RU2021121116A - Новые слитые белки, специфические в отношении cd137 и gpc3 - Google Patents
Новые слитые белки, специфические в отношении cd137 и gpc3 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2021121116A RU2021121116A RU2021121116A RU2021121116A RU2021121116A RU 2021121116 A RU2021121116 A RU 2021121116A RU 2021121116 A RU2021121116 A RU 2021121116A RU 2021121116 A RU2021121116 A RU 2021121116A RU 2021121116 A RU2021121116 A RU 2021121116A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- leu
- ser
- lys
- asp
- tyr
- Prior art date
Links
- 101710037116 GAPC3 Proteins 0.000 title claims 15
- 102100007996 GPC3 Human genes 0.000 title claims 15
- 101700044749 GPC3 Proteins 0.000 title claims 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 112
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 97
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims 78
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims 65
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 claims 55
- 102000037240 fusion proteins Human genes 0.000 claims 54
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims 54
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 claims 52
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 51
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 48
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 44
- 125000000267 glycino group Chemical group [H]N([*])C([H])([H])C(=O)O[H] 0.000 claims 29
- 102000019298 Lipocalins Human genes 0.000 claims 10
- 108050006654 Lipocalins Proteins 0.000 claims 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 10
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 9
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims 6
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 6
- 210000004881 tumor cells Anatomy 0.000 claims 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 5
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 claims 5
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 claims 4
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 claims 4
- 102000018358 Immunoglobulins Human genes 0.000 claims 3
- 108060003951 Immunoglobulins Proteins 0.000 claims 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims 3
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 claims 3
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 claims 3
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 claims 3
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 claims 3
- 230000001404 mediated Effects 0.000 claims 3
- 230000004044 response Effects 0.000 claims 3
- 102100002977 CDR1 Human genes 0.000 claims 2
- 230000036499 Half live Effects 0.000 claims 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 claims 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims 2
- 102000003752 Lipocalin 1 Human genes 0.000 claims 2
- 108010057281 Lipocalin 1 Proteins 0.000 claims 2
- 102000013519 Lipocalin-2 Human genes 0.000 claims 2
- 108010051335 Lipocalin-2 Proteins 0.000 claims 2
- 210000004698 Lymphocytes Anatomy 0.000 claims 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims 2
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 claims 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 claims 1
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims 1
- 210000001744 T-Lymphocytes Anatomy 0.000 claims 1
- 230000003213 activating Effects 0.000 claims 1
- 230000002730 additional Effects 0.000 claims 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 claims 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 claims 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 claims 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 claims 1
- 230000001419 dependent Effects 0.000 claims 1
- 230000000527 lymphocytic Effects 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 claims 1
Claims (64)
1. Слитый белок, способный связывать как CD137, так и GPC3, где слитый белок содержит по меньшей мере две субъединицы в любом порядке, где первая субъединица предусматривает полноразмерный иммуноглобулин или его антигенсвязывающий домен и является специфической в отношении GPC3, и где вторая субъединица предусматривает мутеин липокалина и является специфической в отношении CD137.
2. Слитый белок, где слитый белок, содержащий по меньшей мере две субъединицы, где первая субъединица предусматривает полноразмерный иммуноглобулин или его антигенсвязывающий домен и является специфической в отношении GPC3, и где вторая субъединица предусматривает мутеин липокалина и является специфической в отношении CD137, причем вторая субъединица соединена на N-конце с C-концом каждой тяжелой цепи первой субъединицы, необязательно посредством линкера.
