RU2077204C1 - Method of production of microbiological preparations - Google Patents
Method of production of microbiological preparations Download PDFInfo
- Publication number
- RU2077204C1 RU2077204C1 RU9595107036A RU95107036A RU2077204C1 RU 2077204 C1 RU2077204 C1 RU 2077204C1 RU 9595107036 A RU9595107036 A RU 9595107036A RU 95107036 A RU95107036 A RU 95107036A RU 2077204 C1 RU2077204 C1 RU 2077204C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cultivation
- mass
- culture fluid
- nutrient medium
- water
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к технологии промышленной микробиологии и может быть использовано преимущественно в производстве микробиологических препаратов сельскохозяйственного назначения. The invention relates to the technology of industrial microbiology and can be used mainly in the production of microbiological agricultural products.
Известен способ производства микробиологических препаратов, включающий подготовку посевной культуры микроорганизмов из штамма-продуцента и питательной среды, содержащей водорастворимые углеводы, источник органического азота, соли и воду, внесение посевной культуры в питательную среду, ее культивирование и введение целевого продуцента из культуральной жидкости (заявка РСТ N 94/16566, кл. А 01 N 63/04, 1994). A known method for the production of microbiological preparations, including the preparation of an inoculum culture of microorganisms from a producer strain and a nutrient medium containing water-soluble carbohydrates, a source of organic nitrogen, salt and water, the introduction of the inoculum culture medium, its cultivation and the introduction of the target producer from the culture fluid (PCT application N 94/16566, class A 01 N 63/04, 1994).
Недостатком данного способа является узкая направленность способа на производство небольшой группы микробиологических препаратов сельскохозяйственного назначения из-за заданного соотношения источника органического азота и глицерина в питательной среде. The disadvantage of this method is the narrow focus of the method for the production of a small group of microbiological agricultural products due to a given ratio of the source of organic nitrogen and glycerol in the nutrient medium.
Задачей изобретения является расширение технологических возможностей. Поставленная задача решается тем, что в способе производства микробиологических препаратов, включающем подготовку посевной культуры из штамма-продуцента и питательной среды, содержащей источник органического азота и водорастворимые углеводы, соли и воду, внесение посевной культуры в питательную среду, ее культивирование и выделение целевого продуцента из культуральной жидкости, согласно изобретения, питательная среда содержит не менее 2% по массе водорастворимых углеводов и не менее 0,0003% по массе аминного азота, при этом общее количество углеводов не превышает 18% по массе, а общий азот составляет не более 2,7% по массе. The objective of the invention is the expansion of technological capabilities. The problem is solved in that in a method for the production of microbiological preparations, which includes preparing a seed culture from a producer strain and a nutrient medium containing a source of organic nitrogen and water-soluble carbohydrates, salts and water, introducing the seed culture into the nutrient medium, cultivating it and isolating the target producer from culture fluid, according to the invention, the nutrient medium contains at least 2% by weight of water-soluble carbohydrates and at least 0,0003% by weight of amine nitrogen, while the total amount Your carbohydrate does not exceed 18% by mass, and total nitrogen is not more than 2.7% by mass.
Это позволяет расширить технологические возможности способа за счет расширения ассортимента микробиологических препаратов различного назначения на основе большого количества микроорганизмов, в том числе не относящихся к микробиологическим грибам. This allows you to expand the technological capabilities of the method by expanding the assortment of microbiological preparations for various purposes based on a large number of microorganisms, including those not related to microbiological fungi.
В предпочтительном варианте в качестве источника органического азота питательная среда содержит гидролизат и/или автолизат дрожжей и/или рыбокостной муки и/или казеина и/или белково-витаминный концентрат. In a preferred embodiment, as a source of organic nitrogen, the nutrient medium contains a hydrolyzate and / or autolysate of yeast and / or fish bone meal and / or casein and / or protein-vitamin concentrate.
Это позволяет получить питательные среды с наиболее универсальным составом, обеспечивающим оптимальное соотношение содержания общего и аминного азота. This allows you to get nutrient media with the most versatile composition, providing the optimal ratio of total and amine nitrogen.
В другом предпочтительном варианте культивирование осуществляют глубинным методом. Это позволяет наиболее полно использовать химические вещества питательной среды и получить препараты с максимальным содержанием активного начала. In another preferred embodiment, the cultivation is carried out by the deep method. This allows you to fully use the chemicals of the nutrient medium and get drugs with a maximum content of active principle.
