RO122783B1 - Process and installation for preparing vitamin d2 for veterinary use - Google Patents

Process and installation for preparing vitamin d2 for veterinary use Download PDF

Info

Publication number
RO122783B1
RO122783B1 ROA200600113A RO200600113A RO122783B1 RO 122783 B1 RO122783 B1 RO 122783B1 RO A200600113 A ROA200600113 A RO A200600113A RO 200600113 A RO200600113 A RO 200600113A RO 122783 B1 RO122783 B1 RO 122783B1
Authority
RO
Romania
Prior art keywords
biomass
fermentation
vitamin
pump
medium
Prior art date
Application number
ROA200600113A
Other languages
Romanian (ro)
Inventor
Constanţa Ionescu
Maria Ichim
Original Assignee
Bioing S.A.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bioing S.A. filed Critical Bioing S.A.
Priority to ROA200600113A priority Critical patent/RO122783B1/en
Publication of RO122783B1 publication Critical patent/RO122783B1/en

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

The invention relates to a process and installation for preparing vitamin D2 for veterinary use in a biosynthesis process. According to the invention, the process consists in the inoculation in a sterile fermentation medium brought to optimal temperature, pressure, aeration, stirring parameters and pH with an inoculum obtained from Saccharomyces sp. followed by fermentation, thereafter the resulting biomass is centrifuged and further treated with a solution of 1 % ammonia, and after 20 h, at a temperature of 27A C while stirring is centrifuged and diluted with water till a 8 % suspension is obtained, said suspension being irradiated by UV rays and atomized, there resulting the final product, vitamin D2 for veterinary use, with a vitamin D2 content ranging from 100 000 to 150 000 UI/dry substance. According to the invention, the installation comprises : two reactors (1,3) for preparing the fermentation medium, provided with a heating-cooling and stirring system, a pump (2) for filling out the fermentation medium in three fermentation vessels (4, 6, 8) provided with a heating-cooling system, three filters (5, 7, 9) for sterile air, a pump (11) for filling out the fermentation medium, a centrifugal separator (12) for separating the biomass from the fermentation medium, a reactor (13) for the treatment with ammonia solution, an apparatus (15) for irradiation with UV, a reactor (16) for diluting the biomass with water and a pump (17) for supplying the drying installation (18).

Description

Prezenta invenție se referă la un procedeu și o instalație de obținere a vitaminei D2 de uz veterinar, printr-un proces de biosinteză. Vitamina D2 este utilizată în medicina veterinară în prevenirea rahitismului la animalele tinere, care suferă de hipovitaminoză, respectiv avitaminoză.The present invention relates to a process and facility for obtaining vitamin D2 for veterinary use, through a biosynthesis process. Vitamin D2 is used in veterinary medicine in the prevention of rickets in young animals suffering from hypovitaminosis, respectively avitaminosis.

Se cunosc procedee de obținere a vitaminei D2 prin extracție din plantele izmă bună, păpădie, polene (care conțin 0,4 mg/g), lăptucă, castan, ovăz, grâu, cu solvenți precum alcooli de diferite concentrații, amestecuri de alcool cu glicerină și apă în prezența unor substanțe tensioactive, la temperaturi de 50-60°C, la presiune atmosferică în sistem discontinuu, la un pH de 6-7.Processes for the production of vitamin D2 are known by extraction from plants of good origin, dandelion, pollen (containing 0.4 mg / g), lettuce, chestnut, oats, wheat, with solvents such as alcohols of different concentrations, mixtures of alcohol with glycerin and water in the presence of surfactants, at temperatures of 50-60 ° C, atmospheric pressure in a batch system, at a pH of 6-7.

De asemenea, se cunosc procedee de extracție prin macerare, care se aplică la obținerea extractului uleios din lavandă, mentă, cătină, care conțin vitamina D2. Timpul de extracție variază: pentru extracția apoasă este de circa 30 min până la 6 h, iar pentru extracția alcoolică este de până la 10 zile.Also known are processes of extraction by maceration, which is applied to obtain the oily extract from lavender, peppermint, gizzard, which contain vitamin D2. The extraction time varies: for the aqueous extraction it is about 30 min up to 6 h, and for the alcoholic extraction it is up to 10 days.

Parametrii de lucru sunt: temperatura mediului ambiant sau temperaturi de 50-60°C, cu agitare lentă, la presiune atmosferică și mărunțire avansată a plantelor.The working parameters are: ambient temperature or temperatures of 50-60 ° C, with slow agitation, at atmospheric pressure and advanced shredding of plants.

După extracție se face prelucrarea extractului prin concentrare la temperatura de 60- 65°C, după care se face separarea componentelor prin metode cromatografice.After extraction, the extract is processed by concentration at a temperature of 60-65 ° C, after which the components are separated by chromatographic methods.

Aceste procedee prezintă următoarele dezavantaje:These procedures have the following disadvantages:

- pentru obținerea unor cantități mai mari de vitamina D2, este necesara se prelucra cantități foarte mari de plante;- to obtain larger quantities of vitamin D2, it is necessary to process very large quantities of plants;

- instalațiile de extracție care trebuie să prelucreze plantele sunt foarte mari, iar conținutul în vitamina D2 este mic;- the extraction plants that have to process the plants are very large, and the vitamin D2 content is small;

- costurile de exploatare sunt foarte mari;- the operating costs are very high;

- consumul de utilități este de asemenea foarte mare;- utilities consumption is also very high;

- procedeele de extracție prezintă dezavantajul unor randamente mici în vitamina D2.- The extraction procedures have the disadvantage of low yields in vitamin D2.

Există un document US 349 1007, publicat în data de 20 ianuarie 1970, care se referă la un procedeu de creștere a conținutului de vitamină D2 din drojdii care includ toate vitaminele grupului D, printr-un procedeu de biosinteză ce are o suită de faze de procedeu apropiate de fazele procedeului de obținere a vitaminei D2 de uz veterinar conform prezentei invenții. Ambele produse se obțin prin dezvoltarea unui microorganism propriu pe un mediu de fermentație cu nutrienți specifici creșterii.There is a document US 349 1007, published on January 20, 1970, which refers to a process for increasing the vitamin D2 content of yeasts that include all the vitamins of group D, through a biosynthesis process that has a series of phases. process close to the steps of the process of obtaining the vitamin D2 for veterinary use according to the present invention. Both products are obtained by developing their own microorganism on a fermentation medium with specific growth nutrients.

Problema tehnică pe care o rezolvă invenția este de a obține vitamina D2 stabilă, lipsită de toxicitate și cu randament ridicat, într-o instalație ușor de realizat.The technical problem that the invention solves is to obtain stable, non-toxic and high-yielding vitamin D2 in an easy-to-perform plant.

