RU2020120580A - Способы получения происходящих из мышц клеток - Google Patents
Способы получения происходящих из мышц клеток Download PDFInfo
- Publication number
- RU2020120580A RU2020120580A RU2020120580A RU2020120580A RU2020120580A RU 2020120580 A RU2020120580 A RU 2020120580A RU 2020120580 A RU2020120580 A RU 2020120580A RU 2020120580 A RU2020120580 A RU 2020120580A RU 2020120580 A RU2020120580 A RU 2020120580A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- smdc
- stage
- sample
- sorting
- cells
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims 16
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 title claims 3
- AFCCDDWKHLHPDF-UHFFFAOYSA-M metam-sodium Chemical compound [Na+].CNC([S-])=S AFCCDDWKHLHPDF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 12
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 claims 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims 3
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 claims 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 claims 2
- 208000034347 Faecal incontinence Diseases 0.000 claims 2
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 claims 2
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 claims 2
- 201000009623 Myopathy Diseases 0.000 claims 2
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 claims 2
- 206010029323 Neuromyopathy Diseases 0.000 claims 2
- 206010046543 Urinary incontinence Diseases 0.000 claims 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 claims 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 claims 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims 2
- -1 A2B5 Proteins 0.000 claims 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 claims 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 claims 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 claims 1
- 101000881679 Homo sapiens Endoglin Proteins 0.000 claims 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 claims 1
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 claims 1
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 claims 1
- 206010021639 Incontinence Diseases 0.000 claims 1
- 101100351033 Mus musculus Pax7 gene Proteins 0.000 claims 1
- 102100038380 Myogenic factor 5 Human genes 0.000 claims 1
- 101710099061 Myogenic factor 5 Proteins 0.000 claims 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 claims 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 claims 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims 1
- 101001023030 Toxoplasma gondii Myosin-D Proteins 0.000 claims 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims 1
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 claims 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 claims 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 claims 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/34—Muscles; Smooth muscle cells; Heart; Cardiac stem cells; Myoblasts; Myocytes; Cardiomyocytes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0658—Skeletal muscle cells, e.g. myocytes, myotubes, myoblasts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/50—Cell markers; Cell surface determinants
- C12N2501/599—Cell markers; Cell surface determinants with CD designations not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/70—Enzymes
- C12N2501/71—Oxidoreductases (EC 1.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2509/00—Methods for the dissociation of cells, e.g. specific use of enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2509/00—Methods for the dissociation of cells, e.g. specific use of enzymes
- C12N2509/10—Mechanical dissociation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Claims (20)
1. Способ получения клеток, происходящих из скелетных мышц (SMDC), включающий стадии:
(а) охлаждения образца, полученного из ткани скелетных мышц, в буфере;
(б) обработки и охлаждения образца;
(в) ресуспендирования образца со стадии (б) в среде с сывороткой, содержащей по меньшей мере один фермент, и нагревания до 38°С в течение 1-20 часов; осаждения образца центрифугированием и
(г) ресуспендирования осадка образца со стадии (в) для получения суспензии одиночных клеток из образца со стадии (в) с получением таким образом SMDC.
2. Способ по п. 1, где стадию (а) выполняют при температуре ниже 16°С, предпочтительно в интервале температур от 1 до 16°С, предпочтительно от 4 до 10°С, особенно предпочтительно при 7°С; и в течение периода времени вплоть до 96 часов.
3. Способ по п. 1, где стадия (б) включает использование ножниц, скальпеля, пинцета, фильтра или шаровой мельницы.
4. Способ по п. 1, где охлаждение на стадии (б) выполняют при температуре в интервале от 1 до 16°С, предпочтительно от 4 до 8°С, особенно предпочтительно при 4°С и в течение периода времени от 2 ч до 48 ч.
5. Способ по п. 1, где стадия (в) включает проведение ферментативной обработки раствором, содержащим один или более ферментов, выбранных из группы, состоящей из трипсина, папаина, эластазы, гиалуронидазы, коллагеназы, дезоксирибонуклеазы и ДНКазы.
