RO110828B - Medii pentru culturi de microorganisme - Google Patents
Medii pentru culturi de microorganisme Download PDFInfo
- Publication number
- RO110828B RO110828B RO9300629A RO9300629A RO110828B RO 110828 B RO110828 B RO 110828B RO 9300629 A RO9300629 A RO 9300629A RO 9300629 A RO9300629 A RO 9300629A RO 110828 B RO110828 B RO 110828B
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- medium
- preparation
- extract
- collagen
- environment
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 23
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 21
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 23
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 10
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 12
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 12
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 8
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 8
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 8
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 8
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 8
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 7
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 7
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 6
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000589902 Leptospira Species 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 241000589562 Brucella Species 0.000 description 2
- 241000589567 Brucella abortus Species 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 229940056450 brucella abortus Drugs 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 241000589568 Brucella ovis Species 0.000 description 1
- 244000307700 Fragaria vesca Species 0.000 description 1
- 235000016623 Fragaria vesca Nutrition 0.000 description 1
- 235000011363 Fragaria x ananassa Nutrition 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 241000204022 Mycoplasma gallisepticum Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000606860 Pasteurella Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000012502 diagnostic product Substances 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- -1 peptonate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Invenția se referă la medii pentru
culturi de microorganisme, care cuprind o sursă
de azot, constituită din extract de came până la
50 % și preparat colagenîc, până la 100 % sau
ser normal 1 ... 2 % și preparat colagenic 10
20 % restul componentelor fiind cele uzuale.
Revendicări: 1
Description
Prezenta invenție se referă la noi medii pentru culturi de microorganisme, utilizate în cercetare la obținerea serurilor de diagnostic sau pentru 5 prepararea de vaccinuri.
Se cunosc mai multe medii de cultură a germenilor bacterieni (grupul Brucella, Leptospira, Mycobacterium etc) în a căror compoziție se includ în 10 proporții variate fie extractul de carne, fie serurile normale (de cal, iepure sau bou), fie L-amino-acizi.
Dezavantajele acestor medii constau în aceea că germenii obținuți pot 15 prezenta forme R aglutinabile și nu se pot utiliza la prepararea antigenilor. Utilizarea serurilor normale are dezavantajul existenței unui anumit grad de citotoxicitate, depinzând de 20 proveniența lor. Toate componentele amintite sunt greu accesibile și costisitoare.
Problema pe care o rezolvă invenția este înlocuirea parțială a 25 extractului de carne, a serurilor normale de diferite proveniențe și a L-amino acizilor din componența diferitelor medii folosite la cultivarea diverselor grupe de germeni și obținerea în condiții eficiente 30 a unor culturi de microorganisme.
Mediile de cultură, conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus, prin aceea că cuprind : o sursă de azot constituită din extract de carne până 35 la 50 % și preparat colagenic până la 1OO % sau ser normal 1 ... 2 % și preparat colagenic 10 ... 20 %, restul componentelor fiind cele uzuale.
Avantajele mediilor, realizate con- 40 form invenției, constau în aceea că :
- se obțin simplu, în condiții de eficiență prin reducerea parțială a cantităților unor componente, ca : extractul de carne, serul normal, Lasparagina;
- permite diminuarea riscurilor de citotoxicitate ;
- conduce la obținerea de cantități crescute de antigeni cu potențiale biologice necesare.
Se dau în continuare mai multe exemple de cultivare a unor germeni bacterieni, în medii de cultură, conform invenției.
