RO122437B1 - Compoziţie apifitoterapeutică de uz veterinar - Google Patents

Abstract

Compoziţie apifitoterapeutică de uz veterinar, ce constă în aceea că aceasta conţine 20...65% părţi polen puvis, 5...20% părţi propolis, 0,5...6% părţi vitamina E, 0,01...1,5% părţi vitamina A, 1...3% părţi complex Se + Zn, 0,5...1,5% părţi Tinctura Chelidonii, 4...6% părţi excipienţi acceptabili farmaceutic, părţile fiind exprimate în greutate.

Description

Invenția se referă la o compozție apifitoterapeutică de uz veterinar pentru tratamentul afecțiunilor hepatobiliare, cu utilizare în domeniul zoo-veterinar.

Până în prezent se cunosc produse farmaceutice de uz veterinar având acțiune hepatoprotectoare, regenerativă ori detoxifiantă. Cele care se cunosc până acum sunt produse farmaceutice utilizate pentru uz uman, recomandate și la animale pentru profilaxia și controlul afecțiunilor hepatice.

Dintre acestea sunt menționate în literatura de specialitate (Agenda Medicală Sănătatea mai presus de orice, Ed. Medicală, București, 2005; Agenda Medicală Medicină complementară alternativă, Ed. Medicală, București, 2005;) următoarele:

DEVIL's CLAW (Gheara diavolului) 125mg/100 caps este dintre cele mai potente detoxifiante și imunomodulatorii vegetale de pe piață. Devi's Claw este un extras standardizat din rădăcina de Harpagophytum procumbens și conține un complex de glicoside iridoide, flavonoizi, acizi fenolici, chinine și altele, cu acțiune antiinflamatoare și hepatoprotectoare.

SILIPHOS PHYTOSOME. Siliphos susține și promovează funcționarea sănătoasă a ficatului. Siliphos ajută la optimizarea funcției hepatice și maximizează potențialul de neutralizare a toxinelor; este un antioxidant puternic, prin neutralizarea radicalilor liberi ce ar putea afecta funcția hepatică. Siliphos ajută la protejarea ficatului împotriva efectelor unor agenți nocivi cum ar fi alcoolul, poluarea, fumul de țigară sau medicamente; amplifică procesele de neutralizare a toxinelor din ficat; asigură protecția ficatului în cazul persoanelor care lucrează cu substanțe chimice toxice, pesticide și alte substanțe care pot afecta ficatul. Siliphos poate reduce, împiedica sau remedia afectarea ficatului la femeile care folosesc pilule anticoncepționale. Siliphos îmbunătățește fluxul lichidului biliar, limitează leziunile hepatice apărute în urma întreruperii alimentării cu oxigen și este un protector natural al hepatocitelor datorită capacității de a proteja împotriva leziunilor hepatice cu diverse etiologii.

MECOPAR FORTE sunt comprimate filmate conținând bitartrat de colina 100 mg, metionină 100 mg, acetat de a/fa-tocoferol 3 mg, clorhidrat de tiamina 2 mg, riboflavina 2 mg, clorhidrat de piridoxina 2 mg, ciancobalamina 0,00067 mg, nicotinamida 6 mg, pantotenat de calciu 7 mg. Acțiune farmacoterapeutică: Factori lipotropi și vitamine cu acțiune hepatoprotectoare și hepatotrofică.

Indicații: Hepatite cronice și ciroze hepatice cu infiltrație și degenerescență grasă. Profilactic, în condiții de expunere la substanțe hepatotoxice medicinale sau industriale; sarcina toxică, boala de iradiere, ateroscleroză, boli degenerative ale sistemului nervos (ca medicație adjuvantă).

LIVER AID - supliment alimentar recomandat atat pentru prevenirea unor boli hepatice, cât și pentru utilizarea ca adjuvant al tratamentului medicamentos, în cazul unei boli hepatice cronice. Compoziția chimică reunește aminoacizi esențiali (L-arginină, L-cisteină, L-ornitină, Metionină, Acid a/fa-cetoglutaric, L-carnitină, Colină, Acid a/fa-lipoic, Extract de silimarină, Crom (picolinat), Seleniu (seleniu-metionin).

CĂTINOFORT - este un produs adjuvant recomandat în afecțiuni hepatice, hipercolesterolemie, hiperlipemie, afecțiuni funcționale ale sistemului nervos central, osteoporoză, suprasolicitării intelectuale și fizice, oboseală cronică, insomnii, obezitate, preventiv pentru munca în condiții toxice.

PLAVOBIL - Produs natural realizat din extracte vegetale standardizate, cu conținut ridicat de silimarină, oximetilantrachinone, alcaloizi și principii amare, în amestec cu uleiuri esențiale, condiționat sub formă de comprimate. Conține: Extracte standardizate din: Agrimonia eupatoria, Chelidonium majus, Taraxacum officinalis, Gentiana liitea, Rhamnus frângula, Glycyrrhiza glabra, Silybum marianum, Aetheroleum Foeniculi și Aetheroleum Carvi.

RO 122437 Β1

Acțiune terapeutică: Produsul conține principii active vegetale care acționează la 1 nivelul aparatului hepatobiliar. Este eficace în afecțiunile biliare, stimulând secreția de bilă și golirea veziculei biliare, prevenind astfel formarea calculilor biliari. Silimarina asigură o 3 acțiune hepatoprotectoare și de regenerare a celulelor hepatice. Plavobil stimulează funcția antitoxică a ficatului și în plus, exercită o acțiune antiseptică și antispastică la nivelul 5 veziculei biliare și al canalelor hepatice. Produsul mai prezintă acțiune diuretică și ușor laxativă, cu efect depurativ și de reducere a colesterolului și uremiei. 7

Este indicat în hepatita cronică în diverse faze de evoluție, colecistită cronică, diskinezie biliară hipotonă, constipație cronică, sindrom post-colecistectomie și profilactic, 9 pentru prevenirea formării calculilor biliari la persoanele cu disfuncții biliare.

DIGESTB este un supliment alimentar ce ajută la reglarea digestiei, prin stimularea 11 secreției biliare și eliminarea acesteia, având drept rezultat ușurarea procesului digestiv. Principiul activ Artichoke extras din frunzele de anghinare este foarte bogat în cynarină (5%) 13 și este obținut prin presare la rece prin metoda de extracție inovatoare ce păstrează toate proprietățile active. Artichoke are acțiune colagog-coleretică (stimularea secreției biliare și 15 modificarea calitativă a compoziției bilei) având drept rezultat ușurarea procesului de digestie. 17

Digest B este utilizat în cazul insuficienței biliare, a calculilor biliari, dischineziilor hepato-biliare, insuficienței digestive, enteritelor, enterocolițelor, balonărilor, crampelor și 19 meteorismului intestinal. Indirect, Digest B ajuta la scăderea nivelului colesterolului și intensifică funcția de detoxifiere hepatică. 21

LIVECOMeste un preparat din plante care susține și îmbunătățește funcțiile hepatice.

Are acțiune hepatoprotectoare, diminuează fibroza și steatoza hepatică, corectează 23 disfuncțiile hepatice apărute după unele medicamente, infecții, alcool sau droguri. Conține ca ingrediente: Piper longum, Glycyrrhiza glabra, Mandur bhasma, Gumacacia, Picrorhiza 25 kurroa extract, Phyllanthus urinaria extract.

Preparatul oferă protecție pentru orice manifestare a disfuncțiilor hepatice, fiind foarte 27 eficient în tratamentul icterului, hepatitelor infecțioase, vomismentelor, steatozei hepatice, util împotriva hepatotoxicității induse de medicamente, în special antibiotice, analgezice și 29 antiepileptice. Stopează evoluția ulterioară a cirozelor și conservă funcțiile hepatice existente, îmbunătățește procesul de regenerare hepatică prin diminuarea fibrozei, reduce 31 acumularea trigliceridelorîn celula hepatică, corectează leziunile hepatice datorate infecțiilor, alcoolului sau drogurilor, susține funcția hepatică în cazul cancerului sau al hepatitelor 33 cronice, accelerează activitatea metabolică, generează un apetit sănătos și regularizează secreția biliară, cu indicații în: hepatite virale, infecții hepatice însoțite de anorexie, greață, 35 icter și ciroze hepatice, steatoză hepatică.

Singurele produse de uz veterinar existente pe piață sunt cele încadrate la capitolul 37 - minerale și vitamine:

BIOTINA (vitamina H, vitamina B7). Se prezintă ca pulbere hidrosolubilă. Intervine 39 ca biostimulator, prin favorizarea neoglicogenezei și a ciclului energogen (Krebs).