Procedeul de obținere a vitaminei D2 de uz veterinar, conform invenției, constă în aceea că se prepară un mediu de cultură din 2% melasă, 2% extras de porumb și apă până la 100% prin omogenizare la temperatura de 30°C, timp de 30 min, urmată de sterilizare la 120°C, timp de 30 min și de răcirea mediului de cultură la 30°C și la pH=6,5, se trece apoi la faza de fermentație care cuprinde trei etape care operează la o temperatură de 28-30°C, pH=6,5, presiune 0,5 atm, cu aerare de 1 l/l/min cu aer steril și la o agitare variabilă a mediului fermentativ de 50-200 rot/min timp de 18-20 h, astfel că, în prima etapă de fermentație, se prepară inoculul prin amestecare a mediului de cultură cu un inocul preparat în laborator cu microorganismul Saccharomyces speciesm volum de 10%, în a doua etapă de fermentație se amestecă inoculul din prima etapă de fermentație în volum de 10% cu mediul de cultură, iar în etapa a treia de fermentație se amestecă inoculul din a doua etapă de fermentație în volum de 10% cu mediul de cultură, faza de fermentație fiind urmată de separarea biomasei din mediul de fermentație prin centrifugare, de tratarea biomasei separate cu o soluție de amoniac 1%, raportul dintre biomasa uscată și volumul soluției fiind de 1:8, agitând continuu la 27°C timp de 20 h, de separarea biomasei prin centrifugare, de diluareaThe process for obtaining the vitamin D2 for veterinary use according to the invention consists in the preparation of a culture medium of 2% molasses, 2% corn extract and water up to 100% by homogenization at 30 ° C, during 30 minutes, followed by sterilization at 120 ° C for 30 minutes and cooling of the culture medium to 30 ° C and pH = 6.5, then proceed to the fermentation phase comprising three stages operating at a temperature of 28-30 ° C, pH = 6.5, pressure 0.5 atm, with aeration of 1 l / l / min with sterile air and at a variable stirring of the fermentative medium of 50-200 rpm for 18-20 h, so that, in the first fermentation stage, the inoculum is prepared by mixing the culture medium with an inoculum prepared in the laboratory with the microorganism Saccharomyces speciesm volume of 10%, in the second fermentation step the inoculum from the first fermentation stage is mixed in volume of 10% with the culture medium, and in the third fermentation stage the inoculum is mixed the second stage of fermentation in a volume of 10% with the culture medium, the fermentation phase being followed by the separation of the biomass from the fermentation environment by centrifugation, the treatment of the separate biomass with a 1% ammonia solution, the ratio between the dry biomass and the volume the solution being 1: 8, stirring continuously at 27 ° C for 20 h, separating the biomass by centrifugation, diluting

RO 122783 Β1 biomasei de ergosterol cu apă până la suspensie de 8%, de iradierea cu raze UV la o Iun- 1 gime de undă de 230-280 nm, când are loc transformarea ergostrolului (provitamina D2) în vitamina D2 și de uscarea suspensiei prin atomizare la o temperatura a aerului de intrare în 3 atomizorde 140-150°C și la o temperatură de ieșire a produsului de 70-80’C.RO 122783 Β1 ergosterol biomass with water up to 8% suspension, UV irradiation at a wavelength of 230-280 nm, when ergostrol (provitamin D2) is transformed into vitamin D2 and drying of suspension by atomization at a temperature of the inlet air in 3 atomizers of 140-150 ° C and at an output temperature of the product of 70-80'C.

Instalația pentru obținerea vitaminei D2 de uz veterinar, obținută prin procedeul definit 5 anterior, este constituită din două reactoare 1 și 3, de preparare a mediilor de fermentație, prevăzute cu sisteme de încălzire - răcire, agitare, o pompă 2, de transvazare a mediului la 7 fermentație în cele trei fermentatoare 4, 6, 8, prevăzute cu sistem de încălzire - răcire, trei filtre de aer steril 5,7,9, un separator de picături comun 10, o pompă 11, de transvazare a 9 mediului fermentativ, un separator centrifugal 12, de separare a biomasei din mediul de fermentație, un reactor 13, de tratare cu soluție amoniacală a biomasei de ergosterol, un 11 aparat 15, de iradiere cu ultraviolete, unde ergosterolul provitamina D2 este transformat în vitamina D2, un reactor 16, în care se face diluția biomasei cu apă, și o pompă 17, de aii- 13 mentare a instalației de uscare prin atomizare, 18.The plant for obtaining the vitamin D2 for veterinary use, obtained by the procedure defined above 5, consists of two reactors 1 and 3, for the preparation of fermentation media, provided with heating systems - cooling, agitation, a pump 2, for transferring the environment. at 7 fermentations in the three fermenters 4, 6, 8, provided with heating - cooling system, three sterile air filters 5,7,9, a common drop separator 10, a pump 11, for transferring 9 to the fermentative environment, a centrifugal separator 12, biomass separation from the fermentation medium, a reactor 13, an ammoniacal solution of ergosterol biomass, an 11 apparatus 15, ultraviolet irradiation, where ergosterol provitamin D2 is converted to vitamin D2, a reactor 16, in which the dilution of the biomass is done with water, and a pump 17, for installing the drying plant by atomization, 18.

Procedeul și instalația conform invenției prezintă următoarele avantaje:15The process and installation according to the invention have the following advantages: 15

- realizarea unui procedeu indigen de obținere a vitaminei D2 de uz veterinar;- carrying out an indigenous process for obtaining vitamin D2 for veterinary use;

- se obține vitamina D2 lipsită de toxicitate;17- non-toxic vitamin D2 is obtained, 17

- produsul obținut este stabil;- the product obtained is stable;

- mediile de lucru nu sunt emanatoare de produse toxice;19- working environments are not toxic products; 19

- procesul tehnologic este net superior procedeelor de extracție cunoscute;- the technological process is clearly superior to the known extraction processes;

- randamentele de producție sunt ridicate;21- production yields are high, 21

- materiile prime sunt ușor accesibile, fiind produse secundare obținute de la prelucrarea zahărului și a porumbului;23- raw materials are easily accessible, being by-products obtained from the processing of sugar and maize, 23

- procedeul poate fi aplicat industrial, în instalații de biosinteză existente sau în instalații noi;25- the process can be applied industrially, in existing biosynthesis plants or in new plants;

- instalația este ușor de realizat, fie prin modificarea unor instalații existente, fie în instalație nouă.27 în procedeul de obținere a vitaminei D2 de uz veterinar, conform invenției, prin metode de biosinteză cu ajutorul microorganismului Saccharomyces species, microorga- 29 nismul este cultivat pe un mediu de cultură constituit din surse de carbon și azot asimilabile și netoxice. 31- the plant is easy to make, either by modifying existing plants or in a new plant.27 In the process of obtaining the vitamin D2 for veterinary use, according to the invention, by biosynthesis methods using the microorganism Saccharomyces species, the microorganism is cultivated. on a culture medium consisting of assimilable and non-toxic carbon and nitrogen sources. 31

Vitamina D2 de uz veterinar, obținută prin procesul de biosinteză, este un atomizat de drojdie hidrolizat și iradiat, care, pe lângă conținutul de vitamina D2, are și un conținut de 33 proteine asimilabile de până la 60% raportat la s.u.Vitamin D2 for veterinary use, obtained by the biosynthesis process, is a hydrolyzed and irradiated yeast atomizer, which, in addition to the vitamin D2 content, also has a content of 33 assimilable proteins up to 60% compared to s.u.

