RS52006B - Piridin metilen azolidinoni i njihova upotreba kao inhibitori fosfoinozitida - Google Patents

Abstract

Piridin metilen azolidinonski derivat, naznačen time, daje u skladu sa Formulom (I),gde R1 je izabran iz H, halogena, C1-C6-alkila, C2-C6-alkenila i C2-C6-alkinila, C1-C6-alkil alkoksi, alkoksikarbonila, acila, sulfonila, sulfanila, sulfinila, alkoksi i amino; R2 je izabran iz H, halogena, C1-C6-alkila, C2-C6-alkenila, C2-C6-alkinila; arila; heteroarila, C3-C8-cikloalkila; C3-C8-heterocikloalkila, aril C1-C6-alkila, heteroaril C1-C6-alkila, C3-C8-cikloalkil C1-C6-alkila, C3-C8-heterocikloalkila C1-C6-alkila, C1-C6-alkil alkoksi, alkoksikarbonila, acila, sulfonila, sulfanila, sulfinila, alkoksi i amino; X je izabran iz S, NH i O;Y je izabran iz O, S i NR3, gde R3 je izabran iz H, ponekad supstituisanog C1-C6-alkoksi, ponekad supstituisanog C1-C6-alkila, ponekad supstituisanog C2-C6-alkenila, ponekad supstituisanog C2-C6-alkinila, ponekad supstituisanog C1-C6-alkil arila, cijano i ponekad supstituisanog sulfonila;A je neka heteroarilna grupa; n je neki celi broj izabran iz 1 i 2;kao i njegovi geometrijski izomeri, njegove ponekad aktivne forme kao enantiomeri, dijastereomeri i njegove racematne forme, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli.Prijava sadrži još 29 patentnih zahteva.

Description

Polje pronalaska

Ovaj pronalazak se odnosi na upotrebu piridin metilen azolidinonskih derivata sa Formulom (I) za tretman i/ili profilaksu autoimunih poremećaja i/ili bolesti zapaljenja, kardiovaskularnih bolesti, neurodegenerativnih bolesti, bakterijskih ili viralnih infekcija, alergije, astme, pankreatitisa, multi-organskog kolapsa, bolesti bubrega, agregacije krvnih pločica, raka, pokretljivosti sperme, odbacivanja presadka ili povreda pluća. Specifično, ovaj pronalazak se odnosi na piridin metilen azolidinonske derivate za modulaciju, a posebno za inhibiciju aktivnosti delovanja fosfoinozitid-3-kinaza, PI3K.

Pozadina pronalaska

Fosfoinozitid-3-kinaze (PI3K) imaju kritičnu signalnu ulogu tokom proliferacije ćelija, preživljenja ćelija, vaskularizacije, prometa preko membrane, transporta glikoze, rasta neurita, nabiranja membrane, produkcije superoksida, reorganizacije aktina i hemotakse( Cantley, 2000, Science,296, 1655-1657 iVanhaesebroeck et al, 2001, Annu. Rev. Biochem., 70, 535-602).

Termin PI3K je dan familiji lipidnih kinaza koje se, kod sisara, sastoje od osam identifikovanih PI3K koje su podeljene u tri pod-familije u skladu sa njihovom strukturom i njihovom specifičnosti prema supstratu.

Klasa I iz grupe PI3K se sastoji od dve pod-grupe, Klase IA i Klase IB.

Klasa IA se sastoji od regulacione jedinice od 85 kDa (odgovorne za belančevina-belančevina interakcije preko interakcije sa homolognim domenom Src 2 (SH2) sa fosfotirozin ostacima iz drugih belančevina) i od neke katalitičke pod-jedinice od 110 kDa. Za ovu klasu postoji još tri katalitičke forme (plOOa, pllOp i pl 105) i pet regulacionih izoformi (p85a., p858, p55y, p55a. i p50a).

Klasa IB je stimulisana preko G belančevine p-y pod-jedinica heterodimernih G belančevina. Jedini karakterizovani član Klase IB je PI3Ky (pll0y katalitička pod-jedinica je kompleksovana sa regulacionom belančevinom od 101 kDa, pl01).

Klasa II PI3K se sastoji od a, 8 i y izoformi, koje su otprilike od po 170 kDa i koje su karakterizovane prisutnošću C-terminalnog C2 domena.

Klasa III PI3K uključuje fosfatidilinozitol specifične 3-kinaze.

Evoluciono konzervisane izoforme pl 10a i P se svuda eksprimiraju, dok su P iyviše specifično eksprimirane u hematopoetiČkom sustavu ćelija, ćelijama maznih mišića, miocitima i endotelialnim ćelijama( Vanhaesebroeck et a/., 1997, Trends Biochem Sci., 22( 7), 267- 72).Njihova ekspresija može takođe da bude regulisana na inducibilni način u zavisnosti o tipu ćelije i tkivu i o stimulusima kao i o kontekstu bolesti.

PI3K su encimi koji su uključeni u fosfolipidnom signaliziranju i se aktivišu kao odgovor na brojne ekstra-celularne signale poput faktora rasta, mitogena, integrisa (ćelija-ćelija interakcije) hormona, citokina, virusa i neurotransmitera, a takođe i preko intra-celularnog ukrštenog regulisanja preko drugih signalnih molekula (ukrštena-komunikacija, gde originalni signal može da aktiviše neke paralelne puteve koje u sekundarnom koraku prenose signale na PI3K preko intra-celularnih signalnih događaja), poput, na primer, malih GTPaza, kinaza ili fosfataza.

Fosfatidilinozitol (Ptdlns) je osnovni građevni blok za intracelularne inozitolne lipide u eukariotskoj ćeliji, koji se sastoji od D-mio-inozitol-1 -fosfata (InslP) koji je vezan preko svoje fosfatne grupe za diacilglicerol. Glava inozitolne grupe Ptdlns ima pet slobodnih hidroksi grupa, a tri od pomenutih su fosforilisane u ćelijama u različitim kombinacijama. Ptdlns i njegovi fosforilisani derivati se kolektivno označavaju kao inozitol fosfolipidi ili fosfoinozitidi (Pl). Osam vrsti Pl su dokumentovane u eukariotskim ćelijama

( Vanhaesebroeck et al, 2001, od pre).Svi Pl se nalaze u membranama i predstavljaju supstrati za kinaze, fosfataze i lipaze.

In vitro,PI3K fosforilišu 3-hidroksilnu grupu inozitolskog prstena u tri različita supstrata: fosfatidilinozitol (Ptdlns), fosfatidilinozitol-4-fosfat (PI(4)P) i fosfatidilinozitol-bifosfat (PI(4,5)P2), a to generiše tri lipidna produkta, naime, fosfatidilinozitol 3-monofosfat (PI(3)P), fosfatidilinozitol 3,4-bifosfat (PI(3,4)P2) i fosfatidilinozitol 3,4,5-trifosfat (PI(3,4,5)P3(vidi Semu A ispod).

Preferirani supstrat za Klasu I PI3K je PI(4,5)P2. PIK iz Klase II imaju jaku preferenciju za Ptdlns kao supstrat pred PI(4)P i PI(4,5)P2. PI3K iz Klase III mogu jedino da koriste Ptdlns kao supstratin vivoi su najverovatnije odgovorni za nastanak najvećeg dela PI(3)P u ćelijama

( Vanhaesebroeck et al, 2001, odpre).

Put fosfoinozitidnog intracelularnog signaliziranja počinje sa vezanjem nekog signalnog molekula (ekstracelularni ligandi, stimuli, dimerizacija receptora, transaktivacija uz pomoć heterolognog receptora (na primer, receptor tirozin kinaze) za neku G-belančevinu koja je vezana na trans-membranski receptor koji je integrisan u plazma membrani šta dovodi do aktivisanja PI3K.

Kada se jednom aktivišu, PI3K konvertuju membranskog fosfolipida PJ(4,5)P2u PI(3,4,5)P3koji dodatno može da bude konvertovan u drugu 3' fosforilovanu formu fosfoinozitida uz pomoć 5'-specifičnih fosfoinozitid fosfataza, a na taj način encimska aktivnost PI3K rezultuje direktno ili indirektno u nastanak dva 3'-fosfoinozitidna pod-tipa koji funkcionišu kao drugi glasnici u intra-celularnoj signalnoj transdukciji( Leslie et al, 2001, Chem. Rev. 101( 8) 2365-80; Katso et al, 2001, Annu. Rev. Cell Dev. Bioi. 1, 615- 75iToker et al, 2002, Cell Mol Life

Sci. 59( 5) 761- 79).

Uloga sekundarnih glasnika fosforilisanih produkata u Ptdlns delovanju je uključena u brojnim putevima signalne transdukcije, uključujući i one koji su esencijalni za proliferaciju ćelija, diferencijaciju ćelija, rastu ćelija, veličini ćelija, opstanku ćelija, apoptozu, adheziju, pokretljivosti ćelija, migraciji ćelija, hemotakse, invazije, re-aranžman citoskeleta, promene u obliku ćelija, promet vezikulama i metaboličkih puteva( Stein, 2000, Mol Med. Today 6( 9) 347- 57).Hemotaksa - direktno pokretanje ćelija prema koncentracionom gradijentu hemijskih atraktanata, takođe nazvano i hemokineza, je uključeno u brojnim važnim bolestima poput zapaljenja/auto-imunosti, neurodegeneracije, angiogeneze, invazije/metastaze i zaceljivanje rana{ Wyman et al, 2000, Immunol Today 21 ( 6) 260- 4; Hirsch et al, 2000,

Science 287( 5455) 1049- 53; Hirsch et al, 2001, FASEB J. 15( 11) 2019- 21iGerard et al,

2001, Nat Immunol 2( 2) 108- 15).

Prema tome se veruje da je aktivisanje PI3-kinaze uključeno u brojnim odgovorima u ćeliji uključujući i rast ćelija, njihovu diferencijaciju i apoptozu( Parker et al,1995,Current Biology,5, 577-99;Yao et al,1995,Science, 267, 2003- 05).

Novije biohemijske studije otkrivaju da, PI3K iz Klase I (kao izoforme PI3Ky iz Klase IB) su dualno-specifični kinazni encimi, tojest pokazuju i aktivnost lipidne kinaze (fosforilisanje fosfo-inozitida) i aktivnost belančevinskih kinaza, jer su sposobne da indukuju fosforilaciju drugih belančevinskih supstrata, uključujući auto-fosforilisanje kao intramolekularni regulacioni mehanizam.

PI3K se čini da su uključeni u brojnim aspektima aktivisanja leukocita. Za PI3-kinaznu aktivnost povezanu sa p85 je pokazano da se fizički spaja sa citoplazmatskim domenom iz CD28, koji je važan ko-stimulacioni molekul za aktivisanje T-ćelija kao odgovor na antigen( Pages et al., 1994, Nature, 369, 327- 29).Ovi efekti su povezani sa porastom transkripcije brojnih gena uključujući i interleukin-2 (IL-2), jedan važan faktor rasta T-ćelija{ Fraser et al, 1991, Science, 251, 313- 16).Mutacija CD28 koja mu omogućava da duže reaguje sa PI3-kinazom dovodi do nemogućnosti iniciranja produkcije IL-2, šta sugeriše kritičnu ulogu PI3-kinaze tokom aktivisanja T-ćelija.

Celularni procesi tokom kojih PI3K igraju esencijalnu ulogu uključuju supresiju apoptoze, reorganizaciju skeletnog aktina, rast srčanih miocita, stimulisanje glikogen sintaze preko insulina, prajming TNFa-poticanih neutrofila i nastanak superoksida i migraciju i adheziju leukocita na endotelialne ćelije.

PI3Ky su identifikovani kao medijator G beta-gama-zavisne regulacije JNK aktivnosti gde G beta-gama su pod-jedinice heterotrimernih G belančevina( Lopez- Ilasaca et al, 1998, J. Biol

Chern. 273( 5) 2505- 8).

Nedavno je opisano da PI3Ky prenosi signale zapaljenja preko različitih G(i)-spojenih receptora( Laffargue et al, 2002, lmmunity 16( 3) 441- 51)staje centralno za funkciju masnih ćelija, različitih stimula u odnosu na leukocite, a imunologija uključuje citokine, hemokine, adenozine, antitela, integrine, faktore agregacije, faktore rasta, viruse ili hormone na primer

( Lawlor et al, 2001, J. Cell Sci., 114 ( pt 16) 2903- 1 i Stephens et al, 2002, Curro Opinion

CellBiol. 14( 2), 203- 13).

Specifični inhibitori protiv pojedinačnih članova familije encima obezbeđuju vredne alate za razrešavanje funkcije svakog pojedinog encima.

Dva jedinjenja, LY294002 i vortmanin (cf nadalje), se mnogo koriste kao inhibitori PI3-kinaze. Ova jedinjenja su ne-specifični inhibitori PI3K, jer pomenuti nc razlikuju među četiri člana Klase I PI3-kinaza.

IC50vrednosti vortmanina protiv svake od brojnih PI3-kinaza iz Klase I su u rasponu od 1-10 nM, a IC50vrednosti za LY294002 protiv svake od pomenutih PI3-kinaza su oko 15-20 u.M( Fruman et al, 1998, Ann. Rev. Biochem., 67, 481- 507),takođe 5-10 mM kod CK2 belančevinske kinaze i poseduju neku inhibitornu aktivnost prema fosfolipazama.

Vortmanin je gljivični metabolit koji ireverzibilno inhibira PI3K aktivnost, preko kovalentnog vezanja za katalitički domen pomenutog encima. Inhibicija PI3K aktivnosti uz pomoć vortmanina eliminiše subsekventni odgovor ćelija na ekstracelularni faktor( Thelen et al, 1994, Proc. Natl Acad. Sci. USA, 91, 4960- 64).Eksperimenti sa vortmaninom pokazuju da PI3K aktivnost u ćelijama hematopoetičke linije, posebno neutrofila, monocita i drugih tipova leukocita, je uključena u mnogo imuno-odgovora bez memorije koji su povezani sa akutnim ili hroničnim zapaljenjem.

Bazirano na studijama koje koriste vortmanin, postoji dokaz da funkcija PI3-kinaze je takođe potrebna za neke aspekte leukocitnog signaliziranja preko receptora koji su spojeni na G-belančevinu( Thelen et al, 1994).Dodatno, pokazano je da vortmanin i LY294002 blokiraju migraciju neutrofila i oslobađanje superoksida. Međutim, zbog toga šta ova jedinjenja ne razlikuju brojne izoforme PI3K, ostaje nejasno koja pojedinačna PI3K izoforma ili izoforme su uključene u ovim fenomenima.

Neki rezultati pokazuju da inhibitori PI3K, na primer, LY294002, mogu da povećajuin vivoanti-tumorsku aktivnost nekih citotoksičnih agenasa (kao paklitaksel)( Grant, 2003, IDrugs,

6( 10), 946- 948).

Nedavno, tiazolidinski derivati su razvijeni kao inhibitori PI3K (WO 2004/007491; WO 2004/056820; WO 2004/052373).

Dokumenat WO 2004/007491 razotkriva azolidindion-vinil fuzionisane-benzenske derivate sa sledećom strukturom:

Dokumenat WO 2004/056820 razotkriva benzoksazinske derivate sa sledećom strukturom:

Dokumenat WO 2004/052373 razotkriva benzoksazin-3-onske derivate sa sledećom strukturom:

Velika važnost puta PI3K u nekim široko raširenim bolestima potencira potrebu za razvijanjem inhibitora, uključujući i selektivne inhibitore PIK.

Sažetak pronalaska

Cilj ovoga pronalaska je da obezbedi supstancije koje su pogodne za tretman i/ili prevenciju od bolesti koje su povezane sa fosfoinozitid-3-kinazama, PI3K.

Takođe je cilj ovoga pronalaska da obezbedi supstancije koje su pogodne za tretman i/ili prevenciju od auto-imunih poremećaja i/ili poremećaja zapaljenja.

Takođe je cilj ovoga pronalaska da obezbedi supstancije koje su pogodne za tretman i/ili prevenciju kardiovaskularnih bolesti.

Takođe je cilj ovoga pronalaska da obezbedi supstancije koje su pogodne za tretman i/ili prevenciju neurodegenerativnih poremećaja.

Takođe je cilj ovoga pronalaska da obezbedi supstancije koje su pogodne za tretman i/ili prevenciju poremećaja koji su izabrani iz bakterijskih i viralnih infekcija, bolesti bubrega, agregacije krvnih pločica, raka, transplantacije, odbacivanja presadka, povreda pluća, respiratornih bolesti i ishemičnih stanja.

Cilj je ovoga pronalaska da obezbedi hemijska jedinjenja koja su sposobna da moduliraju, a posebno da inhibiraju aktivnost ili funkciju fosfoinozitid-3-kinaza, PI3K kod bolesnih stanja kod sisara, a posebno kod ljudi.

Dodatni je cilj ovoga pronalaska da se obezbedi novu kategoriju farmaceutskih formulacija za tretman bolesti koji su izabrane iz auto-imunih poremećaja, poremećaja zapaljenja, kardiovaskularnih bolesti, neurodegenerativnih poremećaja, bakterijskih i viralnih infekcija, bolesti bubrega, agregacije krvnih pločica, raka, transplantacije, odbacivanja presadka, povreda pluća, respiratornih bolesti i ishemičnih stanja.

Dodatni je cilj ovoga pronalaska da razotkrije metod za tretman i/ili prevenciju poremećaja koji su izabrani iz auto-imunih poremećaja, poremećaja zapaljenja, kardiovaskularnih bolesti, neurodegenerativnih poremećaja, bakterijskih i viralnih infekcija, bolesti bubrega, agregacije krvnih pločica, raka, transplantacije, odbacivanja presadka ili povreda pluća, respiratornih bolesti i ishemičnih stanja.

U prvom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I):

gdeA,R',R<2>, X, Y i n su definisani u detaljnom opisu ispod.

U drugom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje u skladu sa Formulom (I) za upotrebu kao lek.

U trećem aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje upotrebu nekog jedinjenja u skladu sa Formulom (I) za preparaciju farmaceutske kompozicije za tretman poremećaja koji je izabran iz auto-imunog poremećaja, poremećaja zapaljenja, kardiovaskularnih bolesti, neurodegenerativnih poremećaja, bakterijskih i viralnih infekcija, bubrežnih bolesti, agregacije krvnih pločica, raka, transplantacije, odbacivanja presadka ili povreda pluća, respiratornih bolesti i ishemičnih stanja i drugih bolesti i poremećaja koji su povezani sa fosfoinozitid-3-kinazama, PI3K, koje obuhvataju PI3K a i y.

U četvrtom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja obuhvata najmanje jedno jedinjenje u skladu sa Formulom (I) i neki farmaceutski prihvatljivi nosač, razredivač ili ekscipijent.

U petom aspektu, ovaj pronalazak razotkriva metod za tretman pacijenta koji pati od poremećaja koji je izabran iz auto-imunog poremećaja, poremećaja zapaljenja, kardiovaskularnih bolesti, neurodegenerativnih bolesti, bakterijskih i viralnih infekcija, bolesti bubrega, agregacije krvnih pločica, raka, transplantacije, odbacivanje presadka ili povreda pluća, respiratornih bolesti i ishemičnih stanja i drugih bolesti i poremećaja koji su povezani sa fosfoinozitid-3-kinazama, PI3K. Pomenuti metod obuhvata davanje jedinjenja u skladu sa Formulom (I).

U šestom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje metod za sintezu jedinjenja u skladu sa Formulom (I).

U sedmom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja u skladu sa Formulom (II).

Detaljan opis pronalaska:

Sledeći deo opisa obezbeđuje definicije brojnih hemijskih ostataka koji sačinjavaju jedinjenja u skladu sa ovim pronalaskom i imaju za cilj da se u celoj specifikaciji i zahtevima primenjuju uniformno osim ako je drugačije navedeno u definicijama koje obezbeđuju šire objašnjenje.

"Ci-Cć-alkil" se odnosi na monovalentne alkilne grupe koja imaju od 1 do 6 ugljenikova atoma. Ovaj termin je primer za grupe poput metila, etila, n-propila, izopropila, n-butila, izobutila,tert-butila,n-heksila i slično. Analogno, C|-C|2-alkil se odnosi na monovalentne alkilne grupe koje imaju od 1 do 12 ugljenikovih atoma, uključujući metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil,tart- butil,n-heksil, heptil, oktil, nonil, decil, undecil, dodecil i slično.

"Aril" se odnosi na nezasićenu aromatsku grupu od 6 do 14 ugljenikovih atoma u jednom prstenu (kao fenil) ili više kondenzovanih prstena (kao naftil). Aril uključuje fenil, naftil, fenantrenil i slično.

"Ci-Cć-alkil aril" se odnosi na Ci-C6-alkilne grupe koje imaju neki arilni supstituenat, uključujući benzil, fenetil i slično.

"Heteroaril" se odnosi na heteroaromatsku grupu sa monocikličkim heteroaromatičkim ili bicikličkim ili tricikličkim fuzionisanim-prstenom. Posebni primeri za heteroaromatičke grupe uključuju ponekad supstituisani piridil, pirolil, pirimidinil, furil, tienil, imidazolil, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, izotiazolil, pirazolil, 1,2,3-triazolil, 1,2,4-triazolil, 1,2,3-oksadiazolil, 1,2,4-oksadiazolil, 1,2,5-oksadiazolil, l,3,4-oksadiazolil,l,3,4-triazinil, 1,2,3-triazinil, benzofuril, [2,3-dihidro]benzofuril, izobenzofuril, benzotienil, benzotriazoiil, izobenzotienil, indolil, izoindolil, 3H-indolil, benzimidazolil, imidazo[l,2-a]piridil, benzotiazolil, benzoksazolil, kinolizinil, kinazolinil, ftalazinil, kinoksalinil, kinolinil, naftiridinil, pirido[3,4-

bjpiridil, pirido[3,2-b]piridil, pirido[4,3-b]piridil, kinolil, izokinolil, tetrazolil, 5,6,7,8-tetrahidrokinolil, 5,6,7,8-tetrahidroizokinolil, purinil, pteridinil, karbazolil, ksantenil ili benzokinolil.

