RU2011104431A - Конструкции и способы для продуцирования и секреции полипептидов - Google Patents

Конструкции и способы для продуцирования и секреции полипептидов Download PDF

Info

Publication number
RU2011104431A
RU2011104431A RU2011104431/10A RU2011104431A RU2011104431A RU 2011104431 A RU2011104431 A RU 2011104431A RU 2011104431/10 A RU2011104431/10 A RU 2011104431/10A RU 2011104431 A RU2011104431 A RU 2011104431A RU 2011104431 A RU2011104431 A RU 2011104431A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
recombinant microorganism
polypeptide
interest
module
protein
Prior art date
Application number
RU2011104431/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2525194C2 (ru
Inventor
Анри-Пьер ФЬЕРОБ (FR)
Анри-Пьер ФЬЕРОБ
Флоранс МИНГАРДОН (US)
Флоранс МИНГАРДОН
Анжелик ШАНАЛЬ-ВИАЛЬ (FR)
Анжелик ШАНАЛЬ-ВИАЛЬ
Original Assignee
Тотал С.А. (Fr)
Тотал С.А.
Ле Сентр Насьёналь Де Решерш Сьянтифик (Снрс) (Fr)
Ле Сентр Насьёналь Де Решерш Сьянтифик (Снрс)
Л'Юниверсите Де Ля Медитерране (Fr)
Л'Юниверсите Де Ля Медитерране
Л'Юниверсите Де Прованс (Fr)
Л'Юниверсите Де Прованс
Л'Энститю Насьёналь Де Сьянс Апплике (Инса) (Fr)
Л'Энститю Насьёналь Де Сьянс Апплике (Инса)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from EP08291120A external-priority patent/EP2192177A1/en
Application filed by Тотал С.А. (Fr), Тотал С.А., Ле Сентр Насьёналь Де Решерш Сьянтифик (Снрс) (Fr), Ле Сентр Насьёналь Де Решерш Сьянтифик (Снрс), Л'Юниверсите Де Ля Медитерране (Fr), Л'Юниверсите Де Ля Медитерране, Л'Юниверсите Де Прованс (Fr), Л'Юниверсите Де Прованс, Л'Энститю Насьёналь Де Сьянс Апплике (Инса) (Fr), Л'Энститю Насьёналь Де Сьянс Апплике (Инса) filed Critical Тотал С.А. (Fr)
Publication of RU2011104431A publication Critical patent/RU2011104431A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2525194C2 publication Critical patent/RU2525194C2/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14Hydrolases (3)
    • C12N9/24Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405Glucanases
    • C12N9/2434Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2437Cellulases (3.2.1.4; 3.2.1.74; 3.2.1.91; 3.2.1.150)
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • C07K2319/20Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • C07K2319/70Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02EREDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
    • Y02E50/00Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
    • Y02E50/10Biofuels, e.g. bio-diesel
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/52Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Рекомбинантный микроорганизм, содержащий полинуклеиновую кислоту, кодирующую слитый белок, состоящий из полипептидной последовательности, которая включает в данном порядке: ! - по меньшей мере один сигнальный пептид; ! - домен-носитель, содержащий по меньшей мере один углевод-связывающий модуль (СВМ) целлюлосомного поддерживающего белка, слитый по меньшей мере с одним модулем Х целлюлосомного поддерживающего белка; ! - по меньшей мере один интересующий полипептид; ! - по меньшей мере один пептидный линкер для связывания домена-носителя с интересующим полипептидом, ! где микроорганизм секретирует указанный интересующий полипептид. ! 2. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, который принадлежит к классу Clostridia. ! 3. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где указанная полипептидная последовательность включает два или более чем два модуля X. ! 4. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где указанный сигнальный пептид указанного целлюлосомного поддерживающего белка представляет собой сигнальный пептид поддерживающего белка CipC С.cellulolyticum или сигнальный пептид поддерживающего белка CipA С.acetobutylicum. ! 5. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где по меньшей мере один углевод-связывающий модуль представляет собой углевод-связывающий модуль типа 3а (СВМ3а). ! 6. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где по меньшей мере один модуль Х представляет собой модуль Х2 поддерживающего белка CipC С.cellulolyticum или модуль Х2 поддерживающего белка CipA С.acetobutylicum. ! 7. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где указанный по меньшей мере один интересующий полипептид представляет собой фермент, расщепляющий клеточную стенку. ! 8. Рекомбинантный микроорганизм

