PT1786812E - Azolidinonas de metileno piridina e uso dos seus inibidores fosfoinositídeos - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "AZOLIDINONAS DE METILENO DE PIRIDINA E USO DOS SEUS INIBIDORES FOSFOINOSITÍDEO" Âmbito da invenção A presente invenção está relacionada com o uso de derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) para o tratamento e/ou profilaxia de doenças auto-imunes e/ou doenças inflamatórias, doenças cardiovasculares, doenças neurodegenerativas, infecções bacterianas ou virais, alergia, asma, pancreatite, falência multi-orgânica, doenças do rim, agregação plaquetária, cancro, motilidade espermática, rejeição de enxerto ou lesões pulmonares. Especialmente, a presente invenção está relacionada com derivados de azolidinona de metileno de piridina para a modelação, nomeadamente a inibição da actividade ou da função das fosfoinositídeo-3-quinases, PI3Ks.

Antecedentes da invenção

As fosfoinositídeo 3-quinases (PI3Ks) têm um papel critico de sinalização na proliferação celular, sobrevivência da célula, vascularização, tráfico de membrana, transporte de glucose, crescimento de neuritos, pregueamento da membrana, produção de superóxido, reorganização da actina e quimiotaxia (Cantley, 2000, Science, 296, 1655-1657 e

Vanhaesebroeck et al, 2001, Annu. Rev. Biochem., 70, 535- 602) . O termo PI3K é dado a uma família de quinases lipídicas as quais, em mamíferos, consistem em oito PI3K identificadas que são divididas em três sub-famílias de acordo com a sua estrutura e com a especificidade do seu substrato. 2 0 grupo de PI3K Classe I consiste em dois sub-grupos, Classe IA e Classe IB. A Classe IA consiste numa unidade reguladora de 85 kDa (responsável pelas interacções proteina-proteina por via da interacção do domínio de homologia 2 Src (SH2) com resíduos de fosfotirosina de outras proteínas) e uma sub-unidade catalítica de HOkDa. Três formas catalíticas (ρΙΟΟα, ρΙΙΟβ e ρΙΙΟδ) e cinco isoformas reguladoras (ρ85α, p85 β, ρ55γ, p55 α e p50 α) existem para esta classe. A classe IB é estimulada pelas sub-unidades βγ da proteína G de proteínas G heterodiméricas. O único membro caracterizado da Classe IB é ΡΙ3Κγ (sub-unidade catalítica ρΙΙΟγ complexada com uma proteína reguladora de 101-kDa, plOl) .

As PI3Ks de Classe II compreendem isoformas α, β e γ, que têm aproximadamente 170 kDa e são caracterizadas pela presença de um domínio C2 C-terminal.

As PI3Ks de Classe III incluem as 3-quinases específicas do fosfatidilinositol.

As isoformas evolutivamente conservadas pllOa e β são expressadas ubiquamente, enquanto que as δ e γ são mais especificamente expressadas no sistema de células hematopoéticas, células do músculo liso, miócitos e células endoteliais (Vanhaesebroeck et al, 1997, Trends Biochem Sei., 22(7), 267-72) . A sua expressão pode também ser regulada de uma forma indutível dependendo do tipo celular-tecidular e estímulo, assim como do contexto da doença. 3

As PI3Ks são enzimas envolvidas na sinalização de fosfolipidos e são activadas em resposta a uma variedade de sinais extra-celulares tais como factores de crescimento, mitogénios, integrinas (interacções célula-célula) hormonas, citoquinas, virus e neurotransmissores e também por regulação intra-celular cruzada através de outras moléculas sinalizadoras (comunicação cruzada, em que o sinal original pode activar algumas vias paralelas que, num segundo passo, transmitem sinais às PI3Ks por eventos de sinalização intra-celulares) , tais como GTPases pequenas, quinases ou fosfatases, por exemplo. 0 fosfatidilinositol (Ptdlns) é o bloco de construção base para os lipidos de inositol intracelulares nas células eucarióticas, consistindo em D-mio-inositol-l-fosfato (InslP) ligado por via do seu grupo fosfato ao ciacilglicerol. 0 grupo inositol da frente do Ptdlns tem cinco grupos hidroxi livres e verificou-se que três desses são fosforilados nas células em diferentes combinações. 0 Ptdlns e seus derivados fosforilados são colectivamente referidos como fosfolipidos ou fosfoinositideos de inositol (Pis) . Oito espécies de PI foram documentadas em células eucarióticas (Vanhaesebroeck et al, 2001, acima). Todos os Pis residem em membranas e são substratos para quinases, fosfatases e lipases.

In vitro, as PI3Ks fosforilam o grupo 3-hidroxilo do anel inositol em três substratos diferentes: fosfatidilinositol (Ptdlns), fosfatidilinositol-4-fosfato (PI(4)P) e fosfatidilinositol-4,5-bifosfato (PI(4,5)P2) , formando respectivamente três produtos lipidicos, nomeadamente fosfatidilinositol 3-monofosfato (PI(3)P), fosfatidilinositol 3,4-bisfosfato (PI(3,4)P2) e 4 fosfatidilinositol 3,4,5-trisfosfato (PI(3,4,5)P3 (ver

Esquema A a seguir).

O

Ptdlns (Fosfatidilinositol)

PI(3)P (Fosfatidilinositol 3- monofosfato)

Esquema A 0 substrato preferido para as PI3Ks de Classe I é PI(4,5)P2. Os PIKs de Classe II têm uma forte preferência por Ptdlns como substrato em relação a PI(4)P e PI(4,5)P2. As PI3Ks de Classe III podem usar somente Ptdlns como substrato in vivo e são provavelmente responsáveis pela formação da maioria dos PI(3)P nas células (Vanhaesebroeck et al, 2001, acima). A via de começa com (ligantes sinalização intracelular dos a ligação de uma molécula extra celulares, estímulos, estímulos, fosfoinositídeos de sinalização dimerização do 5 receptor, transactivação por receptor heterólogo (e.g. receptor tirosina quinase)) a um receptor transmembranar ligado a proteína G integrado na membrana plasmática resultando na activação das PI3Ks.

Uma vez activadas, as PI3Ks convertem o fosfolípido da membrana PI(4,5)P2 em PI(3,4,5)P3 o qual por sua vez pode ser também convertido numa outra forma fosforilada 3' dos fosfoinositídeos por fosfatases de fosfoinositídeo 5' específicas, resultando assim na actividade enzimática da PI3K directa ou indirectamente na formação de dois sub-tipos de 3'-fosfoinositídeo os quais funcionam como segundos mensageiros na transdução de sinal intra-celular (Leslie et al, 2001, Chem. Rev. 101 (8) 2365-80; Katso et al, 2001, Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 1, 615-75 e Toker et al, 2002, Cell Mol. Life Sei. 59(5) 761-79). 0 de papel como segundos mensageiros dos produtos fosforilados da acção de Ptdlns está envolvido numa diversidade de vias de transdução de sinal, incluindo as essenciais para a proliferação celular, diferenciação celular, crescimento celular, tamanho da célula, sobrevivência da célula, apoptose, adesão, motilidade celular, migração celular, quimiotaxia, invasão, rearranjo do citoesqueleto, variações na forma da célula, tráfico vesicular e por via metabólica (Stein, 2000, Mol. Med.

Today 6(9) 347-57). A quimiotaxia - movimento das células em direcção a um gradiente de concentração de atractivos químicos, também chamados de quimiocinas, está envolvida em muitas doenças importantes tais como inflamação/auto-imunidade, neurodegeneração, angiogénese, invasão/metástases e cicatrização de feridas (Wyman et al, 2000, Immunol Today 6 21 (6) 260-4; Hírsch et al, 2000, Science 287 (5455) 1049-53; Hirsch et al, 2001, FASEB J. 15(11) 2019-21 e Gerard et al, 2001, Nat Immunol. 2(2) 108-15).

Acredita-se, portanto, que a activação da PI3-quinase está envolvida numa série de respostas celulares incluindo crescimento celular, diferenciação e apoptose (Parker et al, 1995, Current Biology, 5, 577-99; Yao et al, 1995,

Science, 267, 2003-05) .

Estudos bioquímicos recentes mostraram que as PI3Ks de Classe I (e.g. Classe IB isoforma ΡΙ3Κγ) são enzimas quinase com especificidade dupla, i.e. exibem actividade como quinase lipídica (fosforilação de fosfo-inositídeos) assim como actividade como proteína quinase, dado que são capazes de induzir a fosforilação de outra proteína como substratos, incluindo auto-fosforilação como mecanismo regulador intramolecular.

As PI3Ks parecem estar envolvidas em vários aspectos da activação dos leucócitos. Uma actividade PI3-quinase associada a p85 demonstrou associar-se fisicamente com o domínio citoplásmico do CD28, o qual é uma importante molécula co-estimuladora para a activação de células T em resposta ao antigénio (Pages et al, 1994, Nature, 369, 327-29). Estes efeitos estão ligados ao aumento na transcripção de um número de genes incluindo interleucina-2 (IL-2), um importante factor de crescimento das células T (Fraser et al., 1991, Science, 251, 313-16). A mutação do CD28, para que ele possa interagir mais com a PI3-quinase, leva à falha do inicio da produção de IL-2, sugerindo um papel crítico da PI3-quinase na activação das células T. 7

Processos celulares nos quais as PI3Ks desempenham um papel essencial incluem supressão da apoptose, reorganização do esqueleto de actina, crescimento de miócitos cardíacos, estimulação da glicogénio sintase pela insulina, priming de neutrófilos mediado por TNFa e formação de superóxido, e migração de leucócitos e adesão às células endoteliais. A ΡΙ3Κγ foi identificada como um mediador da regulação G beta-gama dependente da actividade de JNK em que G beta-gama são subunidades de proteínas G heterotriméricas (Lopez-Ilasaca et al, 1998, J. Biol. Chem. 273(5) 2505-8) .

Recentemente, tem sido descrito que a ΡΙ3Κγ retransmite os sinais inflamatórios através de vários receptores ligados a G(i) (Laffargue et al., 2002, Immuníty 16(3) 441-51) e é central na função dos mastócitos, os estímulos no contexto dos leucócitos, imunologia incluem citoquinas, quimiocinas, adenosinas, anticorpos, integrinas, factores de agregação, factores de crescimento, vírus ou hormonas por exemplo (Lawlor et al., 2001, J. Cell. Sei., 114 (Pt 16) 2903-1 e Stephens et al, 2002, Curr. Opinion Cell Biol. 14(2), 203-13) .

Inibidores específicos contra membros individuais de uma família de enzimas fornecem ferramentas valiosas para decifrar as funções de cada enzima.

Dois compostos, LY294002 e wortmanina (cf. a seguir), foram largamente usados como inibidores da Pl3-quinase. Estes compostos são inibidores não específicos da PI3K, dado que não fazem distinção entre os quatro membros das PI3-quinases da Classe I. 8

LY294002

Valores de IC50 da wortmanina contra cada uma das várias PI3-quinases da Classe I são num intervalo de 1-10 nM e os valores de IC50 para LY294002 contra cada uma destas PI3-quinases são cerca de 15-20 μΜ (Fruman et al, 1998, Ann. Rev. Biochem., 67, 481-507) , também 5-10 mM para a proteína quinase CK2 e alguma actividade inibidora para as fosfolipases. A Wortmanina é um metabolito fúngico o qual inibe irreversivelmente a actividade da PI3K ligando-se covalentemente ao domínio catalítico desta enzima. A inibição da actividade da PI3K pela wortmanina elimina a subsequente resposta celular ao factor extra celular (Thelen et al, 1994, Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 91, 4960-64) . As experiências com wortmanina mostram que a actividade da PI3K em células de linhagem hematopoiética, particularmente neutrófilos, monócitos, e outros tipos de leucócitos, está envolvida em muita da resposta imune sem memória associada à inflamação aguda e crónica.

Com base em estudos em que se usa wortmanina, é evidente que a função da PI3-quinase é também necessária para alguns aspectos da sinalização de leucócitos através dos receptores acoplados à proteína G (Thelen et al, 1994).Mais ainda, tem sido mostrado que a wortmanina e o LY294002 bloqueiam a migração neutrofílica e libertam superóxido. No entanto, na medida em que estes compostos não distinguem 9 entre as várias isoformas de PI3K, permanece por esclarecer qual isoforma ou isoformas particulares de PI3K estão envolvidas neste fenómeno.

Alguns resultados indicaram que os inibidores da PI3K, por exemplo, o LY294002, podem aumentar a actividade antitumoral in vivo de certos agentes citotóxicos (e.g. paclitaxel) (Grant, 2003, IDrugs, 6(10), 946-948) .

Recentemente, derivados da tiazolidina foram desenvolvidos como inibidores da PI3K (WO 2004/007491; WO 2004/056820; WO 2004/052373). A WO 2004/007491 divulga derivados de benzeno fundidos com azolidinediono-vinilo da estrutura seguinte:

A WO 2004/056820 divulga derivados benzoxazina da estrutura seguinte:

R W—Q A WO 2004/052373 divulga derivados benzoxazin-3-onas da estrutura seguinte: 10

A alta relevância da via da PI3K em algumas doenças largamente disseminadas reforça a necessidade de desenvolver inibidores, incluindo inibidores selectivos, de PIKs.

Sumário da invenção É um objecto da invenção fornecer substâncias que sejam adequadas para o tratamento e/ou prevenção de doenças relacionadas com fosfoinositídeo-3-quinases, PI3Ks. É também um objecto da presente invenção fornecer substâncias que são adequadas para o tratamento e/ou prevenção de doenças auto-imunes e/ou inflamatórias. É também um objecto da presente invenção fornecer substâncias que são adequadas para o tratamento e/ou prevenção de doenças cardiovasculares. É também um objecto da presente invenção fornecer substâncias que são adequadas para o tratamento e/ou prevenção de doenças neurodegenerativas. É também um objecto da presente invenção fornecer substâncias que são adequadas para o tratamento e/ou prevenção de uma doença seleccionada de infecções bacterianas e virais, doenças do rim, agregação plaquetária, cancro, transplante, rejeição de enxerto, 11 lesões pulmonares, doenças respiratórias e estados isquémicos. É especialmente um objecto da presente invenção fornecer compostos químicos que são capazes de modular, especialmente por inibirem a actividade ou função das fosfoinositídeo-3-quinases, as PI3Ks em estados de doença em mamíferos, especialmente em seres humanos. É ainda mais um objecto da presente invenção fornecer uma nova categoria de formulações farmacêuticas para o tratamento de e/ou doenças mediadas seleccionadas a partir de auto-imunes, doenças inflamatórias, doenças cardiovasculares, doenças neurodegenerativas, infecções bacterianas e virais, doenças do rim, agregação plaquetária, cancro, transplante, rejeição de enxerto, lesões pulmonares, doenças respiratórias e estados isquémicos. É também um objecto da presente invenção divulgar um método para o tratamento e/ou prevenção de doenças seleccionadas a partir de auto-imunes, doenças inflamatórias, doenças cardiovasculares, doenças neurodegenerativas, infecções bacterianas e virais, doenças do rim, agregação plaquetária, cancro, transplante, rejeição de enxerto ou lesões pulmonares, doenças respiratórias e estados isquémicos.

Num primeiro aspecto, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de fórmula (I): 12

em que A, R1, R2, X, Y e n são definidos na descrição pormenorizada a seguir.

Num segundo aspecto, a invenção fornece um composto de acordo com a Fórmula (I) para uso como um medicamento.

Num terceiro aspecto, a invenção fornece um uso de um composto de acordo com a Fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de uma doença seleccionada a partir de auto-imunes, doenças inflamatórias, doenças cardiovasculares, doenças neurodegenerativas, infecções bacterianas e virais, doenças do rim, agregação plaquetária, cancro, transplante, rejeição de enxerto ou lesões pulmonares, doenças respiratórias e estados isquémicos e outras doenças ou estados associados com as fosfoinositídeo-3-quinases, PI3Ks, compreendendo as PI3K α e γ.

Num quarto aspecto, a invenção fornece uma composição farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto de acordo com a Fórmula (I) e um seu transportador, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis.

Num quinto aspecto, a invenção divulga um método para tratar um doente que sofra de uma doença seleccionada a partir de auto-imunes, doenças inflamatórias, doenças cardiovasculares, doenças neurodegenerativas, infecções bacterianas e virais, doenças do rim, agregação plaquetária, cancro, transplante, rejeição de enxerto ou 13 lesões pulmonares, doenças respiratórias e estados isquémicos e outras doenças ou estados associados com as fosfoinositídeo-3-quinases, PI3Ks. 0 método compreende administrar um composto de acordo com a Fórmula (I).

Num sexto aspecto, a invenção fornece um método de síntese de um composto de acordo com a Fórmula (I) .

Num sétimo aspecto, a invenção fornece compostos de acordo com a Fórmula (II).

Descrição pormenorizada da invenção:

Os parágrafos seguintes fornecem definições das várias fracções químicas que compõem os compostos de acordo com a invenção e são entendidos para serem aplicadas uniformemente ao longo da especificação e das reivindicações a menos que definições diferentes expressamente estabelecidas forneçam uma definição mais vasta. "Ci-C6-alquilo" refere-se a grupos alquilo monovalentes com 1 até 6 átomos de carbono. Este termo é exemplificado por grupos tais como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, tert-butilo, n-hexilo e afins. Por analogia, Ci-Ci2-alquilo refere-se a grupos alquilo monovalentes com 1 até 12 átomos de carbono, incluindo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, tert-butilo, n-hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo e afins "Arilo" refere-se a um grupo carboxílico aromático insaturado de desde 6 até 14 átomos de carbono com um único anel {e.g., fenilo) ou anéis múltiplos condensados {e.g., naftilo) . Arilo inclui fenilo, naftilo, fenantrenilo e afins. 14 "Ci-C6-alquil arilo" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte arilo, incluindo benzilo, fenetilo e afins. "Heteroarilo" refere-se a um grupo heteroaromático monociclico, ou um anel fundido bicíclico ou tricíclico. Exemplos específicos de grupos heteroaromáticos incluem opcionalmente piridilo, pirrolilo, pirimidinilo, furilo, tienilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxalolilo, tiazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4- triazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadia-zolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1,3,4-triazinilo, 1,2,3-triazinilo, benzofurilo, [2,3-dihidro]benzofurilo, isobenzofurilo, benzotienilo, benzotriazolilo, isobenzotienilo, indolilo, isoindolilo, 3H-indolilo, benzimidazolilo, imidazo[1,2-a]piridilo, benzotiazolilo, benzoxa-zolilo, quinolizinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, quinoxalinilo, cinolinilo, naftaridinilo, pirido[3,4- b]piridilo, pirido[3,2-b]piridilo, pirido[4,3-b]piridilo, quinolilo, isoquinolilo, tetrazolilo, 5,6,7,8- tetrahidroquinolilo, 5,6,7,8-tetrahidroisoquinolilo, purinilo, pteridinilo, carbazolilo, xantenilo ou benzoquinolilo substituídos. "Ci-Cgalquil heteroarilo" refere-se a grupos Ci-C6_alquilo com um substituinte heteroarilo, incluindo 2-furilmetilo, 2-tienilmetilo, 2-(lH-indol-3-il)etilo e afins. "C2-C6-alquenilo" refere-se grupos alquenilo preferencialmente com desde 2 até 6 átomos de carbono e com pelo menos 1 ou 2 sítios de insaturação alquenilo. Preferencialmente os grupos alquenilo incluem etenil(-CH=CH2) , n-2-propenil (alil,-CH2CH=CH2) e afins. "C2-C6-alquenil arilo" refere-se a grupos C2-C6-alquenilo com um substituinte arilo, incluindo 2-fenilvinilo e afins. 15 "C2-C6-alquenil heteroarilo" refere-se a grupos C2-C6-alquenilo com um substituinte heteroarilo, incluindo 2— (3 — piridinil)vinilo e afins. "C2-C6-alquinilo" refere-se a grupos alquinilo preferencialmente com desde 2 até 6 átomos de carbono e com pelo menos 1-2 sítios de insaturação alquinilo, grupos alquinilo preferidos incluem etenil(-C^CH), propargil(-CH2C=CH), e afins. "C2-C6-alquinil arilo" refere-se a grupos C2-C6-alquinilo com um substituinte arilo, incluindo feniletinilo e afins. "C2-C6-alquinil heteroarilo" refere-se a grupos C2-C6-alquinilo com um substituinte heteroarilo, incluindo 2-tieniletinilo e afins. "C3-C8_cicloalquilo" refere-se a um grupo carboxilico saturado de desde 3 até 8 átomos de carbono com um único anel (e.g., ciclohexilo) ou anéis condensados múltiplos {e.g., norbornilo). C3-C8-cicloalquilo inclui ciclopentilo, ciclohexilo, norbornilo e afins. "Heterocicloalquilo" refere-se a um grupo C3-C8-cicloalquilo de acordo com a definição acima, no qual até 3 átomos de carbono são substituídos por heteroátomos escolhidos a partir do grupo que consiste em 0, S, NR, R sendo definido como hidrogénio ou metilo. Heterocicloalquilo inclui pirrolidina, piperidina, piperazina, 1-metilpiperazina, morfolina, tetrahidrofurano e afins. 16 "Ci-Cõ-alquil cicloalquilo" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte cicloalquilo, incluindo ciclohexilmetilo, ciclopentilpropilo, e afins. "Ci-C6-alquil heterocicloalquilo" refere-se grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte heterocicloalquilo, incluindo 2-(1-pirrolidinil)etilo, morfolinilmetilo, morfoliniletilo, morfolinilpropilo, piperidiniletilo, tetrahidrofuranilmetilo e afins. "Carboxi" refere-se ao grupo -C(0)0H. "Ci-C6-alquil carboxi" refere-se grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte carboxi, incluindo 2-carboxietilo e afins. "Acilo" refere-se ao grupo -C(0)R em que R inclui "Ci-Cô-alquilo", "arilo", "heteroarilo", "C3-C8-cicloalquilo", "Heterocicloalquilo", "Ci-C6-alquil arilo" ou " Ci-C6-alquil heteroarilo". "Ci-C6-alquil acilo" refere-se a grupos Ci-C6-alquil com um substituinte acilo, incluindo 2-acetiletilo e afins. "Aril acilo" refere-se a grupos arilo com um acilo substituinte, incluindo 2-acetilfenilo e afins. "Heteroaril acilo" refere-se a grupos hetereoarilo com um substituinte acilo, incluindo 2-acetilpiridilo e afins. "C3-C8-(hetero)cicloalquil acilo" refere-se a grupos cicloalquilo ou heterocicloalquilo com 3 até 8 membros com um substituinte acilo. "Aciloxi" refere-se ao grupo -0C(0)R em que R inclui H, "Ci-C6-alquilo", "C2-C6-alquenilo", "C2-C6-alquinilo", 17 "C3-C8-cicloalquilo", heterocicloalquilo "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-Cô-alquil arilo" ou "Ci-C6-alquil heteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-Ce~ alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil arilo", "C2-C6-alquinilheteroarilo", "Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-C6-alquil heterocicloalquilo". "Ci-Cg-alquil aciloxi" refere-se a grupos Ci-Cg-alquilo com um substituinte aciloxi, incluindo éster etílico do ácido amino-propionico e afins. "Alcoxi" refere-se ao grupo -0-R em que R inclui "C1-C6-alquilo" ou "arilo" ou "hetero-arilo" ou "Ci-Cô-alquil arilo" ou "Ci-C6-alquil heteroarilo". Grupos alcoxi preferidos incluem a título de exemplo, metoxi, etoxi, fenoxi e afins. "Ci-C6-alquil alcoxi" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte alcoxi, incluindo metoxi, metoxietilo e afins. "Alcoxicarbonilo" refere-se ao grupo -C(0)0R em que R inclui H, "Ci-C6-alquilo" ou "arilo" ou "heteroarilo" ou "Ci-C6-alquil arilo" ou " Ci-C6-alquil heteroarilo". "Ci-C6_alquil alcoxicarbonilo" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte alcoxicarbonilo, incluindo 2-(benziloxicarbonil)etilo e afins. "Aminocarbonilo" refere-se ao grupo -C(0)NRR' em que cada R, R' inclui independentemente hidrogénio ou Ci-C6-alquilo ou arilo ou heteroarilo ou "Ci-C6-alquil arilo" ou "Ci-C6-alquil hetero-arilo". 18 "Ci-Cõ-alquil aminocarbonilo" refere-se a grupos Ci-Cõ-alquilo com um substituinte aminocarbonilo, incluindo 2-(dimetilaminocarbonil)etilo e afins. "Acilamino" refere-se ao grupo -NRC(0)R' em que cada R, R' são independentemente hidrogénio, "Ci-Ce-alquilo ", "C2-C6- alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "C3-C8-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-C6-alquil arilo" ou "Ci-C6-alquil heteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-C6 -alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil arilo", "C2-C6-alquinilheteroarilo", "Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-C6-alquil heterocicloalquilo". "Ci-C6-alquil acilamino" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte acilamino, incluindo 2-(propionilamino)etilo e afins. "Ureido" refere-se ao grupo -NRC(0)NR'R" em que cada R, R’, R" são independentemente hidrogénio, "Ci-Cõ-alquilo", "C2-C6-alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "C3-C8-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-Cõ-alquil arilo" ou "Ci-Cô-alquil heteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-C6-alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil arilo", "C2-C6-alquinilheteroarilo", "Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-Cô-alquil heterocicloalquilo", e em que R' e R", em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, podem opcionalmente formar um anel heterocicloalquilo com 3-8-membros. "Ci-Cõ-alquil ureido" refere-se a grupos Ci-C6_alquilo com um substituinte ureido, incluindo 2-{Ν' -metilureido)etilo e afins. 19 "Carbamato" refere-se ao grupo -NRC(0)0R' em que cada R, R' é independentemente hidrogénio, " Ci-Ce-alquilo", "C2-C6- alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "Cs-Cs-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-Cg-alquil arilo" ou "Ci-Ce-alquilheteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-C6-alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil arilo", "C2-Ce-alquinil heteroarilo", "Ci-Cô-alquil cicloalquilo", " Ci-Cõ- alquil heterocicloalquilo". "Amino" refere-se ao grupo -NRR' em que cada R, R' é independentemente hidrogénio ou "Ci-C6alquilo" ou "arilo" ou "heteroarilo" ou "Ci-C6-alquil arilo" ou "Ci-Cg-alquil heteroarilo", ou "cicloalquilo", ou "heterocicloalquilo", e em que R e R', em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, podem opcionalmente formar um anel heterocicloalquilo com 3-8 membros. "Ci-Cô-alquil amino" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte amino, incluindo 2-(1-pirrolidinil)etilo e afins. "Amónio" refere-se a um grupo carregado positivamente -N+RR'R", em que cada R, R', R" são independentemente "C1-C6-alquilo" ou "Ci-C6-alquil arilo" ou "Ci-C6-alquil heteroarilo", ou "cicloalquilo", ou "heterocicloalquilo", e em que R e R’, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, podem opcionalmente formar um anel heterocicloalquilo com 3-8 membros. "Ci-C6-alquil amónio" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte amónio, incluindo 2-(1-pirrolidinil)etilo e afins. 20 "Halogénio" refere-se a átomos de flúor, cloro, bromo e iodo. "Sulfoniloxi" refere-se a um grupo -0S02-R em que R é seleccionado a partir de H, "Ci-C6-alquilo", "Ci-C6-alquilo" substituído com halogénios, e.g., um grupo -0S02-CF3, "C2-C6-alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "C3-C8-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-Ce-alquilo arilo" ou "Ci-Cõ-alquil heteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-C6-alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil arilo", "C2-C6-alquinilheteroarilo", " Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-Cõ-alquil heterocicloalquilo". "Ci-Cõ-alquil sulfoniloxi" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com a substituinte sulfoniloxi, incluindo 2-(metilsulfoniloxi)etilo e afins. "Sulfonilo" refere-se ao grupo "-S02-R" em que R é seleccionado a partir de H, "arilo", "heteroarilo", "Ci-C6-alquilo", "Ci-C6-alquilo" substituído com halogénios, e.g., um grupo -S02-CF3, "C2-C6-alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "C3- C8-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-C6-alquil arilo" ou "Ci-C6-alquil heteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-C6-alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil arilo", "C2-C6- alquinilheteroarilo", "Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-C6-alquil heterocicloalquilo". "Ci-Cõ-alquil sulfonilo" refere-se a grupos Ci-Cõ-alquilo com a substituinte sulfonilo, incluindo 2-(metilsulfonil)etilo e afins. "Sulfinilo" refere-se a um grupo "-S(O)-R" em que R é seleccionado a partir de H, "Ci-C6-alquilo", "Ci-C6-alquilo" 21 substituído com halogénios, e.g., um grupo -SOCF3, "C2-C6-alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "C3-C8-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", " Ci-C6-alquil arilo" ou "Ci-C6-alquil heteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-C6-alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil arilo", "C2-C6-alquinilheteroarilo", "Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-C6-alquil heterocicloalquilo". "Ci-Cô-alquil sulfinilo" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte sulfinilo, incluindo 2-(metilsulfinil)etilo e afins. "Sulfanilo" refere-se a grupos -S-R em que R inclui H, "Ci-C6-alquilo", "Ci-Ce-alquilo" substituído com halogénios, e.g., um grupo -SO-CF3, "C2-C6-alquenilo", "C2-Ce~ alquinilo", "C3-C8-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", " Ci-C6-alquil arilo" ou "Ci-Cõ-alquil heteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-C6-alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil arilo", "C2-C6-alquinilheteroarilo", " Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-Cõ-alquil heterocicloalquilo". Grupos sulfanilo preferidos incluem metilsulfanilo, etilsulfanilo, e afins. "Ci-C6-alquil sulfanilo" refere-se a grupos Ci-Cô-alquilo com um substituinte sulfanilo, incluindo 2-(etilsulfanil)etilo e afins. "Sulfonilamino" refere-se ao grupo -NRSO2R' em que cada R, R' inclui independentemente hidrogénio, "Ci-C6-alquilo", "C2-C6-alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "C3-C8-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-C6-alquil arilo" ou "Ci-C6-alquil heteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-C6-alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil 22 arilo", "C2-C6-alquinilheteroarilo", "Ci-Cõ-alquil cicloalquilo", "Ci-C6-alquil heterocicloalquilo". "Ci-C6-alquil sulfonilamino" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte sulfonilamino, incluindo 2-(etilsulfonilamino)etilo e afins. "Aminosulfonilo" refere-se ao grupo -S02-NRR' em que cada R, R' inclui independentemente hidrogénio, "Ci-C6-alquilo", "C2-C6-alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "Cs-Ce-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-C6-alquil arilo" ou "Ci-C6-alquil heteroarilo", "C2-C6-alquenil arilo", "C2-C6-alquenil heteroarilo", "C2-C6-alquinil arilo", "C2-C6- alquinilheteroarilo", "Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-C6-alquil heterocicloalquilo". "Ci-C6-alquil aminosulfonilo" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo com um substituinte aminosulfonilo, incluindo 2-(ciclohexilaminosulfonil)etilo e afins. "Substituído ou não substituído": A menos que limitado de outro modo pela definição do substituinte individual, os grupos estabelecidos acima, tais como "alquenilo", "alquinilo", "arilo", "heteroarilo", "cicloalquilo", "heterocicloalquilo" etc. os grupos podem opcionalmente ser substituído com desde 1 até 5 substituintes seleccionados a partir do grupo que consiste em "Ci-C6-alquilo", "C2-C6- alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "Ci-C6-alquil arilo", "Ci-C6-alquil heteroarilo", "Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-Ce-alquil heterocicloalquilo", "amino", "amónio", "acilo", "aciloxi", "acilamino", "aminocarbonilo", "alcoxicarbonilo", "ureido", "arilo", "carbamato", "heteroarilo", "sulfinilo", "sulfonilo", "alcoxi", "sulfanilo", "halogénio", "carboxi", trihalometilo, ciano, hidroxi, mercapto, nitro, e afins. 23 "Substituído" refere-se a grupos substituídos com desde 1 até 5 substituintes seleccionados a partir do grupo que consiste em "Ci-C6-alquilo", "C2-C6-alquenilo", "C2-C6-alquinilo", "cicloalquilo", "heterocicloalquilo", 'Όχ-Οβ-alquil arilo", "Ci-C6-alquil heteroarilo", "Ci-C6-alquil cicloalquilo", "Ci-C6-alquil heterocicloalquilo", "amino", "aminosulfonilo", "amónio", "acil amino", "amino carbonilo", "arilo", "heteroarilo", "sulfinilo", "sulfonilo", "alcoxi", "alcoxi carbonilo", "carbamato", "sulfanilo", "halogénio", trihalometilo, ciano, hidroxi, mercapto, nitro, e afins. "Sais ou complexos farmaceuticamente aceitáveis" referem-se a sais ou complexos dos compostos de Fórmula (I) identificados a seguir que retêm a desejada actividade biológica. Exemplos desses sais incluem, mas não são limitados a sais de adição de ácido formados com ácidos inorgânicos (e.g., ácido hidroclórico, ácido hidrobrómico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico, e afins), e sais formados com ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido málico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido ascórbico, ácido benzóico, ácido tânico, ácido pamóico, ácido algínico, ácido poliglutâmico, ácido naftaleno sulfónico, ácido naftaleno disulfónico, e ácido poli-galacturónico. Os referidos compostos podem também ser administrados como sais quaternários farmaceuticamente aceitáveis conhecidos por um especialista na técnica, os quais incluem especificamente o sal de amónio quaternário da fórmula -NR, R',R"+ Z”, em que R, R', R" são independentemente hidrogénio, alquilo, ou benzilo, Οχ-Οβ-alquilo, C2-C6-alquenilo, C2-C6-alquinilo, Cx-C6-alquil arilo, Cx-Cô-alquil heteroarilo, cicloalquilo, 24 heterocicloalquilo, e Z é um contra ião, incluindo cloreto, brometo, iodeto, -O-alquilo, toluenosulfonato, metilsulfonato, sulfonato, fosfato, ou carboxilato (tal como benzoato, succinato, acetato, glicolato, maleato, malato, fumarato, citrato, tartrato, ascorbato, cinamoato, mandeloato, e difenilacetato). "Derivado farmaceuticamente activo" refere-se a qualquer composto que após administração ao destinatário, é capaz de fornecer directa ou indirectamente, a actividade aqui divulgada. 0 termo "indirectamente" também engloba pró-fármacos que podem ser convertidos na forma activa do fármaco através de enzimas endógenas ou metabolismo.

Verificou-se agora que os compostos da presente invenção são moduladores das Fosfatoinositideo 3-quinases (PI3Ks), compreendendo PI3K α e γ. Quando a enzima fosfatoinositideo 3-quinase (PI3K) é inibida pelos compostos da presente invenção, a PI3K é incapaz de exercer os seus efeitos enzimáticos, biológicos e/ou farmacológicos. Os compostos da presente invenção são deste modo úteis no tratamento e prevenção de doenças auto-imunes e/ou doenças inflamatórias, doenças cardiovasculares, doenças neurodegenerativas, infecções bacterianas ou virais, doenças do rim, agregação plaquetária, cancro, transplantes, rejeição de enxertos ou lesões pulmonares. A Fórmula Geral (I) de acordo com a presente invenção compreende também os seus tautómeros, os seus isómeros geométricos, as suas formas opticamente activas como enantiómeros, diastereómeros e suas formas racemato, assim como os seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Sais farmaceuticamente aceitáveis da Fórmula (I) preferidos são sais de adição de ácido formados com ácidos 25 farmaceuticamente aceitáveis como hidrocloreto, hidrobrometo, sulfato ou bisulfato, fosfato ou fosfato de hidrogénio, acetato, benzoato, succinato, fumarato, maleato, lactato, citrato, tartrato, gluconato, metanosulfonato, benzenosulfonato, e sais para-toluenosulfonato.

Os compostos de acordo com a Fórmula (I) são adequados para a modelação, especialmente para a inibição da actividade das fosfatoinositideo 3-quinases (PI3K). Acredita-se, portanto, que os compostos da presente invenção são também particularmente úteis para o tratamento e/ou prevenção de doenças, que são mediadas pelas PI3Ks, particularmente PI3K α e/ou PI3K γ. 0 referido tratamento envolve a modulação -especialmente a inibição ou a regulação para baixo - das fosfatoinositido 3-quinases.

Os compostos de acordo com a Fórmula (I) são adequados para uso como medicamento.

Numa forma de realização, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I):

m em que R1 é seleccionado a partir de H, halogénio, Ci-Cô-alquilo opcionalmente substituído, C2-C6_alquenilo opcionalmente substituído, C2-C6-alquinilo opcionalmente substituído, Ci-C6-alquil alcoxi opcionalmente substituído, alcoxicarbonilo opcionalmente substituído, acilo opcionalmente substituído, sulfonilo opcionalmente 26 substituído, sulfanilo opcionalmente substituído, sulfinilo opcionalmente substituído, alcoxi opcionalmente substituído e amino opcionalmente substituído; R2 é seleccionado a partir de H; halogénio; Ci-Cô-alquilo opcionalmente substituído; C2-C6-alquenilo opcionalmente substituído; C2-C6-alquinilo; arilo opcionalmente substituído, tal como fenilo e 3,5-dimetoxi fenilo; heteroarilo opcionalmente substituído, tal como 2,3-di-hidroindolilo opcionalmente substituído (e.g. éster tert-butílico do ácido 2,3-dihidro-indole-l-carboxílico, 2,3-dihidro-lH-indol-5-ilo, Acetil-2,3-dihidro-lH-indol-5-ilo, 1-(4-Dimetilamino-butiril)-2,3-dihidro-lH-indol-5-ilo, l-Metanosulfonil-2,3-dihidro-lH-indol-5-ilo, l-Clorometanosulfonil-2,3-dihidro-lH-indol-5-ilo, 1-(3-

Morfolin-4-il-propano-l-sulfonil)-2,3-dihidro-lH-indol-5-il); Cs-Cs-cicloalquilo opcionalmente substituído; C3-C8-heterocicloalquilo opcionalmente substituído, incluindo piperidinilo opcionalmente substituído tal como 1-piperidinilo, 4-fluoro-l-piperidinilo, 4- (trifluorometil)- 1-piperidinilo; aril Ci-C6alquilo opcionalmente substituído; heteroaril Ci-Cõ-alquilo opcionalmente substituído; C3-C8-cicloalquil Ci-C6-alquilo opcionalmente substituído e C3-C8-heterocicloalquil C1-C6-alquilo opcionalmente substituído; Ci-C6-alquil alcoxi opcionalmente substituído; alcoxicarbonilo opcionalmente substituído; acilo opcionalmente substituído; sulfonilo opcionalmente substituído; sulfanilo opcionalmente substituído; sulfinilo opcionalmente substituído; alcoxi opcionalmente substituído e amino opcionalmente substituído. X é seleccionado a partir de S, NH e 0; Y é seleccionado a partir de 0, Se NR3, em que R3 é seleccionado a partir de H, Ci-C6_alcoxi opcionalmente substituído, Ci-C6-alquilo opcionalmente substituído, C2-C6- 27 alquenilo opcionalmente substituído, C2-C6-alquinilo opcionalmente substituído, Ci-Cõ-alquil arilo opcionalmente substituído, ciano e sulfonilo opcionalmente substituído; A é um grupo heteroarilo opcionalmente substituído, incluindo pirimidinilo opcionalmente substituído, pirazinilo opcionalmente substituído, furilo opcionalmente substituído e imidazolilo opcionalmente substituído; n é um número inteiro seleccionado a partir de 1 e 2; assim como os seus isómeros geométricos, as suas formas opticamente activas como enantiómeros, diastereómeros e as suas formas de racemato, assim como os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Numa forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que R' é H.

Numa outra forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que R2 é H.

Numa outra forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que R2 é C3-C8-heterocicloalquilo opcionalmente substituído.

Numa outra forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que R2 é seleccionado a partir de arilo opcionalmente substituído e heteroarilo opcionalmente substituído.

Numa outra forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que R3 é H. 28

Numa outra forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que X é S.

Numa outra forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que Y é 0.

Numa outra forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que Y é S.

Numa outra forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que n é 1.

Numa outra forma de realização específica, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que n é 2.

Numa forma de realização preferida, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que A é de modo a formar em conjunto com o anel piridina o seguinte grupo(Ia):

em que R1, R2 e n são como definido acima.

Numa outra forma de realização preferida, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de 29 Fórmula (I) em que A é de modo a formar em conjunto com o anel piridina o seguinte grupo (Ib): 29

em que R1, R2 e n são como definido acima.

Numa outra forma de realização preferida, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que A é de modo a formar em conjunto com o anel piridina o grupo seguinte (Ic):

em que R1, R2 e n são como definido acima.

Numa outra forma de realização preferida, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que A é de modo a formar em conjunto com o anel piridina o grupo seguinte (Id):

(Id) em que R1, R2 e n são como definido acima. é H;

Numa forma de realização preferida, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que R1 é H; R2 é C3-C8-heterocicloalquilo 30 opcionalmente substituído; X é S; Y é O ou S; A forma em conjunto com o anel piridina um grupo de Fórmula (Ia) e n é 1.

Numa forma de realização preferida, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que R1 é Η; X e S; Y é O e A forma em conjunto com o anel piridina um grupo de fórmula (Ib).

Numa forma de realização preferida, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que R1 é Η; X é S; Y é O e A forma em conjunto com o anel piridina um grupo de Fórmula (Ic).

Numa forma de realização preferida, a invenção fornece derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) em que R1éH; XéS; YéOeA forma em conjunto com o anel piridina um grupo de fórmula (Id).