Procedeul conform invenției, de obținere a vitaminei D2 de uz veterinar printr-un 35 procedeu de biosinteză, are loc astfel:The process according to the invention, for obtaining vitamin D2 for veterinary use through a 35 biosynthesis process, occurs as follows:

în prima fază a procedeului se prepară mediile de fermentație cu materiile prime 2% 37 melasă, 2% s.u. extract de porumb și apă până la 100%, se face sterilizarea la 120’C, se răcește la 30°C, se corectează pH-ul la circa 6,5 cu NaOH 40% și se agită 30 min. 39 în a doua fază are loc fermentația în trei etape:In the first phase of the process, the fermentation media with the raw materials 2% 37 molasses, 2% s.u. corn extract and water up to 100%, sterilize at 120 ° C, cool to 30 ° C, adjust the pH to about 6.5 with 40% NaOH and stir for 30 minutes. 39 in the second phase the fermentation takes place in three stages:

- în prima etapă de fermentație se prepară inoculul, se aduce mediul de fermentație 41 preparat în prima fază în fermentatorul sterilizat și se stabilesc parametrii de lucru: temperatură 28-30’C, pH 6,5, presiune 0,5 atm, aerare 1 l/l/min cu aer steril, agitare la turația 43 de 50-200 ture/minut; se face inocularea (însămânțarea) cu inocul preparat în laborator cu microorganismul Saccharomyces species în volum de 10%; fermentația durează 18-20 h; 45- in the first fermentation step, prepare the inoculum, make the fermentation medium 41 prepared in the first phase in the sterilized fermenter and set the working parameters: temperature 28-30'C, pH 6.5, pressure 0.5 atm, aeration 1 l / l / min with sterile air, stirring at speed 43 of 50-200 rpm / minute; the inoculation (sowing) is done with the inoculum prepared in the laboratory with the microorganism Saccharomyces species in a volume of 10%; the fermentation lasts 18-20 hours; 45

-în a doua etapă de fermentație se aduce mediul preparat în prima fază în fermentatorul sterilizat și se stabilesc parametrii de lucru: temperatură 28-30°C, pH 6,5, presiune 0,5 atm, 47- In the second fermentation stage, the medium prepared in the first phase is brought into the sterilized fermenter and the working parameters are established: temperature 28-30 ° C, pH 6.5, pressure 0.5 atm, 47

RO 122783 Β1 aerare 1 l/l/min cu aer steril, agitare la turația de 50-200 ture/minut; se face inocularea cu inoculul din prima etapă de fermentație în volum de 10%; fermentația durează 18-20 h;RO 122783 Β1 aeration 1 l / l / min with sterile air, stirring at a speed of 50-200 rpm / minute; the inoculation is done with the inoculum from the first fermentation stage in volume of 10%; the fermentation lasts 18-20 hours;

-în a treia etapă de fermentație se aduce mediul de fermentație din prima fază în fermentatorul sterilizat, se stabilesc parametrii de lucru: temperatura de 28-30’C, pH 6,5, presiune 0,5 atm; aerare 1 l/l/min cu aer steril, agitare la turația de 50-200 ture/minut; se face inocularea cu inocul din etapa a doua de fermentație în volum de 10%, fermentația durează timp de 18-20 h.- In the third fermentation stage, the fermentation medium from the first phase is brought into the sterilized fermenter, the working parameters are established: temperature of 28-30'C, pH 6.5, pressure 0.5 atm; aeration 1 l / l / min with sterile air, stirring at a speed of 50-200 rpm / minute; the inoculation is made with the inoculation of the second fermentation stage in volume of 10%, the fermentation lasts for 18-20 h.

Aerul evacuat din fermentatoare este trecut prin separatorul de picături comun.The air released from the fermenters is passed through the common drop separator.

Ca antispumant se utilizează uleiul de floarea soarelui, iar corectarea pH-ului se face cu NaOH 40%.The sunflower oil is used as an antifoam, and the pH correction is done with 40% NaOH.

Pentru verificarea procesului de fermentație se analizează probe din 6 în 6 ore.To verify the fermentation process, samples are analyzed every 6 to 6 hours.

în faza a treia, mediul fermentativ din etapa a treia de fermentație este supus centrifugării pentru separarea biomasei.In the third phase, the fermentation medium in the third fermentation stage is subjected to centrifugation for the separation of the biomass.

în faza a patra, se diluează biomasa cu apă până la un raport de 1:8 între biomasa uscată și volumul total, se tratează biomasa cu o soluție amoniacală de 1% amoniac și se agită timp de 20 h la temperatura de 27“C.In the fourth phase, the biomass is diluted with water to a ratio of 1: 8 between the dry biomass and the total volume, the biomass is treated with an ammoniacal solution of 1% ammonia and stirred for 20 h at 27 "C.

în faza a cincea, se separă biomasa prin centrifugare. Biomasa are o umiditate de 24-25% și un conținut de ergosterol de 3,2-3,3% s.u.In step five, the biomass is separated by centrifugation. Biomass has a humidity of 24-25% and an ergosterol content of 3.2-3,3% s.u.

în faza a șasea, biomasa se diluează cu apă până la o suspensie de 8%, suspensie care se supune iradierii cu raze U.V. la o lungime de undă de 230-280 nm perfect controlată. Iradierea se realizează în mediu inert prin barbotare de azot, când ergosterolul (provitamina D2) se transformă în vitamina D2.In the sixth phase, the biomass is diluted with water to a suspension of 8%, a suspension which is subjected to irradiation with U.V. at a wavelength of 230-280 nm perfectly controlled. Irradiation is performed in an inert medium by nitrogen bubbling, when ergosterol (provitamin D2) is converted to vitamin D2.

