RO126606A0

RO126606A0 - Metodă analitică () de identificare, dozare a florfenicolului şi a impurităţilor înrudite chimic din produsele farmaceutice florfenidem 10% - soluţie orală, florfenidem 50 şi florfenicol ingredient farmaceutic activ

Info

Publication number: RO126606A0
Application number: ROA201000777A
Authority: RO
Inventors: Maria Neagu
Original assignee: Maria Neagu
Priority date: 2010-08-31
Filing date: 2010-08-31
Publication date: 2011-08-30

Abstract

Prezenta invenţie se referă la o metodă analitică de identificare şi dozare a Florfenicolului şi a impurităţilor chimice înrudite, din produsele farmaceutice conţinând acest ingredient activ. Metoda conform invenţiei cuprinde o cromatografie HPLC, folosind o coloană octadecilsilil silicagel, pentru cromatografie R, cu lungimea de 150 mm, diametrul interior de 4,6 mm, dimensiunea particulelor de 5 μ m, la o temperatură a coloanei de 25°C, cu eluare izocratică, compoziţia fazei mobile fiind Solvent A:Solvent B 60:40 v/v, unde Solventul A este apă HPLC şi Solventul B este acetonitril R, cu un debit al fazei mobile de 1 ml/min, cu detectare UV la lungimea de 254 nm, coloană în care se injectează 10 μ m soluţie de referinţă a, conţinând 5000 ppm florfenicol, această soluţie reprezentând şi soluţia pentru testarea sistemului cromatografic, cu condiţia existenţei a cel puţin 500 de talere teoretice pentru picul de Florfenicol.

Description

METODA ANALITICA (HPLC) DE IDENTIFICARE, DOZARE A FLORFENICOLULUI SI A IMPURITĂȚILOR ÎNRUDITE CHIMIC DIN PRODUSELE FARMACEUTICE FLORFENIDEM 10% - SOLUȚIE ORALA, FLORFENIDEM 50 SI FLORFENICOL - INGREDIENT FARMACEUTI ACTIV

Invenția se refera la Metoda analitica (HPLC) de identificare, dozare a Florfenicolului si a impurităților înrudite chimic din produsele farmaceutice Florfenidem 10% - soluție orala, Florfenidem 50 si Florfenicol - ingredient farmaceutic activ.

Stadiul tehnicii: Atât metodele analitice HPLC prezentate in diverse articole științifice, cat si cea data de producătorul de materie prima de Florfenicol (Zhejiang Hisoar Pharmaceutical&Chemical Co., Ltd) in Drug Mașter File-ul substanței active, folosesc drept componenta apoasa a fazei mobile, diverse săruri, ex: Acetat de amoniu, Fosfat diacid de de potasiu, dar si alte substanța ca: TEA, H₃PO₄,etc.

Metoda analitica HPLC prezentata de producătorul materiei prime de Florfenicol, pentru dozare, identificare a florfenicolului si a impurităților înrudite chimic consta in utilizarea unei faze mobile cu următoarea compoziție: Acetonitril: Tampon Acetat, 30:70 v/v. Soluția tampon acetat conține 0,5 g de acetat de amoniu in 1000 ml de apa. Detecția se face UV la 254 nm. S-a utilizat o coloana C18, 150mmx4,6mm I.D. Volumul de injecție fiind de 10μΙ.

Dezavantajele constau in faptul ca folosirea sărurilor in faza mobila, in afara de faptul ca măresc costurile per analiza, creaza probleme tehnice echipamentului prin precipitarea in pompa, coloana, sau capilarele cromatografului, a sărurilor. Problema tehnica pe care o rezolva invenția este folosirea unei metode analitice HPLC de identificarea si dozarea substanței active de Florfenicol si a impurităților înrudite chimic ale acestuia, utilizând drept faza mobila doar apa si acetonitril. In acest mod, costurile per analiza se reduc. Se elimina riscul de precipitare a sărurilor in coloana cromatografica si cromatograf. Timpul necesar unei analize complete fiind de aproximativ 90 minute, comparabil cu al celorlalte metode analitice HPLC, similare, cunoscute.