В этом случае предусмотрена возможность использования для культивирования микроорганизмов вида Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky) и смешивание культуральной жидкости с зерновой основой в виде пересушенного зерна или муки и вкусо-ароматической приманкой, при этом в случае использования в качестве зерновой основы муки после смешивания препарат экструдируют и сушат. In this case, it is possible to use Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky) for the cultivation of microorganisms and mix the culture fluid with a grain base in the form of dried grain or flour and a flavoring bait, while in case of using flour after mixing as a grain base the drug is extruded and dried.
Это позволяет получить товарные формы бактороденцида с высоким содержанием активного начала для использования в закрытых помещениях и на открытых площадках и полях в целях борьбы с вредными насекомыми и мышевидными грызунами. This allows you to get the marketable forms of bacterodecene with a high content of active principle for use indoors and in open areas and fields in order to combat harmful insects and mouse rodents.
В этом же случае предусмотрена возможность использования для культивирования микроорганизмов вида Streptomyces albolongus или Streptomyces longosporus или Streptomyces avermitilis. При этом для получения жидкой формы препарата возможно ведение культивирования до максимального накопления мицелиальной массы или спорообразования, концентрирования культуральной жидкости до содержания сухих веществ 6 10% по массе и введение в концентрат 4 10% по массе глицерина и 0,1 1,0% полиэтиленоксида или 1 3% поливинилпирролидона по массе; для получения сухого препарата возможно ведение культивирования до максимального спорообразования, концентрирования культуральной жидкости до содержания сухих веществ 20 30% по массе, введение в концентрат смеси цеолита типа NaX и монтмориллонита или полыгорскита в соотношении 1 2 в количестве 10 30% по массе к сухим веществам концентрата, гранулирование и сушка смеси; для получения комбинированного препарата с удобрением культуральную жидкость вводят в созревающий или зрелый биогумус. In the same case, it is possible to use Streptomyces albolongus or Streptomyces longosporus or Streptomyces avermitilis for the cultivation of microorganisms. In this case, to obtain a liquid form of the drug, it is possible to conduct cultivation to the maximum accumulation of mycelial mass or spore formation, concentration of the culture fluid to a dry matter content of 6 10% by weight and the introduction of 4 10% by weight of glycerol and 0.1 1.0% polyethylene oxide into the concentrate or 1 3% polyvinylpyrrolidone by weight; to obtain a dry preparation, it is possible to cultivate to the maximum spore formation, concentrate the culture fluid to a dry matter content of 20 30% by weight, introduce a mixture of NaX type zeolite and montmorillonite or polygorskite in a ratio of 1 2 in an amount of 10 30% by weight of the concentrate solids granulating and drying the mixture; to obtain a combined preparation with fertilizer, the culture fluid is injected into a ripening or mature biohumus.
Это позволяет получить препараты для борьбы с фитопатогенными микроорганизмами и насекомыми. This allows you to get drugs to combat phytopathogenic microorganisms and insects.
В этом случае возможно использование для культивирования микроорганизмов вида Trichoderma lignorum или Trichoderma harzianum или Trichoderma koningii и смешивание культуральной жидкости с созревающим или зрелым биогумусом. In this case, it is possible to use Trichoderma lignorum or Trichoderma harzianum or Trichoderma koningii for the cultivation of microorganisms and mix the culture fluid with a ripening or mature biohumus.
Это позволяет получать комбинированный с удобрением препарат для борьбы с фитопатогенными микроорганизмами и насекомыми. This allows you to get a drug combined with fertilizer to combat phytopathogenic microorganisms and insects.
Способ реализуется следующим образом. The method is implemented as follows.
