RU2035145C1 - Trichodermine productiuon method - Google Patents

Trichodermine productiuon method Download PDF

Info

Publication number
RU2035145C1
RU2035145C1 RU9393000542A RU93000542A RU2035145C1 RU 2035145 C1 RU2035145 C1 RU 2035145C1 RU 9393000542 A RU9393000542 A RU 9393000542A RU 93000542 A RU93000542 A RU 93000542A RU 2035145 C1 RU2035145 C1 RU 2035145C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cultivation
culture fluid
glycerol
concentrate
carried out
Prior art date
Application number
RU9393000542A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU93000542A (en
Inventor
Анатолий Петрович Третьяков
Original Assignee
Анатолий Петрович Третьяков
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Анатолий Петрович Третьяков filed Critical Анатолий Петрович Третьяков
Priority to RU9393000542A priority Critical patent/RU2035145C1/en
Priority to PCT/RU1994/000008 priority patent/WO1994016566A1/en
Priority to AU58934/94A priority patent/AU5893494A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2035145C1 publication Critical patent/RU2035145C1/en
Publication of RU93000542A publication Critical patent/RU93000542A/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: agricultural microbiology. SUBSTANCE: method involves preparation of sterile nutritive medium containing (mass %) glycerol - 0.3-2.0, green molasses - 0.5-3.0, hydrolyzate of protein-vitamin concentrate - 3-10, phosphates - 0.2-0.6, magnesium sulfate - 0.3-0.5, ammonium nitrate - o.3-0.6, and water - the rest. Fungal race Trichoderma lignorum is inoculated for aerated cultivation till maximum accumulation of mycellium or sporulation. In the process of cultivation it is expedient to add 0.3-1.0 % of glycerol as pH of the culture fluid drops naturally to 3.0-4.5. The resulting culture fluid is condenced until the content of dry matter is 6-10%. For production of liquid preparation the concentrate is supplemented with glycerol (4-10%) and polyvinyl pyrollidone (1-3%) or polyethylene oxide (0.1-1.0%). For production of dry substance, the culture liquid concentrate (dm 20-30%) is mixed with mixture of ceolyte of type NaX and montmorillonite or polygorskite (1: 2). The rate of supplementation is 10-30% (dm). The mixture is deied and granulated. EFFECT: higher product quality. 4 cl

Description

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и касается производства средств защиты растений от болезней, в частности способа получения грибного препарата триходермина. The invention relates to agricultural microbiology and relates to the production of plant protection products against diseases, in particular a method for producing a mushroom preparation trichodermin.

Известны способы получения триходермина путем глубинного культивирования микроскопического гриба вида Trichoderma на питательных средах, содержащих источники углерода, азота и минеральные соли, с последующим концентрированием и сушкой концентрата [1]
Наиболее близким техническим решением к изобретению является способ получения триходермина путем глубинного культивирования микроскопического гриба на питательной среде, содержащей кукурузный экстракт, мелассу, соли и воду, концентрирования культуральной жидкости, введения в концентрат естественного цеолита клиноптилолита, гранулирования смеси, высушивания и измельчения гранул [2]
Недостатком известного способа является сравнительно низкое содержание в препарате активного начала за счет сравнительно низкой влагосвязывающей способности используемого клиноптилолита.Known methods for producing trichodermin by deep cultivation of a microscopic fungus of the species Trichoderma on nutrient media containing carbon sources, nitrogen and mineral salts, followed by concentration and drying of the concentrate [1]
The closest technical solution to the invention is a method for producing trichodermin by deep cultivation of a microscopic fungus in a nutrient medium containing corn extract, molasses, salt and water, concentrating the culture fluid, introducing clinoptilolite into the zeolite concentrate, granulating the mixture, drying and grinding granules [2]
The disadvantage of this method is the relatively low content in the preparation of the active principle due to the relatively low moisture-binding ability of the clinoptilolite used.

Целью изобретения является повышение содержания активного начала в препарате, а также получение триходермина как в сухом, так и в жидком виде. The aim of the invention is to increase the content of active principle in the preparation, as well as the preparation of trichodermin in both dry and liquid form.

Сущность способа заключается в следующем. The essence of the method is as follows.