L

Jf / / Λ .....—— —_Γ— ,—_n ———ujui_uu

Țp g K’fKXiL οε STAT PENTRU INVENȚII Șl MĂRCI / * Cerere de brevet de invenție ' \’_r Λ oGq/o 0 0 m • D,it> <Jepozit %^«>«<4.^ΜΜΜ4ΗΜ·ΜΜ**Μν·Μ«Ι··ΜΙν····Μ·ΙΙ·«·Μ··ΜΙ σ<-2 010-00777-3 1 -08- 2010

Metoda HPLC propusa este originala, foarte utila tuturor acelora care trebuie sa controleze calitatea unor produse farmaceutice care au drept ingredient activ Florfenicolul, neexistand la acest moment monografie compendiala (European Pharmacopoeia, United Stated Pharmacopoeia, British Pharmacopoeia), cu prezentarea vreunei metode de analiza pentru acest ingredient farmaceutic activ, molecula fiind una cu utilizare recenta, pe scara larga in industria farmaceutica. Alături de identificarea substanței active si dozarea acesteia in produsele farmaceutice care conțin acest ingredient activ si următorii excipienti: Lactoza monohidrat, N-methyl 2-pyrrolidone, Propyleneglycol, Polyethylene 300, metoda permite identificarea impurității înrudite chimic cunoscute - Thiamphenicol, dar si a impurităților înrudite chimic necunoscute.

Este foarte importanta dozarea si identificarea impurităților înrudite chimic, cunoscute, respectiv necunoscute deoarece depășirea limitelor admise pentru acestea, atat in ingredientul farmaceutic activ cat si in produsul farmaceutic finit poate avea efecte secundare nedorite.

In cazul Florfenicolului limitele impuse pentru impuritățile înrudite chimic sunt următoarele:

Impuritate înrudita chimic, necunoscuta, individual: maxim 0.3%;Thian'.phei Scol (impuritate înrudita chimic cunoscuta): maxim: 0,5%; Total impurități înrudite chimic, maxim 2,0%;

Metoda conform invenției elimina dezavantajele menționate, prin aceea ca: Intr-un sistem cromatografic HPLC care folosește o coloana cromatogiafica octadecylsilyl silica gel for chromatography R, cu lungimea de 150 mm. diametrul interior de 4,6 mm si cu dimensiunea particulelor de 5 pm, temperatura coloanei cromatografice fiind de 25 °C, elutia este izocratica, compoziția fazei mobile este Solvent A : Solvent B, 60 : 40 v/v unde, Solventul A este Apa uz HPLC. Millipore sau echivalent si Solventul B este Acetonitrile R, debitul fazei mobile fiind 1 mL/min, detecția este UV si se face la lungimea de unda de 254 nm, sa injectează 10 pL de Soluție de referința a, soluție a cărei concentrație este de 5000 ppm de florfenicol, aceasta soluție reprezentând si soluția pentru testarea ¢4.-2 0 1 0 - 0 0 7 7 7 -- V

1 08- 2010 sistemului cromatografic, condiția care trebuie îndeplinita fiind următoarea: minim 500 de talere teoretice pentru picul de Florfenicol.

Metoda conform invenției prezintă următoarele avantaje:

Simultan se poate doza si identifica substanța activa si impuritatea înrudita chimic cunoscuta (Thiamphenicol) si se pot doza impuritățile înrudite chimic necunoscute.

Folosind drept faza mobila doar apa si acetonitril, costurile per analiza sunt micșorate considerabil.

Nefolosirea sărurilor in compoziția fazei mobile înlătură riscurile de precipitare a acestora in coloana cromatografica sau echipament deci înlătură apariția unor probleme tehnice.

Timpul necesar unei analize complete este similar cu cel obtinut folosind celelate metode cromatografice cunoscute.

Exemplu de realizarea a metodei conform invenției (pentru Florfenidem 10 % soluție orala):

Echipamentul folosit (sistemul cromatografic, comun tuturor determinărilor) este următorul:

Cromatograf de lichide de înalta presiune - Agilent 1200 compus din următoarele module: Cabinet solventi; Pompa cuaternara de înalta presiune G 1354A cu degazor G 1379B, serie 1200; Termostat pentru coloana G 1316A, serie 1200; Detector spectrofotometric (VWD) G 1314B, serie 1200, sau altul similar;

Autosampler G 1329A; Termostat pentru autosampler G1330B, serie 1200;

Poate fi folosit orice echipament similar.