3. Слитый белок по п.1 или 2,
(а) где слитый белок способен связывать GPC3 со значением KD, составляющим максимум приблизительно 1 нМ или сравнимым или ниже значения KD у иммуноглобулина или его антигенсвязывающего домена, который включен исключительно в первую субъединицу;
(b) где слитый белок способен связывать CD137 со значением EC50, составляющим максимум приблизительно 3 нМ или сравнимым или ниже значения EC50 у мутеина липокалина, специфического в отношении CD137, который включен исключительно во вторую субъединицу;
(c) где слитый белок вступает в перекрестную реакцию с GPC3 яванского макака;
(d) где слитый белок способен одновременно связывать CD137 и GPC3 со значениями EC50, составляющими максимум приблизительно 10 нМ, при измерении указанного слитого белка в ELISA-анализе;
(e) где слитый белок способен связывать GPC3-экспрессирующие опухолевые клетки;
(f) где слитый белок способен индуцировать повышенную секрецию IL-2;
(g) где слитый белок способен индуцировать повышенную секрецию IL-2 до более высокого уровня, чем SEQ ID NO: 83, и/или с лучшей эффективностью в сравнении с SEQ ID NO: 83;
(h) где слитый белок способен индуцировать опосредуемую лимфоцитами цитотоксичность;
(i) где слитый белок способен индуцировать усиленное уничтожение GPC3-экспрессирующих опухолевых клеток, опосредованное Т-клетками, в сравнении с SEQ ID NO: 83 и/или индуцировать активацию цитотоксических Т-клеток с лучшей эффективностью в сравнении с SEQ ID NO: 83;
(j) где слитый белок способен совместно стимулировать Т-клеточные ответы зависимым от GPC3 образом; или
(k) где слитый белок способен совместно стимулировать Т-клеточные ответы в опухолевом микроокружении.
4. Слитый белок по любому из пп.1-3, где слитый белок обладает периодом полужизни у мышей, составляющим по меньшей мере 50 часов, по меньшей мере 75 часов, по меньшей мере 100 часов, по меньшей мере 125 часов, по меньшей мере 150 часов, по меньшей мере 175 часов, по меньшей мере 200 часов, по меньшей мере 250 часов или еще дольше, и/или где слитый белок обладает периодом полужизни у мышей, который длиннее, чем у SEQ ID NO: 83.
5. Слитый белок по любому из пп.1-4, где слитый белок характеризуется изоэлектрической точкой, составляющей по меньшей мере 6,5, по меньшей мере 6,8, по меньшей мере 7,1, по меньшей мере 7,4, по меньшей мере 7,5, по меньшей мере 7,7 или еще выше, и/или где слитый белок характеризуется изоэлектрической точкой, которая выше чем у SEQ ID NO: 83.
6. Слитый белок по любому из пп.1-5, где мутеин липокалина содержит один или более мутантных аминокислотных остатков в положениях, соответствующих положениям 28, 36, 40-41, 49, 52, 65, 68, 70, 72-73, 77, 79, 81, 83, 87, 94, 96, 100, 103, 106, 125, 127, 132 и 134 линейной полипептидной последовательности зрелого липокалина, ассоциированного с желатиназой нейтрофилов человека (hNGAL) (SEQ ID NO: 2).
7. Слитый белок по любому из пп.1-5, где мутеин липокалина содержит один или более мутантных аминокислотных остатков в положениях, соответствующих положениям 20, 25, 28, 33, 36, 40-41, 44, 49, 52, 59, 68, 70-73, 77-82, 87, 92, 96, 98, 100, 101, 103, 122, 125, 127, 132 и 134 линейной полипептидной последовательности зрелого липокалина, ассоциированного с желатиназой нейтрофилов человека (hNGAL) (SEQ ID NO: 2).
