RU2018322C1

RU2018322C1 - Vaccine against swine erysipelas

Info

Publication number: RU2018322C1
Authority: RU
Inventors: Николай Алексеевич Зубец
Original assignee: Николай Алексеевич Зубец
Priority date: 1991-08-05
Filing date: 1991-08-05
Publication date: 1994-08-30

Abstract

FIELD: immunoprophylaxis. SUBSTANCE: immunogenic activity of vaccine against swine erysipelas produced from VR-2 strain is improved by introducing the second vaccinating strain of causative agent of swine erysipelas Erysipelothrix insidiosa VGNKI-6/24. Relation of these two strains in the claimed vaccine is as follows, wt.-%: broth culture of VR-2 strain, 50-16; broth culture of VGNKI-6/24 strain, 16.7; saccharose, 2.4-2.6; gelatine, 0.4-0.5; agar, 0.07-0.08. Immunogenic activity of the claimed vaccine increases as compared with the prototype when the immunizing dose is reduced 8 times. EFFECT: higher curative effect. 3 tbl

Description

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии и представляет собой живую вакцину для профилактики рожи свиней. The invention relates to biotechnology and veterinary medicine and is a live vaccine for the prevention of swine erysipelas.

Широко известны вакцинные препараты против рожи свиней, такие как депонированная из матрикса Конева вакцина из штамма ВР-2, инактивированная гидроокись алюминиевая вакцина из штаммов возбудителей рожи свиней группы В [1]. Vaccine preparations against pig erysipelas are widely known, such as the vaccine deposited from the Konev matrix from the strain BP-2, inactivated aluminum hydroxide vaccine from the strains of pathogens of porcine erysipelas of group B [1].

Прототипом заявленного изобретения является живая вакцина против рожи свиней, содержащая суспензию аттенуированного штамма Erysipelothrix insidiosa ВР-2 в среде выращивания и стабилизатор из сахарозы, желатина, агара [2]. The prototype of the claimed invention is a live vaccine against erysipelas of pigs containing a suspension of attenuated strain of Erysipelothrix insidiosa BP-2 in a growing medium and a stabilizer from sucrose, gelatin, agar [2].

Известные вакцины против рожи свиней малоэффективны, поскольку продолжительность иммунитета после применения любой из них не превышает 3-4 месяцев. Known vaccines against swine erysipelas are ineffective, since the duration of immunity after using any of them does not exceed 3-4 months.

Целью изобретения является повышение иммуногенной активности вакцины. The aim of the invention is to increase the immunogenic activity of the vaccine.

Это достигается тем, что живая вакцина против рожи свиней, содержащая культуру аттенуированного штамма Erysipelothrix insidiosa ВР-2 и стабилизатор сахарозы, желатина и агара, дополнительно содержит культуру штамма ВГНКИ-6/24 при следующих соотношениях компонентов, мас.%:
Бульонная культура штамма ВР-2 50-16,7
Бульонная культура штамма ВГНКИ-6/24 16,7-50
Сахароза 2,4-2,6
Желатин 0,4-0,5
Агар 0,07-0,08
Дистиллированная вода Остальное
Штаммы Erysipelothrix insidiosa ВГНКИ-6/24 (авт. св. по заявке N 4788259/13, кл. С 12 N 1/20) и ВР-2 [2] депонированы в коллекции микроорганизмов ВГНКИ ветпрепаратов.This is achieved by the fact that a live vaccine against erysipelas of pigs containing a culture of attenuated strain of Erysipelothrix insidiosa BP-2 and a stabilizer of sucrose, gelatin and agar, additionally contains a culture of strain VGNKI-6/24 in the following ratios of components, wt.%:
Bouillon culture of strain BP-2 50-16.7
Bouillon culture of strain VGNKI-6/24 16.7-50
Sucrose 2.4-2.6
Gelatin 0.4-0.5
Agar 0.07-0.08
Distilled Water Else
Strains Erysipelothrix insidiosa VGNKI-6/24 (ed. St. on the application N 4788259/13, class C 12 N 1/20) and BP-2 [2] were deposited in the collection of microorganisms VGNKI veterinary drugs.

П р и м е р 1. Заявленную вакцину готовят следующим образом. PRI me R 1. The claimed vaccine is prepared as follows.

