RU2035144C1 - Method for production of entomopathogenic preparation - Google Patents
Method for production of entomopathogenic preparation Download PDFInfo
- Publication number
- RU2035144C1 RU2035144C1 RU9393000541A RU93000541A RU2035144C1 RU 2035144 C1 RU2035144 C1 RU 2035144C1 RU 9393000541 A RU9393000541 A RU 9393000541A RU 93000541 A RU93000541 A RU 93000541A RU 2035144 C1 RU2035144 C1 RU 2035144C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- culture fluid
- concentrate
- preparation
- glycerol
- cultivation
- Prior art date
Links
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и касается производства средств защиты растений от вредителей, в частности способа получения грибных энтомопатогенных препаратов. The invention relates to agricultural microbiology and relates to the production of plant protection products against pests, in particular a method for producing fungal entomopathogenic preparations.
Известны способы получения энтомопатогенных препаратов путем глубинного культивирования микроскопических грибов, таких как Verticilium lecanii, Beauveria bassiana на питательных средах, содержащих источники углерода, азота и минеральные соли, с последующим концентрированием и сушкой концентрата [1]
Наиболее близким техническим решением к изобретению является способ получения энтомопатогенного препарата путем глубинного культивирования микроскопического гриба Verticillium lecanii на питательной среде, содержащей глицерин, гидролизат белково-витаминного концентрата, мел и воду, концентрирование культуральной жидкости, введение в концентрат естественного цеолита клиноптилолита, гранулирование смеси, высушивание и измельчение гранул [2]
Недостатком известного способа является сравнительно низкое содержание в препарате активного начала за счет сравнительно низкой влагосвязывающей способности используемого клиноптилолита.Known methods for producing entomopathogenic preparations by deep cultivation of microscopic fungi, such as Verticilium lecanii, Beauveria bassiana on nutrient media containing carbon, nitrogen and mineral salts, followed by concentration and drying of the concentrate [1]
The closest technical solution to the invention is a method for producing an entomopathogenic preparation by deep cultivation of the microscopic fungus Verticillium lecanii on a nutrient medium containing glycerin, a protein-vitamin concentrate hydrolyzate, chalk and water, concentrating the culture fluid, introducing clinoptilolite in the zeolite concentrate, granulating the mixture, drying and grinding of granules [2]
The disadvantage of this method is the relatively low content in the preparation of the active principle due to the relatively low moisture-binding ability of the clinoptilolite used.
Целью изобретения является повышение содержания активного начала в препарате, а также возможность использования единой технологии для разных видов микроскопических грибов и получения таких энтомопатогенных препаратов, как вертициллин, боверин и метаризин, как в жидком, так и сухом виде. The aim of the invention is to increase the content of the active principle in the preparation, as well as the possibility of using a single technology for different types of microscopic fungi and to obtain such entomopathogenic preparations as verticillin, boverin and metarizine, both in liquid and dry form.
Сущность способа заключается в следующем. The essence of the method is as follows.
Готовят стерильную питательную среду, содержащую, мас. Глицерин 0,3-2,0 Глюкоза 0,3-2,0 Гидролизат бел- ково-витамин- ного концентра- та (БВК) 8-10 Мел 0,3-0,8 Вода Остальное. Prepare a sterile growth medium containing, by weight. Glycerin 0.3-2.0 Glucose 0.3-2.0 Protein-vitamin concentrate hydrolyzate (BVK) 8-10 Chalk 0.3-0.8 Water The rest.