Посевную культуру микроорганизмов готовят из штамма-продуцента. Одновременно готовят питательную среду, содержащую водорастворимые углеводы, источник органического азота, соли и воду. В состав питательной среды источники углеводов и органического азота вводят таким образом, чтобы обеспечить содержание водорастворимых углеводов не менее 2% по массе и не менее 0,0005% по массе аминного азота и не более 18% по массе общего содержания углеводов и общего азота не более 2,7% по массе. В предпочтительном варианте в качестве источника органического азота в питательную среду вводят гидролизат и/или рыбокостной муки и/или казеина и/или белково-витаминный концентрат, которые обеспечивают оптимальное сочетание содержания общего и аминного азота. Далее посевную культуру вводят в питательную среду и осуществляют ее культивирование, в предпочтительном варианте глубинным методом. A seed culture of microorganisms is prepared from a producer strain. At the same time, a nutrient medium is prepared containing water-soluble carbohydrates, a source of organic nitrogen, salts and water. Sources of carbohydrates and organic nitrogen are introduced into the composition of the nutrient medium in such a way as to ensure a water-soluble carbohydrate content of at least 2% by mass and at least 0,0005% by mass of amine nitrogen and not more than 18% by mass of the total carbohydrate and total nitrogen content not more than 2.7% by weight. In a preferred embodiment, a hydrolyzate and / or fish bone meal and / or casein and / or protein-vitamin concentrate are introduced into the nutrient medium as a source of organic nitrogen, which provide an optimal combination of total and amine nitrogen. Next, the seed culture is introduced into the nutrient medium and its cultivation is carried out, in a preferred embodiment, by the deep method.
При культивировании используют предпочтительно микроорганизмы вида Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky) или Streptomyces albolongus или Streptomyces longosporum или Streptomyces avermitilis или Trichoderma lignorum или Trichoderma harzianum или Trichoderma koningii. В случае использования микроорганизмов вида Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky) после завершения культивирования готовят бактероденцид путем смешивания культуральной жидкости с зерновой основой и вкусо-ароматической приманкой. Этот препарат может быть выпущен в виде формы для применения в любых условиях, в том числе на открытых площадках и полях, когда в качестве зерновой основы используют пересушенное зерно, а также в виде формы для применения только в закрытых помещениях, когда в качестве зерновой основы используют муку, а затем смесь культуральной жидкости с мукой экструдируют и сушат. During cultivation, microorganisms of the species Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky) or Streptomyces albolongus or Streptomyces longosporum or Streptomyces avermitilis or Trichoderma lignorum or Trichoderma harzianum or Trichoderma koningii are preferably used. In the case of the use of microorganisms of the species Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky), after completion of cultivation, bacterodecid is prepared by mixing the culture fluid with a cereal base and a flavoring bait. This preparation can be issued in the form of a form for use in any conditions, including in open areas and fields, when overdried grain is used as a grain base, and also in a form for use only in enclosed spaces, when a grain base is used flour, and then the mixture of culture fluid with flour is extruded and dried.
В случае использования для культивирования микроорганизмов рода Streptomyces названных выше видов культивирование можно осуществлять до максимального накопления мицелиальной массы или спорообразования. Культуральная жидкость после выращивания микроорганизмов до максимального накопления мицелиальной массы в основном пригодна для производства жидкой товарной формы препарата для борьбы с фитопатогенными организмами или смешивания с созревающим биогумусом. In the case of using the above species for the cultivation of microorganisms of the Streptomyces genus, cultivation can be carried out to the maximum accumulation of mycelial mass or spore formation. After growing microorganisms to the maximum accumulation of mycelial mass, the culture fluid is mainly suitable for the production of a liquid commodity form of the drug for controlling phytopathogenic organisms or mixing with ripening biohumus.
После максимального спорообразования культуральную жидкость используют для производства сухих товарных форм аналогичных препаратов длительного хранения, в том числе и в сочетании со зрелым биогумусом. After maximum spore formation, the culture fluid is used to produce dry commodity forms of similar long-term storage preparations, including in combination with mature biohumus.
При использовании микроорганизмов рода Trichoderma названных выше видов культуральную жидкость смешивают с биогумусом, при этом в зависимости от степени развития микроорганизма следует выбирать биогумус созревающий или зрелый, аналогично тому, как это описано для микроорганизмов рода Streptomyces. When using microorganisms of the genus Trichoderma of the above species, the culture fluid is mixed with vermicompost, and depending on the degree of development of the microorganism, ripening or mature vermicompost should be chosen, similar to that described for microorganisms of the genus Streptomyces.
