RU2077576C1 - Питательная среда для выделения и культивирования гонококка - Google Patents
Питательная среда для выделения и культивирования гонококка Download PDFInfo
- Publication number
- RU2077576C1 RU2077576C1 RU94031260A RU94031260A RU2077576C1 RU 2077576 C1 RU2077576 C1 RU 2077576C1 RU 94031260 A RU94031260 A RU 94031260A RU 94031260 A RU94031260 A RU 94031260A RU 2077576 C1 RU2077576 C1 RU 2077576C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hydrolyzate
- gonococcus
- medium
- nutrient medium
- sulfate
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Использование: микробиология, диагностика гонореи, питательная среда для выделения и культивирования гонококка. Сущность изобретения: питательная среда содержит в качестве питательной основы панкреатический гидролизат рыбной муки и солянокислотный гидролизат казеина, в качестве стимулятора роста и источника витаминов - автолизат пекарных или пивных дрожжей, стимулятор роста гемофильных микроорганизмов. Среда дополнительно содержит глюкозу, агар микробиологический, полимиксина-В сульфат, линкомицина гидрохлорид и воду дистиллированную. Среда обеспечивает рост гонококка музейных штаммов и из материала от больных гонореей, сохраняя типичную морфологию микроорганизма, что способствует широкому применению в практическом здравоохранении при диагностике и лечении венерических заболеваний. 3 табл.
Description
Изобретение относится к области медицинской микробиологии и может быть использовано при диагностике гонореи.
Ведущими зарубежными фирмами ("Oxoid", "Gibco", "BRL" и др.) выпускаются питательные среды для культивирования гонококка на основе мясных переваров и ферментолизатов с добавлением стерильной нативной крови [1-4]
Из отечественных препаратов известны: питательная среда "Аргинин-агар", диагностическая, сухая, производства НПО "Питательные среды" г. Махачкала [5] которая состоит из следующих компонентов, г: пептон 8,0-12,0; аргинин 0,07-0,3; цистин 0,007-0,03; глутаминовая кислота 1,0-1,8; ЭКД 4,0-7,0; тиамин бромид 0,002-0,007; нитрат железа 0,002-0,01; калий хлористый 0,07-0,2; натрий хлористый 5,0-8,0; хлористый аммоний 0,9-2,0; магний сернокислый 0,4-0,9; глюкоза 4,0-7,0; крахмал 0,5-2,0; трис-буфер 1,0-2,5; агар 13-17,0; бычья сыворотка 153,0-255,0; полимиксина-М сульфат 15000-25000 Ед; линкомицина гидрохлорид 0,001-0,003; вода дистиллированная до 1 л.
Из отечественных препаратов известны: питательная среда "Аргинин-агар", диагностическая, сухая, производства НПО "Питательные среды" г. Махачкала [5] которая состоит из следующих компонентов, г: пептон 8,0-12,0; аргинин 0,07-0,3; цистин 0,007-0,03; глутаминовая кислота 1,0-1,8; ЭКД 4,0-7,0; тиамин бромид 0,002-0,007; нитрат железа 0,002-0,01; калий хлористый 0,07-0,2; натрий хлористый 5,0-8,0; хлористый аммоний 0,9-2,0; магний сернокислый 0,4-0,9; глюкоза 4,0-7,0; крахмал 0,5-2,0; трис-буфер 1,0-2,5; агар 13-17,0; бычья сыворотка 153,0-255,0; полимиксина-М сульфат 15000-25000 Ед; линкомицина гидрохлорид 0,001-0,003; вода дистиллированная до 1 л.
Недостатком этой среды является: низкая чувствительность, нестабильность результатов по интенсивности роста гонококка.
Лиофильновысушенная среда для выделения гонококка (производства НИИ ВСа, г. С.-Петербург) [6] состоящая из основы среды и добавки при следующем соотношении компонентов, г; приведена в таблице 1.
Недостатком этой среды является: нестабильность результатов по интенсивности роста гонококка и чувствительности.
На практике же, в основном, применяются лабораторно приготовленные безасцитные среды из экстрактов свежего мяса кроликов и свежих бычьих сердец с добавлением пептона и 20% сыворотки крови крупного рогатого скота или стерильной нативной крови.
Отсутствие необходимого количества отечественных питательных сред для диагностики гонореи, а также качество их вызывает нарекания со стороны практической службы здравоохранения.
Задачей изобретения является создание сухой питательной среды, обеспечивающей стабильность результатов по интенсивности роста и повышенную чувствительность, не уступающей коммерческим средам для диагностики гонококка, и использовать для ее производства непищевые продукты.
