RU2011120249A - Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий белок-предшественник дезоксирибонуклеазы i человека, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника дезоксирибонуклеазы i человека, способ получения рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека, и способ получения конъюгатов полиэтиленгликоля и рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека - Google Patents
Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий белок-предшественник дезоксирибонуклеазы i человека, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника дезоксирибонуклеазы i человека, способ получения рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека, и способ получения конъюгатов полиэтиленгликоля и рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2011120249A RU2011120249A RU2011120249/10A RU2011120249A RU2011120249A RU 2011120249 A RU2011120249 A RU 2011120249A RU 2011120249/10 A RU2011120249/10 A RU 2011120249/10A RU 2011120249 A RU2011120249 A RU 2011120249A RU 2011120249 A RU2011120249 A RU 2011120249A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mutein
- pet28ek
- human dnase
- dnase
- coli
- Prior art date
Links
Abstract
1. Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент ДНК, кодирующий предшественник рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина, включающий последовательность, кодирующую отщепляемый N-концевой лидер, включающий гексагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы, слитую в рамке с последовательностью, кодирующей ДНКазу I человека, под контролем промотора, функционирующего в бактериальной клетке2. Экспрессионная плазмида по п.1, отличающаяся тем, что указанная плазмида выбрана из группы, состоящей из плазмид pET28EK-DNASEI, pET28EK-DNASEIC18 и pET28EK-DNASEIC106.3. Бактерия, принадлежащая к роду Escherichia, трансформированная плазмидой по п.1 - продуцент предшественника рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина.4. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанная бактерия выбрана из группы, включающей бактерии Е.coli BL21[DE3]/pET28EK-DNASEI, E.coli BL21[DE3]/pET28EK-DNASEI18C и Е.coli BL21[DE3]/pET28EK-DNASEI106C.5. Предшественник рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина, содержащий отщепляемый N-концевой лидер, включающий гексагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы.6. Предшественник мутеина ДНКазы I человека по п.5, отличающийся тем, что указанный мутеин содержит точечную замену N18C или N106C.7. Способ получения рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина, включающий культивирование описанной выше бактерии в питательной среде, выделение телец включения, солюбилизацию белка-предшественника, металлохелатную хроматографию в денатурирующих условиях, рефолдинг белка-предшественника, получение зрелого белка обработкой энтерокиназой и выделение указанного зрелого белка рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина.8. Способ по
Claims (12)
1. Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент ДНК, кодирующий предшественник рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина, включающий последовательность, кодирующую отщепляемый N-концевой лидер, включающий гексагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы, слитую в рамке с последовательностью, кодирующей ДНКазу I человека, под контролем промотора, функционирующего в бактериальной клетке
2. Экспрессионная плазмида по п.1, отличающаяся тем, что указанная плазмида выбрана из группы, состоящей из плазмид pET28EK-DNASEI, pET28EK-DNASEIC18 и pET28EK-DNASEIC106.
3. Бактерия, принадлежащая к роду Escherichia, трансформированная плазмидой по п.1 - продуцент предшественника рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина.
4. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанная бактерия выбрана из группы, включающей бактерии Е.coli BL21[DE3]/pET28EK-DNASEI, E.coli BL21[DE3]/pET28EK-DNASEI18C и Е.coli BL21[DE3]/pET28EK-DNASEI106C.
5. Предшественник рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина, содержащий отщепляемый N-концевой лидер, включающий гексагистидиновый кластер и последовательность узнавания энтерокиназы.
6. Предшественник мутеина ДНКазы I человека по п.5, отличающийся тем, что указанный мутеин содержит точечную замену N18C или N106C.
7. Способ получения рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина, включающий культивирование описанной выше бактерии в питательной среде, выделение телец включения, солюбилизацию белка-предшественника, металлохелатную хроматографию в денатурирующих условиях, рефолдинг белка-предшественника, получение зрелого белка обработкой энтерокиназой и выделение указанного зрелого белка рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что культивируют штамм Е.coli BL21[DE3]/pET28EK-DNASEI, Е.coli BL21[DE3]/pET28EK-DNASEI18C или Е.coli BL21 [DE3]/pET28EK-DNASEI106C.
9. Способ по п.7, отличающийся тем, что указанный мутеин содержит точечную замену N18C или N106C.
10. Способ получения конъюгатов полиэтиленгликоля и рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина, включающий предварительное ограниченное восстановление белков, инкубацию с малеимид-полиэтиленгликолем и выделение полученных конъюгатов.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанный мутеин содержит точечную замену N18C или N106C.