Claims (18)

1. Рекомбинантный микроорганизм, содержащий полинуклеиновую кислоту, кодирующую слитый белок, состоящий из полипептидной последовательности, которая включает в данном порядке:
- по меньшей мере один сигнальный пептид;
- домен-носитель, содержащий по меньшей мере один углевод-связывающий модуль (СВМ) целлюлосомного поддерживающего белка, слитый по меньшей мере с одним модулем Х целлюлосомного поддерживающего белка;
- по меньшей мере один интересующий полипептид;
- по меньшей мере один пептидный линкер для связывания домена-носителя с интересующим полипептидом,
где микроорганизм секретирует указанный интересующий полипептид.
2. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, который принадлежит к классу Clostridia.
3. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где указанная полипептидная последовательность включает два или более чем два модуля X.
4. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где указанный сигнальный пептид указанного целлюлосомного поддерживающего белка представляет собой сигнальный пептид поддерживающего белка CipC С.cellulolyticum или сигнальный пептид поддерживающего белка CipA С.acetobutylicum.
5. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где по меньшей мере один углевод-связывающий модуль представляет собой углевод-связывающий модуль типа 3а (СВМ3а).
6. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где по меньшей мере один модуль Х представляет собой модуль Х2 поддерживающего белка CipC С.cellulolyticum или модуль Х2 поддерживающего белка CipA С.acetobutylicum.
7. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где указанный по меньшей мере один интересующий полипептид представляет собой фермент, расщепляющий клеточную стенку.
8. Рекомбинантный микроорганизм по п.1, где указанный по меньшей мере один интересующий полипептид представляет собой целлюлазу.
9. Рекомбинантный микроорганизм по п.8, где указанный фермент представляет собой целлюлазу С.cellulolyticum.
10. Рекомбинантный микроорганизм по п.8, где указанный фермент представляет собой Cel48F или Cel9G.
11. Рекомбинантный микроорганизм по п.8, где указанный фермент представляет собой целлюлазу Cel5H S.degradans штамм 2-40.
12. Рекомбинантный микроорганизм по любому из пп.1-6, где по меньшей мере один интересующий полипептид представляет собой терапевтический белок, выбранный из группы, включающей терапевтические ферменты, цитокины и антитела.
13. Рекомбинантный микроорганизм по п.12, где указанный терапевтический белок представляет собой IL-2.
14. Рекомбинантный микроорганизм по п.2, который принадлежит к штамму Clostridium, выбранному из группы, включающей С.acetobutylicum и С.beijerinckii.
15. Способ продуцирования и секреции рекомбинантным микроорганизмом по меньшей мере одного интересующего гетерологичного или гомологичного полипептида, включающий введение в этот микроорганизм полинуклеиновой кислоты, кодирующей слитый белок, состоящий из полипептидной последовательности, которая включает:
- домен-носитель, содержащий по меньшей мере один углевод-связывающий модуль (СВМ) целлюлосомного поддерживающего белка, слитый по меньшей мере с одним модулем Х целлюлосомного поддерживающего белка;
- по меньшей мере один интересующий полипептид;
- по меньшей мере один пептидный линкер для связывания домена-носителя с интересующим полипептидом и
- по меньшей мере один сигнальный пептид;
в условиях, эффективных, чтобы вызвать экспрессию кодируемого слитого белка, где кодируемый слитый белок секретируется рекомбинантным микроорганизмом в окружающую среду этого рекомбинантного микроорганизма.
16. Способ по п.15, где рекомбинантный микроорганизм принадлежит к классу Clostridia.
17. Полинуклеиновая кислота, кодирующая слитый белок, состоящая из полипептидной последовательности, которая включает:
- домен-носитель, содержащий по меньшей мере один углевод-связывающий модуль (СВМ) целлюлосомного поддерживающего белка, слитый по меньшей мере с одним модулем Х целлюлосомного поддерживающего белка;
- по меньшей мере один интересующий полипептид;
- по меньшей мере один пептидный линкер для связывания домена-носителя с интересующим полипептидом, и
- по меньшей мере один сигнальный пептид;
18. Полинуклеиновая кислота по п.17, где указанная полипептидная последовательность включает два или более чем два модуля X.
RU2011104431/10A 2008-07-31 2009-07-30 Конструкции и способы для продуцирования и секреции ферментов, расщепляющих клеточную стенку RU2525194C2 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP08290739.5 2008-07-31
EP08290739 2008-07-31
EP08291120.7 2008-11-28
EP08291120A EP2192177A1 (en) 2008-11-28 2008-11-28 Cellulase Cel5H related reagents and their use in microorganisms
PCT/EP2009/059875 WO2010012805A1 (en) 2008-07-31 2009-07-30 Constructs and methods for the production and secretion of polypeptides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2011104431A true RU2011104431A (ru) 2012-09-10
RU2525194C2 RU2525194C2 (ru) 2014-08-10