Пример 1. Example 1
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky) N 18/1. Питательная среда содержит автолизат и сернокислотный гидролизат дрожжей, сернокислотный гидролизат рыбокостной муки, белково-витаминный концентрат, глюкозу, зеленую патоку, мел и воду. Содержание в ней водорастворимых углеводов составляет 2,3% по массе, общее содержание углеводов 2,5% по массе, аминного азота 0,12% по массе, общего азота 1,8% по массе. Среду стерилизуют и засевают посевной культурой. Культивирование осуществляют глубинным методом при перемешивании и аэрации при температуре 36oС в течение 48 часов. После завершения культивирования культуральную жидкость смешивают с зерном, высушенным в псевдоожиженном слое при температуре 105oС в течение 24 часов, и подсолнечным маслом, используемым в качестве вкусо-ароматической приманки. Готовый зерновой препарат содержит около 10х109 клеток на 1 г.Inoculum culture is prepared from the producer strain Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky) N 18/1. The nutrient medium contains an autolysate and sulfuric acid hydrolyzate of yeast, sulfuric acid hydrolyzate of fish meal, protein-vitamin concentrate, glucose, green molasses, chalk and water. The content of water-soluble carbohydrates in it is 2.3% by mass, the total carbohydrate content is 2.5% by mass, the amine nitrogen is 0.12% by mass, the total nitrogen is 1.8% by mass. The medium is sterilized and seeded with a seed culture. The cultivation is carried out by the deep method with stirring and aeration at a temperature of 36 o C for 48 hours. After cultivation, the culture fluid is mixed with grain dried in a fluidized bed at a temperature of 105 o C for 24 hours, and sunflower oil used as a flavoring bait. The finished cereal preparation contains about 10x10 9 cells per 1 g.
Пример 2. Example 2
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky) N 29/1. Питательную среду готовят из солянокислого гидролизата казеина, белково-витаминного концентрата, технической глюкозы, хлорида натрия, мела и воды. Она содержит водорастворимых углеводов 3% по массе, всего углеводов 3,2% по массе, аминного азота 0,13% по массе, общего азота 1,1% по массе. Среду стерилизуют и засевают посевным материалом. Культивирование осуществляют глубинным методом при перемешивании и аэрации при температуре 37oС в течение 36 часов. Культуральную жидкость смешивают с мукой, отрубями и кукурузным маслом, используемым в качестве вкусо-ароматической приманки. Смесь экструдируют и сушат. Полученный препарат представляет собой гранулы с содержанием микробиальных клеток около 9х109 на 1 г.Inoculum is prepared from the producer strain Salmonella enteritidis var Issatschenko (Danitsch-Mereshkovsky) N 29/1. The nutrient medium is prepared from hydrochloric acid hydrolyzate of casein, protein-vitamin concentrate, technical glucose, sodium chloride, chalk and water. It contains water-soluble carbohydrates 3% by mass, total carbohydrates 3.2% by mass, amine nitrogen 0.13% by mass, total nitrogen 1.1% by mass. The medium is sterilized and seeded with seed. The cultivation is carried out by the deep method with stirring and aeration at a temperature of 37 o C for 36 hours. The culture fluid is mixed with flour, bran and corn oil, used as a flavoring bait. The mixture is extruded and dried. The resulting preparation is a granule with a microbial cell content of about 9x10 9 per 1 g.
Пример 3. Example 3
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Streptomyces albolongus ОСТ-5 ЦКМ-F-62 Ц. Для получения питательной среды смешивают соевую муку, глюкозу, кукурузный экстракт, белково-витаминный концентрат, карбонат кальция и воду. Она содержит водорастворимых углеводов 2% по массе, всего углеводов 5,3% по массе, аминного азота 0,06% по массе, общего азота 2,7% по массе. Среду стерилизуют и вносят в нее посевную культуру. Культивирование осуществляют глубинным методом до максимального накопления мицелиальной массы при температуре 28oС, после чего концентрируют культуральную жидкость до содержания сухих веществ 10% по массе и вводят в концентрат 30% по массе сухих веществ цеолита типа NaX и полыгорскита в соотношении 1 2, гранулируют смесь и сушат. Получают сухое средство с содержанием около 5х109 спор на 1 г препарата.The seed culture is prepared from the producer strain Streptomyces albolongus OST-5 CKM-F-62 C. To obtain a nutrient medium, soy flour, glucose, corn extract, protein-vitamin concentrate, calcium carbonate and water are mixed. It contains water-soluble carbohydrates 2% by mass, total carbohydrates 5.3% by mass, amine nitrogen 0.06% by mass, total nitrogen 2.7% by mass. The medium is sterilized and a seed culture is introduced into it. The cultivation is carried out by a deep method to the maximum accumulation of mycelial mass at a temperature of 28 o C, after which the culture fluid is concentrated to a solids content of 10% by mass and 30% by mass of solids of a NaX type and polygorskite solids are added to the concentrate in a ratio of 1 to 2, the mixture is granulated and dried. Get a dry product with a content of about 5x10 9 spores per 1 g of the drug.