Поставленная задача решается сбалансированностью компонентного состава среды, содержащей питательную белковую основу, автолизат пекарных или пивных дрожжей, агар, хлористый натрий, ингибиторы посторонней микрофлоры линкомицина гидрохлорид и полимиксина-В сульфат, в качестве питательной основы она содержит панкреатический гидролизат рыбной кормовой муки и солянокислотный гидролизат казеина, кроме того она дополнительно содержит стимулятор роста гемофильных микроорганизмов (ферментативный гидролизат черного альбумина), глюкозу, для повышения стабильности результатов при обследовании больных хронической гонореей возможна добавка к среде сыворотки крови крупного рогатого скота (5-10)% при следующем содержании компонентов, г/л:
панкреатический гидролизат рыбной муки 22,0-28,0
кислотный гидролизат казеина 2,8-3,2
автолизат пекарных или пивных дрожжей 0,8-1,2
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 2,0-10,0
глюкоза 9,0-11,0
натрий хлористый 2,9-3,1
агар микробиологический 12,0-15,0
полимиксина-В сульфат 15000-25000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,001-0,003
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Количественное соотношение компонентов питательной среды и ее рН обеспечивают повышенный уровень интенсивности роста гонококка и чувствительности среды.
панкреатический гидролизат рыбной муки 22,0-28,0
кислотный гидролизат казеина 2,8-3,2
автолизат пекарных или пивных дрожжей 0,8-1,2
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 2,0-10,0
глюкоза 9,0-11,0
натрий хлористый 2,9-3,1
агар микробиологический 12,0-15,0
полимиксина-В сульфат 15000-25000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,001-0,003
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Количественное соотношение компонентов питательной среды и ее рН обеспечивают повышенный уровень интенсивности роста гонококка и чувствительности среды.
Питательную среду готовят следующим образом: навески основных ингредиентов вносят в колбу с дистиллированной водой. Среду тщательно перемешивают и, закрыв колбу ватно-марлевой пробкой, стерилизуют при (115-119)oC в течение 30 мин. затем охлаждают до температуры (45-50)oC и стерильно, предварительно растворив в стерильном физ. растворе, вносят навески полимиксина-В сульфата и линкомицина гидрохлорида. Среду перемешивают и разливают в стерильные чашки Петри.
Для биологического контроля питательных сред использовали культуру Neisseria gonorrhoeae музейных штаммов и материал от больных гонореей. Все посевы культивировали при температуре (37+0,5)oC в атмосфере 10% СО2 и повышенной влажности в течение 24-48 час: данные в таблице 1.
Пример 1.
Проверка предлагаемой среды производилась посевом штаммов Neisseria gonorrhoeae и на клиническом материале на питательную среду следующего состава, г:
панкреатический гидролизат рыбной муки 22,0
автолизат пекарных дрожжей 0,8
солянокислотный гидролизат казеина 2,8
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 2,0
глюкоза 9,0
натрий хлористый 2,9
агар микробиологический 12,0
полимиксина-В сульфат 15000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,001
вода дистиллированная до 1 л
рН 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
панкреатический гидролизат рыбной муки 22,0
автолизат пекарных дрожжей 0,8
солянокислотный гидролизат казеина 2,8
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 2,0
глюкоза 9,0
натрий хлористый 2,9
агар микробиологический 12,0
полимиксина-В сульфат 15000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,001
вода дистиллированная до 1 л
рН 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
Пример 2.
Проверка предлагаемой среды производилась посевом штаммов Neisseria gonorrhoeae и на клиническом материале на питательную среду с оптимальным содержанием компонентов следующего состава, г:
панкреатический гидролизат рыбной муки 25,0
автолизат пекарных дрожжей 1,0
солянокислотный гидролизат казеина 3,0
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 5,0
глюкоза 10,0
натрий хлористый 3,0
агар микробиологический 13,0
полимиксина-В сульфат 20000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,002
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
панкреатический гидролизат рыбной муки 25,0
автолизат пекарных дрожжей 1,0
солянокислотный гидролизат казеина 3,0
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 5,0
глюкоза 10,0
натрий хлористый 3,0
агар микробиологический 13,0
полимиксина-В сульфат 20000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,002
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
Пример 3.