Family

ID=41328872

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011104431/10A RU2525194C2 (ru) 2008-07-31 2009-07-30 Конструкции и способы для продуцирования и секреции ферментов, расщепляющих клеточную стенку

Country Status (10)

Country Link
US (2) US8735133B2 (ru)
EP (1) EP2318524B1 (ru)
JP (1) JP2011529336A (ru)
CN (1) CN102112606A (ru)
AU (1) AU2009275846B2 (ru)
BR (1) BRPI0916615A2 (ru)
CA (1) CA2731203C (ru)
NZ (1) NZ590294A (ru)
RU (1) RU2525194C2 (ru)
WO (1) WO2010012805A1 (ru)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2192177A1 (en) * 2008-11-28 2010-06-02 Total S.A. Cellulase Cel5H related reagents and their use in microorganisms
EP2194120A1 (en) * 2008-12-02 2010-06-09 Total S.A. Bioprocessing ligno-cellulose into ethanol with recombinant clostridium
WO2011053545A1 (en) * 2009-10-30 2011-05-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Granulocyte-colony stimulating factor produced in glycoengineered pichia pastoris
US8431371B2 (en) * 2009-11-19 2013-04-30 Academia Sinica Expression system for producing multi-enzyme complexes and uses thereof
JP5434689B2 (ja) * 2010-03-05 2014-03-05 株式会社豊田中央研究所 セルラーゼ複合体及びその利用
JP5628544B2 (ja) * 2010-04-07 2014-11-19 株式会社豊田中央研究所 クロストリジウム・サーモセラム由来のタンパク質複合体を構築するためのタンパク質及びその利用
EP2410061A1 (en) * 2010-07-20 2012-01-25 Wolfgang Schwarz Artificial cellulosome and the use of the same for enzymatic breakdown of resilient substrates
US9528132B2 (en) 2012-06-04 2016-12-27 Carbios Recombinant cellulosome complex and uses thereof
JPWO2015147318A1 (ja) * 2014-03-28 2017-04-13 国立大学法人三重大学 アルコールの製造方法
PT3143075T (pt) 2014-05-16 2022-08-12 Carbios Processo de reciclagem de artigos de plástico pet mistos
DK3209771T3 (da) 2014-10-21 2021-01-11 Carbios Polypeptid med en polyester-nedbrydende aktivitet og anvendelser deraf
EP3233995B1 (en) 2014-12-19 2023-08-09 Carbios Plastic compound and preparation process
US10508269B2 (en) 2015-03-13 2019-12-17 Carbios Polypeptide having a polyester degrading activity and uses thereof
JP6907132B2 (ja) 2015-06-12 2021-07-21 キャルビオスCarbios 生分解性ポリエステル組成物及びその使用
WO2017108577A1 (en) 2015-12-21 2017-06-29 Carbios Recombinant yeast cells producing polylactic acid and uses thereof
WO2017198786A1 (en) 2016-05-19 2017-11-23 Carbios A process for degrading plastic products
CN107841510B (zh) * 2016-09-20 2021-02-09 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 一种原核细胞转录后水平控制不同基因表达比例的方法
CN108977421B (zh) * 2018-08-17 2021-04-13 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 用于催化木质纤维素糖化的全菌酶制剂
EP3647425A1 (en) * 2018-11-02 2020-05-06 Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) Recombinant modified microorganisms displaying membrane functionalization for various biotechnological applications
CN112035094B (zh) * 2020-09-02 2024-04-16 中国银行股份有限公司 基于Vuetify框架的穿梭框实现方法及装置
CN112481282B (zh) * 2020-11-26 2024-02-02 李宪臻 一种特异性识别黄原胶侧链的碳水化合物结合模块cbm6b蛋白质及应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT1084146E (pt) * 1998-05-13 2003-02-28 Biotecon Gesells Biotec Entwic Proteina hibrida para inibicao de desgranulacao de mastocitos e seu uso
WO2005023981A2 (en) * 2003-09-09 2005-03-17 Zephyr Proteomix Ltd. Libraries of chimeric cellulose binding proteins and methods of use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
EP2318524A1 (en) 2011-05-11
NZ590294A (en) 2012-09-28