12. Конъюгат полиэтиленгликоля и рекомбинантной ДНКазы I человека или ее мутеина, полученный способом по п.10.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011120249/10A RU2502803C2 (ru) | 2011-05-20 | 2011-05-20 | ПЛАЗМИДА ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ В КЛЕТКАХ БАКТЕРИИ, ПРИНАДЛЕЖАЩЕЙ К РОДУ Escherichia, НЕАКТИВНОГО ПРЕДШЕСТВЕННИКА ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНОВ, БАКТЕРИЯ, ПРИНАДЛЕЖАЩАЯ К РОДУ Escherichia, - ПРОДУЦЕНТ НЕАКТИВНОГО ПРЕДШЕСТВЕННИКА РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНА, ПРЕДШЕСТВЕННИК РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЪЮГАТОВ ПОЛИЭТИЛЕНГЛИКОЛЯ И РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА, ФЕРМЕНТАТИВНО АКТИВНЫЙ КОНЪЮГАТ МУТЕИНА РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011120249/10A RU2502803C2 (ru) | 2011-05-20 | 2011-05-20 | ПЛАЗМИДА ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ В КЛЕТКАХ БАКТЕРИИ, ПРИНАДЛЕЖАЩЕЙ К РОДУ Escherichia, НЕАКТИВНОГО ПРЕДШЕСТВЕННИКА ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНОВ, БАКТЕРИЯ, ПРИНАДЛЕЖАЩАЯ К РОДУ Escherichia, - ПРОДУЦЕНТ НЕАКТИВНОГО ПРЕДШЕСТВЕННИКА РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНА, ПРЕДШЕСТВЕННИК РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЪЮГАТОВ ПОЛИЭТИЛЕНГЛИКОЛЯ И РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА, ФЕРМЕНТАТИВНО АКТИВНЫЙ КОНЪЮГАТ МУТЕИНА РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2011120249A true RU2011120249A (ru) | 2012-11-27 |
| RU2502803C2 RU2502803C2 (ru) | 2013-12-27 |
Family
ID=49254532
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011120249/10A RU2502803C2 (ru) | 2011-05-20 | 2011-05-20 | ПЛАЗМИДА ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ В КЛЕТКАХ БАКТЕРИИ, ПРИНАДЛЕЖАЩЕЙ К РОДУ Escherichia, НЕАКТИВНОГО ПРЕДШЕСТВЕННИКА ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНОВ, БАКТЕРИЯ, ПРИНАДЛЕЖАЩАЯ К РОДУ Escherichia, - ПРОДУЦЕНТ НЕАКТИВНОГО ПРЕДШЕСТВЕННИКА РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНА, ПРЕДШЕСТВЕННИК РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕЕ МУТЕИНА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЪЮГАТОВ ПОЛИЭТИЛЕНГЛИКОЛЯ И РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА, ФЕРМЕНТАТИВНО АКТИВНЫЙ КОНЪЮГАТ МУТЕИНА РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНКазы I ЧЕЛОВЕКА |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2502803C2 (ru) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2634416C1 (ru) * | 2017-05-05 | 2017-10-26 | Светлана Александровна Ермолаева | Штаммы-продуценты вариантов рекомбинантного белка Интерналин 321, агониста рецептора фактора роста |
| IL301970A (en) | 2020-10-07 | 2023-06-01 | Protalix Ltd | A long-acting DNase |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1231274A3 (en) * | 1994-11-21 | 2002-10-09 | The University Of Leeds | Modified porteinase inhibitors |
| US20050176108A1 (en) * | 2003-03-13 | 2005-08-11 | Young-Min Kim | Physiologically active polypeptide conjugate having prolonged in vivo half-life |
| US7067298B2 (en) * | 2003-03-31 | 2006-06-27 | Ambion, Inc. | Compositions and methods of using a synthetic Dnase I |
| DE602004029326D1 (de) * | 2004-01-23 | 2010-11-11 | Sloning Biotechnology Gmbh | Enzymatische Herstellung von Nukleinsäuremolekülen |
| RU2278688C1 (ru) * | 2004-12-02 | 2006-06-27 | Сергей Викторович Луценко | Препарат человеческого эндостатина и способ его получения |
| RU2316342C1 (ru) * | 2006-03-31 | 2008-02-10 | Автономная некоммерческая организация "Институт молекулярной диагностики" (АНО "ИнМоДи") | Вакцинная композиция для профилактики и лечения онкологических заболеваний, рекомбинантная плазмидная днк, обеспечивающая синтез гибридного белка, способ его получения |
-
2011
- 2011-05-20 RU RU2011120249/10A patent/RU2502803C2/ru not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2502803C2 (ru) | 2013-12-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2016518833A5 (ru) | ||
| US20150376245A1 (en) | Methods and compositions relating to crm197 | |
| WO2021139295A1 (zh) | 一种重组多肽连接酶原及其制备、激活方法与应用 | |