BIOVIT PLUS - Comprimate polivitaminice (vitamine lipo și hiodrosolubile) cu rol 41 biostimulatorîn perioada de creștere, adjuvant în tratamentul bolilor infecțioase și parazitare, medicație specifică în hipovitaminoze, de stimulare în situații stresante și în convalescență. 43

CANIFORT- comprimate pentru reducerea carențelor mineralovitaminice, conținând polivitamine, aminoacizi, macro și microelemente minerale. Stimulează dezvoltarea corpului 45 și rezistența la îmbolnăviri a tineretului canin și felin.

CANIVITA - Comprimate cu polivitamine, cafeina, Mg, Zn, metionină, având rol de 47 stimulare neuromotorie, de tonic general și metabolic, la canine, cu indicații similare cu ale canifortului. 49

RO 122437 Β1

COMPLEX POLMTAMINIC BUVABIL - Suspensie de polivitamine, plus Mg, Zn, metionină și lactoză, cu efect biostimulator și antistres. Acționează favorabil în carențe vitaminice, anemii, cazuri de întârziere a creșterii.

METIONIA - Este un aminoacid esențial, sulfurat. Ca adjuvant al dieteticii și al hidratării pentru stimularea diurezei, ca și al combaterii infecțiilor urinare cu germeni producători de urează. Este utilă în profilaxia și combaterea calculilor urinari de struviți, la câini și pisici, prin acidifierea urinii.

OVIPLUS - Premix proteino-vitamino-mineral care stimulează producția găinilor ouătoare, imprimând și rezistență crescută cojii oului.

ROMHIDROSEL - Conține glucoză, manitol sau sorbitol, fosfați, citrat ș.a. fiind util pentru prevenirea stresului de înțărcare și de transport, de asemenea, pentru rehidratare postdiareică.

ROMSELEVIT - Soluție injectabilă de seleniu și vitamina E, pentru prevenirea și tratamentul manifestărilor de carențe tocoferoselenice, în principal a miodistrofiei nutriționale.

ROMSTARTEP - premix proteino-vitamino-mineral pentru puii de găină, de la exlozionare până la vârsta de 18-20 săptămâni.

STAFAVITAROM- premix vitamino-mineral, plus metionină și virginamicină, inhibitor al florei digestive patogene și stimulent digestiv.

VITAMINA AD3E - cu efect biostimulator și antistres, favorizează creșterea tuturor neonatalilor și tineretului, mamifer și aviar, prolificitatea, prevenirea unor boli înfecțioase și parazitare, apoi depășirea perioadelor de convalescență, a dismetaboliilor minerale și energetice.

VITAMINA AD3E+C- produs biostimulator și antistres, stimulând creșterea tineretului (mamifer și aviar) și prolificitatea, rezistență antistres, la intoxicații, infecții, diateză hemoragipară, enterite, hepatite, stări de convalescență, dismetabolii minerale și energetice.

Aceste produse prezintă dezavantajul că sunt recomandate în principal dezechilibrelor minerale și vitaminice și nu funcțiilor metabolice complexe ale celulei hepatice. De cele mai multe ori sunt recomandate produse de uz uman din gama citată. De aceea schemele terapeutice trebuie să apeleze la mai multe produse din gama citată, fără a asigura în final un tratament eficient.

Problema tehnică propusă spre rezolvare de prezenta cerere constă în echilibrarea funcțiilor metabolice complexe ale celulei hepatice la animale.

Soluția constă în combinarea sinergică a următoarelor componente: polen, propolis, vitaminele E și A, complexul Se + Zn cu tinctura de rostopască și excipienți.

Compoziția apifitoterapeutică revendicată, conform invenției, conține 20...65% părți polen puvis, 5...20% părți propolis, 0,5%...6% părți vitamina E, 0,01...1,5% părți vitamina A,

1...3% părți complex Se + Zn, 0,5...1,5% părți Tinctura Chelidonii, 4...6% părți excipienți acceptabili farmaceutic, părțile fiind exprimate în greutate.

Avantajele compoziției revendicate, conform invenției, sunt următoarele:

- conține un procent ridicat de principii biologic active naturale cu efecte lipotrope, hepatoprotectoare, detoxifiante, hepatoregeneratoare, neurotrofe, antioxidante;

- restaurează funcția normală a celulei hepatice în condiții de agresiuni variate (virale, toxice, inflamatorii);

- prezintă o bună absorbție și toleranță digestivă și nu induce fenomene secundare sau toxice, așa cum pot antrena medicamentele de sinteză;

- permite o administrare de lungă durată inclusiv ca supliment alimentar la animalele cu stări de debilitante, după boli înfecțioase;

RO 122437 Β1

- este un supliment alimentar eficient pentru păstrarea echilibrului metabolic și a stării 1 de sănătate, adjuvant eficient pentru o rație alimentară echilibrată prin aportul de vitamine și minerale; 3

- se poate administra concomitent cu medicamente ce induc fenomene toxice hepatice în scop de protecție hepatică, spre exemplu, în timpul chimioterapiei, pe perioada 5 de antibioterapie, după deparazitare;

- se recomandă atât animalelor de companie cât și celor de fermă în situații de deficit 7 vitaminic, afecțiuni induse de stabulația îndelungată;

- datorită prezenței în formulă a polenului și propolisului, compoziția oferă un aport 9 de proteine, carbohidrați, vitamine și minerale necesar unei homeostazii generale.

Compoziția reunește componente naturale apicole (propolis, polen) cu extracte 11 vegetale și minerale (micro și macroelemente).

Compoziția revendicată intervine eficient într-o gamă largă de afecțiuni hepato-biliare 13 și în creșterea capacității de detoxifiere a organismelor animale; intervine prin multipli factori în reglarea activităților specifice hepatocitului, datorită compoziției sale chimice complexe. 15

Formula sa farmaceutică complexă conține o serie de componente naturale (polen, propolis) selecționate pentru conținutul ridicat în proteine, vitamine, minerale, alături de 17 complexe vitaminice și oligoelemente; este un un integrator metabolic ce reunește aminoacizi esențiali (metionină, colină, inozitol) vitamine din grupul B, vitaminele A și E, 19 vitamina C, flavonoizi, acizi grași liberi (palmitic, stearic, ac. oleic, ac. linoleic), fosfolipide, fosfoinozitol, minerale (Κ, P, Na, Mg, Se, Cu, Zn), glucide, enzime, toate implicate în diferite 21 lanțuri metabolice derulate la nivelul hepatocitului. Formula sa conține de asemenea, principii active vegetale furnizate de tinctură de rostopască, cu rol important în regenerarea celulei 23 hepatice.

Vitamina A - dezvoltă o activitate antioxidantă puternică asupra celulei hepatice, 25 crește durata de viață, stabilizează membranele celulare, reglează sistemul imunitar; acționează sinergie cu vitamina C, vitamina E și seleniu, ca antioxidant. 27

Vitamina C - reduce radicalii liberi, fiind un puternic antioxidant; intervine în formarea colagenului din țesutul conjunctiv; participă la reglarea activităților imune, asigurând o mai 29 bună apărare împotriva infecțiilor virale.

Tinctură de rostopască - intervine în reglarea activităților hepatocitului, reduce nivelul 31 de bilirubină, intervine activ în apărarea antivirală. Proprietățile hepatotrofice sunt corelate cu conținutul ridicat în factori de protecție (vitaminele A, E, C); are acțiuni: depurative, 33 detoxifiante, antioxidante, colagoge, coleretice, antiinflamatorie. Este astfel hepatotrofică, hepatoprotectore și lipotropă. 35

Compoziția a fost special formulată pentru a asigura un aport echilibrat de componente organice, minerale și vitaminice, cu acțiune hepatoprotectoare, antioxidantă, în 37 disfuncțiile hepatice apărute după infecții virale medicamentoase, toxice. Susține procesul de regenerare hepatică prin eliminarea inflamației și reducerea fibrozei, accelerează 39 metabolismul acizilor biliari, reglează secreția biliară.

Acționează ca factor de protecție în tratamentul icterului, steatozei. Este hepatotrofic 41 și lipotrop, acționând eficient în dislipidemii, reduce steatoza și asigură detoxifierea celulei hepatice. 43

Compoziția se administrează sub formă de tablete astfel:

- în hepatite, ciroze, steatoze, dislipidemii 1 cp/5 kg corp/zi, timp de 90 zile în 45 asociere cu alte scheme terapeutice;

- în boli de metabolism 1 cp/5 kg/corp x 3 ori/zi, timp de 1-3 luni, apoi 1 cp/5 kg 47 corp/zi doză de întreținere.

