RU1483941C - Штамм бактерий bacillus thuringiensis var. thuringiensis для получения энтомопатогенного препарата - Google Patents
Штамм бактерий bacillus thuringiensis var. thuringiensis для получения энтомопатогенного препарата Download PDFInfo
- Publication number
- RU1483941C RU1483941C SU874217642A SU4217642A RU1483941C RU 1483941 C RU1483941 C RU 1483941C SU 874217642 A SU874217642 A SU 874217642A SU 4217642 A SU4217642 A SU 4217642A RU 1483941 C RU1483941 C RU 1483941C
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- thuringiensis
- exotoxin
- entopathogenic
- avr
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и представляет собой новый штамм бактерий Bacillus thuringiensis var. thuringiensis 202-Э, эффективный продуцент β -экзотоксина и d -эендотоксина, используемый для производства энтомопатогенных препаратов. Целью изобретения является - получение нового штамма, обладающего более высоким синтезом b -экзотоксина. Штамм получен из штамма B. thuringiensis var. thuringiensis 202. Вновь полученному штаммуприсвоили номер 202-Э. Штамм депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под N В-3698. Штамм позволяет получить препарат, содержащий 299 мг/л b -экзотоксина с титром клеток 1,4 • 108, инсектицидная активность препарата LK5 0 0,29% (непарный шелкопряд), 2,54% - (комнатная муха). 4 табл.
Description
Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и представляет собой новый штамм Bacillus thuringiensis var. thuringiensis 202-Э, эффективный продуцент β-экзотоксина и δ-эндотоксина, который используется для производства энтомопатогенных бактериальных препаратов.
Целю изобретения является получение нового штамма, обладающего более высоким синтезом β-экзотоксина.
Штамм Bacillus thuringiensis var. thuringiensis получен из штамма Bac. thuringiensis var. thuringiensis 202. Для получения клетки штамма B. thuringiensis var. thuringiensis 202 выращивают в 5 мл (МПБ) 12 ч, разводят в 5 мл МПБ до плотности клеток 106 кл/мл и выращивают при 43оС на круговой качалке (260 об/мин) в течение 24 ч. Разведения выросшей культуры высевают на мясопептонный агар (МПА). Отдельные колонии проверяют на β-экзотоксинообразование с помощью микробиологического теста, основанного на эффекте бактерицидного действия β-экзотоксина на клетки Sareina flava, отбирают клоны с наибольшей зоной подавления роста клеток S. flava по сравнению с исходным штаммом.
Вновь полученному штамму бактерий Bacillus thuringiensis var. thuringiensis присвоили номер 202-Э. Штамм депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под номером В-3698. Штамм имеет следующие морфологическую и физиологическую характеристики.
Морфологические признаки. Аэроб, грамположительная подвижная палочка. Размеры 4,3х1,9 мкм. В стационарной фазе роста образует овальные споры размером 1,9х1,4 мкм. Кристаллы крупные и мелкие, правильной ромбовидной формы.
Клетки штамма содержат кристаллы правильной ромбовидной формы (размером 1,8х2,2 мкм), кристаллы кубической формы (0,5х0,5; 1,7х1,7 мкм) и кристаллы неправильной формы различного размера.
Культуральные и физиолого-биохимические признаки. Штамм хорошо растет на мясопептонной среде. Через двое суток при температуре 30оС на мясопептонном агаре образует матовые, светло-серые колонии, 3-5 мм в диаметре, со слабо изрезанным краем. Колонии имеют плоский профиль, мелкозернистую структуру маслянистую консистенцию. При суспендировании в воде образует равномерную муть.
На картофельном агаре в тех же условиях роста колонии более светлые. Консистенция пленочная. Остальные признаки те же, что и при росте на МПА.
При росте на питательном агаре на основе гидролизата кильки через двое суток колонии имеют более прозрачный и зернистый край. Консистенция маслянистая.
В мясопептонном бульоне образует тонкую кольцеобразную пленку, опадающую через 48-72 ч. Рост умеренный, осадок рыхлый.
Отношение штамма к источникам азота. Усваивает нитратные и аммонитные формы азота.