| RU2011133057A (ru) | Стабильный вектор конститутивно высокой экспрессии для получения вакцины против впч и трансформированные этим вектором рекомбинантные молочнокислые бактерии | |
| CN101906165B (zh) | 两种鱼类抗菌肽基因的串联表达产物及其表达方法 | |
| RU2011120249A (ru) | Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий белок-предшественник дезоксирибонуклеазы i человека, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника дезоксирибонуклеазы i человека, способ получения рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека, и способ получения конъюгатов полиэтиленгликоля и рекомбинантной дезоксирибонуклеазы i человека | |
| CN101812459A (zh) | 编码抗菌肽Lactoferricin B的核酸及其原核表达方法 | |
| EP3000823B1 (en) | Strong secretory signal peptide enhancing small peptide motif and use thereof | |
| WO2017181920A1 (zh) | 一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法 | |
| CN102220364A (zh) | 一种家蝇抗菌肽Cecropin A的制备方法 | |
| Paal et al. | A novel Ecotin-Ubiquitin-Tag (ECUT) for efficient, soluble peptide production in the periplasm of Escherichia coli | |
| RU2011121471A (ru) | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ МУТЕИН [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА, БАКТЕРИЯ E.coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА МУТЕИНА [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО МУТЕИНА [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА, РЕКОМБИНАНТНЫЙ МУТЕИН [C112S] ЛЕГКОЙ ЦЕПИ ЭНТЕРОКИНАЗЫ ЧЕЛОВЕКА | |
| RU2011121473A (ru) | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДА, СОДЕРЖАЩАЯ ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ ТКАНЕВЫЙ АКТИВАТОР ПЛАЗМИНОГЕНА ЧЕЛОВЕКА, БАКТЕРИЯ E. coli - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА-ПРЕДШЕСТВЕННИКА ТКАНЕВОГО АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА ЧЕЛОВЕКА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ТКАНЕВОГО АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА ЧЕЛОВЕКА | |
| RU2010134595A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК рЕТ22b(+)/СЛАРП-1, КОДИРУЮЩАЯ БЕЛОК СЛАРП-1, И ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli BL21(DE3)/pET22b(+)/СЛАРП-1 - ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА СЛАРП-1 ЧЕЛОВЕКА | |
| RU2012100002A (ru) | Экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, бактерия e. coli - продуцент белка-предшественника мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, способ получения рекомбинантного мутеина [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом, рекомбинантный мутеин [c245s] тканевого фактора человека с неотделяемым с-концевым тагом | |
| CN103397038A (zh) | 一种人白细胞介素-38的生产方法 | |
| CN103146631A (zh) | 一种表达可溶性猪γ-干扰素PoIFN-γ的基因工程菌及其构建方法和应用 | |
| RU2012139928A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pPA-OPRF-ETA, КОДИРУЮЩАЯ СИНТЕЗ ГИБРИДНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, ВКЛЮЧАЮЩЕГО АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ И ЭКЗОТОКСИНА А PSEUDOMONAS aeruginosa, ШТАММ ESCHERICHIA coli PA-OPRF-ETA - ПРОДУЦЕНТ ГИБРИДНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, ВКЛЮЧАЮЩЕГО АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ И ЭКЗОТОКСИНА А PSEUDOMONAS aeruginosa, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИБРИДНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, ВКЛЮЧАЮЩЕГО АМИНОКИСЛОТНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ БЕЛКА F НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ И ЭКЗОТОКСИНА А PSEUDOMONAS aeruginosa | |
| Lv et al. | Extracellular secretion of anticoagulant peptide hirudin in Lactococcus lactis using SP310mut2 signal peptide | |
| CN103319590B (zh) | 栉孔扇贝肽聚糖识别蛋白（CfPGRP-S1）的应用 | |
| CN106148381B (zh) | 一种利用枯草芽孢杆菌高效表达猪防御素的方法 | |
| CN101555485A (zh) | 重组人甲状旁腺激素(1-84)非融合表达及规模化制备方法 | |
| CN103911338A (zh) | 基于原核密码子偏好性构建高表达igf-1基因的工程菌 | |
| RU2007139262A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pHINS21, КОДИРУЮЩАЯ ГИБРИДНЫЙ БЕЛОК С ПРОИНСУЛИНОМ ЧЕЛОВЕКА, ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli JM109/pHINS21 - ПРОДУЦЕНТ ГИБРИДНОГО БЕЛКА С ПРОИНСУЛИНОМ ЧЕЛОВЕКА И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА | |
| US11401311B2 (en) | Recombinant activin A precursor protein |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170521 |