8. Слитый белок по любому из пп.1-7, где аминокислотная последовательность мутеина липокалина содержит один из следующих наборов мутантных аминокислотных остатков в сравнении с линейной полипептидной последовательностью зрелого hNGAL (SEQ ID NO: 2):
(a) Gln 28 → His; Leu 36 → Gln; Ala 40 → Ile; Ile 41 → Lys; Gln 49 → Asn; Tyr 52 → Met; Ser 68 → Gly; Leu 70 → Thr; Arg 72 → Asp; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Thr; Trp 79 → Ala; Arg 81 → Ser; Cys 87 → Ser; Asn 96 → Lys; Tyr 100 → Phe; Leu 103 → His; Tyr 106 → Ser; Lys 125 → Phe; Ser 127 → Phe; Tyr 132 → Glu и Lys 134 → Tyr;
(b) Gln 28 → His; Leu 36 → Gln; Ala 40 → Ile; Ile 41 → Arg; Gln 49 → Ile; Tyr 52 → Met; Asn 65 → Asp; Ser 68 → Met; Leu 70 → Lys; Arg 72 → Asp; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Met; Trp 79 → Asp; Arg 81 → Trp; Cys 87 → Ser; Asn 96 → Lys; Tyr 100 → Phe; Leu 103 → His; Tyr 106 → Ser; Lys 125 → Phe; Ser 127 → Phe; Tyr 132 → Glu и Lys 134 → Tyr;
(c) Gln 28 → His; Leu 36 → Gln; Ala 40 → Ile; Ile 41 → Arg; Gln 49 → Asn; Tyr 52 → Met; Asn 65 → Asp; Ser 68 → Ala; Leu 70 → Ala; Arg 72 → Asp; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Thr; Trp 79 → Asp; Arg 81 → Trp; Cys 87 → Ser; Asn 96 → Lys; Tyr 100 → Phe; Leu 103 → His; Tyr 106 → Ser; Lys 125 → Phe; Ser 127 → Phe; Tyr 132 → Glu и Lys 134 → Tyr;
(d) Gln 28 → His; Leu 36 → Gln; Ala 40 → Ile; Ile 41 → Lys; Gln 49 → Asn; Tyr 52 → Met; Asn 65 → Asp; Ser 68 → Ala; Leu 70 → Ala; Arg 72 → Asp; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Thr; Trp 79 → Asp; Arg 81 → Trp; Cys 87 → Ser; Asn 96 → Lys; Tyr 100 → Phe; Leu 103 → His; Tyr 106 → Ser; Lys 125 → Phe; Ser 127 → Phe; Tyr 132 → Glu и Lys 134 → Tyr;
(e) Gln 28 → His; Leu 36 → Gln; Ala 40 → Ile; Ile 41 → Lys; Gln 49 → Ser; Tyr 52 → Met; Asn 65 → Asp; Ser 68 → Gly; Leu 70 → Ser; Arg 72 → Asp; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Thr; Trp 79 → Ala; Arg 81 → Met; Cys 87 → Ser; Asn 96 → Lys; Tyr 100 → Phe; Leu 103 → His; Tyr 106 → Ser; Lys 125 → Phe; Ser 127 → Phe; Tyr 132 → Glu и Lys 134 → Tyr;
(f) Gln 28 → His; Leu 36 → Gln; Ala 40 → Ile; Ile 41 → Lys; Gln 49 → Val; Tyr 52 → Met; Asn 65 → Asp; Ser 68 → Gly; Leu 70 → Thr; Arg 72 → Asp; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Arg; Trp 79 → Asp; Arg 81 → Ser; Cys 87 → Ser; Leu 94 → Phe; Asn 96 → Lys; Tyr 100 → Phe; Leu 103 → His; Tyr 106 → Ser; Lys 125 → Phe; Ser 127 → Phe; Tyr 132 → Glu и Lys 134 → Tyr;
(g) Gln 28 → His; Leu 36 → Gln; Ala 40 → Ile; Ile 41 → Arg; Gln 49 → His; Tyr 52 → Met; Asn 65 → Asp; Ser 68 → Gly; Leu 70 → Thr; Arg 72 → Asp; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Thr; Trp 79 → Ala; Arg 81 → Ser; Cys 87 → Ser; Asn 96 → Lys; Tyr 100 → Phe; Leu 103 → His; Tyr 106 → Ser; Lys 125 → Phe; Ser 127 → Phe; Tyr 132 → Glu и Lys 134 → Tyr;
(h) Gln 28 → His; Leu 36 → Gln; Ala 40 → Ile; Ile 41 → Lys; Gln 49 → Asn; Tyr 52 → Met; Asn 65 → Asp; Ser 68 → Gly; Leu 70 → Thr; Arg 72 → Asp; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Thr; Trp 79 → Ala; Arg 81 → Ser; Phe 83 → Leu; Cys 87 → Ser; Leu 94 → Phe; Asn 96 → Lys; Tyr 100 → Phe; Leu 103 → His; Tyr 106 → Ser; Lys 125 → Phe; Ser 127 → Phe; Tyr 132 → Glu и Lys 134 → Tyr;
