RU2022008C1 - Method of preparing of base for nutrient media for microorganism growing - Google Patents
Method of preparing of base for nutrient media for microorganism growing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2022008C1 RU2022008C1 SU4842401A RU2022008C1 RU 2022008 C1 RU2022008 C1 RU 2022008C1 SU 4842401 A SU4842401 A SU 4842401A RU 2022008 C1 RU2022008 C1 RU 2022008C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- medium
- nutrient medium
- water
- base
- nutrient
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к общей и медицинской микробиологии, а именно получению питательной среды для выращивания микроорганизмов. Оно может быть использовано в научно-исследовательской и практической работе как для выделения и культивирования микроорганизмов, так и для накопления их биомассы в крупнотоннажных промышленных масштабах. The invention relates to general and medical microbiology, namely, to obtain a nutrient medium for growing microorganisms. It can be used in research and practical work both for the isolation and cultivation of microorganisms, and for the accumulation of their biomass on a large-scale industrial scale.
Выделение микроорганизмов из объектов среды, получение их биомассы осуществляют на питательных средах. В зависимости от происхождения среды подразделяют на сложные непостоянного состава - мясопептонный бульон (МПБ), картофельная среда и др. и синтетические среды постоянного состава, питательные компоненты которых вводятся в определенную среду строго по прописи (Дж. Мейнел, Э.Мейнел, 1967). Isolation of microorganisms from environmental objects, obtaining their biomass is carried out on nutrient media. Depending on the origin of the medium, they are subdivided into complex, variable composition - meat and peptone broth (MPB), potato medium, etc. and synthetic medium of constant composition, the nutrient components of which are introduced into a certain medium strictly according to the recipe (J. Meinel, E. Meinel, 1967).
Сложные среды непостоянного состава более полно по сравнению с искусственными удовлетворяют трофическим потребностям растущих микроорганизмов, т. к. они содержат практически все необходимые для клеток вещества (белки, аминокислоты, нуклеиновые кислоты, минеральные компоненты и т.п.), находящиеся в легкодоступной форме. Именно на таких средах растут условно-патогенные и патогенные микроорганизмы, обусловливающие инфекционно-воспалительные процессы различной локализации у человека и животных. К таким средам прежде всего относится мясопептонный бульон, который готовится прибавлением к мясной воде 1% пептона и 0,5% хлористого натрия с последующим кипячением 20 мин при помешивании. рН среды устанавливают добавлением щелочи (10% -ный раствор едкого натра) до 7,6-7,8. Для стабилизации рН рекомендуют добавлять к бульону фосфатные буферные смеси с последующим кипячением среды 35-45 мин до выделения осадка. Затем среду фильтруют, доливают водой до первоначального объема и стерилизуют в автоклаве при 120оС (1 атм) в течение 15-20 мин. На основе МПБ готовится ряд сред специального назначения. Мясная вода готовится из дорогостоящего дефицитного пищевого сырья - обезжиренной высокосортной телятины или говядины. (Пяткин К.Д. и соавт. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии. М.; Медицина, 1969, с. 62)
В силу этого среды, приготовленные на основе МПБ как правило дефицитны даже для лабораторных исследований. Практически нереально применять эти среды для получения микробной биомассы в крупнотоннажном процессе. Помимо МБП в медицинской микробиологии используют питательные среды, основой которых является триптический перевар или настой бычьих сердец (Скрипаль И.Г., Малиновская Л. П. , 1984). Обогащенные добавками (лошадиной сывороткой и дрожжевым экстратом) эти среды используют для выделения микоплазм, уреаплазм Л-форм бактерий - микроорганизмов, вызывающих заболевания человека и животных и не растущих на каких-либо других питательных средах.Complicated media of variable composition more fully than the artificial ones satisfy the trophic needs of growing microorganisms, since they contain almost all the substances necessary for cells (proteins, amino acids, nucleic acids, mineral components, etc.), which are in an easily accessible form. It is on such media that conditionally pathogenic and pathogenic microorganisms grow, causing infectious and inflammatory processes of different localization in humans and animals. Meat peptone broth, which is prepared by