Проверка пpедлагаемой среды производилась посевом штаммов Neisseria gonorrhoeae и на клиническом материале на питательную среду с максимальным содержанием компонентов следующего состава, г:
панкреатический гидролизат рыбной муки 28,0
автолизат пекарных дрожжей 1,2
солянокислотный гидролизат казеина 3,2
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 10,0
глюкоза 11,0
натрий хлористый 3,1
агар микробиологический 15,0
полимиксина-В сульфат 25000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,003
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
панкреатический гидролизат рыбной муки 28,0
автолизат пекарных дрожжей 1,2
солянокислотный гидролизат казеина 3,2
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 10,0
глюкоза 11,0
натрий хлористый 3,1
агар микробиологический 15,0
полимиксина-В сульфат 25000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,003
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
Пример 4. Проверка предлагаемой среды производилась посевом штаммов Neisseria gonorrhoeae и на клиническом материале на питательную среду с нарушением количественного соотношения компонентов следующего состава, г:
панкреатический гидролизат рыбной муки 31,0
автолизат пекарных дрожжей 1,4
солянокислотный гидролизат казеина 3,4
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 15,0
глюкоза 13,0
натрий хлористый 3,5
агар микробиологический 20,0
полимиксина-В сульфат 30000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,005
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
панкреатический гидролизат рыбной муки 31,0
автолизат пекарных дрожжей 1,4
солянокислотный гидролизат казеина 3,4
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 15,0
глюкоза 13,0
натрий хлористый 3,5
агар микробиологический 20,0
полимиксина-В сульфат 30000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,005
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
Пример 5.
Проверка предлагаемой среды производилась посевом штаммов Neisseria gonorrhoeae и на клиническом материале на питательную среду с нарушением количественного соотношения компонентов следующего состава, г:
панкреатический гидролизат рыбной муки 18,0
автолизат пекарных дрожжей 0,5
солянокислотный гидролизат казеина 2,5
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 0,5
глюкоза 5,0
натрий хлористый 2,5
агар микробиологический 10,0
полимиксина-В сульфат 10000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,005
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
панкреатический гидролизат рыбной муки 18,0
автолизат пекарных дрожжей 0,5
солянокислотный гидролизат казеина 2,5
стимулятор роста гемофильных микроорганизмов 0,5
глюкоза 5,0
натрий хлористый 2,5
агар микробиологический 10,0
полимиксина-В сульфат 10000 Ед
линкомицина гидрохлорид 0,005
вода дистиллированная до 1 л
pH 7,3+0,2
Учет результатов проводили через 24-48 час культивирования.
В таблице 2 дана сравнительная характеристика роста гонококков из клинического материала и музейных штаммов на предлагаемой и известных средах через 24-48 ч роста.
Морфология колоний и окрашенных мазков на всех испытуемых средах идентична типичная для гонококка.
Из таблицы 2 видно, что предлагаемая среда по интенсивности роста гонококка и чувствительности превосходит коммерческие среды.
Нарушение количественного соотношения компонентов среды ведет к резкому ухудшению микробиологических показателей качества предложенной среды.
Предлагаемая среда позволяет поддерживать жизнеспособность штаммов Nisseria gonorrhoeae (как свежевыделенных от больных, так и музейных) при пассировании в течение 9 месяцев.
В таблице 3 представлены данные жизнеспособности культуры Neisseria gonorrhoeae при культивировании и хранении на плотных средах,
Из таблицы 3 видно, что предлагаемая питательная среда пригодна для диагностических целей при выявлении больных острой и хронической гонореей, а также при получении биомассы Neisseria gonorrhoeae для создания гоновакцин.
Из таблицы 3 видно, что предлагаемая питательная среда пригодна для диагностических целей при выявлении больных острой и хронической гонореей, а также при получении биомассы Neisseria gonorrhoeae для создания гоновакцин.
Источники информации
1. Handbook Culture Media (1982)
2. The manual of microbiological culture media (Gibco BRL 1988)
3. The Oxoid manual of culture media, ingredients and other laboratory services. (Oxoid Limited 1979)
4. Manual of BBL produkts and laboratoru procedures. 1991.
1. Handbook Culture Media (1982)
2. The manual of microbiological culture media (Gibco BRL 1988)
3. The Oxoid manual of culture media, ingredients and other laboratory services. (Oxoid Limited 1979)
4. Manual of BBL produkts and laboratoru procedures. 1991.
5. Авт. свидетельство N 1451167 г.р. Гаджиева и др. "Питательная среда для выделения гонококков".
6. ФС 42-146 ВС-88 Питательная сpеда для выделения гонококка, сухая.