Compostos da presente invenção inclui em particular aqueles do grupo que consiste em:

Exemplo N° Nome 1 (5Z)-5-{ [4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d] pirimidin-6il]metileno}-l,3-tiazolidina-2,4-diona; 2 (5 Z)— 5 —{ [4-(4-fluoro-l-pipiridinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metileno}-l,3-tiazolidina-2,4-diona; 3 (5 Z)-5-({4-[4-(trifluormetil)-1-piperidinil] pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metileno)-l,3-tiazolidina-2,4-diona; 4 5-Pirido[2,3-b]pirazin-6-ilmetileno-tiazolidino-2,4-diona; 5 5-Furo[3,2-b]piridina-5-ilmetileno-tiazolidino-2,4-diona; 6 5- [4-(4-Fluoro-pipiridin-l-il)-1-pirido[3,2-d] pirimidina- 6- ilmetileno]-2-tioxo-tiazolidina-4-ona; 7 5-(3-Fenil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno)-tiazolidino-2,4-diona; 8 5-[3-(3,5-Dimetoxi-fenil)-3H-imidazo[4,5-b] piridina-5-ilmetileno]-tiazolidino-2,4-diona; 9 Éster do ácido ter-butil 5-[5-(2,4-dioxo-tiazolidin-5-ilidenemetil)-imidazo[4,5-b]piridin-3-il]-2,3-dihidro-indol-l-carboxílico; 10 5-[3-(2,3-Dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno]-tiazolidina-2,4-diona; 11 5-[3-(l-Acetil-2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo [4,5-b]piridin-5-ilmetileno]-tiazolidino-2,4-diona; 12 5-{3-[1-(4-Dimetilamina-butiril)-2,3-dihidro-lH-indol-5-il]-3H-imidazo[4,5-b]piridina-5-ilmetileno}-tiazolidino- 31 2,4-diona; 13 5-[3-(l-Metanosulfonil-2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridina-5-ilmetileno]-tiazolidina-2,4-diona; 14 5-[3-(l-Clorometanosulfunil-2,3-dihidro-lH-indol-5il)-3H-imidazo[4,5-b]piridina-5-ilmetileno]-tiazolidina-2,4-diona; 15 5-{3-(l-Morfolin-4-il-propano-l-sulfonil)-2,3-dihidro-lH-indol-5-il]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno]-tiazolidino-2,4-diona; 16 Éster tert-butílico do ácido 6-[5-(2,4-dioxo-tiazolidina-5-ilidenemetil)-imidazo[4,5-b] piridin-3-il]-2,3-dihidro-indole-l-carboxílico; 17 5-[3-(l-Metanosulfonil-2,3-dihidro-lH-indol-6-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno]-tiazolidino-2,4-diona;

Os compostos da presente invenção são úteis como medicamentos. Podem ser usados para a preparação de um medicamento para a profilaxia e/ou tratamento de doenças auto-imunes e/ou doenças inflamatórias, doenças cardiovasculares, doenças neurodegenerativas, infecçóes bacterianas ou virais, doenças do rim, agregação plaquetária, cancro, transplante, rejeição de enxerto ou lesões pulmonares.

Numa forma de realização, os compostos de Fórmula (I) são úteis para o tratamento e/ou profilaxia de doenças auto-imunes ou doenças inflamatórias tais como esclerose múltipla, psoriase, artrite reumatóide, lupus eritematoso sistémico, doença inflamatória intestinal, inflamação pulmonar, trombose ou infecção/inflamação cerebral tal como meningite ou encefalite.

Noutra forma de realização, os compostos de Fórmula (I) são úteis para o tratamento e/ou profilaxia de doenças neurodegenerativas incluindo doença de Alzheimer, doença de Huntington, Trauma do CNS, enfarte ou estados isquémicos.

Ainda numa forma de realização adicional da invenção, os compostos de Fórmula (I) são úteis para o tratamento e/ou profilaxia de doenças cardiovasculares tais como ateroesclerose, hipertrofia cardíaca, disfunção dos 32 miócitos cardíacos, pressão arterial elevada ou vasoconstrição.

Ainda numa outra forma de realização de acordo com a invenção, os compostos de Fórmula (I) são úteis para o tratamento e/ou profilaxia de doença pulmonar obstrutiva crónica, fibrose de choque anafilático, psoríase, doenças alérgicas, asma, enfarte ou estados isquémicos, isquémia-reperfusão, agregação/activação plaquetária, atrofia/hipertrofia do músculo esquelético, recrutamento de leucócitos no tecido cancerígeno, angiogénese, invasão metastática, em especial melanoma, Sarcoma de Karposi, infecções bacterianas e virais agudas e crónicas, sépsia, transplante, rejeição de enxerto, esclerose glomerular, nefrite glomerular, fibrose renal progressiva, lesões endoteliais e epiteliais do pulmão ou em inflamação geral das vias aéreas do pulmão.

Noutra forma de realização de acordo com a invenção, é fornecido um processo para a preparação de derivados de azolidinona de metileno de piridina de acordo com a Fórmula (I) , compreendendo o passo de reagir um composto de Fórmula (II) com um derivado de Fórmula (III) na presença de uma base:

em que R1, R2, A, X, Y e n são definidos acima.

Noutra forma de realização de acordo com a invenção, são fornecidos compostos de acordo com a Fórmula (II): 33

(II) em que R1, R2, A, X, Y e n são definidos acima e em que os compostos de Fórmula II são seleccionados a parir do grupo de fórmula (lia), (Ilb) e (IIc):

em que R4 é seleccionado a partir de H e R2; R5 é um grupo R2 em que o primeiro átomo ligado ao anel pirimidina é seleccionado a partir de C, N, S e 0 e em que quando R4 é NH2, R5 não é NH2; R1, R2 e n são como definido acima;

em que R1, R2 e n são como definido acima;

em que R1, R2 e n são como definido acima e em que pelo menos um R1 ou R2 não é H; e 34

(lld) em que R1, R2 e n são como definido acima desde que o composto de Fórmula (lld) não seja 2-(4-metoxifenil)-3H-Imidazo[4,5-b]piridino-5-carboxaldeído (RN 142764-79-2).

Numa forma de realização adicional de acordo com a invenção, são fornecidos compostos de acordo com a Fórmula (II) a partir do grupo: 4-Piperidin-l-il-pirido[3,2-d]pirimidino-6-carbaldeído; 4-(4-Fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidino-6-carbaldeído; 4-(4-Metil-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidino-6-carbaldeído;

Pirido [2,3-jb]pirazino-6-carbaldeído; 2- Trimetilsilanil-furo[3,2-b]piridino-5-carbaldeido; 3- Fenil-lH-imidazo[4,5-b]piridino-5-carbaldeido; 3- (3, 5-Dimetoxifenil) -3fí-imidazo [4,5-b]piridino-5-carbaldeído;

Tert-butil 5- (5-formil-3fí-imidazo [ 4,5-b]piridin-3- il)indolino-l-carboxilato; 3- (l-acetil-2, 3-dihidro-lH-indol-5-il) -3íí-imidazo [4,5-b]piridino-5-carbaldeído; 35 3— {1 — [4- (dimetilamino) butanoil] -2,3-dihidro-ltf-indol-5-il} -3/í-iinidazo [4, 5-b] piridino-5-carbaldeído; 3- [1- (metilsulfonil) -2,3-dihidro-lfí-indol-5-il] -3H-imidazo[4,5-b]piridino-5-carbaldeido; 3— {1— [ (clorometil) sulfonil] -2,3-dihidro-lH-indol-5-il}-3H-imidazo [4,5-b]piridino-5-carbaldeído; 3-{1-[(3-morfolin-4-ilpropil)sulfonil]-2,3-dihidro-lH-indol-5-il} -3fí-imidazo [ 4,5-b] piridino-5-carbaldeído;

Tert-butil 6- (5-f ormil-3/í-imidazo [ 4,5-b] piridin-3- il)indolino-l-carboxilato ; 3- [1- (metilsulfonil) -2,3-dihidro-lií-indol-6-il] -3H-imidazo[4,5-b]piridino-5-carbaldeído.

Os derivados de azolidinona de metileno de piridina exemplificados nesta invenção podem ser preparados a partir de materiais de partida facilmente disponíveis usando os métodos e procedimentos gerais a seguir. Será apreciado que quando são dadas as condições experimentais típicas ou preferidas (i.e. temperaturas de reacção, tempo, moles de reagentes, solventes etc.), outras condições experimentais podem ser usadas a menos que estabelecido de outro modo. As condições óptimas de reacção pode variar com os reagentes ou solventes usados, mas tais condições podem ser determinadas por uma pessoa especialista na técnica, usando procedimentos de optimização de rotina.

Quando empregues como medicamentos, os compostos da presente invenção tipicamente são administrados na forma de 36 uma composição farmacêutica. Consequentemente, composições farmacêuticas compreendendo um composto de Fórmula (I) e um transportador, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis estão, portanto, também no âmbito da presente invenção. Uma pessoa especialista na técnica está informada acerca da diversidade de tais compostos transportadores, diluentes ou excipientes adequados para formular uma composição farmacêutica.

Os compostos da invenção, em conjunto com um adjuvante, transportador, diluente ou excipiente convencionalmente empregues podem ser postos na forma de composições farmacêuticas e suas doses unitárias, e nessa forma podem ser empregues como sólidos, tais como comprimidos ou cápsulas de enchimento, ou como líquidos tais como soluções, suspensões, emulsões, elixires, ou cápsulas de enchimento com os mesmos, todas para uso oral, ou na forma de soluções injectáveis estéreis para uso parentérico (incluindo uso subcutâneo). Essas composições farmacêuticas e suas formas de dose unitária podem compreender componentes em proporções convencionais, com ou sem compostos ou princípios activos adicionais, e essas formas de dose unitária podem conter qualquer quantidade eficaz adequada do componente activo correspondente à desejada gama de dose diária a ser empregue.

Composições farmacêuticas contendo derivados de azolidinona de metileno de piridina desta invenção podem ser preparadas num modo bem conhecido na técnica farmacêutica e compreendem pelo menos um composto activo. Geralmente, os compostos desta invenção são administrados numa quantidade farmaceuticamente eficaz. A quantidade de composto realmente administrada tipicamente deverá ser determinada pelo médico, à luz das circunstâncias relevantes, incluindo 37 a doença a ser tratada, a via de administração escolhida, o real composto a ser administrado, da idade, peso, e resposta do indivíduo doente, da gravidade dos sintomas do doente, e afins.

As composições farmacêuticas da presente invenção podem ser administradas por uma diversidade de vias incluindo oral, rectal, transdérmica, subcutânea, intravenosa, intramuscular e intranasal. As composições para administração oral podem tomar a forma de soluções ou suspensões líquidas a granel, ou pós a granel. Mais comummente, porém, as composições são apresentadas em formas de dose unitária para facilitar um doseamento rigoroso. 0 termo "formas de dose unitária" refere-se a unidades fisicamente distintas adequadas como doses unitárias para seres humanos e outros mamíferos, cada unidade contendo uma quantidade pré-determinada de material activo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado, em associação com um excipiente farmaceuticamente aceitável. Formas típicas de dose unitária incluem ampolas ou seringas pré-carregadas, pré-medidas, das composições líquidas ou pílulas, comprimidos, cápsulas ou afins no caso de composições sólidas. Em tais composições, os derivados da azolidinona de metileno de piridina são geralmente um componente minoritário (desde cerca de 0,1 até cerca de 50% em peso ou preferencialmente desde cerca de 1 até cerca de 40% em peso) em que o restante são vários veículos ou transportadores e auxiliares de processamento úteis para formar a desejada forma de dosagem.

Formas líquidas adequadas para administração oral podem incluir um veículo aquoso ou não aquoso com tampões, agentes de suspensão e de dispersão, corantes, 38 aromatizantes e afins. Formas sólidas podem incluir, por exemplo, qualquer dos sequintes componentes, ou compostos de uma natureza semelhante: um liqante tal como celulose microcristalina, qoma de tragacanto ou gelatina; um excipiente tal como amido ou lactose, um agente de desintegração tal como ácido alginico, Primogel, ou amido de milho; um lubrificante tal como estearato de magnésio; um deslizante tal como dióxido de silício coloidal; um agente edulcorante tal como sacarose ou sacarina; ou um agente aromatizante tal como menta, salicilato de metilo, ou aroma de laranja.

Composições injectáveis são tipicamente à base de solução salina de cloreto de sódio estéril injectável ou solução salina de cloreto de sódio tamponada com fosfato ou outros transportadores injectáveis conhecidos na técnica. Como acima mencionado, os derivados de azolidinona de metileno de piridina de Fórmula (I) nessas composições é tipicamente um componente minoritário, variando frequentemente entre 0,05 até 10% em peso com o restante sendo o transportador injectável e afins.

Os componentes acima descritos para administrar oralmente ou para composições injectáveis são meramente representativos. Materiais adicionais assim como técnicas de processamento e afins são definidas na Parte 5 do Remington's Pharmaceutical Sciences, 20a Edição, 2000, Marck Publishing Company, Easton, Pennsylvania, os quais são aqui incorporados como referência. Os compostos desta invenção podem também ser administrados em formas de libertação sustentadas ou a partir de sistemas de distribuição de fármacos por libertação sustentada. Uma descrição dos materiais de libertação sustentada 39 representativos pode também ser encontrada nos materiais incorporados no Remíngton's Pharmaceutical Sciences. Síntese dos compostos da invenção:

Os novos derivados de azolidinona de metileno de piridina de acordo com a Fórmula (I) podem ser preparados a partir de materiais de partida facilmente disponíveis por várias abordagens de síntese, usando protocolos químicos tanto em fase de solução como em fase sólida (Brummond et al., 1999, J.O.C., 64, 1723-1726) . Intermediários de piridina fundidos são divulgados em Shiotani et al, J. Heterocyclic chem. 34, 901 (1997) e em Lown et al, Chem. Res. Toxicol. 1992, 5, 579. Exemplos das vias sintéticas serão descritos.

As seguintes abreviaturas referem-se respectivamente às definições a seguir: Â (Angstrom), cm (centímetro), eq (equivalente), h (hora), g (grama), M (molar), MHz (Megahertz), μΐ (microlitro), min (minuto), mg (miligrama), mL (mililitro), mm (milímetro), mmol (milimole), mM (milimolar), nm (nanómetro), ta (temperatura ambiente), ACN (acetonitrilo), ATP (Trifosfato Adenosida), BSA (Albumina de Soro de Bovino) , DCM (diclorometano) , DIBAL (Diisobutilaluminiohidrido), DMF (dimetil formamida), DMSO (Dimetil sulfóxido), HPLC (Cromatografia Líquida de Alta Resolução), InslP (D-mio-inositol-l-fosfato) , IR

(Infravermelho), LC (Cromatografia Líquida), MS (espectrometria de massa), NMR (Ressonância Magnética Nuclear), PBS (Solução salina de cloreto de sódio tamponada com Fosfato), Pis (Fosfoinositídeos), Pl3Ks (Fosfoinositídeo 3-quinases), PI(3)P (Fosfatidilinositol 3-monofosfato), PI(3,4)P2 (Fosfatidilinositol 3,4- bisfosfato), PI(3,4,5)P3 (Fosfatidilinositol 3,4,5- (Fosfatidilinositol-4-fosfato),

trisfosfato), PI(4)P 40 PI(4,5)P2) (Fosfatidil inositol-4,5-bifosfato), Ptdlns (Fosfatidilinositol) , PVT (polivinil tolueno) , SPA (Ensaio de Proximidade de Cintilação) , TEA (trietilamina) , TFA (ácido trifluoro-acético) , THF (tetrahidrofurano) , TLC (Cromatografia de Camada Fina), TMS (Trimetilsililo) , UV (Ultravioleta).

Os derivados de azolidinona de metileno de piridina exemplificados nesta invenção podem ser preparados a partir de materiais de partida facilmente disponíveis usando os métodos e procedimentos gerais seguintes. Será apreciado que quando são dadas condições experimentais típicas ou preferidas (i.e. temperaturas de reacção, tempo, moles de reagentes, solventes etc..), outras condições experimentais podem ser usadas a menos que estabelecido de outro modo. As condições óptimas de reacção podem variar com os reagentes ou solventes usados, mas essas condições podem ser determinadas pela pessoa especialista na técnica, usando procedimentos de optimização de rotina.

No processo ilustrado nos esquemas seguintes R1, R2, A, X, Yen são cada um como acima defino na descrição.

Geralmente, os derivados de azolidinona de metileno de piridina de acordo com a Fórmula geral (I) podem ser obtidos através de várias abordagens de síntese, usando protocolos químicos quer em fase de solução como fase sólida (Brummond et al, 1999, acima), tanto por métodos convencional como por técnicas assistidas por microondas.

Num primeiro passo, um reagente aldeído PI (Pia, Plb, Plc, Pld) e um até dois equivalentes do reagente P2 (particularmente tiazolidinediona ou rodanina) são aquecidos na presença de preferencialmente uma base fraca 41 para fornecer a correspondente olefina de Fórmula (I) como mostrado no Esquema 1 a seguir. No primeiro passo, PI pode ser substituído por precursores Pia, Plb, Plc e Pld com vista a obter os compostos finais (Ia), (Ib) (Ic) e (Id) respectivamente, como descrito acima na descrição. 41 Esquema 1:

Processos particularmente preferidos de acordo com a invenção são ilustrados pelos Esquemas 2, 3, 4 e 5 seguintes nos quais os compostos de fórmula (Ia), (Ib), (Ic) e (Id) respectivamente, podem ser obtidos usando as mesmas condições de reacção acima mencionadas.

CHO

Esquema 2:

Esquema 3: 42

Enquanto que este passo pode ser realizado na ausência de um solvente a uma temperatura, a qual é suficientemente alta para provocar pelo menos a fusão parcial da mistura da reacção, é realizada preferencialmente na presença de um solvente inerte. A variação de temperatura preferida é desde cerca de 70°C até 250°C, e especialmente preferido é uma temperatura de desde cerca de 80°C até 120°C.

Exemplos de tais solventes para a reacção acima incluem solventes como dimetoximetano, xileno, tolueno, o- 43 diclorobenzeno e metanol. Exemplos de bases fracas adequadas para a reacção acima são sais de metal alcalino e alcalino terroso de ácidos fracos tais como os ácidos (Ci-Ci2)-alquil carboxílicos e ácido benzóico, carbonatos e bicarbonatos de metais alcalinos e alcalino tais como carbonato de cálcio, carbonato de magnésio, bicarbonato de potássio e aminas secundárias tais como piperidina, morfolina ou pirrolidina assim como aminas terciárias tais como piridina, trietilamina, diisopropiletilamina, N-metilmorfolina, N-etilpiperidina, N-metilpiperidina e afins. Bases fracas especialmente preferidas são acetato de sódio ou pirrolidina por razões de economia e eficiência.

Numa tal reacção típica (Tietze et al, in "The Knoevenagel reaction", p. 341 ff., Pergamon Press, Oxford 1991, Eds. : Trost B.M., Fleming I.) o aldeído PI e o outro material de partida (e.g. tiazolidinediona) P2 são combinados em quantidades aproximadamente equimolares com 0,5 até um equivalente de pirolidina em metanol ou solvente semelhante e aquecida entre 70 e 200°C à qual a reacção é substancialmente terminada em cerca de 15 minutos até 3 horas. A olefina desejada de Fórmula (I) é então isolada por filtração, no caso de ter sido precipitada da mistura de reacção após arrefecimento, ou por exemplo, através da mistura com água e subsequente filtração, para obter o produto bruto. O produto bruto é purificado, se desejado, e.g. por cristalização ou por métodos cromatográficos padrão.

Alternativamente os compostos de Fórmula (I) podem ser obtidos tipicamente através da mistura de quantidades equimolares de tiazolidinediona P2 com o aldeído PI com excesso molar do acetato de sódio anidro e a mistura é aquecida até uma temperatura suficientemente alta para 44 produzir a fusão, temperatura à qual a reacção está maioritariamente completada em cerca de 5 até 60 minutos.

Preferencialmente, a reacção acima é realizada em meio acidico tal como ácido acético na presença de acetato de sódio ou de beta-alanina.

Mais preferencialmente, a reacção acima é realizada em metanol usando 1,1 até 2,0 equivalentes de tiazolidinediona P2, um equivalente de aldeído PI e 0,2 até 0,5 equivalentes de pirrolidina em metanol.

As reacções descritas acima podem ser realizadas alternativamente sob condições de microondas como fonte de aquecimento. Tipicamente, o material de partida aldeído PI e tiazolidinediona P2 são combinados em quantidades aproximadamente equimolares com 0,5 até um equivalente de piperidina em dimetoximetano ou solvente semelhante e aquecido entre 140°C e 240°C temperatura à qual a reacção está totalmente completa em cerca de 3 até 10 minutos.

Os sais catiónicos farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da presente invenção são preparados facilmente através da reacção de formas de ácido com uma base apropriada, usualmente um equivalente, num co-solvente. Bases típicas são hidróxido de sódio, metóxido de sódio, etóxido de sódio, hidreto de sódio, hidróxido de potássio, metóxido de potássio, hidróxido de magnésio, hidróxido de cálcio, benzatina, colina, dietanolamina, etilenodiamina, meglumina, benetamina, dietilamina, piperazina e trometamina. O sal é isolado por concentração até à secura ou por adição de um não solvente. Em alguns casos, os sais podem ser preparados misturando uma solução do ácido com uma solução do catião (etilhexanoato de sódio, oleato de 45 magnésio), empregando um solvente no qual o desejado sal catiónico precipita, ou pode ser isolado de outro modo por concentração e adição de um não solvente.

Derivados de 2,4-azolidinona P2 estão comercialmente disponíveis em várias fontes. Métodos para preparar intermediários dos compostos de Fórmula (I).

Os aldeídos de fórmula PI são preparados através de uma diversidade de métodos bem conhecidos, por exemplo por óxido-redução partindo do correspondente éster alquilo do ácido carboxílico ou ácido carboxílico. Técnicas padrão para reduzir o éster alquilo do ácido carboxílico, halogenetos carboxílicos ou ácido carboxílico para álcoois benzílicos usam hidreto de alumínio e lítio, diisopropilalumínio, tri-tert-butoxihidreto de alumínio e lítio etc.