Пример 4. Example 4
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Streptomyces legosporum "ВЕРПА". Питательную среду готовят путем смешивания глюкозы картофельного пюре, белково-витаминного концентрата, азотно-кислого натрия, хлористого калия и воды. Она содержит водорастворимых углеводов 3% по массе, всего углеводов 9% по массе, аминного азота 0,012% по массе, общего азота 0,028% по массе. Среду стерилизуют и вносят в нее посевной материал. Культивирование осуществляют глубинным методом до максимального спорообразования при температуре 28oС. Культуральную жидкость смешивают со зрелым биогумусом, подсушивают и фасуют в крафт-мешки, получен комбинированный препарат удобрения, содержащий около 1,2х107 спор на 1 г.The seed culture is prepared from the producer strain Streptomyces legosporum "VERPA". Nutrient medium is prepared by mixing glucose of mashed potatoes, protein-vitamin concentrate, sodium nitrate, potassium chloride and water. It contains water-soluble carbohydrates 3% by mass, total carbohydrates 9% by mass, amine nitrogen 0.012% by mass, total nitrogen 0.028% by mass. The medium is sterilized and seed is introduced into it. Cultivation is carried out by the in-depth method to the maximum spore formation at a temperature of 28 o C. The culture fluid is mixed with mature vermicompost, dried and packaged in kraft bags, a combined fertilizer preparation containing about 1.2x10 7 spores per 1 g is obtained.
Пример 5. Example 5
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Streptomyces avermitilis АС 1301 ВКМ-РФ. Питательную среду готовят смешиванием глюкозы, люпиновой муки, овсяной муки, хлористого кальция, сернокислого железа и воды. Она содержит водорастворимых углеводов 4,1% по массе, всего углеводов 11% по массе, аминного азота 0,0008% по массе, общего азота 0,015% по массе. Питательную среду стерилизуют и вносят в нее посевную культуру. Культивирование осуществляют глубинным методом до максимального накопления мицелия и начала спорообразования при температуре 30oС. Культуральную жидкость концентрируют до содержания сухих вещество 10% по массе и вводят в концентрат 4% по массе глицерина и 0,1% полиэтиленоксида. Получен жидкий препарат с содержанием авермектинов около 1% по массе.The seed culture is prepared from the producer strain Streptomyces avermitilis AC 1301 VKM-RF. The nutrient medium is prepared by mixing glucose, lupine flour, oat flour, calcium chloride, iron sulfate and water. It contains water-soluble carbohydrates 4.1% by mass, total carbohydrates 11% by mass, amine nitrogen 0.0008% by mass, total nitrogen 0.015% by mass. The nutrient medium is sterilized and a seed culture is introduced into it. Cultivation is carried out by the deep method to the maximum accumulation of mycelium and the onset of spore formation at a temperature of 30 o C. The culture fluid is concentrated to a dry matter content of 10% by weight and injected into the concentrate 4% by weight of glycerol and 0.1% polyethylene oxide. A liquid preparation was obtained with an avermectin content of about 1% by weight.