RO 122437 Β1

Prezentarea activității principiilor active

Compoziția conform invenției este bogat echilibrată în săruri minerale, aminoacizi, vitamine, flavonoizi datorită prezenței în compoziție a polenului și propolisului, fiind componente care imprimă un gust plăcut și aromat.

POLENUL este utilizat sub formă de pulbere cu conținut ridicat în proteine, aminoacizi, lipide (fosfolipide, trigliceride, acizi grași nesaturați), glucide, minerale (Ca, Mg, K, Fe, Cu, I, Zn, Mn), vitamine (provitamine A, tocoferol, calciferol, acid ascorbic, tiamină, vitamina B6, B5, acid pantotenic, acid folie, nicotinamidă, PP). Concentrația mare în aminoacizi justifică rolul lui de biostimulent. în plus, polenul conține substanțe antibiotice active, factori de creștere, glucozide (rutina) cu rol în creșterea rezistenței capilare. Prin valențele sale multiple, polenul intervine astfel în reglarea metabolismului celular, înclusiv a celui fosfo-calcic, a echilibrului acido-bazic, ca biocatalizatorîn diferite procese metabolice.

Polenul utilizat este un polen polifloral după o prealabilă condiționare în scopul prevenirii alterării. Se prezintă sub formă de pulbere ce include granule întregi și fragmente de granule de dimensiuni și culori diferite, cu gust dulceag-amărui specific, cu miros floral plăcut, având un conținut de zahăr invertit de minimum 18,0% g/g, proteine totale de 20% g/g, cenușă maximum 3% g/g, umiditate (% g/g) max 8,0, fără reziduuri de pesticide organoclorurate și organosfosforice, fără încărcătură microbiană.

PROPOLISUL se utilizează ca extract moale, cu conținut ridicat în rășini, balsamuri, ceară, uleiuri vegetale, aminoacizi liberi (pralină, arginină), terpene, vitamine (A, Β, E, PP) oligoelemente (Al, Ag, Co, Fe, Mg, Cu, Mn), flavonoizi. Propolisul se prezintă ca o masă rășinoasă de consistență variată în funcție de temperatură, cu culoare variată în funcție de sursa vegetală, cu miros complex balsamic cu gust dependent de sursă vegetală, dar în general iute, arzător. Compoziția cantitativă reunește: 55% rășini și balsamuri, 7,5-35% ceruri de natură vegetale + ceară de albine, 10% uleiuri volatile, 5% polen, 5% acizi grași, terpene, vitamine A, Β, E, PP, aminoacizi, oligoelemente, substanțe taninice.

Activitatea biologică a extractului de propolis și a diferitelor fracțiuni este complexă, între acțiunile specifice enumerându-se: activitatea antimicrobiană, antibiotică, antiinflamatorie, antioxidantă, analgezică. în plus flavonoizii din compoziție sunt responsabili de modificarea activităților enzimatice prin fosforilare, de activitatea antioxidantă și de cea de represie genică. Prin absorbția intestinală și fixarea calciului în oase, propolisul are o activitate deosebită, de neegalat, comparativ cu alte substanțe, comportându-se ca un adevărat anabolizant, în sinergism cu alți antioxidanți - seleniu, vitamina E, vitamina A, acid ascorbic.

Compoziția include, de asemenea, în formulă următoarele componente.

VITAMINA C (acid ascorbic) - sub formă de pulbere cristalină albă este antioxidantul hidrosolubil cel mai important pentru organismele animale, ce nu poate fi stocată în organism și trebuie luată zilnic din alimentație sau ca supliment alimentar. Vitamina C îndeplinește funcții multiple structurale, imunitare și în efort. La nivel structural intervine în formarea colagenului, asigurând o structură normală a pielii, ligamentelor, cartilajelor, oaselor, sistemului venos capilar, asigură fixarea Ca, integritatea osului, intervine în repararea fracturilor: întărește sistemul imunitar, combate agresiunile peroxidante ale radicalilor liberi în celule, ajută la detoxifierea sângelui, la absorbția și depozitarea vitaminei E în organism.

VITAMINA A + E acționează sub formă de complex vitaminic.

VITAMINA A, are rol de factor antioxidant, ce blochează radicalii liberi și constituie un coadjuvant al vitaminei E împreună cu care activează ca factor protector pentru membranele celulare; împreună reduc radicalii liberi, fiind puternic antioxidante; intervin în formarea colagenului din țesutul conjunctiv; participă la reglarea activităților imune, asigurând o mai bună apărare împotriva infecțiilor virale.

RO 122437 Β1

SELENIUL organic și ZINCUL au activitate: antioxidantă în sinergism cu vitamina E; 1 sunt cofactori esențiali ai glutation-peroxidazei (G-Px), care neutralizează peroxidul de hidrogen și peroxizii acizilorgrași, asigurând oxidarea microzomală și dezintoxicarea în ficat. 3

TINCTURĂ DE ROSTOPASCĂ - intervine în reglarea activităților hepatocitului, reduce nivelul de bilirubină, intervine activ în apărarea antivirală. Proprietățile hepatotrofice 5 ale acesteia sunt corelate cu conținutul ridicat în factori de protecție (vitaminele A, E, C) și are acțiune depurativă, detoxifiantă, antioxidantă, colagogă, coleretică, antiinflamatorie, fiind 7 astfel hepatotrofică, hepatoprotectoare și lipotropă.

Exemplu de realizare 9 se cântăresc materiile prime și se verifică parametrii incluși în Buletinul de Analiză a fiecărei materiei prime 11 se amestecă materiile prime, respectiv: 60 părți polen pulvis, 15 părți propolis, 5 părți vitamina E, 1 parte vitamina A, 2 părți complex Se + Zn, 1 parte Tinctură Chelidonii 13

- se adăugă solventul (alcool etilic 96°C) la granularea umedă

- se sitează 15

- se usucă (40-45 °C)

- se adăugă 5 părți excipienți de tabletare (agenți de curgere și antiadezivi) 17

- se efectuează granularea uscată

- are loc analiza interfazică a compoziției (conf. normelor din specificația tehnică 19 internă)

- are loc comprimarea 1,2 g/comprimat 21

- se verifică periodic greutatea

- are loc ambalarea primară 23

- are loc verificare finală a produsului

- are loc ambalarea secundară cu eliberare Buletin analiză 25

Compoziția se prezintă sub formă de comprimate filmate de 1,2 g, de culoare alb-galbuie, miros caracteristic, aromat conferit de componente (propolis, polen). 27

TESTĂRI FARMACOLOGICE PRECLINICE 29

Studiul preclinic al compoziției revendicate a fost efectuat la animale cărora le este destinat produsul (câini, pisică). 31

Cercetările au fost întreprinse în vederea pregătirii unui experiment vizând efectul apifitoterapeutic asupra organismului animal, precum și posibila implicare a acestuia alături 33 de terapia clasică, în dezintoxicarea și vindecarea organismului, cât și scurtarea timpului de tratament cu recuperare după diverse boli. 35

Material și metodă

Investigațiile clinice și examenele ecografice și de laborator au fost realizate în Clinica 37 Medicală a Facultății de Medicină Veterinară București și a Facultății de Medicina Veterinară - Universitatea “Spiru Haret” București, selectându-se 17 cazuri pentru experiment. 39

Cercetările s-au realizat pe câini cu vârste și rase diferite (tabelele nr. 1 si 2), cu diverse afecțiuni hepatobiliare, care au fost tratați prin mijloace terapeutice clasice, 41 comparativ cu protocolul terapiei nutriționale cu compoziția revendicată.

Examenele de laborator au urmărit atât determinarea bilirubinemiei, a activității 43 transaminazelor (ALAT, yGT) și fosfatazei alcaline (PAL) din sânge pe Reflotron (chituri uscate), cât și efectuarea examenului complet al urinei (COMBUR-TEST). Testele au fost 45 efectuate săptămânal.

RO 122437 Β1

Valorile normale de referință la câine pentru parametrii de interes determinați în laborator au fost următoarele: bilirubinemie: < 0,61 mg/dl; transaminaza ALAT: < 40 U/l; tranaminaza yGT: <5 U/l; fosfataza alcalină (PAL): 20-150 U/l; proteinemia: 5,4-7,7 g/dl; albuminemia: 2,5-3,7 g/dl; bilirubinuria: +.

Protocolul terapeutic a fost instituit în funcție de fiecare caz, iar pentru apifitoterapie a fost utilizată compoziția revendicată în doze de 2cp/10 kg greutate vie, zilnic, în trei pro dosis, cu 30-60 min înainte de masă, timp de 44 zile.

