics using ultrasonic wave after freeze-drying and food composition containing freeze-dried powder of probiotics prepared thereby as effective component | |
| KR20180070485A (en) | lactic acid bacteria improved stability and preparing method thereof | |
| RU2314337C1 (en) | Strain bifidobacterium adolescentis dba-3 used for preparing fermented-milk, fermented and nonfermented foodstuffs, hygienic and cosmetic agents, biologically active supplements and bacterial preparations | |
| RU2326938C2 (en) | Consortium of lactobacteria strains and method of receiving preparation on its basis, which is used as dietary supplement or ferment for production of sour milk products | |
| RU2268931C1 (en) | STRAIN Bifidobacterium bifidum 79-37 USED FOR PREPARING FERMENTED-MILK, FERMENTED AND NONFERMENTED FOODSTUFFS, FERMENTS, HYGIENIC AND COSMETIC AGENTS, BIOLOGICALLY ACTIVE SUPPLEMENTS AND BACTERIAL PREPARATIONS | |
| RU2441907C1 (en) | Method for preparation of therapeutic product out of living microbial strains of lactic bacteria and bifidus bacteria lb-complex l | |
| RU2317326C1 (en) | Strain bifidobacterium longum po-6 used for preparing fermented-milk, fermented and nonfermented foodstuffs, ferments, hygienic and cosmetic agents, biologically active supplements and bacterial preparations | |
| US20050215471A1 (en) | Compositions of bacteria and alpha-lactalbumin and uses thereof | |
| RU2083666C1 (en) | Method of preparing the dry bacterial preparation | |
| KR20180070484A (en) | lactic acid bacteria improved stability and preparing method thereof | |
| US5077063A (en) | Process for preparing lactic-acid products | |
| RU2109054C1 (en) | Consortium of bifidobacterium bifidum 791, b longum b379m, b breve 79-119, b infantis 73-15, b adolescentis g7513 for preparing lactic acid nonfermented foodstuffs and bacterial preparations | |
| RU2314342C1 (en) | Strain bifidobacterium bifidum 79-31 used for preparing fermented-milk, fermented and nonfermented foodstuffs, ferments, hygienic and cosmetic agents, biologically active supplements and bacterial preparations | |
| RU2376366C2 (en) | Lactis acid bacillus strains syndicate and production method of biologically active additive or leaven for production of fermented milk products based on this syndicate | |
| RU2225438C2 (en) | Consortium of microorganisms mbi-4 consisting of bifidobacterium bifidum b-2, bifidobacterium infantis bi-7, bifidobacterium longum bl-5, bifidobacterium adolescentis mc-42 used for preparing fermented-milk foodstuffs | |
| RU2196174C2 (en) | Consortium of bifidobacterium strains for preparing fermented-milk, nonfermented foodstuffs, biologically active supplements and bacterial preparations | |
| RU2366699C2 (en) | Method for making bifidus bacteria biomass | |
| RU2196173C2 (en) | Consortium of bifidobacterium strains for preparing fermented-milk foodstuffs, biologically active supplements and bacterial preparations | |
| RU2216588C1 (en) | Strain bifidobacterium longum ya2 used for preparing fermented-milk, fermented and nonfermented foodstuffs, ferments, hygienic and cosmetic agents, biologically active supplements and bacterial preparations | |
| RU2296797C1 (en) | Bifidum bacterium strain consortium to produce sour-milk, fermented and non-fermented foodstuffs, ferments, bioactive supplements, bacterium preparations, and cosmetic agents | |
| RU2067994C1 (en) | Consortium of lactic acid bacterium lactobacillus acidophilus used for preparing lactic acid products and bacterial preparations, method of preparing dry acidophilic lactic acid bacteria ferment and method of lactic acid product making | |
| RU2460777C1 (en) | Bifidobacterium longum strain used for preparing bifidus products | |
| RU2104706C1 (en) | Method of bifido-containing preparation making | |
| RU2314338C1 (en) | Strain bifidobacterium longum abd-6 used for preparing fermented-milk, fermented and nonfermented foodstuffs, ferments, hygienic and cosmetic agents, biologically active supplements and bacterial preparations | |
| RU2280465C2 (en) | Method for preparing probiotic |