Засевают одним из штаммов грибов Verticillium Lecanii или Beauveria bassiana, или Metarrhizium anisopliae и культивируют при перемешивании и аэрации. При использовании штаммов грибов вида Metarrhizium anisopliae и Beauveria bassiana в среду дополнительно вносят фосфорнокислый калий в количестве 0,04-0,06%
В процессе культивирования при естественном снижении рН культуральной жидкости до 3,7-5,9 добавляют глицерин в количестве 0,3-1%
Культивирование осуществляют в течение 3-5 сут. до максимального спорообразования и достижения показателя коэффициента преломления 1,4-1,44.Inoculated with one of the strains of the fungus Verticillium Lecanii or Beauveria bassiana, or Metarrhizium anisopliae and cultivated with stirring and aeration. When using strains of fungi of the species Metarrhizium anisopliae and Beauveria bassiana, potassium phosphate in the amount of 0.04-0.06% is additionally added to the medium
In the process of cultivation with a natural decrease in the pH of the culture fluid to 3.7-5.9 add glycerin in an amount of 0.3-1%
Cultivation is carried out for 3-5 days. to the maximum spore formation and achievement of a refractive index of 1.4-1.44.
Полученную культуральную жидкость концентрируют. The resulting culture fluid was concentrated.
Для получения жидкого препарата в концентрат культуральной жидкости вводят 4-10% глицерина и 1-3% поливинилпироллидона или 0,1-1,0% полиэтиленоксида. To obtain a liquid preparation, 4-10% glycerol and 1-3% polyvinylpyrrolidone or 0.1-1.0% polyethylene oxide are introduced into the culture fluid concentrate.
Для получения сухого энтомопатогенного препарата в концентpат культуральной жидкости вводят смесь цеолита типа NaX и монтмориллонита или палыгорскита в соотношении 1:2 в количестве 10-30% к сухим веществам, полученную смесь гранулируют и высушивают. To obtain a dry entomopathogenic preparation, a mixture of NaX type zeolite and montmorillonite or palygorskite in a ratio of 1: 2 in the amount of 10-30% of solids is introduced into the culture fluid concentrate; the resulting mixture is granulated and dried.
П р и м е р 1. Готовят 3 м3 стерильной питательной среды, содержащей, мас. Глицерин 0,3 Глюкоза 2,0 Гидролизат БВК 10 Мел 0,8 Вода Остальное рН среды 6,7.PRI me R 1. Prepare 3 m 3 sterile nutrient medium containing, by weight. Glycerin 0.3 Glucose 2.0 Hydrolyzate BVK 10 Chalk 0.8 Water The rest of the pH of the medium is 6.7.
Засевают среду посевным материалом из расчета 3% от объема среды штамма гриба Verticillium lecanii N 9 и культивируют в ферментере объемом 5 м3 при аэрации и перемешивании. В процессе культивирования рН культуральной жидкости снижается и при достижении рН 5,9 в культуральную жидкость вводят стерильный глицерин в количестве 0,5% (15 кг на 3 м3) и продолжают культивировать до достижения значения коэффициента преломления культуральной жидкости 1,40.Inoculate the medium with inoculum at the rate of 3% of the medium volume of the strain of fungus Verticillium lecanii N 9 and cultivate in a 5 m 3 fermenter with aeration and stirring. During the cultivation process, the pH of the culture fluid decreases and when pH 5.9 is reached, sterile glycerol is introduced into the culture fluid in an amount of 0.5% (15 kg per 3 m 3 ) and cultivation is continued until the refractive index of the culture fluid reaches 1.40.
Получают культуральную жидкость с титром спор 1,5 ˙103 спор/мл.A culture liquid is obtained with a spore titer of 1.5 × 10 3 spores / ml.
По известному способу получают 0,9 ˙103 спор/мл.According to the known method receive 0.9 ˙ 10 3 spores / ml
Культуральную жидкость разделяют на две части, одну из которых используют для получения жидкого препарата, а другую сухого. The culture fluid is divided into two parts, one of which is used to obtain a liquid preparation, and the other dry.
Получение препарата в жидком виде. Getting the drug in liquid form.
Полученную культуральную жидкость концентрируют фильтрацией, получая 90 кг пасты, содержащей мицелий, остатки питательной среды и бластоспоры (титр 13˙109 спор/г).The resulting culture fluid is concentrated by filtration, obtaining 90 kg of paste containing mycelium, residues of the nutrient medium and blastospores (titer 13˙10 9 spores / g).