Штаммы Erysipelothrix insidiosa ВР-2 и ВГНКИ-6/24 выращивают на среде Хоттингера рН 7,2-7,4 раздельно. Время выращивания штамма ВР-2 12 ч, а штамма ВГНКИ-6/24 20 ч при температуре 37оС. Затем полученные культуры смешивают и совместно доращивают при той же температуре в течение 4 ч. Strains Erysipelothrix insidiosa BP-2 and VGNKI-6/24 are grown on Hottinger medium pH 7.2-7.4 separately. The growing time of strain BP-2 is 12 hours, and strain VGNKI-6/24 is 20 hours at a temperature of 37 ° C. Then, the resulting cultures are mixed and grown together at the same temperature for 4 hours.

К полученной смеси культур штаммов возбудителей рожи ВР-2 и ВГНКИ-6/24 добавляют 1/3 часть среды высушивания (33,3%), представляющей собой 7,5-8,0% сахарозы, 1,2-1,5% желатина и 0,2-0,24% агара на калийфосфатном буфере. Полученную смесь подвергают лиофильной сушке известным способом (ТУ "Вакцина сухая против рожи свиней" 10-09-132-91. ОКП 93-8415-0800-00). To the resulting mixture of cultures of strains of erysipelas pathogens BP-2 and VGNKI-6/24 add 1/3 of the drying medium (33.3%), which is 7.5-8.0% sucrose, 1.2-1.5% gelatin and 0.2-0.24% agar in potassium phosphate buffer. The resulting mixture is subjected to freeze drying in a known manner (TU "Vaccine dry against swine erysipelas" 10-09-132-91. OKP 93-8415-0800-00).

Каждым образцом вакцины иммунизируют по 20 белых мышей в дозах с различным соотношением микробных клеток (м.кл.) штаммов ВР-2 и ВГНКИ-6/24 при общем количестве 40 микробных клеток в прививной дозе. При этом процентное соотношение компонентов среды высушивания остается постоянным, но их количество в три раза меньше (сахарозы 2,4-2,6; желатина 0,4-0,5%, агара 0,07-0,08% ), поскольку среда высушивания в общем объеме вакцины занимает 1/3 часть. Each vaccine sample was immunized with 20 white mice in doses with different ratios of microbial cells (mcl) of strains BP-2 and VGNKI-6/24 with a total number of 40 microbial cells in a vaccination dose. The percentage of components of the drying medium remains constant, but their amount is three times less (sucrose 2.4-2.6; gelatin 0.4-0.5%, agar 0.07-0.08%), since the medium drying in the total volume of the vaccine takes 1/3 part.

Через 20 дней белых мышей заражают сухой культурой контрольного штамма возбудителя рожи свиней N 149 в дозе 100 ЛД50. After 20 days, white mice are infected with a dry culture of a control strain of the pathogen of pig erysipelas N 149 at a dose of 100 LD50.

Результаты опыта представлены в табл. 1. The results of the experiment are presented in table. 1.

Соответственно данным табл. 1 иммуногенная активность заявленной вакцины зависит от определенного соотношения штаммов возбудителей рожи, входящих в смесь, и не зависит от количества компонентов среды высушивания. According to the table. 1 immunogenic activity of the claimed vaccine depends on a certain ratio of strains of erysipelas pathogens included in the mixture and does not depend on the number of components of the drying medium.

Минимальное количество микробных клеток каждого из штаммов, входящих в смесь, необходимое для образования напряженного иммунитета у белых мышей, составляет 16,7% от общего количества микробных клеток в смеси (66,6%). The minimum number of microbial cells of each of the strains included in the mixture, necessary for the formation of intense immunity in white mice, is 16.7% of the total number of microbial cells in the mixture (66.6%).

Оптимальное соотношение микробных клеток штаммов, входящих в смесь составляет 1:1, т.е. 33,3% к 33,3%. The optimal ratio of microbial cells of the strains included in the mixture is 1: 1, i.e. 33.3% to 33.3%.

П р и м е р 2. Иммуногенную активность заявленной вакцины изучают на подсвинках 4-месячного возраста, не вакцинированных против рожи. PRI me R 2. The immunogenic activity of the claimed vaccine is studied on gilts of 4 months of age, not vaccinated against erysipelas.

Четыре группы подсвинков (по 4 головы) иммунизируют вакциной внутримышечно в разных дозах с шагом 10:1,8 млрд., 180 млн., 18 млн., 1,8 млн. живых микробных клеток, однократно в объеме 1 млн. Пятую группу (4 головы) оставят невакцинированной в качестве контроля. Four groups of gilts (4 heads each) are immunized with the vaccine intramuscularly in different doses in increments of 10: 1.8 billion, 180 million, 18 million, 1.8 million live microbial cells, once in a volume of 1 million. Fifth group ( 4 heads) will be left unvaccinated as a control.