"Ci-Cć-alkil heteroaril" se odnosi na Ci-C6-alkilne grupe koje imaju heteroarilni substituenat, uključujući 2-furilmetil, 2-tienilmetil, 2-(lH-indol-3-il)etil i slično.

"C2-C6-alkenil" se odnosi na alkenilne grupe koje preferirano imaju od 2 do 6 ugljenikovih atoma i imaju najmanje 1 ili 2 alkenilno nezasićena mesta. Preferirano alkenilne grupe uključuju etenil (-CH=CH2), n-2-propenil (alil, -CH2CH=CH2) i slično.

"C2-C6-alkenil aril" se odnosi na C2-C6-alkenilne grupe koje imaju neki arilni supstituenat, uključujući 2-fenilvinil i slično.

"C2-C6-alkenil heteroaril" se odnosi na C2-C6-alkenilne grupe koje imaju neki heteroarilni supstituenat, uključujući 2-(3-piridinil)vinil i slično.

"C2-C6-alkinil" se odnosi na alkinilne grupe koje preferirano imaju od 2 do 6 ugljenikovih atoma i imaju najmanje 1-2 alkinilno nezasićena mesta, a preferirane alkinilne grupe uključuju etinil (-C=CH), propargil (-CH2OCH) i slično.

"C2-C6-alkinil aril" se odnosi na C2-C6-alkinilne grupe koje imaju neki arilni supstituenat, uključujući feniletinil i slično.

"C2-C6-alkinil heteroaril" se odnosi na C2-C6-alkinilne grupe koje imaju neki heteroarilni supstituenat, uključujući 2-tieniletinil i slično.

"C3-C8-cikloalkil" se odnosi na zasićenu karbocikličku grupu sa 3 do 8 ugljenikova atoma u jednom prstenu (kao cikloheksil) ili u više kondenzovanih prstena (kao norbornil). C3-C8-cikloalkil uključuje ciklopentil, cikloheksil, norbornil i slično.

"Heterocikloalkil" se odnosi na C3-C8-cikloalkilnu grupu u skladu sa definicijom od pre, u kojoj do 3 ugljenikova atoma je zamenjeno sa heteroatomima izabranima iz grupe koja

obuhvata O, S, NR, pri čemu je R defmisan kao vodonik ili metil. Heterocikloalkil uključuje pirolidin, piperidin, piperazin, 1-metilpiperazin, morfolin, tetrahidrofuran i slično.

"Ci-Cć-alkil cikloalkil" se odnosi na Ci-Cs-alkilne grupe koje imaju neki cikloalkilni supstituenat, uključujući cikloheksilmetil, ciklopentilpropil i slično.

"Ci-Cć-alkil heterocikloalkil" se odnosi na C|-C6-alkilne grupe koje imaju neki heterocikloalkilni supstituenat, uključujući 2-(l-pirolidinil)etil, morfolinilmetil, morfoliniletil, morfolinilpropil, piperidiniletil, tetrahidrofuranilmetil i slično.

"Karboksi" se odnosi na grupu -C(0)OH.

"Ci-C6-alkil karboksi" se odnosi na C|-C6-alkilne grupe koje imaju neki karboksi supstituenat, uključujući 2-karboksietil i slično.

"Acil" se odnosi na grupu -C(0)R gde R uključuje "Ci-C6-aIkil", "aril", "heteroaril", "C3-C8-cikloalkil", "Heterocikloalkil", "CrC6-alkil aril" ili "CrC6-alkil heteroaril".

"Ci-Cć-alkil acil" se odnosi na Ci-Cć-alkilne grupe koje imaju neki acilni supstituenat, uključujući 2-acetiletil i slično.

"Aril acil" se odnosi na arilne grupe koje imaju neki acilni supstituenat, uključujući 2-acetilfenil i slično.

"Heteroaril acil" se odnosi na heteroarilne grupe koje imaju neki acilni supstituenat, uključujući 2-acetilpiridil i slično.

"C3-Cg-(hetero)cikloalkil acil" se odnosi na 3 do 8-člane cikloalkilne ili heterocikloalkilne grupe koje imaju neki acilni supstituenat.

"Aciloksi" se odnosi na grupu -OC(0)R gde R uključuje H, "Ci-C6-alkil", "C2-C6-alkenil", "C2-C6-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", heterocikloalkil "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "Ci-C6-alkil aril" ili "C,-C6-alkil heteroaril", "C2-C6-alkenil aril", "C2-C6-alkenil heteroaril",

"C2-C6-alkinil aril", "C2-C6-alkinilheteroaril", "Ci-C6-alkil cikloalkil", "C,-C6-alkil heterocikloalkil".

"Ci-C6-alkil aciloksi" se odnosi na Ci-Cć-alkilne grupe koje imaju neki aciloksi supstituenat, uključujući etil estera amino-propionske kiseline i slično.

"Alkoksi" se odnosi na grupu -O-R gde R uključuje "C,-C6-alkil" ili "aril" ili "hetero-aril" ili "Ci-Cć-alkil aril" ili "C|-C6-alkil heteroaril". Preferirane alkoksi grupe uključuju, na primer metoksi, etoksi, fenoksi i slično.

"Ci-Cć-alkil alkoksi" se odnosi na Ci-C6-alkilne grupe koje imaju neki alkoksi supstituenat, uključujući metoksi, metoksietil i slično.

"Alkoksikarbonil" se odnosi na grupu -C(0)OR gde R uključuje H, "Ci-C6-alkil" ili "aril" ili "heteroaril" ili "C,-C6-alkil aril" ili "C,-C6-alkil heteroaril".

"Ci-Cć-alkil alkoksikarbonil" se odnosi na C|-C6-alkilne grupe koje imaju neki alkoksikarbonil supstituenat, uključujući 2-(benziloksikarbonil)etil i slično.

"Aminokarbonil" se odnosi na grupu -C(0)NRR' gde svaki R, R' nezavisno uključuje vodonik ili Ci-C6-alkil ili aril ili heteroaril ili "d-Ce-alkil aril" ili "C|-C6-alkil hetero-aril".

"Ci-Cć-alkil aminokarbonil" se odnosi na Ci-Cć-alkil grupe koje imaju neki aminokarbonilni supstituenat, uključujući 2-(dimetilaminokarbonil)etil i slično.

"Acilamino" se odnosi na grupu -NRC(0)R' gde svaki R, R' nezavisno je vodonik, "C|-Cć-alkil", "C2-C6-alkenil", "C2-C6-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "C|-C6-alkil aril" ili "Ci-C6-aIkil heteroaril", "C2-C6-alkeniI aril", "Ci-C6-alkenil heteroaril", "C2-C6-alkinil aril", "C2-C6-alkinilheteroaril", "Ci-Cć-alkil cikloalkil", " C^ Ce-alkil heterocikloalkil".

"Ci-Cć-alkil acilamino" se odnosi na d-Cć-alkilne grupe koje imaju neki acilamino supstituenat, uključujući 2-(propionilamino)etil i slično.

"Ureido" se odnosi na grupu -NRC(0)NR'R" gde svaki R, R', R" nezavisno je vodonik, "Ci-C6-alkil", "C2-C6-alkenir, "C2-C6-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "CrC6-alkil aril" ili "C,-C6-alkil heteroaril", "C2-C6-alkeniI aril", "C2-C6-alkenil heteroaril", "C2-C6-alkinil aril", "C2-C6-alkinilheteroaril", "C,-C6-alkil cikloalkil", "CrC6-alkil heterocikloalkil" i gde R' i R", zajedno sa atomom azota na kojeg su spojeni, mogu ponekad da formiraju neki 3-8-člani heterocikloalkilni prsten.

"C[-c6-alkil ureido" se odnosi na Ci-Q,-alkilne grupe koje imaju neki ureido supstituenat, uključujući2-{ N'-metilureido)etil i slično.

"Karbamat" se odnosi na grupu -NRC(0)OR' gde svaki R, R'je nezavisno vodonik, "C|-Cć-alkil", "C2-C6-alkenil", "C2-C6-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "C,-C6-alkil aril" ili "C,-C6-alkil heteroaril", "C2-C6-alkenil aril", "C2-C6-alkenil heteroaril", "C2-C6-alkinil aril", "C2-C6-alkinilheteroaril", "C,-C0-alkil cikloalkil", "C,-C6-alkil heterocikloalkil".

"Amino" se odnosi na grupu -NRR' gde svaki R. R'je nezavisno vodonik ili "Ci-Cć-alkil" ili "aril" ili "heteroaril" ili "CrC6-alkil aril" ili "C|-C6-alkil heteroaril" ili "cikloalkil" ili "heterocikloalkil" i gde R i R', zajedno sa atomom azota na kojeg su spojeni, mogu ponekad da formiraju 3-8-člani heterocikloalkilni prsten.

"C|-Cć-alkil amino" se odnosi na Ci-Cć-alkilne grupe koje imaju neki amino supstituenat, uključujući 2-(l-pirolidinil)etil i slično.

"Amonijum" se odnosi na pozitivno nabijenu grupu -N<+>RR'R", gde svaki R, R', R" je nezavisno "C,-C6-alkir' ili "CrC6-alkil aril" ili "CrC6-alkil heteroaril" ili "cikloalkil" ili "heterocikloalkil" i gde R i R', zajedno sa atomom azota na kojeg su spojeni, mogu da ponekad formiraju 3-8-člani heterocikloalkilni prsten.

"C|-Cć-alkil amonijum" se odnosi na C|-C6-alkilne grupe koje imaju neki amonijum supstituenat, uključujući 2-(l-pirolidinil)etil i slično.

"Halogen" se odnosi na fluoro, hloro, bromo i jodo atome.

"Sulfoniloksi" se odnosi na grupu -OS02-R gde R je izabran iz H, "C|-C6-alkil", "C,-C6-alkil" koji su supstituisani sa halogenima, kao -OSO2-CF3grupe, "C2-C6-alkenil", "C2-C6-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "Ct-C6-alkil aril" ili "C,-C6-alkil heteroaril", "C2-C6-alkenil aril", "C2-C6-alkenil heteroaril", "C2-C6-alkinil aril", "C2-C6-alkinilheteroaril", "Ci-C6-alkil cikloalkil", "Ci-C6-alkil heterocikloalkil".

"Ci-Cć-alkil sulfoniloksi" se odnosi na CpCć-alkilne grupe koje imaju neki sulfoniloksi supstituenat, uključujući 2-(metilsulfoniloksi)etil i slično.

"Sulfonil" se odnosi na grupu "-S02-R" gde R je izabran iz H, "arila", "heteroarila", "Ci-Cć-alkila", "C|-Cć-alkila" koji su supstituisani sa halogenima, kao -SO2-CF3grupa, "C2-C6-alkenil", "C2-C6-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "CrC6-alkil aril" ili "C,-C6-alkil heteroaril", "C2-C6-alkenil aril", "C2-C6-alkenil heteroaril", "C2-C6-alkinil aril", "C2-C6-alkinilheteroaril", "Ci-C6-alkiI cikloalkil", "Ci-C6-alkil heterocikloalkil".

"Ci-Cć-alkil sulfonil" se odnosi na Ci-Cć-alkilne grupe koje imaju neki sulfonilni supstituenat, uključujući 2-(metilsulfonil)etil i slično.

"Sulfinil" se odnosi na grupu "-S(0)-R" gde R je izabran iz H, "C,-C6-alkila","C,-C6-alkila" supstituisanog sa halogenima, kao -SO-CF3grupa: "C2-Cć-alkenil", "C2-Cć-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "C,-C6-alkil aril" ili "C,-C6-alkil heteroaril", "C2-C6-alkenil aril", "C2-C6-alkenil heteroaril", "C2-C6-alkinil aril", "C2-C6-alkinilheteroaril", "C,-C6-alkil cikloalkil", "Ci-C6-alkil heterocikloalkil".

"Ci-Cć-alkil sulfinil" se odnosi na Ci-Cć-alkilne grupe koje imaju neki sulfinilni supstituenat, uključujući 2-(metilsulfmil)etil i slično.

"Sulfanil" se odnosi na grupe -S-R gde R uključuje H, "C,-C6-alkil", "C-Cć-alkil" supstituisani sa halogenima, kao -SO-CF3grupa, "C2-Cć-alkenil", "C2-Cć-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "Ci-C6-alkil aril" ili "C,-C6-alkil heteroaril", "C2-C6-alkenil aril", "C2-C6-alkenil heteroaril", "C2-C5-alkinil aril", "C2-C6-

alkinilheteroaril", "Ci-C6-alkil cikloalkil", "CrC6-alkil heterocikloalkil". Preferirane sulfanilne grupe uključuju metilsulfanil, etilsulfanil i slično.

"Ci-Cć-alkil sulfanil" se odnosi na Ci-Cć-alkilne grupe koje imaju neki sulfanilni supstituenat, uključujući 2-(etilsulfanil)etil i slično.

"Sulfonilamino" se odnosi na grupu -NRS02-R' gde svaki R, R' nezavisno uključuje vodonik,. "C,-C6-alkil", "C2-C6-alkenil", "C2-C6-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "C,-C6-alkil aril" ili "CrC6-alkil heteroaril", "C2-C6-alkenil aril", "C2-C6-alkenil heteroaril", "C2-C6-alkinil aril", "C2-C6-alkinilheteroarir<*>, "Ci-C6-alkil cikloalkil", "d-C6-alkil heterocikloalkil".

"C|-Cć-alkil sulfonilamino" se odnosi na Ci-Cć-alkilne grupe koje imaju neki sulfonilamino supstituenat, uključujući 2-(etilsulfonilamino)etil i slično.

"Aminosulfonil" se odnosi na grupu -S02-NRR' gde svaki R, R' nezavisno uključuje vodonik, "Ci-Cć-alkil", "C2-C6-alkenil", "C2-C6-alkinil", "C3-C8-cikloalkil", "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "C,-C6-alkil aril" ili "C,-C6-alkil heteroaril", "C2-C6-alkenil aril", "C2-C6-alkenil heteroaril", "C2-C6-alkinil aril", "C2-C6-alkinilheteroaril", "Ci-C6-alkil cikloalkil", "Ci-C6-alkil heterocikloalkil".

"Ci-Cć-alkil aminosulfonil" se odnosi na Ci-Cć-alkilne grupe koje imaju neki aminosulfonilni supstituenat, uključujući 2-(cikloheksilaminosulfonil)etil i slično.

"Supstituisan ili ne-supstituisan": Osim ako je drugačije navedeno sa definicijom za pojedini supstituenat, već pomenute grupe poput "alkenila", "alkinila", "arila", "heteroarila", "cikloalkila", "heterocikloalkila" itd. mogu ponekad da budu supstituisane sa 1 do 5 supstituenata koji su izabrani iz grupe koja obuhvata "Ci-Cć-alkil", "C2-C6-alkenil", "C2-Cć-alkinil", "cikloalkil", "heterocikloalkil", "C,-C6-alkil aril", "C,-C6-alkil heteroaril", "Ci-C6-alkil cikloalkil", "C,-C6-alkil heterocikloalkil", "amino", "amonijum", "acil", "aciloksi", "acilamino", "aminokarbonil", "alkoksikarbonil", "ureido", "aril", "karbamat", "heteroaril", "sulfinil", "sulfonil", "alkoksi", "sulfanil", "halogen", "karboksi", trihalometil, cijano, hidroksi, merkapto, nitro i slično.

"Supstituisan" se odnosi na grupe koje su supstituisane sa 1 do 5 supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata "C,-C6-alkil", "C2-C6-alkenil", "C2-C6-alkinil", "cikloalkil", "heterocikloalkil", "C,-C6-alkil aril", "Ci-C6-alkil heteroaril", "C,-C6-alkil cikloalkil", "C,-Cć-alkil heterocikloalkil", "amino", "aminosulfonil", "amonijum", "acil amino", "amino karbonil", "aril", "heteroaril"; "sulfinil", "sulfonil", "alkoksi", "alkoksi karbonil", "karbamat", "sulfanil", "halogen", trihalometil, cijano, hidroksi, merkapto, nitro i slično.

"Farmaceutski prihvatljive soli ili kompleksi" se odnosi na soli ili komplekse ispod-identifikovanih jedinjenja sa Formulom (I) koji mogu da zadrže željenu biološku aktivnost. Primeri takvih soli uključuju, ali time nisu ograničeni, kisele adicione soli koji se formiraju sa anorganskim kiselinama (kao hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, fosforna kiselina, azotna kiselina i slično) i soli formirane sa organskim kiselinama poput octene kiseline, oksalne kiseline, tartarne kiseline, sukcinske kiseline, maličke kiseline, fumarne kiseline, maleičke kiseline, askorbinske kiseline, benzoičke kiseline, taninske kiseline, pamoične kiseline, alginske kiseline, poliglutamičke kiseline, naftalen sulfoničke kiseline, naftalen disulfoničke kiseline i poli-galakturonske kiseline. Pomenuta jedinjenja mogu takođe da se administriraju kao farmaceutski prihvatljive kvaternarne soli koje su poznate stručnjaku u području, a koje specifično uključuju kvaternarnu amonijumovu so sa formulom -NR,R',R"<+>Z ", gde R, R', R" su nezavisno vodonik, alkil ili benzil, Ci-Cć-alkil, C2-C6-alkenil, C2-C6-alkinil, Ci-Cć-alkil aril, Ci-Cć-alkil heteroaril, cikloalkil, heterocikloalkil, a Z je neki kontra-jon, uključujući hlorid, bromid, jodid, -O-alkil, toluensulfonat, metilsulfonat, sulfonat, fosfat ili karboksilat (poput benzoata, sukcinata, acetata, glikolata, maleata, malata, fumarata, citrata, tartarata, askorbata, cinamoata, mandeloata i difenilacetata).

"Farmaceutski aktivan derivat" se odnosi na bilo koje jedinjenje koje nakon administracije u recipijenta je sposobno da direktno ili indirektno obezbedi aktivnost koja je ovde razotkrivena.

Termin "indirektno" takođe obuhvata pro-lekove koji mogu da se konvertuju u aktivnu formu leka uz pomoć endogenih encima ili metabolizma.

Pronađeno je da su jedinjenja iz ovoga pronalaska modulatori Fosfatoinozitid 3-kinaza (PI3K), koje obuhvaćaju PI3K ay.Kada je encim fosfatoinozitid 3-kinaza (PI3K) inhibiran uz pomoć jedinjenja iz ovoga pronalaska, PI3K nije sposoban da ostvaruje svoje encimske, biološke i/ili farmakološke efekte. Jedinjenja iz ovoga pronalaska su prema tome korisna u tretmanu i prevenciji autoimunih poremećaja i/ili poremećaja zapaljenja, kardiovaskularnih bolesti, neurodegenerativnih bolesti, bakterijskih ili viralnih infekcija, bolesti bubrega, agregacije krvnih pločica, raka, transplantacije, odbacivanje presadka ili povreda pluća.

Opšta Formula (I) u skladu sa ovim pronalaskom takođe obuhvata i svoje tautomere, svoje geometrijske izomere, svoje optički aktivne forme poput enantiomera, dijastereomera i svoje racematne forme, kao i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Preferirane farmaceutski prihvatljive soli sa Formulom (I) su kisele adicione soli koje nastaju sa farmaceutski prihvatljivim kiselinama poput hlorovodonične, bromovodonične, sumporne ili bisulfatne, fosfatne ili hidrogen fosfatne, acetatne, benzoatne, sukcinatne, fumaratne, maleatne, laktatne, limunske, tartaratne, glukonatne, metansulfonatne, benzensulfonatne i/?ara-toluensulfonatne kiseline.

Jedinjenja u skladu sa Formulom (1) su prikladna za modulaciju, a posebno za inhibiciju delovanja fosfatoinozitid 3-kinaza (PI3K). Prema tome se veruje da su jedinjenja iz ovoga pronalaska posebno korisna za tretman i/ili prevenciju poremećaja, koji su posredovani delovanjem PI3K, a posebno delovanjem PI3K a i/ili PI3K y. Pomenuti tretman uključuje modulaciju - a posebno inhibiciju ili negativnu regulaciju - fosfatoinozitid 3-kinaza.

Jedinjenja sa Formulom (I) su prikladna za upotrebu kao lek.

U jednoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I):

gde R<1>je izabran iz H, halogena, ponekad supstituisanog CpCć-alkila, ponekad supstituisanog C2-C6-alkenila, ponekad supstituisanog C2-C6-alkinila, ponekad supstituisanog Ci-Cć-alkil alkoksi, ponekad supstituisanog alkoksikarbonila, ponekad supstituisanog acila, ponekad supstituisanog sulfonila, ponekad supstituisanog sulfanila, ponekad supstituisanog sulfinila, ponekad supstituisanog alkoksi i ponekad supstituisanog amino;

R2 je izabran iz H; halogena; ponekad supstituisanog CpCć-alkila; ponekad supstituisanog C2-Cć-alkenila; C2-C6-alkinila; ponekad supstituisanog arila, poput fenila i 3,5-dimetoksi fenila; ponekad supstituisanog heteroarila, poput ponekad supstituisanog 2,3-dihidroindolila (kao tert-butil ester 2,3-dihidro-indol-l-karboksilne kiseline, 2,3-Dihidro-lH-indol-5-il, Acetil-2,3-dihidro-lH-indol-5-il, l-(4-Dimetilamino-butiril)-2,3-dihidrolH-indol-5-il, 1-Metansulfonil-2,3-dihidro-1 H-indol-5-il, 1 -Hlorometansulfonil-2,3-dihidro-1 H-indol-5-il, 1 -(3-Morfolin-4-il-propan-l-sulfonil)-2,3-dihidro-lH-indol-5-il); ponekad supstituisanog C3-C8-cikloalkila; ponekad supstituisanog CrCs-heterocikloalkila, uključujući i ponekad supstituisanog piperidinila poput 1-piperidinila, 4-fluoro-l-piperidinila, 4-(trifluorometil)-l-piperidinila; ponekad supstituisanog aril Ci-Cć-alkila; ponekad supstituisanog heteroaril Ci-Cć-alkila; ponekad supstituisanog Ca-Cs-cikloalkil Ci-Cć-alkila i ponekad supstituisanog C3-C8-heterocikloalkil Ci-Cć-alkila; ponekad supstituisanog CpCć-alkil alkoksi; ponekad supstituisanog alkoksikarbonila; ponekad supstituisanog acila; ponekad supstituisanog sulfonila; ponekad supstituisanog sulfonila; ponekad supstituisanog sulfanila; ponekad supstituisanog alkoksi i ponekad supstituisanog amino.

X je izabran iz S, NH i O;

Y je izabran iz O, S i NR<3>, gde R<3>je izabran iz H, ponekad supstituisanog Ci-Cć-alkoksi, ponekad supstituisanog C|-C6-alkila, ponekad supstituisanog C2-Cć-alkenila, ponekad supstituisanog C2-Cć-alkinila, ponekad supstituisanog C|-C6-alkil arila, cijano i ponekad supstituisanog sulfonila;

A je ponekad supstituisana heteroarilna grupa, uključujući ponekad supstituisanog pirimidinila, ponekad supstituisanog pirazinila, ponekad supstituisanog furila i ponekad supstituisanog imidazolila;

n je celi broj koji je izabran iz 1 i 2; kao i njihove geometrijske izomere, njihove optički aktivne forme poput enantiomera, dijastereomera i njihove racematne forme, kao i njihove farmaceutski prihvatljive soli.

U jednoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde R<1>je H.

U drugoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gdeR<2>je H.

U drugoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde R2 je ponekad supstituisani C3-Q-heterocikloalkil.

U drugoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde R<2>je izabran iz ponekad supstituisanog arila i ponekad supstituisanog heteroarila.

U drugoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gdeR<3>je H.

U drugoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde X je S.

U drugoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde Y je O.

U drugoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde Y je S.

U drugoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde nje 1.

U drugoj specifičnoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde nje 2.

U preferiranoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde A je takav da zajedno sa piridinskim prstenom formira sledeću grupu (Ia):

gdeR',R<2>i n su kao šta je pre definisano.

U drugoj preferiranoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde A je takav da zajedno sa piridinskim prstenom formira grupu (lb):

gde R<1>, R<2>i n su kao šta je pre definisano.

U drugoj preferiranoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde A je takav da zajedno sa piridinskim prstenom formira grupu (Ic):

gdeR1,R<2>i n su kao staje pre definisano.

U drugoj preferiranoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde A je takav da zajedno sa piridinskim prstenom formira sledeću grupu (Id):

gde R',R<2>i n su kao staje pre definisano.

U preferiranoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde R<1>je H; R2 je ponekad supstituisani CrCrheterocikloalkiI; X je S; Y je O ili S; A zajedno sa piridinskim prstenom formira grupu sa Formulom (Ia), a nje 1.

U preferiranoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde R<1>je H; X je S; Y je O, A zajedno sa piridinskim prstenom formira grupu sa Formulom (lb).

U preferiranoj izvedbi, ovaj pronalazak obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde R<1>je H; X je S; Y je O, A zajedno sa piridinskim prstenom formira grupu sa Formulom (Ic).

U preferiranoj izvedbi, ovaj pronalazak, obezbeđuje piridin metilen azolidinonske derivate sa Formulom (I) gde R<1>je H; X je S; Y je O, a A zajedno sa piridinskim prstenom formira grupu sa Formulom (Id).

Jedinjenja iz ovoga pronalaska posebno uključuju one grupe koje se sastoje od:

Jedinjenja iz ovoga pronalaska su korisna kao lekovi. Pomenuti mogu da se koriste za preparaciju leka za profilaksu i/ili tretman autoimunih poremećaja i/ili poremećaja bolesti zapaljenja, kardiovaskularnih bolesti, neurodegenerativnih bolesti, bakterijskih ili viralnih infekcija, bolesti bubrega, agregacije krvnih pločica, raka, transplantacije, odbacivanje presadka ili povreda pluća.

U jednoj izvedbi, jedinjenja sa Formulom (I) su korisna za tretman i/ili profilaksu autoimunih poremećaja ili bolesti zapaljenja poput multipne skleroze, psorijaze, reumatoidnog artritisa, sistemskog lupusa eritematozisa, bolesti zapaljenja creva, zapaljenja pluća, tromboze ili infekcija/zapaljenja mozga poput meningitisa ili encefalitisa.

U drugoj izvedbi, jedinjenja sa Formulom (I) su korisna za tretman i/ili profilaksu neurodegenerativnih bolesti, uključujući Alzheimer-ovu bolest, Huntington-ovu bolest, traume CNS-a, kapi ili ishemičnih stanja.

U drugoj izvedbi u skladu sa ovim pronalaskom, jedinjenja sa Formulom (I) su korisna za tretman i/ili profilaksu kardiovaskularnih bolesti poput ateroskleroze, srčane hipertrofije, srčane miocitne disfunkcije, povećanog krvnog pritiska ili vazokonstrikcije.

U drugoj izvedbi u skladu sa ovim pronalaskom, jedinjenja sa Formulom (I) su korisna za tretman i/ili profilaksu hroničnih obstruktivnih plućnih bolesti, fibroze anafilaktičkog šoka, psorijaze, alcrgijskih bolesti, astme, kapi ili ishemičnih stanja, ishemije-reperfuzije, agregacije/aktivisanja krvnih pločica, atrofije/hipertrofije skeletnih mišića, regrutovanja leukocita u tkivu raka, angiogeneze, invazije metastaze, a posebno melanoma, Karposi-jevog sarkoma, akutnih i hroničnih bakterijskih i viralnih infekcija, sepse, transplantacije, odbacivanja presadka, glomerulo-skleroze, glomerulo-nefritisa, progresivne renalne fibroze, endotelialnih i epitelialnih povreda u plućima ili opšte zapaljenje plućnih puteva.

U drugoj izvedbi u skladu sa ovim pronalaskom je obezbeđen proces za preparaciju piridin metilen azolidinonskih derivata u skladu sa Formulom (I), a koji proces obuhvata korak reagovanja nekog jedinjenja sa Formulom (II) sa nekim derivatom sa Formulom (III) u prisutnosti neke baze:

gdeR',R<2>, A, X, Y i n su kao šta je pre definisano.

U drugoj izvedbi u skladu sa ovim pronalaskom su obezbeđena jedinjenja u skladu sa Formulom (II):

gde R<1>, R<2>, A, X, Y i n su kao šta je pre definisano i gde jedinjenja sa Formulom II su izabrana iz grupe sa formulama (Ha), (Ilb) i (IIc): gde R<4>je izabran iz H i R<2>; R<5>je neka R<2>grupa gde prvi atom koji je spojen na pirimidinski prsten je izabran iz C, N, S i O i gde kada R<4>je NH2, R'<1>nije NH2; R<1>, R<2>i n su kao šta je definisano pre; gde R 1 , R 0 i n su kao staje definisano pre; gde R<1>, R<2>i n su kao šta je pre definisano i gde najmanje jedan R<1>ili R<2>nije H; i

gde R , R^ i n su kao šta je pre definisano pod uslovom da jedinjenje sa Formulom (Ud) nije 2-(4-metoksifenil)-3H-Imidazo[4,5-b]piridin-5-karboksaldehid (RN 142764-79-2).

U dodatnoj izvedbi u skladu sa ovim pronalaskom su obezbeđena jedinjenja u skladu sa Formulom (II) iz sledeće grupe: 4-Piperidin-l-il-pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid;

4-(4-Fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid;

4-(4-Metil-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid;

Pirido[2,3-b]pirazin-6-karbaldehid;

2- Trimetilsilanil-furo[3,2-b]piridin-5-karbaldehid;

3- Fenil-lH-imidazo[4,5-b]piridin-5-karbaldehid;

3-(3,5-Dimetoksifenil)-3H-imidazo[4,5-i]piridin-5-karbaldehid;

Tert- butil5-(5-formil-3H-imidazo[4,5-ft]piridin-3-il)indolin-1 -karboksilat; 3-(l-acetil-2,3-dihidro-l//-indol-5-il)-3//-imidazo[4,5-/3]piridin-5-karbaldehid; 3-{l-[4-(dimetilamino)butanoil]-2,3-dihidro-l//-indol-5-il}-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehid;

3-[l-(metilsulfonil)-2,3-dihidro-l//-indol-5-il]-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehid; 3-{l-[(hlorometil)sulfonil]-2,3-dihidro-l//-indol-5-il}-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehid;

3-{l-[(3-morfolin-4-ilpropil)sulfonil]-2,3-dihidro-l//-indol-5-il}-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehid;

Tert- butil6-(5-formil-3#-imidazo[4,5-6]piridin-3-il)indolin-1 -karboksilat; 3-[l-(metilsulfonil)-2,3-dihidro-l//-indol-6-il]-3//-imidazo[4,5-^]piridin-5-karbaldehid. Piridin metilen azolidinonski derivati koji su navedeni u ovom pronalasku kao primer mogu da se pripreme iz lako dostupnog početnog materijala uz pomoć sledećih opštih metoda i procedura. Treba da se razume da tamo gde su tipični ili preferirani eksperimentalni uslovi dani (kao reakcione temperature, vreme, molovi reagenasa, rastvarači i slično), takođe mogu da se primene i drugi eksperimentalni uslovi osim ako je drugačije navedeno. Optimalni reakcioni uslovi mogu da variraju u odnosu na pojedinačne reaktante ili rastvarače koji se koriste, ali takvi uslovi mogu da se odrede od strane stručnjaka u polju, uz pomoć rutinskih optimizacijskih procedura.

Kada se primenjuju kao farmaceutici, jedinjenja iz ovoga pronalaska se tipično administriraju u formi farmaceutske kompozicije. Tako, farmaceutske kompozicije koje obuhvataju neko jedinjenje sa Formulom (I) i neki farmaceutski prihvatljivi nosač, razređivač ili ekscipijent spadaju takođe u okrive ovoga pronalaska. Stručnjak u području poznaje brojne takve nosače, razređivače ili ekscipijente koji su prikladni za formulisanje neke farmaceutske kompozicije.

Jedinjenja iz ovoga pronalaska, zajedno sa konvencionalno korišćenim dodatkom, nosačem, razređivačem ili ekscipijentom mogu da se sačine u formi farmaceutskih kompozicija i njihovih pojedinačnih doza, a u takvim formama pomenuti mogu da budu uključeni kao kruta materija, poput tableta ili ispunjenih kapsula ili kao tečnost poput rastvora, suspenzija, emulzija, eliksira ili kapsula ispunjenih sa pomenutim, pri čemu je sve pomenuto za oralnu upotrebu ili u formi sterilnih rastvora za injektiranje za parenteralnu (uključujući i subkutanu) upotrebu. Takve farmaceutske kompozicije i njihove pojedinačne dozne forme mogu da svoje sastojke sadrže u konvencionalnim proporcijama, sa ili bez dodatnih aktivnih jedinjenja ili principa, a takve dozne forme mogu da sadrže bilo koji prikladnu efektivnu količinu aktivnog sastojaka pod uslovom da se zadovolji potrebni dnevni dozni raspon.

Farmaceutske kompozicije koje sadrže piridin metilen azolidinonske derivate iz ovoga pronalaska mogu da se pripreme na način koji je dobro poznat stanju tehnike u farmaciji i obuhvataju najmanje jedno aktivno jedinjenje. Opšte uzeto, jedinjenja iz ovoga pronalaska se administriraju u farmaceutski efektivnoj količini. Količina jedinjenja koje se u stvari daje će tipično da bude određena od strane lekara, a u zavisnosti o relevantnih okolnosti, uključujući i samog stanja koje se tretira, izabrane rute administracije, aktualnog jedinjenja koje se administrira, starosti, težini i odgovoru pojedinog pacijenta, jačine pacijentovih simptoma i slično.

Farmaceutske kompozicije iz ovoga pronalaska mogu da se administriraju preko brojnih ruta uključujući oralno, rektalno, trans-dermalno, subkutano, intravenozno, intramuskularno i intranazalno. Kompozicije za oralnu administraciju mogu da budu u formi rezervoara tečnih rastvora ili suspenzija ili rezervoara pudera. Još uobičajenije, međutim, kompozicije su predstavljene u pojedinačnim doznim formama sa ciljem postizanja tačnijeg doziranja. Termin "pojedinačne dozne forme" se odnosi na fizički diskretne jedinice prikladne za unitarno doziranje ljudskih subjekata i drugih sisara, a svaka jedinica sadrži od pre određenu količinu aktivnog materijala koja je izračunata da može da stvori željeni terapeutski efekat, u asocijaciji sa nekim prikladnim farmaceutskim ekscipijentom. Tipične pojedinačne dozne forme uključuju pre ispunjene, pre izmerene ampule ili šprice tečnih kompozicija ili pilule, tablete, kapsule ili slično u slučaju krutih kompozicija. U takvim kompozicijama, piridin metilen azolidinonski derivat je uobičajeno manjinska komponenta (od oko 0.1 do oko 50% po težini ili preferirano od oko 1 do oko 40% po težini), a ostatak se odnosi na brojne prenosnike ili nosače i pomagala za procesiranje koja su korisna za formiranje željene dozne forme.

Tečne forme koje su prikladne za oralnu administraciju mogu da uključuju neki prikladni vodeni ili ne-vodeni prenosnik sa puferima, agensima za suspendovanje i za rastvaranje, kolorantima, okusima i slično. Krute forme mogu da uključe, na primer, bilo kojeg od sledećih sastojaka ili jedinjenja slične prirode: veznik poput mikrokristalne celuloze, gume tragakant ili želatin; neki ekscipijent poput škroba ili laktoze, agens za dezintegrisanje poput alginske kiseline, Primogela ili kukuruznog škroba; lubrikant poput magnezijum stearata; glidant poput koloidnog silikon dioksida; agens za zaslađivanje poput saharoze ili saharina; ili neki agens za okus poput peperminta, metil salicilata ili okusa pomorandže.

Kompozicije za injektiranje se tipično baziraju na sterilni slani rastvor za injektiranje ili slani rastvor koji je puferiran sa fosfatnim puferom ili na druge nosače koji mogu da se injektiraju, a koji su poznati stanju tehnike. Kao šta je pre pomenuto, piridin metilen azolidinonski derivati sa Formulom (I) u takvim kompozicijama su tipično manjinska komponenta, koja često ima raspon među 0.05 i 10% po težini, a ostatak je neki nosač koji može da se injektira i slično.

Pre opisana jedinjenja za kompozicije za oralnu administraciju ili za kompozicije za injektiranje su samo reprezentativni primeri. Dodatni materijali, kao i tehnike procesiranja i slično su predstavljeni u Delu 5 izRemington' s Pharmaceutical Sciences,20 izdanje, 2000, Marck Publishing Companv, Easton, Pensilvanija, a koja referenca je ovde uključena ovim citatom.

Jedinjenja iz ovoga pronalaska mogu takođe da se administriraju preko formi za zadržano otpuštanje ili preko dostavnih sistema za zadržano otpuštanje. Opis prikladnih materijala za zadržano otpuštanje takođe može da se pronađe u već pomenutom naslovuRemington' s

Pharmaceutical Sciences.

Sinteza jedinjenja iz ovoga pronalaska:

Novi piridin metilen azolidinonski derivati u skladu sa Formulom (I) mogu da se pripreme iz lako dostupnih startnih materijala uz pomoć nekoliko sintetskih pristupa, koristeći hemijske protokole rastvor-faze i kruta materija-faze( Brummond et al, 1999, J. O. C., 64, 1723- 1726).Fuzionisani piridinski intermedijari su razotkriveni uShiotani et al, J. Heterocyclic chem. 34, 901 ( 1997)i uLown et al, Chem. Res. Toxicol. 1992, 5, 597.Primeri sintetskih puteva će biti opisani.

Sledeća skraćenja se odnose na definicije ispod:

A (Angstrem), cm (santimetar),ekv(ekvivalent), h (čas), g (gram), M (molarno),MHz(Megaherc), ui (mikrolitar),min(minut), mg (miligram),mL(mililitar),mm(milimetar),mmol(milimol),mM(milimolarno),nm(nanometar),st(sobna temperatura),ACN(acetonitril),ATP(Adenozid Trifosfat),BSA(Goveđi Serumski Albumin),DCM(dihlorometan),DIBAL(Diizobutilaluminijumhidrid),DMF(dimetil formamid),DMSO(Dimetil Sulfoksid),HPLC(Tečna hromatografija visoke performanse),InslP(D-mio-inozitol-1-fosfat),IR(Infracrveno),LC(Tečna hromatografija),MS(masena spektrometrija),NMR(Nuklearna magnetna rezonancija),PBS(Slani rastvor sa fosfatnim puferom),Pl(fosfoinozitidi),PI3K(fosfoinozitid 3-kinaze),PI(3)P(fosfatidilinozitol 3-monofosfat),PI(3,4)P2(fosfatidilinozitol 3,4-bifosfat),PI(3,4,5)P3(fosfatidilinozitol 3,4,5-trifosfat),PI(4)P(fosfatidilinozitol-4-fosfat),PI(4,5)P2)(fosfatidil inozitol-4,5-bifosfat),Ptdlns(fosfatidilinozitol),PVT(polivinil toluen), SPA (Test scincilacijske blizine),TEA(trietilamin),TFA(trifluoro-sirćetna kiselina),THF(tetrahidrofuran),TLC(Tankoslojna hromatografija),TMS(Trimetilsilil), UV (Ultravioletovo).

Piridin metilen azolidinonski derivati koji su prikazani u ovom pronalasku mogu da se pripreme iz lako dostupnih startnih materijala koristeći sledeće opšte metode i procedure. Treba da se razume da kada su tipični ili preferirani eksperimentalni uslovi dani (kao reakcione temperature, vreme, molovi reagenasa, rastvarači i slično), drugi eksperimentalni uslovi takođe mogu da se koriste osim ako je drugačije navedeno. Optimalni reakcioni uslovi mogu da variraju u zavisnosti o pojedinačnim reagensima ili rastvaračima koji se koriste, a takvi uslovi mogu da se odrede od strane stručnjaka u polju, koristeći rutinske procedure za optimizaciju.

U ilustrovanom procesu u sledećoj šemi, R<1>, R<2>, A, X, Y i n su kao šta je pre definisano u opisu.

Opšte uzeto, piridin metilen azolidinonski derivati u skladu sa opštom Formulom (I) mogu da se dobiju uz pomoć nekoliko sintetičkih pristupa, koristeći hemijske protokole za rastvor-fazu i kruta materija-fazu( Brummond et al, 1999, od pre)i to ili uz pomoć konvencionalnih metoda ili uz pomoć tehnika mikro-talasa.

U prvom koraku, aldehidni reaktant Pl (Pla, Plb, Plc, Pld) i jedan do dva ekvivalenata reaktanta P2 (posebno tiazolidinedion ili rodanin) su grejani u prisutnosti preferirano blage baze sa ciljem da se dobije odgovarajući olefin sa Formulom (I) kao šta je prikazano u Šemi 1 ispod. U prvom koraku, Pl može da bude zamenjen sa prekursorima Pla, Plb, Plc i Pld sa ciljem da se dobiju finalna jedinjenja (Ia), (lb), (Ic) i (Id) kao staje pre opisano.

Posebno preferirani procesu u skladu sa ovim pronalaskom su ilustrovani uz pomoć sledećih Šema 2, 3, 4 i 5 u kojima jedinjenja sa formulama (Ia), (lb), (Ic) i (Id) mogu da budu dobivena koristeći iste reakcione uslove kao staje pre pomenuto.

Dok ovaj korak može da bude proveden bez prisustva rastvarača na temperaturi koja je dovoljno visoka da uzrokuje najmanje delomično topljenje reakcione mešavine, preferirano se provodi u prisutnosti nekog inertnog rastvarača. Preferirani temperaturni raspon je od oko 70° C do 250° C, a posebno preferirane su temperature od oko 80° C do 120° C.

Primeri rastvarača za pre pomenutu reakciju uključuju rastvarače poput dimetoksimetana, ksilena, toluena, o-dihlorobenzena i metanola. Primeri prikladnih blagih baza za pre pomenute reakcije su alkalo metalne i alkalne zemne soli slabih kiselina poput (C|-Ci2)-alkil karboksilnih kiselina i benzoičke kiseline, alkalno metalnih i alkalno zemnih karbonata i bikarbonata poput kalcijum karbonata, magnezijum karbonata, kalijum bikarbonata i sekundarnih amina poput piperidina, morfolina ili pirolidina kao i tercijarnih amina poput piridina, trietilamina, diizopropiletilamina, N-metilmorfolina, N-etilpiperidina, N-metilpiperidina i slično. Posebno preferirane blage baze su natrijum acetat ili pirolidin zbog ekonomskih razloga i efikasnosti.