Готовят стерильную питательную среду, содержащую, мас. Глицерин 0,3-2 Зеленая патока 0,5-3 Гидролизат белко- во-витаминного концентрата (БВК) 3-10 Калий фосфорно- кислый 0,2-0,6 Сернокислый магний 0,3-0,5 Азотнокислый аммо- ний 0,3-0,6 Вода Остальное. Prepare a sterile growth medium containing, by weight. Glycerin 0.3-2 Green molasses 0.5-3 Protein-vitamin concentrate hydrolyzate (BVK) 3-10 Potassium phosphate 0.2-0.6 Magnesium sulfate 0.3-0.5 Ammonium nitrate 0.3-0.6 Water The rest.

Засевают среду штаммов гриба вида Trichoderma lignorum и культивируют при перемешивании и аэрации. В процессе культивирования при естественном снижении рН культуральной жидкости до 4,5-3,0 добавляют глицерин в количестве 0,3-1,0%
Культивирование осуществляют в течение 3-5 сут.The medium of the strain of the fungus Trichoderma lignorum is inoculated and cultured with stirring and aeration. In the process of cultivation with a natural decrease in the pH of the culture fluid to 4.5-3.0 add glycerin in an amount of 0.3-1.0%
Cultivation is carried out for 3-5 days.

Для получения жидкого препарата культивирование осуществляют до максимального накопления мицелиальной массы или спорообразования, для получения сухого препарата до максимального спорообразования. To obtain a liquid preparation, cultivation is carried out to the maximum accumulation of mycelial mass or spore formation, to obtain a dry preparation to a maximum spore formation.

При получении жидкого препарата культуральную жидкость концентрируют до СВ 6-10% и в концентрат вводят 4-10% глицерина и 1-3% поливинилпироллидона или 0,1-1,0% полиэтиленоксида. Upon receipt of the liquid preparation, the culture fluid is concentrated to 6-10% CB and 4-10% glycerol and 1-3% polyvinylpyrrolidone or 0.1-1.0% polyethylene oxide are introduced into the concentrate.

Для получения сухого триходермина в концентрат культуральной жидкости (СВ 20-30%) вводят смесь цеолита типа NaX и монтмориллонита или палыгорскита в соотношении 1: 2 в количестве 10-30% к сухим веществам, полученную смесь гранулируют и высушивают. To obtain dry trichodermin, a mixture of NaX type zeolite and montmorillonite or palygorskite in a ratio of 1: 2 in the amount of 10-30% to dry substances is introduced into the culture fluid concentrate (CB 20-30%), the resulting mixture is granulated and dried.

П р и м е р 1. Готовят 3 м3 стерильной питательной среды, содержащей, мас. Глицерин 0,3 Зеленая патока 3,0 Гидролизат БВК 5,0 Фосфаты 0,2 Сернокислый магний 0,3 Азотнокислый аммоний 0,6 Вода Остальное
Засевают среду посевным материалом из расчета 5% от объема среды штамма гриба Trichoderma lignorum ТБ-10 и культивируют в ферментере объемом 5 м3 при аэрации и перемешивании, продолжительность культивирования 4 сут.PRI me R 1. Prepare 3 m 3 sterile nutrient medium containing, by weight. Glycerin 0.3 Green molasses 3.0 BVK hydrolyzate 5.0 Phosphates 0.2 Magnesium sulfate 0.3 Ammonium nitrate 0.6 Water Else
The medium is inoculated with seed at the rate of 5% of the medium volume of the strain of the fungus Trichoderma lignorum TB-10 and cultivated in a fermenter with a volume of 5 m 3 under aeration and stirring, the cultivation time is 4 days.

Получают культуральную жидкость с титром хламидоспор 1˙108 в 1 мл.A culture fluid is obtained with a titer of Chlamydospores 1 × 10 8 in 1 ml.

По известному способу получают 0,7˙108 спор/мл.By a known method receive 0.710 8 spores / ml

Культуральную жидкость разделяют на 2 части, одну из которых используют для получения жидкого препарата, а другую сухого. The culture fluid is divided into 2 parts, one of which is used to obtain a liquid preparation, and the other dry.

Получение триходермина в жидком виде. Getting trichodermin in liquid form.

Полученную культуральную жидкость концентрируют фильтрацией (СВ 10%), получая 70 кг пасты, содержащей мицелий, остатки питательной среды и хламидоспоры (титр 2˙109 спор/г).The resulting culture fluid was concentrated by filtration (10% SW), yielding 70 kg of paste containing mycelium, residues of the nutrient medium and chlamydospores (titer 2 × 10 9 spores / g).

В пасту добавляют 10% (7 кг) глицерина и 0,1% (0,07 кг) смоченного полиэтиленоксида, перемешивают и охлаждают. 10% (7 kg) of glycerol and 0.1% (0.07 kg) of wetted polyethylene oxide are added to the paste, mixed and cooled.

