PT94159A - Processo para a preparacao de composto heterociclicos contendo amino e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

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V

f Vf» k»

Descrição referente ã patente de invenção de WARNER-LAMBERT COMPANY, norte-americana, industrial e comercial, estabelecida em 201 Tabor Road, Morris Plains, New Jersey 07950, Estados Unidos da América, (inventores: Cleo Connolly, William Chester Patt, Annette Marian Doherty, Ila Sircar e Harriet Wall Hamilton, residentes nos E.U.A.), para "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE COMPOSTOS HETERQCÍCLICOS CONTENDO AMINO E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTEM"

DESCRIÇÃO

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A renina é uma enzima natural que se liberta no sangue a partir do rim. Ela cliva o seu substrato natural, an giotensinogénio, libertando um decapéptido, angiotensina I. Esta é por sua vez clivada por conversão da enzima no pulmão, rim e noutros tecidos para um octapéptido, angiotensina II. A angio tensina II aumenta a pressão sanguínea quer directamente por provocar uma constricção arterial, quer indirectamente por estimular a libertação da hormona que retém o sódio a aldosterona a partir da glândula adrenal provocando um aumento no volume do ! fluido extracelular. Tem-se pensado que os inibidores da renina 1

são agentes para o controlo da hipertensão, deficiência cardíaca congestiva e hiperaldosteronismo. 0 Pedido de Patente Europeia com o Número EP--229667 trata os inibidores da renina, peptidil-amino-dióis com a fórmula:

I na qual A é um substituinte; W é C=0 ou CHOH; U é CE^ ou é alquilo inferior, cicloalquilmetilo, benzilo, 4-metoxiben-zilo, halobenzilo, (l-naftil)metilo, (2-naftil)metilo, (4-imi-dazoil)metilo, i3L,^(-dimetilbenzilo, 1-benziloxietilo, fenetilo, fenoxi, tiofenoxi ou anilino; é alquilo inferior, [(alcoxi)--alcoxi]alquilo, tioalcoxi)alquilo, alcenilo inferior, benzilo ou um anel heterocíclico substituído com metilo; é alquilo inferior, cicloalquilmetilo ou benzilo; R,_ é vinilo, formilo, hidroximetilo ou hidrogénio; R^ é hidrogénio ou alquilo inferior; Rg e Rg são independentemente escolhidos de entre OH e N^; e Rg é hidrogénio, alquilo inferior, vinilo ou arilalquilo. 0 Pedido Europeu 186-977 trata certos pépti-dos inibidores da renina com a fórmula f4 R2 0 R3 0 CHo0H o ! I II I II I 2 II 5

R -(0) -CH-C-NH-CH-C-NH-CH-CH-CH„-C-R m 2 , i 3 na qual meOouleR aR sao vanos grupos orgânicos. 0 va- 3 lor de R engloba muitos grupos.

Estruturalmente as posições dos vários amino-ãcidos (aminoácidos mímicos) dos compostos da presente invenção • podem ser designados com referência ao octapéptido que é a se- 2

quência mínima de angiotensinogénio clivado pela renina, nomeadamente : j ligação séssil HIS6- PRO7- PHE8— HIS9- LEU10- VAL11- VAL12- TYR13

P.

I

Indica-se a seguir uma designação para os com postos desta invenção. 0 valor de CAD é considerado como ocupan do as posições P^-P^'. Por exemplo

A presente invenção refere-se a novos compostos que inibem a renina. Também se refere a composições farmacêuticas que contêm estes novos péptidos, que servem para o tra tamento da hipertensão associada com a renina, deficiência cardíaca congestiva, glaucoma e hiperaldosteronismo, bem como a utilização dos compostos como ferramentas de diagnóstico, e a processos para preparar estes compostos.

Dado que a HIV protease, â semelhança da reti na, é uma aspartil protease, estes compostos podem também ser utilizados para tratar doenças provocadas pelos retrovírus incluindo HTLV-I e -III.