В пасту добавляют 10% (9 кг) глицерина и 0,1% (0,1 кг) смоченного полиэтиленоксида, перемешивают и охлаждают. 10% (9 kg) of glycerol and 0.1% (0.1 kg) of wetted polyethylene oxide are added to the paste, mixed and cooled.
Полученный энтомопатогенный препарат, представляющий собой стойкую нерасслаивающуюся суспензию, имеет следующую характеристику:
титр бластоспор 11˙109 спор/мл,
биологическая эффективность 80% на личинках оранжерейной белокрылки при рабочей концентрации 10 ˙106 спор/мл,
срок хранения до трех месяцев при температуре не выше 10оС.The resulting entomopathogenic preparation, which is a persistent non-stratified suspension, has the following characteristic:
blastospore titer 11˙10 9 spores / ml,
biological efficiency of 80% on the larvae of the greenhouse whitefly at a working concentration of 10 × 10 6 spores / ml,
the shelf life of up to three months at a temperature not higher than 10 ° C
Получение препарата в сухом виде. Getting the drug dry.
В пасту добавляют 3,4 кг (10%) смеси цеолита типа NaX и монтмориллонита в соотношении 1:2, выдерживают при перемешивании для перераспределения влаги и пропускают через гранулятор 2Р-75. Гранулы высушивают, фасуют и маркируют. 3.4 kg (10%) of a mixture of NaX-type zeolite and montmorillonite in a ratio of 1: 2 are added to the paste, kept under stirring to redistribute moisture and passed through a 2P-75 granulator. The granules are dried, packaged and labeled.
Полученный препарат представляет собой гранулы от светло-серого до темно-коричневого цвета, которые в процессе хранения и транспортирования не слеживаются. Биологическая эффективность препарата на личинках оранжерейной белокрылки 70% при рабочей концентрации 10 ˙106 спор/мл, число жизнеспособных спор 15 ˙109 спор/г.The resulting preparation is a granule from light gray to dark brown in color, which during storage and transportation do not cake. The biological effectiveness of the drug on the larvae of the greenhouse whitefly is 70% at a working concentration of 10 ˙ 10 6 spores / ml, the number of viable spores is 15 ˙ 10 9 spores / g.
П р и м е р 2. Получение энтомопатогенного препарата боверин. Готовят 3,0 м3 стерильной питательной среды, содержащей, мас. Глицерин 2 Глюкоза 0,3 Гидролизат БВК 8,0 Мел 0,3 Калий фосфорно- кислый 0,04 Вода Остальное
Засевают среду штаммов Beauveria bassiana 124/1. Процесс культивирования и концентрирования осуществляют как описано в примере 1, но глицерин вводят при рН культуральной жидкости 3,7 в количестве 1%
Полученную культуральную жидкость также разделяют на две части (по 100 кг). Получение жидкого препарата осуществляют, как описано в примере 1, но в пасту вводят 4 л (4%) глицерина и 1,0 кг смоченного поливинилпироллидона.PRI me R 2. Obtaining an entomopathogenic drug boverin. Prepare 3.0 m 3 sterile nutrient medium containing, by weight. Glycerin 2 Glucose 0.3 Hydrolyzate BVK 8.0 Chalk 0.3 Potassium phosphate 0.04 Water Else
The medium of Beauveria bassiana 124/1 strains is seeded. The process of cultivation and concentration is carried out as described in example 1, but glycerol is introduced at pH of the culture fluid 3.7 in the amount of 1%
The resulting culture fluid is also divided into two parts (100 kg each). The preparation of a liquid preparation is carried out as described in example 1, but 4 l (4%) of glycerol and 1.0 kg of wetted polyvinylpyrrolidone are introduced into the paste.
