RU2010140417A - Способы трансформации дрожжей - Google Patents
Способы трансформации дрожжей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2010140417A RU2010140417A RU2010140417/10A RU2010140417A RU2010140417A RU 2010140417 A RU2010140417 A RU 2010140417A RU 2010140417/10 A RU2010140417/10 A RU 2010140417/10A RU 2010140417 A RU2010140417 A RU 2010140417A RU 2010140417 A RU2010140417 A RU 2010140417A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- yeast cells
- electroporation
- suspension
- dna
- yeast
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N13/00—Treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
- C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
- C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures
- C40B40/02—Libraries contained in or displayed by microorganisms, e.g. bacteria or animal cells; Libraries contained in or displayed by vectors, e.g. plasmids; Libraries containing only microorganisms or vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
- C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
- C40B50/00—Methods of creating libraries, e.g. combinatorial synthesis
- C40B50/06—Biochemical methods, e.g. using enzymes or whole viable microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
- C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
1. Способ получения дрожжевой библиотеки посредством электропорации клеток дрожжей, где способ включает стадии: ! получения суспензии, содержащей векторы из нуклеиновой кислоты, клетки дрожжей, сорбит и CaCl2 или MgCl2 и !электропорации суспензии при от 0,5 кВ/см до более 12,5 кВ/см с емкостью от приблизительно 10 до приблизительно 50 мкФ; чтобы таким образом получить размер библиотеки по меньшей мере 1×109. ! 2. Способ по п.1, где суспензия содержит 1 М сорбита и 1 мМ CaCl2. ! 3. Способ по п.1, где суспензия содержит 1 М сорбита и 1 мМ MgCl2. ! 4. Способ по п.1, где клетки дрожжей инкубируют в одном объеме, содержащем холодный 0,1 M LiAc и 10 мМ DTT. ! 5. Способ по п.1, где суспензию подвергают электропорации при 2,5 кВ/см с емкостью приблизительно 25 мкФ. ! 6. Способ по п.1, где стадию электропорации проводят в кювете с просветом 0,2 см. ! 7. Способ по п.1, где применяют от 1 мкг до 8 мкг ДНК вектора. ! 8. Способ по п.1, где применяют 4 мкг ДНК вектора. ! 9. Способ по п.1, где вектор является линейным. ! 10. Способ по п.1, где суспензия содержит 400 мкл 1,6×109 клеток дрожжей/мл. ! 11. Способ по п.1, где соотношение ДНК вектора к ДНК вставки находится в диапазоне от 1:0,5 до 1:10. ! 12. Способ по п.1, где соотношение ДНК вектора к ДНК вставки составляет 1:3. ! 13. Способ трансформации дрожжей с помощью ДНК для получения библиотеки, где способ включает стадии: ! культивирования клеток дрожжей в течение ночи до OD600 от приблизительно 1,0 до приблизительно 2; ! промывки клеток дрожжей в воде; ! промывки клеток дрожжей в растворе, содержащем сорбит и CaCl2; ! инкубации клеток дрожжей в растворе, содержащем LiAc и DTT; ! промывки клеток дрожжей в растворе, содержащем сорбит и CaCl2; ! ресуспендирования клеток дрожжей в р�
Claims (13)
1. Способ получения дрожжевой библиотеки посредством электропорации клеток дрожжей, где способ включает стадии:
получения суспензии, содержащей векторы из нуклеиновой кислоты, клетки дрожжей, сорбит и CaCl2 или MgCl2 и
электропорации суспензии при от 0,5 кВ/см до более 12,5 кВ/см с емкостью от приблизительно 10 до приблизительно 50 мкФ; чтобы таким образом получить размер библиотеки по меньшей мере 1×109.
2. Способ по п.1, где суспензия содержит 1 М сорбита и 1 мМ CaCl2.
3. Способ по п.1, где суспензия содержит 1 М сорбита и 1 мМ MgCl2.
4. Способ по п.1, где клетки дрожжей инкубируют в одном объеме, содержащем холодный 0,1 M LiAc и 10 мМ DTT.
5. Способ по п.1, где суспензию подвергают электропорации при 2,5 кВ/см с емкостью приблизительно 25 мкФ.
6. Способ по п.1, где стадию электропорации проводят в кювете с просветом 0,2 см.
7. Способ по п.1, где применяют от 1 мкг до 8 мкг ДНК вектора.
8. Способ по п.1, где применяют 4 мкг ДНК вектора.