Отношение к источникам углерода. Усваивает с образованием кислоты глюкозу, сахарозу. Не усваивает аннозу, лактозу, целлобиозу. Разлагает салицин, эскулин.
Молоко пептонизирует. Разжижает желатину. Гидролизует крахмал. Зона просветления особенно четко видна после обработки агара раствором Люголя. Мочевину разлагает, слабо усваивает лецитин.
Патогенные свойства. Токсичен для личинок комнатной мухи и непарного шелкопряда. Подавляет рост клеток Sareina flava. Не обладает патогенностью для теплокровных животных.
Антигенные свойства. Относится к серотипу Bacillus thuringiensis.
Отношение к фагам. Устойчив к фагам 22, с/п, И-77, 17 и 25/16, собственных вирулентных фагов не выделяет.
Штамм 202-Э не имеет маркерных признаков.
Условия хранения штамма. Штамм 202-Э длительно сохраняет свои свойства при хранении его на картофельном агаре и МПА и 4оС. После 15 пассажей с МПА на МПА с последующим посевом на дрожжеполисахаридную среду не отмечалось явления диссоциации или ухудшения полезных свойств штамма. При хранении штамма в течение трех лет на полужидком агаре под вазелиновым маслом и в лиофильно высушенном виде не наблюдалось снижения активности β-экзотоксина, δ-эндотоксина и титра спор. Для длительного хранения штамма рекомендовано лиофильное высушивание в запаянных ампулах.
П р и м е р. Использование штамма для получения эндомопатогенного препарата.
Штамм 202-Э выращивают в течение 12 ч на косяке с МПА. Полученную культуру пересевают на дрожжеполисахаридную среду (ДПС) следующего состава: на 1 л воды, г, дрожжи 30; кукурузная мука 15; NaCl 2; CaCl2 0,5; MgCl2 0,25. Культивирование проводят в колбах емкостью 750 мл с 30 мл среды на круговой качалке при 260 об/мин и 30оС в течение 48 ч. Центрифугируют при 5000 об/мин в течение 15 мин. Культуральную жидкость автоклавируют при 1 атмосфере 15 мин и определяют содержание экзотоксина с помощью жидкостной хроматографии высокого давления.
Сравнительная характеристика инсектицидной активности, фагоустойчивости и содержания β-экзотоксина производственного штамма 620 М и полученного штамма 202-Э приведена в табл. 1 и 2.
Из данных, приведенных в табл. 1 и 2, следует, что по инсектицидной активности в отношении комнатной мухи и по количеству β-экзотоксина (мл/л) штамм 202-Э превышает промышленный штамм 620 М на 30% А по инсектицидной активности спорокристаллического комплекса и по фагоустойчивости штамм 202-Э находится на уровне производственного.
В своем составе полученный продукт содержит низкомолекулярный термостабильный β-экзотоксин нуклеотидной природы, секретируемый клетками в культуральную среду, δ-эндотоксин белковой природы и споры, освобождающиеся в конце споруляции к 40-46 часам роста (при выращивании штамма на дрожжеполисахаридной среде при 30оС и 240 об/мин).
Штамм 202-Э как продуцент β-экзотоксина превосходит известные штаммы (0,9 мкл культуральной жидкости формирует пятно на хроматограмме). По инсектицидной активности спорокристаллического комплекса он соответствует показателям штаммов 98, 2510, ИПМ 1140/27-2а, а по титру спор уступает им на порядок.
Данные количественного содержания β-экзотоксина, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления, представлены в табл. 4.
Сравнивая показатели штаммов 98, 2510, ИПМ 1140/27-2а, 202 следует сделать заключение, что применение штамма 202-Э в качестве продуцента бактериальных препаратов, содержащих β-экзотоксин (битоксибациллин, турингин 2 и др. ), позволяет получить экологичеки более безопасный препарат в связи с низким титром спор в культуре (при более высоком содежании β-экзотоксина (на 30%), это позволяет увеличить его биоинсектицидную активность и снизить дозу применяемых препаратов.