Rezultate obținute

Rezultatele cele mai spectaculoase ale terapiei cu compoziția revendicată s-au constatat la câini cu mică insuficiență hepatică, unde analizele au arătat revenirea la normal a valorilor bilirubinemiei și transaminazelor, cu rezultate superioare chiar tratamentului medicamentos.

în colestază, rezultatele tratamentului cu compoziția conform invenției, sunt superioare tratamentului medicamentos, ducând la o normalizare a parametrilor biochimici studiați.

în hepatita acută și în ciroza hepatică, rezultatele analizelor de laborator după 44 zile de tratament arată o tendință accentuată de vindecare, însă necesită mai multe ședințe de terapie nutrițională cu această compoziție până la revenirea la normal a parametrilor biochimici investigați, în corelație cu evoluție clinică favorabilă ce caracterizează vindecarea.

Parametrii biochimici analizați arată o eficiență cel puțin egală a terapiei cu compoziția revendicată, față de terapia clasică, în toate cele patru tipuri de afecțiuni hepatice.

Discuții

Rezultatele analizelor fata de tratamentul medicamentos după primele 14 zile de tratament.

Rezultatele investigațiilor biochimice (tabel 3) la câinii cu mică insuficiență hepatică au arătat după 44 zile de apiterapie cu compoziția revendicată, reflectă o revenire la normal a bilirubinemiei (0,3-0,5 mg/dl), față de tratamentul medicamentos clasic (0,5-0,6 mg/dl) și o scădere a activității tranaminazice ALAT (33-51,5 U/l) față de tratamentul medicamentos (60-67,8 U/l).

La câinii cu colestază investigațiile biochimice au arătat valori apropiate ale bilirubinemiei în urma tratamentului cu compoziția revendicată, de 0,5-0,85 mg/dl față de 0,8-0,85 mg/dl în urma tratamentului medicamentos.

Valorile activității transaminazei yGT au fost între 4,1 și 6,4 U/l în urma apiterapiei, comparativ cu limitele 7,5-9,8 U/l în urma tratamentului medicamentos. Transaminaza ALAT a scăzut în urma apiterapiei la valori cuprinse între 36-79 U/l față de 68-86 U/l în urma tratamentului medicamentos.

Fosfataza alcalină (PAL) și bilirubinuria au scăzut semnificativ prin ambele procedee terapeutice, astfel încât se poate concluziona că efectul apiterapiei cu compoziția revendicată a fost cel puțin la fel de eficient ca și terapia medicamentoasă după 6 săptămâni de tratament.

La câinii cu hepatită acută, scăderea bilirubinemiei la valori de 0,85-1,1 mg/dl în urma apiterapiei față de 1,9-2,2 mg/dl în urma tratamentului medicamentos, cât și scăderea transaminazei ALAT la valori cuprinse între 36-68 U/l față de 88-109 U/l în urma tratamentului medicamentos, justifică utilizarea apiterapiei cu compoziția revendictă. Valorile albuminemiei, ale fosfatazei alcaline, yGT și bilirubinuriei au fost sensibil apropiate în ambele procedee terapeutice, ceea ce arată o tendința accentuată spre vindecare, dar și nevoia unei perioade mai lungi, de terapie nutrițională cu compoziția revendicată, până la o vindecare completă, în general de minimum 90 zile.

RO 122437 Β1

La câinii cu ciroză hepatică, rezultatele apiterapiei arată o scădere a activității 1 transaminazei ALAT până la valori de 56-59 U/l (față de 40 U/l - limita superioară a valorilor normale) cu creșterea semnificativă a proteinemiei și albuminemiei, însă sub limitele 3 normale, concomitent cu scăderea bilirubinei la 0,9 mg/dl (însă peste limita superioară a valorilor de referință 0,6 mg/dl), rezultate foarte apropiate de cele obținute în urma 5 tratamentului medicamentos.

Eficiența tratamentului medicamentos și a apiterapiei cu compoziția revendicată în 7 ciroza hepatică, nu poate fi demonstrată după o perioadă de 44 zile, astfel încât investigațiile trebuie efectuate după mai multe luni de zile de tratament. Există însă o tendință de revenire 9 la normal a parametrilor biochimici sanguini și urinari, corelată cu evoluția clinică favorabilă a cazurilor urmărite în experiment. 11

Investigațiile trebuie efectuate pe un număr mai mare de animale și o perioadă de timp prelungită în cazul animalelor cu ciroză hepatică; rezultatele analizelor biochimice 13 sugerează o posibilă asociere a apiterapiei și fitoterapiei cu tratamentul medicamentos. în paralel s-au făcut investigații ecografice la câini și pisici și examene histologice pentru 15 evidențierea structurii histologice a ficatului în diferite afecțiuni.

Tabelul 1

Afecțiunile hepatice diagnosticate la câini și protocolul terapeutic aplicat 19

Afecțiune	Tratament medicamentos	Apiterapie cu HEPRO-VIT
Hepatită acută	Cazul 1, 5	Cazurile 11,13
Colestază	Cazul 4, 7	Cazurile 8, 10, 12
Mică insuficiență hepatică	Cazul 3, 9	Cazurile 6, 14, 17
Ciroză hepatică	Cazul 2	Cazurile 15, 16

Tabelul 2 27

Apiterapia cu compoziția revendicată, dozele zilnice

Specificare	Mică insuf. hepatică	Colestază	Ciroză hepatică	Hepatită acută
Câini talie mică	3cp/10kg	4cp/1 Okg	4cp/10kg	4cp/10kg
Câini talie mijlocie	2cp/10kg	2cp/10kg	3cp/1 Okg	3cp/10kg
Câini talie mare	1cp/10kg	2cp/10kg	3cp/10kg	3cp/10kg

co		r-
ro -Q	H	N
50	>	ro
>CD	ή	O

.o •C

CD

Q.

0)

-C

2S.

c ro o

CC

W ,c >CD

O 'CD

CJ c

CD

E

CD io o

co co 'T co

M3

-O ί

CQ co •N·

CN

CN

O

CD

Ό .CD

N

Xh

Hf

CD

Ό </>

Hm c

CD

E

4S £

O

CD

Hm ,c

CD

-C

O ,o

-S

CD .O)

-C co

CD

J» ,c ro

CD

N

CD

CC

CC

0.

LU

X

Σ3

O

O ’q.

CD

M—»

o.

<

N

CD

O

CD

N

CD

O co o

CM 'T >CD

N co o

CJ

C5

CD

E

CD

CJ n

ω

E c

CD

E

CD -*—< CD

KD ro

4—j)c

CD v_

CD

O

CD >

O

E

Lc o

o

Lo

C

-t—<

CD

E ro

L_ ro

CL co o’ in lo o

CD

N

CD

O

IO o' o

CD

CM co

CO

N

CD

O

N

CD

O

N

CD

O

N ro

O

CD

N

CD

O

CO

N

CD

O

CO o

CO o

θ' bo

E, ω

E

CD

C

Lq

Z5

L.

m co

Γ-’

CD

CD

CO co

LO

CO

O

CO

CO r-~I— s

<

CD bho io co o

LO o

<

Q_ 'CD

CJ .CD

-M c

CD §

N •StM>CD §·

Ό δ>

C <D

E

S

CD

Ό ,c

CD <5

CD

CJ ,E

-c

CJ .o

-Q

CD .05 *3

CO §

,c

CD ro

Hm

N

Φ

Ct

Apiterapie cu HEPR0-VIT	Caz 12	0,85	36	09	4,2	+
Caz 10	0,5	55	53	6,4	+
Caz 8	0,6	79		sf	+
Tratament medicamentos	Caz 7	0,85	68	58	io r--~	+
Caz 4	8Ό	86,8	64	9,8	+
Valoare inițială	Caz 12	2,5	107	LO	13,3	+++
o N CD O	0,8	105	09	10,2	+ +
CO N ro O	T“	102	105	o	+ +
Caz 7	τ- ΓΝ	108	CM	CM	++
Caz 4	CD	103,5	107	11,24	+++
Parametri biochimici	Bilirubinemie (mg/dl)	ALAT (U/l)	PAL (U/l)	7GT (U/l)	Bilirubinurie

CO lo σ>

cq io r*σ>

CO lo r» σ>

co in rσι uo a5 •o £

’4S a

o

CB

CO §

c

O

1^ co

CM

CM

O

OÎ <co o

.CO ’+w c

ε o

φ

N

V

M>C0 §

Ό δ,

C ε

Ό .c co ,g

O

-c o

o co .05

CO §

.c □

N

CC

Apiterapie cu HEPRO-VIT	Cazul 13		36	85	r*- oo	2,95	+
Cazul 11	0,85	89	69	σ>“	2,44	+
Tratament medicamentos	Cazul 5	σ>	109	00 00	oo	2,7	+
Cazul 1	CM cm	co 00	ZZ	σ>	CD cm	+
Valoare inițială i	Cazul 13	IO cm	140	105	00	IO cm	+ +
Cazul 11	co	165	107	CM	cm	++
Cazul 5	CM cm	180	130	CM	IO	++
Cazul 1	F- cm	160	105	T“	1,2	+ +
Parametri biochimici		Bilirubinemie (mg/dl)	ALAT (U/l)	PAL (U/l)	YGT (U/l)	Albuminemie (g/dl)	Bilirubinurie

CO

-Q (2 >co .o

CO g·

-c >co

N .S δ

=5

C5 <co

C5

-Kj c:

ε £

-o o

N

Ό>co §

Ό c:

ε

Q .c co ,ε

O §

.O

v.