(i) Gln 28 → His; Leu 36 → Gln; Ala 40 → Ile; Ile 41 → Arg; Gln 49 → Ser; Tyr 52 → Met; Asn 65 → Asp; Ser 68 → Ala; Leu 70 → Thr; Arg 72 → Asp; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Asn; Trp 79 → Ala; Arg 81 → Ser; Cys 87 → Ser; Asn 96 → Lys; Tyr 100 → Phe; Leu 103 → His; Tyr 106 → Ser; Lys 125 → Phe; Ser 127 → Phe; Tyr 132 → Glu и Lys 134 → Tyr;
(j) Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Gln 49 → His; Tyr 52 → Ser; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Gln; Trp 79 → Ile; Arg 81 → Trp; Asn 96 → Phe; Tyr 100 → Asp; Leu 103 → His; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly;
(k) Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Gln 49 → His; Tyr 52 → Ser; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Gln; Trp 79 → Ile; Arg 81 → Trp; Phe 92 → Leu; Asn 96 → Phe; Lys 98 → Arg; Tyr 100 → Asp; Pro 101 → Leu; Leu 103 → His; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly;
(l) Asn 25 → Tyr; Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Gln 49 → His; Tyr 52 → Gly; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Phe 71 → Leu; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Gln; Trp 79 → Ile; Arg 81 → Gln; Phe 92 → Ser; Asn 96 → Phe; Tyr 100 → Asp; Leu 103 → His; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly;
(m) Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Gln 49 → His; Tyr 52 → Gly; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Gln; Tyr 78 → His; Trp 79 → Ile; Arg 81 → Trp; Phe 92 → Leu; Asn 96 → Phe; Tyr 100 → Asp; Leu 103 → His; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly;
(n) Asn 25 → Asp; Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Gln 49 → His; Tyr 52 → Gly; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Gln; Trp 79 → Ile; Arg 81 → Trp; Phe 92 → Leu; Asn 96 → Phe; Tyr 100 → Asp; Leu 103 → His; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly;
(o) Val 33 → Ile; Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Gln 49 → His; Tyr 52 → Gly; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Gln; Trp 79 → Ile; Arg 81 → Trp; Phe 92 → Leu; Asn 96 → Phe; Tyr 100 → Asp; Leu 103 → His; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly;
(p) Gln 20 → Arg; Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Glu 44 → Val; Gln 49 → His; Tyr 52 → Gly; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Gln; Trp 79 → Ile; Arg 81 → Trp; Phe 92 → Leu; Asn 96 → Phe; Tyr 100 → Asp; Leu 103 → His; Phe 122 → Tyr; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly;
(q) Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Gln 49 → His; Tyr 52 → Ser; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Gln; Trp 79 → Ile; Ile 80 → Asn; Arg 81 → Trp; Thr 82 → Pro; Asn 96 → Phe; Tyr 100 → Asp; Pro 101 → Leu; Leu 103 → Pro; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly;
(r) Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Gln 49 → His; Tyr 52 → Gly; Lys 59 → Asn; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → Gln; Trp 79 → Ile; Arg 81 → Trp; Phe 92 → Leu; Asn 96 → Phe; Tyr 100 → Asp; Leu 103 → His; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly и
(s) Leu 36 → Met; Ala 40 → Asn; Ile 41 → Leu; Glu 44 → Asp; Gln 49 → His; Tyr 52 → Ser; Ser 68 → Asp; Leu 70 → Met; Phe 71 → Leu; Arg 72 → Leu; Lys 73 → Asp; Asp 77 → His; Trp 79 → Ile; Arg 81 → Trp; Phe 92 → Leu; Asn 96 → Phe; Tyr 100 → Asp; Leu 103 → His; Lys 125 → Ser; Ser 127 → Ile; Tyr 132 → Trp и Lys 134 → Gly.