U takvoj tipičnoj reakciji( Tietze et al., u " The Knoevenagel reaction", str. 341 ff, Pergamon Press, Oxford 1991, Ur. : Trost B. M, Fleming I.)aldehid Pl i ostali startni materijali (kao tiazolidindion) P2 su kombinovani u otprilike ekvimolarnim količinama sa 0.5 do jedan ekvivalent pirolidin u metanolu ili sličnom rastvaraču i grejani među 70 i 200° C, a na kojim temperaturama reakcija je kompletna tokom oko 15 min pa do 3 časa. Željeni olefin sa Formulom (I) je tada izolovan uz pomoć filtracije, ako je precipitovao iz reakcione mešavine nakon hlađenja, ili na primer, uz pomoć mešanja sa vodom i subsekventnom filtracijom, a sa ciljem da se dobije grubi produkt. Grubi produkt je purifikovan, ako je to poželjno, na primer uz pomoć kristalizovanja ili uz pomoć standardnih hromatografskih metoda.

Alternativno, jedinjenja sa Formulom (I) mogu da se tipično dobiju uz pomoć mešanja ekvimolarnih količina tiazolidindiona P2 sa aldehidom Pl sa molarnim viškom bezvodnog natrijum acetata, a mešavina je grejana na temperaturi koja je dovoljno visoka da dovede do topljenja, a na kojoj temperaturi reakcija je uglavnom kompletna u oko 5 do 60 min.

Preferirano, pomenuta reakcija se provodi u kiselom medijumu poput sirćetne kiseline u prisutnosti natrijum acetata ili beta-alanina.

Još bolje, pomenuta reakcija se provodi u metanolu koristeći 1.1 do 2.0 ekvivalenta tiazolidindiona P2, jednog ekvivalenta aldehida Pl i 0.2 do 0.5 ekvivalenta pirolidina u metanolu.

Pre opisane reakcije mogu da se provode alternativno u uslovima mikro-talasa kao izvor topline. Tipično, aldehidni startni materijal Pl i tiazolidindion P2 su kombinovani u ekvimolarnim količinama sa 0.5 do jednog ekvivalenta piperidina u dimetoksimetanu ili u sličnom rastvaraču i grejani među 140° C i 240° C na kojim temperaturama reakcija je gotovo kompletna tokom oko 3 do 10 min.

Farmaceutski prihvatljive katjonske soli jedinjenja iz ovoga pronalaska mogu da se lako pripreme uz pomoć reagovanja kiselih formi sa odgovarajućom bazom, uobičajeno jedan ekvivalent u nekom ko-rastvaraču. Tipične baze su natrijum hidroksid, natrijum metoksid, natrijum etoksid, natrijum hidrid, kalijum hidroksid, kalijum metoksid, magnezijum hidroksid, kalcijum hidroksid, benzatin, holin, dietanolamin, etilendiamin, meglumin, benetamin, dietilamin, piperazin i trometamin. So je izolovana uz pomoć koncentrisanja do suvoće ili uz pomoć dodavanja nekog ne-rastvarača. U nekim slučajevima, soli mogu da se pripreme uz pomoć mešanja nekog rastvora kiseline sa rastvorom katjona (natrijum etilheksanoat, magnezijum oleat), uz korišćenje rastvarača u kojem željena katjonska so precipituje ili može na neki drugi način da se izoluje uz pomoć koncentrisanja i dodavanja nekog ne-rastvarača.

2,4-Azolidinonski derivati P2 su komercijalno dostupni iz brojnih izvora.

Metodi za pripremu intermedijara jedinjenja sa Formulom ( I).

Aldehidi sa formulom Pl mogu da se pripreme uz pomoć brojnih dobro poznatih metoda, na primer uz pomoć oksido-redukovanja započinjući sa odgovarajućim alkil esterom karboksilne kiseline ili sa karboksilnom kiselinom.

Standardne tehnike za redukovanje alkil estera karboksilne kiseline, karboksilnih halida ili karboksilne kiseline u benzilične alkohole koriste litijum aluminijum hidrid, diizopropilaluminijum, litijum aluminijum tri-tert-butoksihidrid i slično.

Konačno, odgovarajući benzilički alkohol je re-oksidiran u odgovarajući aldehid uz pomoć blage oksidacije sa reagensima poput mangan dioksida, hromove kiseline, Dess-Martin-ovog reagensa ili Swern-ove oksidacije ili u drugim uslovima za koje se zna da mogu da stvore aldehide iz primarnih alkohola. Alternativan način može da bude direktna redukcija odgovarajućeg alkil estera karboksilne kiseline ili karboksilne kiseline u odgovarajući aldehid, koristeći DIBAL na niskoj temperaturi ili bilo koju drugu tehniku koja je poznata u području.

Alternativni način da se proizvede odgovarajući aldehid Pl je selektivna redukcija nitrilnog ostatka u odgovarajući aldehid koristeći poznate metode poput na primer DIBAL-a.

Drugi način dobijanja aldehida sa formulom Pl je selektivna redukcija odgovarajućeg kiselog hlorida koristeći na primer litijumaluminijum-tri-tert-butoksihidrid( Cha et al, 1993, J. O. C.,

58, str. 4732- 34).

Drugi način da se sintetišu aldehidi Pl je da se počne sa odgovarajućim 2-piridin halidima, koji se podvrgavaju redukciji koja je potpomognuta sa organometalom sa ciljem da se dobiju odgovarajući 2-vinil-piridini, koji konačno mogu da budu oksidirani u odgovarajuće aldehide Pl koristeći standardne agense za oksidiranje olefinskih veza poput osmijum tetroksida, rutenijum tetroksida, ozona, rutenijum(III)hlorid u prisutnosti natrijum perjodata i druge agense koji su poznati stručnjaku u području.

Drugi način za dobijanje odgovarajućih aldehida Pl je oksidacija 2-metilpiridina koristeći agense za oksidiranje poput selenijum dioksida ili benzen selen anhidrida.

U skladu sa posebno preferiranim procesom iz ovoga pronalaska, kao šta je ilustrovano u Šemi 6 ispod, reaktant Pla može da se dobije započinjući sa derivatom sa formulom P3a gde R je izabran iz metila, etila ili bilo koje druge grupe koja može da se redukuje na način koji je poznat stručnjaku u području, uz ponekad primenjivanoj sekvenci redukovanja/oksidacije koristeći preferirano litijum aluminijum hidrid u tetrahidrofuranu, a nakon toga preko koraka oksidacije koristeći preferirano mangan dioksid u dihlorometanu.

Intermedijar koji može da bude korišćen u sintezi iz gornje šeme je metil 2,4,8-trihloropirido[3,2-d]pirimidin-6-karboksilat(Intermedijar1.3), a čija sinteza je opisana u literaturi( Srinivasan et al, 1979, J. O. C, 1979, 44, 3, str. 435),kao staje prikazano u Šemi 7 ispod.

Selektivna zamena 3 hloro grupe može da dozvoli uvođenje R<1>i R<2>grupa šta dovodi do različitih intermedijara sa formulama P3a (P3a(l), P3a(2), P3a(3), P3a(4), P3a(5), P3a(6), P3a(7)) kao šta je prikazano u Šemi 8 ispod.

Redukcioni koraci u Šemi 8 mogu da se provode uz korišćenje standardnih agenasa za redukovanje poput vodonika ili Raney-Nickel-ove ditiacije{ Srinivasan et al., 1979, od pre).

Preferirano, redukovanje se provodi u blagim uslovima uz korišćenje amonijum formata u prisutnosti paladijuma. Količina amonijum formata se određuje preko broja atoma hlora koji treba da se odstrane (2-12 ekv.).

Uvođenje grupa R2 i R<1>se postiže uz pomoć standardnih reakcionih tehnika koje su poznate stručnjaku u polju.

U skladu sa drugim posebno preferiranim procesom iz ovoga pronalaska, kao šta je ilustrovano u Šemi 9 ispod, aldehid Plb može da se dobije započinjući sa intermedijarom P3b uz oksidativno cepanje olefinske dvostruke veze.

gde R je izabran iz H, ponekad supstituisanog C]- C(, alkila, ponekad supstituisanog arila. U takvoj reakciji, olefinska dvostruka veza je pocepana uz pomoć agenasa za oksidaciju olefinskih veza poput osmijum tetroksida, rutenijum tetroksida, ozona, rutenijum(IIl)hlorida u prisutnosti natrijum perjodata i drugih agenasa poznatih stručnjaku u području.

Intermedijar P3b može da se sintetiše započinjući sa 2-halogen piridinskim derivatima koristeći reakcije spajanja koje su potpomognute sa organometalom, a sa ciljem da se uvede neki vinilni ostatak na standardan način koji je poznat stručnjaku u području. Odgovarajući 2-halogen piridini su lako dostupni preko na primer 2-halogen-4-nitro-6-aminopiridina kao šta je prikazano u Šemi 10 ispod, a gde "Hal" predstavlja neki halogen.

U skladu sa drugim posebno preferiranim procesom iz ovoga pronalaska, kao šta je ilustrovano u Šemi 11 ispod, gde R je izabran iz H, ponekad supstituisanog Ci-Cćalkila, ponekad supstituisanog arila, intermedijar Plc može da se dobije započinjući sa intermedijarom P3c uz pomoć oksidacije 2-metil piridina.

Takva oksidacija može da se provede koristeći selenijum dioksid ili benzen seleninski anhidrid u nekom inertnom rastvaraču na temperaturi među 150 i 250° C. Preferirano, takva reakcija se provodi uz pomoć mikro-talasa kao izvor topline. U drugom koraku, desililacija je provedena pod standardnim uslovima kao šta je opisano odKocienski, 1994(pre) iGreene et al, 1999(od pre).

Preferirano, trimetilsililna grupa se čepa koristeći natrijum 2 do 5N hidroksid.

Uvođenje R<2>može da se provede kao šta je opisano u dokumentu W02004/007491.

U skladu sa drugim više preferiranim procesom, intermedijarPlcmože da se dobije iz intermedijaraP3cpreko rearanžmana pikolinskog N-oksida: Tipično, intermedijarP3cse podvrgava N-oksiđaciji šta dovodi do intermedijara P32', koristeći oksidanse poput m-Hloro-perbenzoičke kiseline (m-CPBA) na sobnoj temperaturi ili bilo kojeg oksidansa koji je poznat stručnjaku u području. Nakon osnovne dorade i grejanja P3c' u srćetnom anhidridu na 100° C tokom 5 do 15 min( Cava et al., 1958, JOC, 23, 1616)nastaje odgovarajući alkohol zaštićeni acetilom, sa kojeg nakon toga može da se odstrani zaštita i isti može da se istovremeno desililuje uz pomoć tretmana sa natrijum hidroksidom (2N) u metanolu na sobnoj temperaturi. Konačno, primarni alkohol P3c" može da se oksidira u odgovarajući aldehidni intermedijarPlckoristeći oksidanse poput mangan dioksida u dihlorometanu ili bilo koje oksidanse koji su poznati stručnjaku u području (Šema 11 iznad).

Skladu sa drugim posebno preferiranim procesom iz ovoga pronalaska, gde su predstavljeni benzimidazoli, IntermedijarP4dmože da se dobije iz intermedijaraP5d,kao šta je prikazano u Šemi 12 ispod, gde "Hal" predstavlja neki halogen.

Supstitucija 2-halogena sa R<2>NH2kod alkohola (na primer, etanola) u prisutnosti neke baze nastupa pre redukcije nitro grupe koja je ciklizovana uz pomoć metala indijuma u prisutnosti izvora vodonika.P4dse dobija uz pomoć ciklizacije preko kondenzovanja sa amidima, a nakon toga uz pomoć instalacije vinilnog ostatka koristeći reakcije spajanja potpomognute organometalom na standardan način koji je poznat stručnjaku u području.

Kada R<2>u intermedijaruP4dje neki hemijski ostatak koji treba da prođe kroz sintetičke transformacije, ove transformacije se provode nakon kompletovanja spajanja sa vinilnim ostatkom. Ove sintetske transformacije uključuju, ali time nisu ograničeni, otklanjanje zaštite, spajanja, oksidacije, redukcije.

U skladu sa posebno preferiranim procesom iz ovoga pronalaska, instalirana vinilna olefinska veza u intermedijaru P3d (Šema 13 iznad) se čepa uz pomoć agenasa za oksidaciju olefinskih veza poput osmijum tetroksida ili rutenijum(IIl)hlorida u prisutnosti natrijum perijodata, ozona i drugih poznatih agenasa stručnjaku iz područja.

U skladu sa dodatnim opštim procesom, jedinjenja sa Formulom (I) mogu da se konvertuju do alternativna jedinjenja sa Formulom (I), koristeći prikladne tehnike za inter-konverziju koje su dobro poznate stručnjaku u području.

Ukoliko pre pomenuti sintetski metodi nisu primenjivi sa ciljem da se dobiju jedinjenja u skladu sa Formulom (I) i/ili potrebni intermedijari za sintezu jedinjenja sa Formulom (I), mogu da se koriste prikladni metodi za preparaciju koji su poznati stručnjaku u području. Opšte uzeto, sintetički putevi za bilo koje pojedinačno jedinjenje sa Formulom (I) će zavisiti o specifičnim supstituentima svakog molekula i o tome dali su potrebni intermedijari lako dostupni; uz to da su ti faktori poznati stručnjacima u području. Za sve metode zaštite i otklanjanja zaštite vidiKocienski, 1994(od pre) iGreene et al, 1999(od pre).

Jedinjenja iz ovoga pronalaska mogu da se izoluju spojene sa molekulima rastvarača uz pomoć kristalizacije preko isparavanja odgovarajućeg rastvarača. Farmaceutski prihvatljive kisele soli jedinjenja sa Formulom (I), koji sadrže bazični centar, mogu da se pripreme na konvencionalan način. Na primer, rastvor slobodne baze može da se tretira sa prikladnom kiselinom, ili čistom ili u odgovarajućem rastvoru, a nastala so može da se izoluje ili uz pomoć filtriranja ili uz pomoć isparavanja reakcionog rastvarača pod vakumom. Farmaceutski prihvatljive bazne soli mogu da se dobiju na analogan način uz pomoć tretmana sa rastvorom jedinjenja sa Formulom (I) sa prikladnom bazom. Oba tipa soli mogu da se formiraju ili inter-konvertuju uz pomoć tehnika izmene-jona.

U sledećim tekstu, ovaj pronalazak će da bude ilustrovan uz pomoć nekih primera, koji ne trebaju da se smatraju kao da ograničavaju okvire samoga pronalaska.

Primeri:

Sledeći komercijalno dostupni startni materijali su korišćeni: 5- aminouracil komercijalno dostupan kod Aldrich;

Dimetil acetilendikarboksilat komercijalno dostupan kod Aldrich; N,N-dietilanilin komercijalno dostupan kod Aldrich;

Fosforni oksihlorid komercijalno dostupan kod Aldrich; N-etildiizopropilamin komercijalno dostupan kod Aldrich;

Amonijum format komercijalno dostupan kod Aldrich;

Litijum aluminijum hidrid komercijalno dostupan kod Aldrich;

Mangan oksid komercijalno dostupan kod Aldrich;

2,4-tiazolidindion komercijalno dostupan kod Aldrich;

Rodanin komercijalno dostupan kod Aldrich;

Beta-alanin komercijalno dostupan kod Aldrich;

4-fluoro-piperidin komercijalno dostupan kod Fluorochem; 4-trifluorometil-piperidin komercijalno dostupan kod Lancaster;

Glioksal (Oksaldehid) komercijalno dostupan kod Aldrich;

Tetrakis (trifenilfosfin) paladijum komercijalno dostupan kod Aldrich; Viniltributilstanan komercijalno dostupan kod Aldrich; 6-jodo-2-pikolin-5-ol komercijalno dostupan kod Acros; (trimetilsilil)acetilen komercijalno dostupan kod Aldrich; Dihlorobi(trifenil fosfin)paladijum(II) komercijalno dostupan kod Aldrich; 1,2 dihloro benzen komercijalno dostupan kod Aldrich; 2-amino-3-nitro-6-hloropiridin komercijalno dostupan kod ACROS; Indijum puder komercijalno dostupan kod Aldrich;

Formamidin acetat komercijalno dostupan kod Aldrich;

Tributil(vinil)tin komercijalno dostupan kod Aldrich;

Osmijum tetroksid komercijalno dostupan kod Aldrich;

Natrijum perjodat komercijalno dostupan kod Aldrich;

2,6-Dihloro-3-nitropiridin komercijalno dostupan kod Aldrich;

3,5-Dimetoksianilin komercijalno dostupan kod Aldrich;

5- Nitroindolin komercijalno dostupan kod Aldrich;

6- Nitroindolin komercijalno dostupan kod Aldrich;

Hidrohlorid 4-(Dimetilamino)butirične kiseline komercijalno dostupan kod Aldrich; 3-Hloropropansulfonil hlorid komercijalno dostupan kod Aldrich;

Hlorometansulfonil hlorid komercijalno dostupan kod Alfa Aesar.

HPLC, NMR i MS podaci koji su prikazani u primerima ispod su dobiveni kako sledi: HPLC: kolona Waters Symmetry C8 50 x 4.6 mm, Uslovi: MeCN/H20, 5 do 100% (8 min), maksimalni plot 230-400 nm; Maseni spektar: PE-SCIEX API 150 EX (APCI i ESI), LC/MS spektar: Waters ZMD (ES);<!>H-NMR: Bruker DPX-300MHz.

Purifikacije preko preparativne HPLC su provedene sa HPLC Waters Prep LC 4000 System koji je bio opremljen sa kolonama Prep Nova-Pak<®>HR Cl 86\ xm60A, 40x30 mm (do najviše 100 mg) ili sa XTerra<®>Prep MS C8, 10 um, 50x300 mm (do najviše 1 g). Sve purifikacije su provedene sa gradijentom od MeCN/HjO 0.09% TFA. Polu-preparativne HPLC povratnih faza su provedene na Biotage Parallex Flex System koji je bio opremljen sa kolonama Supelcosil™ ABZ+Plus (25 cm x 21.2 mm, 12 um); UV detekcija kod 254 nm i 220 nm; protok 20 mL/min (do najviše 50 mg). TLC analiza je provedena na Merck Precoated 60 F254pločicama. Purifikacije uz pomoć fleš hromatografije su provedene na Si02potpori, koristeći cikloheksan/EtOAc ili DCM/MeOH mešavine kao eluente.

Intermedijar 1. 1; Dimetil ( 2E)- 2-[( 2, 4- diokso- l, 2, 3, 4- tetrahidro- 5- pirimidinil) aminol- 2-butendioat (Sema 7)

U suspenziju 5-aminouracila (B) (4.0 g; 31.5 mmol; 1 ekv.) u McOH (120.00 mL) je dodan dimetil acetilendikarboksilat (C) (5.0 g; 35.2 mmol; 1.1 ekv.). Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 46 h. Reakcija je praćena uz pomoć NMR. Kruta materija je filtrirana sa ciljem da se dobije dimetil (2E)-2-[(2,4-diokso-l,2,3,4-tetrahidro-5-pirimidinil)amino]-2-butendioat (8.0 g, 95%) (Intermedijar 1.1).

Količina: 8.0 g; Prinos: 95%; Formula: CioHn06N3; HPLC Čistoća: 95%; HPLC ( HzO TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 1.37; 93.61; ' H NMR ( DMSO- d*) 6 3.64 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 5.21 (s, IH), 7.42 (s, IH), 9.07 (s, IH), 10.86 (br, IH), 11.31 (br, IH); LCMS: M/ Z ESI: St (min) 0.85; 210, 238, 270 (M+l); 208, 236, 268 (M-l).

Intermedijar 1. 2; Metil 2, 4, 8- triokso- l, 2, 3, 4, 5, 8- heksahidropiridol[ 3, 2- dllpirimidin- 6-

karboksilat (Šema 7)

U bocu sa četiri vrata od dva litra na kojoj je bio namešten kondenzer, stavljen je dimetil (2E)-2-[(2,4-diokso-l,2,3,4-tetrahidro-5-pirimidinil)amino]-2-butendioat (Intermedijar 1.1)

(38.5 g; 0.14 mol; 1 ekv.) douterm(R) A (1 L) (fenil etar-bifenil eutektik). Suspenzija je bila mešana sa mehaničkom mešalicom pod argonom i grejana do 220° C. Reakcija je praćena uz pomoć HPLC/LC/MS. Nakon 3 časa, reakcija je zaustavljena uz pomoć hlađenja, a nakon toga uz pomoć dodavanja 300 mL petroleum etara. Nastao precipitat je filtriran i opran sa DMF (2x100 mL). Metil 2,4,8-triokso-l,2,3,4,5,8 heksahidropirido[3,2-d]pirimidin-6-karboksilat (21.02 g; 62%) (Intermedijar 1.2) je izolovan u formi žutog pudera sa 100% HPLC čistoćom.

Količina: 21.0 g; Prinos: 62 %; Formula: C9H7O5N3; ' H NMR ( DMSO- dft) 5 3.87 (s, 3H), 7.58 (s, IH), 10.90 (s, IH), 11.56 (s, IH), 12.10 (br, IH).

Intermedijar 1. 3; Metil 2, 4, 8- trihloropirido[ 3, 2- d1pirimidin- 6- karboksilat (Sema 7) Rastvor metil 2,4,8-triokso-l ,2,3,4,5,8-heksahidropirido[3,2-d]pirimidin-6-karboksilat (Intermedijar 1.2) (9 g; 37.95 mmol; 1 ekv.) i N,N-dietilanilin (10 mL) u fosfornom oksihloridu (174 mL) je grejan kod refluksa tokom noći. Rastvor je koncentrisan pod vakumom. Crno ulje je polako izliveno na led. Dodan je etil acetat, a organska faza je oprana sa vodom do postizanja pH=6. Organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani. Metil 2,4,8-trihloropirido[3,2-d]pirimidin-6-karboksilat (Intermedijar 1.3) (6.5 g, 59%) je precipitovan u cikloheksanu kao ljubičasta kruta materija sa 98% HPLC čistoćom. Količina: 6.5 g; Prinos: 59 %; Formula: C9H4O2CI3N3; ' H NMR (CDCI3]8 4.12 (s, 3H), 8.70 (s, IH); HPLC ( H7 Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 3.07; 98; LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 1.58 ; 293 (M+l).

