RU2002469C1 - Способ хранени проб желчи дл микроскопических исследований - Google Patents

Abstract

Использование: в медицине, в частности в гастроэнтерологии. Сущность изобретени : в на- тивную пробу желчи последовательно ввод т 1%-ный раствор метиленовой сини в соотношении 1 :4 - 2 :8 с последующим добавлением через 10 - 20 мин безводного глицерина в соотношении 1 4-2:8, после чего полученную смесь содержат при 4-8 °С. Способ позвол ет проводить микроскопическое исследование желчи в течение 5-7 сут после дуоденального зондировани  3 табл

Description

Изобретение относитс  к гастроэнтерологии , а именно к лабораторным (микроскопическим ) методам исследовани  дуоденального содержимого.

Микроскопическое исследование желчи представл ет определенные трудности в св зи с тем, что процедура дуоденального зондировани  весьма продолжительна по времени и клеточные элементы, простейшие , присутствующие в патологической желчи In vitro под действием ферментов, желчных кислот быстро разрушаютс . Поэтому непременным условием микроскопического анализа дуоденального содержимого служит незамедлительное его исследование по мере получени  каждой очередной порции. .

Известен метод Эрлиха в модификации Ромейса суправитального окрашивани  ме- тиленовым синим или изучени  периферических нервных окончаний, Мелкие кусочки или тонкие срезы помещают при 37° в 0,1- 0,25% раствор метиленового синего на 1-2 ч. с последующей фиксацией в течение 30- 60 мин свежеприготовленным раствором молибденовокислого аммони , затем промывают водой в течение 1-6 ч, обезвоживают 95 и 100% этиловым спиртами до 2 ч. Просветл ют в 2 сменах терпинеола, промывают ксилолом и заключают в бальзам.

Известен также способ приготовлени  препаратов периферической нервной ткани по Догелю, при котором окрашенные срезы метиленовым синим фиксируют в течение 24 ч насыщенным раствором пикрата аммони  с последующим заключением в смесь равных объемов глицерина и раствора пикрата аммони .

Известен способ приготовлени  препаратов периферической нервной ткани по Шабадашу(1;2). Окрашенные срезы метиленовым синим фиксируют в течение 3-6 ч при 35° смесью пикрата аммони  с раствором йодита аммони  (или с раствором тиоцината аммони ), выдерживают при определенных услови х в течение нескольких дней с последующим заключением в смесь равных объемов химически чистого глицерина, насыщенного раствора пикрата аммони  и 10% раствора желатина.

Однако известные способы не используютс  дл  хранени  проб желчи с целью последующего микроскопического исследовани  и не позвол ют сохранить пробы желчи из-за разрушени  форменных элементов, простейших.

Известен способ хранени  проб желчи дл  микроскопического исследовани , при котором с целью сохранени  клеточных элементов добавл ют капель формалина на

й

каждые 10 мл полученной при зондировании желчи.

Известен способ хранени  желчи дл  микроскопического исследовани , который 5 заключаетс  в следующем. Добавл ют 1 мл трасилола или тцалола на каждые 10 мл желчи .

Известен также способ хранени  проб желчи дл  микроскопического исследоваЮ

ни , который заключаетс  в том, что с целью

сохранени  форменных элементов желчи добавл ют ЭДТА (2мл 10% раствора на 10- 20 мл желчи).

Недостатком всех этих способов  вл ет5 с  то, что длительность хранени  проб желчи не превышает 1-1,5 ч, а затем присутствующие в желчи клеточные элементы , простейшие, разрушаютс .

Известен способ хранени  проб желчи

0 с целью последующего микроскопического анализа, состо щий в том, что желчь обрабатывают 10%-ным раствором нейтрального формалина, добавл емого в соотношении 1:3.

5Недостатком данного способа  вл етс 

то, что при его использовании удаетс  сохранить патологические элементы желчи (клеточные элементы, простейшие) только в течение 2 ч, что требует проведени  микро0 скопического исследовани  дуодэнального содержимого в данном отрезке времени.

Данный способ прин т за прототип - базовый объект.

Цель изобретени  -удлинить срокихра5 нени  проб желчи дл  микроскопического исследовани .

Цель достигаетс  тем, что в исследуемую пробу нативной желчи последовательно ввод т при перемешивании 1%-ный

0 раствор метиленовой сини в соотношении (1;4 - 2:8) с последующим добавлением через 10-20 мин безводного глицерина в соотношении 1:4-1:8 и далее содержат при 4-8°С.

5 Отличие предложенного способа от прототипа заключаетс  в том, что в исследуемую пробу нативной желчи последовательно ввод т при перемешивании 1%-ный раствор метиленовой сини в соотношении

0 1;4-2:8 с последующим добавлением через 10-20 мин безводного глицерина в соотношении 1:4-2:8 и далее содержат при 4-8°С. Обработанные таким образом пробы желчи в течение 5-7 сут можно использовать дл 

5 микроскопического исследовани .

