RU1822779C - Ингибитор вируса лихорадки Ласса и вируса Пичинде - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к вирусологии. Целью изобретени   вл етс  поиск лекарственных препаратов, эффективных в отношении аренавирусов Ласса и Пичинде. Цель достигаетс  использованием 5-фторурацила (2,4-Диоксо-5-фторпиримидинг), добавленного в поддерживающую рост культур клеток среду, дл  подавлени  размножени  вируса лихорадки Ласса, вируса Пичинде (модель, вз та  первично дл  установлени  противовирусного действи  препарата в отношении аренавирусов) в культуре клеток Vero в концентраци х 400, 200, 100, 50 мкг/мл на 72 ч. Инкубаци  проводилась при температуре 37°С. В отобранных пробах культурной жидкости определ ли инфекционную активность исследуемого вируса методом редукции бл шек под агаровыМ покрытием. 5-фторурацил обладает выраженным противоареновирусным действием . Химиотерапевтический индекс препарата равен 8. 1 табл.

Description

Изобретение относитс  к вирусологии и может быть использовано как эффективное средство в отношении аренавирусов в химиотерапии .

Цель изобретени  - поиск лекарственных препаратов, эффективных в отношении аренавирусов Ласса и Пичинде.

Цель достигаетс  применением 5-фто- рурацила (2,4-Диоксо-5-фторпиримидина), добавленного в поддерживающую рост культур клеток среду, дл  подавлени  размножени  вируса лихорадки Ласса, вируса Пичинде (модель, вз та  первично дл  установлени  противовирусного действи  препарата в отношении аренавирусов) в культуре клеток Vero.

Предложенный препарат 5-фторурацил (2,4-Диоксо-5-фторпиримидин) по фармакологической значимости относитс  к антиметаболитам , в медицинской практике используетс  дл  лечени  некоторых злокачественных опухолей. 5-фторурацил мало растворим в воде, слабо - в спирте. Водный раствор бесцветен и прозрачен, в клинической практике используетс  в виде 5%-ного раствора натриевой соли.

Пример 1. Использовали двух- и трехсуточную культуру клеток Vero, в качестве модели дл  исследований вз ты арена- вирусы Ласса и Пичинде (штамм Сьерра-Леоне и AN-3739 соответственно), полученные из музе  вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского АМН СССР. В качестве среды поддержки использовали 2,5% гемогидролизат (производство Бел- НИИЭМ) с добавлением 2%-ной эмбрио00

ю го

Nj

vj Ю

нальной сыворотки тел т, 100 ед/мл гента- мицина, 7,5% раствор МаНСоз дл  доведени  рН среды 7,2.

Токсическое действие препарата изучали при титровании его на культуре клеток Vero. Соединение брали в разведени х 800, 400, 200, 100, 50, 25 мкг/мл и вносили во флаконы, объемом 10 мл с культурой клеток. На каждое разведение использовали по 4 флакона. После 96 ч инкубации в термостате при 37°С учитывали максимально переносимую дозу соединени . Цитодеструктивные изменени  культур клеток фиксировали по 4-крестовой системе. Максимально переносимой концентрацией считали 1/2 толерантной переносимой дозы, при которой отсутствовал цитотоксический эффект.

При изучении ингибирующего действи  препарата последний вносили в заданной концентрации в культура л ьную среду после 1,5-часовой адсорбции вируса. Контрольные и опытные культуры инкубировали при 37°С в течение 72 ч, в отобранных пробах определ ли инфекционную активность методом редукции бл шек под агаровым покрытием .

Об антивирусной активности 5-фтору- рацилина судили по снижению инфекционного титра вируса в культурах, обработанных препаратом, в сравнении с контрольной культурой, где 5-фторурацил отсутствовал. Максимально переносимую концентрацию (МПК) препарата определ ли в диапазоне 400 млг/мл, свидетельствует о

невысокой токсичности препарата в культуре клеток Vero. Максимально активной концентрацией (МАК) считали такую, при которой снижение инфекционного титра вируса было 1,5-1,7 Ig БОЕ/мл. Мак равна 50 мкг/мл.

В таблице представлены результаты излучени  ингибирующего действи  препарата в отношении аренавирусов Ласса и

Пичинде. ХТИ при обеих инфекци х равен 8. Пример 2. Двухсуточную монослой- ную культуру клеток Vero заражали вирусом Ласса. Множественность инфекции составл ла 0,1-0,01 БОЕ/кл. После адсорбции вируса (1,5 ч) вносили поддерживающую рост культур клеток среду, в состав которой добавл ли 5-фторурацил в концентрации 400, 200,100,50 мкг/мл. пробы инкубировали 72 с при 37°С, затем отбирали и определ ли

инфекционную активность вируса методом редукции бл шек. В качестве контролей использовали зараженные культуры клеток и инкубированные без 5-фторурацила. ХТИ препарата при данной инфекции равен 8.

Таким образом было установлено, что 5-фторурацил обладает выраженным противовирусным действием в отношении патогенного вируса ласса и Пичинде, химиотерапевтический индекс которого равен 8.

Claims (1)

1. Формула изобретени  Применение 5-фторурацила в качестве ингибитора вируса лихорадки Ласса и вируса Пичинде.

   Характеристика противовирусного действи  5-фторурацила