Exemplul 1. Cultivarea germenului Brucella abortus 99, necesar la prepararea antigenului brucelic RALRFC, se face pe plăci Rouxîn mod curent folosind mediile :
| Agar | 25 % | 25 % |
| Extract mânzat | 100 I | 50 I |
| Infuzie cartof | - sau | 50 I |
| Peptona(Oxoid) | 10% | 10% |
| NaCl | 5 % | 5 % |
| Glucoza | 10% | 10% |
| Glicerina | 20% | 20% |
Rezultatele extractului de carne cu preparatul colagenic lucrându-se cu 56DO plăci sunt prezentate în tabelul 1. Cele mai bune rezultate s-au obținut prin folosirea în părți egale a celor două componente (grupa C). Este posibilă și o înlocuire în totalitate a extractului de carne, însă cantitatea de antigen se reduce cu 50 % față de grupa martor (grupa A). Rezultate bune în comparație cu martorul s-a obținut și în cazul înlocuirii a 65 ... 100 % din extract atunci când în formula mediului a fost introdusă infuzia de cartofi (grupa B).
Tabelul 1
Influența înlocuirii extractului de mânzat la cultivarea germenului Brucella.
| Grupa de plăci | Compoziți a mediului | Nr. plăci | Cantitatea totală de antigen | Cantitatea de antigen la 100 plăci | ||
| Doze | Litri | |||||
| Doze | Litri | |||||
| A | Mediul 1' | 400 | 46.600 | 10 | 11.500 | 2,5 |
| B | Mediul 2' | 800 | 165.600 | 36 | 20.700 | 4,5 |
| B | Mediul 3’ | 400 | 78.200 | 17 | 19.550 | 4,25 |
| B | Mediul 4' | 800 | 161.000 | 35 | 20.125 | 4,375 |
| C | Mediul 5' | 800 | 230.000 | 50 | 28.750 | 6,25 |
| D(martor) | Mediul 6' | 2.400 | 556.600 | 121 | 23.291 | 5,041 |
Mediul 1': Preparat colagenic 100 I.
Mediul 2': Preparat colagenic 70 I, infuzie cartofi 30 I, peptona.
Mediul 3': Preparat colagenic 45 I, infuzie cartofi 30 I, extract mânzat 25 I, 5 peptona.
Mediul 4': Preparat colagenic 35 I, infuzie cartofi 30 I, extract mânzat 35 I, peptona.
Mediul 5': Preparat colagenic 50 I, 10 extract mânzat 50 I, peptona.
Mediul 6': Extract mânzat 100 I, peptona.
în locul peptonei (Oxoidj se mai poate folosi triptoza fosfat broth(TPB4
Difco) în proporție de 1,5 %, cantitățile celorlalte ingrediente rămânând neschimbate față de formula de bază a mediului. Rezultatele obținute pe 6.535 de plăci cu mediu gelozat, glucozat, glicerinat prezentate în tabelul 2 demonstrează posibilitatea înlocuirii totale (grupa E) sau parțiale (grupa F) a extractului de carne cu preparatul pe bază de colagen. Compararea este făcută prin raportarea la cantitatea totală sau la numărul de doze de antigen față de grupa de plăci martor (grupa G).
Tabelul 2
Influența înlocuirii beef extractului la cultivarea germenului Brucella abortus 99 asupra cantității de antigen brucelic RAL-RFC.
| Grupa de plăci | Compoziția mediului | Nr.plăci | Cantitatea totală de antigen | Cantitatea de antigen la 100 plăci | ||
| Doze | Litri | Doze | Litri | |||
| E | Mediul 1 | 2.195 | 425.500 | 92,5 | 19.385 | 4,214 |
| F | Mediul 2 | 2.340 | 388.700 | 84,5 | 16.610 | 3,611 |
| G(martor) | Mediul 3 | 1.200 | 280.600 | 69 | 24.450 | 5,750 |
| G(martor) | Mediul 4 | 400 | 78.000 | 17 | 19.500 | 4,250 |
| G(martor) | Mediul 5 | 400 | 64.400 | 14 | 16.100 | 3,500 |
Mediul 1 : Preparat colagenic 100 I, 30 TPB, glucoza, glicerina, NaCl.
