RU2012100002A - Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, способ получения рекомбинантного мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, рекомбинантный мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом - Google Patents
Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, способ получения рекомбинантного мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, рекомбинантный мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом Download PDFInfo
- Publication number
- RU2012100002A RU2012100002A RU2012100002/10A RU2012100002A RU2012100002A RU 2012100002 A RU2012100002 A RU 2012100002A RU 2012100002/10 A RU2012100002/10 A RU 2012100002/10A RU 2012100002 A RU2012100002 A RU 2012100002A RU 2012100002 A RU2012100002 A RU 2012100002A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- human tissue
- tissue factor
- mutein
- terminal
- bacterium
- Prior art date
Links
Abstract
1. Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент ДНК, кодирующий предшественник мутеина [C245S] тканевого фактора человека, включающий последовательность, кодирующую отщепляемый N-концевой лидерный пептид, содержащий декагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы, слитую в рамке с последовательностью, кодирующей мутеин [C245S] тканевого фактора человека, слитый в рамке с последовательностью, кодирующей дополнительный С-концевой пептид, включающий гексагистидиновый кластер, под контролем промотора, функционирующего в бактериальной клетке.2. Экспрессионная плазмида по п. 1, отличающаяся тем, что указанная плазмида представлена плазмидой pHYP-10ETFCS6.3. Бактерия, принадлежащей к роду Escherichia, трансформированная плазмидой по п. 1, - продуцент предшественника мутеина [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом и отщепляемым N-концевым лидерным пептидом.4. Бактерия по п. 3, отличающаяся тем, что указанная бактерия представлена бактерией E.coli BL21[DE3]/pHYP-10ETFCS6.5. Предшественник мутеина [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом, включающим гексагистидиновый кластер и отщепляемым N-концевым лидерным пептидом, включающим декагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы.6. Способ получения мутеина [C245S] рекомбинантного тканевого фактора человека по п.5, включающий культивирование описанной выше бактерии в питательной среде, выделение телец включения, солюбилизацию белка-предшественника, металлохелатную хроматографию в денатурирующих условиях, рефолдинг и диафильтрацию раствора белка.7. Зрелый мутеин [C245S] тканевого фактора человека с до�
Claims (8)
1. Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент ДНК, кодирующий предшественник мутеина [C245S] тканевого фактора человека, включающий последовательность, кодирующую отщепляемый N-концевой лидерный пептид, содержащий декагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы, слитую в рамке с последовательностью, кодирующей мутеин [C245S] тканевого фактора человека, слитый в рамке с последовательностью, кодирующей дополнительный С-концевой пептид, включающий гексагистидиновый кластер, под контролем промотора, функционирующего в бактериальной клетке.
2. Экспрессионная плазмида по п. 1, отличающаяся тем, что указанная плазмида представлена плазмидой pHYP-10ETFCS6.
3. Бактерия, принадлежащей к роду Escherichia, трансформированная плазмидой по п. 1, - продуцент предшественника мутеина [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом и отщепляемым N-концевым лидерным пептидом.
4. Бактерия по п. 3, отличающаяся тем, что указанная бактерия представлена бактерией E.coli BL21[DE3]/pHYP-10ETFCS6.
5. Предшественник мутеина [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом, включающим гексагистидиновый кластер и отщепляемым N-концевым лидерным пептидом, включающим декагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы.
6. Способ получения мутеина [C245S] рекомбинантного тканевого фактора человека по п.5, включающий культивирование описанной выше бактерии в питательной среде, выделение телец включения, солюбилизацию белка-предшественника, металлохелатную хроматографию в денатурирующих условиях, рефолдинг и диафильтрацию раствора белка.
7. Зрелый мутеин [C245S] тканевого фактора человека с дополнительным С-концевым пептидом, включающим гексагистидиновый кластер.