O

CO .05 co §

.g

N tc

Apiterapie cu HEPRO-VIT	Cazul 16	0,9	56	94	00 cm’		+
Cazul 15	0,8	59	o	’îr CM	4,96	+
Tratament medicamentos	Cazul 2	6‘0	56	96	2,95	4,85	+
Valoare inițială	Cazul 16	6‘0	98	107	2,5	UD	++
Cazul 15	CO	105	U5	CO	oo_ co	+ +
Cazul 2		102	O			++
Parametri biochimici		Bilirubinemie (mg/dl)	ALAT (U/l)	PAL (U/l)	Albuminemie (g/dl)	Proteinemie (g/dl)	Bilirubinurie

RO 122437 Β1

CONCLUZII

Studii preclinice •Testarea toleranței locale;

1. Examenul macroscopic a fost efectuat pentru toate animalele din loturile de studiu. Au fost examinate aspectul tegumentului și apariția fenomenelor locale de reacție.

Nu au fost semnalate decât fenomene tranzitorii de reacție locală ușoară (zonă roșie).

2. Examenul anatomo-patologic a inclus zonele de piele epilată supusă testării precum și analiza organelor interne și a mucoaselor.

3. Anomaliile anatomo-patologice observate au fost banale, ceea ce conduce la concluzia unei bune toleranțe locale și generale. Produsul nu a antrenat anomalii nici la nivelul organelor interne.

în urma testării preclinice a compoziției revendicate la animale de laborator (șoarece, șobolan) au rezultat următoarele concluzii:

4. Dozele terapeutice uzuale ale suplimentului nutritiv, practic netoxice, nu sunt strict delimitate.

5. Doze terapeutice maxime (cele mai mari doze terapeutice suportate de majoritatea animalelor fără apariția unor fenomene toxice) nu au limită superioară, fiind produs nutrițional.

6. Valorile DL₅₀ obținute atât la șoareci cât și la șobolani, în urma administrării unice a compoziției hepatoprotectoare au demonstrat lipsita de toxicitate.

7. Rezultatele experimentale cu compoziția revendicată, obținute la șoarece, demonstrează lipsa de potențial toxic și teratogen.

8. Au fost tratați 17 câini, efectuându-se anterior analize biochimice și radiografii care au confirmat hepatopatiile, timp de minimum 44 de zile, cu compoziția revendicată, în doză de 0,5-2 cp/5 Kg /zi.

9. Monitorizarea tratamentului prin evidențierea activității enzimelor GPT, GGT a demonstrat eficiența terapiei efectuate timp de 44 de zile.

10. Compoziția revendicată corespunzător rezultatelor analizelor de laborator a stimulat funcțiile hepatorenale concomitent cu stimularea detoxifierii organismului după cele 44 de zile de tratament.

11. Metodele de terapie nutrițională cu produsul compoziția revendicată, aplicate în afecțiunile hepatice prezentate au fost la fel de eficiente ca și metodele terapeutice standard, fiind lipsite de reacții adverse, detectate biochimic, radiologie și clinic.

12. La câinii cu mică insuficiență hepatică, după 14 zile se constată revenirea la normal a bilirubinemiei, sub 0,61 mg/dl în urma ambelor procedee terapeutice și scăderea activității ALAT (33-51,5 U/l) în urma apiterapiei, față de (60-67,8 U/l) după tratamentul medicamentos.

13. La câinii cu colestază, în urma terapiei cu compoziția revendicată, bilirubinemia a scăzut la 0,5-0,85 mg/dl, față de 0,8-0,85 mg/dl în urma tratamentului medicamentos corelată cu scăderea yGT (4,1-6,4 U/l) față de 7,5-9,8 U/l prin tratamentul medicamentos și cu scăderea ALAT (36-79 U/l) în urma apiterapiei comparativ cu 68-86 U/l prin tratamentul medicamentos și cu scăderea fosfatazei alcaline și a bilirubinuriei prin ambele metode de tratament.

14. La câinii cu hepatită acută, scăderea bilirubinemiei la valori de 0,85-1,1 mg/dl în urma apiterapiei față de 1,9-2,2 mg/dl prin tratamentul medicamentos corelat cu scăderea activității ALAT (36-68 U/l) după terapia nutrițională cu compoziția revendicată, față de 88-109 U/l în urma tratamentului medicamentos, justifică utilizarea apiterapiei, arătând tendința de vindecare, demonstrată și de corectarea albuminemiei, bilirubinuriei și a activității enzimelor PAL și yGT.

RO 122437 Β1

15. în ciroza hepatică la câine, în urma apiterapiei, compoziția revendicată se 1 constată scăderea ALAT (56-59 U/l) și a bilirubinemiei (0,8-0,9 mg/dl) corelată cu creșterea albuminemiei (2,4-2,8 g/dl) și a proteinemiei (4,7-4,96 g/dl), cu rezultate aproape identice cu 3 tratamentul medicamentos și arată o tendință spre corectare a valorilor parametrilor investigați, care sugerează necesitatea prelungirii tratamentului pe o durată de luni de zile, 5 minimum 90 zile.

3) TRIAL CLINIC DE EVALUARE A COMPOZIȚIEI REVENDICATE CU APLICAȚII 7 ÎN MEDICINA VETERINARĂ

METODE DE LABORATOR FOLOSITE 9

1. Exploararea biochimică a sângelui

a) recoltarea sângelui și obținerea serului 11

Recoltarea s-a făcut de regulă de la animale odihnite, nestresate.

Pregătirea prealabilă a animalului a constat în: tunderea și/sau raderea zonei de unde 13 urma a se recolta și dezinfecția cu alcool sanitar.

Zonele de elecție sunt reprezentate de venele superficiale de calibru mai mare, de 15 la carnasiere respectiv: venele safene externe și venele jugulare.

Tehnica de lucru 17

- realizarea stazei venoase prin compresie;

- puncționarea venei (în sensul invers de curgere) cu ajutorul acelor de seringă pentru 19 injecții IV, sterile;

- atașarea seringii la mandrenul acului și aspirarea sau aplicarea eprubetei în care 21 se recoltează, direct;

- extragerea acului și se aplicarea un tampon care se menține până la realizarea 23 hemostazei.

în condițiile recoltării sângelui fără anticoagulant, sângele lăsat la temperatura 25 camerei va exprima serul (componenta sanguină lichidă) după coagulare.

b) Principii de dozare a unor enzime și metaboliți cu ajutorul aparatului SPOTCHEM 27

Spotchem este un fotometru cu reflectanță care poate determina 22 parametri din sânge capilar sau venos, fără tratarea prealabilă a probei. 29

Acest aparat computerizat poate fi considerat un laborator complet și rapid într-un spațiu redus, fiind foarte util în special pentru urgențe, rezultatele fiind obținute imediat. 31

Parametrii care pot fi determinați sunt:

A. Reactivi cu un singur test/bandeleta (50 bandelete/cutie): 33

1) GLU (glucoza) 12) LDH (lactico-dehidrogeneza) 35

2) UA (acid uric) 13) CPK (creatin fosfokinaza)

3) T-Cho (colesterol) 14) Hb (hemoglobulina) 37

4) TG (trigliceride) 15) Amy (amilaza)

5) BUN (uree) 16) GGT gama glutamil transpeptidaza 39

6) T-Bil (biliru 17) ALP (fosfataza alcalina).