Em última instância, o álcool benzílico correspondente é re-oxidizado no aldeído correspondente através de oxidação moderada com reagentes tais como dióxido de manganês, ácido crómico, reagente de Dess-Martin ou oxidação de Swern, ou sob outras condições conhecidas para produzir aldeídos a partir de álcoois primários. Uma via alternativa pode ser a redução directa do correspondente éster alquilo do ácido carboxílico ou ácido carboxílico no aldeído correspondente, usando DIBAL a baixa temperatura ou quaisquer outras técnicas conhecidas neste âmbito.

Uma via alternativa para preparar o aldeído PI apropriado é a redução selectiva de uma porção nitrilo no aldeído correspondente usando métodos conhecidos como e.g. DIBAL. 46

Outra via para obter aldeídos de fórmula PI é a redução selectiva do correspondente cloreto de acilo usando e.g. tri-tert-butoxihidreto de alumínio e lítio (Cha et al, 1993, J.O.C., 58, p, 4732-34).

Outra via para a síntese de aldeídos PI é a partir dos correspondentes halogenetos de 2-piridina, os quais são submetidos a reacção assistida organometálico com vista a formar as correspondente 2-vinil-piridinas, as quais em última instância podem ser oxidizadas nos aldeídos PI correspondentes usando agentes de oxidação padrão para ligações olefinicas tais como tetróxido de ósmio, tetróxido de ruténio, ozono, cloreto de ruténio (III) na presença de periodato de sódio e outros conhecidos de uma pessoa especialista na técnica.

Outra via para obter os aldeídos PI correspondentes é a oxidação de uma 2-metilpiridina usando agentes oxidantes tais como dióxido de selénio ou anidrido benzeno selenínico.

De acordo com um processo mais particularmente preferido da invenção, como ilustrado pelo Esquema 6 a seguir, o reagente Pia pode ser obtidos partindo de um derivado de fórmula P3a em que R é seleccionado a partir de metilo, etilo ou qualquer outro grupo susceptível de redução conhecido por uma pessoa especialista na técnica, aplicando opcionalmente uma sequência de redução/oxidação usando preferencialmente hidreto de alumínio e lítio em tetrahidofurano, seguido por um passo de oxidação usando preferencialmente dióxido de manganês em diclorometano.

Esquema 6: 47 αή

COOR P3a 1) redução 2) oxidação

Um intermediário que pode ser usado para a síntese acima é 2,4,8-tricloropirido[3,2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (Intermediário 1.3), cuja síntese é descrita na literatura (Srinivasan et al., 1979, J.O.C, 1979, 44, 3, p.435), como mostrado no Esquema 7 a seguir.

Esquema 7

Intermediário 1.2 _o_o_ MeOH 93%

Dowtherm(R)A Refluxo 220°C 55%

Intermediário 1.1

A substituição selectiva dos 3 grupos cloro pode permitir a introdução de grupos R1 e R2 conduzindo a diferentes intermediários de fórmula P3a (P3a(l), P3a(2), P3a(3), P3a(4), P3a(5), P3a(6), P3a(7)) como mostrado no Esquema 8 a seguir.

Esquema 8: 48

P3a{7> F3a(S)

Os passos das reduções no Esquema 8 podem ser realizados usando agentes de redução padrão como hidrogénio ou ditiação de Raney-Nickel (Srinivasan et al, 1979, acima).

Preferencialmente, a redução é conduzida sob condições moderadas usando formato de amónio na presença de paládio. A quantidade de formato de amónio é determinada pelo número de átomos de cloro a serem removidos (2-12 eq.). A introdução de grupos R2 e R1 é obtida através de técnicas de reacção padrão conhecidas da pessoa especialista na técnica.

De acordo com outro processo da invenção particularmente preferido, como ilustrado no Esquema 9 a seguir, o aldeído Plb pode ser obtido partindo de um intermediário P3b por clivagem oxidativa de uma dupla ligação olefínica.

Esquema 9: 49

em que R é seleccionado a partir de H, C1-C6 alquilo opcionalmente substituído, arilo opcionalmente substituído. Numa tal reacção a dupla ligação olefínica é clivada usando agentes de oxidação para ligações olefínicas tais como tetróxido de ósmio, tetróxido de ruténio, ozono, cloreto de ruténio (III) na presença de periodato de sódio e outros conhecidos da pessoa especialista na técnica. 0 intermediário P3b pode ser sintetizado a partir de derivados de 2-halogénio piridina usando reacções de acoplamento assistida por organometálico para introduzir uma fracção vinilo de modo padrão conhecido da pessoa especialista na técnica. As correspondentes 2-halogénio piridinas são facilmente acessíveis a partir de e.g. 2-halogen-4-nitro-6-aminopiridina como mostrado no Esquema 10 a seguir, em que "Hal" representa um halogénio.

Esquema 10:

HjNO/i redução

Hfi HjN

Hal

>>’

50

De acordo com outro processo particularmente preferido da invenção, como ilustrado pelo Esquema 11 a seguir, em que R é seleccionado a partir de H, C1-C6 alquilo opcionalmente substituído, arilo opcionalmente substituído, o intermediário Plc pode ser obtido partindo do intermediário P3c por oxidação das 2-metil piridinas.

Esquema 11:

m-CPBA / DCM (rt) MnO2/0CM(rt)

N

1) Ac30 (100*0) /^NyCH*°M

2) KOH/MoOH P3c‘

Tal oxidação pode ser realizada usando dióxido de selénio ou anidrido benzeno selenínico num inerte solvente a temperaturas entre 150 até 250°C. Preferencialmente, uma tal reacção é realizada usando microondas como fonte de aquecimento. Num segundo passo, a desililação é realizada sob condições padrão como descrito em Kocienski, 1994 (acima) e Greene et al, 1999 (acima).

Preferencialmente o grupo trimetilsililo é clivado usando de hidróxido de sódio desde 2 até 5N. A introdução de R2 pode ser realizada como descrito na W02004/007491. 51

De acordo com outro processo mais preferido, o intermediário Plc pode ser obtido a partir do intermediário P3c por via de um rearranjo de N-óxido de picolina: Tipicamente o intermediário P3c é submetido a N-oxidação conduzindo ao intermediário P3', usando oxidantes como ácido m-Cloro- perbenzóico (m-CPBA) à temperatura ambiente ou qualquer oxidante conhecido de uma pessoa especialista na técnica. Um processamento básico a seguir e o aquecimento do P3c' em anidrido acético a 100°C durante 5 até 15 min (Cava et al, 1958, JOC, 23, 1616) conduz ao correspondente álcool acetilico protegido, o qual por sua vez pode ser desprotegido e desililado simultaneamente por tratamento com hidróxido de sódio (2N) em metanol à temperatura ambiente. Finalmente, o álcool primário P3c" pode ser oxidizado no correspondente aldeído intermediário Plc usando oxidantes como dióxido de manganês em diclorometano ou quaisquer oxidantes conhecidos da pessoa especialista na técnica (Esquema 11 acima).

De acordo com outro processo particularmente preferido da invenção, em que são representados aza-benzimidazoles, o Intermediário P4d pode ser obtido a partir do intermediário P5d, como mostrado no Esquema 12 a seguir, em que "Hal" representa um halogénio.

1) R2NH2 2) Redução 3) ciclização 2) Acoplamento

Esquema 12

52 A substituição do halogénio 2 por R2NH2 em álcoois (e.g. etanol) na presença de uma base é seguida pela redução do grupo nitro catalisado por metal indio na presença de uma fonte de hidrogénio. 0 P4d é obtido por subsequente ciclização por meios de condensação com amidinas seguido pela instalação de uma porção vinilo usando reacções de acoplamento assistidas por organometálico num modo padrão conhecido da pessoa especialista na técnica.

Quando R2 no intermediário P4d é uma porção química a qual é para ser submetida a transformações sintéticas, estas transformações são realizadas após conclusão do acoplamento com a porção vinilo. Estas transformações sintéticas incluem, mas não estão limitadas a, desprotecções, acoplamentos, oxidações, reduções.

Esquema 13 oxidagâo N R1 P1d

De acordo com um processo particularmente preferido da invenção, a ligação instalada oleofina vinilo do intermediário P3d (Esquema 13 acima) é clivada usando agentes de oxidação para ligações olefínicas tais como tetróxido de ósmio ou cloreto de ruténio(III) na presença de periodato de sódio, ozono, e outros conhecidos por uma pessoa especialista na técnica.

De acordo com um processo geral adicional, os compostos de Fórmula (I) podem ser convertidos em compostos de Fórmula (I) alternativos, empregando técnicas de interconversão 53 adequadas bem conhecidas por uma pessoa especialista na técnica.

Se o conjunto métodos gerais sintéticos acima não for aplicável para obter compostos de acordo com a Fórmula (I) e/ou os intermediários necessários para a síntese dos compostos de Fórmula (I), devem ser usados métodos de preparação adequados conhecidos por uma pessoa especialista na técnica. Em geral, as vias de síntese de qualquer composto individual de Fórmula (I) vão depender dos substituintes específicos de cada molécula e da pronta disponibilidade dos intermediários necessários; mais uma vez esses factores devem ser apreciados por um comum especialista na técnica. Para todos os métodos de protecção e desprotecção, ver Kocienski, 1994 (acima) e Greene et al., 1999 (acima).

Os compostos desta invenção podem ser isolados em associação com moléculas de solventes por cristalização a partir da evaporação de um solvente apropriado. Sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de Fórmula (I), os quais contêm um centro básico, podem ser preparados num modo convencional. Por exemplo, a solução da base livre pode ser tratada com um ácido adequado, ou puro ou numa solução adequada, e o sal resultante isolado ou por filtração ou por evaporação do solvente de reacção sob vácuo. Sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis podem ser obtidos de um modo análogo através do tratamento de uma solução do composto de Fórmula (I) com uma base adequada. Ambos os tipos de sais podem ser formados ou interconvertidos usando técnicas de resina de troca iónica. 54 A seguir a presente invenção será ilustrada através de alguns exemplos, os quais não são construídos para serem vistos como limitativos do âmbito da invenção.

Exemplos:

Os seguintes materiais de partida comercialmente disponíveis foram usados: 5- aminouracilo disponível comercialmente da Aldrich;

Acetilenodicarboxilato de dimetilo disponível comercialmente Aldrich; N,N-dietilanilina disponível comercialmente da Aldrich; Oxicloreto de fósforo disponível comercialmente da Aldrich; N-etildiisopropilamina disponível comercialmente da Aldrich;

Formato de amónio disponível comercialmente da Aldrich; Hidreto de alumínio e lítio disponível comercialmente da Aldrich; Óxido de manganês disponível comercialmente da Aldrich; 2,4-tiazolidinediona disponível comercialmente da Aldrich; Rodanina disponível comercialmente da Aldrich;

Beta-alanina disponível comercialmente da Aldrich; 4-fluoro-piperidina disponível comercialmente da

Fluorochem; 4-trifluorometil-piperidina disponível comercialmente da Lancaster;

Glioxal (Oxaldeído) disponível comercialmente da Aldrich; Tetraquis (trifenilfosfina) paládio disponível comercialmente da Aldrich;

Viniltributilestanano disponível comercialmente da Aldrich; 6- iodo-2-picolin-5-ol disponível comercialmente da Acros; (Trimetilsilil)acetileno disponível comercialmente da Aldrich;

Diclorobis(trifenilfosfina) paládio(II) disponível comercialmente da Aldrich; 1,2 dicloro benzeno disponível comercialmente da Aldrich; 55 2-amino-3-nitro-6-cloropiridina disponível comercialmente da ACROS; índio em pó disponível comercialmente da Aldrich;

Acetato de formamidina disponível comercialmente da Aldrich;

Tributil(vinil)estanho disponível comercialmente da Aldrich;

Tetróxido de ósmio disponível comercialmente da Aldrich; Periodato de sódio disponível comercialmente da Aldrich; 2,6-Dicloro-3-nitropiridina disponível comercialmente da Aldrich; 3,5-Dimetoxianilina disponível comercialmente da Aldrich; 5- Nitroindolina disponível comercialmente da Aldrich; 6- Nitroindolina disponível comercialmente da Aldrich; Hidrocloreto ácido 4-(dimetilamino)butírico disponível comercialmente da Aldrich;

Cloreto de 3-cloropropanosulfonilo disponível comercialmente da Aldrich;

Cloreto de clorometanosulfonilo disponível comercialmente da Alfa Aesar.

Os dados de HPLC, NMR e MS fornecidos nos exemplos descritos a seguir são obtidos como se segue: HPLC: coluna Waters Symmetry C8 50 x 4, 6 mm, Condições: MeCN/H20, 5 até 100% (8 min) , plot max 230-400 nm; Espectro de massa: PE-SCIEX API 150 EX (APCI e ESI), espectros LC/MS: Waters ZMD (ES) ; 1H-NMR: Bruker DPX-300MHz.

Purificações por HPLC preparativa são realizadas com HPLC Waters Prep LC 4000 System equipado com colunas Prep Nova-PakOHR C186 μια 60Ã, 40x30 mm (até lOOmg) ou com XTerra® Prep MS C8, 10 μπι, 50x300 mm (até 1 g) . Todas as purificações são realizadas com um gradiente de MeCN/H20 0, 09% TFA. As HPLC de fase reversa semi-preparativas são 56 realizadas com o Biotage Parallex Flex System equipado com colunas Supelcosil™ ABZ + Plus (25 cm x 21,2 mm, 12 μιη) ; detecção UV a 254 nm e 220 nm; fluxo 20 mL/min (até 50 mg). A análise de TLC é realizada sobre placas 60 F254 Pré-revestidas da Merck. As purificações por cromatografia de flash são realizadas sobre suporte de SiC>2, usando ciclohexano/AcOEt ou misturas de DCM/MeOH como eluentes.

Intermediário 1.1: (2E)-2-[(2,4-dioxo-l,2,3,4-tetrahidro-5- pirimidinil-amino]-2-butenodioato de dimetilo (Esquema 7) A uma suspensão de 5-aminouracilo (B)(4,0 g; 31,5 mmol; 1 eq.) em MeOH (120,00 mL) foi adicionado acetilenodicarboxilato de dimetilo (C) (5,0 g; 35,2 mmol; 1,1 eq.). A suspensão foi agitada à temperatura ambiente durante 46h. A reacção foi monitorizada por NMR. O sólido foi filtrado para dar (2E)-2-[(2,4-dioxo-l,2,3,4-tetrahidro-5-pirimidinil)amino]-2-butenodioato de dimetilo (8,0 g, 95%) (Intermediário 1.1).

Quantidade: 8,0 g; Rendimento: 95%; Fórmula: CioHh06N3; Pureza em HPLC: 95%; HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min) ; Área % = 1,37; 93,61; 1H NMR (DMSQ-d6) δ 3,64 (s, 3H) , 3,66 (s, 3H) , 5,21 (s, 1H) , 7,42 (s, 1H) , 9,07 (s, 1H) , 10,86 (br, 1H) , 11,31 (br, 1H) ; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 0,85; 210, 238, 270 (M+l); 208, 236, 268 (M-l).

Intermediário_1.2:_2,4,8-trioxo-1,2,3,4,5,8- hexahidropirido[3,2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (Esquema 7)

Num frasco de 2 litros com 4 tubuladuras ajustado a um condensador de refluxo foi colocado (2E)-2-[(2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidro-5-pirimidinil)amino]-2-butenodioato de dimetilo (Intermediário 1.1) (38,5 g; 0,14 mol; 1 eq.)

dowtherm(R) A (1 L) (éter fenílico-bifenilo utético) . A 57 suspensão foi agitada com um agitador mecânico sob árgon e aquecida até 220°C. A reacção foi monitorizada por HPLC/LC/MS. Após 3 horas a reacção foi parada por arrefecimento seguido por adição de 300 mL de éter petróleo. O precipitado resultante foi filtrado e lavado com DMF (2x100 mL) . 2,4,8-Trioxo-l,2,3,4,5,8 hexahidropirido[3,2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (21,02 g; 62%) (Intermediário 1.2) foi isolado como um pó amarelo com 100% de pureza em HPLC.

Quantidade: 21, Og; Rendimento: 62 %; Fórmula: C9H7O5N3/ 1H NMR (DMSO-d6) δ 3,87 (s, 3H) , 7,58 (s, 1H), 10,90 (s, 1H) , 11,56 (s, 1H), 12,10 (br, 1H).

Intermediário 1.3: 2,4,8-tricloropirido[3,2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (Esquema 7) A solução 2,4,8-trioxo-l,2,3,4,5,8-hexahidropirido[3, 2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (Intermediário 1.2) (9 g; 37,95 mmol; 1 eq.) e N, N-dietilanilina (10 mL) em oxicloreto de fósforo (174 mL) foi aquecida até refluxo durante a noite. A solução foi concentrada em vácuo. O óleo preto foi deitado lentamente sobre gelo. Foi adicionado acetato de etilo e a fase orgânica foi lavada com água até pH=6. As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas. 2,4,8-

Tricloropirido[3,2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (Intermediário 1.3) (6,5 g, 59%) foi precipitado em ciclohexano como um sólido rosa com 98% de pureza para HPLC. Quantidade: 6,5g; Rendimento: 59 %; Fórmula: C9H4O2CI3N3; 1H NMR (CDC13) δ 4,12 (s, 3H) , 8,70 (s, 1H) ; HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área % = 3,07; 98; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 1,58 ; 293 (M+l).

Intermediário 1.4: 2,8-Dicloro-4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (Esquema 8) 58

A uma solução de 2,4,8-tricloropirido[3,2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (4,65 g; 15,9 mmol; 1 eq.) (Intermediário 1.3) em acetonitrilo (140 mL) foi adicionado N-etildiisopropil amina (4 mL; 23,8 mmol; 1,5 eq.). A mistura foi arrefecida até 0°C. A solução de piperidina (1,57 mL; 15,9 mmol; 1 eq.) em acetonitrilo (20 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura foi agitada 15 min a 0°C. A mistura foi parcialmente concentrada e o precipitado foi filtrado, lavado com MeOH e seco sob vácuo para dar 2,8-dicloro-4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidino-6 carboxilato de metilo (Intermediário 1.4) (3,98 g; 73%) como um sólido rosa em 98,8% de pureza em HPLC; Quantidade: 3,98 g; Rendimento: 73%; Fórmula: C14H14O2CI2N4; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1,71 (sl, 6H) , 3,92 (s, 3H) , 4,01 (sl, 2H) , 4,82 (sl, 2H), 8,42 (s, 1H); LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 2,02; 341,02, 342,89 (M+l); HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área % = 4,27; 98,84.

Intermediário_1.5:_4- (1-piperidinil) pirido [3,2- d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (Esquema 8) A um frasco de fundo redondo foram adicionados paládio (540 mg; 0,51 mmol; 0,05 eq.) isopropanol (90 mL). Foi borbulhado Ar nesta mistura. Foi adicionada uma solução desarejada de formato de amónio em água (2,56 g, 40,6 mmol, 4 eq., em 4 mL de água), seguido por 2,8-dicloro-4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (Intermediário 1.4) (3,46 g; 10,5 mmol; 1 eq.) e isopropanol desarejado (10 mL) . Após 30 min, um segundo lote de formato de amónio foi adicionado como solução em água (2,56 g, 40,6 mmol, 4 eq., em 4 mL de água). Finalmente, após 30 min adicionais, outros 8 equivalentes de formato de amónio em água foram adicionados (5,12 g, 81,2 mmol, 8 eq., em 8 mL de água) . A mistura foi depois agitada à ta. durante a noite e filtrada através de celite. 59 0 filtrado foi evaporado. 0 produto bruto foi dissolvido em DCM e lavado com água e solução salina de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca através de sulfato de magnésio, filtrada e evaporada para dar 4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d] pirimidino-6-carboxilato de metilo (2,29 g; 83%) (Intermediário 1.5), como um sólido amarelo em 92,9% de pureza em HPLC. Este produto foi usado no passo seguinte sem purificação adicional.

Quantidade: 2,29 g; Rendimento: 82 %; Fórmula: Ci4Hi607N4.; 1H NMR (DMS0-d6) δ 1,70 (sl, 6H) , 3,92 (s, 3H) , 4,42 (sl, 4H) , 8,19 (d, J = 9 Hz, 1H) , 8,30 (d, J = 9 Hz, 1H) , 8,52 (s, 1H); HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área % = 1,83; 92,88; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 1,58; 273,10 (M+l) .

