Claims (17)
1. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli SGM1.0 [pPYC] - продуцент янтарной кислоты, обладающий инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE и активностью пируваткарбоксилазы.1. Recombinant bacterial strain Escherichia coli SGM1.0 [pPYC] - a producer of succinic acid with inactivated genes ackA, pta, poxB, ldhA, adhE and pyruvate carboxylase activity.
2. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.1, отличающийся тем, что активность пируваткарбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки штамма молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1.2. The recombinant bacterial strain Escherichia coli according to claim 1, characterized in that the activity of pyruvate carboxylase is provided by introducing into the cells of the strain a DNA molecule containing a gene encoding an enzyme having an activity classified as K.F. 6.4.1.1.
3. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli SGM1.1 [pPYC] - продуцент янтарной кислоты, обладающий инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, iclR и активностью пируваткарбоксилазы.3. Recombinant bacterial strain Escherichia coli SGM1.1 [pPYC] - a producer of succinic acid with inactivated genes ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, iclR and pyruvate carboxylase activity.
4. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.3, отличающийся тем, что активность пируваткарбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки штамма молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1.4. The recombinant strain of bacteria Escherichia coli according to claim 3, characterized in that the activity of pyruvate carboxylase is provided by introducing into the cells of the strain a DNA molecule containing a gene encoding an enzyme having an activity classified as K.F. 6.4.1.1.
5. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli SGM2.0 [pPYC] - продуцент янтарной кислоты, обладающий инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceFv. IpdA, и активностью пируваткарбоксилазы.5. Recombinant bacterial strain Escherichia coli SGM2.0 [pPYC] - a producer of succinic acid with inactivated genes ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, enhanced expression of ACEE, aceFv genes. IpdA, and pyruvate carboxylase activity.
6. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.5, отличающийся тем, что активность пируваткарбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки штамма молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1.6. The recombinant bacterial strain Escherichia coli according to claim 5, characterized in that the activity of pyruvate carboxylase is provided by introducing into the cells of the strain a DNA molecule containing a gene encoding an enzyme having an activity classified as K.F. 6.4.1.1.
7. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.5, отличающийся тем, что экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме штамма нуклеотидной последовательности природного промотора, контролирующего экспрессию генов aceEF-lpdA оперона, на более сильный промотор.7. The recombinant bacterial strain Escherichia coli according to claim 5, characterized in that the expression of the ACEE, aceF and lpdA genes is enhanced by replacing the nucleotide sequence of the natural promoter controlling the expression of the aceEF-lpdA gene of the operon in the chromosome with a stronger promoter.
8. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli SGM2.1 [pPYC] - продуцент янтарной кислоты, обладающий инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, iclR, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируваткарбоксилазы.8. The recombinant bacterial strain Escherichia coli SGM2.1 [pPYC] is a succinic acid producer possessing inactivated ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, iclR genes, enhanced expression of ACEE, aceF and lpdA genes, and pyruvate carboxylase activity.
9. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.8, отличающийся тем, что активность пируваткарбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки штамма молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1.9. The recombinant strain of bacteria Escherichia coli according to claim 8, characterized in that the activity of pyruvate carboxylase is ensured by introducing into the cells of the strain a DNA molecule containing a gene encoding an enzyme having an activity classified as K.F. 6.4.1.1.
10. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.8, отличающийся тем, что экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме штамма нуклеотидной последовательности природного промотора, контролирующего экспрессию генов aceEF-lpdA оперона, на более сильный промотор.10. The recombinant bacterial strain Escherichia coli according to claim 8, characterized in that the expression of the ACEE, aceF and lpdA genes is enhanced by replacing the nucleotide sequence of the natural promoter controlling the expression of the aceEF-lpdA gene of the operon in the chromosome with a stronger promoter.
11. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli SGM3.0 [pPYC] - продуцент янтарной кислоты, обладающий инактивированными генами ackA, pta, рохВ, ldhA, adhE, pflB, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируваткарбоксилазы.11. The recombinant bacterial strain Escherichia coli SGM3.0 [pPYC] is a succinic acid producer possessing inactivated ackA, pta, pohB, ldhA, adhE, pflB genes, enhanced expression of aceE, aceF and lpdA genes, and pyruvate carboxylase activity.
12. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.11, отличающийся тем, что активность пируваткарбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки штамма молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1.12. The recombinant bacterial strain Escherichia coli according to claim 11, characterized in that the activity of pyruvate carboxylase is provided by introducing into the cells of the strain a DNA molecule containing a gene encoding an enzyme having an activity classified as K.F. 6.4.1.1.
13. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.11, отличающийся тем, что экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме штамма нуклеотидной последовательности природного промотора, контролирующего экспрессию генов aceEF-lpdA оперона, на более сильный промотор.13. The recombinant bacterial strain Escherichia coli according to claim 11, characterized in that the expression of the ACEE, aceF and lpdA genes is enhanced by replacing the nucleotide sequence of the natural promoter controlling the expression of the aceEF-lpdA gene of the operon in the chromosome with a stronger promoter.
14. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli SGM3.1 [pPYC] - продуцент янтарной кислоты, обладающий инактивированными генами ackA, pta, рохВ, ldhA, adhE, pflB, iclR, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируваткарбоксилазы.14. The recombinant bacterial strain Escherichia coli SGM3.1 [pPYC] is a succinic acid producer possessing inactivated ackA, pta, pohB, ldhA, adhE, pflB, iclR genes, enhanced expression of acee, aceF and lpdA genes, and pyruvate carboxylase activity.
15. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.14, отличающийся тем, что активность пируваткарбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки штамма молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1.15. The recombinant bacterial strain Escherichia coli according to 14, characterized in that the activity of pyruvate carboxylase is provided by introducing into the cells of the strain a DNA molecule containing a gene encoding an enzyme having an activity classified as K.F. 6.4.1.1.
16. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.14, отличающийся тем, что экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме штамма нуклеотидной последовательности природного промотора, контролирующего экспрессию генов aceEF-lpdA оперона, на более сильный промотор.16. The recombinant bacterial strain Escherichia coli according to 14, characterized in that the expression of the ACEE, aceF and lpdA genes is enhanced by replacing the nucleotide sequence of the natural promoter controlling the expression of the aceEF-lpdA gene of the operon in the chromosome with a stronger promoter.
17. Способ получения янтарной кислоты путем культивирования рекомбинантного штамма по п.1 или 3, или 5, или 8, или 11, или 14 в питательной среде и выделения янтарной кислоты из культуральной жидкости.
17. A method for producing succinic acid by culturing the recombinant strain according to claim 1 or 3, or 5, or 8, or 11, or 14 in a nutrient medium and isolating succinic acid from the culture fluid.