în faza a șaptea, produsul obținut se diluează cu apă până la 20%, apoi se usucă prin atomizare la temperatura de intrare a aerului cald în atomizor de 140-150°C și la o temperatură de ieșire a produsului de 70-80“C. Produsul uscat este vitamina D2 de uz veterinar cu un conținut de 100.000 * 150.000 U.l./g.s.u. care se ambalează în saci cașerați și se trimite la depozitare.In the seventh phase, the obtained product is diluted with water up to 20%, then dried by atomization at the inlet temperature of the hot air in the atomizer of 140-150 ° C and at an output temperature of the product of 70-80 "C . The dry product is vitamin D2 for veterinary use with a content of 100,000 * 150,000 U./l./g.s.u. which are packed in cash bags and sent to storage.

Instalația de obținere a vitaminei D2 de uz veterinar, prin procedeul conform invenției, cuprinde două reactoare 1 și 3, de preparare medii de fermentație la temperatura de sterilizare, cu agitare, o pompă 2, de transvazare a mediului din reactorul 1, în fermentatorul 4, în care se face corecția pH-ului, temperaturii și presiunii, în care se aerează cu aerdin filtrul 5, se agită variabil continuu și se inoculează cu inoculul preparat în laborator. După terminarea fermentației sefacetransvazarea cu aer comprimat pentru inoculare în fermentatorul 6, unde inocularea se face pe mediul de fermentație adus din reactorul 1 cu ajutorul pompei 2, numai după stabilirea parametrilor de lucru - pH, temperatură, presiune, aerare cu aer steril (din filtrul steril 7), agitare variabilă continuă -, fermentația încheindu-se după 18-20 h. Se transvazează mediul fermentat în fermentatorul 8, unde se efectuează inocularea pe mediul de fermentație adus din reactorul 3 cu ajutorul pompei 2, după ce au fost stabiliți parametrii de lucru - temperatură, presiune, pH, aerare (filtrul 9), agitare -, fermentația încheindu-se după 18-20 h. Aerul evacuat din fermentatoare este trecut prin separatorul de picături 10. Mediul fermentat se transvazează cu pompa 11 în separatorul centrifugal 12, biomasa rezultată se trimite în reactorul 13, se face diluția cu apă până la un raport de 1:8 între biomasa uscată și volumul total în care se face tratarea cu soluție amoniacală 1%, se agită 20 h și se separă biomasa în separatorul centrifugal 12. Biomasa obținută are o umiditate de 24-25% și un conținut de ergosterol de 3,2-3,3% s.u.. Apoi, în reactorul 13 se diluează cu apă până la o suspensie de 8%, care se trece, cu ajutorul pompei 14, în echipamentul de iradiere cu raze UV 15 la o lungime de undă de 230-280 nm, când ergosterolul se transformă în vitamina D. Apoi, seThe plant for obtaining the vitamin D2 for veterinary use, by the process according to the invention, comprises two reactors 1 and 3, for preparing fermentation media at the sterilization temperature, with stirring, a pump 2, for transferring the environment from the reactor 1, to the fermenter 4. , in which the pH, temperature and pressure are corrected, in which the filter 5 is aerated, the variable is continuously stirred and inoculated with the inoculum prepared in the laboratory. After the fermentation is completed, the transfer with compressed air for inoculation in the fermenter 6, where the inoculation is done on the fermentation medium brought from the reactor 1 by means of the pump 2, only after the working parameters have been established - pH, temperature, pressure, aeration with sterile air (from the filter sterile 7), continuous variable agitation -, the fermentation ending after 18-20 h. The fermented environment is transferred to the fermenter 8, where the inoculation is carried out on the fermentation medium brought from the reactor 3 by means of the pump 2, after the parameters have been established working - temperature, pressure, pH, aeration (filter 9), stirring -, fermentation ending after 18-20 h. The air discharged from the fermenters is passed through the drop separator 10. The fermented medium is transferred to the pump 11 in the centrifugal separator. 12, the resulting biomass is sent to reactor 13, dilution with water to a ratio of 1: 8 between the dry biomass and the total volume in c treatment with 1% ammonia solution, stir for 20 h and the biomass is separated in the centrifugal separator 12. The obtained biomass has a humidity of 24-25% and an ergosterol content of 3.2-3,3% su. , in reactor 13, dilute with water to a suspension of 8%, which is passed, by means of pump 14, into the UV irradiation equipment 15 at a wavelength of 230-280 nm, when ergosterol is converted to vitamin D. Then yes

RO 122783 Β1 transvazează produsul în reactorul 16, de unde, sub agitare, este trimis cu ajutorul pompei 1 la atomizorul 18 pentru uscare în strat fluidizat, cu ajutorul aerului încălzit cu gaz metan, la temperatura de 140-150’C, temperatura de ieșire a produsului fiind de 70-80C. Produsul 3 finit astfel obținut este vitamina D2 de uz veterinar, cu o valoare de 100.000-150.000 Ul/g.s.u.RO 122783 Β1 transfers the product to the reactor 16, from which, under stirring, it is sent with the aid of pump 1 to atomizer 18 for drying in a fluidized layer, using methane gas heated air, at 140-150'C, outlet temperature. of the product being 70-80C. The finished product 3 thus obtained is vitamin D2 for veterinary use, with a value of 100,000-150,000 Ul / g.u.

Se dau în continuare 2 exemple de realizare a procedeului în instalația conform 5 invenției și în legătura cu fig. 1.Following are two examples of carrying out the process in the installation according to 5 of the invention and in connection with FIG. 1.

Exemplu 1. Preparea mediului de fermentație se realizează în reactorul 1, unde se 7 introduc 1601 apă, 3,2 kg melasă reprezentând 2% și 3,2 kg extract de porumb, reprezentând 2% care se omogenizează la temperatura de 30°C, se sterilizează 1Λ oră la 120°C cu 9 ajutorul aburului care circulă prin manta, după care se răcește la 30°C cu ajutorul apei de răcire. Mediul nutritiv este trimis la fermentatorul inoculator 4 și fermentatorul intermediar 6, 11 cu ajutorul pompei 2. în reactorul 3, de preparare mediu nutritiv, se introduc 1600 I apă, 32 kg melasă (adică 2%) și 32 kg extract de porumb (care reprezintă 2%) care se omo- 13 genizează și se sterilizează % oră la 120“C cu ajutorul aburului care circulă prin manta, după care se face răcirea cu apa recirculată în mantaua reactorului, iar apoi mediul de fermentație 15 este trimis cu ajutorul pompei 2 la fermentatorul de regim 8.Example 1. The preparation of the fermentation medium is carried out in reactor 1, where 1601 water is introduced, 3.2 kg molasses representing 2% and 3.2 kg maize extract, representing 2% which is homogenized at 30 ° C, sterilize 1 1 hour at 120 ° C with 9 using steam running through the jacket, then cool to 30 ° C with cooling water. The nutrient medium is sent to the inoculatory fermenter 4 and the intermediate fermenter 6, 11 by means of pump 2. In the reactor 3, of nutritional preparation medium, 1600 l of water, 32 kg molasses (ie 2%) and 32 kg maize extract (which represents 2%) that is homogenized and sterilized% hourly at 120 "C with the help of steam circulating through the mantle, after which the cooling with recirculated water is done in the reactor mantle, and then the fermentation medium 15 is sent with the help of the pump. 2 at the regime fermenter 8.

