RU2012100002A - Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, способ получения рекомбинантного мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, рекомбинантный мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом - Google Patents

Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, способ получения рекомбинантного мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, рекомбинантный мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом Download PDF

Info

Publication number
RU2012100002A
RU2012100002A RU2012100002/10A RU2012100002A RU2012100002A RU 2012100002 A RU2012100002 A RU 2012100002A RU 2012100002/10 A RU2012100002/10 A RU 2012100002/10A RU 2012100002 A RU2012100002 A RU 2012100002A RU 2012100002 A RU2012100002 A RU 2012100002A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
human tissue
tissue factor
mutein
terminal
bacterium
Prior art date
Application number
RU2012100002/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2550027C2 (ru
Inventor
Иван Иванович Воробьев
Надежда Александровна Орлова
Лев Алексеевич Усакин
Виктор Александрович Мацкевич
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Инновационный Центр "Новые Технологии и Материалы" (ООО "ИЦ Новтехмат")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Инновационный Центр "Новые Технологии и Материалы" (ООО "ИЦ Новтехмат") filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Инновационный Центр "Новые Технологии и Материалы" (ООО "ИЦ Новтехмат")
Priority to RU2012100002/10A priority Critical patent/RU2550027C2/ru
Publication of RU2012100002A publication Critical patent/RU2012100002A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2550027C2 publication Critical patent/RU2550027C2/ru

Links

Abstract

1. Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент ДНК, кодирующий предшественник мутеина [C245S] тканевого фактора человека, включающий последовательность, кодирующую отщепляемый N-концевой лидерный пептид, содержащий декагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы, слитую в рамке с последовательностью, кодирующей мутеин [C245S] тканевого фактора человека, слитый в рамке с последовательностью, кодирующей дополнительный С-концевой пептид, включающий гексагистидиновый кластер, под контролем промотора, функционирующего в бактериальной клетке.2. Экспрессионная плазмида по п. 1, отличающаяся тем, что указанная плазмида представлена плазмидой pHYP-10ETFCS6.3. Бактерия, принадлежащей к роду Escherichia, трансформированная плазмидой по п. 1, - продуцент предшественника мутеина [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом и отщепляемым N-концевым лидерным пептидом.4. Бактерия по п. 3, отличающаяся тем, что указанная бактерия представлена бактерией E.coli BL21[DE3]/pHYP-10ETFCS6.5. Предшественник мутеина [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом, включающим гексагистидиновый кластер и отщепляемым N-концевым лидерным пептидом, включающим декагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы.6. Способ получения мутеина [C245S] рекомбинантного тканевого фактора человека по п.5, включающий культивирование описанной выше бактерии в питательной среде, выделение телец включения, солюбилизацию белка-предшественника, металлохелатную хроматографию в денатурирующих условиях, рефолдинг и диафильтрацию раствора белка.7. Зрелый мутеин [C245S] тканевого фактора человека с до�

Claims (8)

1. Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент ДНК, кодирующий предшественник мутеина [C245S] тканевого фактора человека, включающий последовательность, кодирующую отщепляемый N-концевой лидерный пептид, содержащий декагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы, слитую в рамке с последовательностью, кодирующей мутеин [C245S] тканевого фактора человека, слитый в рамке с последовательностью, кодирующей дополнительный С-концевой пептид, включающий гексагистидиновый кластер, под контролем промотора, функционирующего в бактериальной клетке.
2. Экспрессионная плазмида по п. 1, отличающаяся тем, что указанная плазмида представлена плазмидой pHYP-10ETFCS6.
3. Бактерия, принадлежащей к роду Escherichia, трансформированная плазмидой по п. 1, - продуцент предшественника мутеина [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом и отщепляемым N-концевым лидерным пептидом.
4. Бактерия по п. 3, отличающаяся тем, что указанная бактерия представлена бактерией E.coli BL21[DE3]/pHYP-10ETFCS6.
5. Предшественник мутеина [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом, включающим гексагистидиновый кластер и отщепляемым N-концевым лидерным пептидом, включающим декагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы.
6. Способ получения мутеина [C245S] рекомбинантного тканевого фактора человека по п.5, включающий культивирование описанной выше бактерии в питательной среде, выделение телец включения, солюбилизацию белка-предшественника, металлохелатную хроматографию в денатурирующих условиях, рефолдинг и диафильтрацию раствора белка.
7. Зрелый мутеин [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом, включающим гексагистидиновый кластер.
8. Способ получения зрелого мутеина [C245S] тканевого фактора человека по п.7, включающий конверсию предшественника мутеина [C245S] тканевого фактора человека по п.5 обработкой энтерокиназой и удаление свободного пептида.
RU2012100002/10A 2012-01-01 2012-01-01 ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ RU2550027C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012100002/10A RU2550027C2 (ru) 2012-01-01 2012-01-01 ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012100002/10A RU2550027C2 (ru) 2012-01-01 2012-01-01 ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012100002A true RU2012100002A (ru) 2013-07-10
RU2550027C2 RU2550027C2 (ru) 2015-05-10

