RO59682B1 - PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG - Google Patents
PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG Download PDFInfo
- Publication number
- RO59682B1 RO59682B1 RO80575A RO8057574A RO59682B1 RO 59682 B1 RO59682 B1 RO 59682B1 RO 80575 A RO80575 A RO 80575A RO 8057574 A RO8057574 A RO 8057574A RO 59682 B1 RO59682 B1 RO 59682B1
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- veronal
- igg
- sodium
- buffer solution
- reagent
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 5
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229940087559 grape seed Drugs 0.000 claims 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims 1
- FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 5,5-diethylbarbituric acid Chemical compound CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 14
- 229960002319 barbital Drugs 0.000 abstract description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 241000894007 species Species 0.000 abstract description 4
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 abstract description 3
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 abstract description 2
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 abstract description 2
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 abstract description 2
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 abstract 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 241000219094 Vitaceae Species 0.000 description 1
- 241000219095 Vitis Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N barbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=O)N1 HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000011449 brick Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 235000021021 grapes Nutrition 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 210000004201 immune sera Anatomy 0.000 description 1
- 229940042743 immune sera Drugs 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- RGHFKWPGWBFQLN-UHFFFAOYSA-M sodium;5,5-diethylpyrimidin-3-ide-2,4,6-trione Chemical compound [Na+].CCC1(CC)C([O-])=NC(=O)NC1=O RGHFKWPGWBFQLN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000011514 vinification Methods 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Invenția se refera la un procedeu
de obținere a unui reactiv imunochimic
destinat Identificării și doaârii imunogiebulinelor
serice IgG umane șs de ia alte
specii animate. Procedeul conform invenției
constă în aceea că folosește ca materie
primă sâmburi de struguri, care se usucă în
curent de aer cald, se macină, se supun
extracției cu o soluție tampon de veronal ··
veronai scd-c. după care extractul obținut
se cenfrifugheazâ, supernatantul se precipită
în alcool etilic de 50°, iar precipitatul se
resolubîlizează în soluție tampon veronal -
veronal sodic.
Description
Invenția se față se referă la un procedeu de obținere a unui reactiv imunochimlc destinat identificării și dozării imunoglobulineior serice IgG umane și de ia alte specii animale.
în prezent, în scopul identificării și dozării imunoglobulinelor de la om și animale. se folosesc seruri monospecifice. Aceste seruri se obțin prin hiperimunizarea unor animale potrivite pentru acest scop, care sunt hiperimunizate cu antigenul respectiv după o anumită schemă, sângerarea animalelor fâcându-se când s-a obținut un litru de anticorpi corespunzător.
Deoarece în diferite afecțiuni virotice șl bacteriene umane și animale, imunoglobulsnele normale - y globulineie polivalente - suferă modificări meri din punct de vedere cantitativ, determinarea lor oferă un spectru larg de indicații în scopul punerii diagnosticului. Folosirea ca reactivi a serurilor animale monospecifice prezintă dezavantaje, datorită faptului că acești reactivi sunt scumpi, specifici speciei, Iar procedeul ior de obținere este lung și laborios.
Invenția de față elimină dezavantajele arătate mai sus prin aceea că, în scopul detectării și determinării cantitative a imunoglobulinei G (igG) la om și animale, folosește un reactiv obținut prin extragere clin sâmburii do struguri izolați, uscâți și măcinați, extracția făcându-se cu ajutorul unei soluții tampon de veronal veronal sodic (ester dietilmaionic al acidului barbiluric - sarea sodica a esterului dletll malonic al acidului barbituricl, după care extractul obținut se centrifughează, supernatantul se precipită ou alcool etilic de 50s, iar precipitatul se resolubiiizează în soluție tampon veronal - veronal sodic.
Se dă, în continuare, un exemplu de realizare a invenției.
Sâmburi de struguri, provenit! de la tescuite in procesai de vinificare, se supun izolării pe sită sub curent de apa și pasaj cu perie aspră. In continuare, sâmburii se supun uscării sub curent de aer cald ia temperatura de 80’C, apoi, sunt aduși sub formă de făină prin măcinare într-o moară cu ciocănele. în vederea extragerii reactivului, făina de sâmburi se încarcă într-un exfractor prevăzut cu mijloace de agitare șl se toarnă soluție tampon veronal - veronal sodic cu pH~8,8, cu tărie ionică între 0,05 șl 0,025, folosind pentru fiecare gram de făină de la 5 la 20 ml soluție tampon. Dopa extracție, reziduul solubil se sedimentează ușor sau este separat prin centrifugare. Reziduul se supune ia încă 2..,3 extracții efectuate în aceleași condiții ca extracția anterioară. Supernatanteie obținute se amestecă și reprezintă reactivul brut, lichid de culoare gaidsnă-cărămizio.
Pentru extragerea componentelor chimice active din reactivul brut, se face precipitarea in alcool etilic de 5CTC. Fazele sunt separate prin centrifugare ori prin sedimentare liberă, Iar depozitul se resolubiiizează în tampon veronal - veronai sodic cu pH~8,6, în condițiile de ia extracții. Se obține, astfel, reactivul sub formă pură, care se poate aduce la o concentrație anumită, standard.