în fermentatorul inoculator 4 se introduc 201 mediu de fermentație preparat în reac- 17 torul 1, după ce fermentatorul a fost în prealabil sterilizat la 120’C cu abur viu atât în reactor și în manta, precum și pe toate traseele de conducte tehnologice care conduc la reactor 19 (conducta de aer comprimat, inclusiv filtrul de aer steril 5, conducta de antispumant, conducta de corector al pH-ului și conducta de inoculare). Apoi se face răcirea, se stabilesc parametrii 21 de lucru - temperatura de 28-30°C; pH = 6,5 (corecția de pH se face cu NaOH); presiunea 0,5 atm; aerarea 1 l/l/min cu aer steril, agitare variabilă continuă de 50-200 ture/minut -, se 23 face inocularea cu inoculator preparat în laborator în raport de 10% din volum. Inoculul este obținut din microorganismul Saccharomyces species cu concentrație de 4,8 x 10 UFC/ml. 25 Fermentația durează 18-20 ore.201 fermentation medium prepared in reactor 1 is introduced into the inoculatory fermenter 4, after the fermenter has been previously sterilized at 120'C with live steam in both the reactor and the mantle, as well as on all the technological pipelines that lead. at reactor 19 (compressed air pipeline, including sterile air filter 5, antifoam pipeline, pH correction pipeline and inoculation pipeline). Then the cooling is done, the working parameters 21 are set - the temperature is 28-30 ° C; pH = 6.5 (pH correction is done with NaOH); pressure 0.5 atm; aeration 1 l / l / min with sterile air, continuous variable agitation of 50-200 rpm / minute - inoculation with inoculator prepared in the laboratory in a ratio of 10% by volume. The inoculum is obtained from the microorganism Saccharomyces species with a concentration of 4.8 x 10 CFU / ml. 25 Fermentation takes 18-20 hours.

>>

Fermentatorul intermediar 6 se sterilizează cu abur la 120°C timp de 30 min, odată 27 cu toate traseele de conducte tehnologice pentru aer comprimat steril, corector de pH, inoculare, antispumant, filtru de aer steril 7; se introduc în fermentator 1401 mediu de fermentație 29 preparat în reactorul 1; se stabilesc parametrii de lucru: temperatură = 28-30’C; pH = 6,5 (corecția de pH se face cu NaOH); presiune 0,5 atm; aerare 1 l/l mediu/min cu aer steril, 31 agitare 50-200 ture/minut; se inoculează în raport de 10% cu inocul preparat în fermentatorul inoculator 4; după terminarea fermentației, care durează circa 18-20 h, se transvazează mediul 33 fermentativ cu ajutorul aerulu imprimat steril în fermentatorul de regim 8, pentru inoculare.Intermediate fermenter 6 is steam sterilized at 120 ° C for 30 minutes, once 27 with all technology pipelines for sterile compressed air, pH corrector, inoculation, antifoam, sterile air filter 7; place in fermenter 1401 fermentation medium 29 prepared in reactor 1; working parameters are set: temperature = 28-30'C; pH = 6.5 (pH correction is done with NaOH); pressure 0.5 atm; aeration 1 l / l medium / min with sterile air, 31 stirring 50-200 rpm / minute; is inoculated at a rate of 10% with the inoculum prepared in the inoculating fermenter 4; After the fermentation is completed, which lasts about 18-20 hours, the fermentative medium 33 is transferred using the sterile printed air in the fermenter of regime 8, for inoculation.

Fermentatorul de regim 8 se pregătește pentru fermentație, se sterilizează la 120°C 35 cu abur, împreună cu toate traseele de conducte și armături pentru aer steril, corector de pH, antispumant, inoculare, evacuare aer, filtru de aer steril 9 și separatorul de picături comun 10. 37The fermenter regime 8 is prepared for fermentation, sterilized at 120 ° C 35 with steam, along with all routes of pipes and fittings for sterile air, pH corrector, antifoam, inoculation, exhaust air, sterile air filter 9 and the separator common drops 10. 37

Se introduc 16001 mediu steril preparat în reactorul 3 cu pompa 2. Se stabilesc parametrii de lucru: temperatură = 28-30'C; pH = 6,5 (corecția de pH se face cu NaOH); presiune 39 0,5 atm; debit aer steril = 1 l/l mediu/min, agitare 50-200 ture/minut, se face inocularea cu inocul preparat în fermentatorul intermediar 6 în raport de 10%, fermentația durează 18-20 h. 41 în cazul când mediul de fermentație spumează, se adaugă antispumant (ulei de floarea soarelui). 4316001 sterile medium prepared in reactor 3 with pump 2 is introduced. The working parameters are set: temperature = 28-30'C; pH = 6.5 (pH correction is done with NaOH); pressure 39 0.5 atm; sterile air flow = 1 l / l average / min, stirring 50-200 rpm / minute, inoculation with inoculum prepared in intermediate fermenter 6 at 10%, fermentation lasts 18-20 h. 41 if fermentation medium foam, add antifoam (sunflower oil). 43

Mediul fermentat în fermentatorul de regim 8 este transvazat cu pompa 11 în separatorul centrifugal 12, pentru separarea biomasei; biomasa separată este trecută în reactorul 45 13, unde se face diluția cu apă până la un raport de 1:8 între biomasa uscată și volumul total; se omogenizează, se tratează cu o soluție amoniacală de 1% amoniac, se agită 20 h la o 47The fermented medium in the regime fermenter 8 is transferred with the pump 11 in the centrifugal separator 12, for the separation of the biomass; the separated biomass is passed to reactor 45 13, where dilution with water is made up to a ratio of 1: 8 between the dry biomass and the total volume; homogenize, treat with an ammoniacal solution of 1% ammonia, shake 20 h at a 47

RO 122783 Β1 temperatură de 27°C și se separă biomasa în separatorul centrifugal 12. Biomasa obținută are o umiditate de 4-25% și un conținut de ergosterol de 3,2-3,3% s.u. Biomasa obținută este trecută în reactorul 13, unde se face o diluție până la o suspensie de 8%, se transvazează cu pompa 14 în echipamentul de iradiere cu raze UV15 la o lungime de undă de 230-280 nm, perfect controlată. Iradierea se face în mediu inert, prin barbotare de azot. Prin iradiere, ergosterolul (provitamina D2) se transformă în vitamina D2.RO 122783 Β1 temperature of 27 ° C and the biomass is separated into the centrifugal separator 12. The obtained biomass has a humidity of 4-25% and an ergosterol content of 3.2-3,3% s.u. The obtained biomass is passed to the reactor 13, where a dilution is made up to a suspension of 8%, is transferred with the pump 14 in the irradiation equipment with UV rays 15 at a wavelength of 230-280 nm, perfectly controlled. The irradiation is done in an inert environment, by nitrogen bubbling. By irradiation, ergosterol (provitamin D2) is converted to vitamin D2.