adding 1% peptone and 0.5% sodium chloride to meat water, followed by boiling for 20 minutes with stirring, is primarily referred to such media. The pH of the medium is adjusted by adding alkali (10% sodium hydroxide solution) to 7.6-7.8. To stabilize the pH, it is recommended to add phosphate buffer mixtures to the broth, followed by boiling the medium for 35-45 min until a precipitate is formed. The medium is then filtered, made up with water to the original volume and sterilized by autoclaving at 120 ° C (1 atm) for 15-20 min. Based on the BCH, a number of special-purpose media are being prepared. Meat water is prepared from expensive scarce food raw materials - low-fat high-quality veal or beef. (Pyatkin KD et al. Guide to practical exercises in medical microbiology. M; Medicine, 1969, p. 62)
Due to this environment, prepared on the basis of the BCH as a rule are scarce even for laboratory research. It is practically unrealistic to use these media to obtain microbial biomass in a large-capacity process. In addition to MBP in medical microbiology, nutrient media are used, the basis of which is tryptic digest or infusion of bovine hearts (Skripal I.G., Malinovskaya L.P., 1984). Enriched with additives (horse serum and yeast extract), these media are used to isolate mycoplasmas, ureaplasmas of L-forms of bacteria - microorganisms that cause diseases in humans and animals and do not grow on any other nutrient media.
Описаны способы приготовления питательной среды из свежей плаценты (Отраслевое рационализаторское предложение N 423 от 11 мая 1986 г. "Питательная среда для выделения и культивирования урогенитальных уреаплазм"). Несмотря на высокую чувствительность питательной среды, вряд ли она может найти широкое внедрение, т.к. плацента - ценное сырье для косметической промышленности. Describes how to prepare a nutrient medium from fresh placenta (Sector rationalization proposal N 423 dated May 11, 1986, "Nutrient medium for isolation and cultivation of urogenital ureaplasmas"). Despite the high sensitivity of the nutrient medium, it is unlikely to find widespread use, because placenta is a valuable raw material for the cosmetics industry.
Известны способы получения питательных сред, близких по качеству к МПБ, но получаемых из дешевых субстратов. Так, для производства биомассы сапрофитного микроорганизма Вас. subticis получают питательную среду на основе сусла, а также среду, содержащую минеральную основу и органические источники питания, из гидролизата вермикулитовой подстилки, применяемой на птицефабриках (авт.св. 1124029). Однако в настоящее время птицефабрики отказались от применения вермикулитовых подстилок, применяя более прогрессивный способ содержания птиц в клетках, исключающий использование каких-либо подстилок, а среда на основе сусла бедна на питательные элементы для многих групп микроорганизмов. Known methods for producing culture media similar in quality to BCH, but obtained from cheap substrates. So, for the production of biomass saprophytic microorganism you. subticis receive a wort-based nutrient medium, as well as a medium containing a mineral base and organic food sources, from the vermiculite litter hydrolyzate used in poultry farms (ed. St. 1124029). However, poultry farms have abandoned the use of vermiculite litter, using a more advanced way of keeping birds in their cages, which excludes the use of any litter, and the wort-based medium is poor in nutrients for many groups of microorganisms.
Наиболее близкой к изобретению по технической сущности является питательная среда на основе помета птиц, которая подвергается анаэробной бактериальной ферментации с доведением количества аммиака в ней как источника азота до 0,4-2,2%. Приготовленная таким образом питательная среда использовалась для культивирования дрожжей. (Дик Питер Хенри, Патент Австралии N 75824 СО 767/00 А 23,1/18, А 23 К 1/00, 1976). В известном решении среда избрана в качестве прототипа как наиболее близкая по сущности к заявляемому объекту. The closest to the invention in technical essence is a nutrient medium based on bird droppings, which is subjected to anaerobic bacterial fermentation with bringing the amount of ammonia in it as a source of nitrogen to 0.4-2.2%. The culture medium thus prepared was used to cultivate the yeast. (Dick Peter Henry, Australian Patent N 75824 CO 767/00 A 23.1 / 18, A 23 K 1/00, 1976). In a well-known solution, the medium is chosen as a prototype as the closest in essence to the claimed object.
