RU2006118799A

RU2006118799A - Анализ

Info

Publication number: RU2006118799A
Application number: RU2006118799/15A
Authority: RU
Inventors: Дэвид ПАРКЕР (GB); Дэвид ПАРКЕР
Original assignee: Пласмакуте Ас (No); Пласмакуте Ас
Priority date: 2003-10-31
Filing date: 2004-11-01
Publication date: 2007-12-10
Also published as: ZA200603628B; AU2004288016A1; GB0325483D0; JP2007510149A; CA2543464A1; WO2005045441A1; US20070292839A1; CN1950702A; NO20062280L; EP1680682A1

Claims

1. Способ определения количества или присутствия антител к иммуногену в образце крови, предусматривающий по меньшей мере стадии определения количества или присутствия плазменных антител или их частей, и лимфоцитарных антител в указанном образце, или их частей, где указанные плазменные и лимфоцитарные антитела определяют вместе, или в отдельных анализах, и определение их объединенного количества или присутствия определяет количество или присутствие антител к указанному иммуногену.

2. Способ по п.1, где лимфоциты указанного образца крови разрушают для выделения антител или их частей, связанных с указанными лимфоцитами, и определяют количество или присутствие указанных лимфоцитарных антител или их частей, выделившихся из лимфоцитов, и определяют количество или присутствие плазменных антител.

3. Способ по п.1, дополнительно предусматривающий стадию

выделения содержащего плазму образца из указанного образца крови; и

выделение содержащего лимфоциты образца из указанного образца крови.

4. Способ по п.2, дополнительно предусматривающий стадию

5. Способ по любому из пп.1-4, где указанный образец целой крови делят на две части для получения образца, содержащего лимфоциты, и образца, содержащего плазму.

6. Способ по любому из пп.1-4, где одну аликвоту целой крови используют для получения образца, содержащего лимфоциты, и образца, содержащего плазму.

7. Способ по любому из п.3 или 4, где указанный образец, содержащий лимфоциты, и/или указанный образец, содержащий плазму, является очищенным препаратом.

8. Способ по п.4, где указанный образец, содержащий плазму, и указанный образец, содержащий лимфоциты, объединяют перед разрушением лимфоцитов.

9. Способ по п.4, где указанный образец, содержащий плазму, и указанный образец, содержащий лимфоциты, объединяют после разрушения лимфоцитов и перед указанной стадией определения.

10. Способ по п.8 или 9, где отношение указанного образца, содержащего плазму, и образца, содержащего лимфоциты, составляет от 1:0,4 до 1:4, предпочтительно 1:1.

11. Способ по любому из пп.1-4, 8 или 9, где указанные плазменные и лимфоцитарные антитела определяют в одном анализе.

12. Способ по любому из пп.1-4, 8 или 9, где указанные плазменные и лимфоцитарные антитела определяют в различных анализах.

13. Способ по любому из пп.1-4, 8 или 9, где указанный образец крови является образцом крови млекопитающего, предпочтительно человека.

14. Способ по любому из пп.1-4, 8 или 9, где указанный образец крови имеет объем менее 1 мл.

15. Способ по любому из пп.1-4, 8 или 9, где эритроциты удаляют из указанного образца крови.

16. Способ по любому из пп.1-4, 8 или 9, где не-B-лимфоциты удаляют из указанного образца крови.

17. Способ по любому из пп.1-4, 8 или 9, где указанный иммуноген является результатом инфекции или вакцинации.

18. Способ по любому из пп.1-4, 8 или 9, где указанным иммуногеном является бактериальный или вирусный антиген, предпочтительно антиген из группы, выбранной из антигенов герпесвируса, цитомегаловируса, вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), вируса гепатита, вируса Эпштейна-Барра, аптовируса, токсоплазмы, туберкулеза, сифилиса и хламидий.

19. Способ по любому из пп.1, 2, 4, 8 или 9, где лимфоциты разрушают, используя химические разрушающие буферы (предпочтительно, содержащие детергент) или физические способы разрушения.