7) GPT (transaminaza GP) 18) Cre (creatinina) 41

8) T-Pro (proteine totale) 19) PIDL-C (colesterol -lipoproteine)

9) Alb (albumina) 20) FRA (fructozamina) 43

10) GOT (transaminaza GO) 21) IP (fosfor anorganic)

11) Ca (calciu) 22) Mg (magneziu) 45

RO 122437 Β1 sau

B. Reactivi cu mai multe teste/bandeleta (50 bandelete/cutie)

Liver-1 (LDH, Alb, GPT, GOT, T-Pro, T-Bil)

STAT-1 (LDH, CPK, GPT, GOT, BUN, T-Bil)

PANEL-1 (GPT, GOT, BUN, Glu, T-Cho, T-Bil)

PANEL-2 (LDH, Alb, T-Pro, UA, Ca, TG)

Heart-2 (LDH, CPK, GOT, T-Pro, BUN, T-Cho)

Kidney-2 (CRE, Alb, T-Pro, UA, BUN)

Criterii clinice și paraclinice pentru diagnosticul afecțiunilor hepatice

Din cazurile prezentate în cadrul Clinicii de Medicală a Facultății de Medicnă Veterinară București se prezintă cazurile diagnosticate cu afecțiuni hepatice. (Anexa 1)

Fiecare caz a fost supus aceluiași protocol de investigație:

1. Examen clinic

2. Examen ecografic

3. Examen radiologie

4. Profilul biochimic (GLU, UA, T-Cho, TG, BUN, T-Bil, GPT, T-Pro, Alb, GOT Ca, LDH, CPK, Amy, GGT, ALP, Cre, HDL-C, Mg)

Din cazurile prezentate în Anexa 1, putem trage concluzia că se impune coroborarea datelor anamnetice, a rezultatelor examenului clinic și paraclinic și a examenului ecografic.

Pe baza datelor anametice, clinice și paraclinice, se poate stabili frecvent un diagnostic de sindrom.

De asemenea, rezultatul examenului ecografic permite, uneori, pe baza aspectului parenchimului, căilor biliare și vezicii biliare, stabilirea diagnosticului. Pentru stabilirea unui diagnostic cert se impune realizarea biopsiei hepatice.

a) Manifestările clinice nu sunt specifice unei anumite afecțiuni hepatice.

Semnele digestive (vomă, diaree, inapetență) apar în majoritatea afecțiunilor hepatice acute și cronice.

Semnele nervoase sunt întâlnite atât în afecțiunile acute cât și cronice, singura diferență fiind modul de instalare: brusc (cazul afecțiune acută) sau evoluează intermitent (cazul afecțiune cronică). Toate afecțiunile hepatice potfi însoțite de manifestări desemnate cu termenul de encefaloză hepatică. Aceste semne sunt caracteristice în cazului șuntului portosistemic.

Icterul este o manifestare frecventă în cazului afecțiunilor hepatice, dar nu exclusivă.

Tulburările urinare apar, frecvent, în cazului afecțiunilor hepatice cronice.

b) Parametrii biochimici permit confirmarea existenței unei afecțiuni hepatice.

Tabelul 7

Parametrii biochimici de identificare a ai unei afecțiuni hepatice

Parametrii biochimici	Modificare	Afecțiune
GOT GPT	creștere	insuficiență hepatică colestază ciroză hepatică hepatită acută
ALP	creștere	colestază angiocolită insuficiență hepatică
GGT	creștere	ciroză hepatică angiocolită

RO 122437 Β1

Tabelul 7 (continuare) 1

Parametrii biochimici	Modificare	Afecțiune
	creștere	insuficiență hepatică colestază
Bilirubinemia		angiocolită
		hemoliză
		hepatită acută
Albumineraia	scădere	insuficiență hepatică
		ciroză hepatică
Timpii de coagulare	(Quick)	insuficiență hepatică

Activitatea PAL este foarte crescută în afecțiunile acute, iar în cele cronice, este de regulă moderat crescută. 13

c) Examenul ecografic, pe baza datelor care le oferă în ceea ce privește dimensiunea și aspectul parenchimului hepatic, permite orientarea diagnosticului spre o anumită afecțiune. 15

Hepatomegalia este întâlnită în numeroase afecțiuni, însă, pe baza ecogenității parenchimului, putem stabili dacă este un proces cronic sau acut, astfel: 17

- hiperecogenitatea parenchimului apare în cazul de ciroză, distrofii hepatice (steatoză), infiltrații tumorale; 19

- hipoecogenitatea parenchimului apare în cazul de inflamație acută, congestie hepatică, infiltrație tumorală. 21

Coroborarea tuturor datelor obținute în urma acestor examene permite stabilirea 23 diagnosticului afecțiunii hepatice, chiar dacă nu întotdeauna cu precizarea clară a tipului de leziune, astfel încât este posibilă instaurarea unei terapii adecvate. 25

I. MATERIAL Șl METODE EXPERIMENT

1) Eșantioane de populație 27

LOTUL I - LOT EXPERIMENTAL • 10 câini cu vârste cuprinse între 2 și 8 luni cu afecțiuni hepatobiliare în momentul 29 intrării în experiment, la care s-a aplicat o schemă de tratament incluzând compoziția revendicată. 31

LOTUL II - LOT MARTOR •10 câini cu vârste cuprinse între 2. și 7 ani în momentul intrării în experiement, la 33 care s-a aplicat o schemă standard de tratament (hepatoprotectoare, lipotrope, aminoacizi, vitamine) 35

2) Medicația

- apifitoterapie cu compoziția revendicată (Lotul I) - experimental; 37

- tratament standard (lotul II) - martor

3) Dozarea și mod de administrarea 39

Lotul I: 1cp /5 kg greutate vie din compoziția revendicată, de 3 ori/zi/per os, dimineața-prânz-seara, timp de 90 zile, asociat cu ceai hepatic, complex B și regim alimentar 41 (doză stabilită în baza testelor farmacologice preclinice) (cazurile nr. 1-10).

Lotul II: Scheme combinate de tratament standard (cazuri nr. 11 -20) și fără tratament 43 standard.

RO 122437 Β1

- Tratament perfuzabil cu glucoză, Ringer lactat, Duphalyte, Aspatofort, LIV 52, Esențiale, Silimarină, ceai hepatic, vitaminoterapie cu complexul B, regim alimentar

- LIV 52, Esențiale, ceai hepatic, metoclopramid, dietă pe bază de orez cu legume, glucoza, vitamia C, Lipovit

- Furosemid, ceai de tei, hrană cu aport proteic scăzut, legume fierte, LIV52, Esențiale

- Dietă, miere, pâine neagră, LIV 52, Esențiale, complexul B, Mecopar forte

- Perfuzii cu glucoza, Ringer lactat, Duphalyte, ceai hepatic, Furosemid, Liv 52, esențiale, Vitamiana C, Coenzima Q10

- Regim de viață igienico-dietetic, dietă pe bază de orez cu legume, gel de aloe vera, vitaminoterapie cu complexul B, Liv 52, Esențiale

- Dietă, vitaminoterapie cu complexul B, C, antioxidanți, ceaiuri hepatice, Lipovitan, Ormegavit E

- Tratatament perfuzabil, ceaiuri hepatice, silimarină, spirulină, Ormegavit E

- Ceaiuri hepatice, esențiale, Liv52, regim lacto-vegetarian, complexul B, vitamina C

4) Evaluarea

Evaluarea a urmărit eficacitatea tratamentului cu compoziția revendicată

a) reducerea afecțiunilor hepatobiliare prin tratamentul profilactic al animalelor tinere cu disfuncții hepatobiliare toxicoze și prevenirea apariției de tulburări metabolice cu impact hepatic ireversibil;

b) îmbunătățirea calității vieții, prin recuperarea funcțiilor hepato-biliare la animalele tinere cu forme acute și cronice de hepatite, insuficiență hepato-biliară, scăderea numărului de recurențe și a evoluției spre ciroză sau insuficiență hepatică gravă.

Compoziția revendicată a fost eficace pentru corectarea carențelor vitaminice și minerale la animalele adulte, prin introducerea în rata zilnică, pe serii de tratament.

Pe lungă durată, tratamentul administrat a asigurat profilaxia hepatitelor cronice și ciroza hepatică, precum și siguranța produsului cu privire la:

- incidența unor reacții adverse clinice și/sau biochimice (evaluarea eficacității în funcție de criteriile standard);

- evaluarea globală a siguranței de către medicii veterinari practicieni la femelele gestante;

- evaluarea globală a siguranței tratamentului la generația animalelor tinere.

5) Analiza statistică aplicată a urmărit:

Eficacitatea tratamentului exprimată prin:

- dispariția simptomatologiei și reducerea semnelor organice pe fondul redresării activității enzimelor hepatice;

- normalizarea disfuncției hepatice;

- concentrația de GPT;

- concentrația de GGT;

- concentrația de GOT;

- concentrația de ALP;

- concentrația de bilirubină;

- efectele hepatoprotectoare (scăderea nivelului transaminazelor) și efectele de stimulare a funcțiilor renale (nivelul creatininei) au fost comparate prin statistică x².