9. Способ по п.1, где вектор является линейным.
10. Способ по п.1, где суспензия содержит 400 мкл 1,6×109 клеток дрожжей/мл.
11. Способ по п.1, где соотношение ДНК вектора к ДНК вставки находится в диапазоне от 1:0,5 до 1:10.
12. Способ по п.1, где соотношение ДНК вектора к ДНК вставки составляет 1:3.
13. Способ трансформации дрожжей с помощью ДНК для получения библиотеки, где способ включает стадии:
культивирования клеток дрожжей в течение ночи до OD600 от приблизительно 1,0 до приблизительно 2;
промывки клеток дрожжей в воде;
промывки клеток дрожжей в растворе, содержащем сорбит и CaCl2;
инкубации клеток дрожжей в растворе, содержащем LiAc и DTT;
промывки клеток дрожжей в растворе, содержащем сорбит и CaCl2;
ресуспендирования клеток дрожжей в растворе, содержащем сорбит и CaCl2 для формирования суспензии клеток дрожжей для электропорации;
добавления одного объема суспензии клеток для электропорации к ДНК вектора и ДНК вставки для формирования суспензии клеток дрожжей - ДНК для электропорации; и
электропорации суспензии клеток дрожжей - ДНК для электропорации при напряжении между приблизительно 2,5 кВ/см и приблизительно 12,5 кВ/см в кювете с просветом 0,2 см.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US6791008P | 2008-03-03 | 2008-03-03 | |
| US61/067,910 | 2008-03-03 | ||
| PCT/US2009/001351 WO2009114093A2 (en) | 2008-03-03 | 2009-03-03 | Methods for transforming yeast |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2010140417A true RU2010140417A (ru) | 2012-04-10 |
| RU2510418C2 RU2510418C2 (ru) | 2014-03-27 |
Family
ID=41065707
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010140417/10A RU2510418C2 (ru) | 2008-03-03 | 2009-03-03 | Способы трансформации дрожжей |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9200270B2 (ru) |
| EP (1) | EP2257638B1 (ru) |
| JP (1) | JP5647009B2 (ru) |
| KR (1) | KR20100120708A (ru) |
| CN (1) | CN102084002B (ru) |
| AU (1) | AU2009223846B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0910286A2 (ru) |
| CA (1) | CA2717128A1 (ru) |
| ES (1) | ES2531194T3 (ru) |
| HK (1) | HK1151561A1 (ru) |
| IL (1) | IL207851A (ru) |
| MX (1) | MX2010009679A (ru) |
| NZ (1) | NZ587766A (ru) |
| RU (1) | RU2510418C2 (ru) |
| SG (1) | SG188846A1 (ru) |
| TW (1) | TWI449788B (ru) |
| WO (1) | WO2009114093A2 (ru) |
| ZA (1) | ZA201006192B (ru) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2009298501A1 (en) * | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Abbvie Inc. | Improved antibody libraries |
| US9410258B2 (en) | 2012-12-21 | 2016-08-09 | Colorado Energy Research Technologies, LLC | Systems and methods of improved fermentation |
| US9279101B2 (en) | 2012-12-21 | 2016-03-08 | Colorado Energy Research Technologies, LLC | Systems and methods of improved fermentation |
| US9382633B2 (en) | 2012-12-21 | 2016-07-05 | Colorado Energy Research Technologies, LLC | Systems and methods of improved fermentation |
| IL241462A0 (en) | 2015-09-10 | 2015-11-30 | Yeda Res & Dev | Heterologous engineering of betalain pigments in plants |
| EP3450554B1 (en) | 2016-03-30 | 2022-09-21 | Epsilon Molecular Engineering Inc. | High-speed in vitro screening method |
| US11634705B2 (en) | 2016-03-30 | 2023-04-25 | Epsilon Molecular Engineering Inc. | High-speed in vitro screening method |
| DE102016121899A1 (de) * | 2016-11-15 | 2018-05-17 | Immatics Biotechnologies Gmbh | Verfahren zur Herstellung von elektrokompetenten Hefezellen und Verfahren zur Verwendung dieser Zellen |
| CN110741076A (zh) | 2017-04-26 | 2020-01-31 | 拉瓦塔解决方案股份有限公司 | 用于电穿孔的微电极技术 |