9. Слитый белок по любому из пп.1-8, где аминокислотная последовательность мутеина липокалина обладает по меньшей мере 85% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 39-57.
10. Слитый белок по любому из пп.1-5, где мутеин липокалина содержит один или более мутантных аминокислотных остатков в положениях, соответствующих положениям 5, 26-31, 33-34, 42, 46, 52, 56, 58, 60-61, 65, 71, 85, 94, 101, 104-106, 108, 111, 114, 121, 133, 148, 150 и 153 линейной полипептидной последовательности зрелого липокалина слезы человека (SEQ ID NO: 1).
11. Слитый белок по любому из пп.1-5 и 10, где аминокислотная последовательность мутеина липокалина содержит один из следующих наборов мутантных аминокислотных остатков в сравнении с линейной полипептидной последовательностью зрелого липокалина слезы человека (SEQ ID NO: 1):
(a) Arg 26 → Glu; Glu 27 → Gly; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Arg; Glu 30 → Pro; Met 31 → Trp; Leu 33 → Ile; Glu 34 → Phe; Leu 56 → Ala; Ser 58 → Asp; Arg 60 → Pro; Cys 61 → Ala; Cys 101 → Ser; Glu 104 → Val; Leu 105 → Cys; His 106 → Asp; Lys 108 → Ser; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp и Cys 153 → Ser;
(b) Ala 5 → Thr; Arg 26 → Glu; Glu 27 → Gly; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Arg; Glu 30 → Pro; Met 31 → Trp; Leu 33 → Ile; Glu 34 → Phe; Leu 56 → Ala; Ser 58 → Asp; Arg 60 → Pro; Cys 61 → Ala; Lys 65 → Arg; Val 85 → Asp; Cys 101 → Ser; Glu 104 → Val; Leu 105 → Cys; His 106 → Asp; Lys 108 → Ser; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Lys 121 → Glu; Ala 133 → Thr и Cys 153 → Ser;
(c) Arg 26 → Glu; Glu 27 → Gly; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Arg; Glu 30 → Pro; Met 31 → Trp; Leu 33 → Ile; Glu 34 → Phe; Leu 56 → Ala; Ser 58 → Asp; Arg 60 → Pro; Cys 61 → Ala; Lys 65 → Asn; Lys 94 → Arg; Cys 101 → Ser; Glu 104 → Val; Leu 105 → Cys; His 106 → Asp; Lys 108 → Ser; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Lys 121 → Glu; Ala 133 → Thr и Cys 153 → Ser;
(d) Ala 5 → Val; Arg 26 → Glu; Glu 27 → Gly; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Arg; Glu 30 → Pro; Met 31 → Trp; Leu 33 → Ile; Glu 34 → Phe; Leu 56 → Ala; Ser 58 → Asp; Arg 60 → Pro; Cys 61 → Ala; Lys 65 → Arg; Lys 94 → Glu; Cys 101 → Ser; Glu 104 → Val; Leu 105 → Cys; His 106 → Asp; Lys 108 → Ser; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Lys 121 → Glu; Ala 133 → Thr и Cys 153 → Ser;
(e) Arg 26 → Glu; Glu 27 → Gly; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Arg; Glu 30 → Pro; Met 31 → Trp; Leu 33 → Ile; Glu 34 → Phe; Thr 42 → Ser; Leu 56 → Ala; Ser 58 → Asp; Arg 60 → Pro; Cys 61 → Ala; Cys 101 → Ser; Glu 104 → Val; Leu 105 → Cys; His 106 → Asp; Lys 108 → Ser; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Ser 150 → Ile и Cys 153 → Ser;
(f) Arg 26 → Glu; Glu 27 → Gly; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Arg; Glu 30 → Pro; Met 31 → Trp; Leu 33 → Ile; Glu 34 → Phe; Lys 52 → Glu; Leu 56 → Ala; Ser 58 → Asp; Arg 60 → Pro; Cys 61 → Ala; Thr 71 → Ala; Cys 101 → Ser; Glu 104 → Val; Leu 105 → Cys; His 106 → Asp; Lys 108 → Ser; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Ala 133 → Thr; Arg 148 → Ser; Ser 150 → Ile и Cys 153 → Ser и
(g) Ala 5 → Thr; Arg 26 → Glu; Glu 27 → Gly; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Arg; Glu 30 → Pro; Met 31 → Trp; Leu 33 → Ile; Glu 34 → Phe; Gly 46 → Asp; Leu 56 → Ala; Ser 58 → Asp; Arg 60 → Pro; Cys 61 → Ala; Thr 71 → Ala; Cys 101 → Ser; Glu 104 → Val; Leu 105 → Cys; His 106 → Asp; Lys 108 → Ser; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Ser 150 → Ile и Cys 153 → Ser.