Siguranța tratamentului apreciată prin;

- reacțiile adverse: incidența reacțiilor adverse a fost comparată în statistica x².

RO 122437 Β1

Evaluarea globală a activităților farmacologice; evaluarea globală făcută pe grupe de 1 animale martor și experimentale, care au primit diferite doze în scheme variate de administrare, a fost comparată prin testul student-t, iar evaluarea globală a siguranței 3 produsului, prin testul gradului Wilconxon.

6) Scopul experimentului 5

Scopul studiului: de a examina dacă suplimentarea zilnică cu compoziția revendicată, a animalelor cu semne clinice de afecțiuni hepatobiliare într-un experiment de perspectivă, 7 cu control martor, scade incidența afecțiunilor hepatobiliare și a formelor cronice, într-o observație de lungă durată. în plus, s-a urmărit eficacitatea compoziției comparativ sau 9 asociat cu alte scheme terapeutice de abordare a acestor afecțiuni la animalele de companie. 11

7) Tratamentul

Forma de administrație a compoziției farmaceutice a fost sub formă de comprimate, 13 având în compoziție în principal materii prime apicole (polen, propolis). Pentru forma (schema) de tratament activ s-a inițiat și un tratament standard care a inclus aceleași număr 15 de animale ca și în cazul tratamentul activ, iar greutatea și aspectul substanței active au fost echivalente cu cele ale tratamentului activ. Atât produsul pentru tratamentul activ cât și 17 pentru lotul martor au fost împachetate cantitativ pentru o cură egală de tratament (3 luni de tratament). 19

7.1. Modul de administrare

O cantitate medie de 1 cp de 1,2 g/5 kg greutate corp/zi de produs activ a fost 21 administrată oral, în 3 doze zilnice înainte sau în timpul mesei. Medicația a fost administrată după fixarea diagnosticului în baza rezultatelor examenelor clinice și paraclinice (a fost 23 aplicată în scheme terapeutice individualizate în funcție de caz până la obținerea unui răspuns pozitiv, după care schema terapeutică a fost din nou reformulată). 25

Centrul de experiment clinic (Clinica de Patologie Medicală a Facultății de Medicină Veterinară-București și a Facultății de Medicina Veterinară-Universitatea Spiru-Haret- 27 București) a primit codul de randomizare a studiului clinic - acesta desfășurându-se conform metodei dublu întâmplător până la final. 29

7.2. Terapie concomitentă

Medicațiile menționate în capitolul dedicat criteriilor de excludere (pct. 5.3.1.) nu au 31 fost permise în timpul experimentului, orice abatere constituind un criteriu de retragere a studiului. Folosirea oricărei medicații concentrate, fie că este sau nu permisă în protocol, a 33 fost raportată.

7.3. Culegerea de date și evaluarea variabilelor 35

7.4. Această evaluare înseamnă o investigație standard care se execută în momentul diagnosticării și confirmării (biologice): 37

- vârsta, greutatea, înălțimea

- istoricul medical, inclusiv istoricul medical al animalului, al bolilor suferite 39

- examinarea fizică completă

- testele complementare conform reglementărilor și normelor în vigoare 41

- alte teste complementare dacă o cer cercetătorii.

Toate aceste variabile au fost consemnate în Formularul-raport al cazulului. 43

7.5. Eficacitate

7.6. Scop major 45

Etapele (stadiile) bolii sunt raportate pe Formularul-raport al cazulului pentru compararea incidenței acesteia. Au fost evaluate stadiile bolii la animalele tinere și la adulți, 47 atât în grupa cu tratament activ, cât și în cea cu tratamentul standard.

RO 122437 Β1

7.7. Scopuri minore

Durata tratamentului, rezultatele acestuia și incidența recurentelor a fost de asemenea, consemnată în Formularul-raport al cazulului. Concentrațiile sanguine ale enzimelor hepatice GTP, GOT, GGT, ALP a bilirubinei, creatininei, ureei, glicemiei, au fost evaluate și consemnate înainte de aplicarea terapiei, pe parcursul acesteia și la finalul seriilor de tratamente aplicate la obținerea rezultatelor. Ele au fost corelate cu simptomatologia clinică și rezultatele examenelor radiologice.

Aceste date brute, obținute prin studierea scopurilor minore în locul tratamentului activ și cel cu tratamentul standard, au stat la baza comparației statistce.

7.8. Variabilele de siguranță au inclus:

- Incidența reacțiilor adverse clinice și biochimice (evaluarea toxicității)

- Estimarea globală de către clinician a variabilelor de siguranță la subiecții tratați după un scor în trei trepte: bună, satisfăcătoare, proastă.

7.9. Retragerea subiecților din experiment

La sfârșitul experimentului s-a efectuat un studiu asupra retragerilor permanente din experiment.

Retragerile au fost cauzate de diferite motive:

- aparținătorul animalului nu dorește să continue colaborarea la studiu;

- apariția unei reacții adverse care impune retragerea animalului din experiment

- nerespectarea prescripției date de clinician;

- neprezentarea la controlul periodic pentru vârste și pentru vizite periodice.

Orice motiv de excludere din experiment a fost raportat în Formularul-raport al fiecărui caz.

Dacă subiectul a beneficiat de medicație de experimentare cel puțin un ciclu de tratament, acesta a fost inclus într-o evaluare de siguranță minimă.

7.10. Reacții adverse în cazului unei reacții adverse serioase, se procedează la oprirea medicației și comunicarea reacției medicului veterinar responsabil cu experimentul. în acest scop s-a completat o fișă specifică pentru reacții adverse, atașată. Formularul-raport al cazulului se trimite în 25 h la medicul veterinar care coordonează activitatea din experiment.

7.11. Cursul experimentului

După verificarea criteriilor de includere și excludere legate de alegerea subiecților pentru experiment, clinicianul trebuie să comunice aparținătorului (proprietarului) scopul asupra experimentului și se va cere consimțământul de includere în studiu a animalului.

Perioada de includere formulată a fost de 12 luni de la începerea experimentului pentru a permite o perioadă suficientă de timp de urmărire a ultimului subiect inclus în studiu.

Studiul clinic a fost efectuat în cadrul Clinicii Medicale a Facultății de Medicină

I

Veterinară (USAMV-București) în colaborare cu Laboratorul Clinic și Compartimentul de Radiologie și Imagistică din structura acesteia.

Prima etapă a studiului s-a derulat pe parcursul a 3 luni, iar a doua etapă a durat 9 luni, fiind aplicate serii de tratamente de 3 luni. Au fost selecționate și incluse în loturile de lucru 20 animale cu vârste între 2-10 ani, la care la prima vizită la clinică s-au observat semne clinice, iar la anamneză, existența unor tulburări ale metabolismului proteic, a enzimelor hepatice și dezvoltarea unor forme de hepatite.

Studiul clinic al afecțiunilor hepatobiliare a fost precizat după corelarea datelor de anamneză, cu rezultatele biochimice și imaginea ecografică (semne incipiente sau severe de hepatită).

Claims (8)

>

1. Produsele și derivatele apicole din compoziția apifitoterapeutică sunt eficace pentru tratamentul multor afecțiuni hepatice, dacă acestea nu sunt în stadiul final, iar sitemul imunitar al organismului este în parametrii normali de funcționare.

a. polenul de albine care conține toți aminoacizii esențiali și numeroase vitamine acționează puternic regenerativ;

b. propolisul are un conținut ridicat în bioflavone, minerale care acționează imunostimulatorîn cazul hepatitelor cu origine virală, având de asemenea rol antiinfla- mator;

co ι-~ o>

cm

RO 122437 Β1

c. vitaminele A+E+C și Se acționează ca antioxidanți, protejând celula hepatică. 1

2. Efectele compoziției revendicate asupra ficatului nu se datorează în exclusivitate acțiunii sale antioxidante; acțiunea hepatoprotectoare potențială poate fi explicată și printr-o 3 scădere a nivelului glucozei sanguine și o creștere a nivelului glicogenului.

3. Transaminazele (GOT și GPT) cele mai comune enzime verificate în analizele de 5 laborator, prezintă niveluri variabile, creșteri și descreșteri, ceea ce reflectă fie o inhibare, fie o activare a activității lor la nivelul țesutului hepatic. O altă posibilă explicație poate fi și 7 modificarea permeabilității membranelor celulare ce favorizează intrarea sau eliberarea acestora din celule, concomitent cu protecția membranei celulare hepatoprotectoare prin 9 antioxidanți și cu activarea detoxifierii.