6. Способ по п. 1, где стадию (в) выполняют при температуре в интервале от 25 до 38°С, предпочтительно от 36 до 38°С, особенно предпочтительно при 37°С.
7. Способ по п. 1, где стадия (г) предпочтительно включает метод, выбранный из по меньшей мере одного из сортировки FACS (сортировка флуоресцентно-активированных клеток), центрифугирования, электрокинетической сортировки, сортировки посредством акустофореза, сортировки клеток с помощью микросфер и оптической сортировки.
8. Способ по п. 1, где после стадии (г) выполняют дополнительную возможную стадию (д), включающую инкубацию одноклеточной суспензии, полученной на стадии (г), где инкубацию на стадии (д) предпочтительно выполняют при температуре в интервале от 25 до 38°С, предпочтительно от 36 до 38°С, особенно предпочтительно при 37°С, получая таким образом прикрепленные SMDC.
9. Способ по п. 1, где после стадии (д) возможно выполняют дополнительную стадию (е), включающую удаление клеток, неприкрепленных на стадии (д), где стадию (е) предпочтительно выполняют через промежуток времени от по меньшей мере 6 часов до 4 суток.
10. Способ по п. 1, где после стадии (е) возможно выполняют дополнительную стадию (ж) размножения клеток, прикрепленных на стадии (д), при этом размножение на стадии (з) включает культивирование прикрепленных клеток в течение 1-5 пассажей до 70-80% конфлюентности.
11. SMDC (клетки, происходящие из скелетных мышц), где SMDC содержат по меньшей мере 60% CD56-позитивных и 60% А2В5-позитивных клеток.
12. SMDC (клетка, происходящая из скелетных мышц), полученная способом по любому из пп. 1-10.
13. SMDC по п. 11 или 12, где SMDC характеризуются экспрессией определенной комбинации маркеров, выбранной из положительной экспрессии по меньшей мере одного или более маркеров, выбранных из CD56, А2В5, CD105, Myf5 и Рах7, и негативной экспрессии по меньшей мере одного или более маркеров, выбранных из CD34 и MyoD.
14. SMDC по любому из пп. 11-13 для использования в качестве фармацевтической композиции.
15. SMDC по любому из пп. 11-13 для использования в способе предупреждения и/или лечения нейромиопатий и/или миопатий; предпочтительно, SMDC для использования в способе предупреждения и/или лечения нейромиопатий и/или миопатий, таких как недержание кала и/или недержание мочи.
16. SMDC по любому из пп. 11-13 для использования в способе лечения мышечной дисфункции, где мышечная дисфункция представляет собой недержание, в частности недержание мочи и/или анальное недержание или недержание кала.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP17207417.1 | 2017-12-14 | ||
EP17207417 | 2017-12-14 | ||
PCT/EP2018/085015 WO2019115790A1 (en) | 2017-12-14 | 2018-12-14 | Methods for obtaining muscle derived cells |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2020120580A true RU2020120580A (ru) | 2022-01-14 |
RU2796929C2 RU2796929C2 (ru) | 2023-05-29 |
Family
ID=
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US11617768B2 (en) | 2023-04-04 |
HRP20230474T1 (hr) | 2023-07-21 |
CL2020001480A1 (es) | 2020-10-30 |
KR20200099173A (ko) | 2020-08-21 |
WO2019115790A1 (en) | 2019-06-20 |
DK3724319T3 (da) | 2023-05-01 |
JP7361398B2 (ja) | 2023-10-16 |
MX2020005881A (es) | 2020-08-13 |
CN111448307A (zh) | 2020-07-24 |
JP2023085507A (ja) | 2023-06-20 |
CA3085483A1 (en) | 2019-06-20 |
RS64241B1 (sr) | 2023-06-30 |
FI3724319T3 (fi) | 2023-05-04 |
BR112020011853A2 (pt) | 2020-11-24 |
LT3724319T (lt) | 2023-06-12 |
EP4223872A3 (en) | 2023-08-23 |
ZA202002410B (en) | 2021-09-29 |