12. Слитый белок по любому из пп.1-5 и 10-11, где аминокислотная последовательность мутеина липокалина обладает по меньшей мере 85% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 32-38.
13. Слитый белок по любому из пп.1-12, где вторая субъединица соединена на N-конце посредством линкера с N- или C-концом константной области каждой тяжелой цепи (СН) первой субъединицы или с N- или C-концом константной области каждой легкой цепи (CL) первой субъединицы.
14. Слитый белок по любому из пп.1-13, где антитело содержит соответственно следующую вариабельную область тяжелой цепи и следующую вариабельную область легкой цепи: SEQ ID NO: 78 и 79, SEQ ID NO: 129 и 79, SEQ ID NO: 114 и 115 или SEQ ID NO: 126 и 127, или вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, которые имеют последовательность, обладающую по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или более высокой идентичностью последовательности с аминокислотными последовательностями, представленными под SEQ ID NO: 78 и 79, SEQ ID NO: 129 и 79, SEQ ID NO: 114 и 115 или SEQ ID NO: 126 и 127.
15. Слитый белок по любому из пп.1-14, где тяжелая цепь антитела содержит следующий набор последовательностей CDR: GYTFTDYE (HCDR1, SEQ ID NO: 72), LDPKTGDT (HCDR2, SEQ ID NO: 73), TRFYSYTY (HCDR3; SEQ ID NO: 74), а легкая цепь антитела содержит следующий набор последовательностей CDR: QSLVHSNRNTY (LCDR1, SEQ ID NO: 75), KVS (LCDR2), SQNTHVPPT (LCDR3; SEQ ID NO: 77).
16. Слитый белок по любому из пп.1-15, где антитело имеет остов IgG4.
17. Слитый белок по п.16, где остов IgG4 имеет одну или более из следующих мутаций: S228P, N297A, F234A, L235A, M428L, N434S, M252Y, S254T и T256E.
18. Слитый белок по любому из пп.1-17, где слитый белок содержит аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 87 и 82, аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 88 и 82, аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 81 и 89, аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 81 и 90, аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 91 и 82, аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 92 и 82, аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 81 и 93, аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 81 и 94, аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 95 и 82, или аминокислоты, представленные под SEQ ID NO: 96 и 82.
19. Слитый белок по любому из пп.1-18, где слитый белок содержит аминокислотные последовательности, обладающие по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или более высокой идентичностью последовательности с аминокислотными последовательностями, представленными под SEQ ID NO: 87 и 82, SEQ ID NO: 88 и 82, SEQ ID NO: 81 и 89, SEQ ID NO: 81 и 90, SEQ ID NO: 91 и 82, SEQ ID NO: 92 и 82, SEQ ID NO: 81 и 93, SEQ ID NO: 81 и 94, SEQ ID NO: 95 и 82 или SEQ ID NO: 96 и 82.
20. Молекула нуклеиновой кислоты, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую слитый белок по любому из пп.1-19.
21. Способ получения слитого белка по любому из пп.1-19, где слитый белок получают исходя из нуклеиновой кислоты, кодирующей слитый белок.