Недостатком этой питательной среды является то, что в среде на основе помета птиц в достаточном количестве присутствуют только жирные кислоты (уксусная, пропионовая, масляная, валериановая) и в недостаточном количестве для выделения и культивирования многих групп микроорганизмов присутствуют белки, аминокислоты, витамины. Это существенно снижает возможности использования данной среды для выделения и культивирования разных групп микроорганизмов. The disadvantage of this nutrient medium is that only fatty acids (acetic, propionic, butyric, valerianic) are present in an environment based on bird droppings, and proteins, amino acids, and vitamins are present in insufficient quantities for the isolation and cultivation of many groups of microorganisms. This significantly reduces the possibility of using this medium for the isolation and cultivation of different groups of microorganisms.
Цель изобретения - повышение эффективности питательной среды путем повышения ее чувствительности, позволяющей выделять и выращивать на ней микроорганизмы различного таксономического положения, которая стимулирует рост и повышает их жизнеспособность, а также получать в промышленных масштабах биомассу микробных культур при значительном снижении ее себестоимости. The purpose of the invention is to increase the efficiency of the nutrient medium by increasing its sensitivity, allowing to isolate and grow microorganisms of different taxonomic position on it, which stimulates growth and increases their viability, as well as obtain biomass of microbial crops on an industrial scale with a significant reduction in its cost.
Цель достигается тем, что в качестве исходного питательного сырья используют помет домашней птицы после следующей обработки: помет соединяют с водой при содержании 50-100 г его в 1 л воды. Полученную смесь подвергают аэробному брожению при 28-40оС в течение 48 ч, а затем подвергают анаэробному сбраживанию при 60оС в метантенке. Время анаэробного сбраживания 3-5 сут. Твердую часть среды отделяют центрифугированием, жидкую фракцию разливали в стеклянную посуду и стерилизуют 30 мин при 0,5 атм. Разлитая и простерилизованная жидкая фракция являлась питательной средой для выделения и культивирования микроорганизмов различных таксономических групп, в том числе микоплазм, уреплазм, Л-форм бактерий. С целью получения твердой питательной среды к жидкой фракции добавляют агар, причем концентрации этого желирующего реагента могут быть ниже применяемых для изготовления МПА. Например, если для создания твердой среды на основе МПБ необходимо добавить 2 г/л агар-агара, то аналогичное по плотности желирование на основе предлагаемой питательной основы осуществляется при добавлении на 1 л 1,3-1,5 г/л агара. Химический состав предложенной универсальной питательной среды приведен в табл. 1. Для сравнения приведен состав компонентов среды на основе среды, полученной при анаэробном сбраживании помета (среда по прототипу), и предлагаемой универсальной питательной среды.The goal is achieved by the fact that poultry manure is used as the initial nutritious raw material after the following treatment: the manure is combined with water at a content of 50-100 g of it in 1 liter of water. The resulting mixture is subjected to aerobic fermentation at 28-40 ° C for 48 hours and then subjected to anaerobic digestion at 60 ° C in a digester. Anaerobic digestion time 3-5 days. The solid part of the medium is separated by centrifugation, the liquid fraction was poured into a glass dish and sterilized for 30 min at 0.5 atm. The spilled and sterilized liquid fraction was a nutrient medium for the isolation and cultivation of microorganisms of various taxonomic groups, including mycoplasmas, ureplasmas, and L-forms of bacteria. In order to obtain a solid nutrient medium, agar is added to the liquid fraction, and the concentrations of this gelling reagent may be lower than those used for the manufacture of MPA. For example, if in order to create a solid medium based on MPB, it is necessary to add 2 g / l agar-agar, then a gelation similar in density based on the proposed nutrient base is carried out by adding 1.3-1.5 g / l agar per 1 l. The chemical composition of the proposed universal nutrient medium is given in table. 1. For comparison, the composition of the components of the medium based on the environment obtained by anaerobic digestion of litter (environment prototype), and the proposed universal nutrient medium.
Анализ данных табл.1 свидетельствует о том, что разработанная универсальная питательная среда является обогащенной, ценными питательными элементами (витаминами, аминокислотами и другими) для микроорганизмов. An analysis of the data in Table 1 indicates that the developed universal nutrient medium is enriched with valuable nutrients (vitamins, amino acids, and others) for microorganisms.