Vitamina D2 se diluează cu apă până la 20% în reactorul 16 și se trimite la uscare în atomizorul 18 cu pompa cu șurub 17. Vitamina D2 se ambalează în saci cașerați și se trimite la depozitare.Vitamina D2 de uz veterinar obținută are un conținut de 100.000-150.000 Ul/g substanță uscată.Vitamin D2 is diluted with water up to 20% in the reactor 16 and sent to dry in atomizer 18 with screw pump 17. Vitamin D2 is packaged in sachets and sent to storage. The vitamin D2 for veterinary use has a content of 100,000-150,000 Ul / g dry matter.

Exemplu 2. Preparea mediului de fermentație se realizează în reactorul 1, unde se introduc 16001 apă, 32 kg melasă, reprezentând 2% și 32 kg extract de porumb, reprezentând 2%. Se omogenizează la temperatura de 30°C, iar mediul rezultat se sterilizează 7? oră la 120°C cu ajutorul aburului care circulă prin manta, după care se răcește la 30°C cu ajutorul apei de răcire. Mediul nutritiv rezultat este trimis la fermentatorul inoculator 4 și fermentatorul intermediar 6 cu ajutorul pompei 2. în reactorul 3, de preparare mediu, se Întroduc 16000 I apă, 320 kg melasă adică 2% și 320 kg extract de porumb care reprezintă 2%. Se omogenizează și se sterilizează /2 oră la 120°C cu ajutorul aburului care circulă prin manta, după care răcește cu apă recirculată în mantaua reactorului, apoi mediul de fermentație este trimis cu ajutorul pompei 2 la fermentatorul de regim 8.Example 2. The preparation of the fermentation medium is carried out in reactor 1, where 16001 water, 32 kg molasses, representing 2% and 32 kg maize extract, representing 2% are introduced. Is it homogenized at 30 ° C, and the resulting medium is sterilized 7? hour at 120 ° C with the help of steam running through the jacket, then cooled to 30 ° C with the help of cooling water. The resultant nutrient medium is sent to the inoculatory fermenter 4 and the intermediate fermenter 6 by means of pump 2. In the reactor 3, of medium preparation, 16000 L of water are introduced, 320 kg molasses ie 2% and 320 kg corn extract representing 2%. Homogenize and sterilize / 2 hours at 120 ° C with the steam circulating through the casing, then cool with recirculated water in the reactor casing, then the fermentation medium is sent using pump 2 to the regime fermenter 8.

în fermentatorul inoculator 4 se introduc 2001 mediu de fermentație preparat în reactorul 1, după ce fermentatorul a fost în prealabil sterilizat la 120°C cu abur viu atât în reactor și în manta, precum și pe toate traseele de conducte tehnologice care conduc la reactor (conducta de aer comprimat inclusiv filtrul de aer steril 5, conducta de antispumant, conducta de corector de pH, conducta de inoculare). Se stabilesc parametrii de lucru - temperatura de 28-30°C; pH = 6,5 (corecția de pH se face cu NaOH); presiunea 0,5 atm; aerarea 1 l/l/min cu aer steril, agitare variabilă continuă de 50-200 ture/minut. Se face inocularea cu inoculator preparat în laborator în raport de 10% din volum. Inoculul este obținut din microorganismul Saccharomyces species cu concentrație de 4,8 x 10 UFC/ml. Fermentația durează 18-20 h.Fermentation medium prepared in reactor 1 is introduced into the inoculatory fermenter 4, after the fermenter has been previously sterilized at 120 ° C with live steam in both the reactor and the mantle, as well as on all the technological pipelines that lead to the reactor ( compressed air pipeline including sterile air filter 5, antifoam pipeline, pH corrector pipeline, inoculation pipeline). The working parameters are set - the temperature of 28-30 ° C; pH = 6.5 (pH correction is done with NaOH); pressure 0.5 atm; aeration 1 l / l / min with sterile air, continuous variable agitation of 50-200 rpm. Inoculation is done with inoculator prepared in the laboratory in a ratio of 10% by volume. The inoculum is obtained from the microorganism Saccharomyces species with a concentration of 4.8 x 10 CFU / ml. The fermentation lasts 18-20 h.

Fermentatorul intermediar 6 se sterilizează cu abur la 120°C timp de 30 min, odată cu toate traseele de conducte tehnologice pentru aer comprimat steril, corector de pH, inoculare, antispumant, filtru de aer steril 7. Se introduc în fermentator 1400 I mediu de fermentație preparat în reactorul 1. Se stabilesc parametrii de lucru: temperatură = 28-30°C; pH = 6,5 (corecția de pH se face cu NaOH); p = 0,5 atm; aerarea 1 l/l mediu/min cu aer steril, agitare 50-200 ture/minut. Se face inocularea în raport de 10% cu inocul preparat în fermentatorul inoculator 4, după terminarea fermentației care durează circa 18-20 h, se transvazează mediul fermentativ cu ajutorul aerului comprimat steril în fermentatorul de regim 8, pentru inoculare.Intermediate fermenter 6 is steam sterilized at 120 ° C for 30 minutes, along with all technology pipelines for sterile compressed air, pH corrector, inoculation, antifoam, sterile air filter 7. A 1400 l medium is introduced into the fermenter. fermentation prepared in the reactor 1. The working parameters are set: temperature = 28-30 ° C; pH = 6.5 (pH correction is done with NaOH); p = 0.5 atm; aeration 1 l / l medium / min with sterile air, stirring 50-200 rpm. The inoculation is made in relation to 10% with the inoculation prepared in the inoculatory fermenter 4, after the completion of the fermentation which lasts about 18-20 h, the fermentative medium is transferred using the sterile compressed air in the fermentation regime 8, for inoculation.

Fermentatorul de regim se pregătește pentru fermentație, se sterilizează la 120°C cu abur, împreună cu toate traseele de conducte și armături pentru aer steril, corector de pH, antispumant, inoculare, evacuare aer, filtru de aer steril 9 și separatorul de picături comun 10.The regime fermenter prepares for fermentation, is sterilized at 120 ° C with steam, along with all routes of pipes and fittings for sterile air, pH corrector, antifoam, inoculation, air outlet, sterile air filter 9 and the common drop separator 10.