Claims (1)
1 Питательная среда для выделения и культивирования гонококка, содержащая питательную основу, автолизат пекарных или пивных дрожжей, агар микробиологический, натрий хлористый, ингибитор посторонней микрофлоры и воду дистиллированную, отличающаяся тем, что в качестве питательной основы она содержит панкреатический гидролизат рыбной муки и солянокислотный гидролизат казеина, дополнительно содержит стимулятор роста гемофильных микроорганизмов, глюкозу, а в качестве ингибитора посторонней микрофлоры полимиксина-В сульфат и линкомицина гидрохлорид при следующем соотношении компонентов, г/л:3 Панкреатический гидролизат рыбной муки7 22 283 Солянокислотный гидролизат казеина7 2,8 3,23 Автолизат пекарных или пивных дрожжей7 0,8 1,23 Стимулятор роста гемофильных микроорганизмов7 2 103 Глюкоза7 9 113 Натрий хлористый7 2,9 3,13 Агар микробиологический7 12 - 153 Полимиксина-В сульфат, Ед7 15000 250003 Линкомицина гидрохлорид7 0,001 0,0033 Вода дистиллированная7 До 1 л3 pH7 7,3 + 0,2
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU94031260A RU2077576C1 (ru) | 1994-08-25 | 1994-08-25 | Питательная среда для выделения и культивирования гонококка |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU94031260A RU2077576C1 (ru) | 1994-08-25 | 1994-08-25 | Питательная среда для выделения и культивирования гонококка |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU94031260A RU94031260A (ru) | 1996-11-10 |
| RU2077576C1 true RU2077576C1 (ru) | 1997-04-20 |
Family
ID=20160016
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU94031260A RU2077576C1 (ru) | 1994-08-25 | 1994-08-25 | Питательная среда для выделения и культивирования гонококка |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2077576C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2455351C1 (ru) * | 2011-06-08 | 2012-07-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Ростовский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО РостГМУ Минздравсоцразвития России) | Питательная среда для культивирования дифтерийных микробов |
-
1994
- 1994-08-25 RU RU94031260A patent/RU2077576C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР N 1451167, кл. C 12 Q 1/04, 1989. ФС 42-146 ВС-88. Питательная среда для выделения гонококка, сухая. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2455351C1 (ru) * | 2011-06-08 | 2012-07-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Ростовский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО РостГМУ Минздравсоцразвития России) | Питательная среда для культивирования дифтерийных микробов |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU94031260A (ru) | 1996-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113122453A (zh) | 一种用于分离旱獭组织中布鲁氏菌的培养基及其制备方法 | |
| Ronen et al. | A spectrophotometric method for quantitative determination of lysozyme in human tears: description and evaluation of the method and screening of 60 healthy subjects. | |
| Mårdh et al. | An effective, simplified medium for the culture of Neisseria gonorrhoeae | |
| Schultz-Haudt et al. | Lysis of collagen by human gingival bacteria. | |
| RU2077576C1 (ru) | Питательная среда для выделения и культивирования гонококка | |
| Chan et al. | Culture of erythropoietic cells from chick blastoderms | |
| RU2076904C1 (ru) | Питательная среда для выделения и культивирования гонококка | |
| Soldo | Cultivation of two strains of killer Paramecium aurelia in axenic medium. | |
| Takehara et al. | Effect of enzymes on partially purified Japanese B encephalitis and related arbor viruses | |
| US2792331A (en) | Culture medium for bacteria | |
| RU2101342C1 (ru) | Дифференциально-диагностическая питательная среда для выделения возбудителей кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза | |
| RU2103368C1 (ru) | Питательная среда для выделения и культивирования менингококков (менингоагар) | |
| RU2101357C1 (ru) | Питательная среда для выделения и культивирования коклюшного микроба | |
| MACDONALD et al. | Comparison of Sheffield media with standard media for the isolation of Haemophilus ducreyi | |
| Krishnaswamy et al. | Fish hydrolysates. IV. Microbiological evaluation | |
| RU2827845C1 (ru) | Элективная питательная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa | |
| KR100348795B1 (ko) | 기능성 발효 사료첨가제 및 이의 제조방법 | |
| RU2508400C1 (ru) | СУХАЯ ХРОМОГЕННАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ КОЛИФОРМНЫХ БАКТЕРИЙ И E.coli (ВАРИАНТЫ) | |
| US3687816A (en) | Bacterial growth media | |
| RU2233885C2 (ru) | Питательная среда для выделения шигелл и сальмонелл | |
| RU2193061C1 (ru) | Питательная среда для культивирования микобактерий туберкулеза (мбт-бульон) | |
| Chacko et al. | A New Convenient Egg-enriched Medium For the Cultural Diagnosis of Gonorrhoea | |
| RU1781299C (ru) | Способ идентификации возбудител брюшного тифа | |
| RU2644248C2 (ru) | Питательная среда плотная для культивирования и выращивания туляремийного микроба | |
| ES2966679T3 (es) | Métodos y composiciones para mejorar la detección de microorganismos |