22. Способ одновременной активации последующих сигнальных путей CD137 и воздействия на GPC3-положительные опухолевые клетки, предусматривающий применение одного или более слитых белков по любому из пп. 1-19 или одной или более композиций, содержащих такой слитый белок, по отношению к ткани, содержащей опухоль.
23. Способ одновременной совместной стимуляции Т-клеток и воздействия на GPC3-положительные опухолевые клетки, предусматривающий применение одного или более слитых белков по любому из пп.1-19 или одной или более композиций, содержащих такой слитый белок, по отношению к ткани, содержащей опухоль.
24. Способ индукции локализованного лимфоцитарного ответа в непосредственной близости от GPC3-положительных опухолевых клеток, предусматривающий применение одного или более слитых белков по любому из пп. 1-19 или одной или более композиций, содержащих такой слитый белок, по отношению к ткани, содержащей опухоль.
25. Способ индукции повышенного опосредованного лимфоцитами цитолиза GPC3-положительных опухолевых клеток, предусматривающий применение одного или более слитых белков по любому из пп.1-19 или одной или более композиций, содержащих такой слитый белок, по отношению к ткани, содержащей опухоль.
26. Фармацевтическая композиция, содержащая один или более слитых белков по любому из пп.1-19.
27. Способ предупреждения, уменьшения интенсивности или лечения GPC3-положительных форм рака, предусматривающий применение слитого белка по любому из пп.1-19 или одной или более композиций, содержащих такой слитый белок, по отношению к ткани, содержащей опухоль.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP19000100.8 | 2019-02-26 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021121116A true RU2021121116A (ru) | 2023-01-16 |
| RU2814653C2 RU2814653C2 (ru) | 2024-03-04 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HRP20230590T1 (hr) | Novi fuzijski protein specifičan za cd137 i pd-l1 | |
| JP2018515085A5 (ru) | ||
| RU2021119777A (ru) | Слитый полипептид, способный связывать cd137 и gpc3, молекула нуклеиновой кислоты, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую такой слитый полипептид, способ его получения и пути применения | |
| AU2015295936B2 (en) | Anti-CTLA4 monoclonal antibody or antigen binding fragment thereof, medicinal composition and use | |
| KR102247704B1 (ko) | 항 pd-1/항 her2 천연항체 구조 형태의 헤테로다이머 계의 이중특이성 항체 및 그 제조방법 | |
| JP2018519803A5 (ru) | ||
| RU2017135596A (ru) | Слитый полипептид с противораковой активностью | |
| AU2017272111B2 (en) | Compositions and methods related to engineered Fc constructs | |
| JP7536294B2 (ja) | 抗体のＦｃ領域改変体 | |
| AU2019288496A1 (en) | Interleukin-2 variants and methods of uses thereof | |
| RU2017135599A (ru) | Белки, специфичные в отношении cd137 | |
| JP2018515084A5 (ru) | ||
| KR20160034404A (ko) | Ｆc-함유 폴리펩타이드의 안정화 | |
| EP3180361A1 (en) | Recombinant antibody molecule and its use for target cell restricted t cell activation | |
| RU2007129676A (ru) | Антитела к рецептору альфа 1 il-13 и их применение | |
| JP7359784B2 (ja) | 抗ｐｄ－１／抗ｈｅｒ２天然抗体構造ヘテロダイマー系の二重特異性抗体及びその製造方法 | |
| JP2019502694A (ja) | 二特異性抗体基幹 | |
| CN113518823A (zh) | 多功能的融合蛋白及其用途 | |
| CA3147044A1 (en) | Agents that interfere with thymic stromal lymphopoietin (tslp)-receptor signaling | |
| AU2013223801A1 (en) | Tumour necrosis factor receptor fusion proteins and methods of using the same | |
| WO2020053300A1 (en) | Improved anti-flt3 antigen binding proteins | |
| JP2023542049A (ja) | インターロイキン－２ムテイン及びその使用 | |
| JPWO2020173897A5 (ru) | ||
| RU2021121116A (ru) | Новые слитые белки, специфические в отношении cd137 и gpc3 | |
| JPWO2020025659A5 (ru) |