RU2005133446A

RU2005133446A - Способ получения фотореактивных полимеров для иммобилизации на них биомолекул

Info

Publication number: RU2005133446A
Application number: RU2005133446/04A
Authority: RU
Inventors: Прадип НАХАР (IN); Прадип НАХАР; Азми НАКВИ (IN); Азми НАКВИ
Original assignee: Каунсил Оф Сайентифик Энд Индастриал Рисерч (In); Каунсил Оф Сайентифик Энд Индастриал Рисерч
Priority date: 2003-03-31
Filing date: 2003-03-31
Publication date: 2006-05-10
Also published as: RU2309180C2

Claims

1. Способ получения фотореактивных полимеров с последующей иммобилизацией молекул на них, включающий в себя

(f) реакцию полимера, содержащего нуклеофильную группу, с молекулой фотолинкера, растворенного в соответствующем растворе,

(g) промывание полимера соответствующим раствором, с последующей сушкой при температуре окружающей среды, с получением фотореактивного полимера,

h) добавление молекулы, растворенной в соответствующем буфере, на фотореактивный полимер,

i) обработку смеси источником фотоэнергии в течение от 2 мин до 2 ч для иммобилизации молекулы на указанном полимере, и

j) промывание указанного полимера, имеющего иммобилизованную молекулу, в соответствующем буфере с последующей сушкой указанного полимера при температуре окружающей среды с получением фотореактивного полимера с иммобилизованными на нем молекулами.

2. Способ по п.1, в котором фотолинкер имеет термохимическую группу, выбранную из группы, способной к формированию ковалентной связи с нуклеофильной группой полимера.

3. Способ по п.2, в котором термохимическая группа фотолинкера выбрана из группы, содержащей альдегид, карбонил, изотиоцианат, галогенид и изоцианат.

4. Способ по п.1, в котором фотолинкер имеет фотохимическую группу, которая фотореактивна и способна к образованию ковалентной связи при фотохимической реакции с молекулой без добавления какого-либо иного реагента.

5. Способ по п.4, в котором фотохимическая группа фотолинкера выбрана из группы, состоящей из предшественников карбена, предшественников нитрена и кислородного радикала.

6. Способ по п.1, в котором фотолинкер представляет собой 1-фтор-2-нитро-4-азидобензол (FNAB).

7. Способ по п.1, в котором полимер включает в себя любой полимер, имеющий амино, гидроксильную, тиольную или какую-либо другую нуклеофильную группу.

8. Способ по п.1, в котором полимер выбран из группы, состоящей из силикагеля, пористого стекла с длинноцепочечным алкиламино-контролируемым размером пор, поливинилового спирта, аминополистирола и алкиламиносиликагеля.

9. Способ по п.1, в котором раствор, используемый на стадии (a), выбран из группы, состоящей из диметилформамида и толуола.

10. Способ по п.1, в котором стадию (a) выполняют в присутствии катализатора.

11. Способ по п.10, в котором катализатор содержит 30% KOH.

12. Способ по п.1, в котором реакцию на стадии (a) выполняют путем воздействия на смесь из фотолинкера, полимера и раствора микроволновым облучением или путем термической инкубации при температуре 37°C.

13. Способ по п.12, в котором обработку микроволновым облучением производят при частоте от 2000 Гц до 2600 Гц с прикладываемой мощностью в диапазоне от 100 ватт до 1000 ватт в течение от 10 с до 20 мин.

14. Способ по п.1, в котором используемый растворитель для промывания полимера, полученного на стадии (a), включает в себя растворитель, способный к растворению фотолинкера и продуктов его деградации без разрушения полимера.

15. Способ по п.14, в котором используемый растворитель выбран из метанола и этанола.

16. Способ по п.1, в котором полимер выбран из полимера в форме бусины, лунки, листа, порошка, стержня, пластины, полоски или трубки.

17. Способ по п.1, в котором молекула, иммобилизованная на фотореактивном полимере, выбрана из группы, состоящей из органической молекулы, органического полимера, биомолекулы и любой молекулы с C-H-связью.

18. Способ по п.17, в котором биомолекула выбрана из группы, состоящей из белка, нуклеиновых кислот, углеводорода, олигонуклеотидов, фермента, антигена, антитела и пептида.

19. Способ по п.18, в котором ферментом является пероксидаза хрена.

20. Способ по п.1, в котором источник фотоэнергии выбран из группы, состоящей из УФ-света, солнечного света, светового потока и лазерного пучка.

21. Способ по п.1, в котором УФ-свет, используемый в качестве источника фотоэнергии, имеет длину волны от 300 нм до 400 нм, и обработку с целью иммобилизации молекулы производят в течение от 2 мин до 2 ч.

22. Способ по п.1, в котором реакцию между нуклеофильной группой полимерной поверхности и фотолинкером осуществляют в микроволновой печи в присутствии растворителя.

23. Применение фотореактивного полимера с иммобилизованной на его поверхности молекулой для диагностики, аффинной хромотографии, протеомики, геномики и скрининга лекарственных средств.