Полученный препарат, представляющий собой стойкую нерасслаивающуюся суспензию, имеет следующую характеристику:
титр хламидоспор 1,0 ˙109 спор/мл,
биологическая эффективность 70% против корневых гнилей огурцов и томатов,
срок хранения до трех месяцев при температуре не выше 10оС.The resulting preparation, which is a persistent non-stratified suspension, has the following characteristic:
Chlamydospore titer 1.0 ˙ 10 9 spores / ml,
biological efficiency of 70% against root rot of cucumbers and tomatoes,
the shelf life of up to three months at a temperature not higher than 10 ° C

Получение препарата в сухом виде. Getting the drug dry.

В пасту (СВ 20%) добавляют 2,5 кг (10%) смеси цеолита NaX и монтмориллонита в соотношении 1:2, выдерживают при перемешивании для перераспределения влаги и пропускают через гранулятор ГР-75, гранулы высушивают, фасуют и маркируют. Add to the paste (CB 20%) 2.5 kg (10%) of a mixture of NaX zeolite and montmorillonite in a 1: 2 ratio, keep under stirring to redistribute moisture and pass through a GR-75 granulator, the granules are dried, packed and marked.

Полученный препарат представляет собой гранулы от светло-серого до темно-коричневого цвета, которые в процессе хранения и транспортирования не слеживаются. Биологическая эффективность препарата против корневых гнилей огурцов и томатов 65% титр хламидоспор 1,0˙109 спор/г.The resulting preparation is a granule from light gray to dark brown in color, which during storage and transportation do not cake. Biological effectiveness of the drug against root rot of cucumbers and tomatoes 65% titer of chlamydospores 1.0˙10 9 spores / g.

П р и м е р 2. Готовят 3,0 м3 стерильной питательной среды, содержащей, мас. Глицерин 2,0 Зеленая патока 0,5 Гидролизат БВК 10 Фосфаты 0,6 Сернокислый магний 0,3 Азотнокислый аммоний 0,3 Вода Остальное
Процесс культивирования и концентрирования осуществляют, как описано в примере 1, но в процессе культивирования при снижении рН культуральной жидкости до 4,5 вводят глицерин в количестве 0,3% длительность культивирования 3 сут.PRI me R 2. Prepare 3.0 m 3 sterile culture medium containing, by weight. Glycerin 2.0 Green molasses 0.5 BVK hydrolyzate 10 Phosphates 0.6 Magnesium sulfate 0.3 Ammonium nitrate 0.3 Water Else
The cultivation and concentration process is carried out as described in example 1, but in the process of cultivation with a decrease in the pH of the culture fluid to 4.5, glycerol is introduced in an amount of 0.3%, the cultivation duration is 3 days.

Из полученной культуральной жидкости готовят жидкий препарат триходермин, вводя в пасту 20 кг (10%) глицерина и 2 кг (1%) поливинилпироллидона. A trichodermin liquid preparation is prepared from the obtained culture fluid, introducing 20 kg (10%) of glycerol and 2 kg (1%) of polyvinylpyrrolidone into the paste.

Получают триходермин, представляющий собой устойчивую суспензию и имеющий следующую характеристику:
титр жизнеспособных хламидоспор 0,5 ˙108 спор/мл,
биологическая эффективность 70% против корневых гнилей огурцов и томатов.Get trichodermin, which is a stable suspension and having the following characteristic:
titer of viable chlamydospores 0.5 ˙ 10 8 spores / ml,
biological efficiency of 70% against root rot of cucumbers and tomatoes.

П р и м е р 3. Готовят 3,0 м3 стерильной питательной среды, содержащей, мас. Глицерин 1,5 Зеленая патока 2,5 Гидролизат БВК 3,0 Фосфаты 0,4 Сернокислый магний 0,4 Азотнокислый аммоний 0,5 Вода Остальное
Процесс культивирования и концентрирования осуществляют как описано в примере 2, но глицерин вводят при рН культуральной жидкости 3,0 в количестве 1,0% длительность культивирования составляет 5 сут.PRI me R 3. Prepare 3.0 m 3 sterile culture medium containing, by weight. Glycerin 1.5 Green molasses 2.5 BVK hydrolyzate 3.0 Phosphates 0.4 Magnesium sulfate 0.4 Ammonium nitrate 0.5 Water Else
The cultivation and concentration process is carried out as described in example 2, but glycerol is introduced at a pH of 3.0 culture fluid in an amount of 1.0%, the cultivation duration is 5 days.