Family

ID=48787545

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012100002/10A RU2550027C2 (ru) 2012-01-01 2012-01-01 ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2550027C2 (ru)

Also Published As

Publication number Publication date
RU2550027C2 (ru) 2015-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101374149B1 (ko) 융합 단백질의 자가단백질분해성 절단에 의한 재조합단백질 생산
US20160060291A1 (en) Process for renaturation of polypeptides
MY184387A (en) Improved surface display of functional proteins in a broad range of gram negative bacteria
Tomisawa et al. Efficient production of a correctly folded mouse α-defensin, cryptdin-4, by refolding during inclusion body solubilization
RU2012100002A (ru) Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, способ получения рекомбинантного мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, рекомбинантный мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом
RU2011120249A (ru) Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий белок-предшественник дезоксирибонуклеазы i человека, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника дезоксирибонуклеазы i человека, способ получения рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека, и способ получения конъюгатов полиэтиленгликоля и рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека
RU2011121471A (ru) ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА, БАКТЕРИЯ E.coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА
CN1369014A (zh) 蛋白质生产
RU2011121473A (ru) ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ ТКАНЕВЫЙ АКТИВАТОР ПЛАЗМИНОГЕНА ЧЕЛОВЕКА, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА ТКАНЕВОГО АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА ЧЕЛОВЕКА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ТКАНЕВОГО АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА ЧЕЛОВЕКА
CN104195157A (zh) 生物活性肽在原核细胞中的高效率重组表达和纯化方法
RU2015100212A (ru) Химерные белки на основе hpv/cyaa и их применение в индукции имунного ответа против hpv-инфекции и расстройств, вызываемых hpv
Zhang et al. Large-scale expression, purification, and glucose uptake activity of recombinant human FGF21 in Escherichia coli
RU2010134595A (ru) РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК рЕТ22b(+)/СЛАРП-1, КОДИРУЮЩАЯ БЕЛОК СЛАРП-1, И ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli BL21(DE3)/pET22b(+)/СЛАРП-1 - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА СЛАРП-1 ЧЕЛОВЕКА
Bals et al. Expression and purification of bioactive soluble murine stem cell factor from recombinant Escherichia coli using thioredoxin as fusion partner
CN100500841C (zh) 一种表达可溶性trail蛋白的方法
US20220127324A1 (en) Method for continuous production of recombinant glp-1 peptide by bacteria
Peymanfar et al. Production and simple purification of recombinant human granulocyte colonystimulating factor using the inteintag in Escherichia Coli
CN106148381B (zh) 一种利用枯草芽孢杆菌高效表达猪防御素的方法
RU2012139928A (ru) РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pPA-OPRF-ETA, КОДИРУЮЩАЯ СИНТЕЗ ГИБРИДНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, ВКЛЮЧАЮЩЕГО АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ И ЭКЗОТОКСИНА А PSEUDOMONAS aeruginosa, ШТАММ ESCHERICHIA coli PA-OPRF-ETA - ПРОДУЦЕНТ ГИБРИДНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, ВКЛЮЧАЮЩЕГО АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ И ЭКЗОТОКСИНА А PSEUDOMONAS aeruginosa, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИБРИДНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, ВКЛЮЧАЮЩЕГО АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ И ЭКЗОТОКСИНА А PSEUDOMONAS aeruginosa
RU2013107777A (ru) Поливалентная вакцина против гриппа на основе гибридного белка
Tsuji et al. L-Cysteine-enhanced renaturation of bioactive soluble tumor necrosis factor ligand family member LIGHT from inclusion bodies in Escherichia coli
Maleki et al. A convenient method for solubilization and refolding recombinant proteins: an experience from recombinant mouse TGF-β1
Kim et al. Expression and purification of recombinant human bone morphogenetic protein-7 (rhBMP-7) in Bacillus subtilis
EA201070461A1 (ru) РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pPHINS21, КОДИРУЮЩАЯ ГИБРИДНЫЙ БЕЛОК С ПРОИНСУЛИНОМ ЧЕЛОВЕКА, ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI JM109/PHINS21 - ПРОДУЦЕНТ ГИБРИДНОГО БЕЛКА С ПРОИНСУЛИНОМ ЧЕЛОВЕКА И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА
Wang et al. Functional expression of hepassocin in Escherichia coli using SUMO fusion partner and molecular chaperones

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20130809

FZ9A Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal)

Effective date: 20140512

HZ9A Changing address for correspondence with an applicant
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20170102