Intermediário_1.6:_[4- (1-piperidinil) pirido [3,2- d]pirimidin-6-il]metanol (Esquema 6) 4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidino-6-carboxilato de metilo (Intermediário 1.5) (4,4 g; 16,2 mmol; 1 eq.) foi dissolvido em THF (176 mL) e a solução foi arrefecida até aos - 35°C (temperatura interna). Hidreto de alumínio e lítio (8,1 mL; 1,00 M; 8,1 mmol; 0,50 eq.) foi adicionado gota-a-gota. Após 2h30 a -35°C a reacção foi terminada. Adicionou-se água (8,1 mL) e a temperatura foi deixada aquecer até à ta. Após adição de MeOH (8 mL), a mistura foi filtrada através de Celite, e largamente enxaguada com mistura de DCM/MeOH 1:1. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida para dar [4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metanol (Intermediário 1.6) (3,99 g; rendimento quantitativo) com 92,9% de pureza em HPLC. Este produto foi usado no passo seguinte sem purificação adicional. Quantidade: 3,99 g; Rendimento: 100%; Fórmula: C13H16ON4; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1,64 (m, 6H) , 4,32 (sl, 4H) 4,66 (s, 2H) , 7,86 (d, J = 9 Hz, 1H) , 8,06 (d, J = 9 Hz 60 1Η) , 8,44 (s, 1H) ; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 1,24; 245, 08 (M+l); HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área % = 1,39; 92,88.

Intermediário_1.7_j_4- (1-piperidinil) pirido [3,2- d]pirimidino-6-carbaldeído (Esquema 6) [4- (1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il] metanol (Intermediário 1.6) (3,95 g; 16,2 mmol; 1,00 eq.) foi dissolvido em DCM (160 mL) . A solução foi arrefecida até 0°C e foi adicionado óxido de manganês (16,5 g; 0,162 mol; 10 eq.) . A reacção foi agitada 5 min a 0°C e deixada durante a noite à ta Para completar a conversão, foi adicionado MnC>2 após 12 horas e 20 horas (dois lotes de 4,96 g; 48, 48 mmol; 3 eq.). Após 20 horas, a reacção foi terminada. Adicionou-se MeOH (100 mL) e a mistura foi filtrada através de Celite, e largamente enxaguada com mistura de DCM/MeOH 1:1. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida para dar 4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidino-6-carbaldeído (Intermediário 1.7). Este produto foi usado no passo seguinte sem purificação adicional. Quantidade: 4,1 g; Fórmula: C13H14ON4; Pureza em HPLC: 58,84%; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 1,53; 243,06 (M+l); HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área % = 1,39; 58,84. 1H NMR (DMSO-d6) δ 9,95 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,16 (m, 2H), 4,46 (1, 4H), 1,70 (1, 6H).

Intermediário 2.1: 4-(4-fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2- d]pirimidino-6-carbaldeido (Esquemas 6 e 8) O composto de titulo foi obtido usando 4-fluoro-piperidina seguindo o procedimento geral descrito para a síntese do intermediário 1.7 (Esquemas 5 e 7). Quantidade: 4,15 g; Fórmula: C13H13FON4; Pureza em HPLC: 89,16%; LC-MS: M/Z ESI:

Rt (10 min) 2,26; 261,08 (M+l); HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%); Rt (min); Área % = 1,19; 89,16; 1H NMR (DMSO-d6) δ 61 10,01 (s, 1H) , 8,60 (s, 1H) , 8,23 (m, 2H) , 5,00 (m, 1H) , 4,51 (1, 4H) , 1,91 (1, 4H) .

Intermediário 3.1: 4-(4-(trifluorometil)-piperidin-l-il)- pirido[3,2-dlpirimidino-6-carbaldeído (Esquemas 6 e 8) 0 composto de título foi obtido usando 4-trifluorometil-piperidina seguindo o procedimento geral descrito para a síntese do intermediário 1.7 (Esquemas 5 e 7) . Quantidade: 4,8 g; Fórmula: C14H13OF3N4; Pureza em HPLC: 67,12%; LC-MS: M/Z ESI: Rt (3 min) 1,75; 311,04 (M+l); HPLC (H20 TFA 0,1%- ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área % = 1,89; 67,12; 1H NMR (DMSO-d6) δ 10,03 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,18 (s, 2H), 3,22 (t, 2H) , 2,48 (m, 2H) , 2,08 (d, 2H) , 1,80 (m, 3H) .

Intermediário 4.1: 6-Cloro-piridino-2,3-diamina (Esquema 10) 2-amino-3-nitro-6-cloropiridina (3 g, 17,3 mmol, 1 eq.) foi dissolvido em THF (50 mL). Cloreto de estanho dihidrato (15,6 g, 70 mmol, 4 eq.) pré-dissolvido com HClcc (5 mL) foi adicionado lentamente e a mistura de reacção agitada à ta durante 4 horas. Quando a acção estava terminada, a mistura de reacção foi arrefecida até 0°C e tratada com hidróxido de sódio 5M (12 mL) até pH 14 e o composto correspondente extraído com acetato de etilo. As fases orgânicas foram secas com sulfato de magnésio, evaporadas sob vácuo e o material bruto resultante purificado por cromatografia de flash usando ciclohexano/acetato de etilo (1/1) para dar 1,5 g de um óleo vermelho (Intermediário 4.1). Quantidade: 1,5 g; Rendimento: 60 %; Fórmula:

C5H6N3C1; Pureza em HPLC: 98%; HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%) : Rt (min) ; Área % = 0,5 min; 98%; 1H NMR ( DMSO-d6) δ 6,67 (d, 1H, H5, J=8Hz), 6, 36 (d, 1H, H4, J= 8Hz) , 5,78 (m, 2H, NH2) , 4,75 (m, 2H, NH7 ) : LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 0, 1 min, 144,0 (M+l). 62

Intermediário 4.2: 6-Cloro-pirido[2,3-b]pirazina (Esquema 10) 6-cloro-2,3-piridinodiamina (Intermediário 4.1) (1 g, 6,96 mmol, 1 eq.) foi dissolvido em THF (15 mL) . Adicionou-se Glyoxal (0,84 mL, 18,1 mmol, 2,5 eq.) e a mistura de reacção agitada à ta durante 2 horas. A reacção foi monitorizada por RP-HPLC. O THF foi evaporado, o resíduo re-dissolvido em acetato de etilo (30 mL). As fases orgânicas foram lavadas duas vezes com Na2C03 saturado, secas com sulfato de magnésio e evaporadas sob vácuo para dar 1,15 g do composto esperado como um sólido branco (Intermediário 4.2). Quantidade: 1,15 g; Rendimento: 100 %; Fórmula: C7H4N3CI; Pureza em HPLC: 98%; HPLC (H20 TFA 0,1%- ACN TFA 0,05%) : Rt (min) ; Área % = 1,2 min; 98%; 1H NMR (CDCI3) δ 9,0 (s, 1H) , 8,88 (s, 1H) , 8,36 (d, 1H, J=8Hz) , 7,67 (d, 1H, J= 8 H z) ; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 0,68 min, 167,0 (M+l) .

Intermediário 4.3 : 6-Vinil-pirido[2,3-b]pirazino (Esquema 10) 6-cloropirido[2,3-b]pirazina (Intermediário 4.2) (3 g, 18,12 mmol, 1,00 eq.) foi dissolvido em THF (150mL) e desarejado com azoto à ta durante 10 minutos. Tetrakis (trifenilfosfina) paládio(O) (1,46 g, 1,27 mmol, 0,07 eq.) e viniltributilestanano (7,47 mL, 23,5 mmol, l,3eq.) foram adicionados e a mistura de reacção foi agitada a 65°C durante 3 horas. O THF foi evaporado e o bruto purificado directamente por cromatografia de flash usando ciclohexano/acetato de etilo (8/2) para dar 2,3 g do composto esperado (Intermediário 4.3) como um óleo laranja. Quantidade: 2,3g; Rendimento: 81%; Fórmula: C9H7N3; Pureza em HPLC: 98%; HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área 1,32 min; 98%; 1H NMR (DMSQ-d6) δ 9,10 (s, 1H), 63 8,98 (s, 1H) , 8,46 (d, 1H, J=8Hz), 7,95 (d, 1H, J= 8Hz), 6,90 (dd, 1H, Jtrans=17 Hz, JC1S = 10Hz) 6,50 (dd 1H, JtranS =17 HZ, Jgem-1,5Hz) , 5,80 (dd, 1H, JC1S=10Hz, Jgem=l,5Hz). LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 0,78 min, 158,13 (M+l).

Intermediário 4.4:_Pirido[2,3-b]pirazino-6-carbaldeido (Esquema 9) 6-Vinilpirido[2,3-b]pirazino (Intermediário 4.3) (1 g, 6,37 mmol, 1 eq.) foi dissolvido em metanol (20 mL) e arrefecido até -70°C. Um fluxo suave de uma mistura de oxigénio/ozono foi depois borbulhado durante 20 minutos. A reacção foi monitorizada por TLC usando ciclohexano/acetato de etilo (8/2) . Quando a reacção foi finalizada, foi adicionado dimetilsulf eto (0,1 mL) e a reacção foi deixada assim durante 30 minutos. O metanol foi evaporado sob vácuo e foram recuperados 600mg de pirido[2,3-b]pirazino-6-carbaldeído. O material bruto foi analisado sem purificação adicional (Intermediário 4.4) . Quantidade: 0, 60 g; Rendimento: 60 %; Fórmula: c8h5n3o ; Pureza em HPLC: 90%; HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área O. _ o — 0, 90 min; 90%; 1H NMR (DMSO-d6) δ 10, 1 d, 1H), 9, 05 (s, 1H) , 8,95 (s, 1H) , 8,70 (d, 1H, J=8Hz) , 8,20 (d, 1H, J= 8Hz) ; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 0,76 min, 158,13 (M+l).

Intermediário 5.1: 5-Metil-2-trimetilsilanil-furo[3,2- b]piridina (Esquema 11) A uma solução desarejada de 6-iodo-2-picolin-5-ol (855 mg; 3,64 mmol; 1,00 eq.) em trietilamina (20,00 mL) foram adicionados (trimetilsilil)acetileno (1 g; 10,19 mmol; 2,80 eq.), iodeto cuproso (90, 07 mg; 0,47 mmol; 0,13 eq.) e diclorobis(trifenilfosfina) paládio(II) (229,82 mg; 0,33 mmol; 0,09 eq.). A solução foi aquecida sob refluxo. Após 3h, a reacção foi terminada, e deixada arrefecer à ta A solução foi filtrada através de celite (lavada com AcOEt e 64

MeOH). Os solventes foram removidos. Foram adicionados AcOEt e água e as camadas orgânicas combinadas foram secas através de sulfato de magnésio, filtradas e concentradas para dar o composto esperado. 0 bruto foi purificado por cromatografia em flash curta usando ciclohexano e depois AcOEt/Ciclohexano 20/80 par dar 603 mg do composto desejado como um sólido (Intermediário 5.1) . Quantidade: 603 mg;

Rendimento: 81 %; Fórmula: CnHisNOSi; Pureza em HPLC: 93,14%; HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área % = 2,17 min; 93,14%; 1H NMR (CDC13) δ 7,65 (d, 1H, J=8,5Hz), 7,10 (s, 1H) , 7,06 (d, 1H, J=8,5Hz), 2,67 (s, 3H) , 0,36 (s, 9H); LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 1,89 min, 206,06 (M+l).

Intermediário 5.2: 2-Trimetilsilanil-furo[3,2-b]piridino-5-carbaldeído (Esquema 11) A uma solução de 5-metil-2-(trimetilsilil)furo[3,2-bjpiridina (Intermediário 5.1) (600 mg; 2,92 miriol; 1 eq.) em 1,2-diclorobenzeno (12 mL) foi adicionado dióxido de selénio (486 mg; 4,38 mmol; 1,5 eq.). A mistura de reacção foi aquecida em microondas a 220°C durante 6h. A solução foi concentrada sob vácuo. Adicionou-se Et20 e o sólido preto foi filtrado. 0 filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia de flash usando ciclohexano e depois ciclohexano/AcOEt 90/10 dando um sólido (Intermediário 5.2). Quantidade: 13 Omg; Rendimento: 20 %; Fórmula:

CuHi3N02Si; Pureza em HPLC: 81,8%; HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0, 05%) : Rt (min); Área % = 3,84 min; 81,83%; 1H NMR (CDC13) δ 10,19 (s, 1H) , 7,99 (d, 1H, J=8,50Hz), 7,89 (d, 1H, J=8,50Hz), 7,27 (s, 1H) , 0,40 (s, 9H); LC-MS: M/Z ESI:

Rt (min) 1,86 min, 220 (M+l).

Procedimentos gerais para a síntese dos intermediários 6 até 16.3: 65

Procedimento geral I para substituição do intermediário P5d com R2NH2 (Esquema 12) :

Uma solução de 2,6-dibromo-3-nitropiridina (Intermediário 6 de fórmula P5d em que Hal é Br e R1 é Η) (1 eq.), arilamina (1,0-1,2 eq.), e trietilamina (2 eq.) em etanol (5 mL/mmol) é agitada durante 48 h à temperatura ambiente. A filtração do precipitado resultante fornece o respectivo produto de substituição com alta pureza.

Procedimento geral II para redução (Esquema 12):

Uma mistura de bromopiridina (1 eq.), pó de indio (3-6 eq.), cloreto de amónio aquoso saturado (8 mL/mmol), e etanol (20 mL/mmol) são agitados sob refluxo durante 4 h. A filtração através de Celite® e a concentração do filtrado em vácuo é seguida pela extracção básica. A camada orgânica é seca através de sulfato de sódio e concentrada em vácuo. A correspondente diaminopiridina resultante é usada no passo seguinte sem purificação adicional.

Procedimento geral III for ciclização (Esquema 12):

Uma mistura de diaminopiridina (1 eq.), acetato de formamidina (3-5 eq.), e 2-metoxietanol (30 mL/mmol) é agitada sob refluxo durante 15 h. A mistura é concentrada em vácuo e purificada cromatograficamente (gradiente

AcOEt/hexano) para produzir a correspondente bromoimidazo [ 4,5-b>] piridina.

Procedimento geral IV para acoplamento (Esquema 12):

Uma solução de bromoimidazo[4,5-b]piridina (1 eq.), tributil(vinil)estanho (1,5-3 eq.), e tetrakis(trifenilfosfina)paládio(0) (0,1 eq.) em tolueno (desoxigenada com N2, 20 mL/mmol mL) foi agitada sob refluxo durante 4 h. A concentração em vácuo e purificação 66 cromatográfica (gradiente AcOEt/hexano) produziu a correspondente vinilimidazo[4,5-b]piridina.

Procedimento geral V for oxidação do intermediário 4 (Esquema 13):

Uma mistura de vinilimidazo[4,5-b]piridina (1 eq.), tetróxido de ósmio (0,1 eq.), periodato de sódio (3-4 eq.), 1,4-dioxano (30 mL/mmol) , e água (25 mL/mmol) foi agitada durante 15-30 min à temperatura ambiente. A suspensão resultante é diluída em quantidades iguais de água e acetato de etilo. Após filtração através de Celite®, a fase orgânica é seca através de sulfato de sódio, concentrada em vácuo e purificada por via de cromatografia de flash para render a respectiva formilimidazo[4,5-b]piridina.

Intermediário 6: 2,6-dibromo-3-nitropiridina (Esquema 12)

Uma mistura comercialmente disponível de 2,6-dicloro-3-nitropiridina (10,0 g; 51,8 mmol) e 33 % em p de HBr/AcOH (120 mL) foi aquecida a 80°C durante 3h. A solução é concentrada em vácuo, o resíduo resultante é tomado em AcOEt e ished com bicarbonato de sódio aquoso saturado. A fase orgânica é seca através de sulfato de sódio e concentrada em vácuo. 0 produto resultante 14,4 g (99%) é usado sem purificação adicional (Intermediário 6). GC/MS: 94% de pureza, tR 7,56 min (tR<Sm> 6,93 min), m/z (CsH2Br2N2) 280/282/284 (M, 38), 222/224/226 (35), 76 (100) Finnegan LCQ.

67

Intermediário 7.1: 6-bromo-3-nitro-2-fenilaminopiridina (Esquema 12) 0 composto de título é obtido a partir de 2,6-dibromo-3-nitropiridina (Intermediário 6) e anilina com 95% de rendimento seguindo o procedimento geral I (Intermediário 7.1). GC/MS: 99% de pureza, tR 9,28 min (tR(SM: nitropiridina) 7,62 min), m/z 293/295 (M, 12), 168 (25), 140 (25), 77 (100) Finnegan LCQ.

Br

Intermediário 7.2: e-Bromo-^-f enilpiridina-2,3-diamina (Esquema 12) 0 composto de título é obtido a partir de N-(5-bromo-2-nitrofenil)-N-fenilamina (Intermediário 7.1) em 97% seguindo o procedimento geral II. GC/MS: 99% de pureza, tR 9,69 min (tR(sm) 9,27 min), m/z 263/265 (M, 45), 183 (19), 104 (18), 92 (23), 77 (42) Finnegan LCQ.

Intermediário_7.3:_5-Bromo-3-fenil-3fl-imidazo [4,5-

Jbjpiridina (Esquema 12) O composto de título é obtido a partir de 6-Bromo-N2-fenilpiridina-2,3-diamina (Intermediário 7.2) com 71% de rendimento seguindo o procedimento geral III. GC/MS: 99% de 68 pureza, tR 9,23 min (tR(SM) 9,72 min) , m/z 273/275 (M, 55), 194 (36), 167 (30), 77 (100) Finnegan LCQ.

Intermediário_7.4:_3-Fenil-5-vinil-3ff-imidazo [4,5-

Jb] piridina (Esquema 12) 0 composto de titulo é obtido a partir de 5-bromo-3-fenil-3H-imidazo[4,5-b]piridina (Intermediário 7.3) com 92% de rendimento seguindo o procedimento geral IV. GC/MS: 97% de pureza, tR 8,94 min (tR(Sm) 9,23 min), m/z 221 (M, 100), 77 (58) Finnegan LCQ.

Intermediário 7.5: 3-Fenil-3H-imidazo [ 4,5-Jb] piridino-5- carbaldeido (Esquema 13) 0 composto de titulo é obtido a partir de 3-fenil-5-vinil-3H-imidazo[4,5-b]piridina (Intermediário 7.4) com 36% de rendimento seguindo o Procedimento geral V. GC/MS: 97% de pureza, tR 9,20 min (tR(SM) 9,04 min), m/z 223 (M, 55), 195 (63), 77 (100) Finnegan LCQ.

69

Intermediário_8.1:_6-Bromo-3-nitro-2- (3,5- dimetoxifenil)aminopiridina (Esquema 12) 0 composto de titulo é obtido a partir de 2,6-dibromo-3-nitropiridina e 3,5-dimetoxianilina comercialmente disponíveis com 85% de rendimento seguindo o procedimento geral I. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 98% de pureza, tR 10, 12 min (tR(sm: nitropiridina) 7, 98 min) . GC/MS: 99¾ de pureza, tR 10,88 min (tr(sm: nitropiridina) 3,50 min), m/z 253/255 (M, 100), 228 (72), 122 (41), 77 (53) Finnegan LCQ. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 10,04 (s, 1H) , 8,42 (d, 1H) , 7,19 (d, 1H) , 6,94 (s, 2H) , 6,33 (s, 1H) , 3,76 (s, 6H) ppm.

Intermediário 8.2: 6-Bromo-N2- (3,5-dimetoxienilpiridino- 2,3-diamina (Esquema 12) O composto de titulo é obtido a partir de N-(5-Bromo-2-nitrofenil)-N- (3,5-dimetoxifenil)amina (Intermediário 8.1) com 93% de rendimento usando o procedimento geral II. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 96% de pureza, tR 8,38 min (tR(SM) 10,12 min). GC/MS: 97% de pureza, tR 11,47 min (tR(SM) 10,15 min), m/z 323/325 (M, 100), 310/308 (33), 292/294 (39) Finnegan LCQ. o--

Intermediário_8.3:_5-Bromo-3- (3,5-dimetoxifenil-3fl- imidazo [ 4,5-Jb] piridina (Esquema 12) 70 O composto de título é obtido a partir de 6-Bromo-iV2-(3,5-dimetoxifenil)piridino-2,3-diamina (Intermediário 8.2) com 43% de rendimento seguindo o procedimento geral III. HPLC (durante 10 min 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 98% de pureza, tR 8,51 min (tR(Sm) 8,40 min). GC/MS: 98% de pureza, tR 10,56 min (tR(sM) 11,47 min), m/z 333/335 (M, 79), 207 (100) Finnegan LCQ.

Intermediário_8.4:_3- (3,5-Dimetoxifenil-5-vinil-3H- imidazo[4,5-Jb]piridina (Esquema 12) O composto de título é obtido a partir de 5-bromo-3-(3,5-dimetoxifenil) -3i7-imidazo [4,5-£>]piridina (Intermediário 8.3) com 57% de rendimento seguindo o procedimento geral IV. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq. ) : 99% de pureza, tR 8,39 min (tR(SM) 8,51 min) . GC/MS: 99% de pureza, tR 10,36 min (tR(SM) 10,56 min), m/z 281 (M, 100)

Finnegan LCQ.