Из полученной культуральной жидкости готовят сухой препарат как описано в примере 1, но в пасту вводят 15 кг (30%) смеси цеолита NaX и палыгорскита в соотношении 1:2. A dry preparation is prepared from the obtained culture fluid as described in Example 1, but 15 kg (30%) of a mixture of NaX zeolite and palygorskite are introduced into the paste in a ratio of 1: 2.

Биологическая эффективность препарата против корневых гнилей огурцов и томатов 75% титр хламидоспор 2 ˙109 спор/г.Biological effectiveness of the drug against root rot of cucumbers and tomatoes 75% titer of chlamydospores 2 ˙ 10 9 spores / g.

Как видно из приведенных примеров, предлагаемый способ позволяет увеличить содержание активного начала в сухом препарате с 0,8 ˙109 до 2 ˙109 спор/г и получать жидкий препарат, не уступающий по биологической активности сухому.As can be seen from the above examples, the proposed method allows to increase the content of active principle in a dry preparation from 0.8 × 10 9 to 2 × 10 9 spores / g and to obtain a liquid preparation that is not inferior in dry activity to biological.

Claims (3)

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИХОДЕРМИНА путем глубинного культивирования микроскопических грибов Trichoderma lignorum на питательной среде, содержащей источники углерода, органического азота, фосфаты, сернокислый магний, азотнокислый аммоний и воду, с последующим концентрированием культуральной жидкости, отличающийся тем, что в качестве источника углерода используют глицерин и зеленую патоку, в качестве источника органического азота - гидролизат белково-витаминного концентрата при следующем соотношении компонентов в среде, мас. 1. METHOD FOR PRODUCING TRIHODERMINE by deep cultivation of microscopic fungi Trichoderma lignorum in a nutrient medium containing carbon sources, organic nitrogen, phosphates, magnesium sulfate, ammonium nitrate and water, followed by concentration of the culture fluid, characterized in that glycerol and green molasses, as a source of organic nitrogen, a hydrolyzate of protein-vitamin concentrate in the following ratio of components in the medium, wt. Глицерин 0,3 2,0
Зеленая патока 0,5 3,0
Гидролизат белково-витаминного концентрата 3,0 10,0
Фосфаты 0,2 0,6
Сернокислый магний 0,3 0,5
Азотнокислый аммоний 0,3 0,6
Вода Остальное
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в процессе культивирования при естественном снижении pH культуральной жидкости до 3,0 4,5 дополнительно вводят глицерин в количестве 0,3 1 мас.Glycerin 0.3 2.0
Molasses green 0.5 3.0
Protein-vitamin concentrate hydrolyzate 3.0 10.0
Phosphates 0.2 0.6
Magnesium sulfate 0.3 0.5
Ammonium nitrate 0.3 0.6
Water Else
2. The method according to claim 1, characterized in that in the process of cultivation with a natural decrease in the pH of the culture fluid to 3.0 4.5 additionally enter glycerin in an amount of 0.3 to 1 wt. 3. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что культивирование гриба проводят до максимального накопления мицелиальной массы или спорообразования, концентрирование культуральной жидкости осуществляют до содержания сухих веществ 6 10% в концентрат вводят 4 10 мас. глицерина и 0,1 1,0 мас. полиэтиленоксида или 1 3 мас. поливинилпироллидона. 3. The method according to PP.1 and 2, characterized in that the cultivation of the fungus is carried out until the maximum accumulation of mycelial mass or spore formation, the concentration of the culture fluid is carried out to a solids content of 6 10%, 4 10 wt. glycerol and 0.1 to 1.0 wt. polyethylene oxide or 1 to 3 wt. polyvinylpyrrolidone. 4. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что культивирование гриба проводят до максимального спорообразования, концентрирование культуральной жидкости осуществляют до содержания сухих веществ 20 30% в концентрат вводят смесь цеолита типа NaX и монтмориллонита или полыгорскита в соотношении 1 2 в количестве 10 30% к сухим веществам, полученную смесь гранулируют и высушивают. 4. The method according to PP.1 and 2, characterized in that the cultivation of the fungus is carried out to the maximum spore formation, the concentration of the culture fluid is carried out to a solids content of 20-30%; a mixture of a zeolite of the NaX type and montmorillonite or polygorskite in a ratio of 1 2 in an amount of 10 is introduced into the concentrate 30% solids, the resulting mixture is granulated and dried.
RU9393000542A 1993-01-22 1993-01-22 Trichodermine productiuon method RU2035145C1 (en)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU9393000542A RU2035145C1 (en) 1993-01-22 1993-01-22 Trichodermine productiuon method
PCT/RU1994/000008 WO1994016566A1 (en) 1993-01-22 1994-01-21 Process for obtaining microbiological preparations for agricultural use, a production line for carrying this out and removable unit for deep culture of the microorganisms
AU58934/94A AU5893494A (en) 1993-01-22 1994-01-21 Process for obtaining microbiological preparations for agricultural use, a production line for carrying this out and removable unit for deep culture of the microorganisms