Intermedijar1. 4: Metil 2, 8- dihloro- 4-( l- piperidinil) pirido[ 3, 2- dlpirimidin- 6- karboksilat

(Šema 8)

U rastvor metil 2,4,8-trihloropirido[3,2-d]pirimidin-6-karboksilata (4.65 g; 15.9 mmol; 1 ekv.)

(Intermedijar 1.3) u acetonitrilu (140 mL) je dodan N-etildiizopropil amin (4 mL; 23.8 mmol; 1.5 ekv.). Mešavina je ohlađena do 0° C. Rastvor piperidina (1.57 mL; 15.9 mmol; 1 ekv.) u acetonitrilu (20 mL) je dodan kap po kap. Mešavina je mešana 15 min na 0° C. Mešavina je delomično koncentrisana, a precipitat je filtriran, opran sa MeOH i osušen pod vakumom sa ciljem da se dobije metil 2,8-dihloro-4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-karboksilat (Intermedijar 1.4) (3.98 g; 73%) u formi ljubičaste krute materije sa 98.8% HPLC čistoćom; Količina: 3.98 g; Prinos: 73%; Formula: CuH^ChN^ ' H NMR IDMSO- dg) 6 1.71 (si, 6H), 3.92 (s, 3H), 4.01 (si, 2H), 4.82 (si, 2H), 8.42 (s, IH); LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 2.02; 341.02, 342.89 (M+l); HPLC ( H? Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 4.27; 98.84.

Intermedijar 1. 5: Metil 4-( l- piperidiniDpirido[ 3, 2- djpirimidin- 6- karboksilat (Sema 8) U bocu sa okruglim dnom su dodani paladijum (540 mg; 0.51 mmol; 0.05 ekv.) i izopropanol (90 mL). Ar je propuštan kroz ovu mešavinu u formi mehurića. Dodan je degazirani rastvor amonijum formata u vodi (2.56 g, 40.6 mmol, 4 ekv., u 4 mL vode), a nakon toga je dodan metil 2,8-dihloro-4(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-karboksilat (Intermedijar 1.4)

(3.46 g; 10.5 mmol; 1 ekv.) i degazirani izopropanol (10 mL). Nakon 30 min, dodana je druga šarža amonijum formata kao rastvor u vodi (2.56 g, 40.6 mmol, 4 ekv., u 4 mL vode). Konačno, nakon dodatnih 30 min, dodano je dodatnih 8 ekvivalenata amonijum formata u vodi (5.12 g, 81.2 mmol, 8 ekv., u 8 mL vode). Mešavina je tada mešana na st tokom noći pa je filtrirana kroz celit. Filtrat je isparen. Grubi produkt je rastvoren u DCM i opran sa vodom i slanim rastvorom. Organske faze su osušene preko magnezijum sulfata, filtrirane i isparene sa ciljem da se dobije metil 4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-karboksilat (2.29 g; 83%)

(Intermedijar 1.5) u formi žute krute materije sa 92.9% HPLC čistoćom. Ovaj produkt je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog pročišćavanja.

Količina: 2.29 g; Prinos: 82 %; Formula: C,4H|602N4; ' HNMR ( DMSO- dft) 5 1.70 (si, 6H), 3.92 (s, 3H), 4.42 (si, 4H), 8.19 (d, J = 9 Hz, IH), 8.30 (d, J = 9 Hz, IH), 8.52 (s, IH); HPLC (H2 Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 1.83; 92.88; LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 1.58; 273.10 (M+l).

Intermedijar1. 6: I4:( l- piperidinil) pirido[ 3, 2- dlpirimidin- 6- il1metanol (SVema 6)

Metil 4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-karboksilat (Intermedijar 1.5) (4.4 g; 16.2 mmol; 1 ekv.) je rastvoren u THF (176 mL), a rastvor je ohlađen do 35° C (interna temperatura). Litijum alumijnum-hidrid (8.1 mL; 1.00 M; 8.1 mmol; 0.50 ekv.) je dodan kap po kap. Nakon 2 h i 30 min na -35° C, reakcija je kompletovana. Dodana je voda (8.1 mL), a temperatura je ostavljena sa se podigne do st. Nakon dodavanja MeOH (8 mL), mešavina je filtrirana kroz Celit i dobro oprana sa mešavinom DCM/MeOH 1:1. Rastvarači su odstranjeni pod smanjenim pritiskom sa ciljem da se dobije [4-(l-piperidiniI)pirido[3,2-d]pirimidin-6-iljmetanol (Intermedijar 1.6) (3.99 g; kvantitativni prinos) sa 92.9% HPLC čistoćom. Ovaj produkt je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog pročišćavanja. Količina: 3.99 g; Prinos: 100%; Formula: Ci3Hi6ON4; * H NMR ( DMSO- d^) 5 1.64 (m, 6H), 4.32 (si, 4H), 4.66 (s, 2H), 7.86 (d, J =9 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 9 Hz, IH), 8.44 (s, IH); LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 1.24; 245.08 (M+l); HPLC ( H?Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 1.39; 92.88.

Intermedijar 1. 7: 4-( l- piperidinil) pirido[ 3, 2- d] pirimidin- 6- karbaldehid (Šema 6)

[4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metanol (Intermedijar 1.6) (3.95 g; 16.2 mmol; 1.00 ekv.) je rastvoren u DCM (160 mL). Rastvor je ohlađen do 0° C pa je dodan mangan oksid (16.5 g; 0.162 mol; 10 ekv.). Reakcija je mešana 5 min na 0° C, a tada tokom noći na st. Sa ciljem da se kompletuje konvertovanje, dodan je Mn02nakon 12 časova i ponovo nakon 20 časova (dve šarše od po 4.96 g; 48.48 mmol; 3 ekv.). Nakon 20 časova, reakcija je kompletovana. Dodan je MeOH (100 mL), a mešavina je filtrirana kroz Celit i dobro oprana sa mešavinom DCM/MeOH 1:1. Rastvarači su odstranjeni pod smanjenim pritiskom sa ciljem da se dobije 4-(l-piperidnil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid (Intermedijar 1.7). Ovaj produkt je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog pročišćavanja. Količina: 4.1 g; Formula: C13Hi4ON4; HPLC Čistoća: 58.84%; LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 1.53; 243.06 (M+l); HPLC H2Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % - 1.39; 58.84. 'H NMR (DMSO-d6) 8 9.95 (s, IH), 8.52 (s, IH), 8.16 (m, 2H), 4.46 (1, 4H), 1.70 (1, 6H).

Intermedijar 2. 1: 4-( 4- fluoro- piperidin- l- il)- piridof3, 2- d| pirimidin- 6- karbaldehid (Seme 6 i 8)

Jedinjenje iz naslova je dobiveno koristeći 4-fluoro-piperidin uz pomoć opšte procedure koja je opisana kod sinteze intermedijara 1.7 (Šeme 5 i 7). Količina: 4.15 g; Formula: Ci3H,3FON4; HPLC Čistoća: 89.16%; LC- MS: M/ Z ESI: St (10 min) 2.26; 261.08 (M+l);

HPLC ( H20 TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 1.19; 89.16; 'H NMR (DMSO-d6) 8 10.01 (s, IH), 8.60 (s, IH), 8.23 (m, 2H), 5.00 (m, IH), 4.51 (1, 4H), 1.91

(MH).

Intermedijar 3. 1: 4-( 4-( trifluorometin- piperidin- l- il)- pirido[ 3, 2- dlpirimidin- 6-

karbaldehid(Šeme6i 8)

Jedinjenje iz naslova je dobiveno preko 4-trifluorometil-piperidina uz pomoć opšte procedure koja je opisana kod sintezeintermedijara 1.7(Šeme 5 i 7). Količina: 4.8 g; Formula: C14H0OF3N4; HPLC Čistoća: 67.12%; LC- MS: M/ Z ESI: St (3 min) 1.75; 311.04 (M+l); HPLC ( H7O TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 1.89; 67.12; 'H NMR (DMSO-d6) 5 10.03 (s, IH), 8.62 (s, IH), 8.18 (s, 2H), 3.22 (1, 2H), 2.48 (m, 2H), 2.08 (d, 2H), 1.80 (m,3H).

Intermedijar 4. 1: 6- Hloro- piridin- 2, 3- diamin(Šema10)

2-amino-3-nitro-6-hloropiridin (3 g, 17.3 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u TUF (50 mL) na st. Polako je dodan je tin hlorid dihidrat (15.6 g, 70 mmol, 4 ekv.) prethodno rastvoren u HC1CC(5 mL), a reakciona mešavina je mešana na st tokom 4 časa. Kada je reakcija gotova, reakciona mešavina je ohlađena do 0° C i tretirana sa 5M natrijum hidroksidom (12 mL) do postizanja pH 14, a odgovarajuće jedinjenje je ekstrahovano sa etil acetatom. Organske faze su osušene sa magnezijum sulfatom, isparene pod vakumom, a nastao grubi materijal je purifikovan uz pomoć fleš hromatografije koristeći cikloheksan/etil acetat (1/1) sa ciljem da se dobije 1.5 g crvenog ulja(Intermedijar 4.1).Količina: 1.5 g; Prinos: 60 %; Formula: CsH6N3CI; HPLC Čistoća: 98%; HPLC ( H2Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 0.5 min; 98%; ' HNMR ( DMSO- d.) 8 6.67 (d, IH, H5, J=8Hz), 6.36 (d, IH, H4, J= 8Hz), 5.78 (m, 2H, NH2), 4.75 (m, 2H, NH2); LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 0.1 min, 144.0 (M+l).

Intermedijar 4. 2: 6- Hloro- piridof213- blpirazin(Šema10)

6-hloro-2,3-piridindiamin(Intermedijar 4.1)(1 g, 6.96 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u THF (15 mL). Dodan je glioksal (0.84 mL, 18.1 mmol, 2.5 ekv.), a reakciona mešavina je mešana na st tokom 2 časa. Reakcija je praćena uz pomoć RP-HPLC. THF je isparen, a ostatak je ponovo rastvoren u etil acetatu (30 mL). Organske faze su oprane dva puta sa zasićenim Na2C03,

osušene sa magnezijum sulfatom i isparene pod vakumom sa ciljem da se dobije 1.15 g željenog jedinjenja u formi bele krute materije (Intermedijar 4.2). Količina: 1.15 g; Prinos: 100 %; Formula: C7H4N3C1; HPLC Čistoća: 98%; HPLC ( H?Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % - 1.2 min; 98%; ' H NMR ( CDC10 5 9.0 (s, IH), 8.88 (s, IH), 8.36 (d, IH, J=8Hz), 7.67 (d, IH, J= 8Hz); LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 0.68 min, 167.0 (M+l).

Intermedijar 4. 3: 6- Vinil- pirido[ 2, 3- blpirazin (Šema 10)

6-hloropirido[2,3-b]pirazin (Intermedijar 4.2) (3 g, 18.12 mmol, 1.00 ekv.) je rastvoren u THF (150mL) pa je degaziran sa azotom na st tokom 10 min. Dodani su tetrakis (trifenilfosfin) paladijum(O) (1.46 g, 1.27 mmol, 0.07 ekv.) i viniltributilstanan (7.47 mL, 23.5 mmol, 1.3 ekv.), a reakciona mešavina je mešana na 65° C tokom 3 časa. THF je isparen, a grubi materijal je purifikovan direktno uz pomoć fleš hromatografije koristeći cikloheksan/etil acetat (8/2) sa ciljem da se dobije 2.3 g očekivanog jedinjenja (Intermedijar 4.3) u formi ulja boje pomorandže. Količina: 2.3 g; Prinos: 81%; Formula: C9H7N3; HPLC Čistoća: 98%; HPLC ( H2Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 1.32 min; 98%; ' H NMR ( DMSO- dć) 8 9.10 (s, IH), 8.98 (s, IH), 8.46 (d, IH, J=8Hz), 7.95 (d, IH, J= 8Hz), 6.90 (dd, IH, Jtrans=17Hz, Jcis<=>10Hz), 6.50 (dd, IH, Jtrans<=>17Hz, Jgem<=>1.5Hz), 5.80 (dd, IH, Jcis<=>10Hz, Jgem=1.5Hz). LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 0.78 min, 158.13 (M+l).

Intermedijar 4. 4: Piridof2, 3- blpirazin- 6- karbaldehid (Šema 9)

6-vinilpirido[2,3-b]pirazin (Intermedijar 4.3) (1 g, 6.37 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u metanolu (20 mL) i ohlađen do -70° C. Lagani protok mešavine kiseonika/ozona je tada proveden kroz mešavinu u formi mehurića tokom 20 min. Reakcija je praćena sa TLC koristeći cikloheksan/etil acetat (8/2). Kada je reakcija bila gotova, dodan je dimetilsulfid (0.1 mL), a reakcija je ostavljena sa st tokom 30 min. Metanol je isparen pod vakumom pa je dobiveno 600 mg pirido[2,3-b]pirazin-6-karbaldehida. Grubi materijal je analiziran bez dodatne purifikacije (Intermedijar 4.4). Količina: 0.60 g; Prinos: 60 %; Formula: CgHjNsO; HPLC Čistoća: 90%; HPLC ( HzO TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 0.90 min; 90%; ' H NMR ( DMSO- cU) 5 10.1 (1, IH), 9.05 (s, IH), 8.95 (s, IH), 8.70 (d, IH, J=8Hz), 8.20 (d, IH, J= 8Hz); LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 0.76 min, 158.13 (M+l).

Intermedijar 5. 1: 5- Metil- 2- trimetilsilanil- furo[ 3, 2- blpiridin (Šema 11)

U degazirani rastvor 6-jodo-2-pikolin-5-ola (855 mg; 3.64 mmol; 1.00 ekv.) u trietilaminu (20.00 mL) dodani su (trimetilsilil)acetilen (1 g; 10.19 mmol; 2.80 ekv.), bakar jodid (90.07 mg; 0.47 mmol; 0.13 ekv.) i dihlorobi(trifenil fosfin) paladijum(II) (229.82 mg; 0.33 mmol; 0.09 ekv.). Rastvor je grejan pod refiuksom. Nakon 3 h, reakcija je kompletna pa je ostavljena da se ohladi do st. Rastvor je filtriran preko celita (opran sa AcOEt i MeOH). Rastvarači su odstranjeni. AcOEt i voda su dodani, a spojeni organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani sa ciljem da se dobije očekivano jedinjenje. Grubi materijal je purifikovan uz pomoć kratke fleš hromatografije koristeći cikloheksan, a tada AcOEt/Cikloheksan 20/80 sa ciljem da se dobije 603 mg željenog jedinjenja u formi krute materije (Intermedijar 5.1). Količina: 603 mg; Prinos: 81 %; Formula: CnH^NOSi; HPLC Čistoća: 93.14%; HPLC ( H20 TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 2.17 min; 93.14%; ' H NMR ( CDCIO5 7.65 (d, IH, J=8.5Hz), 7.10 (s, IH), 7.06 (d, IH, J=8.5Hz), 2.67 (s, 3H), 0.36 (s, 9H); LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 1.89 min, 206.06 (M+l).

Intermedijar 5. 2: 2- TrimetilsilaniI- furof3, 2- b1piridin- 5- karbaIdehid (Sema 11)

U rastvor 5-metil-2-(trimetilsilil)furo[3,2-b]piridina (Intermedijar 5.1) (600 mg; 2.92 mmol;

1 ekv.) u 1,2-dihlorobenzena (12 mL) je dodan selenijum dioksid (486 10 mg; 4,38 mmol; 1.5 ekv.). Reakciona mešavina je grejana sa mikro-talasima na 220° C tokom 6 h. Rastvor je koncentrisan pod vakumom. Dodan je Et20, a crna kruta materija filtrirana. Filtrat je koncentrisan i purifikovan uz pomoć fleš hromatografije koristeći cikloheksan, a tada cikloheksan/AcOEt 90/10 Šta dovodi do pojave krute materije (Intermedijar 5.2). Količina: 130 mg; Prinos: 20%; Formula: C,,H|3N02Si; HPLC Čistoća: 81.8%; HPLC ( H?Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : St (min); Areal % = 3.84 min; 81.83%; ' H NMR ( CDC10 5 10.19 (s, IH), 7.99 (d, IH, J=8.50Hz), 7.89 (d, IH, J=8.50Hz), 7.27 (s, IH), 0.40 (s, 9H); LC- MS: M/ Z ESI: St (min) 1.86 min, 220 (M+1).

Opšte procedure za sintezu intermedijara 6 do 16. 3:

Opšta procedura I za supstituciju intermedijara P5d sa R<2>NH2(Šema 12):

Rastvor 2,6-dibromo-3-nitropiridina (Intermedijar 6 sa formulom P5d gde Hal je Br, a R<1>je H) (1 ekv.), arilamina (1.0-12 ekv.) i trietilamina (2 ekv.) u etanolu (5 mL/mmol) je mešan tokom 48 h na ambijentalnoj temperaturi. Filtracija nastalog precipitata dovodi do potrebnog produkta supstitucije sa visokom čistoćom.

Opšta procedura II za redukovanje ( Šema 12) :

Mešavina bromopiridina (1 ekv.), indijum pudera (3-6 ekv.), zasićenog vodenog amonijum hlorida (8 ml/mmol) i etanola (20 ml/mmol) je mešana pod refluksom tokom 4 h. Filtracija kroz Celite<®>i koncentrisanje filtratain vacuoprodužuje u bazičnu ekstrakciju. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrisanin vacuo.Nastao odgovarajući diaminopiridin se koristi u sledećem koraku bez dodatnog purifikovanja.

Opšta proceduraIIIza ciklizovanje ( Šema 12) :

Mešavina diaminopiridina (1 ekv.), formamidin acetata (3-5 ekv.) i 2-metoksietanola (30 ml/mmol) je mešana pod refluksom tokom 15 h. Mešavina je koncentrisanain vacuopa je hromatografski purifikovana (EtOAc/heksan gradijent) sa ciljem da se dobije odgovarajući bromoimidazo[4,5-&]piridin.

Opšta procedura IV za spajanje ( Šema 12) :

Rastvor bromoimidazo[4,5-6]piridina (1 ekv.), tributil(vinil)tina (1.5-3 ekv.) i tetrakis(trifenilofsfin)paladijum(0) (0.1 ekv.) u toluenu (deoksigenovan sa N2, 20 ml/mmol ml) je mešan pod refluksom tokom 4 h. Koncentrisanjein vacuoi hromatografsko purifikovanje (EtOAc/heksan gradijent) dovodi do odgovarajućeg vinilimidazo[4,5-6]piridina.

Opšta procedura V za oksidaciju intermedijara 4 ( Šema 13) :

Mešavina vinilimidazo[4,5-6]piridina (1 ekv.), osmijum tetroksida (0.1 ekv.), natrijum perjodata (3-4 ekv.), 1,4-dioksana (30 ml/mmol) i vode (25 ml/mmol) je mešana tokom 15-30 min na ambijentalnoj temperaturi. Nastao gusti rastvor je razređen sa jednakim količinama vode i etil acetata. Nakon filtracije kroz Celite<®>, organska faza je osušena preko natrijum sulfata, koncentrisanain vacuoi purifikovana uz pomoć fleš hromatografije sa ciljem da se dobije odgovarajući formilimidazo[4,5-6]piridin.

Intermedijar 6: 2, 6- dibromo- 3- nitropiridin( Sema12)

Mešavina komercijalno dostupnog 2,6-dihloro-3-nitropiridina (10.0 g; 51.8 mmol) i 33 w% HBr/AcOH (120 mL) je grejana na 80° C tokom 3 h. Rastvor je koncentrisanin vacuo,a nastao ostatak je rastvoren u EtOAc i opran sa vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organska faza je osušena preko natrijum sulfata i koncentrisanain vacuo.Nastao produkt, 14.4 g (99%), je korišćen bez dodatnog purifikovanja(Intermedijar6). GC/MS: 94% čistoća, tR7.56 min (tR(SM) 6.93 min),m/ z(C5H2Br2N2) 280/282/284 (M, 38), 222/224/226 (35), 76(100) Finegan LCQ.

Intermedijar 7. 1: 6- bromo- 3- nitro- 2- feniIaminopiridin ( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija preko 2,6-dibromo-3-nitropiridina(Intermedijar6) i anilina sa 95% prinosom preko opšte procedure I(Intermedijar7.1). GC/MS: 99% čistoća, tR9.28 min (tR(SM: nitropiridin) 7.62 min),m/ z293/295 (M, 12), 168 (25), 140 (25), 77 15 (100) Finegan

LCQ.

Intermedijar 7. 2: 6- Bromo-./ V2- fenilpiridin- 2, 3- diamin ( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 7vr-(5-bromo-2-nitrofenil)-A^-fenilamina(Intermedijar 7.1)

(97%) preko opšte procedure II. GC/MS: 99% čistoća, tR9.69 min (tR(SM) 9.27 min),m/ z263/265 (M, 45),183 (19),104 (18), 92 (23), 77 (42) Finegan LCQ.

Intermedijar 7. 3:5- Bromo- 3- fenil- 3/ f- imidazo[ 4, 5- 61 piridin( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 6-Bromo-N<2->fenilpiridin-2,3-diamina(Intermedijar7.2) sa 71% prinosom preko opšte procedure III. GC/MS: 99% čistoća, tR9.23 min (tR(SM) 9.72 min),m/ z273/275 (M, 55), 194 (36), 167 (30), 77 (100) Finegan LCQ.