Получают энтомопатогенный препарат боверин, представляющий собой устойчивую суспензию и имеющий следующую характеристику:
титр жизнеспособных бластоспор 10 ˙109 спор/мл;
биологическая эффективность в рабочей концентрации 90% на трипсе и оранжерейной белокрылке.An entomopathogenic preparation of boverine is obtained, which is a stable suspension and having the following characteristic:
titer of viable blastospores 10 ˙ 10 9 spores / ml;
biological effectiveness at a working concentration of 90% on thrips and greenhouse whiteflies.
Для получения сухого препарата в пасту вносят смесь цеолита типа NaX и монтмориллонита в количестве 20%
Получают боверин в виде гранул от светло-серого до темно-коричневого цвета, которые в процессе хранения и транспортирования не слеживаются. Биологическая эффективность на трипсе в рабочей концентрации 85% (число жизнеспособных спор 8 ˙109 спор/г).To obtain a dry preparation, a mixture of a zeolite of the NaX type and montmorillonite in an amount of 20% is introduced into the paste
Boverin is obtained in the form of granules from light gray to dark brown in color, which do not cake during storage and transportation. The biological efficiency at thrips at a working concentration of 85% (the number of viable spores is 8 ˙ 10 9 spores / g).
П р и м е р 3. Готовят 3 м3 питательной среды, содержащей, мас. Глицерин 1,5 Глюкоза 1,5 Гидролизат БВК 9 Мел 0,6 Фосфорнокислый калий 0,06 Вода Остальное
Засев осуществляют штаммом Metarrhizium anisopliae N 2 (коллекция УкрНИЗР).PRI me R 3. Prepare 3 m 3 nutrient medium containing, by weight. Glycerin 1.5 Glucose 1.5 Hydrolyzate BVK 9 Chalk 0.6 Potassium phosphate 0.06 Water Else
Sowing is carried out with a strain of Metarrhizium anisopliae N 2 (UkrNIZR collection).
Процесс культивирования и концентрирования культуральной жидкости осуществляют, как описано в примере 1, но глицерин в процессе культивирования вводят при рН 5,0 в количестве 0,3% для получения жидкого препарата метаризина в пасту вводят 6% глицерина и 1,0% полиэтиленоксида, а для получения сухого препарата в пасту вводят смесь цеолита типа NaX и палыгорскита в количестве 30%
Жидкий препарат имеет следующую характеристику:
титр жизнеспособных бластоспор 2 ˙109 спор/мл,
биологическая эффективность в рабочей концентрации 85% на трипсе и оранжерейной белокрылке.The process of cultivation and concentration of the culture fluid is carried out as described in example 1, but glycerol is introduced in the process of cultivation at pH 5.0 in an amount of 0.3% to obtain a liquid preparation of metarizine, 6% glycerol and 1.0% polyethylene oxide are introduced into the paste, and to obtain a dry preparation, a mixture of a zeolite of the NaX type and palygorskite in an amount of 30% is introduced into the paste
A liquid preparation has the following characteristics:
titer of viable blastospores 2 × 10 9 spores / ml,
biological efficiency at a working concentration of 85% on thrips and greenhouse whiteflies.
Сухой препарат гранулы от светло-серого до темно-коричневого цвета, не слеживающиеся в процессе хранения и транспортирования; биологическая эффективность в рабочей концентрации 80% (на трипсе и оранжерейной белокрылке), титр жизнеспособных бластоспор 2 ˙109 спор/г.Dry preparation granules from light gray to dark brown, not caking during storage and transportation; biological efficiency at a working concentration of 80% (on thrips and greenhouse whiteflies), titer of viable blastospores 2 ˙ 10 9 spores / g.