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU9393000542A RU2035145C1 (en) 1993-01-22 1993-01-22 Trichodermine productiuon method

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2035145C1 true RU2035145C1 (en) 1995-05-20
RU93000542A RU93000542A (en) 1996-07-10

Family

ID=20135267

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU9393000542A RU2035145C1 (en) 1993-01-22 1993-01-22 Trichodermine productiuon method

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2035145C1 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2534213C2 (en) * 2012-03-12 2014-11-27 Диана Ирековна Тазетдинова Method of obtaining biological preparation for protection of plants against phytopathogens and nematodes based on genus trichoderma fungus strain and biological preparation obtained thereof
RU2607785C2 (en) * 2015-06-03 2017-01-10 Филоненко Владимир Александрович Biological product for stimulating the growth of plants and their protection against phytopathogens on the basis of strains of trichoderma, strains of trichoderma for the production thereof (variants), method for producing a biological product on the basis of such strains
RU2658430C1 (en) * 2016-12-26 2018-06-21 Общество с ограниченной ответственностью "Органик парк" Method for obtaining a biological preparation for plant treatment

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
1. Авторское свидетельство СССР N 736925, кл. A 01N 63/00, 1978. *
2. Опытно-промышленный регламент на производство грибного препарата триходермин, (64-15-08-89), с.37-50. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2534213C2 (en) * 2012-03-12 2014-11-27 Диана Ирековна Тазетдинова Method of obtaining biological preparation for protection of plants against phytopathogens and nematodes based on genus trichoderma fungus strain and biological preparation obtained thereof
RU2607785C2 (en) * 2015-06-03 2017-01-10 Филоненко Владимир Александрович Biological product for stimulating the growth of plants and their protection against phytopathogens on the basis of strains of trichoderma, strains of trichoderma for the production thereof (variants), method for producing a biological product on the basis of such strains
RU2658430C1 (en) * 2016-12-26 2018-06-21 Общество с ограниченной ответственностью "Органик парк" Method for obtaining a biological preparation for plant treatment

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2194032B1 (en) Novel biological fertiliser, method for obtaining same and use thereof as a plant growth stimulator
US4551164A (en) Microbial plant growth promoter
CA2589857A1 (en) Stable microbial inoculants and methods for production of them
RU2322061C2 (en) Biopreparation for enhancing productivity of agricultural crops and improving quality of production
US3087865A (en) Process for making pesticidal compositions
US5089263A (en) Nematicidal strain of pseudomonas and its use as a biocontrol agent
CN111777464A (en) Biological agent for improving soil fertility and preparation method thereof
RU2035145C1 (en) Trichodermine productiuon method
CN1052711C (en) Biological organic compound fertilizer
CN104291928A (en) Microbial insecticide
WO1987002659A1 (en) Microbial plant growth promoter and yield enhancer
CN114875093B (en) Method for improving fermentation yield of PF1022A
AU2005223976B2 (en) Process for the production of granules or pellets containing filamentous fungi
RU2035144C1 (en) Method for production of entomopathogenic preparation
CN1046313C (en) Process for preparing swamp Rhodopseudomonas preparation and use
JPH0782066A (en) Organic fertilizer and its production
RU2817304C1 (en) Method of using strain bacillus pumilus ct2 (ebc/22-q1) together with mineral fertilizers and ameliorants to increase crop capacity and quality of crops
RU2077204C1 (en) Method of production of microbiological preparations
RU2130005C1 (en) Method for producing biofertilizer
RU1808255C (en) Nutritive medium for growing somatic structures of macroscopic fungi
SU282249A1 (en)
RU2081867C1 (en) Strain of bacterium bacillus mucilaginosus for fertilizer and exopolymer producing
RU2059727C1 (en) Plant growth regulating agent
RU2223650C1 (en) Method for manufacturing agricultural microbiological preparation and method for plant protection against diseases due to application of this preparation
CN114467977A (en) Insecticidal composite microbial composition suitable for drip irrigation facilities and application thereof