| US20220217934A1 (en) | 2018-09-06 | 2022-07-14 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Cellulose-synthase-like enzymes and uses thereof |
| MX2021011185A (es) | 2019-03-15 | 2021-10-22 | Amyris Inc | Produccion microbiana de compuestos. |
| KR102659073B1 (ko) * | 2022-12-14 | 2024-04-22 | 코스맥스 주식회사 | 인간 제6형 콜라겐 유전자를 포함하는 발현 컨스트럭트로 형질전환된 균주를 포함하는 피부 상태 개선용 조성물 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4808537A (en) | 1984-10-30 | 1989-02-28 | Phillips Petroleum Company | Methanol inducible genes obtained from pichia and methods of use |
| US4837148A (en) | 1984-10-30 | 1989-06-06 | Phillips Petroleum Company | Autonomous replication sequences for yeast strains of the genus pichia |
| US4855231A (en) | 1984-10-30 | 1989-08-08 | Phillips Petroleum Company | Regulatory region for heterologous gene expression in yeast |
| US4879231A (en) | 1984-10-30 | 1989-11-07 | Phillips Petroleum Company | Transformation of yeasts of the genus pichia |
| US4882279A (en) | 1985-10-25 | 1989-11-21 | Phillips Petroleum Company | Site selective genomic modification of yeast of the genus pichia |
| US5135868A (en) | 1985-10-25 | 1992-08-04 | Phillips Petroleum Company | Cultures of yeast of the genus Pichia altered by site selective genomic modification |
| US4929555A (en) | 1987-10-19 | 1990-05-29 | Phillips Petroleum Company | Pichia transformation |
| FR2626584B1 (fr) | 1988-01-28 | 1990-07-13 | Agronomique Inst Nat Rech | Sequence ars efficace chez yarrowia lipolytica et procede pour sa preparation |
| US5231007A (en) | 1988-09-29 | 1993-07-27 | Zeagen, Inc. | Efficient riboflavin production with yeast |
| US5268273A (en) | 1990-12-14 | 1993-12-07 | Phillips Petroleum Company | Pichia pastoris acid phosphatase gene, gene regions, signal sequence and expression vectors comprising same |
| US5665600A (en) | 1991-09-18 | 1997-09-09 | Research Corporation Technologies, Inc. | Pichia pastoris linear plasmids and DNA fragments thereof |
| US5716808A (en) | 1995-11-09 | 1998-02-10 | Zymogenetics, Inc. | Genetic engineering of pichia methanolica |
| US5736383A (en) | 1996-08-26 | 1998-04-07 | Zymogenetics, Inc. | Preparation of Pichia methanolica auxotrophic mutants |
| US5908753A (en) * | 1996-10-04 | 1999-06-01 | Merck & Co., Inc. | Transformation of Candida albicans by electroporation |
| US20030166132A1 (en) * | 1998-08-26 | 2003-09-04 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
| US7009045B2 (en) | 2000-07-14 | 2006-03-07 | Archer-Daniels-Midland Company | Transformation systems for flavinogenic yeast |
-
2009
- 2009-03-03 KR KR1020107022000A patent/KR20100120708A/ko not_active Application Discontinuation
- 2009-03-03 WO PCT/US2009/001351 patent/WO2009114093A2/en active Application Filing
- 2009-03-03 ES ES09719237T patent/ES2531194T3/es active Active
- 2009-03-03 BR BRPI0910286A patent/BRPI0910286A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2009-03-03 SG SG2013016084A patent/SG188846A1/en unknown
- 2009-03-03 NZ NZ587766A patent/NZ587766A/xx not_active IP Right Cessation
- 2009-03-03 US US12/380,703 patent/US9200270B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-03-03 CA CA2717128A patent/CA2717128A1/en not_active Abandoned
- 2009-03-03 TW TW098107048A patent/TWI449788B/zh not_active IP Right Cessation
- 2009-03-03 RU RU2010140417/10A patent/RU2510418C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2009-03-03 AU AU2009223846A patent/AU2009223846B2/en not_active Ceased
- 2009-03-03 JP JP2010549653A patent/JP5647009B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2009-03-03 CN CN200980115953.XA patent/CN102084002B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2009-03-03 EP EP09719237.1A patent/EP2257638B1/en active Active