Mediul 2 : Preparat colagenic 50 I, beef extract 5 % -50 I, TPB, glicerina, NaCl. Mediul 3: Beef extract 5 % -100 I, TPB 15 %, glucoza, glicerina, NaCl. 35
Mediul 4 : Extract mânzat 50 I, Infuzie cartofi 50 I, TPB 15 %, glucoza, glicerina, NaCl.
Mediul 5 : Beef extract 5 % - 50 I, infuzie cartofi 50 I, TPB 15 %, glucoza, 40 glicerina, NaCl.
Germenii obținuți prin cultivarea în agar cu extract de carne, peptonat, glucozat, glicerinat au prezentat forme R (rofizate) care au aglutinat la proba cu 45 tripaflavina și care nu pot fi utilizate la prepararea antigenelor brucelice de diagnostic pentru reacția de aglutinare lentă sau pentru țesutul inelar cu lapte de vacă. 50
Germenii obținuți prin cultivarea în mediu care a conținut preparatul pe bază de colagen au prezentat forme S neaglutinabile, ceea ce a permis în final obținerea a 17.000 doze de antigen care au corespuns normelor de control.
Preparatul colagenic se prepară astfel : se dizolvă colagen pulbere cu greutatea moleculară 3 000 ... 15 000, în apă bidistilată, în raport în greutate de 5 : 87, la cald, sub agitare continuă, se precipită colagenul din soluția obținută prin adăugarea de NaCl p.a. în raport în greutate față de cantitatea inițială de colagen de 2,09 : 5, se îndepărtează partea lichidă prin sifonare, se aduce din nou în soluție precipitatul, prin adăugarea unei cantități de apă bidistilată egală cu cea inițială și agitare energică, se corectează pH-ul soluției rezultate la valoarea 6,8 ... 7 și se filtrează, peste
6 soluția filtrată se adaugă o soluție de NaCl și KCI dizolvate în apă bidistilată, se răcește la temperatura de 2O°C, se ajustează din nou pH-ul la valoarea 6.8 ...
cu soluție 1 N de HCI și se 5 condiționează fie sub formă de soluție în sticle brune sterilizate, care se autoclavează la temperatura de 12O°C, timp de 30 minute, fie sub formă de pulbere, obținută prin atomizare, în pungi 10 de plastic închise etanș și sterilizate cu radiații gamma Co60.
Exemplul 2. Cultivarea germenilor din grupul Leptospira pentru obținerea vaccinului antileptospiric se face pe 15 mediul Korthof, care are următoarea formulă clasică :
Peptona Witte 1,6 g
NaCl 2,8 g
NaHCQg 0,04 g
KCI 0,08 g
KH2P04 0,36 g
Na2HP04 1,92 g
Apă distilată 2000 I
Ser de iepure 5 %
S-a efectuat cultivarea germenilor Leptospira pomona și hios în medii în care serul normal de iepure a fost de 1 ... 2 %, iar preparatul pe bază de colagen 10 % și, respectiv, 20 %. 30 Culturile făcute în baloane Erlenmayer și în baloane de 15 I au permis realizarea unui număr de 4 pasaje de cultivare, care au condus la o dezvoltare corespunzătoare a germenilor, cu toate 35 că conținutul de ser normal al mediului a fost diminuat.
Exemplul 3. Cultivarea germenilor din grupul Mycobacterium tuberculosis se face în general în medii care conțin L-asparagina în proporție de 1 ... 2 g %. în locul L-asparaginei, mediul pe care l-am folosit a conținut glutamat de sodiu și preparatul pe bază de colagen, restul compoziției mediului în sărurile minerale, glucoza și microelementele a rămas neschimbat. Rezultatele au arătat o dezvoltare superioară a germenilor în mediul realizat conform invenției, urmărindu-se atât dezvoltarea microbacteriilor, cât și producția de tuberculo-proteinei specifice, care este principiul activ din produsul de diagnostic.