Intermedijar 7. 4: 3- Fenil- 5- vinil- 3//- imidazo[ 4, 5- 61 piridin ( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 5-bromo-3-fenil-3//-imidazo[4,5-6]piridina(Intermedijar7.3) sa 92% prinosom preko opšte procedure IV. GC/MS: 97% čistoća, tR8.94 min (tR(SM) 9.23 min),m/ z221 (M, 100), 77 (58) Finegan LCQ.

Intermedijar 7. 5: 3- Fenil- 3/ f- imidazo[ 4. 5- 61piridin- 5- karbaIdehid ( Šema 13)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-fenil-5-vinil-3//-imidazo[4,5-6]piridina(Intermedijar 7.4)sa 36% prinosom preko opšte procedure V. GC/MS: 97% čistoća, tR9.20 min (tR(sM) 9.04 min),m/ z223 (M, 55), 195 (63), 77 (100) Finegan LCQ.

Intermedijar 8. 1: 6- Bromo- 3- nitro- 2-( 3, 5- dimetoksifenil) aminopiridin ( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz komercijalno dostupnih 2,6-dibromo-3-nitropiridina i 3,5-dimetoksianilina sa 85% prinosom preko opšte procedure I. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 98% čistoća, tR10.12 min (tR(SM:nitropiridin) 7.98 min). GC/MS: 99% čistoća, tR10.88 min (tR(SM: miropindin) 7.50 min),m/ z253/255 (M, 100), 228 (72), 122 (41), 77 (53) Finegan LCQ. 'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 10.04 (s, IH), 10 8.42 (d, IH), 7.19 (d, IH), 6.94 (5, 2H), 6.33 (5, IH), 3.76 (s. 6H) ppm.

Intermedijar 8. 2; 6- Bromo- Ar2-( 3, 5- dimetoksifeniI) piridin- 2, 3- diamin( Šema12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz iV-(5-Bromo-2-nitrofenil)-A^-(3,5-dimetoksifenil) amina(Intermedijar 8.1)sa 93% prinosom koristeći opštu proceduru II. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 96% čistoća, tR8.38 min (tR(SM) 10.12 min). GC/MS: 97% čistoća, tR11.47 min (tR(SM) 10.15 min),mlz323/325 (M, 100), 310/308 (33), 292/294 (39) Finegan LCQ.

Intermedijar 8. 3:5- Bromo- 3-( 3, 5- dimetoksifenil)- 3//- imidazo[ 4. 5- Z>] piridin ( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 6-Bromo-N<2->(3,5-dimetoksifenil)piridin-2,3-diamina (Intermedijar 8.2) sa 43% prinosom preko opšte procedure III. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 98% čistoća, tR8.51 min (tR(SM) 8.40 min). GC/MS: 98% čistoća, tR10.56 min (tR(SM) 11 -47 min),m/ z333/335 (M, 79), 207 (100) Finengan LCQ.

Intermedijar 8. 4: 3-( 3. 5- Dimetoksifenil)- 5- vinil- 3//- imidazo [ 4. 5- 61 piridin ( SV ema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 5-bromo-3-(3,5-dimetoksifenil)-3//-imidazo[4,5-6]-piridina(Intermedijar8.3) sa 57% prinosom preko opšte procedure IV. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR8.39 min (tR(SM) 8.51 min). GC/MS: 99% čistoća, tR10.36 min (tR(SM) 10.56 min),m/ z281 (M, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 8. 5: 3-(. 5- Dimetoksifenil)- 3//- imidazo[ 4. 5- 61piridin- 5- karbaldehid ( Šema

13}

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-(3,5-dimetoksifenil)-5-vinil-3//-imidazo[4,5-6]-piridina(Intermedijar 8.4)sa 56%> čistoćom preko opšte procedure V. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 98% čistoća, tR7.26 min (tR(SM) 8.39 min). GC/MS: 99% čistoća, tR10.32 min (tR(SM) 10.36 min),m/ z283 (M, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 9. 1: 7>r^- butil- 5-[( 6- bromo- 3- nitro- piridin- 2- il) aminolindolin- l-v

karboksilat ( Sema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 2,6-dibromo-3-nitropiridina itert- bui\\5-aminoindolin-l-karboksilata (dobiven iz komercijalno dostupnog 5-nitroindolina preko jV-Boc zaštite i subsekventne redukcije nitro grupe sa H2/Pd/C u MeOH/EtOAc) sa 97% prinosom preko opšte procedure I. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/0.1 % TFA/H20): 99% čistoća, tR10.35min(tR(SM:nitropiridin) 6.79 min). 'H-NMR (400 MHz, CDC13): 5 10.16 (s, IH), 8.31 (d, IH), 7.86 (br s, 0.4H), 7.49 (s, IH), 7.45 (br s, 0.6H), 7.31 (d, IH), 6.92 (d, IH), 4.03 (br t, 2H), 3.14 (t, 2H), 1.56 (s, 9H) ppm. MS (ESI)mlz(CgHi^BrN^ 435.2/437.1 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 9. 2: Tert- butil 5-[ l( 3- amino- 6- bromopiridin- 2- il) amino1indolin- l-karboksilat ( Sv ema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iztert-butil5-[(5-bromo-2-nitrofenil)amino]indolin-l-karboksilata(Intermedijar 9.1)sa 96% prinosom preko opšte procedure II. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 98% čistoća, tR9.86 min (tR(sM>11.66 min). MS(ESI)m/ z(C,8H2iBrN402) 405.1/407.0 (M+l. 100), 349.1/351.1 (82) Finengan LCQ.

Intermedijar 9. 3:7er/- butil5-( 5- bromo- 3/ f- imidazo [ 4, 5- 6] piridin- 3- il) indolin- l-karboksilat ( Sema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iztert- b\ xt\\5-[(3-amino-6-bromopiridin-2-il)amino]indolin-l-karboksilata(Intermedijar 9.2)sa 91% prinosom preko opšte procedure III. HPLC (tokom lOmin 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 97% čistoća, tR10.08 min (tR(SM) 9.85 min). MS (ESI)m/ z(Ci9H19BrN402) 415.0/416.9 (M+l, 91), 359.1/361.0 (100), 315.1/317.2 (51) Finengan LCQ.

Intermedijar 9. 4: Jert- butil 5-( 5- vinil- 3i/- imidazo[ 4, 5- 61piridin- 3- il) indolin- l-karboksilat ( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iztert-butil5-(5-bromo-3#-imidazo[4,5-fr]piridin-3-il)indolin-1-karboksilata(Intermedijar9.3) sa 94% prinosom preko opšte procedure IV. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/0.1 % TFA/H20): 96% čistoća, tR7.21 min (tR(SM) 8.51 min). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.21 (s, IH), 8.04 (d, IH), 7.98 (br s, 0.5H), 7.56 (s, IH), 7.55 (br s, 0.5H), 7.48 (d, IH), 7.35 (d, IH), 6.89 (dd, IH), 6.19 (d, IH), 5.42 (d, IH), 4.05 (t, 2H), 3.18 (t, 2H), 1.55 (s, 9H) ppm.

Intermedijar 9. 5:Tert - butil5-( 5- formil- 3//- imidazo[ 4, 5- Z>| piridin- 3- iI) indolin- l-v

karboksilat ( Sema 13)

Jedinjenje iz naslova se dobija iztert- bnii\5-(5-vinil-3/ir-imidazo[4,5-&]piridin-3-il)indolin-l-karboksilata(Intermedijar 9.4)sa 69% prinosom preko opšte procedure V. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/0.1 % TFA/H20): 96% čistoća, tR7.31 min (tR(SM) 7.21 min).

Intermedijar 10. 1: 3-.( 2<3- dihidro- l^- indol- 5- il)- 5- vinil- 3//- imidazof4, 5- 61piridin ( Šema

12}

Mešavina fe/7-butil 5-(5-vinil-3//-imidazo[4.5-/7]piridin-3-il)indolin-l -karboksilata(Intermedijar 9.4)(9.50 g, 26.21 mmol) (intermedijar 9.4), 4 M HC1 u 1,4-dioksanu (200 ml), 2-propanola (30 ml) i dioksana (50 ml) je mešana tokom 1.5 h na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je koncentrisana do suvoće sa ciljem da se dobije 9.50 g (98% prinos) trihidrohloridne soli odgovarajućeg slobodnog amina. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni 20 NaOAc): 99% čistoća, tR6.64 min (tR(SM) 10.06 min). 'H-NMR (400 MHz, metanol-d4) 5 9.97 (s, IH), 8.34 (d, IH), 8.12 (d, IH), 8.04 (d, IH), 7.85 (d, IH), 7.82 (d, IH), 7.63 (m, IH), 7.54 (m, IH), 6.98 (dd, IH), 6.37 (d, IH), 5.63 (d, IH), 4.02 (t, 2H), 3.52 (t, 2R) ppm. MS (ESI)m/ z(Ci6H,4N4) 263.2 (M+l, 100), 219.2 (32) Finengan

LCQ.

Intermedijar 10. 2: 3-( l- acetil- 23- dihidro- l/^- indol- 5- il)- 5- vinH- 3//- imidazo[ 4. 5- 61piridin

( Šema 12)

Mešavina 3-(2,3-dihidro-1 //-indol-5-il)-5-vinil-3//-imidazo[4,5-6]piridina(Intermedijar 10.1)(150.0 mg, 0.57 mmol), glacijalne sirćetne kiseline (39.3 ul, 0.69 mmol),N- e\\ l- N'-{ 3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorida (175.4 mg, 0.91 mmol), 4-dimetilaminopiridina (419.2 mg, 3.43 mmol) i dihlorometana (10 ml) je mešana tokom 24 h na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je uspešno ekstrahovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom i zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrisanin vacuosa ciljem da se dobije 139.1 mg (80%) traženog amida. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc); 99% čistoća, tR6.43 min (tR(SM) 6.64 min). GC/MS: 96% čistoća, tR13.98 min,m/ z304 (M, 58), 262 (100), 207 (62) Finengan LCQ.

Intermedijar 10. 3: 3-( l- acetil- 2, 3- dihidro- l//- indol- 5- il)- 3Jy- imidazof4, 5- 61piridin- 5-

karbaldehid ( Šema 13)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz l-(l-acetil-2,3-dihidro-l//-indol-5-il)-5-vinil-3//- imidazo[4,5-6]piridina(Intermedijar 10.2)sa 44% prinosom preko opšte procedure V. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 95% čistoća, tR5.38 min (tR(SM) 6.43 min). GC/MS: tR14.98 min (tR(SM) 13.98 min),m/ z306 (M, 60), 264 (100) Finengan LCQ.

Intermedijar 11. 1: A^^- dimetil- Ar-{ 4- okso- 4-[ 5-( 5- vinil- 3/ f- imidazo[ 4, S- 61piridin- 3- iI)-2, 3- dihidro- l//- indol- l- illbutiUamin ( Šema 12)

Mešavina 3-(2,3-dihidro-l//-indol-5-il)-5-vinil-3//-imidazo[4,5-6]piridina (48.0 mg, 0.14 mmol)(Intermedijar 10.1),hidrohlorida 4-(dimetilamino)butiričke kiseline (36.3 mg, 0.21 mmol), hidrohlorida Af-etil-A^3-dimetilaminopropil)karbodiimida (54.9 mg, 0.29 mmol), 4-dimetilaminopiridina (122.5 mg, 1.00 mmol) i dihlorometana (8 ml) je mešana tokom 24 h na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je uspešno ekstrahovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom i zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrisanin vacuosa ciljem da se dobije 50.4 mg (94%) odgovarajućeg amida. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 92% čistoća, tR6.27 min (tR(SM) 6.61 min).

Intermedijar 11. 2: 3-( l- f4-( dimetilaniino) butanoil]- 2, 3- dihidro- l/ r- indol- 5- il)- 3Jy-

imidazo[ 4, 5- 61piridin- 5- karbaldehid ( Šema 13)

Jedinjenje iz naslova se dobija izjV,jV-dimetil-A^-{4-okso-4-[5-(5-vinil-3//-imidazo[4,5-6]piridin-3-il)-2,3-dihidro-l//-indol-l-il]butil}amina(Intermedijar 11.1)sa 45% prinosom preko opšte procedure V. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 94% čistoća, tR5.02 min (tR(sM) 6.27 min).

Intermedijar 12. 1 : 3-[ l-( metilsulfonil)- 2, 3- dihidro- l/ Mndol- 5- ill- 5- viniI- 3i/imidazo [ 4, 5- 61 piridin ( Šema 12)Rastvor 3-(2,3-dihidro-l//-indol-5-il)-5-vinil-3//-imidazo[4,5-/)]piridina (2.53 g, 9.64 mmol)(Intermedijar 10.1),metansulfonil hlorida (1.12 ml, 14.47 mmol) i trietilamina (2.94 ml, 21.22 mmol) u dihlorometanu (50 ml) se meša tokom 30 min na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je uspešno ekstrahovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom i zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrisanin vacuosa ciljem da se dobije 3.24 g (99%) odgovarajućeg sulfonamida. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 92% čistoća, tR7.16 min (tR(SM) 6.64 min). MS (ESI)m/ z(C17H16N4O2S) 341.1 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 12. 2: 3- [ l-( metiisulfoniI}- 2, 3- dihidro- l/ f- indoI- 5- ill - 3i/- imidazo [ 4, 5-61piridin- 5- karbaldehid ( Šema 13)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-[l-(metilsulfonil}-2,3-dihidro-l//-indol-5-il]-5-vinil-3/7-imidazo[4,5-6]piridina(Intermedijar 12.1)sa 60% prinosom preko opšte procedure V. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 98% čistoća, tR6.13 min (tR(SM) 7.16 min).

Intermedijar 13. 1: S- n- KhlorometiDsulfonill^ J- dihidro- m- indol- S- ilj- S- vinil- S^-

imidazo [ 4, 5- 61 piridin ( Šema 12)

Rastvor 3-(2,3-dihidro-l//-indol-5-il)-5-vinil-3//-imidazo[4,5-i]piridina (2.57 g, 9.80 mmol)

(Intermedijar 10.1),hlorometansulfonil hlorida (2.00 ml, 19.59 mmol) iNjSf-diizopropiletilamina (11.98 ml, 68.58 mmol) u dihlorometanu (100 ml) je mešan tokom 20 min na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je uspešno ekstrahovana sa zasićenim vodenim

amonijum hloridom i zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrisanin vacuosa ciljem da se dobije 3.61 g (98%) odgovarajućeg sulfonamida. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 92% čistoća, tR8.05 min (tR(SM) 6.64 min). 'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 9.03 (s, IH), 8.22 (d, IH), 7.85 (s, IH), 7.79 (d, IH), 7.56 (m, 2H), 6.93 (dd, IH), 6.25 (d, IH), 5.50 (d, IH), 5,41 (s, 2H), 4.21 (t, 2H), 3.28 (t, 2H) ppm. MS (ESI) m/z (C17H15CIN4O2S) 375.0 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 13. 2: 3-{ l- f( hIorometil) sulfonill- 2, 3- dihidro- ljy- indol- 5- il|- 3/ f- imidazof4, 5-Mpiridin- S- karbaldehid ( Šema 13)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-{l-[(hlorometil)sulfonil]-2,3-dihidro-l//-indol-5-il}-5-vinil-3//-imidazo[4,5-6]piridina(Intermedijar 13.1)sa 86% prinosom preko opšte procedure V. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 97% čistoća, tR7.03 min (tR(SM) 8.05 min). MS (ESI) m/z (Ci6Hl3ClN403S) 377.0 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 14. 1: 3-( l-[( 3- hloropropil) sulfonU1- 2, 3- dihidro- l/ f- indol- 5- iU- 5- vinil- 3//iinidazol4. 5- 6] piridin ( Šema 12)Rastvor 3-(2,3-dihidro-l//-indol-5-il)-5-vinil-3//-imidazo[4,5-6]piridina (270 mg, 1.03 mmol)(Intermedijar 10.1),3-hloropropansulfonil hlorida (0.25 ml, 2.06 mmol) iN, N-diizopropiletilamina (1.08 ml, 6.18 mmol) u dihlorometanu (15 ml) je mešan tokom 10 min na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je uspešno ekstrahovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom i sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrisanin vacuosa ciljem da se dobije 351 mg (85%) odgovarajućeg sulfonamida. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 92% čistoća, tR8.44 min (tR(SM) 6.59 min). MS (ESI)m/ z(C9H19CIN4O2S) 403.0 (M, 100), 294.9 (65) Finengan LCQ.

Intermedijar14. 2: S- ll- fO- morfolin-^ ilpropiDsulfonill^^- dihidro- l^- indol- S- ill- S-vinil- 3/ 7- imidazof4, 5- 6] piridin ( Šema12)

Mešavina 3-{ l-[(3-hloropropil)sulfonil]-2,3-dihidro-l//-indol-5-il}-5-vinil-3//-imidazo[4,5-fr]piridina(Intermedijar 14.1)(351 mg, 0.87 mmol), morfolina (0.46 ml, 5.23 mmol), kalijum jodida (144.6 mg, 0.87 mmol) i N,N-dimetilformamida (10 ml) je mešana tokom 24 h na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je ekstrahovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom, a organski sloj je osušen preko natrijum sulfata. Koncentrisanjein vacuodovodi do 382 mg (97%) odgovarajućeg morfolino derivata. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 91% čistoća, tR8.44 min (tR{SM) 8.44 min). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 88.32 (s, IH), 8.09 (d, IH), 7.68 (s, IH), 7.55 (m, 2H), 7.41 (d, IH), 15 6.90 (dd, IH), 6.22 (d, IH), 5.48 (d, IH), 4.14 (1, 2H), 3.70 (m, 4H), 3.40-3.18 (m, 8H), 2.36 (m, 2H) ppm. MS (ESJ)m/ z(C23H27NS03S) 454.0 (M, 10) Finengan LCQ.

Intermedijar 14. 3: 3-( l- K3- morfolin- 4- ilpropil) sulfonil]- 2, 3- dihidro- l/^- indoI- 5- il)- 3^-

imidazo[ 4, 5- 61 piridin- 5- karbaidehid( Šema 13)

Jedinjenje iz naslova je dobiveno iz 3-{l-[(3-morfolin-4-ilpropil)sulfonil]-2,3-dihidro-l//- indol-5-il}-5-vinil-3#-imidazo[4,5-6]piridina(Intermedijar 14.2)sa 82% prinosom preko opšte procedure V. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): tR7.55 min (tR(sM) 8.44 min). MS (ESI)m/ z(C22H25N5O4S) 456.1 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 15. 1:Tert - butil6-[( 5- bromo- 2- nitrofenil) arninolindolin- l- karboksilat

( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova je dobiveno iz 2,6-dibromo-3-nitropiridina itert- butil6-aminoindolin-l-karboksilata (koji je dobiven iz komercijalno dostupnog 6-nitroindolina preko jV-Boc zaštite, a nakon toga redukcije ni tro grupe sa H2/Pd/C u MeOH/EtOAc) sa 51% prinosom preko opšte procedure I. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/0.1% TFA/H20): 99% čistoća, tR10.45 min (tR(SM:nitropiridin) 7.98 min). MS (ESJ)m/ z(CigHnABrN^ 435.2/437.1 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 15. 2:7<?rt- butil6-[( 3- amino- 6- bromopiridin- 2- il) amino| indoIin- l-karboksilat ( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iztert-butil6-[(5-bromo-2-nitrofenil)amino]indolin-l-karboksilata(Intermedijar 15.1)sa 98% prinosom preko opšte procedure II. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR9.72 min (tR(SM) 11.38 min). MS (ESI)m/ z(C18H2,BrN402) 426.8/428.9 (M+Na<+>, 87), 405.1/407.0 (M+H<+>, 23), 349.1/351.0 (100), 305.1/307.1 (56) Finengan LCQ.

Intermedijar15. 3:7grt- butil6-( 5- bromo- 3//- imidazo| 4, 5- 6] piridin- 3- il) indolin- l-karboksilat ( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz /err-butil 6-[(3-amino-6-bromopiridin-2-il)amino]indolin-l-karboksilata (Intermedijar 15.2) sa 76% prinosom preko opšte procedure III. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR9.78 min (tR(SM) 9.72 min). MS (ESI)m/ z(Ci9H,9BrN402) 415.0/416.9 (M+l, 74), 359.1/361.0 (100), 315.1/317.2 (51) Finengan LCQ.

Intermedijar15. 4:7grt- butil6-( 5- vinil- 3i/- imidazo[ 4, 5- 61piridin- 3- il) indolin- l-karboksilat ( Šema 12)

Jedinjenje iz naslova se dobija izterr-butil6-(5-bromo-3//-imidazo[4,5-6]piridin-3-il)indolin-1-karboksilata (Intermedijar 15.3) sa 69% prinosom preko opšte procedure IV. HPLC

(tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR9.76 min (tR(SM) 9.78 min). MS (ESI)m/ z(C2,H2iN402) 363.0 (M+l, 100), 307.0 (92) Finengan LCQ.