RESUMO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a novos compos- • tos com a fórmula 3 V *^1 ι ·»~:.^Ή:ν;πϊΚικϊβ *

(I) e aos seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis em que A, B, C, D, E, η, X e Y são como a seguir definidos. A invenção também inclui composições farmacêu ticas que compreendem uma quantidade eficaz do composto acima citado com a fórmula I em mistura com um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável e refere ainda um método para o tra tamento da hipertensão associada com a renina num paciente que sofra dessa doença e que compreende administrar-se ao referido paciente a composição farmacêutica acima referida numa forma de unidade de dosagem. A invenção inclui ainda uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um composto com a fórmula I tal como acima referida em mistura com um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável, e refere um método para o tratamento do hiperaldosteronismo num paciente que sofra dessa doença que compreende administrar-se ao referido paciente a composição farmacêutica acima referida numa forma de unidade de dosagem. A invenção inclui ainda uma invenção farmacêu tica que compreende uma quantidade eficaz de um composto com a fórmula I em mistura com um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável, e refere um método para o tratamento da deficiência cardíaca congestiva num paciente que sofra dessa doença que compreende administrar-se ao referido paciente a composição farmacêutica acima referida numa forma de unidade de dosagem. A presente invenção também inclui a utiliza- 4

\ ção de compostos com a fórmula I para tratar doenças provocadas por retrovírus. A presente invenção também inclui a utilização de compostos com a fórmula I tal como acima definida como meio de diagnóstico para a identificação de causas da hipertensão devidas a um excesso de renina. A presente invenção inclui ainda uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz para o tratamento do glaucoma, incorporando-se um composto com a fórmu la I em mistura com um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável e refere um método para o tratamento do glaucoma num paciente que sofra desta doença que compreende administrar-se ao referido paciente a composição farmacêutica acima referida numa forma de unidade de dosagem. A invenção inclui ainda processos para prepa-rae os compostos com a fórmula I acima referida.

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA A tabela seguinte proporciona um glossário dos termos utilizados na descrição da invenção.

TABELA I

Designação abreviada GLU ASP PHE TYR(OMe) TYR HIS . ATG * ATM

Amino Ãcido - 5 - \

CT.tnrotmnBBtf1

ATE AHM AHY CAD 4-(21-Amino-41-imidazolil)etilgli-cina 3- (2'-Amino-4'-imidazolil)alanina 4- (2'-Amino-41-imidazolil)etilgli-cina

Grupo C-Terminal S RS x y s * * * —HNCHCH(OH)CH(OH)CH2CH(CH3)2

CST 0

0

STA —NHCHCH(OH)CH9C-* λ *

\/ S

CDH ^ (R/S) -HNCHCH(OH)CH2CH(OH)C2H5 * *

—HNCHCOCF C— 0

FCO 6

FCS

2 C- RS)

Z BOC AC CHO TROC BBSP OBZL MPS SMO DMSA SPI AEM o

Grupos Miscelâneos

Benziloxicarbonilo

Terc-butiloxicarbonilo

Acetilo

Formilo ci3cch2oco-

Grupos Miscelâneos 2-Benzil-3-(t-butilsulfonil) pro-pionilo Éster de benzilo /“\ «

MeN N-S- \ / " 0 o

II N-S-

II 0 0

Me„NS-/, || 0

BHEAEA

HN

/\^0H N

Solventes e Reagentes

Et20 CHC13 DMF DMSO HOBT DCC HOAc Et3N THF CH2C12 MeOH EtOAC DMAP Éter dietílico

Clorofórmio N,N-Dimetilformamida

Sulfóxido de dimetilo

Hidroxibenzotriazole N,N'-Diciclohexilcarbodiimida Ácido acético

Trietilamina

Tetrahidro furano

Diclorometano

Metanol

Acetato de etilo 4-(N,N-Dimetilamino)piridina

Os compostos da presente invenção são representados pela fórmula

I ou um seu sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável/ em que A é H, BOC/ BBSP, Zf

R Rí 0

N-S ou 8 0

ο em que R e são cada um independentemente hidrogénio ou alquilo inferior linear ou ramificado que é não substituido ou que é substituido por um ou dois grupos hidroxi, um ou /' ‘ Ί. dois grupos amino ou Q N em que este anel é um anel sa- \ / turado contendo 2 a 5 átomos de carbono, Q i CH^r °r S ou NR; B está ausente, PHE, TYR ou TYR(OMe) com a condição de que quando A for BBSP, B estar ausente; C é CST, FCS, FCO, CAD ou STA; D está ausente, OH, NR2R3 em R2 e R3 são ambos independentemen te hidrogénio ou uma cadeia de alquilo inferior linear ou ra mificada ou quando R2 é hidrogénio R3 pode também ser -CH9) X em que m é um inteiro de zero a oito e X é -OH, / ' Q N e como definido acima, OR^, NR^R^ em que R^, R^ e R, são cada um hidrogénio, uma cadeia de alquilo inferior linear ou ramificada, substituída ou não substituída por um ou dois grupos hidroxi ou amino com a condição de que quando C for CAD, D estar ausente; E é hidrogénio, Z, BOC, ou alcanoilo inferior, n é um inteiro de 0 a 2; X e Y são cada um independentemente O, S, N ou NH e pelo menos um de X e Y deve ser N; X e Y não podem ser ambos N.