П р и м е р 4. Готовят 3 м3 питательной среды, содержащей, мас. Глицерин 1,8 Глюкоза 0,5 Гидролизат БВК 9 Мел 0,5 Фосфорнокислый калий 0,05 Вода Остальное
Засев производят штаммом гриба Beauveria bassiana N 124/1.PRI me R 4. Prepare 3 m 3 nutrient medium containing, by weight. Glycerin 1.8 Glucose 0.5 Hydrolyzate BVK 9 Chalk 0.5 Potassium phosphate 0.05 Water Else
Inoculation is performed with a strain of the fungus Beauveria bassiana N 124/1.
Процесс культивирования и концентрирования культуральной жидкости осуществляют, как описано в примере 1, но глицерин в процессе культивирования вводят при рН 4,2 в количестве 0,4% для получения жидкого препарата боверина в пасту вводят 8% глицерина и 3% поливинилпироллидона, а для получения сухого препарата вводят смесь цеолита типа NaX и палыгорскита в количестве 15%
Жидкий препарат имеет следующую характеристику:
титр жизнеспособных бластоспор 11 ˙109 спор/мл,
биологическая эффективность в рабочей концентрации 90% на трипсе и оранжерейной белокрылке.The process of culturing and concentrating the culture fluid is carried out as described in example 1, but glycerol is introduced during cultivation at pH 4.2 in an amount of 0.4% to obtain a liquid preparation of boverin, 8% glycerol and 3% polyvinylpyrrolidone are introduced into the paste, and to obtain a dry preparation is introduced a mixture of zeolite type NaX and palygorskite in an amount of 15%
A liquid preparation has the following characteristics:
titer of viable blastospores 11 ˙ 10 9 spores / ml,
biological effectiveness at a working concentration of 90% on thrips and greenhouse whiteflies.
Сухой препарат гранулы от светло-серого до темно-коричневого цвета, не слеживается в процессе хранения и транспортирования;
биологическая эффективность в рабочей концентрации 85% на трипсе и оранжерейной белокрылке, титр жизнеспособных бластоспор 9 ˙109 спор/г.Dry preparation of granules from light gray to dark brown, does not cake during storage and transportation;
biological efficiency at a working concentration of 85% on thrips and greenhouse whitefly, viable blastospore titer 9 ˙ 10 9 spores / g.
Claims (4)
Глицерин 0,3 2,0
Гидролизат белково-витаминного концентрата 8 10
Мел 0,3 0,8
Вода Остальное
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что из микроскопических грибов используют один из видов грибов Verticillium lecanii, Beauveria bassiana или Metarrhizium anisopliae.Glucose 0.3 2.0
Glycerin 0.3 2.0
Protein-vitamin concentrate hydrolyzate 8 10
Chalk 0.3 0.8
Water Else
2. The method according to claim 1, characterized in that one of the species of fungi Verticillium lecanii, Beauveria bassiana or Metarrhizium anisopliae is used from microscopic fungi.
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU9393000541A RU2035144C1 (en) | 1993-01-22 | 1993-01-22 | Method for production of entomopathogenic preparation |
PCT/RU1994/000008 WO1994016566A1 (en) | 1993-01-22 | 1994-01-21 | Process for obtaining microbiological preparations for agricultural use, a production line for carrying this out and removable unit for deep culture of the microorganisms |
AU58934/94A AU5893494A (en) | 1993-01-22 | 1994-01-21 | Process for obtaining microbiological preparations for agricultural use, a production line for carrying this out and removable unit for deep culture of the microorganisms |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU9393000541A RU2035144C1 (en) | 1993-01-22 | 1993-01-22 | Method for production of entomopathogenic preparation |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2035144C1 true RU2035144C1 (en) | 1995-05-20 |
RU93000541A RU93000541A (en) | 1996-06-10 |
Family
ID=20135266
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU9393000541A RU2035144C1 (en) | 1993-01-22 | 1993-01-22 | Method for production of entomopathogenic preparation |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2035144C1 (en) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2487542C2 (en) * | 2011-10-21 | 2013-07-20 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений Российской академии сельскохозяйственных наук | Entomopathogenic biopreparation for protecting plants from pests and method for preparation thereof |