Пример 6. Example 6
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Trichoderma lignorum ТБД-93. Питательную среду готовят из технической глюкозы, гидролизата дрожжей, азотнокислого натрия, однозамещенного фосфорнокислого натрия, хлористого калия, сернокислого железа и воды. Она содержит водорастворимых углеводов 2,8% по массе, всего углеводов 2,801% по массе, аминного азота 0,0005% по массе, общего азота 0,0006% по массе. Среду стерилизуют, вносят в нее посевную культуру и осуществляют культивирование глубинным методом при температуре 26oС в течение 96 часов. Культуральную жидкость смешивают с зрелым биогумусом. Получен сухой препарат с содержанием спор 2,1х107 на 1 г.Inoculum culture is prepared from a producer strain Trichoderma lignorum TBD-93. The nutrient medium is prepared from technical glucose, yeast hydrolyzate, sodium nitrate, monosubstituted sodium phosphate, potassium chloride, ferrous sulfate and water. It contains water-soluble carbohydrates 2.8% by mass, total carbohydrates 2.801% by mass, amine nitrogen 0.0005% by mass, total nitrogen 0.0006% by mass. The medium is sterilized, a seed culture is introduced into it and cultivation is carried out by the in-depth method at a temperature of 26 ° C. for 96 hours. The culture fluid is mixed with mature biohumus. A dry preparation was obtained with a spore content of 2.1x10 7 per 1 g.
Пример 7. Example 7
Посевной материал готовят из штамма-продуцента Trichoderma hurzianum 2029. Для приготовления питательной среды смешивают автолизат дрожжей, мелассу, азотнокислый аммоний, мел, хлорид натрия, сернокислое железо и воду. Она содержит водорастворимых углеводов 2,1% по массе, всего углеводов 2,104% по массе, аминного азота 0,03% по массе, общего азота 0,08% по массе. Среду стерилизуют, вносят в нее посевной материал и осуществляют культивирование глубинным методом в течение 48 часов при температуре 27oC, культуральную жидкость смешивают с созревающим биогумусом и продолжают культивирование в течение 168 часов. Получен препарат с содержанием 10х106 спор на 1 г.The seed is prepared from a producer strain Trichoderma hurzianum 2029. To prepare a nutrient medium, yeast autolysate, molasses, ammonium nitrate, chalk, sodium chloride, iron sulfate and water are mixed. It contains water-soluble carbohydrates 2.1% by mass, total carbohydrates 2.104% by mass, amine nitrogen 0.03% by mass, total nitrogen 0.08% by mass. The medium is sterilized, inoculum is introduced into it and cultivation is carried out by a deep method for 48 hours at a temperature of 27 o C, the culture fluid is mixed with ripening biohumus and cultivation is continued for 168 hours. Received a drug with a content of 10x10 6 spores per 1 g.
Пример 8. Example 8
Посевной материал готовят из штамма-продуцента Trichoderma koningii ИБФМ F240. Питательную среду составляют из гидролизата дрожжей, муки арахиса, кукурузного экстракта, пюре топинамбура, зеленой патоки, нитратов магния и аммония, хлорида кальция и воды. Она содержит водорастворимых углеводов 2,1% по массе, всего углеводов 12% по массе, аминного азота 0,3% по массе, общего азота 1,08% по массе. Среду стерилизуют, вносят в нее посевную культуру и осуществляют культивирование глубинным методом в течение 30 часов при температуре 27oС. Культуральную жидкость смешивают со зрелым гумусом. Получен препарат с содержанием 2х107 клеток на 1 г.The seed is prepared from the producer strain Trichoderma koningii IBPM F240. The nutrient medium consists of a yeast hydrolyzate, peanut flour, corn extract, Jerusalem artichoke puree, green molasses, magnesium and ammonium nitrates, calcium chloride and water. It contains water-soluble carbohydrates 2.1% by mass, total carbohydrates 12% by mass, amine nitrogen 0.3% by mass, total nitrogen 1.08% by mass. The medium is sterilized, a seed culture is introduced into it and cultivation is carried out by the in-depth method for 30 hours at a temperature of 27 o C. The culture fluid is mixed with mature humus. Received a preparation containing 2x10 7 cells per 1 g.
Пример 9. Example 9
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Entomophthora thaxteriana 65-41-15. Inoculum culture is prepared from the producer strain Entomophthora thaxteriana 65-41-15.