Claims (1)
- Штамм бактерий Bacillus thuringiensis var thuringiensis ВКПМ В-3698 для получения энтомопатогенного препарата.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU874217642A RU1483941C (ru) | 1987-03-26 | 1987-03-26 | Штамм бактерий bacillus thuringiensis var. thuringiensis для получения энтомопатогенного препарата |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU874217642A RU1483941C (ru) | 1987-03-26 | 1987-03-26 | Штамм бактерий bacillus thuringiensis var. thuringiensis для получения энтомопатогенного препарата |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU1483941C true RU1483941C (ru) | 1996-01-10 |
Family
ID=30440637
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU874217642A RU1483941C (ru) | 1987-03-26 | 1987-03-26 | Штамм бактерий bacillus thuringiensis var. thuringiensis для получения энтомопатогенного препарата |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU1483941C (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2514211C1 (ru) * | 2012-10-10 | 2014-04-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus thuringiensis var.thuringiensis N800/15 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЭНТОМОЦИДНОГО БИОПРЕПАРАТА |
-
1987
- 1987-03-26 RU SU874217642A patent/RU1483941C/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР N 1074138, кл. A 01N 63/00, 1981. Авторское свидетельство СССР N 1243181, кл. A 01N 63/00, 1985. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2514211C1 (ru) * | 2012-10-10 | 2014-04-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus thuringiensis var.thuringiensis N800/15 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЭНТОМОЦИДНОГО БИОПРЕПАРАТА |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1268133A (en) | Strain of bacillus, obtaining a toxin thereof and a composition for combating coleoptera | |
| Potts et al. | Effects of water stress on cryptoendolithic cyanobacteria from hot desert rocks | |
| Williams et al. | Chapter XI actinomycetes | |
| CN86107242A (zh) | 新颖的微生物 | |
| US4757010A (en) | Production of clostridium acetobutylicum mutants of high butanol and acetone productivity, the resultant mutants and the use of these mutants in the joint production of butanol and acetone | |
| US4082613A (en) | Process for the production of insulin by genetically transformed fungal cells | |
| GB2220657A (en) | Antifungal fermentation product | |
| US5277906A (en) | Insecticidal composition of bacillus thuringiensis serovar israelensis, DSM 3435 and DSM 3440 | |
| Perlak et al. | Converting bacteriophage for sporulation and crystal formation in Bacillus thuringiensis | |
| KR20080014242A (ko) | 항균활성물질을 생산하는 신규의 페니바실러스 폴리믹사ｄｙ1 및 그 항균활성물질 | |
| RU1483941C (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis var. thuringiensis для получения энтомопатогенного препарата | |
| Rogers et al. | Characterization of Enterococcus bacteriophages from the small intestine of the rat | |
| Jansson | Isolation of fastidious mycoplasma from human sources | |
| Strzelczyk et al. | Comparative studies on metabolic activity of planktonic, benthic and epiphytic bacteria | |
| CN1141383C (zh) | 一种蜡状芽孢杆菌及其制备方法 | |
| Crombach et al. | DNA base composition of some sheathed bacteria | |
| RU2033721C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis var kurstaki для получения биоинсектицида | |
| SU1121806A1 (ru) | Штамм @ @ Н/14 BTS-393 N в-2547 дл изготовлени энтомопатогенного препарата против кровососущих комаров | |
| JP2002355030A (ja) | バチルス・ポピリエの胞子嚢の製造方法、防除剤及び防除方法 | |
| El-Helaly et al. | Production of cellulase (Cx) by different species of Erwinia | |
| RU1794434C (ru) | Штамм бактерий BacILLUS тнURINGIеNSIS дл изготовлени энтомопатогенного препарата | |
| RU2061376C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis spp thuringiensis для производства экзотоксинсодержащих биоинсектицидов | |
| SU665684A1 (ru) | Штамм @ @ @ @ ИПМ @ -2-продуцент @ -эндотоксина | |
| US5202240A (en) | Preparation of spore free, concentrated protein preparations from Bacillus thuringiensis serovar,israelensis, which is toxic | |
| GB2056985A (en) | Antibiotic em4940 |