Se introduc 160001 mediu steril preparat în reactorul 3 cu pompa 2. Se stabilesc parametrii de lucru: temperatură = 28-30°C; pH = 6,5 (corecția de pH se face cu NaOH); presiune 0,5 atm; debit aer steril = 1 l/l mediu/min, agitare 50-200 ture/minut. Se face inocularea cu inocul preparatîn fermentatorul intermediarîn raport de 10%. Fermentația durează 18-20h.160001 sterile medium prepared in reactor 3 with pump 2 is introduced. The working parameters are set: temperature = 28-30 ° C; pH = 6.5 (pH correction is done with NaOH); pressure 0.5 atm; sterile air flow = 1 l / l average / min, stirring 50-200 rpm / minute. The inoculation is made with the inoculum prepared in the intermediate fermenter in a ratio of 10%. Fermentation lasts 18-20h.

în cazul când mediul de fermentație spumează se adaugă antispumant (ulei de floarea soarelui).In case the foaming fermentation medium is added antifoam (sunflower oil).

RO 122783 Β1RO 122783 Β1

Mediul fermentat în fermentatorul de regim 8 este transvazat cu pompa 11 în separa- 1 torul centrifugal 12 pentru separarea biomasei; biomasa separată este trecută în reactorul 13, unde se face diluția cu apă în raport de 1: 8 între biomasa uscată și volumul total și se 3 omogenizează, se tratează cu soluție amoniacală 1 %, amoniac, se agită 20 h la o temperatura de 27°C, se separă biomasa în separatorul centrifugal 12. Biomasa obținută are o urni- 5 ditate de 4-25% și un continui de ergosterol de 3,2-3,3% s.u. Biomasa obținută este trecută în reactorul 13, unde se face o diluție până la o suspensie de 8%, se transvazează cu pompa 1 14 în echipamentul de iradiere cu raze UV 15 la o lungime de undă de 230-280 nm, perfect controlată. Iradierea se face în mediu inert prin barbotare de azot. Prin iradiere ergosterolul 9 (provitamina D2) se transformă în vitamina D2.The fermented medium in the regime fermenter 8 is transferred to the pump 11 in the centrifugal separator 12 for biomass separation; The separated biomass is passed to the reactor 13, where dilution with water is made in a ratio of 1: 8 between the dry biomass and the total volume and 3 is homogenized, treated with 1% ammoniacal solution, ammonia, stirred 20 h at a temperature of 27 ° C, the biomass is separated in the centrifugal separator 12. The obtained biomass has an urnidity of 4-25% and an ergosterol content of 3.2-3.3% su. The obtained biomass is passed to the reactor 13, where a dilution is made up to a suspension of 8%, is transferred with pump 1 14 in the irradiation equipment with UV rays 15 at a wavelength of 230-280 nm, perfectly controlled. Irradiation is done in an inert environment by nitrogen bubbling. By irradiation ergosterol 9 (provitamin D2) is converted to vitamin D2.

Vitamina D2 se diluează cu apă până la 20% în reactorul 16, de unde, cu pompa cu 11 șurub 17, se trimite la uscare în atomizorul 18, de unde vitamina D2 se ambalează în saci cașerați și se trimite la depozitare. 13Vitamin D2 is diluted with water up to 20% in reactor 16, where, with the 11-screw pump 17, it is sent to dry in atomizer 18, where vitamin D2 is packaged in sachets and sent to storage. 13

Vitamina D2 de uz veterinar, obținută, are un conținut de 100.000 - 150.000 Ul/g substanță uscată.15Vitamin D2 for veterinary use, has a content of 100,000 - 150,000 Ul / g dry substance.15

Claims (4)