П р и м е р 1. Для получения среды с концентрацией компонентов, лимитирующих рост микробных культур, в колбу с 1 л водопроводной воды вносили 50 г исходного помета с влажностью 70%. Содержимое колбы тщательно перемешивали и подвергали анаэробному сбраживанию при 30оС в течение 48 ч на качалках (160 об/мин). Затем содержимое колбы продували 5 мин инертным газом (аргоном) и в колбу вносили термофильную анаэробную метаногенную ассоциацию (100 мл инокумма на 1 л среды), после чего проводили анаэробное сбраживание помета при 60оС в термостате. Время анаэробного сбраживания составляло 30 сут. Затем твердую часть отделяли центрифугированием, жидкую фракцию разливали в посуду и стерилизовали 30 мин при 0,5 атм. На полученной таким образом питательной среде культивировали различные виды микроорганизмов. Накопление их биомассы на этой среде представлено в табл.2.Example 1. To obtain a medium with a concentration of components that limit the growth of microbial cultures, 50 g of the initial litter with a humidity of 70% was introduced into a flask with 1 liter of tap water. The flask contents were thoroughly mixed and subjected to anaerobic digestion at 30 ° C for 48 hours on a shaker (160 rev / min). Then, the contents of the flask was purged 5 minutes with an inert gas (argon) and the flask was added thermophilic anaerobic methanogenic association (100 ml inokumma to 1 liter of medium), which was followed by anaerobic digestion litter at 60 ° C in a thermostat. Anaerobic digestion time was 30 days. Then the solid part was separated by centrifugation, the liquid fraction was poured into the dishes and sterilized for 30 min at 0.5 atm. Various types of microorganisms were cultivated on the nutrient medium thus obtained. The accumulation of their biomass in this medium is presented in Table 2.
П р и м е р 2. Для получения среды с концентрацией компонентов среды, обеспечивающих оптимальный рост микробных культур, в колбу с 1 л водопроводной воды вносили 75 г исходного помета с влажностью 70%. Последующие операции по получению питательной среды проводили аналогично примеру 1. Накопление биомассы различных микробных культур на приготовленной среде представлено в табл.2. PRI me R 2. To obtain a medium with a concentration of medium components that ensure optimal growth of microbial cultures, 75 g of the initial litter with a humidity of 70% was introduced into the flask with 1 l of tap water. Subsequent operations to obtain a nutrient medium was carried out analogously to example 1. The accumulation of biomass of various microbial cultures on the prepared medium is presented in table 2.
П р и м е р 3. Для получения среды с максимально допустимой концентрацией компонентов среды в колбу с 1 л водопроводной воды вносили 100 г исходного помета с влажностью 70%. Последующие операции по получению питательной среды проводили аналогично примеру 1. Накопление биомассы различных микробных культур на приготовленной среде представлено в табл.2. Example 3. To obtain a medium with the maximum allowable concentration of medium components, 100 g of the initial litter with a humidity of 70% was introduced into a flask with 1 liter of tap water. Subsequent operations to obtain a nutrient medium was carried out analogously to example 1. The accumulation of biomass of various microbial cultures on the prepared medium is presented in table 2.
П р и м е р 4. Для получения среды с ингибирующими концентрациями компонентов среды в колбу с 1 л водопроводной воды вносили 100 г исходного помета с влажностью 70% . Последующие операции по получению питательной среды проводили аналогично примеру 1. Накопление биомассы различных микробных культур на приготовленной среде представлено в табл.2. PRI me R 4. To obtain a medium with inhibitory concentrations of the components of the medium in a flask with 1 l of tap water was introduced 100 g of the original litter with a humidity of 70%. Subsequent operations to obtain a nutrient medium was carried out analogously to example 1. The accumulation of biomass of various microbial cultures on the prepared medium is presented in table 2.