Для приготовления питательной среды смешивают соевую муку, глюкозу, молочную сыворотку, хлорид натрия и воду. Она содержит водорастворимых углеводов 6% по массе, всего углеводов 7,1% по массе, аминного азота 0,04% по массе, общего азота 0,4% по массе. Питательную среду стерилизуют, вносят в нее посевную культуру и осуществляют глубинное культивирование при температуре 25,5oС в течение 153 часов. Культуральную жидкость концентрируют до содержания сухих веществ 25% по массе, смешивают с цеолитом, гранулируют и сушат, получен препарат с содержанием 1х105 спор на 1 г.To prepare a nutrient medium, soy flour, glucose, whey, sodium chloride and water are mixed. It contains water-soluble carbohydrates 6% by mass, total carbohydrates 7.1% by mass, amine nitrogen 0.04% by mass, total nitrogen 0.4% by mass. The nutrient medium is sterilized, a seed culture is introduced into it, and deep cultivation is carried out at a temperature of 25.5 ° C. for 153 hours. The culture fluid is concentrated to a solids content of 25% by weight, mixed with zeolite, granulated and dried, a preparation with a content of 1x10 5 spores per 1 g is obtained.
Пример 10. Example 10
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Bacillus subtilis G-28. Для приготовления питательной среды смешивают соевый жмых, мясокостный бульон, глюкозу, крахмал, сульфат аммония и воду. Она содержит водорастворимых углеводов 4,58% по массе, аминного азота 0,2% по массе, всего углеводов 10% по массе, общего азота 0,9% по массе. Питательную среду стерилизуют, вносят в нее посевную культуру и осуществляют глубинное культивирование с аэрацией 0,4 л/мин при температуре 32oC в течение 26 часов. Культуральную жидкость отделяют и сушат с получением ферментного препарата медицинского назначения лизоцим.The seed culture is prepared from a producer strain of Bacillus subtilis G-28. To prepare a nutrient medium, soybean meal, meat and bone broth, glucose, starch, ammonium sulfate and water are mixed. It contains water-soluble carbohydrates 4.58% by mass, amine nitrogen 0.2% by mass, total carbohydrates 10% by mass, total nitrogen 0.9% by mass. The nutrient medium is sterilized, a seed culture is introduced into it, and deep cultivation is carried out with aeration of 0.4 l / min at a temperature of 32 ° C. for 26 hours. The culture fluid is separated and dried to obtain a lysozyme medical enzyme preparation.
Пример 11. Example 11
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Aspergillus niger П. Для приготовления питательной среды смешивают свекловичный жом, солодовые ростки, стержни початков кукурузы, кислый фосфат аммония, однозамещенный фосфат калия, сульфат магния и воду. Она содержит водорастворимых углеводов 2,72% по массе, аминного азота 0,02% по массе, всего углеводов 14% по массе, общего азота 0,204% по массе. Питательную среду стерилизуют, вносят в нее посевную культуру и осуществляют культивирование глубинным методом при температуре 30oС в течение 72 часов. Культуральную жидкость отделяют и сушат с получением пектолитического ферментного препарата для осветления соков или обработки мезги перед извлечением из нее сока в консервной промышленности или виноделии.The seed culture is prepared from a producer strain Aspergillus niger P. To prepare a nutrient medium, beet pulp, malt sprouts, corn cobs, ammonium acid phosphate, monosubstituted potassium phosphate, magnesium sulfate and water are mixed. It contains water-soluble carbohydrates 2.72% by weight, amine nitrogen 0.02% by weight, total carbohydrates 14% by weight, total nitrogen 0.204% by weight. The nutrient medium is sterilized, a seed culture is introduced into it and cultivation is carried out by the in-depth method at a temperature of 30 ° C. for 72 hours. The culture fluid is separated and dried to obtain a pectolytic enzyme preparation for clarifying juices or processing pulp before extracting juice from it in the canning industry or winemaking.