Intermedijar 15. 5: Jert- butil 6-( 5- formil- 3Z/- imidazo [ 4, 5- 6] piridin- 3- iDindolin- l-karboksilat ( Šema 13)

Jedinjenje iz naslova se dobija iztert-butil6-(5-vinil-3//-imidazo[4,5-6]piridin-3-il)indolin-l-karboksilata(Intermedijar 15.4)sa 95% prinosom preko opšte procedure V. HPLC (tokom 10 mm 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 88% čistoća, tR8.61 mm (tR(SM) 9.76 min). MS (ESI)m/ z(C20H20N4O3) 365.1 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 16. 1: 3-( 2, 3- dihidro- l/ f- indol- 6- il)- 5- vinil- 3/ ir- imidazo[ 4, 5- 61piridin ( Šema

12}

Mešavina tert-butil 6-(5-vinil-3//-imidazo[4,5-^]piridin-3-il)indoIin-l-karboksilata (4.90 g, 13.52 mmol)(Intermedijar 15.3), 4M HC1 u 1,4-dioksanu (200 ml), 2-propanola (30 ml) i dioksana (50 ml) je mešana tokom 1 h na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je koncentrisana do suvoće sa ciljem da se dobije 4.00 g (99% prinosa) monohidrohloridne soli odgovarajućeg slobodnog amina. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR7.06 min (tR(SM) 9.78 min). MS (ESI)m/ z(C,6H,4N4) 263.3 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar 16. 2: 3- fl-( metilsulfonil)- 23- dihidro- li/- indol- 6- in- 5- viniI- 3^ r- imidazof4, 5-61 piridin( Šema12)Rastvor 3-(2,3-dihidro-l//-indol-6-il)-5-vinil-3//-imidazo[4,5-6]piridina(Intermedijar 16.1)(1.10 g, 4.19 mmol), metansulfonil hlorida (0.65 ml, 839 mmol) i trietilamina (3.49 ml, 25.16 mmol) u dihlorometanu (50 ml) je mešan tokom 15 min na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je uspešno ekstrahovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom i zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrisanin vacuosa ciljem da se dobije 1.40 g (98%) odgovarajućeg sulfonamida. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR7.03 min (tR(SM) 7.06 min). MS (ESI) m/z (Ci7H16N402S) 341.0 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Intermedijar16. 3: 3- H-( metilsulfonin- 2, 3- dihidro- l/ f- indol- 6- il1- 3/ f- imidazo[ 4, 5-Mpiridin- 5- karbaldehid ( Šema 13)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-[l-(metilsulfonil-2,3-dihidro-l//-indol-6-il]-5-vinil-3//- imidazo[4,5-6]piridina (Intermedijar 16.2) sa 99% prinosom preko opšte procedure V. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 93% čistoća, tR6.09 min (tR(SM) 7.03 min). MS (ESI) m/z (C,6H|4N403S) 343.0 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Primer 1: Kalijumova so ( 5Z)- 5-{[ 4-( l- piperidinil) piridof3, 2- dIpirimidin- 6- illmetilen)-13- tiazoIidin- 2, 4- diona (1) (Šema 2)

Mešavina 2,4-tiazolidindiona (3.4 g; 29.1 mmol; 1.80 ekv.), pirolidina (269.80 uL; 3.2 mmol; 0.2 ekv.) u MeOH (50 mL) je grejana na 70° C. Polako je dodan rastvor 4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehida(Intermedijar1.7) (3.9 g; 162 mmol; 1 ekv.) u MeOH (50 mL) tokom 1.5 časova na 70° C. Nakon 2 h pod refluksom nakon dodavanja, reakcija je bila kompletovana. Nastao je precipitat. Vruća reakciona mešavina je filtrirana, a kruta materija je oprana sa hladnim MeOH sa ciljem da se dobije (5Z)-5-{[4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metilen}-l,3-tiazolidin-2,4-dion (1) (2.70 g; 48%) u formi pudera boje pomorandže sa 98% HPLC čistoćom.

(5Z)-5-{[4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metilen}-l,3-tiazolidin-2,4-dion (2.7 g; 8.1 mmol; 1 ekv.) je suspendovan u THF (80 mL) i vodi (80 mL). Dodan je kalijum hidroksid (16.2 mL; 0.50 M; 8.1 mmol; 1 ekv.), a rastvor je filtriran kroz vatu i opran sa vodom. Nakon liofilizacije je izolovana kalijumova so (5Z)-5-{[4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metilen}-l,3-tiazolidin-2,4-diona (1) (3.06 g, 98%) u formi žute krute materije sa 99.36%

HPLC čistoćom. Količina: 3.06 g; Prinos: 99%; Tačka topljenja: 319° C; Formula: C,6H1402SN5.K; IR ( čisto) v 3355.1, 2932.9, 2852.7, 1674.1, 1519.6 cm"<1>; ' HNMR ( DMSO- dg) 8 1.68 (si, 6H), 4.34 (si, 4H), 20 7.44(s, IH), 7.93(d, J = 9 Hz, IH), 8.04 (d, J = 9Hz, IH), 8.45 (s, IH); HPLC ( H?Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : Rt (min); Areal % = 2.07; 99.10;

LC- MS: M/ Z ESI: Rt (min) 1.36; 342.04 (M+l); 340.08 (M-l).

Primer 2: Kalijumova so ( 5Z)- 5-{[ 4-{ 4- lfuoro- l- piperidinil) piridoI3, 2- dlpirimidin- 6-

iIlmetilen}- l, 3- tiazolidin- 2, 4- diona (2) (Sema 2)

Jedinjenje iz naslova je dobiveno preko opšte procedure koja je opisana kod Primera 1, koristeći Intermedijar 2.1, 4-(4-fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid. Nakon liofilizacije izolovana je kalijumova so (5Z)-5-{[4-(4-fluoro-l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metilen}-l,3-tiazolidin-2,4-diona (2) u formi krute materije boje pomorandže sa 98.8% HPLC čistoćom; Formula: Ci6H,3F02SN5.K; ' H NMR ( DMSO- d*) 5 1.86 (m, 2H), 2.07 (m, 2H), 4.39 (m, 4H), 5.00 (m, IH), 7.44 (s, IH), 7.97 (d, J = 9Hz, IH), 8.07 (d, J = 9Hz, IH), 8.50 (s, IH); HPLC ( H2Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : Rt (min); Areal % = 1.92; 98.76; LC- MS: M/ Z ESI: Rt (min) 1.27; 360.07 (M+l); 358.07 (M-l).

Primer 3: Kalijumova so ( 5Z)- 5-({ 4-[ 4-( trifluorometil)- l- piperidinillpiridof3, 2-d1pirimidin- 6- il) metilen)- l, 3- tiazolidin- 2, 4- diona (3) (Šema 2)

Jedinjenje iz naslova se dobija preko opšte procedure koja je opisana kod Primera 1, koristećiIntermedijar 3.1,4-(4-(trifluorometil)-piperidin-l -il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid. Nakon liofilizacije izolovana je kalijumova so (5Z)-5-({4-[4-(trifluorometil)-l-piperidinil]pirido[3,2-d]pirimidin-6-il}metilen)-l,3-tiazolidin-2,4-diona (3) u formi krute materije boje pomorandže sa 99.5% HPLC čistoćom; Formula: C17H13O2SF3N5.K; ' H NMR ( DMSO- d*) 8 1.39 (m, 2H), 1.76 (m, 2H), 2.59 (m, IH), 3.05 (m, 2H), 5.44 (m, 2H), 7.24 (s, IH), 7.76 (d, J=9Hz, IH), 7.87 (d, J=9Hz, IH), 8.30 (s, IH); HPLC ( H20 TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : Rt (min); Areal % = 2.44; 88.47; LC- MS: M/ Z ESI: Rt (min) 1.55; 410.09 (M+l); 408.09 (M-l).

Primer 4: 5- Piridof2, 3- blpirazin- 6- ilmetilen- tiazoIidin- 2, 4- dion(4) (Šema 3)

Pirido[2,3-b]pirazin-6-karbaldehid(Intermedijar4.4) (300 mg, 1.89 mmol, 1 ekv.), 2,5-tiazolidindion (397 mg, 3.4 mmol, 1.8 ekv.) i pirolidin (0.03 mL, 0.38 mmol, 0.2 ekv.) su grejani u metanolu (10 mL) tokom 3 časa na 65° C. Kada je reakcija bila gotova, dodana je voda (3 mL), a odgovarajući kafeni precipitat je filtriran, opran sa metanolom, vodom, a tada i sa dietil etarom sa ciljem da se dobije 200 mg čistog očekivanog jedinjenja (4). Iz slobodne baze (200 mg, 0.78 mmol, 1 ekv.) je sintetizovana kalijumova so koristeći KOH (IM, V= 0.78 mL, 1 ekv.) sa ciljem da se dobije 231 mg odgovarajuće kalijumove soli. Količina: 231 mg (kalijumova so); Prinos: 41 %; Formula: CnH602SN4.K; HPLC Čistoća: 98.7%; HPLC ( H2Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : Rt (min); Areal % = 1.89 min; 98.7%; * H NMR ( DMSO- d^ 8 9.09 (s, IH), 8.95 (s, IH), 8.46 (d, IH, J=8Hz), 8.02 (d, IH, J=8Hz), 7.52 (s, IH); LC- MS: M/ Z ESI: Rt (min) 0.76 min, 259.07 (M+l).

Primer 5: 5- Furo[ 3, 2- b| piridin- 5- ilmetilen- tiazolidin- 2, 4- dion(5e) (Šema 4)

Rastvor 2-(trimetilsilil)furo[3,2-b]piridin-5-karbaldehid(Intermedijar5.2) (130 mg; 0.59 mmol; 1 ekv.), 2,4-tiazolidindiona (125 mg; 1.07 mmol; 1.8 ekv.) i beta-alanina (95 mg; 1.07 mmol; 1.8 ekv.) u sirćetnoj kiselini (2 mL) je grejan na 100° C tokom 7 h. Dodana je voda, a precipitat je filtriran i opran sa Et20 sa ciljem da se dobije kruta materija (čistoća: 98.14%, prinos: 25%). Tada je (5Z)-5-{[2-(trimetilsilil)furo[3,2-b]piridin-5-il]metilen}-l,3-tiazolidin-2,4-dion (41 mg; 0.13 mmol; 1 ekv.) rastvoren u MeOH (5 mL). Dodan je NaOH (5N vodeni)

(150.00 ud). Rastvor je mešan na st. Nakon 24 časa, reakcija je kompletovana. Dodan je AcOH (1 mL), a rastvor je koncentrisan pod vakumom. Dodana je voda, a precipitat je filtriran, opran sa vodom, Et20 i MeOH sa ciljem da se dobije kaita materija (5). Iz slobodne baze (24 mg, 0.097 mmol, 1 ekv.) je sintetizovana kalijumova so koristeći KOH (IM, V= 0.097 mL, 1 ekv.) šta dovodi do 24 mg odgovarajuće kalijumove soli. Količina: 24 mg

(kalijumova so); Prinos: 75 %; Formula: CiiH6N203S.K; HPLC Čistoća: 98.03%; HPLC ( H?Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : Rt (min); Areal % = 2.96 min; 98.03%; * H NMR ( DMSO- dV) 6 8.30 (s, IH), 8.00 (d, IH, J=9Hz), 7.51 (d, III, J=9Hz), 7.37 (s, IH), 7.13 (s, IH); LC- MS: M/ Z ESI: Rt (min) 1.31 min, 246.95 (M+l).

Primer 6; 5-[ 4-( 4- Fluoro- piperidin- l- il)- pirido[ 3, 2- d| piriinidin- 6- ilmetilenl- 2- tiokso-

tiazolidin- 4- on ( Šema 2)

Jedinjenje iz naslova je dobiveno preko opšte procedure koja je opisana kod Primera 1, koristeći rodanin (umesto tiazolidindion) iIntermedijar 2.1,4-(4-fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid. Nakon liofilizacije izolovana je kalijumova so 5-[4-(4-Fluoropiperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-ilmetilen]-2-tiokso-tiazolidin-4-ona (6) u formi krute materije boje pomorandže sa 95.5% HPLC čistoćom; Formula: C16H13FOS2N5.K;] UNMR ( DMSO- d*) 8 1.89 .(m, 4H), 4.42 (m, 4H), 5.00 (m, IH), 729 (s, IH), 8.07 (d, J = 9 Hz, 2H), 8.52 (s, IH); HPLC ( H?Q TFA 0. 1% - ACN TFA 0. 05%) : Rt (min); Areal % = 2.37 min; 95.54%; LC- MS: M/ Z ESI: Rt (min) 138 min; 376.11 (M+l); 374.11 (M-l).

Primer 7; ( 5Z)- 5-[( 3- fenil- 3H- imidazo[ 4. 5- 61piridin- 5- il) metilenl- l, 3- tiazolidin- 2, 4- dion

v

( Sema 5)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-fenil-3//-imidazo[4,5-£]piridin-5-karbaldehida sa 55% prinosom preko opšte procedure koja je opisana kodPrimera1. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 96% čistoća, tR 4.95 min. MS (ESI)m/ z(C16H10N4O2S) 361.2 (M+K<+>, 100). 'H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6): 8 8.97 (s, IH), 8.23 (d, IH), 8.13 (d, 2H), 7.70-7.45 (m, 5H).

Primer 8: Preparacija ( 5Z)- 5-{[ 3-{ 3, 5- dimetoksifenill- 3^- imidazo[ 4. 5- 61piridin- 5-

il| metilen}- l, 3- tiazo! idin- 2, 4- diona ( Šema 5)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-(3,5-dimetoksifenil)-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehida sa 85% prinosom preko opšte procedure VI. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 96% čistoća, tR5.12 min (tR(SM) 7.26 min). 'H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6): 8 8.90 (s, IH), 8.16 (d, IH), 7.58 (d, IH), 7.41 (s, IH), 7.24 (s, 2H), 6.60 (s, IH), 3.87 (s, 6H).

Primer 9:Tert - butil5-( 5-[( Z)-( 2, 4- diokso- l, 3- tiazolidin- 5- iliden) metill- 3iy- imidazo[ 4, 5-b ] piridin- 3- iIMndolin- l- karboksilat( Šema 5)

Jedinjenje iz naslova je dobijeno iztert-butil5-(5-formil-3//-imidazo[4,5-6]piridin-3-il)indolin-l-karboksilata sa 65% prinosom preko opšte procedure VI. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/0.1% TFA/H20): 94% čistoća, tR6.50 min (tR(SM) 7.31 min). 1 H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) 5 8.89 (s, IH), 8.17 (s, IH), 8.12 (d, IH), 7.92 (brs, 0.5H), 7.88 (s, IH), 7.59 (br s, 0.5H), 7.58 (d, IH), 7.28 (d, IH), 4.06 (br 1, 2H), 3.24 (1, 2H), 1.54 (s, 9H) ppm. MS (ESI)m/ z(C23H20N5O4S) 464.1 (M+l, 100), 408.1 (60) Finengan LCQ.

Primer 10: ( 5Z)- 5-{ r3-( 2, 3- dihidro- l^- indol- 5- il)- 3H- imidazof4. 5- Z>lpiridin- 5- illmetilen}-

l, 3- tiazolidin- 2, 4- dion ( Šema 5)

Mešavinatert-butil5- {5-[(Z)- {2,4-diokso-1,3 -tiazolidin-5 -iliden)metil] -3//-imidazo[4,5-6]piridin-3-il}indolin-l-karboksilata (35.0 mg, 75.5 mmol) (Primer 9), 4M HC1 u 1,4-dioksanu (3 ml) i 2-propanola (1 ml) je mešana tokom 1.5 h na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je koncentrisana do suvoće, oprana sa vodom i osušenain vacuosa ciljem da se dobije 27.3 mg (89% prinos) monohidrohloridne soli odgovarajućeg slobodnog amina. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 98% čistoća, tR4.44 min (tR(SM) 6.23 min). 'H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) 5 9.03 (s, IH), 8.33 (d, IH), 8.01 (s, IH), 7.96 (s, IH), 7.91 (d, IH), 7.75 (d, IH), 7.34 (d, IH), 3.97 (br s, 4H), 3.74 (t, 2H), 3.22 (t, 2H) ppm. MS (ESI) m/z(Cl8Hl3N502S) 364.1 (M+l, 100), 329.2 (21) Finengan LCQ.

Primer 11: ( 5Z)- 5- lf3-( l- acetil- 23- dihidro- l^- indol- 5- il)- 3iy- imidazo[ 4. 5- blpiridin- 5-

illmetilen}- 1. 3- tiazolidin- 2, 4- dion ( Šema 5)

Jedinjenje iz naslova je dobiveno iz 3-(l-acetil-2,3-dihidro-l//-indol-5-il)-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehida (intermedijar 10.3) sa 55% prinosom preko opšte procedure VI. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR4.46 min (tR(SM) 5.38 min). 'H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6, 65° C) 6 12.23 (br s, IH), 8.89 (s, IH), 8.27 (d, IH), 8.22 (br s, IH), 7.93 (s, IH), 7.90 (s, IH), 7.83 (d, IH), 7.70 (d, IH), 4.23 (1, 2H), 3.29 (1, 2H), 2.23 (s, 3H) ppm. MS (ESI)m/ z( CjoU^ sO^) 406.3 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Primer 12: ( 5Z)- 5- K3- H-( l- I4-( dimetilamino) butanoiH- 2, 3- dihidro- ljy- indol- 5- iU- 3/ y-imidazo[ 4, 5- 61piridin- 5- iI) metilenl- l, 3- tiazolidin- 2, 4- dion

Jedinjenje iz naslova je dobijeno iz 3-{ l-[4-(Dimetilamino)butanoil]-2,3-dihidro-l//-indol-5-il}-3//-imidazo[4,5-/>]piridin-5-karbaldehida (intermedijar 11.2) sa 78% prinosom preko opšte procedure VI. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 98% čistoća, tR4.14 min (tR(SM) 5.02 min). 1 H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) 5 8.94 (s, IH), 8.28 (d, IH), 8.22 (d, IH), 7.98 (s, IH), 7.76 (br s, 3H), 4.23 (1, 2H), 3.45 (br s, mH), 3.31 (t, 2H), 2.71 (t, 2H), 2.59 (t, 2H), 2.52 (s, 6H), 1.88 (m, 2H) ppm. MS (ESI)m/ z(C24H24N6O3S) 477.1 {M+l, 100), 432.2 (49), 272.3 (19), 260.4 (21) Finengan LCQ.

Primer 13: ( 5Z)- 5-(( 3-[ l-( metilsulfonil)- 2. 3- dihidro- l/ jr- indol- 5- ill- 3//- imidazof4, 5-Z>] piridin- 5- iUmetilen)- l, 3- tiazolidin- 2, 4- dion ( Sema S)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-[l-(metilsulfonil)-2,3-dihidro-l//-indol-5-il]-3//- imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehida (intermedijar 12.2) sa 62% prinosom preko opšte procedure VI. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR4.80 min (tR(SM) 6.13 min). 'H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) 5 8.97 (s, IH), 8.32 (d, IH), 7.96 (s, 2H), 7.87 (d, IH), 7.74 (d, IH), 7.45 (d, IH), 4.09 (1, 2H), 3.28 (1, 2H), 3.10 (s, 3H) ppm. MS (ESI)m/ z(CgHisNsC^) 442.1 (M+l, 100), 363.0 (27), 291.3 (22).

Primer 14: Preparaciia ( 5Z)- 5- f( 3-{ l- f( hlorometil) sulfonil)- 2, 3- dihidro- m- indol- 5- iU-3//- imidazo 14, 5- 61 piridin- 5- il) metiIen|- l, 3- tiazolidin- 2, 4- diona ( Šema 5)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-{l-[(hlorometil)sulfonil]-2,3-dihidro-l//-indol-5-il}-3//- imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehida (intermedijar 13.2) sa 60% prinosom preko opšte procedure VI. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR5.37 min (tR(SM) 7.03 min). 'H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) 8 8.92 (s, IH), 8.31 (d, IH), 7.98 (d, 2H), 7.88 (d, IH), 7.75 (d, IH), 7.52 (d, IH), 538 (s, 2H), 422 (t, 2H), 3.30 (t, 2H) ppm. MS (ESI)m/ z(CgHuClN^Sz) 477.0 (M+l, 100) Finengan LCQ.

Primer 15: ( 5Z)- 5- tG-{ l- f( 3- morfolin- 4- ilpropil) sulfonill- 2, 3- dihidro- l^- indol- 5- iIl- 3^-

imidazof4, 5- 61piridin- 5- il) metilenl- l, 3- tiazolidin- 2, 4- dion ( Šema 5)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-{l-[(3-morfolin-4-ilpropil)sulfonil]-2,3-dihidro-l//-indol-5-iI}-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehida sa 39% prinosom preko opšte procedure VI. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): tR5.50 min (tR(SM) 7.55 min).

'H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) 8 8.93 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.85 (d, IH), 7.66 (d, IH), 7.56 (s, IH), 7.42 (d, IH), 4.13 (t, 2H), 3.74 (m, 2H), 3.50-3.20 (m, 12H), 2.18 (m, 2H) ppm. MS (ESI)m/ z(C23H27N5O3S) 454.0 (M, 10) Finengan LCQ.

Primer 16:Tert - butil6-{ 5-[( Z)-( 2, 4- diokso- l, 3- tiazolidin- S- iIiden) metill- 3/ f- imidazo[ 4, 5-Z>1piridin- 3- iUindolin- l- karboksilat ( Šema 5)

Jedinjenje iz naslova se dobija iztert-butil6-(5-formil-3H-imidazo[4,5-^]piridin-3-il)indolin-1-karboksilata sa 22% prinosom preko opšte procedure VI. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR6.49 min (tR(SM>8.61 min). 1 H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) 8 8.87 (s, IH), 8.24 (d, IH), 8.02 (br d, IH), 7.74 (d, IH), 7.72 (s, IH), 7.50 (br s, IH), 7.41 (d, IH), 4.05 (t, 2H), 3.20 (t, 2H), 1.45 (s, 9H) ppm. MS (ESI)m/ z(C23H2oN504S) 464.0 (M+l, 100), 408.1 (42) Finengan LCQ.