în mod asemănător ca în exemplele 1, 2 și 3 se pot cultiva și Pasteurella, Salmonella, Mycoplasma gallisepticum, Brucella ovis în medii de cultură clasice, în care se înlocuiește 20 parțial extractul de carne sau serurile normale, în vederea obținerii de vaccinuri și/sau seruri diagnoza.
Claims (2)
- Mediii pentru culturi de microorganisme, caracterizate prin aceea că, în scopul obținerii în condiții de eficiență, a unor culturi de germeni bacterieni utilizați în cercetare și la prepararea de vacinuri și seruri de diagnoză, cuprind o sursă de azot constituită din extract de carne până la 50 % și preparat colagenic până la 100 % sau ser normal 1 ...
- 2 % și preparat colagenic 10 ... 20 %, restul componentelor fiind cele uzuale.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RO9300629A RO110828B (ro) | 1993-05-05 | 1993-05-05 | Medii pentru culturi de microorganisme |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RO9300629A RO110828B (ro) | 1993-05-05 | 1993-05-05 | Medii pentru culturi de microorganisme |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO110828B true RO110828B (ro) | 1996-04-30 |
Family
ID=20099578
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RO9300629A RO110828B (ro) | 1993-05-05 | 1993-05-05 | Medii pentru culturi de microorganisme |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RO (1) | RO110828B (ro) |
-
1993
- 1993-05-05 RO RO9300629A patent/RO110828B/ro unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101999525B (zh) | 一种复合益生素饲料添加剂 | |
| CN116590184B (zh) | 一种提升免疫力的后生元制品及其制备方法和应用 | |
| CN106973794B (zh) | 一种光触媒抗菌助生长植物组织培养基及其制备方法 | |
| RU2084233C1 (ru) | Способ получения пробиотика для ветеринарии | |
| CN108690816A (zh) | 一种a群奈瑟氏脑膜炎球菌的非动物源培养基及其培养方法 | |
| US3816261A (en) | Culture medium for lertospira organisms | |
| RO110828B (ro) | Medii pentru culturi de microorganisme | |
| JP2000093162A (ja) | 有胞子乳酸菌の培養方法 | |
| US3577319A (en) | Large scale cultivation of bordetella pertussis cells for vaccine production | |
| RU2518282C1 (ru) | Питательная среда для глубинного культивирования туляремийного микроба | |
| NZ232069A (en) | Preparing concentrated bacterial cultures for direct vat inoculation of milk batches | |
| Kidder et al. | Thiamine and Tetrahymena | |
| CN103937649A (zh) | 用虫草轮枝菌和蛹虫草菌人工培制原生态虫草酒的方法 | |
| McIntire et al. | The role of certain vitamins and metallic elements in the nutrition of the crown-gall organism | |
| SU977466A1 (ru) | Полиакриламидный гель дл медико-биологических целей и способ его получени | |
| RU2216587C2 (ru) | Питательная среда для выращивания лактобактерий | |
| RU2301256C1 (ru) | Питательная среда жидкая для культивирования холерного вибриона | |
| DaMassa et al. | Growth of Mycoplasma synoviae in a medium supplemented with nicotinamide instead of B-nicotinamide adenine dinucleotide | |
| RU2100029C1 (ru) | Среда для культивирования бактерии-симбионта bacillus pulvifaciens или bacillus subtilis - продуцента пробиотика | |
| RU2214453C2 (ru) | Питательная среда для накопления сибиреязвенного микроба | |
| CN110283762A (zh) | 一株具有强力抗癌活性的链霉菌ccpm7649及其应用 | |
| RU2036233C1 (ru) | Питательная среда для выращивания первичных и перевиваемых клеток | |
| RU2086647C1 (ru) | Питательная среда для выращивания штамма strertococcus faecium стф-1/56 | |
| RU2528101C2 (ru) | Питательная среда для культивирования легионелл | |
| RU2198920C2 (ru) | Питательная среда для выращивания биомассы трепонем |