RU2021132744A - Способ получения однонуклеотидных молекулярных маркеров для идентификации неизвестного индивида методом мультиплексной амплификации для работы с образцами деградированной ДНК - Google Patents

Claims (9)

1. Способ получения молекулярных однонуклеотидных маркеров для идентификации неизвестного индивида методом мультиплексной амплификации для работы с образцами деградированной ДНК, характеризующийся тем, что для генотипирования используют композицию из 95 пар оригинальных синтетических олигонуклеотидных праймеров для проведения мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР), фланкирующих участки ДНК, содержащие однонуклеотидные вариации (SNP), выбранных из группы SEQ ID NO: 1-SEQ ID NO: 190, представленных в Табл.1; ПЦР-продукты, соответствующие выбранным праймерам, представляют собой маркеры.

2. Способ идентификации неизвестного индивида, включающий генетические исследования биологического образца, содержащего ДНК, выделенную из любого биологического материала в соответствии со стандартными методами, обеспечивающими качественную очистку ДНК от белков и примесей, с использованием мультиплексной полимеразной цепной реакции (мультиплексной ПЦР) и последующего определения нуклеотидной последовательности продуктов амплификации, содержащих однонуклеотидные SNP-маркеры для идентификации неизвестного индивида, полученные способом по п. 1.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что размер полученных ПЦР-продуктов составляет не более 120 п. н.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что полученные в результате мультиплексной амплификации ПЦР-продукты, содержащие маркеры для идентификации неизвестного индивида, используются в качестве матрицы для различных методов генетического определения нуклеотидной последовательности.

5. Способ по п. 2, где определение нуклеотидной последовательности продуктов амплификации (ПЦР-продуктов) проводят секвенированием по методу "массового параллельного секвенирования" (NGS).

6. Способ по п. 2, отличающийся тем, что определение нуклеотидной последовательности продуктов амплификации (ПЦР-продуктов) проводят любым доступным способом определения нуклеотидной последовательности, в том числе: секвенированием по методу Сэнгера, методом TaqMan Real-Time PCR.

7. Способ по п. 2, отличающийся тем, что биологический образец содержит деградированную ДНК.

8. Набор для генотипирования индивида для осуществления способа по п. 1, используемый для детектирования присутствия молекулярных однонуклеотидных SNP-маркеров, предназначенных для идентификации неизвестного индивида, включающий оригинальные синтетические олигонуклеотидные праймеры с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 1-SEQ ID NO: 190.

9. Применение способа по п. 1 для идентификации неизвестного индивида, происходящего из популяций Российской Федерации.