Intermediário 8.5: 3-(3,5-Dimetoxifenil)-3fl-imidazo]4,5-

Jb]piridino-5-carbaldeido (Esquema 13) O composto de título é obtido a partir de 3-(3,5-dimetoxifenil)-5-vinil-3H-imidazo[4,5-b] piridina (Intermediário 8.4) com 56% de rendimento seguindo o procedimento geral V. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 98% de pureza, tR 7,26 min (tR(SM) 8,39 min). 71 GC/MS: 99% de pureza, tR 10,32 min (tR(Sm) 10,36 min) , m/z 283 (M, 100) Finnegan LCQ. 71

Intermediário 9.1: Tert-butil 5-[(6-bromo-3-nitro-piridin-2-il)amino]indolino-l-carboxilato (Esquema 12) 0 composto de título é obtido a partir de tert-butil 2, 6-dibromo-3-nitropiridina e 5-aminoindolino-l-carboxilato (derivado de 5-nitroindolina disponível comercialmente por via de protecção N-Boc e subsequente redução do grupo nitro com H2/Pd/C em MeOH/AcOEt) com 97% rendimento seguindo o procedimento geral I. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/0,1% TFA/H20) : 99% de pureza, tR 10,35 min (tR (SM: nitropiridina) 6^7 9 min). 1H-NMR (400 MHz, CDC13) : δ 10,16 (s, 1H) , 8,31 (d, 1H) , 7,86 (br s, 0,4H), 7,49 (s, 1H) , 7,45 (br s, 0, 6H) , 7,31 (d, 1H) , 6,92 (d, 1H) , 4,03 (br t, 2H) , 3,14 (t, 2H) , 1,56 (s, 9H) ppm. MS (ESI) m/z (CieHigCUBrN^ 435, 2/437,1 (M+l, 100) Finnegan LCQ. o >

Intermediário 9.2: Tert-butil 5-[(3-amino-6-bromopiridin-2-il)amino]indolino-l-carboxilato (Esquema 12) 0 composto de título é obtido a partir de tert-butil 5—[(5— bromo-2-nitrofenil)amino]indolino-l-carboxilato 72 (Intermediário 9.1) em 96% de rendimento seguindo o procedimento geral II. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.) : 98% de pureza, tR 9,86 min (tR<Sm> 11,66 min). MS (ESI) m/z (CisHziBrN^) 405, 1/407, 0 (M+l, 100), 349,1/351,1 (82) FinneganLCQ.

Intermediário 9.3: Tert—butil 5—(5—bromo—3H—imidazo[4,5— b]piridin-3-il)indolino-l-carboxilato (Esquema 12) O composto de titulo é obtido a partir de tert-butil 5—[(3— amino-6-bromopiridin-2-il)amino]indolino-l-carboxilato (Intermediário 9.2) com 91% de rendimento seguindo o procedimento geral III. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 97% de pureza, tR 10,08 min (tR(Sm) 9,85 min). MS (ESI) m/z (Ci9Hi9BrN402) 415, 0/416, 9 (M+l, 91),359,1/361,0 (100), 315,1/317,2 (51) FinneganLCQ.

Intermediário 9.4: Tert-butil 5-(5-vinil-3ff-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)indolino-l-carboxilato (Esquema 12) 0 composto de titulo é obtido a partir de tert-butil 5— (5— bromo-3H-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)indolino-l-carboxilato (Intermediário 9.3) com 94% de rendimento seguindo o procedimento geral IV. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/0,1% TFA/H20) : 96% de pureza, tR 7,21 min (tR(Sm) 8,51 min) . 1H- 73 NMR (400 MHz, CDC13) δ 8, 21 (s , 1H) , 8,04 (d, 1H), 7, 98 (br s, 0 ,5H) , 7,56 (s, 1H) , 7, 55 (br s, 0,5H), 7,48 (d, 1H) , 7,35 (d, 1H) , 6,89 (dd, 1H ) , 6, 19 ( d, 1H), 5,42 (d, 1H) , 4, 05 (t, 2H) , 3,18 (t, 2H), 1, 55 (s, 9H) ppm.

Intermediário 9.5: Tert-butil 5-(5-Formil-3ff-imidazo[4,5-Jb]piridin-3-il) indolino-l-carboxilato (Esquema 13) 0 composto de título é obtido a partir de tert-butil 5—(5— vinil-3fí-imidazo [4,5-b] piridin-3-il) indolino-l-carboxilato (Intermediário 9.4) com 69% de rendimento seguindo o procedimento geral V. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/0,1% TFA/H20) : 96% de pureza, tR 7,31 min (tR<Sm> 7,21 min) .

Intermediário 10.1: 3-(2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-5-vinil- 3H-imidazo[4,5-b]piridina (Esquema 12)

Uma mistura de tert-butil 5- (5-vinil-3fí-imidazo [4,5-b]piridin-3-il)indolino-l-carboxilato (Intermediário 9.4) (9,50 g, 26,21 mmol) (intermediário 9.4), HC1 4 M em 1,4-dioxano (200 mL), 2-propanol (30 mL) , e dioxano (50 mL) é agitada durante 1,5 h à temperatura ambiente. A mistura é concentrada até à secura para fornecer 9,50 g (98% de rendimento) do sal de trihidrocloreto da correspondente amina livre. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc 74 74 aq. ) : 99% de pureza, tR 6,64 min (tR(Sm) 10,06 min( ) . 1H-NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 9,97 (s, 1H) , 8,34 (d, 1H) , 8,12 (d, 1H) , 8 ,04 (d, 1H), 7, 85 (d, 1H), 7,82 (d, 1H) , 7, 63 (m, 1H) , 7,54 (m, 1H) , 6, 98 (dd, 1H) , 6,37 (d, 1H) , 5,63 (d, 1H) , 4,02 (t, 2H), 3,52 (t, 2H) ppm. MS (ESI) m/z (Ci6Hi4N4) 263, 2 (M+l , 100), 219,2 ( 32) Finnegan LCQ.

V

Intermediário 10.2: 3-(l-acetil-2,3-dihidro-lff-indol-5-il- 5-vinil-3H-imidazo]4,5-b] piridina (Esquema 12)

Uma mistura de 3-(2,3-dihidro-li7-indol-5-il)-5-vinil-3.fi-imidazo[4,5-b]piridina (Intermediário 10.1) (150,0 mg, 0,57 mmol), ácido acético glacial (39,3 μΐ, 0,69 mmol), hidrocloreto de N-etil-N'-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida (175,4 mg, 0,91 mmol), 4-dimetilaminopiridina (419,2 mg, 3,43 mmol), e diclorometano (10 mL) é agitada durante 24 h à temperatura ambiente. A mistura é sucessivamente extraída com cloreto de amónio saturado aquoso e bicarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica é seca através de sulfato de sódio e concentrada em vácuo para dar 139,1 mg (80%) da amida respectiva. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 99% de pureza, tR 6,43 min (tR(SM) 6,64 min) . GC/MS: 96% de pureza, tR 13,98 min, m/z 304 (M, 58), 262 (100), 207 (62) Finnegan LCQ. O.

CHO 75

Intermediário 10.3: 3-(l-acetil-2,3-dihidro-lff-indol-5-il)-3fl-imidazo [4,5-Jb]piridino-5-carbaldeído (Esquema 13) 0 composto de titulo é obtido a partir de 3- (l-acetil-2,3-dihidro-lfí-indol-5-il) -5-vinil-3H-imidazo [4,5-b]piridina (Intermediário 10.2) com 44% de rendimento seguindo o procedimento geral V. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 95% de pureza, tR 5,38 min (tR(Sm) 6,43 min) . GC/MS: tR 14,98 min (tR(sM> 13,98 min), m/z 306 (M, 60), 264 (100) Finnegan LCQ.

Intermediário 11.1: N,W-dimetil-W-{4-oxo-4-[5-(5-vinil-3H-imidazo [ 4,5-ib] piridin-3-il-2,3-dihidro-lH-indol-l-il]butil}amina (Esquema 12) 6,61 min).

Uma mistura de 3-(2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-5-vinil-3H-imidazo[4,5 b-lpiridina (48,0 mg, 0,14 mmol) (Intermediário 10.1), hidrocloreto do ácido 4-(dimetilamino)butirico (36,3 mg, 0,21 mmol), hidrocloreto de N-etil-N'-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (54,9 mg, 0,29 mmol), 4-dimetilaminopiridina (122,5 mg, 1,00 mmol), e diclorometano (8 mL) é agitada durante 24 h à temperatura ambiente. A mistura é sucessivamente extraída com cloreto de amónio aquoso saturado e bicarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica é seca através de sulfato de sódio e concentrada em vácuo para dar 50,4 mg (94%) da amida respectiva. HPLC (durante 10 min 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 92% de pureza, tR 6,27 min (tR(SM) 76

Intermediário 11.2: 3-{l-[4-(dimetilamino)butanoil]-2,3- dihidro-lff-indol-5-il}-3H-imidazo_[4,5-ib]_piridino-5- carbaldeido (Esquema 13) 0 composto de titulo é obtido a partir de N, N-dimetil-N-{4-oxo-4- [5- (5-vinil-3ff-imidazo [4,5b-] piridin-3-il) -2,3- dihidro-lH-indol-l-il]butil}amina (Intermediário 11.1) com in 45% de rendimento seguindo o procedimento geral V. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 94% de pureza, tR 5,02 min (tR(Sm) 6,27 min) .

Intermediário 12.1: 3-[1-(metilsulfonil-2,3-dihidro-lfl·-indol-5-il]-5-vinil-3ff-imidazo [4,5-Jb] piridina (Esquema 12)

Uma solução de 3-(2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-5-vinil-3H-imidazo[4,5-b]piridina (2,53 g, 9,64 mmol) (Intermediário 10.1), cloreto de metanosulfonilo (1,12 mL, 14,47 mmol), e trietilamina (2,94 mL, 21,22 mmol) em diclorometano (50 mL) é agitada durante 30 min à temperatura ambiente. A mistura é sucessivamente extraída com cloreto de amónio aquoso saturado e bicarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica é seca através de sulfato de sódio e concentrada 77 em vácuo para dar 3,24 g (99%) da sulfonamida respectiva. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.) : 92% de pureza, tR 7,16 min (tR<Sm> 6,64 min) . MS (ESI) m/z (C17H16N4O2S) 341,1 (M+l, 100) Finnegan LCQ.

Intermediário 12.2: 3-[1-(metilsulfonil-2,3-dihidro-lH- indol-5-il] -3H-imidazo_[4,5—Jb] piridino-5-carbaldeído (Esquema 13) O composto de titulo é obtido a partir de 3—[1— (metilsulfonil) -2,3-dihidro-li7-indol-5-il] -5-vinil-3H-imidazo[4,5-b]piridina (Intermediário 12.1) com 60% de rendimento seguindo o procedimento geral V. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 98% de pureza, tR 6,13 min (tR(sm) 7,16 min) .

Intermediário_13.1:_3-{-1- [ (clorometil) sulfonil] 2,3- dihidro-lfl-indol-5-il}-5-vinil-3fl-imidazo [4,5-Jb] piridina (Esquema 12)

Uma solução de 3-(2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-5-vinil-3íí-imidazo[4,5-b]piridina (2,57 g, 9,80 mmol) (Intermediário 10.1), cloreto de clorometanosulfonilo (2,00 mL, 19,59 mmol), e N, N-diisopropiletilamina (11,98 mL, 68,58 mmol) em 78 diclorometano (100 mL) é agitada durante 20 min à temperatura ambiente. A mistura é sucessivamente extraída com cloreto de amónio aquoso saturado e bicarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica é seca através de sulfato de sódio e concentrada em vácuo para dar 3, 61 g (98%) da sulfonamida respectiva. HPLC (durante lOmin 10-85%

MeCN/lOOmM NaOAc aq.) : 92% de pureza, c+ π co LO O min (t r ( sm) 6, 64 min) . 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9, 03 (s, 1H) , 8,22 (d, 1H) , 7,85 (s, 1H) , 7,79 (d, 1H) , 7,56 (m, 2H) , 6, 93 (dd, 1H) , 6,25 (d, 1H) , 5,50 (d, 1H) , 5, 41 (s, 2H) , 4,21 (t, 2H) , 3,28 (t, 2H) ppm. MS (ESI) m/z (C17H15CIN4O2S) 375,0 (M+l, 100) Finnegan LCQ.

Intermediário_13.2 :_3—{1— [ (clorometil) sulfonill—2,3— dihidro-lff-indol-5-il}-imidazo [4,5-Jb]piridino-5-carbaldeído (Esquema 13) 0 composto de título é obtido a partir de 3-{Ι Ε (clorometil)sulfonil]-2,3-dihidro-lH-indol-5-il}-5-vinil-3fí-imidazo [4,5-b]piridina (Intermediário 13.1) em 8 6% de rendimento seguindo o procedimento geral V. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 97% de pureza, tR 7,03 min (tR(sm) 8,05 min) . MS (ESI) m/z (C16H13CIN4O3S) 377,0 (M+l, 100) Finnegan LCQ.

79

Intermediário 14.1: 3-{l-[(3-cloropropil)sulfonil]-2,3- dihidro-lfl-indol-5-il} -5-vinil-3H-imidazo [ 4,5-ib] piridina (Esquema 12)

Uma solução de 3-(2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-5-vinil-3H-imidazo[4,5-b]piridina (270 mg, 1,03 mmol) (Intermediário 10.1), cloreto de 3-cloropropanosulfonilo (0,25 mL, 2,06 mmol), e N,N-diisopropiletilamina (1,08 mL, 6,18 mmol) em diclorometano (15 mL) é agitada durante 10 min à temperatura ambiente. A mistura é sucessivamente extraída com cloreto de amónio aquoso saturado e bicarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica é seca através de sulfato de sódio e concentrada em vácuo para dar 351 mg (85%) da sulfonamida respectiva. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/ lOOmM NaOAc aq.) : 92% de pureza, tR 8,44 min (tR(Sm> 6,59 min). MS (ESI) m/z (C19H19CIN4O2S) 403, 0 (M, 100), 294,9 (65) Finnegan LCQ.

Intermediário 14.2: 3-{1-[(3-morfolin-4-ilpropil)sulfonil]-2,3-dihidro-lH-indol-5-il}-5-vinil-3ff-imidazo [4,5-Jb] piridina (Esquema 12)

Uma mistura de 3-{1-[(3-cloropropil) sulfonil]-2,3-dihidro-lH-indol-5-il}-5-vinil-3íí-imidazo [4,5-b] piridina (Intermediário 14.1) (351 mg, 0,87 mmol), morfolina (0,46 mL, 5,23 mmol), iodeto de potássio (144,6 mg, 0,87 mmol), e N,N- dimetilformamida (10 mL) é agitada durante 24 h à temperatura ambiente. A mistura é extraída com cloreto de amónio aquoso saturado e a camada orgânica é seca através de sulfato de sódio. A concentração em vácuo fornece 382 mg 80 (97%) do respectivo derivado morfolino. HPLC (durante lOmin 10-85 % MeCN/lOOmM NaOAc aq.) : 91% de pureza t tR 8, 4 4 min (t R ( sm) 8,44 min ). 1H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 8,32 (s, 1H) , 8, 09 (d, 1H), 7,68 (s, 1H) , 7,55 (m, 2H) , 7,41 (d, 1H) , 6, 90 (dd, 1H) , 6,22 (d, 1H) , 5, 48 (d, 1H), 4,14 (t, 2H) , 3,70 (m, 4H), 3 ,40-3,18 ( ;m, 8H), 2, 36 (m, 2H) ppm. MS (ESI) m/z ( C23H27N5O3S) 454,0 (M, 10) Finnegan LCQ.

Intermediário 14.3: 3-{l-[(3-morfolin-4-ilpropil)sulfonil]- 2,3-dihidro-lH-indol-5-il} -3g-imidazo [ 4,5-Jb]_piridino-5- carbaldeído (Esquema 13) O composto de titulo é obtido a partir de 3—(1—[(3— morfolin-4-ilpropil) sulfonil] -2,3-dihidro-lfí-indol-5-il}-5-vinil-3H-imidazo [4,5-b]piridina (Intermediário 14.2) em 82% de rendimento seguindo o procedimento geral V. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.) : tR 7,55 min (tR(SM) 8,44 min). MS (ESI) m/z (C22H25N5O4S) 456, 1 (M+l, 100)

Finnegan LCQ.

Intermediário

6-[(5-bromo-2- nitrofenil)amino]indolino-l-carboxilato (Esquema 12)

81 0 composto de titulo é obtido a partir de tert-butil 2,6-dibromo-3-nitropiridina e 6-aminoindolino-l-carboxilato (derivado do 6-nitroindolino disponível comercialmente por via de protecção N-Boc e subsequente redução do grupo nitro com H2/Pd/C em MeOH/AcOEt) em 51% de rendimento seguindo o procedimento geral I. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/0,1% TFA/H20) : 99% de pureza, tR 10,45 min (tR(SM: nitropiridina) 7,98 min) . MS (ESI) m/z (Ci8Hi904BrN4) 435, 2/437,1 (M+l, 100) Finnegan LCQ.

Intermediário 15.2: Tert-butil 6-[(3-amino-6-bromopiridin-2-il)amino]indolino-l-carboxilato (Esquema 12) O composto de título é obtido a partir de tert-butil 6—[ (5— bromo-2-nitrofenil)amino]indolino-l-carboxilato (Intermediário 15.1) em 98% de rendimento seguindo o procedimento geral II. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.) : 99% de pureza, tR 9,72 min (tR(Sm) 11,38 min). MS (ESI) m/z (Ci8H2iBrN402) 426, 8/428,9 (M+Na+, 87), 405, 1/407, 0 (M+H+, 23), 349, 1/351,0 (100), 305, 1/307,1 (56) Finnegan LCQ.

Intermediário 15.3: Tert-butil 6- (5-bromo-3ií-imidazo [4,5-

Jb]piridin-3-il) indolino-l-carboxilato (Esquema 12) 82 0 composto de título é obtido a partir de tert-butil 6—[(3— amino-6-bromopiridin-2-il)amino]indolino-l-carboxilato (Intermediário 15.2) em 76% de rendimento seguindo o procedimento geral III. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.) : 99% de pureza, tR 9,78 min (tR(SM) 9,72 min). MS (ESI) m/z (Ci9Hi9BrN402) 415,0/416,9 (M+l, 74), 359,1/361,0 (100), 315,1/317,2 (51) FinneganLCQ.

Intermediário 15.4: Tert-butil 6-(5-vinil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)indolino-l-carboxilato (Esquema 12) O composto de título é obtido a partir de tert-butil 6—(5— bromo-3íí-imidazo [4,5-b] piridin-3-il) indolino-l-carboxilato (Intermediário 15.3) com 69% de rendimento seguindo o procedimento geral IV. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq. ) : 99% de pureza, tR 9,76 min (tR(Sm> 9,78 min). MS (ESI) m/z (C21H21N4O2) 363, 0 (M+l, 100), 307,0 (92) Finnegan LCQ.

Intermediário 15.5: Tert-butil 6- (5-formil-3fl-iniidazo [4,5-b]piridin-3-il)indolino-l-carboxilato (Esquema 13)

O composto de título é obtido a partir de tert-butil 6— (5 — vinil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-3-il)indolino-l-carboxilato (Intermediário 15.4) em 95% de rendimento seguindo o procedimento geral V. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM 83

NaOAc aq.): 88% de pureza, tR 8,61 min (tR(SM) 9,76 min) . MS (ESI) rn/z (C20H20N4O3) 365, 1 (M+l, 100) FinneganLCQ.

Intermediário 16.1: 3-(2,3-dihidro-lH-indol-6-il-5-vinil-3H-imidazo] 4,5-Jb]piridina (Esquema 12)

Uma mistura de tert-butil 6- (5-vinil-3íí-imidazo [4,5- b]piridin-3-il)indolino-l-carboxilato (4,90 g, 13,52 mmol) (Intermediário 15.3), HC1 4 M em 1,4-dioxano (200 mL) , 2- propanol (30 mL), e dioxano (50 mL) é agitada durante 1 h à temperatura ambiente. A mistura é concentrada até à secura para fornecer 4,00 g (99% rendimento) do sal monohidrocloreto da corresponde amina livre. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.) : 99% de pureza, tR 7,06 min (t R ( sm) 9,78 min). MS (ESI) m/z (C16H14N4) 263, 3 (M+l, 100) Finnegan LCQ.

Intermediário 16.2: 3-[1-(metilsulfonil)-2,3-dihidro-lff- indol-6-il] -5-vinil-3ff-imidazo [4,5-Jb] piridina (Esquema 12)

Uma solução de 3-(2,3-dihidro-lH-indol-6-il)-5-vinil-3H-imidazo[4,5-b]piridina (Intermediário 16.1) (1,10 g, 4,19 mmol), cloreto de metanosulfonilo (0,65 mL, 8,39 mmol), e trietilamina (3,49 mL, 25,16 mmol) em diclorometano (50 mL) é agitada durante 15 min à temperatura ambiente. A mistura é sucessivamente extraída com cloreto de amónio aquoso 84 saturado e bicarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica é seca através de sulfato de sódio e concentrada em vácuo para dar 1,40 g (98%) da sulfonamida respectiva. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.) : 99% de pureza, tR 7,03 min (tR(Sm) 7,06 min) . MS (ESI) m/z (Ci7H16N402S) 341,0 (M+l, 100) FinneganLCQ.

Intermediário 16.3: 3-[1-(metilsulfonil-2,3-dihidro-lff- indol-6-il] -3ff-imidazo [4,5-Jb]_piridino-5-carbaldeído (Esquema 13) O composto de título é obtido a partir de 3-[l-(metilsulfonil) -2,3-dihidro-lH-indol-6-il] -5-vinil-3ií-imidazo[4,5-b]piridina (Intermediário 16.2) em 99% de rendimento seguindo o procedimento geral V. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 93% de pureza, tR 6,09 min (tR(SM) 7,03 min). MS (ESI) m/z (C16H14N4O3S) 343, 0 (M+l, 100) Finnegan LCQ.