Reactivul prezintă următoarele caracteristici: migrează electroforetic atât în gel de agar, cât și în gel de agaroză, la pH~8,8, în tampon veronal - veronal sodic, spre anod, precipită selectiv imuncglobulinele G serice, după separarea eieciroforeflcă a acestora, ca în imunoeiectroforexa cu seruri imune monospecifice, dând reacții specifice de precipitare, de altă natură decât precipitările prin cuplaj antigen-antieorp, nu precipită imunoglobulinele serice din clase IgA și IgM și indică uneie modificări patologice din molecula de IgG, ia bolnavi cu biperproducție cionalâ de IgA, reactivul poate fi folosit în oricare din tehnicile Imunochimlce curente, imunoetectroforezâ, umunoelectroprecipltare. dublă difuzie. Pentru analizele cantitative de imunoglobuline umane șî de alte specii, reactivul poate fi inclus la cald în gel de ager ca pentru realizarea plăcilor cu anticorpi. în acest caz, se obțin precipitări electroforetice cu o Singură migrare, sub formă de rachetă catodică, sau în dublă migrare.
Reactivul obținut, conform Invenției: poate fi folosit pentru identificarea și dozarea unor componente proteinice, extracte din vegetale, semințe de mere și de alte fructe.
invenția prezintă următoarele evantaie:
- realizează un reactiv nou anti IgG fără limitare de specie de utilizare largă în biologia șl cim-ca umană. în biologia si clinica veterinară, in biologie vegetare ș; industria alimentară pentru identificarea.
te te dozarea și semnalarea modificărilor patologice a imunologlobulineldr G utilă în scopuri diagnostice și de cercetare.
Claims (1)
- Procedeu de obținere a unui reactiv imunochimic destinat identificării și dozării imunoglobulinelor serice IgG umane șl de la alte specii animale, caracterizat prin aceea că folosește ca materie primă sâmbun de struguri care se usucă in curent de aer caid. se macină, se supun extracție! cu o soluție tampon de veronaî veronaî sodic, după care extractul obținut se centrifughează. supareafantul se precipită te aicool etilic de StÎ'C, iar precipitatul se resolubilizează In soluție tampon verenai - veronaî sodic.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RO80575A RO59682B1 (ro) | 1974-11-22 | 1974-11-22 | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RO80575A RO59682B1 (ro) | 1974-11-22 | 1974-11-22 | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO59682B1 true RO59682B1 (ro) | 2002-06-28 |
Family
ID=40902932
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RO80575A RO59682B1 (ro) | 1974-11-22 | 1974-11-22 | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RO (1) | RO59682B1 (ro) |
-
1974
- 1974-11-22 RO RO80575A patent/RO59682B1/ro unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bade et al. | Rapid method of extraction of antibodies from hen egg yolk | |
| Middleton JR | Immunochemical relationship of human plasma beta-lipoprotein and chylomicrons | |
| CN111077320B (zh) | 一种检测鸡或鸭骨骼肌肌钙蛋白i的酶联免疫试剂盒及其制备方法与应用 | |
| Beiser et al. | Immunochemical Studies on Blood Groups: XII. Preparation of Blood Group Substances from Bovine Stomach Linings and a Comparison of Their Chemical and Immunochemical Properties with Those of Blood Group Substances from Other Species | |
| Perlmann et al. | Soluble antigens in microsomes and other cell-fractions of rat liver | |
| Webster et al. | An inhibition test for identifying the neuraminidase antigen on influenza viruses | |
| BR112012030535B1 (pt) | Método para detectar um componente da parede celular de levedura | |
| CN109810191B (zh) | 一种抗羊骨骼肌肌钙蛋白i单克隆抗体及其应用 | |
| CN109705216B (zh) | 一种抗牛骨骼肌肌钙蛋白i单克隆抗体及其应用 | |
| EP1847831A1 (en) | Method for the determination of the composition of textile fibers | |
| RO59682B1 (ro) | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG | |
| Nagode et al. | Organ-identifying properties of alkaline phosphatases from canine tissues | |
| Sacco et al. | Comparison of antigens in the ovary, oviduct and uterus of the rabbit and other mammalian species | |
| Hansen et al. | Quantitative recovery of carboxymethyl cellulose from milk | |
| CN111220809B (zh) | 一种检测鸡或鸭骨骼肌肌钙蛋白i的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法与应用 | |
| CN117510620A (zh) | 一种抗绵羊Y精子IgY的制备方法 | |
| RO59685B1 (ro) | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR lgG | |
| Mairs et al. | A serological comparison of five species of atlantic clupeoid fishes | |
| Poli et al. | Crossover electrophoresis with indirect immunofluorescence in the detection of soy protein in heated meat products | |
| RO59686B1 (ro) | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG | |
| CN114660298A (zh) | 一种基于中性氨基酸转运蛋白在外泌体中的表达在衰老检测中的应用 | |
| RO59684B1 (ro) | PROCEDEU DE OBTINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG | |
| de Palozzo et al. | Immunoelectrophoretic studies with bean proteins | |
| RO59687B1 (ro) | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR ÎgG | |
| Hruban et al. | Lymphocytotoxic antibodies against cattle J antigen |