PT3724319T (pt) | 2023-06-07 |
EP4223872A2 (en) | 2023-08-09 |
CY1126049T1 (el) | 2023-11-15 |
ES2948712T3 (es) | 2023-09-18 |
US20230285467A1 (en) | 2023-09-14 |
EP3724319B1 (en) | 2023-04-05 |
PL3724319T3 (pl) | 2023-07-24 |
IL309687A (en) | 2024-02-01 |
JP2021506285A (ja) | 2021-02-22 |
SI3724319T1 (sl) | 2023-07-31 |
IL275288A (en) | 2020-07-30 |
HUE062005T2 (hu) | 2023-09-28 |
US20210069255A1 (en) | 2021-03-11 |
AU2018383015A1 (en) | 2020-05-28 |
EP3724319A1 (en) | 2020-10-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Choudhery et al. | Donor age negatively impacts adipose tissue-derived mesenchymal stem cell expansion and differentiation | |
Jo et al. | Fetal mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord sustain primitive characteristics during extensive expansion | |
Jones et al. | Large‐scale extraction and characterization of CD271+ multipotential stromal cells from trabecular bone in health and osteoarthritis: implications for bone regeneration strategies based on uncultured or minimally cultured multipotential stromal cells | |
Hoogduijn et al. | Comparative characterization of hair follicle dermal stem cells and bone marrow mesenchymal stem cells | |
Wu et al. | Age-related decline in the matrix contents and functional properties of human periodontal ligament stem cell sheets | |
Choudhery et al. | Cryopreservation of whole adipose tissue for future use in regenerative medicine | |
Jackson et al. | Mesenchymal progenitor cells derived from traumatized human muscle | |
Ali et al. | Multi-lineage differentiation of human umbilical cord Wharton’s jelly mesenchymal stromal cells mediates changes in the expression profile of stemness markers | |
Abu Kasim et al. | Unique molecular signatures influencing the biological function and fate of post‐natal stem cells isolated from different sources | |
CN107828722B (zh) | 特异性表达pd-1的干细胞、其鉴定和分离方法及用途 | |
Mehrabani et al. | Growth kinetics, characterization, and plasticity of human menstrual blood stem cells | |
Koo et al. | Isolation and characterization of chorionic mesenchymal stromal cells from human full term placenta | |
Fink et al. | Isolation and expansion of adipose-derived stem cells for tissue engineering | |
Prieto González | Heterogeneity in adipose stem cells | |
Tonelli et al. | Tissue engineering: the use of stem cells in regenerative medicine | |
JP7286651B2 (ja) | 間葉系間質細胞及び臍帯から間葉系間質細胞を得るための方法 | |
Krešić et al. | Canine adipose derived mesenchymal stem cells transcriptome composition alterations: a step towards standardizing therapeutic | |
EP3578641A1 (en) | Method for preparing dental pulp stem cells from cells derived from dental pulp tissue | |
Amiri et al. | Positive selection of Wharton's jelly-derived CD105+ cells by MACS technique and their subsequent cultivation under suspension culture condition: A simple, versatile culturing method to enhance the multipotentiality of mesenchymal stem cells | |
FI3724319T3 (fi) | Menetelmiä lihaksesta johdettujen solujen saamiseksi | |
Obara et al. | Differentiation and molecular properties of mesenchymal stem cells derived from murine induced pluripotent stem cells derived on gelatin or collagen | |
JP6563145B2 (ja) | 不死化汗腺筋上皮細胞 | |
Zhao et al. | Isolation and characterization of ovine umbilical cord-derived mesenchymal stem cells | |
US20230357724A1 (en) | Human umbilical cord mesenchymal stem cell sheets and methods for their production | |
CN110373382B (zh) | 一种ips细胞提取物的提取方法及利用ips细胞提取物逆转衰老的间充质干细胞的方法 |