RU1772760C

RU1772760C - Method of differential diagnosis of bacterial bronchial asthma and atopic asthma

Info

Publication number: RU1772760C
Application number: SU904827890A
Authority: RU
Inventors: Валерий Николаевич Минеев; Олег Ильич Карпов; Сергей Степанович Жихарев
Original assignee: 1-Й Ленинградский Медицинский Институт Им.Акад.И.П.Павлова
Priority date: 1990-03-23
Filing date: 1990-03-23
Publication date: 1992-10-30

Abstract

Изобретение относитс к медицине, а именно к пульмонологии и аллергологии Цель изобретени - повышение точности способа. Поставленна цель достигаетс тем, что определ ют активность кислой фос- фатазы в мембранной фракции гемолизата эритроцитов и при ее активности 350 ЕД и более диагностируют инфекционно-зависи- мую форму бронхиальной астмыThe invention relates to medicine, namely to pulmonology and allergology. The purpose of the invention is to improve the accuracy of the method. The goal is achieved by determining the activity of acid phosphatase in the membrane fraction of erythrocyte hemolysate and, with its activity of 350 IU or more, diagnose an infectious-dependent form of bronchial asthma

Description

Изобретение относитс к медицине, а именно к пульмонологии и аллергологии, и может быть использовано при обследовании больных бронхиальной астмой (БД).The invention relates to medicine, namely to pulmonology and allergology, and can be used in the examination of patients with bronchial asthma (DB).

Целью изобретени вл етс повышение точности способа.The aim of the invention is to improve the accuracy of the method.

Способ осуществл ют следующим образом .The method is carried out as follows.

1 мл Эритроцитарной взвеси, полученной седиментацией гепаринизированной венозной крови (в течение 1 ч при комнатной температуре), отмывают 0,9% раствором хлористого натри , эатем центрифугируют при 800 об/мин, 10 мин, Далее эритровзвесь дважды подвергают гемолизу в бидистиллированной воде (соотношение эритровзвесь мембранной фракции: вода 1:10), центрифугируют при 1500 об/мин, 15 мин. К 0,1 мл мембранной фракции гемолизата, полученной при повторном гемолизе, добавл ют 0,3 мл 0,9% раствора хлористого натри , перемешивают. Далее определ ют активность кислой фосфотазы, Дл этого в центрифужную пробирку внос т1 ml of the erythrocyte suspension obtained by sedimentation of heparinized venous blood (for 1 h at room temperature) is washed with 0.9% sodium chloride solution, then centrifuged at 800 rpm, 10 min, then the erythra suspension is hemolysed twice in bidistilled water (ratio erythro-suspension of the membrane fraction: water 1:10), centrifuged at 1500 rpm, 15 minutes To 0.1 ml of the hemolysate membrane fraction obtained by repeated hemolysis, 0.3 ml of 0.9% sodium chloride solution was added, and stirred. The activity of acid phosphatase is then determined. For this purpose, a centrifuge tube is introduced

1,4 мл 0,001 М раствора паранитрофенил- фосфата, 0,2 М 0,1 М раствора хлористого магни , 0,4 мл 0,5 М аммонийного ацетатного буфера (рН - 5,2). К смеси добавл ют 0,2 мл свежеприготовленной взвеси мембранной фракции гемолизата эритроцитов. Пробирку помещают в термостат на 2 часа при 37°С, после чего реакцию останавливают добавлением 0,2 мл 50%-ной трихлоруксус- ной кислоты, центрифугируют. 1 мл надоса- дочной жидкости смешивают с 2 мл 0,25 Н раствора Na ОН. Интенсивность по вившегос желтого окрашивани оценивают спек- трофотометрически против контрол на длине волны 40 мкм. В контроле сыворотку замен ют эквивалентным количеством дистиллированной воды. За единицу активности кислой фосфатазы (КФ) принимают величину, привод щую к образованию 6 10 мг нитрофенола после 2 ч инкубации фермента и паранитрофенилфосфата в услови х опыта.1.4 ml of a 0.001 M solution of paranitrophenyl phosphate, 0.2 M of a 0.1 M solution of magnesium chloride, 0.4 ml of 0.5 M ammonium acetate buffer (pH 5.2). To the mixture was added 0.2 ml of freshly prepared suspension of the red blood cell hemolysate membrane fraction. The tube is placed in a thermostat for 2 hours at 37 ° C, after which the reaction is stopped by the addition of 0.2 ml of 50% trichloroacetic acid, centrifuged. 1 ml of supernatant is mixed with 2 ml of 0.25 N NaOH solution. The intensity of yellow staining was evaluated spectrophotometrically against a control at a wavelength of 40 μm. In the control, the serum is replaced with an equivalent amount of distilled water. A unit value of acid phosphatase (CF) activity is taken, which leads to the formation of 6-10 mg of nitrophenol after 2 hours of incubation of the enzyme and paranitrophenyl phosphate under experimental conditions.

