RO106512B1 - Procedeu pentru separarea și purificarea eritromicinei-bază - Google Patents

Abstract

Invenția se refera la un procedeu de izolare a eritromicinei-baza din soluțiile native rezultate din biosinteză, prin intermediul lactatului de eritromicina, neutralizarea acestuia in mediu organic apos sau anhidru si separarea eritromicinei, la cald sau la rece, in funcție de solventul in care s-a realizat scindarea lactatului de eritromicina in eritromicina baza.

Description

Prezenta invenție se referă la un procedeu de separare și purificare a eritromicinei - bază din lactatul de eritromicină - produs intermediar sub care se poate izola eritromicina din lichidul de cultură rezultat în urma procesului de biosinteză a eritromicinei.

Se cunosc procedee de separare a eritromicinei, care constau în izolarea acesteia din soluțiile native, prin extracții succesive în solvenți organici nemiscibili cu apa, din care, în final, eritromicina se separă ca bază liberă prin procedee combinate, care utilizează procese de răcire a soluțiilor eritromicinei și nesolvenți, sau prin transformare în alte săruri insolubile în solventul în care s-a făcut extracția.

Aceste procedee prezintă dezavantajul că implică multe etape de lucru, consumuri de solvenți mari și cheltuieli energetice ridicate. Pe de altă parte, produsul se obține parțial impurificat

Procedeul conform invenției înlătură aceste dezavantaje, prin aceea că eritromicina se izolează din soluția nativă obținută în urma filtrării lichidului de cultură, prin extracție într-un solvent nemiscibil cu apă, de preferință acetat de butii, din care se izolează sub forma unei sări insolubile cu acidul lactic, în etapa finală lactatul de eritromicină fiind transformat în eritromicină bază.

Un alt avantaj al procedeului conform invenției constă în aceea că utilizează solvenți care se pot recupera și recirculă în proces, asigurând economicitatea ridicată a procesului propus în invenție.

In procedeul conform invenției se obține lactatul de eritromicină direct în solventul utilizat în extracția eritromicinei din soluție nativă, după care acesta se separă si se transformă în eritromicină bază, prin alcalinizare cu o bază organică sau anorganică în mediu anhidru sau apos.

Drepl agenți de alcalinizare se pot folosi irielilamina. amoniacul sau hidroxidul de sodiu, iar ca solvenți se pot utiliza clorură dc metilen sau cloroformul, de preferință clorură de metilen.

In cazul în care reacția de transformare a lactatului de eritromicină în eritromicină bază are loc în mediu organic anhidru, se folosește trietilamina, sarea de trietilamoniu a acidului lactic rezultată prin reacția lactatului cu trietilamina, se îndepărtează din solvent prin extracție în apă.

Izolarea eritromicinei bază rezultată din clorură de metilen se face după purificarea acesteia prin decolorare cu cărbune activ, prin răcire la -15 ... -20°C, de preferință -18°C, urmată de filtrare.

Se dau în continuare trei exemple, care ilustrează procedeul conform invenției.

Exemplul 1. Obținerea lactatului de eritromicină: 2000 ml soluție de eritromicină în acetat de butii cu activitatea de 19950 U/ml, se anhidrizează cu 100 g Na2SO4 anhidru, se decolorează cu 10 g cărbune activ, se agită 15 min și se filtrează.

Soluția obținută se acidulează cu soluție de acid lactic în acetat de butii 37% (g/v) până la pH = 5,2. Se agită la temperatura camerei 1,5 h, apoi 0,5 h la -5 ... 0°C. Cristalele obținute se separă prin filtrare, se spală pe filtru cu 40 ml eter dc petrol și se usucă la presiune redusă, timp de 3 li. la temperatura de 45°C.

Rezultă 43,4 g lactat de eritromicină cu activitate de 800 U/mg. Randament 87,01%.

Transformarea lactatului de eritromicină în eritromicină bază: 10 g lactat dc eritromicină. cu activitate de 800 U/mg. se dizolvă în 400 ml apă rece (2 ... 8°C). Soluția obținută se filtrează la presiune redusă de eventualele impurități, după care se tratează cu amoniac 25% până la pil = 8,5 ... 9,0. se încălzește la 50 ... 55°Cși se agită la această temperatură 2 h. Cristalele obținute se filtrează Ia cald și se spală pe filtrul cu 10 ml apă cu temperatura de 50°C.

După uscare la presiune redusă timp de 3 h. la temperatura de 45°C. se obțin

7,7 g eritromicină-bază cu activitate de 920 U/mg și rotație specifică la /Tj = =- 74,8°. Randament 88,5%.

Exemplul 2. Se lucrează ca în exemplul 1, cu deosebire că, în locul amonia- 5 cului 25%, pentru corecția de pH se folosește soluție NaOH 10%. Se obțin 7,68 g eritromicină-bază cu activitaț^ de 920 U/mg și rotație specifică /« /D~ = =- 73,5°. Randament 88,3%. 10

Exemplul 3. 10 g lactat de eritromicină, cu activitate de 800 U/mg, se suspendă în 130 ml clorură de metilen și se adaugă trietilamină până la pH = 8,5 ... 9,0, când are loc solvirea completă. 15 Soluția diclormetanică obținută se supune extracției lactatului de trietilamoniu în 65 ml apă.

Faza organică se anhidrizează cu 4 g Na2SO4 anhidru și se decolorează cu 20 0,4 g cărbune activ. Se agită 15 min și se filtrează. Soluția obținută se răcește la -15 ... -18°C, se menține sub agitare la această temperatură 4 h, apoi erilromicina-bază cristalizată se filtrează pe un 25 filtru Nuce. prevăzut cu răcire, la -15 ... -20°Cși se spală pe filtru cu 5 ml clorură de metilen răcită la -15 ... -18^ϋΟ.

După uscare la presiune redusă, timp timp de 3 h la 45°C. se obțin 6.4 g eritromicină-bază cu activitate de 930 U/mg și rotație specifică / a TD' — =-75,6°C. Randament 74,4%.

Claims (1)

1. Procedeu de separare și purificare a eritromicinei - bază din soluția sa în acetat de butii, obținută în urma filtrării lichidului de biosinteză și a extracției cu acetat de butii, caracterizat prin aceea că soluția se acidulează cu acid lactic în acetat de butii 37% (g/V) până la pH = 5,2, se agită 1,5 h la 20 ... 25°C și 0,5 h la -5 ... 0°C, când se formează cristale de lactat de eritromicină, care se filtrează, se spală cu eter de petrol și se usucă 3 h la presiune redusă și 45°C. după care lactatul de eritromicină se alcalinizează în mediu anhidru sau apos cu NH? 25%. NaOH J()%r sau clorură de metilen și trietilamină până la un pH = 8.5 ... 9,0. urmată de filtrare și uscare 3 h la presiune redusă și 45°C, când rezultă eritromicină - bază cu activitate de 920 U/mg.