Пример 12. Example 12
Посевную культуру готовят из штамма-продуцента Lactobacillus plantarum S-68. Для приготовления питательной среды смешивают гидролизованное молоко, дрожжевой автолизат, агар-агар, мел, сульфат марганца (II), сульфат железа (II) и воду. Она содержит водорастворимых углеводов 6% по массе, аминного азота 2,1% по массе, всего углеводов 6,2% по массе, общего азота 2,7% по массе. Питательную среду стерилизуют, вносят посевную культуру и осуществляют глубинное культивирование при температуре 30oС в течение 148 часов. Биомассу отделяют от культуральной жидкости с получением закваски для соления овощей с содержанием 1011 клеток на мл.A seed culture is prepared from the producer strain Lactobacillus plantarum S-68. To prepare the nutrient medium, hydrolyzed milk, yeast autolysate, agar-agar, chalk, manganese (II) sulfate, iron (II) sulfate and water are mixed. It contains water-soluble carbohydrates 6% by mass, amine nitrogen 2.1% by mass, total carbohydrates 6.2% by mass, total nitrogen 2.7% by mass. The nutrient medium is sterilized, a seed culture is introduced and deep cultivation is carried out at a temperature of 30 ° C. for 148 hours. The biomass is separated from the culture fluid to obtain a starter culture for pickling vegetables with a content of 10 11 cells per ml.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет расширить технологические возможности за счет увеличения ассортимента производимых микробиологических препаратов. Thus, the proposed method allows to expand technological capabilities by increasing the range of manufactured microbiological preparations.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU9595107036A RU2077204C1 (en) | 1995-05-12 | 1995-05-12 | Method of production of microbiological preparations |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU9595107036A RU2077204C1 (en) | 1995-05-12 | 1995-05-12 | Method of production of microbiological preparations |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU95107036A RU95107036A (en) | 1996-11-10 |
| RU2077204C1 true RU2077204C1 (en) | 1997-04-20 |
Family
ID=20167338
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU9595107036A RU2077204C1 (en) | 1995-05-12 | 1995-05-12 | Method of production of microbiological preparations |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2077204C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA005442B1 (en) * | 2003-12-23 | 2005-02-24 | Георгий Семёнович Коломейцев | Method for producing microbiological preparations |
| MD4251C1 (en) * | 2012-10-12 | 2014-04-30 | Институт По Защите Растений И Экологического Сельского Хозяйства Анм | Nutrient medium for cultivation of Trichoderma lignorum CNMN-FD-14 fungal strain |
-
1995
- 1995-05-12 RU RU9595107036A patent/RU2077204C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| WO, 94/16566, кл. A 01 N 63/04, 1994. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA005442B1 (en) * | 2003-12-23 | 2005-02-24 | Георгий Семёнович Коломейцев | Method for producing microbiological preparations |
| MD4251C1 (en) * | 2012-10-12 | 2014-04-30 | Институт По Защите Растений И Экологического Сельского Хозяйства Анм | Nutrient medium for cultivation of Trichoderma lignorum CNMN-FD-14 fungal strain |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU95107036A (en) | 1996-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3040399B2 (en) | Food | |
| CA2359338C (en) | Bacillus subtilis takemi and use thereof | |
| JP2003259835A (en) | Production of fermented product and its utilization | |
| CN105087444B (en) | The bacillus amyloliquefaciens of degrading zearalenone and its application | |
| US3087865A (en) | Process for making pesticidal compositions | |
| US5089263A (en) | Nematicidal strain of pseudomonas and its use as a biocontrol agent | |
| CN103387428A (en) | Preparation method for organic material decomposition agent | |
| RU2077204C1 (en) | Method of production of microbiological preparations | |
| Robinson et al. | The large-scale growth of higher fungi | |
| CN103960463A (en) | Silage tangerine pulp feed and preparation technique thereof | |
| CN116553975A (en) | Fish protein fermentation liquor and application | |
| JP2005343772A (en) | Composition for organic fertilizer and method of manufacturing organic fertilizer | |
| CN107927708A (en) | A kind of fast preparation method of krill soy sauce | |
| KR960002865B1 (en) | A fertilizer and the preparing process thereof | |
| CN109287890B (en) | Germination agent-containing bacillus coagulans feed additive for aquaculture and preparation method thereof | |
| RU2380906C2 (en) | Self-preserved biological preparation for protection of plants against diseases (versions) and method for its production (versions) | |
| CN101993259A (en) | Active ecological organic fertilizer | |
| Okagbue | Fermentation research in Nigeria | |
| KR0136838B1 (en) | Method of growing fruit body of fistulina hepatica | |
| KR910004593B1 (en) | Process for preparing assorted feed | |
| RU2216201C2 (en) | Biochemical method for obtaining of powdered food product and powdered food product | |
| Borras et al. | Effect of fibrous materials inclusion on the solid-state fermentation of post harvested wastes of Solanum tuberosum | |
| KR100596692B1 (en) | fertilizer and manufacturing method of the same | |
| US5587158A (en) | Biological control for weed trees | |
| KR20020097273A (en) | Complex culture, process for producing complex culture, pre-culture, process for producing pre-culture and process for producing microbial preparations |