20. Способ по любому из п.1, где указанные антитела или их части определяют, осуществляя контактирование указанных антител или их частей с одним или более из антигенов или антител, которые распознают указанные антитела или их части, предпочтительно нанесенных на твердую фазу.

21. Способ по любому из пп.1-4, 8, 9 или 20, где выделенные антитела определяют, используя твердофазный анализ связывания.

22. Способ по п.20, где указанные твердофазные носители одного или более из антигенов (антигены на твердой фазе) распознаются антителами или их частями, подлежащими определению (антитела-мишени).

23. Способ по п.20, где указанные твердофазные носители одного или более из антител (антитела на твердой фазе) распознаются антителами или их частями, подлежащими определению (антитела-мишени).

24. Способ по любому из пп.1-4, 8, 9, 20, 22 или 23, где стадию определения осуществляют, используя иммуноанализ, предпочтительно ELISA.

25. Способ по любому из п.23, где один или более из антигенов, распознаваемых антителами-мишенями, иммобилизованными на указанной твердой фазе, подвергают контактированию с указанной твердой фазой.

26. Способ по любому из п.22 или 23, где одно или более из антител, распознаваемых антителами-мишенями, иммобилизованными на указанной твердой фазе, подвергают контактированию с указанной твердой фазой.

27. Способ по любому из пп.1-4, 8, 9, 20, 22, 23 или 25, где указанную стадию определения осуществляют в растворе.

28. Способ по любому из пп.1-4, 8, 9, 20, 22, 23 или 25, где для стадии определения и получения спектрофотометрически детектируемого сигнала используют растворимый субстрат.

29. Способ по любому из пп.1-4, 8, 9, 20, 22, 23 или 25, где используют негативный контроль.

30. Способ по п.20, где используют множество твердых фаз, каждая из которых несет отличный антиген или антитело, которые распознают различные антитела-мишени.

31. Способ по п.2, где образец крови для использования в способе и/или образец, содержащий лимфоциты, и/или образец, содержащий плазму, хранят при температуре 4°C или ниже до разрушения лимфоцитов.

32. Способ по п.2, где образец крови для использования в способе получают из целой крови, и указанную целую кровь замораживают, используя 5-15% ДМСО до разрушения лимфоцитов.

33. Способ по любому из пп.1-4, 8, 9, 20, 22, 23, 25 или 30-32, где лимфоциты в указанном образце не инкубируют в условиях, которые обеспечивают продуцирование и/или секрецию антител, до использования указанного метода.

34. Способ по любому из пп.1-4, 8, 9, 20, 22, 23, 25 или 30-32, где множество образцов тестируют одновременно или последовательно.

35. Способ по п.1 для использования для идентификации животного, инфицированного иммуногеном, предпочтительно инфицированных ВИЧ-пациентов.

36. Способ по п.35, где инфицирование указанного животного указанным иммуногеном, предпочтительно ВИЧ, происходит менее, чем за 10 дней до получения образца крови указанного животного.

37. Применение способа по п.1 для высокоэффективного скринирования.

38. Применение по п.37, где указанное скринирование является скринированием образцов банка крови.

39. Способ по п.1 для определения пригодности образца для интер-индивидуальной трансплантации или трансфузии.

40. Применение по п.37 или 38 для определения пригодности образца для интер-индивидуальной трансплантации или трансфузии.

41. Применение способа по п.1 для диагностики или контроля за инфицированием человека или животного, или части указанного животного иммуногеном, предпочтительно бактерией или вирусом, и присутствие или степень инфицирования указанным иммуногеном, предпочтительно указанной бактерией или вирусом, определяют путем сравнения с соответствующими контрольными и/или сравнительными образцами.

42. Применение по п.37 или 38 для диагностики или контроля за инфицированием человека или животного, или части указанного животного иммуногеном, предпочтительно бактерией или вирусом, и присутствие или степень инфицирования указанным иммуногеном, предпочтительно указанной бактерией или вирусом, определяют путем сравнения с соответствующими контрольными и/или сравнительными образцами.