- 2009-03-03 MX MX2010009679A patent/MX2010009679A/es active IP Right Grant
-
2010
- 2010-08-29 IL IL207851A patent/IL207851A/en not_active IP Right Cessation
- 2010-08-30 ZA ZA2010/06192A patent/ZA201006192B/en unknown
-
2011
- 2011-06-08 HK HK11105771.1A patent/HK1151561A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-10-28 US US14/925,939 patent/US20160153001A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2009114093A2 (en) | 2009-09-17 |
| ES2531194T3 (es) | 2015-03-11 |
| US9200270B2 (en) | 2015-12-01 |
| SG188846A1 (en) | 2013-04-30 |
| AU2009223846B2 (en) | 2014-11-20 |
| CN102084002A (zh) | 2011-06-01 |
| BRPI0910286A2 (pt) | 2015-09-29 |
| KR20100120708A (ko) | 2010-11-16 |
| JP5647009B2 (ja) | 2014-12-24 |
| IL207851A0 (en) | 2010-12-30 |
| TW200942613A (en) | 2009-10-16 |
| AU2009223846A1 (en) | 2009-09-17 |
| CN102084002B (zh) | 2014-09-10 |
| EP2257638A2 (en) | 2010-12-08 |
| JP2011512841A (ja) | 2011-04-28 |
| CA2717128A1 (en) | 2009-09-17 |
| IL207851A (en) | 2014-04-30 |
| ZA201006192B (en) | 2012-01-25 |
| EP2257638A4 (en) | 2011-06-29 |
| RU2510418C2 (ru) | 2014-03-27 |
| TWI449788B (zh) | 2014-08-21 |
| US20090264320A1 (en) | 2009-10-22 |
| NZ587766A (en) | 2013-06-28 |
| WO2009114093A3 (en) | 2010-01-21 |
| HK1151561A1 (en) | 2012-02-03 |
| US20160153001A1 (en) | 2016-06-02 |
| MX2010009679A (es) | 2010-09-22 |
| EP2257638B1 (en) | 2014-12-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2010140417A (ru) | Способы трансформации дрожжей | |
| Lee et al. | Characterization of Saccharomyces cerevisiae promoters for heterologous gene expression in Kluyveromyces marxianus | |
| RU2010128902A (ru) | Композиции и способы получения изопрена | |
| ATE521633T1 (de) | Fgf18 produktion in prokaryotischen zellen | |
| NZ616301A (en) | Clay interlaced yeast compositions and methods of utilizing the same | |
| CN106544284B (zh) | 一种重组解脂耶氏酵母工程菌株及其构建方法和应用 | |
| WO2008075206A3 (en) | Cell-matrix microspheres, methods for preparation and applications | |
| MXPA05008857A (es) | Procedimiento de preparacion de microorganismos evolucionados que permite la creacion o la modificacion de vias metabolicas. | |
| CN106834200A (zh) | 一种提高大肠杆菌中己二酸产量的方法 | |
| CN203159722U (zh) | 一种微重力下的电解水装置 | |
| CN104372017A (zh) | 一种提高基因工程菌异戊二烯及其衍生物产量的方法及应用 | |
| Wang et al. | Comparison of process configurations for ethanol production from acid-and alkali-pretreated corncob by Saccharomyces cerevisiae strains with and without β-glucosidase expression | |
| Laamanen et al. | Development of heat-aided flocculation for flotation harvesting of microalgae | |
| CN103184185B (zh) | 产电基因工程菌的构建、菌株及其应用 | |
| Noor-Mohammadi et al. | Method for assembling and expressing multiple genes in the nucleus of microalgae | |
| Wang et al. | Engineering Escherichia coli for autoinducible production of n-butanol | |
| CN110387389A (zh) | 一种提高抗真菌活性物质hsaf发酵产量的方法 | |
| CN104988172A (zh) | 一种高产间苯三酚基因工程菌的构建方法及应用 | |
| Kim et al. | Enhanced cellobiose fermentation by engineered Saccharomyces cerevisiae expressing a mutant cellodextrin facilitator and cellobiose phosphorylase | |
| CN104726477A (zh) | 一种脂肪酶编码基因及其工程菌株 | |
| BR112013028006A2 (pt) | método para aumentar a produtividade de células eucarióticas na produção do recombinante fviii | |
| CN107937296A (zh) | 一种具有乙酸糠醛香草醛耐受性重组酿酒酵母及制备方法、应用 | |
| Liu et al. | Kinetic modeling for redox potential-controlled repeated batch ethanol fermentation using flocculating yeast | |
| CN105483190B (zh) | 酿酒酵母基因工程改造提高s-腺苷-l-蛋氨酸产量的方法 | |
| CN102643844B (zh) | 粳稻木糖异构酶基因的功能及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190304 |