4. Fosforilarea hepatică prezintă, de asemenea, niveluri variabile de activitate la 11 diferite intervale de timp: creșteri la intervale de timp de 10, 30 și 60 de zile și scăderi la intervalul de 20 și respectiv 120 de zile. Flavonoizii intră în combinație cu procesul metabolic 13 al adrenalinei, acțiune ce este sinergică cu cea a acidului ascorbic (vitamina C). Flavonoizii pot fi priviți ca factori de economisire și protecție pentru adrenalină cu rol antioxidant și 15 hepatoprotector.

5. Glucozo-6-fosfataza este o enzimă esențială, dar nu specifică pentru 17 gluconeogeneză. Activitatea acestei enzime reflectă capacitatea țesutului hepatic de a sintetiza glucoza. Steatoza hepatică este rezultatul acumulării de acizi grași la nivelul 19 țesutului hepatic ca sursă de energie pentru hepatocite. O potențială cauză este eliberarea de catecholamine care, prin lipoliză periferică, generează producerea de acizi grași ce sunt 21 direcționați spre ficat pentru sinteza lipidelor.

6. Avantajele folosirii subproduselor apicole în asociere cu rostopasca în compoziția 23 revendicată, pentru tratamentul hepatopatiilor, comparativ cu medicamentele de sinteză, sunt următoarele: 25

- ajută și stimulează celulele sănătoase din întreg organismul (fișele lotului experimental); 27

- au un grad înalt de absorbție la nivelul tubului digestiv (energia digestivă de absorbție este redusă), multe din substanțele active pot fi absorbite direct prin mucoasa 29 bucală);

- asigură hrănirea și regenerarea funcțională a celulelor hepatice sănătoase, acestea 31 beneficiind și de un tratament de „refacere metabolică, în timp ce hepatocitele nefuncționale sunt inhibate (fișele lotului experimental, comparativ cu fișele lotului martor). 33

7. Un posibil tratament cu subprodusele apicole în afecțiunile hepatobiliare poate fi următorul: 1 comprimat din compoziția revendicată x 3 ori/zi, asociat cu lichide. 35

8. Rezultatele studiului comparativ dintre lotul II (Martor) tratat după scheme standardizate, incluzând produse hepatoprotectoare și hepatoreconstructive din gama 37 produselor farmaceutice umane și lotul I experimental tratat cu compoziția revendicată au pus în evidență următoarele aspecte: 39

- compoziția revendicată reunește principii active variate, ce susțin procesul de regenerare hepatică prin diminuarea inflamației, normalizarea metabolismului, ceea ce 41 permite folosirea lui în schemă unică, alături de regimul igienico-alimentar, și eliminarea unor scheme combinate (evoluția GOT, GPT, GGT, fosfataza alcalină, glucoză, colesterol, 43 albumine, bilirubină);

- realizează o bună protecție pentru celula hepatică, asigurând neutralizarea 45 radicalilor liberi și detoxifierea ficatului; acționează eficient în tratamentul icterului, steatozei, fiind deopotrivă lipotrop, hepatotrop și hepatoprotector (bilirubină, GGT, ALP, colesterol, 47 glucoza);

RO 122437 Β1

- acționează direct asupra sintezei hepatice, inhibând procesele inflamatorii, fibroza și citoliza hepatocitelor, a echipamentului enzimatic (GOT, GGT, GPT), a fosfatazei alcaline (ALP), cu normalizarea Ca, P, Mg, ureei.

ANEXAI

LOTUL EXPERIMENTAL FIȘA OBSERVAȚIE NR. 1

Specia Câine

Rasa DOBERMAN Sexul: mascul Vârsta: 7 ani

Anameza:

- inapetență

- emaciere, ascită, polidipsie, melenă, vomă

- ascită moderată ecografic

- hepatomegalie cu aspect hipprecogen la nivelul parenchimului

- ectazia canalelor biliare

- ascită moderată Diagnostic: ciroză hepatică

Tratamente - Puncție evacuatoare a lichidului de ascită, Furosemid, ceai de tei (diretic), regim igienico-alimentat cu aport proteic scăzut, suplimentare cu Zn;HEPRO-VIT 1 CP/5 KG X 3 ORI/ZI CONTINUU TIMP DE 90 ZILE

Evoluția cazului sub tratament

Data intrării animalului în experiment: IAN. 2005

Dara ieșirii animalului din experiment: APR. 2006

Parametrul determinat Determinare inițială Determinare finală GOT (UI/1) 102 52 GPT(UM) 62 41 GGT(UI/1) 7,2 5,8 Fosfataza alcalină (UI/1) 260 159 Bilirubina (mg/dl) 0,2 0,8 Colesterol total (mg/dl) 254 160 Uree (mg/dl) 70 50 Creatinina (mg/dl) 1,3 0,9 Glicemia (mg/dl) 198 109 Proteinele totale (mg/dl) 8,4 7,9 Albuminele (mg/dl) 2,7 3,0 Calciu (mg/dl) 6,8 8,8 Magneziu (mg/dl) 1,2 1,8 Fosfor (mg/dl) 2,2 3,6

Alte observații: evoluția sub tratament a fost pozitivă. S-a remarcat faptul că nu s-a mai instalat ascita. Semnele clinice s-au ameliorat, animalul a recăpătat pofta de mâncare, iar valorile constantelor sanguine s-a modificat simțitor.

RO 122437 Β1

ANEXA 2

LOTUL MARTOR FIȘA OBSERVAȚIE NR. 11

Specia

Câine

Rasa: OGAR AFGAN Sexul: mascul Vârsta: 2 ani

ANAMNEZĂ: apatie, somnolență, preferă decubitus

- mucoase: palid-galbene

- stare generală: proastă, anorexie, slăbiciune, vomă

- fecale decolorate, tendință la constipație

EXAMEN CLINIC

- facies trist 11

- piele cu elasticitate redusă

- mucoasele aparente icterice (galben pal) 13

- temperatura corporală 39,8 °C

- frecventa cardiacă 75/min 15

I

- frecvența respiratorie 20/min

- abdomen sensibil la palparea în ana hepatică 17

- mărirea anei hepatice

ECOGRAFIE se observă hepatomegalie, conturul caudo-ventral a ficatului fiind 19 rotunjit și întinzându-se mult sub stomac; de asemenea, aspect hiperecogen al parenchimului 21

PARACLINIC se constată: hiperbilirubinemie

- activitate crescută transaminaze (GOT, GPT, GGT) 23

- hipoalbuminemie

- activitate crescută ALP 25

- prezența bilirubinei și a urobilinogenului în urină

DIAGNOSTIC PREZUMTIV: hepatită acută 27

TRATAMENT:

Igienico-dietetic: 29

- hrană cu aport proteic și lipidic redus, bogată în vitamine și minerale (suplimentare de zinc, cu reducerea aportului de Na) 31

Medicamentos:

- în perfuzie, glucoza soluție 5% 0,5 mg/kg, Ringer lactat, Duphalyte 50 ml/5 kg 33

- Esențiale 1 tb/zi

- Amoxicilină 250 mg în doză de 25 mg/kg/zi, de 2 on/zi 35

- Vitamina K, intramuscular

- Vitamina C în doze mari 37

Evoluția cazulului sub tratament 39

Stare de sănătate îmbunătățită

Data intrării animalului în exeperiment: iunie 2005 41

Data ieșirii animalului din experiment: decembrie 2005

RO 122437 Β1

Parametrul determinat Determinare inițială Determinare finală GOT (UI/1) 178 54 GPT0JI/1) 165 49 GGT(UI/1) 11 7,2 Fosfataza alcalină (UI/1) 238 164 Bilirubină (mg/dl) 2,72 0,9 Colesterol total (mg/dl) 210 172 Uree (mg/dl) 48 32 Creatinină (mg/dl) 0,9 0,7 Glicemia (mg/dl) 90 90 Proteinele totale (mg/dl) 6,8 6,8 Albuminele (mg/dl) 2 3,2 Calciu (mg/dl) 7,8 9,2 Magneziu (mg/dl) 1,6 2,6 Fosfor (mg/dl) 3,9 4,8

Revendicare

Compoziție apifitoterapeutică de uz veterinar, pentru tratamentul afecțiunilor hepatobiliare, caracterizată prin aceea că, conține 20...65% părți polen puvis, 5...20% părți propolis, 0,5%...6% părți vitamina E, 0,01...1,5% părți vitamina A, 1...3% părți complex Se + Zn, 0,5...1,5% părți Tinctura Chelidonii, 4...6% părți excipienți acceptabili farmaceutic, părțile fiind exprimate în greutate.