8. Способ получения зрелого мутеина [C245S] тканевого фактора человека по п.7, включающий конверсию предшественника мутеина [C245S] тканевого фактора человека по п.5 обработкой энтерокиназой и удаление свободного пептида.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012100002/10A RU2550027C2 (ru) | 2012-01-01 | 2012-01-01 | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012100002/10A RU2550027C2 (ru) | 2012-01-01 | 2012-01-01 | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2012100002A true RU2012100002A (ru) | 2013-07-10 |
RU2550027C2 RU2550027C2 (ru) | 2015-05-10 |
Family
ID=48787545
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012100002/10A RU2550027C2 (ru) | 2012-01-01 | 2012-01-01 | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C245S] ТКАНЕВОГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА С НЕОТДЕЛЯЕМЫМ С-КОНЦЕВЫМ ТАГОМ |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2550027C2 (ru) |
-
2012
- 2012-01-01 RU RU2012100002/10A patent/RU2550027C2/ru not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2550027C2 (ru) | 2015-05-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101374149B1 (ko) | 융합 단백질의 자가단백질분해성 절단에 의한 재조합단백질 생산 | |
US20160060291A1 (en) | Process for renaturation of polypeptides | |
MY184387A (en) | Improved surface display of functional proteins in a broad range of gram negative bacteria | |
Tomisawa et al. | Efficient production of a correctly folded mouse α-defensin, cryptdin-4, by refolding during inclusion body solubilization | |
RU2012100002A (ru) | Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, способ получения рекомбинантного мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, рекомбинантный мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом | |
RU2011120249A (ru) | Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий белок-предшественник дезоксирибонуклеазы i человека, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника дезоксирибонуклеазы i человека, способ получения рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека, и способ получения конъюгатов полиэтиленгликоля и рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека | |
RU2011121471A (ru) | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА, БАКТЕРИЯ E.coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА | |
CN1369014A (zh) | 蛋白质生产 | |
RU2011121473A (ru) | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ ТКАНЕВЫЙ АКТИВАТОР ПЛАЗМИНОГЕНА ЧЕЛОВЕКА, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА ТКАНЕВОГО АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА ЧЕЛОВЕКА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ТКАНЕВОГО АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА ЧЕЛОВЕКА | |
CN104195157A (zh) | 生物活性肽在原核细胞中的高效率重组表达和纯化方法 | |
RU2015100212A (ru) | Химерные белки на основе hpv/cyaa и их применение в индукции имунного ответа против hpv-инфекции и расстройств, вызываемых hpv | |
Zhang et al. | Large-scale expression, purification, and glucose uptake activity of recombinant human FGF21 in Escherichia coli | |
RU2010134595A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК рЕТ22b(+)/СЛАРП-1, КОДИРУЮЩАЯ БЕЛОК СЛАРП-1, И ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli BL21(DE3)/pET22b(+)/СЛАРП-1 - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА СЛАРП-1 ЧЕЛОВЕКА | |
Bals et al. | Expression and purification of bioactive soluble murine stem cell factor from recombinant Escherichia coli using thioredoxin as fusion partner | |
CN100500841C (zh) | 一种表达可溶性trail蛋白的方法 | |
US20220127324A1 (en) | Method for continuous production of recombinant glp-1 peptide by bacteria | |
Peymanfar et al. | Production and simple purification of recombinant human granulocyte colonystimulating factor using the inteintag in Escherichia Coli | |
CN106148381B (zh) | 一种利用枯草芽孢杆菌高效表达猪防御素的方法 | |
RU2012139928A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pPA-OPRF-ETA, КОДИРУЮЩАЯ СИНТЕЗ ГИБРИДНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, ВКЛЮЧАЮЩЕГО АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ И ЭКЗОТОКСИНА А PSEUDOMONAS aeruginosa, ШТАММ ESCHERICHIA coli PA-OPRF-ETA - ПРОДУЦЕНТ ГИБРИДНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, ВКЛЮЧАЮЩЕГО АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ И ЭКЗОТОКСИНА А PSEUDOMONAS aeruginosa, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИБРИДНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, ВКЛЮЧАЮЩЕГО АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ И ЭКЗОТОКСИНА А PSEUDOMONAS aeruginosa | |
RU2013107777A (ru) | Поливалентная вакцина против гриппа на основе гибридного белка | |
Tsuji et al. | L-Cysteine-enhanced renaturation of bioactive soluble tumor necrosis factor ligand family member LIGHT from inclusion bodies in Escherichia coli | |
Maleki et al. | A convenient method for solubilization and refolding recombinant proteins: an experience from recombinant mouse TGF-β1 | |
Kim et al. | Expression and purification of recombinant human bone morphogenetic protein-7 (rhBMP-7) in Bacillus subtilis | |
EA201070461A1 (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pPHINS21, КОДИРУЮЩАЯ ГИБРИДНЫЙ БЕЛОК С ПРОИНСУЛИНОМ ЧЕЛОВЕКА, ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI JM109/PHINS21 - ПРОДУЦЕНТ ГИБРИДНОГО БЕЛКА С ПРОИНСУЛИНОМ ЧЕЛОВЕКА И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА | |
Wang et al. | Functional expression of hepassocin in Escherichia coli using SUMO fusion partner and molecular chaperones |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20130809 |
|
FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20140512 |
|
HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant | ||
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170102 |