П р и м е р 1. Больна  П, 43 года. Клинический диагноз: обострение хронического холецистита. При дуоденальном зондировании забор желчи производили из пузырной фракции в три пробирки по 4 мл в каждую с

наибольшим количеством хлопьев. В первой пробирке желчь не обрабатывали. Во второй пробирке желчь обрабатывали по прототипу с добавлением 10% нейтрального формалина в соотношении 1:3. В третьей пробирке желчь обрабатывали по предлагаемому способу, а именно к содержимому пробирки при перемешивании добавл ли 1%-ный водный раствор метиленовой сини в соотношении 1:4. Дл  перемешивани  пробирку вращали вокруг вертикальной оси, избега  взбалтывани  с целью предотвращени  образовани  пузырьков воздуха, затрудн ющих микроскопический анализ. Все три пробирки хранили в холодильнике при 4°С. Микроскопическое исследование проводили сразу после забора, после обработки по прототипу и предлагаемому способу , через 2 ч и через каждые 24 ч. Результаты исследовани  представлены в табл.1.

Как видно из табл.1 в нативной желчи (перва  пробирка) и пробе желчи, обработанной па прототипу (втора  пробирка) кле-- точные элементы, простейшие количественно уменьшались к концу 2 ч, ис- чезали к концу 1 суток. Проба желчи, обработанна  по предлагаемому образцу (треть  пробирка), содержала клеточные элементы, простейшие в течение 7 сут. Исследование помогло диагностировать л мблиоз и на- значить адекватную терапию.

П р и м е р 2. Больна  К. 36 лет. Клинический диагноз: обострение хронического холецистита. Забор и обработка пузырной желчи, полученной при дуоденальном зон- дировании, проводилась также как описано в примере 1. Результаты исследовани  представлены в табл.2. Как видно из таблицы , сохранение лейкоцитов в третьей пробирке , обработанной по предлагаемому способу, в течение 7 сут дало возможность подтвердить наличие воспалительного процесса в желчном пузыре и кроме того, сделать процедуру микроскопическою исследовани  независимой от времени проведени  дуоденального зондировани  Пробы желчи в 1- и 2-й пробирках дают низкую диагностическую информативность на содержание лейкоцитов.

П р и м е р 3. Больна  Т., 54 года. Клинический диагноз: обострение хронического холецистита. Забор и обработку проб пузырной желчи, полученной при дуоденальном зондировании проводили как описано в примере 1. Результаты представлены в табл.3. Как видно из табл.3, в нативной желчи (1 пробирка) и в желчи, обработанной по прототипу (2 пробирка), сохранность клеточных элементов была низкой. Диагностическа  ценность пробы желчи, обработанной по предлагаемому способу, не изменилась в течение 5-7 сут.

Микроскопические исследовани  проб желчи, обработанной по за вленному способу , проведены у 31 больного и у 10 здоровых людей. У всех больных перед зондированием был поставлен диагноз: обострение хронического холецистита. По результатам микроскопического анализа у 17 пациентов подтвержден диагноз воспалени  желчного пузыр  (на основании наличи  лейкоцитов в пузырной порции желчи), у 6 пациентов поставлен диагноз л мблиоза (по наличию л мблий в пробе желчи), что дало возможность своевременно назначить адекватную терапию.

Таким образом, предлагаемый способ хранени  проб желчи дл  микроскопического исследовани  позвол ет повысить диагностическую ценность микроскопического анализа, проведенного более чем через 2ч после дуоденального зондировани . (56) Ску  Н.А. Хронические заболевани  желчных путей. М.; Медицина 1972, с.122.

Результаты микроскопического исследовани  пробы пузыркой желчи больной П

Примечание

- номера проб желчи (1-изтивна  , 2-обраЬотанна  по прототипу; 3-желчь. консервированна  по предлагаемому способу)

Г а 6 л и ц а 1

Результаты микроскопического исследовани  пробы пузырной желчи больной К.

Результаты микроскопического исследовани  пробы пузырной желчи больной Т.

Примечание - номера проб желчи (1-нативна  желчь: 2-же чь, обработанна  по прототипу: 3-желчь, консервированна  по предлагаемому нами способу)

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   СПОСОБ ХРАНЕНИЯ ПРОБ ЖЕЛЧИ: ДЛЯ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ИССЛЕДО-1 . ВАНИЙ, включающий обработку ее натив- 35 ного раствора консервантом, отличающийс  тем, что, с целью удлинени  сроков

   Таблица 2

   Т аблимэ 3

   хранени , в нативную желчь последовательно ввод т 1%-ный раствор метилено- вой сини в соотношении 1 : 4 - 2 : 8 и безводный глицерин в соотношении 1:4- 2 : 8 с последующим содержанием полученной смеси при 4 - 8 С.