Exemplo_lj_sal_potássio_de_(5Z) —5—{ [4- (1- piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metileno}-l,3— tiazolidina-2,4-diona (1) (Esquema 2)

Uma mistura de 2,4-tiazolidinodiona (3,4 g; 29,1 mmol; 1,80 eq.), pirrolidina (269, 80 μΕ; 3,2 mmol; 0,2 eq.) em MeOH 85 (50 mL) foi aquecida a 70°C. Uma solução de 4 — (1 — piperidinil)pirido[3,2 — d] pirimidino-6-carbaldeido (Intermediário 1.7) (3,9 g; 16,2 mmol; 1 eq.) em MeOH (50 mL) foi adicionada lentamente durante 1,5 hora a 70°C. Após 2 h sob refluxo após a adição, a reacção foi terminada. Foi formado um precipitado. A mistura de reacção quente foi filtrada e o sólido foi lavado com MeOH frio para dar (5Z) — 5-{[4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metileno}-1,3-tiazolidina-2, 4-diona (1) (2,70 g; 48%) como um pó laranja com 98% de pureza em HPLC. (5Z)—5—{ [4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il] metileno}-1,3-tiazolidina-2, 4-diona (2,7 g; 8,1 mmol; 1 eq.) foi suspenso em THF (80 mL) e água (80 mL). Adicionou-se hidróxido de potássio (16,2 mL; 0,50 M; 8,1 mmol; 1 eq.) e a solução foi filtrada através de algodão e enxaguada com água. Após liofilização, o sal potássio de (5Z)-5-{[4-(1-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metileno} — 1,3 — tiazolidina-2,4-diona (D ( 3,06 g, 98%) foi isolado como um sólido amarelo com 99,36% de pureza em HPLC. Quantidade: 3, 06 g; Rendimento: 99%; Ponto de fusão: 319°C; Fórmula: Cl6Hi4 O2SN5.K; IR (puro) v 3355, 1 , 2932,9, 2852,7, 1674,1, 1519, 6 cnf1; 1H NMR (DMS0-d6) δ 1,68 (sl, 6H) , 4,34 (sl, 4H) , 7,44 (s, 1H) , 7,93 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 9

Hz, 1H) , 8,45 (s, 1H) ; HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min) ; Área % = 2,07; 99,10; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 1,36; 342,04 (M+l); 340,08 (M-l).

Exemplo 2: sal potássio de (5Z)-5-{[4-(4-fluoro-1- piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metileno}-!,3-tiazolidina-2,4-diona (2) (Esquema 2) 86

F

Ο (2) 0 composto de título foi obtido seguindo o procedimento geral descrito para o exemplo 1, usando o Intermediário 2.1, 4-(4 — fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidino-6- carbaldeído. Após liofilização, o sal potássio de (5Z)— 5 — {[4-(4-fluoro-l-piperidinil)pirido[3,2-d] pirimidin-6- il]metileno}-l,3-tiazolidina-2,4-diona (2) foi isolado como um sólido laranja 98,8% Pureza em HPLC; Fórmula: C16H13FO2SN5.K; 1H NMR (DMS0-d6) δ 1,86 (m, 2H) , 2,07 (m, 2H), 4,39 (m, 4H), 5,00 (m, 1H), 7,44 (s, 1H) , 7,97 (d, J = 9 Hz, 1H) , 8,07 (d, J = 9 Hz, 1H) , 8,50 (s, 1H) ; HPLC (H20 TFA 0,1%- ACN TFA 0,05%): Rt (min) ; Área % = 1,92; 98,7 6; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 1,27; 360,07 (M+l); 358,07 (M-l).

Exemplo 3: sal potássio de (5Z)-5-({4-[4-(trifluorometil)-1-piperidinil]pirido[3,2-d]pirimidin-6-il}metileno)-1,3-tiazolidina-2,4-diona (3) (Esquema 2)

(3) 0 composto de título foi obtido seguindo o procedimento geral descrito para o exemplo 1, usando o Intermediário 87 3.1, 4-(4-(trifluorometil)-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidino-6-carbaldeído. Após liofilização, o sal potássio de (5Z)-5-({4-[4-(trifluorometil)-1-piperidinil]pirido[3,2-d] pirimidin-6-il}metileno)-1,3-tiazolidina-2,4-diona (3) foi isolado como um sólido laranja com 99,5% de pureza em HPLC; Fórmula: C17H13O2SF3N5.K; 1H NMR (DMS0~d6) δ 1,39 (m, 2H) , 1,76 (m, 2H) , 2,59 (m, «·. \—1 3, 05 (m, 2H :), 5,44 (m, 2H) , 7, 24 (s, 1H) , 7,76 (d, J = 9 Hz, 1H), 7, 87 (d, J = 9 Hz, 1H) O cn CD «·. (S, 1H) ; HPLC (H20 TFA 0,1 %- ACN TFA LO O O %) : Rt (min); Área O, _ 0 — 2,44; 88,47; LC- MS: M/Z ESI: Rt (mini ) 1,55; 410,09 (M+l); 408,09 (M-l).

Exemplo 4: 5-Pirido[2,3-b]pirazin-6-ilmetileno-tiazolidina-2,4-diona (4) (Esquema 3)

Pirido[2,3-b]pirazino-6-carbaldeido (Intermediário 4.4) (300 mg, 1,89 mmol, 1 eq.), 2,5-tiazolidinediona (397 mg, 3,4 mmol, 1,8 eq.) e pirrolidina (0,03 mL, 0,38 mmol, 0,2 eq.) foram aquecidos em metanol (10 mL) durante 3 horas a 65°C. Quando a reacção estava terminada, foi adicionada água (3 mL) e o correspondente precipitado castanho foi filtrado, lavado com metanol, água e depois éter dietilico para dar 200 mg do composto puro esperado (4). A partir da base livre (200 mg, 0,78 mmol, 1 eq.), um sal de potássio sintetizado usando KOH (1M, V= 0,78 mL, leq.) para dar 231 mg do correspondente sal potássio. Quantidade: 231mg (sal potássio); Rendimento: 41 %; Fórmula: C11H6O2SN4 .K; pureza em HPLC; 98,7%; HPLC (H20 TFA 0, 1%- ACN TFA 0,05%): Rt (min) ; Área % = 1,89 min; 98,7%; 1H NMR (DMSQ-d6) δ 9,09 (s, 1H), 8,95 (s, 1H), 8,46 (d, 1H, J=8Hz), 8,02 (d, 1H, J= 8Hz) , 7,52 (s, 1H) : LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 0,76 min, 259, 07 (M+l) .

Exemplo 5: 5-Furo[3,2-b]piridin-5-ilmetileno-tiazolidina-2,4-diona (5) (Esquema 4)

Uma solução de 2-(trimetilsilil)furo[3,2-b]piridino-5-carbaldeído (Intermediário 5.2) (130 mg; 0,59 mmol; 1 eq.), 2,4-tiazolidinediona (125 mg; 1,07 mmol; 1,8 eq.) e beta-alanina (95 mg; 1,07 mmol; 1,8 eq.) em ácido acético (2 mL) foi aquecida a 100°C durante 7h. Foi adicionada água e o precipitado foi filtrado e lavado com Et20 para dar um sólido (pureza: 98,14%, rendimento: 25%). Depois (5Z)-5-{[2-(trimetilsilil)furo[3,2-b]piridin-5-il] metileno] -1,3-tiazolidina-2,4-diona (41 mg; 0,13 mmol; 1 eq. ) foi dissolvido em MeOH (5 mL) . Adicionou-se NaOH (5N aquoso) (150, 00 μΐ) . A solução foi agitada à ta. Após 24 horas a reacção foi terminada. Adicionou-se AcOH (lmL) e a reacção foi concentrada em vácuo. Adicionou-se água e o precipitado foi filtrado, lavado com água, Et20 e MeOH para produzir um sólido (5). A partir da base livre (24 mg, 0, 097 mmol, 1 eq.), um sal potássio foi sintetizado usando KOH (1M, V=0, 097 mL, 1 eq.) produzindo 24 mg do correspondente sal potássio. Quantidade: 24 mg (sal potássio); Rendimento: 75 %; Fórmula: CnH6N203S.K; Pureza em HPLC: 98,03%: HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área % = 2,96 min; 89 98,03%; 1Η NMR (DMSO~d6) δ 8,30 (s, 1H) , 8,00 (d, 1H, J=9Hz) , 7,51 (d, 1H, J=9Hz), 7,37 (s, 1H) , 7,13 (s, 1H) ; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 1,31 min, 246,95 (M+l).

Exemplo 6: 5-[4-(4-Fluoro-piperidin-l-il)-pirido [3,2-dlpirimidin-6-ilmetileno]-2-tioxo-tiazolidin-4-ona (Esquema 2)

F

O (6) O composto de titulo foi obtido seguindo o procedimento geral descrito para o exemplo 1, usando rodanina (em vez de tiazolidinediona) e o Intermediário 2.1, 4-(4-fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidino-6-carbaldeido. Após liofilização, o sal potássio 5-[4-(4-Fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidin-6-ilmetileno]-2-tioxo-tiazolidin-4-one (6) foi isolado como um sólido laranja com 95,5% pureza em HPLC; Fórmula: Ci6Hi3FOS2N5. K; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1,89 (m, 4H) , 4,42 (m, 4H) , 5,00 (m, 1H) , 7,29 (s, 1H) , 8,07 (d, J = 9 Hz, 2H) , 8,52 (s, 1H) ; HPLC (H20 TFA 0,1%-ACN TFA 0,05%): Rt (min); Área % = 2,37 min; 95,54%; LC-MS: M/Z ESI: Rt (min) 1,38 min; 376,11 (M+l); 374,11 (ΜΙ) ·

Exemplo 7 :_(5Z) -5- [ (3-fenil-3H-imidazo [4,5-Jb] piridin—5— il)metileno]-1,3-tiazolidina-2,4-diona (Esquema 5) 90

Ό (7) Ο composto de titulo foi obtido a partir de 3-fenil-3H-imidazo[4, 5-b]piridino-5-carbaldeído com 55% de rendimento seguindo o procedimento geral descrito para o Exemplo 1. HPLC (durante 10 min 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 96% de pureza, tR 4,95 min. MS (ESI) m/z (C16H10N4O2S) 361,2 (M+K+, 100). 1H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6): δ 8,97 (s, 1H), 8,23 (d, 1H), 8,13 (d, 2H), 7,70-7,45 (m, 5H).

Exemplo 8: Preparação de (5Z)-5-{[3-(3,5-dimetoxifenil-3ff-imidazo [4,5-Jb] piridin-5-il]metileno}-l, 3-tiazolidina—2,4-diona (Esquema5)

(8) O composto de titulo é obtido a partir de 3-(3,5-dimetoxifenil) -3i7-imidazo [4,5-b]piridino-5-carbaldeido com 85% de rendimento seguindo o procedimento geral VI. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 96% de pureza, tR 5,12 min (tR(SM) 7,26 min). 1H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) : δ 8,90 (s, 1H) , 8,16 (d, 1H) , 7,58 (d, 1H) , 7,41 (s, 1H), 7,24 (s, 2H), 6,60 (s, 1H), 3,87 (s, 6H).

Exemplo 9: Tert-butil 5-{5-[(Z)-(2,4-dioxo-l,3-tiazolidin-5-ilideno)metil] -3H-imidazo [4,5-jb]piridin-3-il}indolino-l-carboxilato (Esquema 5) 91

Ό (9) Ο composto de título é obtido a partir de tert-butil 5—(5— formil-3fí-imidazo [4,5-b]piridin-3-il) indolino-l-carboxilato com 65% de rendimento seguindo o procedimento geral VI. HPLC (durante 10 min 10-85% MeCN/0,1% TFA/H20) : 94% de pureza, tR 6,50 min (tR(Sm> 7,31 min). 1H-1SIMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) δ 8,89 (s, 1H) , 8,17 (s, 1H) , 8,12 (d, 1H) , 7,92 (br s, 0,5H), 7,88 (s, 1H) , 7,59 (br s, 0,5H), 7,58 (d, 1H) , 7,28 (d, 1H) , 4,06 (br t, 2H) , 3,24 (t, 2H) , 1,54 (s, 9H) ppm. MS (ESI) m/z (C23H2oN504S) 464,1 (M+l, 100), 408,1 (60) Finnegan LCQ.

Exemplo 10:_(5Z)-5-{[3-(2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-3H- imidazo [4,5Jb] piridin-5-il] metileno}-!, 3-tiazolidina-2,4-diona (Esquema 5)

H

(10)

Uma mistura de tert-butil 5-{5-[(Z)-(2,4-dioxo-l,3-tiazolidin-5-ilideno) metil] -3fí-imidazo [4,5-b] piridin-3-il}indolino-l-carboxilato (35,0 mg, 75,5 mmol) (Exemplo 9), HC1 4 M em 1,4-dioxano (3 mL) , e 2-propanol (1 mL) é agitada durante 1,5 h à temperatura ambiente. A mistura é 92

concentrada até à secura, lavada com água, e seca em vácuo para fornecer 27,3 mg (89% de rendimento) do sal monohidrocloreto da correspondente amina livre. HPLC (durante 10 min 10-85% MeCN/100 mM NaOAc aq. ) co (J) % de pureza, tR 4,44 min (tR(SM) 6,23 min ). 1H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) Ô 9,03 (s, 1H) , 8,33 (d, 1H) , 8,01 (s, 1H) , 7, 96 (s, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,75 (d, 1H) , 7,34 (d, 1H) , 3,97 (br s, 4H) , 3,74 (t, 2H) , 3,22 (t, 2H) ppm. MS (ESI) m/z (C18H13N5O2S) 364, 1 (M+l, 100), 329, 2 (21) Finnegan LCQ.

Exemplo 11: (5Z)-5-{[3-(l-acetil-2,3-dihidro-lH-indol-5- il) -3H-imidazo [4,5-Jb]piridin-5-il]metileno}-l, 3-tiazolidina-2,4-diona (Esquema 5)

(11) 0 composto de titulo é obtido a partir de 3-(l-acetil-2,3-dihidro-lfí-indol-5-il) -3fí-imidazo [4,5-b] piridino-5-carbaldeído (intermediário 10.3) com 55% de rendimento seguindo o procedimento geral VI. HPLC (durante lOmin 10- 85% MeCN/lOOmM NaOAc aq. ) : 99% de pureza, tR 4,46 min ( t R ( SM) 5, 38 min). 1H-NMR ( JEOL 400 MHz, DMSO-de, 65 °C) δ 12,23 (br s, 1H), 8,89 (s , ih: ), 8,27 (d, 1H), 8, 22 (br s, 1H) , 7, 93 (s, 1H), 7,90 (s, 1H) , 7,83 (d, 1H) , 7,70 (d, 1H) , 4,23 (t, 2H), 3,29 (t, 2H), 2,23 (s, 3H) ppm. MS (ESI) m/z (C20H15N5O3S) 406, 3 (M+l, 100) Finnegan LCQ. 93

Exemplo 12: (5Z)-5-[(3-{l-[4-(dimetilamino)butanoil]-2,3- dihidro-lfl-indol-5-il}-3ff-imidazo[4,5-b]piridin-5-il) metileno]-1,3-tiazolidina-2,4-diona

0 composto de titulo é obtido a partir de 3—{1— [4 — (Dimetilamino)butanoil]-2,3-dihidro-lfJ-indol-5-il}-3H-imidazo[4,5-b]piridino-5-carbaldeído (intermediário 11.2) com 78% de rendimento seguindo o procedimento geral VI. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc aq.): 98 % de pureza, tR 4,14 min (tR(sm) 5,02 min). XH -NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-de) δ 8,94 (s, 1H) , 8,28 (d, 1H) , 8,22 (d, 1H), 7, 98 (s, 1H), 7,76 (br s , 3H) , 4,23 (t, 2H) , 3,45 (br s, mH) , 3,31 (t, 2H), 2,71 (t, 2H) , 2,59 (t, 2H) , 2,52 (s, 6H) , 1,88 (m, 2H) ppm. MS (ESI) m/z (C24H24N6O3S) 477, 1 (M+l, 100), 432,2 (49), 272,3 (19), 260,4 (21) FinneganLCQ.

Exemplo 13: (5Z)-5-({3-[1-(metilsulfonil)-2,3-dihidro-lH- indol-5-il] -3H-imidazo [4,5-jb]piridin-5-il}metileno) -1,3-tiazolidina-2,4-diona (EsquemaS)

O composto de titulo é obtido a partir de 3-[l-(metilsulfonil) -2,3-dihidro-lH-indol-5-il] -3H-imidazo [4,5-b] piridino-5-carbaldeído (intermediário 12.2) com 62% de 94 rendimento seguindo o procedimento geral VI. HPLC (durante lOmin 10-85% MeCN/lOOmM NaOAc ag.) : 99% de pureza, tR 4,80 min (tR(sm) 6,13 min) . 1H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) δ 8,97 (s, 1H) , 8,32 (d, 1H) , 7,96 (s, 2H) , 7,87 (d, 1H) , 7,74 (d, 1H) , 7,45 (d, 1H) , 4,09 (t, 2H) , 3,28 (t, 2H) , 3,10 (s, 3H) ppm. MS (ESI) m/z (C19H15N5O4S2) 442,1 (M+l, 100), 363,0 (27) , 291,3 (22) .

Exemplo_14 :_Preparação_de_(5Z) -5- [ (3-{ 1- [(clorometil)sulfonil]-2,3-dihidro-lfl-indol-5-il}-3fl-imidazo [4,5-Jb] piridin-5-il)metileno] -1,3-tiazolidina—2,4-diona (EsquemaS)

O composto de título é obtido a partir de 3-{ΙΕ (clorometil) sulfonil] -2,3-dihidro-lfí-indol-5-il}-3Η-imidazo[4,5-b]piridino-5-carbaldeído (intermediário 13.2) com 60% de rendimento seguindo o procedimento geral VI. HPLC (durante 10 min 10-85% MeCN/100 mM NaOAc aq.): 99% de pureza, tR 5,37 min (tR(SM) 7,03 min) . 1H-NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-de) δ 8,92 (s, 1H) , 8,31 (d, 1H) , 7,98 (d, 2H) , 7,88 (d, 1H) , 7,75 (d, 1H) , 7,52 (d, 1H) , 5,38 (s, 2H) , 4,22 (t, 2H) , 3,30 (t, 2H) ppm. MS (ESI) m/z (C19H14CIN5O4S2) 477,0 (M+l, 100) Finnegan LCQ.

Exemplo_15 :_(5Z) -5- [ (3-{l-[ (3-morfolin-4-ilpropil) sulfonil] -2,3-dihidro-lH-indol-5-il}-3ff-imidazo [4,5-Jb] piridin-5-il)metileno)-1,3-tiazolidina-2,4-diona (Esquema 5) 95 /—\

Ο composto de titulo é obtido a partir de 3 —{1—[(3 — morfolin-4-ilpropil) sulfonil ] -2,3-dihidro-lfí-indol-5-il} -3fí-imidazo [ 4,5-b] piridino-5-carbaldeido com 39% de rendimento seguindo o procedimento geral VI. HPLC (durante 10 min 10-85% MeCN/100 mM NaOAc aq.): tR 5,50 min (tR(SM) 7, 55 min) . 1H-NMR ( JEOL 400 MHz, DMSO- -d6) δ 8,93 (s, 1H) , 8, 22 (s, 1H), 8,20 (s, 1H) , 7, 85 (d, 1H) , 7, 66 (d, 1H) , 7, 56 (s, 1H) , 7,42 (d, 1H) , 4, 13 (t, 2H) , 3,74 (m, 2H) , 3, 50-3,20 (m, 12H! ) , 2 ,18 (m, 2H) ppm. MS ( :esd m/z (C23H27N5O3S) 454,0 (M, 10) Finnegan LCQ.

Exemplo 16: rerfc-butil 6-{5-[(Z)-2,4-dioxo-l,3-tiazolidin-5-ilideno)metil] -3fl-imidazo [4,5-Jb]piridin-3-il}indolino-l-carboxilato (Esquema 5)

O composto de titulo é obtido a partir de tert-butil 6—(5— formil-3íí-imidazo [4,5-b]piridin-3-il) indolino-l-carboxilato com 22% de rendimento seguindo o procedimento geral VI. HPLC (durante 10 min 10-85% MeCN/100 mM NaOAc aq.): 99% de pureza, tR 6,49 min (tR(Sm) 8,61 min) . 1H- NMR (JEOL 400 MHz, DMSO-d6) δ 8,87 (s, 1H) , 8,24 (d, 1H) , 8,02 (br d, 1H) , 7,74 (d, 1H) , 7,72 (s, 1H), 7,50 (br s, 1H), 7,41 (d, 1H) , 96 4,05 (t, 2H), 3,20 (t, 2H), 1,45 (s, 9H) ppm. MS (ESI) m/z (C23H20N5O4S) 464,0 (M+l, 100), 408, 1 (42) Finnegan LCQ.