1. Procedeu de obținere a vitaminei D2 de uz veterinar printr-un proces de biosinteză19 care cuprinde fermentația microorganismului Saccharomyces species cu obținerea unei biomase care conține ergosterol, separarea biomasei prin centrifugarea mediului fermentativ, 21 tratarea biomasei cu o soluție amoniacală de 1%, urmată de iradierea cu radiații UV a biomasei și uscarea prin atomizare, caracterizat prin aceea că se prepară un mediu de cultură 23 din 2% melasă, 2% extract de porumb și apă până la 100% prin omogenizare la temperatura de 30°C, timp de 30 min, urmată de sterilizare la 120°C, timp de 30 min și de răcirea mediului 25 de cultură la 30°C și la pH=6,5, se trece apoi la faza de fermentație care cuprinde trei etape care operează la o temperatură de 28-30°C, pH=6,5, presiune 0,5 atm, cu aerare de 1 l/l/min 27 cu aer steril și cu o agitare variabilă a mediului fermentativ de 50-200 roi/min timp de 18-20 h, astfel că în prima etapă de fermentație se prepară inoculul prin amestecarea mediului de 29 cultură cu un inocul preparat în laborator cu microorganismul Saccharomyces species în volum de 10%, în a doua etapă de fermentație se amestecă inoculul din prima etapă de fer- 31 mentație în volum de 10% cu mediul de cultură, iar în etapa a treia de fermentație se amestecă inoculul din a doua etapă de fermentație în volum de 10% cu mediul de cultură, 33 faza de fermentație fiind urmată de separarea biomasei din mediul de fermentație prin centrifugare, de tratarea biomasei separate cu o soluție de amoniac 1 %, raportul dintre bio- 35 masa uscată și volumul soluției fiind de 1:8, agitând continuu la 27“C, timp de 20 h, de separarea biomasei prin centrifugare, de diluarea biomasei de ergosterol cu apă până la suspensie 37 de 8%, de iradierea cu raze UV la o lungime de undă de 230-280 nm, când are loc transformarea ergostrolului în vitamina D2, și de uscarea suspensiei prin atomizare la o tem- 39 peratură a aerului de intrare în atomizor de 140-150°C și la o temperatură de ieșire a produsului de 70-80°C. 411. Process for obtaining the vitamin D2 for veterinary use through a biosynthesis process19 comprising fermentation of the microorganism Saccharomyces species with obtaining a biomass containing ergosterol, separating the biomass by centrifuging the fermentative environment, 21 treating the biomass with a 1% ammoniacal solution, followed by the irradiation with UV radiation of the biomass and the drying by atomization, characterized in that a culture medium 23 is prepared from 2% molasses, 2% corn extract and water up to 100% by homogenization at 30 ° C, during 30 min, followed by sterilization at 120 ° C, for 30 min and cooling of the culture medium at 30 ° C and pH = 6.5, then proceed to the fermentation phase comprising three stages operating at a temperature of 28-30 ° C, pH = 6.5, pressure 0.5 atm, with aeration of 1 l / l / min 27 with sterile air and with a variable stirring of the fermentative medium of 50-200 roj / min for 18 -20 h, so in the first fermentation stage the inoculum is prepared by mixing the 29 culture medium with an inoculum prepared in the laboratory with the microorganism Saccharomyces species by volume of 10%, in the second fermentation stage the inoculum from the first fermentation stage is mixed by volume of 10% with the medium. culture, and in the third fermentation stage, the inoculum from the second fermentation stage in 10% volume is mixed with the culture medium, 33 the fermentation phase being followed by the separation of the biomass from the fermentation environment by centrifugation, the treatment of the separate biomass with a 1% ammonia solution, the ratio between the dry bio-mass and the volume of the solution being 1: 8, stirring continuously at 27 "C, for 20 hours, separating the biomass by centrifugation, diluting the ergosterol biomass with water until suspended. 37 8%, by irradiation with UV at a wavelength of 230-280 nm, when ergostrol is transformed into vitamin D2, and by drying the suspension by atomization at a temperature of 39 inlet air flow at 140-150 ° C and at a product outlet temperature of 70-80 ° C. 41 2. Instalație pentru obținerea vitaminei D2 de uz veterinar obținută prin procedeul definit în revendicarea 1, care cuprinde incinte în care se realizează fermentația, mijloace 43 de separare a biomasei prin centrifugarea mediului fermentativ, mijloace de iradiere cu radiații ultraviolete a biomasei și mijloace de uscare prin atomizare, caracterizată prin aceea că 45 este constituită din două reactoare (1 și 3) de preparare a mediilor de fermentație, prevăzute cu sisteme de încălzire - răcire, agitare, o pompă (2) de transvazare a mediului la fermentație 472. Plant for obtaining vitamin D2 for veterinary use obtained by the process defined in claim 1, comprising enclosures in which fermentation is carried out, means 43 of biomass separation by centrifugation of the fermentative environment, means of irradiation with ultraviolet radiation of the biomass and means of drying. by atomization, characterized in that 45 consists of two reactors (1 and 3) for the preparation of fermentation media, provided with heating systems - cooling, stirring, a pump (2) for transferring the environment to fermentation 47 RO 122783 Β1RO 122783 Β1 1 în cele trei fermentatoare (4,6, 8) prevăzute cu sistem de încălzire - răcire, trei filtre de aer steril (5, 7,9), un separator de picături comun (10), o pompă (11) de transvazare a mediului1 in the three fermenters (4,6, 8) equipped with heating-cooling system, three sterile air filters (5, 7,9), a common drop separator (10), a pump (11) for transferring environment 3 fermentativ, un separator centrifugal (12) de separare a biomasei din mediul de fermentație, un reactor (13) de tratare cu soluție amoniacală a biomasei de ergosterol, un aparat (15) de3 fermentative, a centrifugal separator (12) for separating the biomass from the fermentation medium, a reactor (13) for treatment with an ammoniacal solution of the ergosterol biomass, an apparatus (15) for 5 iradiere cu ultraviolete, unde ergosterolul este transformat în vitamina D2, un reactor (16) în care se face diluția biomasei cu apă și o pompă (17) de alimentare a instalației de uscare prin 7 atomizare (18).5 ultraviolet irradiations, where ergosterol is converted to vitamin D2, a reactor (16) diluting the biomass with water and a pump (17) to supply the drying plant through 7 atomizations (18).
ROA200600113A 2006-04-19 2006-04-19 Process and installation for preparing vitamin d2 for veterinary use RO122783B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ROA200600113A RO122783B1 (en) 2006-04-19 2006-04-19 Process and installation for preparing vitamin d2 for veterinary use

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ROA200600113A RO122783B1 (en) 2006-04-19 2006-04-19 Process and installation for preparing vitamin d2 for veterinary use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RO122783B1 true RO122783B1 (en) 2010-01-29

Family

ID=41665454

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ROA200600113A RO122783B1 (en) 2006-04-19 2006-04-19 Process and installation for preparing vitamin d2 for veterinary use

Country Status (1)

Country Link
RO (1) RO122783B1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013021138A3 (en) * 2011-08-09 2014-03-20 Lesaffre Et Compagnie Yeast flakes enriched with vitamin d2, compositions containing same, method for preparing same, uses thereof, and device for implementing the method

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013021138A3 (en) * 2011-08-09 2014-03-20 Lesaffre Et Compagnie Yeast flakes enriched with vitamin d2, compositions containing same, method for preparing same, uses thereof, and device for implementing the method

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106190905B (en) Utilize the method and its application of bacillus subtilis biosynthesis nanometer selenium
Zhou et al. Applied modern biotechnology for cultivation of Ganoderma and development of their products
CN1229440A (en) Production and use of compositions comprising high concentrations of vitamin B12 activity
CN102835251A (en) Submerged fermentation culturing method for medicinal hericium erinaceus mycelium liquid
CN107189949B (en) Rhizopus oryzae LJH3 and application thereof in preparation of genistein by biotransformation of sophoricoside
CN108309922A (en) One kind three spends proferment pulp cosmetic and preparation method thereof
CN104694613B (en) A kind of ubiquinone10Novel technology for extracting
CN103214593B (en) The preparation method of beta-glucan
RU2409658C1 (en) Basidiomycete inoculating mycelium and preparation method thereof
CN1799561A (en) Application of Antrodia camphorata mycelium fermented extract in preparation of anti-radiation damage medicine
CN110229762A (en) One plant has the hydrogen-oxidizing bacterium of Plant growth promotion and its is separately cultured and applies
CN106957801B (en) Method for producing five kinds of ustilaginoidea virens toxins by using ustilaginoidea virens
CN102823428A (en) Method for solid liquid mixed culture of medical hericium erinaceus mycelia
RO122783B1 (en) Process and installation for preparing vitamin d2 for veterinary use
CN107604036A (en) A kind of method for preparing bata-carotene and bata-carotene product
CN116355816A (en) Microorganism of fermented samara oil seed and blood lipid reducing composition thereof
CN106922386A (en) A kind of artificial culture method of cicada fungus
CN109082449A (en) A kind of L-Histidine production technology based on plant source
CN111419822B (en) Calcium butyrate microcapsule and preparation method and application thereof
CN109536533B (en) A method for preparing lycopene
CN107048166A (en) A kind of method of natural gamma Gamma-propalanine content in increase highland barley monascus
CN110283855B (en) Method for improving GABA (Gamma amino acid butyric acid) producing capability of streptococcus thermophilus 210202 strain
RU2189395C2 (en) Method of mushroom protein biomass preparing
CN107475306B (en) Method for preparing lycopene and lycopene product
CN104664041A (en) Edible biological compound protein powder and preparation method thereof