Следовательно, как видно из табл.2, можно заключить, что минимально допустимая концентрация помета для приготовления среды 50 г/л воды. Значения менее 50 г/л воды будут лимитирующими. Оптимальная концентрация помета для приготовления питательной среды 75 г/л воды. Максимально допустимая 100 г/л воды. Therefore, as can be seen from table 2, we can conclude that the minimum allowable concentration of litter for the preparation of the environment is 50 g / l of water. Values less than 50 g / l of water will be limiting. The optimal concentration of litter for the preparation of a nutrient medium 75 g / l of water. The most admissible 100 g / l of water.
Как ранее было показано, разработанная основа питательной среды является обогащенной ценными питательными элементами для микроорганизмов (табл. 1). As previously shown, the developed basis of the nutrient medium is enriched with valuable nutrients for microorganisms (Table 1).
В подтверждение вышесказанного приводятся данные по накоплению биомассы различных микроорганизмов на основе из помета по прототипу и заявляемой питательной среде (табл.3, 4). In support of the above, data on the accumulation of biomass of various microorganisms based on the litter of the prototype and the claimed nutrient medium are given (Tables 3, 4).
Практически все изученные культуры в течение 48 ч роста накапливали до 1 г и более клеточной биомассы. Наращивание биомассы проводили в 0,5 литровых колбах на качалках (160 об/мин) при температуре 28-30оС, а также в условиях непрерывного культивирования в ферментерах типа АНКУМ-2 и АК-10. Как видно из данных, представленных в табл.2 и 3, на разработанной питательной среде отмечен наиболее активный рост как условно-патогенных микроорганизмов, так и сапрофитных, получаемых в промышленном масштабе. Достигнутый эффект объясняется наличием в предлагаемой питательной среде значительного количества витаминов, микроэлеметов, аминокислот и других ростовых факторов. Все выросшие на предлагаемой среде культуры микроорганизмов были морфологически идентичны исходным культурам и не имели каких-либо различий при идентификации по биохимическим свойствам.Almost all studied cultures accumulated up to 1 g or more of cell biomass during 48 h of growth. Capacity biomass was conducted in 0.5 liter flasks on a shaker (160 rev / min) at a temperature of 28-30 ° C, and under conditions of continuous culture in fermentors ANKUM type-2 and AC-10. As can be seen from the data presented in Tables 2 and 3, on the developed nutrient medium, the most active growth of both opportunistic microorganisms and saprophytic obtained on an industrial scale was noted. The achieved effect is explained by the presence in the proposed nutrient medium of a significant amount of vitamins, microelements, amino acids and other growth factors. All cultures of microorganisms grown on the proposed medium were morphologically identical to the original cultures and did not have any differences when identified by biochemical properties.
На полученной среде можно выделять также микроорганизмы, не имеющие стабильной клеточной стенки микоплазмы, уреаплазмы, что позволяет применять ее для диагностики воспалительных заболеваний, микробного происхождения, человека и животных. При выделении микоплазм для подавления сопутствующей микрофлоры использовали ацетат калия, пенициллин, а в качестве индикатора фенолрот. On the resulting medium, it is also possible to isolate microorganisms that do not have a stable cell wall of mycoplasma, ureaplasma, which allows it to be used to diagnose inflammatory diseases, microbial origin, humans and animals. When mycoplasmas were isolated, potassium acetate, penicillin were used to suppress concomitant microflora, and phenolroth was used as an indicator.
Таким образом, получена из отходов птицефабрик (помет домашней птицы) жидкая фракция, которую после комбинированной обработки путем аэробного и анаэробного сбраживания, можно использовать как органоминеральную питательную среду для выращивания микроорганизмов различных таксономических групп. Thus, a liquid fraction was obtained from waste from poultry farms (poultry litter), which, after combined treatment by aerobic and anaerobic digestion, can be used as an organomineral nutrient medium for growing microorganisms of various taxonomic groups.