Exemplo 17: (5Z)-5-({3-[1-(metilsulfonil)-2,3-dihidro-lH- indol-6-il] -3H-imidazo [4,5-jb]piridin-5-il}metileno) -1,3-tiazolidina-2,4-diona (Esquema 5)

0 composto de titulo é obtido a partir de 3-[l-(metilsulfonil) -2,3-dihidro-lfí-indol-6-il] -3V-imidazo [4,5 — b]piridino-5-carbaldeído com 29% de rendimento seguindo o procedimento geral VI. HPLC (durante 10 min 10-85% MeCN/100 mM NaOAc aq.): 99% de pureza, tR 4,68 min (tR(SM) 6,09 min). 1H-NMR (JEOL 4 00 MHz, DMSO-d6) δ 8,87 (s, 1H) , 8, 17 (d, \—1 82 (d, 1H), 7,65-7,50 (m, 3H) , 7,42 (s, 1H) , 4,09 (t, 2H) , 3,24 (t, 2H) , 3,15 (s, 3H) ppm. MS (ESI) m/z (C19H15N5O4S2) 442, 0 (M+l, 100), 362,8 (21) Finnegan LCQ.

Exemplo 18; Ensaios biológicos

Os compostos da presente invenção podem ser submetidos aos seguintes ensaios: a) Ensaio de quinase lipidica de PI3K de alto fluxo (ensaio de ligação): A eficácia dos compostos da invenção na inibição da fosforilação da PI3K induzida por lipido pode ser testada nos seguintes ensaios de ligação. O ensaio combina a tecnologia de ensaio de proximidade de cintilação (SPA, Amersham) com a capacidade da neomicina 97 (um antibiótico policatiónico) para ligar fosfolipidos com alta afinidade e especificidade. 0 Ensaio de Proximidade de Cintilação é baseado nas propriedades dos isótopos de fraca emissão (tais como 3H, 125I, 33P) . 0 revestimento dos grânulos SPA de com neomicina permite a detecção de substratos lipidos fosforilados após incubação com PI3K recombinante e ATP radioactivo no mesmo poço, capturando os fosfolipidos radioactivos para os grânulos de SPA através da sua ligação especifica à neomicina. A uma MTP de 384 poços contendo 5 μΐ do composto de teste de Fórmula (I) (solubilizado em DMSO a 6%; para produzir concentrações de 100, 30, 10, 3, 1, 0,3, 0,1, 0,03, 0,01, 0, 001 μΜ do composto de teste) , são adicionados os seguintes componentes do ensaio. 1) 5 μΐ (58 ng) de GST-ΡΙ3Κγ recombinante Humano (em Hepes 40 mM, pH 7,4, DTT 1 mM e etilenoglicol 5%) 2) 10 μΐ de micelas lipidicas e 3) 10 μΐ de tampão Quinase ([33Ρ]γ-ΑΤΡ 45μΜ/60ηΟί, MgCl2 30mM, DTT ImM, β-Glicerofosfato lmM, Na3V04 100 μΜ, Colato de Na 0,3 %, em Hepes 4 0 mM, pH 7,4) . Após incubação à temperatura ambiente durante 180 minutos, com agitação suave, a reacção foi parada com a adição de 60 μΐ de uma solução contendo 100 μρ de grânulos de SPA PVT revestidos com neomicina em PBS contendo ATP lOmM e EDTA 5mM. O ensaio é adicionalmente incubado à temperatura ambiente durante 60 minutos com agitação suave para permitir a ligação dos fosfolipidos aos grânulos de SPA com neomicina. Após precipitação dos grânulos de SPA PVT revestidos com neomicina durante 5 minutos a 1500 x g, o PtdIns(3)P radioactivo é quantificado por contagem de cintilação numa placa de contagem Wallac MicroBeta ™. 98

Os valores indicados na Tabela I a seguir referem-se ao IC50 (nM) em relação ao ΡΙ3Κγ, i.e. a quantidade necessária para alcançar 50% de inibição do referido alvo. Os referidos valores mostram um considerável potencial inibidor dos compostos tiazole em relação ao ΡΌΚγ. Exemplos de actividade inibidora para compostos da invenção são apresentados na Tabela I a seguir.

Tabela I: Valores de IC50 dos derivados de tiazole contra _ΡΡΚγ._

Exemplo N°. Ρΐ3κγ IC50 (nM) 1 4 3 6 4 20 5 35 6 2 8 10 12 7 15 20 b) ELISA à base de células para monitorizar a inibição de PI3K: A eficácia dos compostos da invenção na inibição da fosforilação Akt/PKB induzida por PI3K pode ser testada no seguinte ensaio com base em células.

Medição da fosforilação Akt/PKB em necrófagos após estimulação com Complemento 5a: Linha 264: Da linha de necrófagos 264-7 (cultivados em meio DMEM-F12 contendo 10% de soro de Fetal Bovino e antibióticos) são colocadas 20'000 células/poço numa MTP 96, 24 h antes da estimulação das células. Previamente à estimulação com 50 nM do Complemento 5a durante 5 minutos, as Células estão com carência de soro durante 2h, e pré-tratadas com inibidores durante 20 minutos. Após estimulação as células são fixadas em formaldeido a 4% durante 20 minutos e lavadas 3 vezes em PBS contendo Triton X-100 a 1% (PBS/Triton). A peroxidase endógena é bloqueada com uma incubação de 20 minutos em 99 H202 a 0,6% e Azida de Sódio a 0,1% em PBS/Triton e lavada 3 vezes em PBS/Triton. As células são depois bloqueadas através de 60 minutos de incubação com 10% soro fetal bovino em PBS/Triton. Depois, o Akt/PKB fosforilado é detectado através de incubação durante a noite a 4°C com o primeiro anticorpo (anti fosfo Serina 473 Akt IHC, Sinalização de Célula) diluído 800 vezes em PBS/Triton, contendo 5% de soro de albumina bovina (BSA) . Após 3 lavagens em PBS/Triton, as células são incubadas durante 60 minutos com anticorpo de cabra anti-coelho conjugado a peroxidase (diluição 1/400 em PBS/Triton, contendo BSA a 5%) , lavadas 3 vezes em PBS/Triton, e 2 vezes em PBS e adicionalmente incubadas em 100 μΐ de solução do substrato reagente (R&D) durante 20 minutos. A reacção é parada através da adição de 50 μΐ e S04H2 1 M e a absorvância é lida a 450 nm.

Os valores indicados na Tabela II a seguir reflectem a percentagem de inibição da fosforilação de AKT em comparação com o nível basal. Os referidos valores mostram um claro efeito dos compostos tiazole na activação da fosforilação da AKT em necrófagos.

Exemplos de actividades inibidoras dos compostos da invenção são indicados na Tabela II a seguir.

Tabela II: Valores IC50 de derivados de tiazole em

Ensaios de Células

Exemplo N°. Ensaio de Células (P-Akt, Elisa) IC50 [nM] 1 < 10 3 < 10

Exemplo 19: Modelo de recrutamento das células da cavidade peritoneal induzido por tioglicolato 100 A eficácia in vivo dos compostos da invenção na inibição da migração dos leucócitos perante a exposição intraperitoneal do tioglcolato pode ser testado com o seguinte ensaio. Protocolo Experimental: Fêmeas de ratos C3H com 8-10 semanas foram submetidas a jejum durante 18 horas. 15 minutos antes da injecção intraperitoneal de tioglicolato (1,5%, 40 mL/kg), os ratos foram tratados oralmente com azolidinonas de metileno de piridina de Fórmula (I). Os ratos controlo receberam CMC/Tween como veiculo (10 mL/kg). Os ratos foram depois sacrificados por inalação de CO2 e a cavidade peritoneal foi lavada duas vezes com 5 mL de PBS/1 mM EDTA arrefecido em gelo. As lavagens foram feitas 4hrs ou 48 hrs após a exposição ao tioglicolato para avaliar o recrutamento de neutrófilos ou macrófagos, respectivamente. As células brancas do sangue (neutrófilos, linfócitos ou macrófagos) foram contadas usando a Beckman Coulter® Ã T 5diff(TM) . Foi usada dexametasona como fármaco de referência.

Exemplo 20: Preparação de uma formulação farmacêutica Formulação 1 - Comprimidos

Um composto de fórmula (T) é misturado como um pó seco com um ligante de gelatina seca numa proporção em peso aproximada de 1:2. Uma pequena quantidade do estearato de magnésio é adicionada como lubrificante. A mistura é moldada em comprimidos de 240-270 mg (80-90 mg) de composto activo azolidinona de metileno de piridina por comprimido) numa prensa para comprimidos.

Formulação 2 - Cápsulas

Um composto de fórmula (I) é misturado como um pó seco com um diluente de amido numa proporção em peso aproximada de 1:1. A mistura é colocada dentro de cápsulas de 250 mg (125 101 mg do composto activo metileno azolidinona de piridina por cápsula).

Formulação 3 - Líquido

Misturou-se um composto de Fórmula (I) (1250 mg), sacarose (1,75 g) e goma de xantano (4 mg), passados através de um crivo de mesh U.S. No. 10, e depois misturado com uma solução previamente preparada de celulose microcristalina e carboximetil celulose de sódio (11:89, 50 mg) em água. Benzoato de sódio (10 mg), aroma, e corante são diluídos com água e adicionados com agitação. Depois é adicionada água suficiente para produzir um volume total de 5 mL.

Formulação 4 — Comprimidos

Um composto de Fórmula (T) é misturado como um pó seco com um ligante de gelatina seca numa proporção em peso aproximada de 1:2. Uma pequena quantidade estearato de magnésio é adicionada como um lubrificante. A mistura é formada em comprimidos de 450-900 mg (150-300 mg de composto activo azolidinona de metileno de piridina) numa prensa para comprimidos.

Formulação 5 - Injecção

Um composto de Fórmula (I) é dissolvido num meio aquoso injectável de solução salina de cloreto de sódio estéril tamponada com uma concentração de aproximadamente 5 mg/mL.

Lisboa, 18 de Novembro de 2011

Claims (30)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com a Fórmula (I),

em que R1 é seleccionado a partir de H, halogénio, Ci~ Cõ-alquilo, C2-C6-alquenilo C2-C6-alquinilo, Ci-C6-alquil alcoxi, alcoxicarbonilo, acilo, sulfonilo, sulfanilo, sulfinilo, alcoxi e amino; R2 é seleccionado a partir de H, halogénio, Ci-Cõ-alquilo, C2-C6-alquenilo, C2-Cs-alquinilo; arilo; heteroarilo, C3-C8-cicloalquilo; C3-C8- heterocicloalquilo, aril Ci-C6-alquilo, heteroaril Ci-C6alquilo, C3-C8-cicloalquil Ci-C6-alquilo, C3-C8-heterocicloalquilo Ci-C6-alquilo, Ci-C6-alquil alcoxi, alcoxicarbonilo, acilo, sulfonilo, sulfanilo, sulfinilo, alcoxi e amino; X é seleccionado a partir de S, NH e 0; Y é seleccionado a partir de 0, Se NR3, em que R3 é seleccionado a partir de H, Ci-C6-alcoxi opcionalmente substituído, Ci-C6-alquilo opcionalmente substituído, C2-C6-alquenilo opcionalmente substituído, C2-C6~ alquinilo opcionalmente substituído, Ci-C6_alquil arilo opcionalmente substituído, ciano e sulfonilo opcionalmente substituídos; A é um grupo heteroarilo; n é um número inteiro seleccionado a partir de 1 e 2; assim como os seus isómeros geométricos, as suas formas opticamente activas como enantiómeros, 2 diastereómeros e suas formas de racemato, assim como os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

2. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com a reivindicação 1 em que R1 é H.

3. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com as reivindicações 1 até 2 em que R2 é H. acordo c3-c8-

4. Derivado azolidinona de metileno de piridina de com as reivindicações 1 até 2 em que R2 é heterocicloalquilo.

5. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com as reivindicações 1 até 2 em que R2 é seleccionado a partir de arilo e heteroarilo.

6. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações precedentes em que X é S.

7. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações precedentes em que Y é 0.

8. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações precedentes em que Y é S.

9. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações precedentes em que n é 1. 3

10. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações precedentes em que A forma em conjunto com o anel piridina o grupo seguinte (Ia) :

em que R1 e R2 são como definido em qualquer das reivindicações precedentes.

11. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações 1 até 9 em que A forma em conjunto com o anel piridina o grupo seguinte (Ib):

m em que R1 e R2 são como definido em qualquer das reivindicações precedentes.

12. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações 1 até 9 em que A forma em conjunto com o anel piridina o grupo seguinte (Ic):

em que R1 e R2 são como definido em qualquer das reivindicações procedentes. 4

13. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações 1 até 9 em que A forma em conjunto com o anel piridina o grupo seguinte (Id):

(W) em que R1 e R2 são como definido em qualquer das reivindicações precedentes.

14. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações 1 até 10 em que R1 é H; R2 é C3-C8-heterocicloalquilo; X é S; Y é O ou S e A formam em conjunto com o anel piridina um grupo de Fórmula (Ia).

15. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações precedentes em que R1 é Η; X é S; Y é O e A forma em conjunto com o anel piridina um grupo de Fórmula (Ib).

16. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações precedentes em que R1éH; XéS; YéOeA forma em conjunto com o anel piridina um grupo de Fórmula (Ic).

17. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações precedentes em que R1éH; XéS; YéOeA forma em conjunto com o anel piridina um grupo de Fórmula (Id).

18. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações precedentes, seleccionado a partir do grupo seguinte: 5 (5 Ζ) — 5 —{ [4-(l-piperidinil)pirido[3,2-d]pirimidin-6-il]metileno}-1,3-tiazolidina-2,4-diona; (5 Z)— 5 —{ [4-(4-fluoro-l-piperidinil)pirido[3,2-d] pirimidin-6-il]metileno}-1,3-tiazolidina-2,4-diona; (5Z)—5—({4—[4—(trifluorometil)-l-piperidinil]pirido [3,2 — d]pirimidin-6-il}metileno)-1,3-tiazolidina-2,4-diona; 5-Pirido[2,3-b]pirazin-6-ilmetileno-tiazolidina-2,4-diona; 5-Furo[3,2-b]piridin-5-ilmetileno-tiazolidina-2,4-diona; 5- [4-(4-Fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidin 6- ilmetileno]-2-tioxo-tiazolidin-4-ona; 5-(3-Fenil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno)-tiazolidina-2,4-diona; 5-[3-(3,5-Dimetoxi-fenil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno]-tiazolidina-2,4-diona; éster tert-butílico do ácido 5-[5-(2,4-Dioxo tiazolidin-5-ilidenometil)-imidazo[4,5-b]piridin-3-il]-2,3-dihidro-indole-l-carboxílico; 5-[3-(2,3-Dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno]-tiazolidina-2,4-diona; 5-[3-(l-Acetil-2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo [4,5-b]piridin-5-il metileno]-tiazolidina-2,4-diona; 5-{3-[1-(4-Dimetilamino-butiril)-2,3-dihidro-lH-indol 5-il]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno}-tiazolidina-2,4-diona; 5-[3-(l-Metanosulfonil-2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il metileno]-tiazolidina-2,4 diona; 5-[3-(l-Clorometanosulfonil-2,3-dihidro-lH-indol-5-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno]-tiazolidina-2,4-diona; 6 5-{3-[1-(3-Morfolin-4-il-propano-l-sulfonil)-2,3-dihidro-lH-indol-5-il]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno}-tiazolidina-2,4-diona; éster tert-butílico do ácido 6-[5-(2,4-Dioxo- tiazolidin-5-ilidenometil)-imidazo [4,5-b]piridin-3- il]-2,3-dihidro-indole-l-carboxílico; 5-[3-(l-Metanosulfonil-2,3-dihidro-lH-indol-6-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-ilmetileno]-tiazolidina-2,4-diona.

19. Derivado azolidinona de metileno de piridina de acordo com as reivindicações 1 até 18 para uso como medicamento.

20. Uso de um derivado de azolidinona de metileno de piridina de acordo com as reivindicações 1 até 18 assim como misturas destes para a preparação de um medicamento para a profilaxia e/ou tratamento de doenças auto-imunes e/ou doenças inflamatórias, doenças cardiovasculares, doenças neurodegenerativas, infecções bacterianas ou virais, doenças do rim, agregação plaquetária, cancro, transplante, rejeição de enxerto ou lesões pulmonares.

21. Uso de acordo com a reivindicação 20, em que as referidas doenças são seleccionadas no grupo que inclui esclerose múltipla, psoriase, artrite reumatóide, lúpus sistémico eritematoso, doença inflamatória intestinal, inflamação pulmonar, trombose ou infecção/inflamação cerebral tais como meningite ou encefalite.

22. Uso de acordo com a reivindicação 20, em que as referidas doenças são seleccionadas do grupo que 7 inclui Doença de Alzheimer, Doença de Huntington, Trauma do CNS, enfarte ou estados isquémicos.

23. Uso de acordo com a reivindicação 20, em que as referidas doenças são seleccionadas do grupo que inclui ateroesclerose, hipertrofia cardíaca, disfunção dos miocitos cardíacos, pressão arterial elevada ou vasoconstrição.

24.Uso de acordo com a reivindicação 20, em que as referidas doenças são seleccionadas do grupo que inclui doença pulmonar obstrutiva crónica, fibrose de choque anafilático, psoríase, doenças alérgicas, asma, enfarte ou estados isquémicos, isquémia-reperfusão, agregação/activação plaquetária, atrofia/hipertrofia do músculo esquelético, recrutamento de leucócitos no tecido cancerígeno, angiogénese, invasão metastática, melanoma, Sarcoma de Karposi, infecções bacterianas e virais agudas e crónicas, sépsia, rejeição de enxerto, esclerose glomerular, nefrite glomerular, fibrose renal progressiva, feridas endoteliais e epiteliais no pulmão ou na inflamação geral das vias aéreas do pulmão.

25. Uso de acordo com as reivindicações 20 até 24 para a modulação, em particular para a inibição, da actividade da quinase PI3.

26. Uso de acordo com a reivindicação 25, em que a referida quinase PI3 é uma quinase PI3 γ.

27. Composição farmacêutica contendo pelo menos um derivado azolidinona de metileno de piridina de 8 acordo com qualquer das reivindicações 1 até 18 e um seu transportador, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis.

28. Processo para a preparação de derivados de azolidinona de metileno de piridina de acordo com qualquer das reivindicações 1 até 18, compreendendo o passo de reagir um composto de Fórmula (II) com um derivado de Fórmula (III) na presença de uma base:

em que R1, R2, A, X, Y e n são como definido em qualquer das reivindicações precedentes.

29. A composto de acordo com a Fórmula (lia), (Ilb), (IIc) e (Ild):

em que R4 é seleccionado a partir de H e R2; R5 é um grupo R2 em que o primeiro átomo ligado ao anel pirimidina é seleccionado a partir de C, N, S , e 0 em que R4 é NH2, R5 não é NH2; R1, R2 e n são como definido em qualquer das reivindicações precedentes; (Ilb) (R2)vfN« N R 1 9 em que R1 e R2 e n são como definido em qualquer das reivindicações precedentes; 9

em que R1, R2 e n são como definido em qualquer das reivindicações precedentes e em que pelo menos um R1 ou R2 não são H; O

(IM> em que R1, R2 e n são como definido em qualquer das reivindicações precedentes e com a condição de que o composto de Fórmula (Ild) não seja 2-(4-metoxifenil)-3H-Imidazol[4,5-b]piridino-5-carboxaldeído.

30. Composto de acordo com a reivindicação 29 seleccionado a partir do grupo: 4-Piperidin-l-ilo-pirido[3,2-d]pirimidino-6-carbaldeído; 4-(4-Fluoro-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidino-6-carbaldeído; 4-(4-Metil-piperidin-l-il)-pirido[3,2-d]pirimidino-6-carbaldeido; Pirido[2,3-b]pirazino-6-carbaldeido; 2- Trimetilsilanil-furo[3,2-b]piridino-5-carbaldeído; 3- Fenil-lH-imidazo[4,5-b]piridino-5-carbaldeído; 3- (3, 5-Dimetoxifenil) -3fí-imidazo [4,5-b] piridino-5-carbaldeído; 10 Tert-butil 5- (5-formil-3fí-imidazo [ 4,5-b] piridin-3 il)indolino-l-carboxilato; 3- (l-acetil-2,3-dihidro-l/í-indol-5-il) -3fí-imidazo [4,5 b]piridino-5-carbaldeído; 3- {1- [4- (dimetilamino) butanoil] -2,3-dihidro-líí-indol-5-il}-3H-imidazo [4,5-b]piridino-5-carbaldeído; 3- [1- (metilsulfonil) -2,3-dihidro-lff-indol-5-il] -3H-imidazo[4,5-b]piridino-5-carbaldeído; 3-{1-[(clorometil)sulfonil]-2,3-dihidro-lH-indol-5-il} -3ií-iinidazo [ 4,5-b] piridino-5-carbaldeído; 3 - {1- [ (3-morfolin-4-ilpropil) sulfonil ] -2,3-dihidro-líí-indol-5-il} -3fí-imidazo [4,5-b] piridino-5-carbaldeido; rent-butil 6- (5-formil-3íí-imidazo [ 4,5-b] piridin-3 il)indolino-l-carboxilato; e 3- [1- (metilsulfonil) -2,3-dihidro-líí-indol-6-il] -3H-imidazo[4,5-b]piridino-5-carbaldeído. Lisboa, 18 de Novembro de 2011