Primer 17: ( 5Z)- 5-(( 3-[ l-( metilsulfonil)- 2, 3- dihidro- ljy- indol- 6- il1- 3/ jr- imidazor4, 5-61piridin- 5- iI} metiIen)- 1. 3- tiazolidin- 2, 4- dion ( Sv ema 5)

Jedinjenje iz naslova se dobija iz 3-[l-(metilsulfonil)-2,3-dihidro-l//-indol-6-il]-3//- imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehida sa 29% prinosom preko opšte procedure VI. HPLC (tokom 10 min 10-85% MeCN/100 mM vodeni NaOAc): 99% čistoća, tR4.68 min (tR(SM) 6.09 min). 'H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) 8 8.87 (s, IH), 8.17 (d, IH), 7.82 (d, IH), 7.65-7.50 (m, 3H), 7.42 (s, IH), 4.09 (t, 2H), 3.24 (t, 2H), 3.15 (s, 3H) ppm. MS (ESI)m/ z(C|9H15N504S2) 442.0 (M+l, 100), 362.8 (21) Finengan LCQ.

Primer 18: Biološki testovi

Jedinjenje iz ovoga pronalaska mogu da se podvrgnu sledećim testovima:

a) Test visokog protoka PI3K lipidne kinaze (test vezanja):

Efikasnost jedinjenja iz ovoga pronalaska da inhibiraju lipidnu fosforilaciju pomoću PI3K

može da se testira u sledećem testu vezanja.

Test kombinuje tehnologiju scincijacijske bliskosti (SPA, Amersham) sa kapacitetom neomicina (polikatjonski antibiotik) da veže fosfolipide sa visokim afinitetom i specifično. Test Scincilacijske Bliskosti se bazira na karakteristikama slabo emitirajućih izotopa (poput3H,125I,3<3>P). Obavijanje SPA kuglica sa neomicinom omogućava detekciju fosforilisanih Iipidnih supstrata nakon inkubacije sa rekombinantnim PI3K i radioaktivnim ATP u istoj rupici, uz pomoć hvatanja radioaktivnih fosfolipida na SPA kuglicama preko njihovog specifičnog vezanja za neomicin.

U MTP sa 384 rupica koji sadrže 5 ul testnog jedinjenja sa Formulom (I) (rastvorenog u 6% DMSO; sa ciljem da se dobiju koncentracije od 100, 30, 10, 3, 1, 0.3, 0.1, 0.03, 0.01, 0.001 uM testnog jedinjenja) su dodana sledeća testna jedinjenja. 1) 5 ul (58 ng) Ljudskog rekombinantnog GST-PI3Ky (u Hepes 40 mM, pH 7.4, DTT 1 mM i etilenglikol 5%) 2) 10 ul lipidnih micela i 3) 10 ul Kinaznog pufera ([33P]y-ATP 45 uM/60 nCi, MgCl230 mM, DTT 1 mM, 13-Glicerofosfat 1 mM, Na3V04100 uM, Na Holat 0.3 % u Hepes 40 mM, pH 7.4). Nakon inkubacije na sobnoj temperaturi tokom 180 min, uz blago agitiranje, reakcija je zaustavljena uz pomoć dodavanja 60 ul rastvora koji sadrži 100 ug PVT SPA kuglica zamotanih sa neomicinom u PBS-u koji sadrži ATP 10 mM i EDTA 5 mM. Test je dodatno inkubiran na sobnoj temperaturi tokom 60 min uz blagu agitaciju sa ciljem da se omogući vezanje fosfolipida za neomicin-SPA kuglice. Nakon precipitacije PVT SPA kuglica omotanih sa neomicinom tokom 5 min na 1500 x g, radioaktivni PtdIns(3)P je kvantifikovan uz pomoć brojanja scincilacije na brojaču Wallac MicroBeta TM.

Vrednosti prikazane u Tabeli I ispod se odnose na IC5o(nM) s obzirom na PI3Ky, kao količina koja je neophodna da se postigne 50% inhibicija pomenute mete. Pomenute vrednosti pokazuju značajan inhibitoran potencijal tiazolskih jedinjenja prema PI3Ky.

Primeri inhibitornih aktivnosti za jedinjenja iz ovoga pronalaska su predstavljeni u Tabeli I ispod.

b) ELISA bazirana na ćelijama sa ciljem da se prati inhibicija PI3K:Efikasnost jedinjenja iz ovoga pronalaska da inhibiraju Akt/PKB fosforilaciju indukovanu sa

PI3K može da se testira preko sledećeg testa baziranog na ćelijama.

Merenje Akt/PKB fosforilacije u makrofagima nakon stimulacije sa Komplementom 5a: Sirov 264: Sirovi 264-7 makrofagi (kultivisani u DMEM-F12 medijumu sadrže 10% Fetalni goveđi serum i antibiotike) su posađeni kod gustoće od 20000 ćelija/rupici u MTP sa 96 rupica 24 h pre ćelijske stimulacije. Pre stimulisanja sa 50 nM Komplementa 5a tokom 5 min, Ćelije nisu dobivale serum tokom 2 h, a nakon toga su pre-tretirane sa inhibitorima tokom 20 min. Nakon stimulisanja, ćelije su fiksirane u 4% formaldehidu tokom 20 min i oprane 3 puta u PBS koji je sadržavao 1% Triton X-100 (PBS/Triton). Endogena peroksidaza je blokirana uz pomoć inkubacije tokom 20 min u 0.6% H2O2i 0.1% Natrijum Azidu u PBS/Tritonu, a nakon toga sve je oprano 3 puta u PBS/Tritonu. Ćelije su tada blokirane tokom 60 min preko inkubacije sa 10% fetalnim goveđim serumom u PBS/Tritonu. Sledeće, fosforilisani Akt/PKB je detektiran uz pomoć preko-noćne inkubacije na 4° C sa prvim antitelom (anti fosfo Serin 473 Akt IHC, ćelijsko signalizovanje) koje je bilo razređeno 800-puta u PBS/Tritonu i koje je sadržalo 5% goveđi serum albumin (BSA). Nakon 3 ispiranja u PBS/Tritonu, ćelije su inkubirane tokom 60 min sa kozjim-anti-zečjim antitelom koje je bilo konjugirano sa peroksidazom (1/400 razređenje u PBS/Tritonu, koje sadrži 5% BSA), sve je oprano 3 puta u PBS/Tritonu i 2 puta u PBS, a nakon toga je sve inkubirano u 100 jliI rastvora sa supstratom (R&D) tokom 20 min. Reakcija je zaustavljena uz pomoć dodavanja 50 ul IM SO4H2, a apsorbancija je pročitana kod 450 nm.

Vrednosti navedene u Tabeli II ispod se odnose na procenat inhibicije AKT fosforilacije koja je upoređena sa banalnim nivoom. Pomenute vrednosti pokazuju jasan efekat tiazolskih jedinjenja u aktivisanju AKT fosforilacije kod makrofaga.

Primeri inhibitornih aktivnosti jedinjenja iz ovoga pronalaska su prikazani u Tabeli II ispod.

Primer 19: Model regrutovanja ćelija iz peritonealne šupljine uz pomoć tioglikolata

In vivoefikasnost jedinjenje iz ovoga pronalaska u inhibiciji migracije leukocita nakon intra-peritonealnog poticanja sa tioglikolatom može da se testira sa sledećim testom.

Eksperimentalni protokol:

8-10 nedelja stare ženke miša soja C3H su bile držane gladnima tokom 18 časova. 15 min pre intra-peritonealne injekcije tioglikolata (1.5%, 40 ml/kg), miševi su bili tretirani oralno sa Piridin metilen azolidinonima sa Formulom (I). Kontrolni miševi su primili CMC/Tween kao prenosnik (10 ml/kg). Miševi su tada žrtvovani uz pomoć inhalacije CO2, peritonealna šupljina se oprana dva puta sa 5 ml ledeno-hladnog PBS/1 mM EDTA. Lavaže su provedene 4 h ili 48 h nakon podražavanja sa tioglikolatom sa ciljem da se evaluira regrutovanje neutrofila ili makrofaga. Bele krvne ćelije (neutrofili, limfociti ili makrofagi) su izbrojane uz pomoć Beckman Coulter<®>A°T 5diff™. Deksametazon je bio korišćen kao referentni lek.

Primer 20: Preparacija farmaceutske formulacije

Formulacija 1- Tablete

Jedinjenje sa Formulom (I) je pomešano kao suvi puder sa suvim želatinskim veznikom u težinskom omeru od otprilike 1:2. Mala količina magnezijum stearataje dodana kao lubrikant. Mešavina je formirana u tablete od po 240-270 mg (80-90 mg aktivnog piridin metilen azolidinon jedinjenja po tableti) uz pomoć prese za tablete.

Formulacija 2 - Kapsule

Jedinjenje sa Formulom (I) je pomešano kao suvi puder sa razređivačem od škroba u težinskom omeru od otprilike 1:1. Mešavina je punjena u 250 mg kapsula (125 mg aktivnog piridin metilen azolidinon jedinjenja po kapsuli).

Formulacija 3 - Tečnost

Jedinjenje sa Formulom (I) (1250 mg), saharoza (1.75 g) i ksantinska guma (4 mg) su pomešane, smeša je propuštena kroz Američko sito Br. 10, a tada je pomešana sa od pre pripremljenim rastvorom mikrokristalne celuloze i natrijum karboksimetil celuloze (11:89, 50 mg) u vodi. Natrijum benzoat (10 mg), okus i boja su razređeni sa vodom i dodani uz mešanje. Tada je dodano dovoljno boje sa ciljem da se dobije totalni volumen od 5 mL.

Formulacija 4 - Tablete

Jedinjenje sa Formulom (I) je pomešano kao suvi puder sa suvim želatinoznim veznikom u težinskom omeru od otprilike 1:2. Mala količina magnezijum stearataje dodana kao lubrikant. Mešavina je formirana u 450-900 mg tableta (150-300 mg aktivnog piridin metilen azolidinon jedinjenja) uz pomoć prese za tablete.

Formulacija 5 - Injekcija

Jedinjenje sa Formula (I) je rastvoreno u puferovani sterilni slani vodeni medijum za injektiranje u koncentraciju od otprilike 5 mg/mL.

Claims (30)

1. Piridin metilen azolidinonski derivat,naznačen time,daje u skladu sa Formulom (I), gde R<1>je izabran iz H, halogena, Ci-C6-alkila, C2-C6-alkenila i C2-C6-alkinila, Ci-C6-alkil alkoksi, alkoksikarbonila, acila, sulfonila, sulfanila, sulfinila, alkoksi i amino; R je izabran iz H, halogena, CpCć-alkila, C2-C6-alkenila, C2-C6-alkinila; arila; heteroarila, C3-C8-cikloalkila; C3-Cg-heterocikloalkila, aril Cj-C6-alkila, heteroaril Ci-C6-alkila, C3-C8-cikloalkil C,-C6-alkila, C3-C8-heterocikloalkila Ci-C6-alkila, CrC6-alkil alkoksi, alkoksikarbonila, acila, sulfonila, sulfanila, sulfinila, alkoksi i amino; X je izabran iz S, NH i O; Y je izabran iz O, S i NR<3>, gde R<3>je izabran iz H, ponekad supstituisanog C|-Cć-alkoksi, ponekad supstituisanog Ci-C6-alkila, ponekad supstituisanog C2-C6-alkenila, ponekad supstituisanog C2-C6-alkinila, ponekad supstituisanog Ci-Cć-alkil arila, cijano i ponekad supstituisanog sulfonila; A je neka heteroarilna grupa; nje neki celi broj izabran iz 1 i 2; kao i njegovi geometrijski izomeri, njegove ponekad aktivne forme kao enantiomeri, dijastereomeri i njegove racematne forme, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli.

2. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa zahtevom 1,naznačen time,da R<1>je H.

3.Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa zahtevima 1 do 2,naznačen time,da R<2>jeH.

4.Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa zahtevima 1 do 2,naznačen time,da R2 je C3-C8-heterocikloalkil.

5. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa zahtevima 1 do 2,naznačen time,da R je izabran iz arila i heteroarila.

6. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva,naznačen time,da X je S.

7.Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva,naznačen time,da Y je O.

8.Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva,naznačen time,da Y je S.

9.Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva,naznačen time,da nje 1.

10.Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva,naznačen time,da A zajedno sa piridinskim prstenom formira sledeći grupu (Ia): gde R<1>i R<2>su definisani kao u bilo kojem od prethodnih zahteva.

11. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 9,naznačen time,da A zajedno sa piridinskim prstenom formira sledeću grupu (lb): gde R<1>i R<2>su definisani kao u bilo kojem od prethodnih zahteva.

12. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 9,naznačen time,da A zajedno sa piridinskim prstenom formira sledeću grupu (Ic): gde R i R su definisani kao u bilo kojem od prethodnih zahteva.

13. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 9,naznačen time,da A zajedno sa piridinskim prstenom formira sledeću grupu (Id): gde R 1 i R 0 su definisani kao u bilo kojem od prethodnih zahteva.

14. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 10,naznačen time,da R<1>je H; R<2>je Cj-Cg-heterocikloalkil; X je S; Y je 0 ili S, a A zajedno sa piridinskim prstenom formira grupu sa Formulom (Ia).

15.Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva,naznačen time,da R<1>je H; X je S; Y je O, a A zajedno sa piridinskim prstenom formira neku grupu sa Formulom (lb).

16. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva,naznačen time,da R<1>je H; X je S; Y je 0, a A zajedno sa piridinskim prstenom formira neku grupu sa Formulom (Ic).

17. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva,naznačen time,da R<1>je H; X je S; Y je 0, a A zajedno sa piridinskim prstenom formira neku grupu sa Formulom (Id).

18. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva,naznačen time,daje izabran iz sledeće grupe: (5Z)-5-{[4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metilen}-l,3-tiazolidin-2,4-dion; (5Z)-5-{[4-(4-fIuoro-l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metilen}-l,3-tiazolidin-2,4-dion; (5Z)-5-({4-[4-(trifluorometil)-l-piperidinil]pirido[3,2-d]pirimidin-6-il}-metilen)-l,3-tiazolidin-2,4-dion; 5-Pirido[2,3-b]pirazin-6-ilmetilen-tiazolidin-2,4-dion; 5-Furo[3,2-b]piridin-5-ilmetilen-tiazolidin-2,4-dion; 5-[4-(4-Fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-ilmetilen]-2-tioksotiazolidin-4- on; 5- (3-Fenil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetilen)-tiazolidin-2,4-dion; 5-[3-(3,5-Dimetoksi-fenil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetilen]-tiazolidin2,4-dion; tert-butil ester 5-[5-(2,4-Diokso-tiazolidin-5-ilidenmetil)-imidazo[4,5-b]piridin-3-il]-2,3-dihidro-indol-l-karboksilne kiseline; 5-[3-(2,3-Dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetilen]tiazolidin-2,4-dion; 5-[3-(l-Acetil-2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetilen]-tiazolidin-2,4-dion; 5-{3-[l-(4-Dimetilamino-butiril)-23-dihidro-lH-indol-5-il]-3H-imida 5-ilmetilen}-tiazolidin-2,4-dion; 5-[3-(l-MetansuIfonil-2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetilen]-tiazolidin-2,4-dion; 5-[3-(l-Hlorometansulfonil-2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5 ilmetilen]-tiazolidin-2,4-dion; 5-{341-(3-Morfolin-4-il-propan-l-sulfonil)-23-dihidro-lH-indol-5-il]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetilen}-tiazolidin-2,4-dion; tert-butil ester 6-[5-(2,4-Diokso-tiazolidin-5-ilidenmetil)-imidazo[4,5-b]piridin-3-il]-2,3-dihidro-indol-1 -karboksilne kiseline; 5-[3-(l-Metansulfonil-2,3-dihidro-lH-indol-6-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetilen]-tiazolidin-2,4-dion.

19. Piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa zahtevima 1 do 18,naznačen time,da se koristi kao lek.

20. Upotreba piridin metilen azolidinonskog derivata u skladu sa zahtevima 1 do 18 kao i njegove mešavine,naznačena time,da se pomenuti koriste za preparaciju leka za profilaksu i/ili tretman autoimunih poremećaja i/ili poremećaja zapaljenja, kardiovaskularnih bolesti, neurodegenerativnih bolesti, bakterijskih ili viralnih infekcija, bolesti bubrega, agregacije trombocita, raka, transplantacije, odbacivanja presadka ili povreda pluća.

21. Upotreba u skladu sa zahtevom 20,naznačena time,da su pomenute bolesti izabrane iz grupe koja obuhvata multipnu sklerozu, psorijazu, reumatoidni artritis, sistemski lupus eritematozis, bolest zapaljenja creva, zapaljenje pluća, trombozu ili infekcije/zapaljenje mozga poput meningitisa ili encefalitisa.

22. Upotreba u skladu sa zahtevom 20,naznačena time,da su pomenute bolesti izabrane iz grupe koja obuhvata Alzheimer-ovu bolest, Huntington-ovu bolest, CNS traumu, kap ili ishemična stanja.

23.Upotreba u skladu sa zahtevom 20, naznačenatime,da su pomenute bolesti izabrane iz grupe koja obuhvata aterosklerozu, srčanu hipertrofiju, disfunkciju srčanih miocita, povećani krvni pritisak ili vazokonstrikciju.

24. Upotreba u skladu sa zahtevom 20, naznačena time, da su pomenute bolesti izabrane iz grupe koja obuhvata hroničnu obstruktivnu plućnu bolest, fibrozu anafilaktičkog šoka, psorijazu, alergijske bolesti, astmu, kap ili ishemična stanja, ishemiju-reperfuziju, agregaciju/aktivaciju krvnih pločica, atrofiju/hipertrofiju skeletnih mišića, regrutovanje leukocita u tkivu raka, angiogenezu, invazivnu metastazu, melanom, Karposi-jev sarkom, akutne i hronične bakterijske i viralne infekcije, sepsu, odbacivanje presadka, glomerulo-sklerozu, glomerulo-nefritis, progresivnu renalnu fibrozu, endotelijalne i epitelijalne povrede u plućima ili zapaljenje opštih plućnih puteva.

25. Upotreba u skladu sa zahtevima 20 do 24, naznačenatime,da se pomenuti upotrebljavaju za modulaciju, a posebno za inhibiciju aktivnosti PI3 kinaze.

26. Upotreba u skladu sa zahtevom 25, naznačenatime,da pomenuta PI3 kinaza je neka PI3 kinaza y.

27. Farmaceutska kompozicija, naznačena time, da sadrži najmanje jedan piridin metilen azolidinonski derivat u skladu sa bilo kojim od zahteva 1 do 18 i neki njegov farmaceutski prihvatljivi nosač, razređivač ili ekscipijent.

28. Proces za preparaciju piridin metilen azolidinonskog derivat u skladu sa bilo kojim od zahteva 1 do 18,naznačen time,da obuhvata korak reagovanja nekog jedinjenja sa Formulom (II) sa derivatom sa Formulom (III) u prisutnosti baze: gdeR'1 .R*2, A, X, Y i n su kao šta je definisano u bilo kojem od prethodnih zahteva.

29. Jedinjenje,naznačeno time,daje u skladu sa Formulama (Ha), (Ilb), (IIc) i (Ud): gde R<4>je izabran iz H i R<2>; R<5>je neka R<2>grupa gde je prvi atom spojen na pirimidinski prsten izabran iz C, N, S i O i gde kada R4 je NH2, R<5>nije NH2; R<1>, R<2>i n su kao šta je definisano u bilo kojem od prethodnih zahteva; gdeR'1 ,Rz 2 i n su kao šta je definisano u bilo kojem od prethodnih zahteva; gde R<1>, R<2>i n su kao šta je definisano u bilo kojem od prethodnih zahteva i gde najmanje jedan od R<1>ili R<2>nije H; gde R\ R<2>i n su definisani kao u bilo kojem od prethodnih zahteva pod uslovom da jedinjenje sa Formulom (Ud) nije 2-(4-metoksifenil)-3H-Imidazo[4,5-b]piridin-5-karboksaldehid.

30. Jedinjenje u skladu sa zahtevom 29, naznačeno time, daje izabrano iz sledeće grupe: 4-Piperidin-1 -il-pirido [3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid; 4-(4-Fluoro-piperidin-1 -il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid; 4- (4-Metil-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-karbaldehid; Pirido[2,3-b]pirazin-6-karbaldehid; 2- Trimetilsilanil-furo[3,2-b]piridin-5-karbaldehid; 3- Fenil-lH-imidazo[4,5-b]piridin-5-karbaldehid; 3-(3,5-Dimetoksifenil)-3//-imidazo[4,5-^]piridin-5-karbaldehid;Tert-butil5-(5-formil-3//-imidazo[4,5-6]piridin-3-il)indolin-l-karboksilat; 3-(l-acetil-2,3-dihidro-l//-indol-5-il)-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehid; 3-{l-[4-(dimetilamino)butanoil]-2,3-dihidro-l//-indol-5-il}-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5- karbaldehid; 3-[l-(metilsulfonil)-23-dihidro-l//-indol-5-il]-3//-imidazo[4,5-Z>]piridin-5-karbaldehid; 3-{1-[(hlorometil)sulfonil]-2,3^ karbaldehid; 3-{l-[(3-morfolin-4-ilpropil)sulfonil]-2,3-dihidro-l//-indoI-5-il}-3//-imidazo[^ 6]piridin-5-karbaldehid;Tert-butil6-(5-forrnil-3//-imidazo[4,5-6]piridin-3-il)indolin-l -karboksilat; i 3-[l-(metilsulfonil)-2,3-dihidro-l//-indol-6-il]-3//-imidazo[4,5-6]piridin-5-karbaldehid.