RU2539025C1 (en) * | 2013-07-08 | 2015-01-10 | Общество с ограниченной ответственностью Малое инновационное предприятие "Кубанские агротехнологии" | Agent for microbiological protection of plants and method of microbiological protection of plants using this agent |
RU2581929C2 (en) * | 2014-05-07 | 2016-04-20 | Общество с ограниченной ответственностью "ФУНГИПАК" | Biologically active preparation for protecting plants from pests, production method thereof, microcontainer for said preparation, method of making same and method of protecting plants from pests |
-
1993
- 1993-01-22 RU RU9393000541A patent/RU2035144C1/en active
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
1. Тезисы докладов на Всесоюзной конференции "Проблемы создания и применения микробиологических средств защиты растений", Велигож, 1989, с.206-210. * |
2. Опытно-промышленный регламент на производство инсектицидного препарата вертициллин сухой, (64-15-07-89) БС -36/90, с.47-59. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2487542C2 (en) * | 2011-10-21 | 2013-07-20 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений Российской академии сельскохозяйственных наук | Entomopathogenic biopreparation for protecting plants from pests and method for preparation thereof |
RU2539025C1 (en) * | 2013-07-08 | 2015-01-10 | Общество с ограниченной ответственностью Малое инновационное предприятие "Кубанские агротехнологии" | Agent for microbiological protection of plants and method of microbiological protection of plants using this agent |
RU2581929C2 (en) * | 2014-05-07 | 2016-04-20 | Общество с ограниченной ответственностью "ФУНГИПАК" | Biologically active preparation for protecting plants from pests, production method thereof, microcontainer for said preparation, method of making same and method of protecting plants from pests |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Häggström et al. | Calcium alginate immobilized cells of Clostridium acetobutylicum for solvent production | |
CN100485027C (en) | Method for producing D-lactic acid and spore lactobacillus special for the same | |
US3087865A (en) | Process for making pesticidal compositions | |
JPS6137919B2 (en) | ||
EP0051637A1 (en) | Liquid culturing of sporulating, ectomycorrhizal fungi | |
EP0354491A2 (en) | Nematicidal microorganisms, their isolation and their use as bionemacides | |
RU2035144C1 (en) | Method for production of entomopathogenic preparation | |
CN110218713A (en) | A method of it improving Penicillium citrinum and produces nuclease P 1 enzyme activity | |
Burkholder | Synthesis of riboflavin by a yeast | |
CN1162536C (en) | Preservation method for live bacterial preparation | |
Jain et al. | Production of propionic acid from whey ultrafiltrate by immobilized cells of Propionibacterium shermanii in batch process | |
RU2035145C1 (en) | Trichodermine productiuon method | |
Calderone et al. | Axenic growth and nutrition of Gonatobotryum fuscum | |
CN105441336B (en) | A method of it effectively prevent filamentous fungi to degenerate and restore to produce spore | |
RU93000541A (en) | METHOD OF OBTAINING ENTOMOPATHOGEN PREPARATION | |
CN103881922A (en) | Method for harvesting microalgae by using microorganism flocculant | |
Fermor | Agaricus macrosporus: an edible fungus with commercial potential | |
CN108823132B (en) | Method for prolonging preservation time of liquid photosynthetic bacteria product | |
SU810180A1 (en) | Nutrient medium for cultivating beauveria bassianu(bals) vuill | |
US3783102A (en) | Production of l-asparaginase | |
SU883177A1 (en) | Panus tigrinus (fr.) sing ibk-131 strain biomass producent | |
CN1648242A (en) | Permeable cell trehalose synthease and its preparation and use | |
SU1544803A1 (en) | Strain of rhadotorula glutinis yeast used for feeding hydrobionts | |
SU313531A1 (en) | METHOD OF OBTAINING ENTOMOPATHOGENIC MATERIAL OF THE BREADIA BASSiANA MUSHROOM | |
SU1033543A1 (en) | Method for preparing mannite |