Substanțe de referința folosite:

- Florfenicol CRSJot TRC-20030503, Toronto Research Chemicals;

-Thiamphenicol CRS, lot nr.l.a, European Pharmacopoeia;

Solventi, Soluții folosite:

Acetonitril, - gradient grade for liquid chromatography, Merck, lot 1462630847 Solvent probe - Faza mobila (Apa : Acetonitril 60:40);

Apa de uz cromatografic - rezistivitate minima 18,2ΜΩ, continui total de substanțe organice TOC maxim 30 ppb (apa ultrapurificata).

c^-2010-00777-- Λ

1 -08- 2010

Soluția stoc (10 000 ppm) - Florfenidem 10% soluție orala - Intr-un balon cotat de clasa de precizie A, de 100 ml se aduc 10 ml de Florfenidem 10% - soluție orala, se completează la semn cu Solvent de probe. Se ultrasoneaza 1 minut pentru omogenizare.

Soluția stoc Thiamphenicol (50 ppm)- Intr-un balon cotat de clasa de precizie A, de 100ml, se aduc 5 mg de Thiamphenicol CRS, se dizolva si se completează la semn cu Solvent de probe. Se ultrasoneaza 1 minut pentru omogenizare.

Soluție test (5000 ppm) - 5 ml din Soluția stoc se aduc intr-un balon cotat de clasa de precizie A, de 10 ml si se completează la semn cu solvent de probe. Se ultrasoneaza 1 minut pentru omogenizare.

Soluția de referința a, (5000 ppm)- 50 mg de Florfenicol CRS se aduc intr-un balon cotat de 10 ml de clasa de precizie A, se adauga 2 ml de acetonitril si se completează la semn cu solvent de probe. Se ultrasoneaza 1 minut pentru omogenizare.

Soluție de referința b, (25 ppm) - 5 mL de Soluție stoc de Thiamphenicol se aduc intr-un balon cotat de 10 ml de clasa de precizie A, se completează la semn cu Solvent de probe. Se ultrasoneaza 1 minut pentru omogenizare.

Soluția de referința c, (15 ppm) - 0,3 ml de Soluția de referința a se aduc intrun balon de 100 ml de clasa de precizie A, se completează la semn cu Solvent probe.

Soluțiile utilizate in funcție de tipul determinării sunt prezentate in continuare: Identificarea substanței active:

- Soluția de referința a - Florfenicol CRS - 5000 ppm

- Soluția proba - Florfenicol - 5000 ppm

Identificarea Thiamphenicolului:

Soluția de referința b Thiamphenicol - Thiamphenicol CRS - 25 ppm Soluția proba - Florfenicol - 5000 ppm

Dozarea substanței active:

Soluția de referința a - Florfenicol CRS - 5000

Soluția proba - Florfenicol - 5000 ppm »-2010-00777'- U

1 08- 2010

Dozare Thiamphenicol:

- Soluția de referința b - Thiamphenicol CRS - 25 ppm

- Soluția proba - Florfenicol - 5000 ppm

Impurități înrudite chimic:

Soluția de referința c - Florfenicol CRS -15 ppm

Soluția proba - Florfenicol - 5000 ppm «- 2 Ο 1 Ο - Ο Ο 7 7 7 - - C

1 -08- 2010

METODA ANALITICA (HPLC) DE IDENTIFICARE, DOZARE A FLORFENICOLULUI SI A IMPURITĂȚILOR ÎNRUDITE CHIMIC DIN PRODUSELE FARMACEUTICE FLORFENIDEM 10% - SOLUȚIE ORALA, FLORFENIDEM 50 SI FLORFENICOL - INGREDIENT FARMACEUTIC ACTIV

Claims

Revendicare

Metoda analitica (HPLC) de identificare, dozare a Florfenicolului si a impurităților înrudite chimic din produsele farmaceutice Florfenidem 10% - soluție orala, Florfenidem 50 si Florfenicol - ingredient farmaceutic activ, caracterizata prin aceea ca: Intr-un sistem cromatografic HPLC care folosește o coloana cromatografica octadecylsilyl silica gel for chromatography R, cu lungimea de 150 mm, diametrul interior de 4,6 mm si cu dimensiunea particulelor de 5 pm, temperatura coloanei cromatografice fiind de 25 °C, elutia este izocratica, compoziția fazei mobile este Solvent A : Solvent B, 60 : 40 v/v unde, Solventul A este Apa uz HPLC, Millipore sau echivalent si Solventul B este Acetonitrre R, debitul fazei mobile fiind 1 mL/min, detecția este UV si se face la lungimea de unda de 254 nm, se injectează 10 pL de Soluție de referința a, soluție a cărei concentrație este de 5000 ppm de florfenicol, aceasta soluție reprezentând si soluția pentru testarea sistemului cromatografic, condiția care trebuie îndeplinita fiind următoarea: minim 500 de talere teoretice pentru picul de Florfenico;.