US20110129876A1 (en) 2011-06-02
US8735133B2 (en) 2014-05-27
EP2318524B1 (en) 2016-02-24
AU2009275846B2 (en) 2014-09-25
RU2525194C2 (ru) 2014-08-10
CN102112606A (zh) 2011-06-29
BRPI0916615A2 (pt) 2015-08-04
JP2011529336A (ja) 2011-12-08
CA2731203A1 (en) 2010-02-04
WO2010012805A1 (en) 2010-02-04
US20140220656A1 (en) 2014-08-07
AU2009275846A1 (en) 2010-02-04
US9441213B2 (en) 2016-09-13
CA2731203C (en) 2017-01-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2011104431A (ru) Конструкции и способы для продуцирования и секреции полипептидов
Mingardon et al. The issue of secretion in heterologous expression of Clostridium cellulolyticum cellulase-encoding genes in Clostridium acetobutylicum ATCC 824
Doi et al. The Clostridium cellulovorans cellulosome: an enzyme complex with plant cell wall degrading activity
Lambertz et al. Challenges and advances in the heterologous expression of cellulolytic enzymes: a review
Tsai et al. Functional display of complex cellulosomes on the yeast surface via adaptive assembly
Jung et al. Heterologous expression of plant cell wall degrading enzymes for effective production of cellulosic biofuels
Tanaka et al. Cell surface engineering of industrial microorganisms for biorefining applications
Mazzoli DEVELOPMENT OF MICROORGANISMS FOR CELLULOSE-BIOFUEL CONSOLIDATED BIOPROCESSINGS: METABOLIC ENGINEERS'TRICKS
KR101120359B1 (ko) 섬유소를 효과적으로 분해할 수 있는 유전자가 삽입된 재조합 벡터, 그 재조합벡터를 포함하는 형질전환체, 및 그 형질전환체를 이용한 에탄올 생산방법
US20110294184A1 (en) Cellulolytic polypeptides and their use in micro-organisms for the production of solvents and fuels
Currie et al. Functional heterologous expression of an engineered full length CipA from Clostridium thermocellum in Thermoanaerobacterium saccharolyticum
RU2015120576A (ru) Бета-глюкозидаза из magnaporthe grisea
Jeon et al. Production of cellulosic ethanol in Saccharomyces cerevisiae heterologous expressing Clostridium thermocellum endoglucanase and Saccharomycopsis fibuligera β-glucosidase genes
Lee et al. Production of ethanol from agarose by unified enzymatic saccharification and fermentation in recombinant yeast
Fierobe et al. Engineering cellulase activity into Clostridium acetobutylicum
US8354266B2 (en) Method for producing extracellular multi-enzyme complexes in host cells
CN104312933B (zh) 一种优化信号肽提高胰蛋白酶胞外分泌表达的方法
EP2633060B1 (en) Covalent cellulosomes and uses thereof
van Rensburg et al. Expression of the Ruminococcus flavefaciens cellodextrinase gene in Saccharomyces cerevisiae
JP2012039966A (ja) セルロース結合ドメインが不活性化されたセロビオヒドロラーゼ活性を有するタンパク質
CN116970591B (zh) 一种嗜热内切纤维素酶突变体及制备方法
TWI444477B (zh) 製造纖維素水解酶複合體之多順反子表現卡匣及其應用
Sanusi Identification and enzyme production of a cellulolytic Bacillus-strain isolated from moose (Alces alces) rumen
O'Malley Engineering Anaerobic Gut Fungi for Lignocellulose Breakdown
De Chellis Supercharging of a Family-5 Glycoside Hydrolase Cel5a from Thermobifida fusca to Improve Cellulose Hydrolysis

Legal Events

Date Code Title Description
HZ9A Changing address for correspondence with an applicant
HZ9A Changing address for correspondence with an applicant
HZ9A Changing address for correspondence with an applicant
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20150731

NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20160620

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20180731