Использование этого сырья для получения питательной среды с целью организации крупнотоннажного наращивания практически ценных микробных культур позволяет организовать безотходное производство птиц и животных, значительно улучшить экологическую обстановку на животноводческих комплексах и осуществить экономию ценного и дорогостоящего пищевого сырья - мяса крупного рогатого скота. The use of this raw material for obtaining a nutrient medium with the aim of organizing large-scale building up of practically valuable microbial cultures makes it possible to organize waste-free production of birds and animals, significantly improve the ecological situation at livestock breeding complexes and save valuable and expensive food raw materials - cattle meat.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4842401 RU2022008C1 (en) | 1990-04-24 | 1990-04-24 | Method of preparing of base for nutrient media for microorganism growing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4842401 RU2022008C1 (en) | 1990-04-24 | 1990-04-24 | Method of preparing of base for nutrient media for microorganism growing |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2022008C1 true RU2022008C1 (en) | 1994-10-30 |
Family
ID=21522674
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU4842401 RU2022008C1 (en) | 1990-04-24 | 1990-04-24 | Method of preparing of base for nutrient media for microorganism growing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2022008C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2627874C2 (en) * | 2010-06-11 | 2017-08-14 | Дво, Инк. | Systems and methods of extracting nutritive substances |
| DE202022100365U1 (en) | 2021-04-06 | 2022-02-28 | Geofert Llc | Bacterial biopreparation and granules based on it |
-
1990
- 1990-04-24 RU SU4842401 patent/RU2022008C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Патент Австралии N 475824, кл. C 07G 7/00, опублик. 1975. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2627874C2 (en) * | 2010-06-11 | 2017-08-14 | Дво, Инк. | Systems and methods of extracting nutritive substances |
| DE202022100365U1 (en) | 2021-04-06 | 2022-02-28 | Geofert Llc | Bacterial biopreparation and granules based on it |
| DE102021108535A1 (en) | 2021-04-06 | 2022-10-06 | Geofert Llc | Bacterial biopreparation, process for its production and use |
| EP4083188A1 (en) | 2021-04-06 | 2022-11-02 | Geofert LLC | Bacterial bioproduct, method for its manufacture and application |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105039195A (en) | Cellulase producing bacteria and application thereof | |
| CN112760274B (en) | Organic solid waste high-temperature aerobic composting strain and application thereof | |
| CN110607261A (en) | Bacillus cereus capable of efficiently degrading feathers and application thereof | |
| RU2580028C1 (en) | Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella | |
| CN1416719A (en) | Beneficient microbe feed additive and its prepn | |
| CN110982711B (en) | Method for open production of trichoderma solid strain | |
| RU2022008C1 (en) | Method of preparing of base for nutrient media for microorganism growing | |
| CN107058181B (en) | Bacillus subtilis and separation method and application thereof | |
| RU2687023C1 (en) | Pediococcus pentosaceus strain for processing organic wastes and a preparation based thereon | |
| JPS59227294A (en) | Pseudomonas microorganism and use thereof | |
| CN109609384A (en) | One chlorella Chlorella sorokinianaTX and its high density fast culture process | |
| RU2745093C1 (en) | Methylococcus capsulatus bf 19-07 methane-oxidizing bacteria strain - producer for obtaining microbial protein mass | |
| CN112094777B (en) | Lactobacillus plantarum and application thereof in Laoshan milk goat feed | |
| RU2518282C1 (en) | Nutrient medium for submerged cultivation of tularemia microbe | |
| CN112342160A (en) | Lactobacillus plantarum and application thereof in pet dog food | |
| CN1312273C (en) | Additive for photosyntheric bacterial culture medium | |
| RU2541454C1 (en) | Nutrient culture medium for swine erysipelas strain erysipelothrix rhuisipathie | |
| JPH0233352B2 (en) | ||
| Vuori et al. | Fermentation of poultry manure for poultry diets | |
| RU2055823C1 (en) | Method of avian dung biological processing | |
| CN117106676B (en) | Bacillus subtilis and application thereof in feed production | |
| RU2298031C2 (en) | Actinomyces fradiae STRAIN FOR REPROCESSING OF ORGANIC WASTE FROM ANIMAL AND POULTRY BREEDING | |
| RU2729389C1 (en) | Method of producing a nutrient base of media for extracting and cultivating legionella | |
| CN114657076A (en) | Preparation quality inspection method of tryptophan microecological preparation and application of microecological preparation | |
| Жаппарбергенова et al. | Study of local strains of enzymatic microflora of green biomass and of microalgae obtained from natural local sources |