Активность кислой фосфатззы в мембранной фракции гемолизата эритроцитов vThe activity of acid phosphatase in the membrane fraction of erythrocyte hemolysate v

onon

XIXi

оabout

больных инфекционно зависимой формой БА составл ет 352,3-455,3 ЕД, у больных атопической формой БА-133.2-299,4 ЕД. При активности кислой фосфатазы 350 ЕД и более диагностируют инфекциомно-зависи- мую форму БА.patients with an infectious dependent form of AD are 352.3-455.3 units, in patients with an atopic form of BA-133.2-299.4 units. With acid phosphatase activity of 350 IU or more, an infectious-dependent form of AD is diagnosed.

П р и м е р 1. Больна И., 47 лет. Клинический диагноз; бронхиальна астма, ин- фекционно-зависима форма, средней т жести, фаза обострени . Активность КФ в сыворотке крови (по прототипу) - 35,7 ЕД, активность КФ в мембранной фракции ге- молизата эритроцитов-358,1 ЕД. Подтвержден диагноз; инфекц ионно зависима форма БА. В соответствии с этим в терапию включены антибактериальные препараты (линкомицин, бисептол), что привело к ремиссии заболевани .PRI me R 1. Sick I., 47 years old. Clinical diagnosis; bronchial asthma, infection-dependent form, moderate, phase of exacerbation. The activity of CF in blood serum (according to the prototype) is 35.7 PIECES, the activity of CF in the membrane fraction of erythrocyte hemolysate is 358.1 PIECES. The diagnosis is confirmed; the infection is an ion-dependent form of AD. Accordingly, antibacterial drugs (lincomycin, biseptol) are included in the therapy, resulting in a remission of the disease.

П р и м е р 2. Больна Е., 46 лет. Клинический диагноз: бронхиальна астма, атоническа форма, легкое течение, фаза обострени . Активность КФ в сыворотке 0PRI me R 2. Sick E., 46 years. Clinical diagnosis: bronchial asthma, atonic form, mild course, exacerbation phase. Serum CF activity 0

55

00

75,9 ЕД, активность КФ в мембранной фракции гемолизата эритроцитов - 253,5 ЕД. Исключена инфекционно-зависима форма БА, что позволило не включать в терапию антибактериальные препараты.75.9 PIECES, the activity of CF in the membrane fraction of erythrocyte hemolysate is 253.5 PIECES. An infectious-dependent form of AD was excluded, which made it possible not to include antibacterial drugs in therapy.

Предложенный способ позвол ет по сравнению со способом-прототипом повысить точность диагностики инфекционно-за- висимой формы БА на 32%.The proposed method allows, in comparison with the prototype method, to increase the accuracy of diagnosis of an infectious-dependent form of AD by 32%.

Claims

SUMMARY OF THE INVENTION A method for differential diagnosis of an infectious-dependent form of bronchial asthma from an atopic form of bronchial asthma by determining the activity of acid phosphatase in the blood, and so on, in order to increase the accuracy of the method, the activity is determined acid phosphatase in the membrane fraction of blood erythrocytes and with its activity of 360 units or more is diagnosed with an infection-dependent form of bronchial asthma.