Через 16 сут. после иммунизации всех опытных и контрольных поросят заразят культурой контрольного вирулентного штамма Erysipelothrix insidiose С-17 возбудителя рожи свиней с содержанием живых бактерий рожи в инфицирующей дозе 4 млрд. Результаты опыта приведены в табл. 2. After 16 days. after immunization, all experimental and control piglets will be infected with the culture of the control virulent strain Erysipelothrix insidiose C-17 of the pathogen of pig erysipelas containing live erysipelas bacteria in an infectious dose of 4 billion. The experimental results are given in table. 2.

Соответственно данным табл. 2 иммунизирующая доза заявленной вакцины
минимальная 18 млн. м.к.;
максимальная 1,8 млрд. м.к.;
средняя 180 млн. м.к.According to the table. 2 immunizing dose of the claimed vaccine
minimum 18 million sq.m .;
maximum 1.8 billion sq.m .;
average 180 mln.m.

П р и м е р 3. Длительность иммунитета заявленной вакцины определяют в хозяйстве при профилактической вакцинации свиней. При этом прививают поросят 2-2,5-месячного возраста согласно наставлению по ее применению однократно, внутримышечно в дозе 50 млн. микробных клеток. Одновременно иммунизируют аналогичных поросят в этом же хозяйстве коммерческой вакциной сухой живой против рожи свиней из штамма ВР-2, изготовленной Краснодарской биофабрикой. PRI me R 3. The duration of the immunity of the claimed vaccine is determined on the farm during the preventive vaccination of pigs. At the same time, piglets of 2-2.5 months of age are vaccinated according to the instructions for its use once, intramuscularly at a dose of 50 million microbial cells. At the same time, similar piglets in the same farm are immunized with a live dry live vaccine against pig erysipelas from strain BP-2 manufactured by the Krasnodar Biological Factory.

Напряженность иммунитета у свиней определяют через 4,6 и 8 месяцев после вакцинации путем заражения вирулентным заражающим штаммом возбудителя рожи "С-17" в дозе 4 млрд. микробных клеток. Результаты опыта по определению длительности иммунитета у свиней представлены в табл. 3. Immunity in pigs is determined after 4.6 and 8 months after vaccination by infection with a virulent infectious strain of the causative agent of erysipelas "C-17" at a dose of 4 billion microbial cells. The results of the experiment to determine the duration of immunity in pigs are presented in table. 3.

Соответственно данным таблицы максимальный срок иммунитета у вакцины, изготовленной из штамма ВР-2 при двухкратной иммунизации в дозе 200 млн. микробных клеток, менее 4 месяцев. У заявленной вакцины при однократной иммунизации в дозе 50 млн. микробных клеток длительность иммунитета 8 месяцев (срок наблюдения). According to the table, the maximum immunity for a vaccine made from strain BP-2 with double immunization at a dose of 200 million microbial cells is less than 4 months. The claimed vaccine with a single immunization at a dose of 50 million microbial cells, the duration of immunity is 8 months (observation period).

Заявленная вакцина сухая против рожи свиней ареактогенна для свиней в дозе, превышающей иимунизирующую дозу в 10 раз. Вакцина свободна от контаминации посторонней микрофлорой. The claimed vaccine is dry against erysipelas of pigs areactogenic for pigs at a dose exceeding the immunizing dose by 10 times. The vaccine is free from contamination by extraneous microflora.

Claims

PIG NUTRITION VACCINE containing a broth culture of the strain Erysipelothrix in sidiosa BP-2, sucrose, gelatin, agar and distilled water, characterized in that it additionally contains a broth culture of the strain Erysipelothrix insidiosa VGNKI-6/24 in the following ratios of components, wt.%. :
Bouillon culture of strain Erysipelothrix insidiosa VGNKI-6/24 50.0 - 16.7
Bouillon culture of strain Erysipelothrix insidiosa BP-2 16.7 - 50.0
Sucrose 2.4 - 2.6
Gelatin 0.4 - 0.5
Agar 0.07 - 0.08
Distilled Water Else
the total number of microbial cells of the cultures of the strains is (0.18 - 1.0) · 10 ⁹ / ml of the vaccine.