Os compostos preferidos da presente invenção são os que possuem a fórmula I em que p 0 0 R\ II /'"\ 1 A é BOC, BBSP, N- -s- ou Q N-S-; / || ^ / II R1 0 0 B está ausente, PHE, ou TYR(OMe), 9 <1

C é CST, FCO, FCS ou CAD; D está ausente ou

N H

N H

N

"OH com a condição de que quando C for CAD D estar ausente? E é hidrogénio ou alquilo inferior; e n é um.

Oa compostos mais preferidos da presente invenção são aqueles que possuem a fórmula I na qual

Me o \ ii A é N - S - ou κ 0 (ΓΛ-

Me S -il 0 B é PHE ou TYR(OMe) São ainda compostos mais preferidos os que possuem a fórmula I em que 0 z~™\ 11 A é 0 H-S- , \_/ " 0 B e PHE, C é CST OU CAD, E é hidrogénio.

Os compostos particularmente preferidos que estão incluídos dentro do âmbito da invenção incluem os seguintes compostos, os seus isómeros e os seus sais de adição de ãci do farmaceuticamente aceitáveis: SPI-PHE-ATM(Z)-CAD, MPS-PHE-ATM(Z)-CAD, , DMSA-PHE-ATM(Z)-CAD, * BBSP-ATM(Z)-CAD, - 10 - BBSP-ATM(AC)-CAD, BBSP-ATM-CST-AEM, BBSP-ATM-CST-BHEAEA, SPI-TYR(OME)-ATM(Z)-CAD, SPI-TYR(OME)-ATM(CHO)-CAD, BB S P-ATM-FCO-AEM, DMSA-TYR(OME)-ATM-FCS-AEM, BOC-PHE-ATM-CAD, BOC-PHE-ATM-CS T-AEM, BOC-PHE-ATM-CST-BHEAEA, BBSP-ATG-VAD, DMSA-PHE-ATG-CST-AEM, SPI-TYR(OME)-ATG-CAD, SPI-PHE-ATG-CAD, SMO-TYR(OME)-ATG-CST-AEM, SMO-PHE-ATE-CAD, SMO-TYR(OME)-ATE-CAD, SMO-PHE-AHM-CAD, SMO-PHE-AHM-CST-BHEAEA, DMSA-TYR(OME)-AHY-CST-AEM, SMO-PHE-ATM-FCS-AEM, SMO-PHE-ATM-FCO-AEM, S PI-PHE-ATM-CAD, BOC-ATG(Z)-FCS-AEM, ATG(Z)-FCS-AEM, SMO-PHE-ATG(Z)-FCS-AEM, SMO-PHE-ATG-FCS-AEM, SMO-PHE-ATM(TROC)-FCS-OET, SMO-PHE-ATM(TROC)-FCO-OET, SMO-PHE-ATM-FCO-OET, e SMO-PHE-ATG(Z)-FCS-AEM.

Os compostos mais preferidos são SMO-PHE-ATM(Z)-CAD, SMO-PHE-(S)ATM-CAD (Isómero A), SMO-PHE-ATM-CST-AEM, 11

\ SMO-TYR (ΟΜΕ) -ATM, CST. ΑΕΜ, SMO-PHE-ATM-CAD (Isõmero Β), SMO-TYR(ΟΜΕ)-ATM-CADf SMO-PHE-ATG-CAD, BOC-PHE-ATG-STA-MBA, e SMO-PHE-ATM-CST-BHEAEA. na presente invenção pode ter um substi-tuinte (E): E = (Z), (AC) ou (CHO), representado pela seguinte abreviatura; ATM(E). O substituinte está no azoto exocíclico co mo se mostra por 0

Os compostos incluem solvatos e hidratos e os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis dos compos tos básicos com a fórmula I acima apresentada. 0 termo sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável pretende significar um sal de adição de ácido não-tóxico obtido quer com ácidos inorgânicos quer com ácidos orgânicos, tais como, por exemplo, ácido clorídrico, bromídrico, iodídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, cítrico, oxãlico, ma-lónico, salicólico, málico, benzoico, glucõnico, fumárico, suc-cínico, ascórbico, maleico, tartãrico, metanossulfónico, e produtos semelhantes. Os sais são preparados fazendo reagir a forma de base livre com uma quantidade suficiente do ácido pretendido para se obter um sal de modo convencional. As formas de ba se livre podem ser regeneradas tratando a forma salina com uma base.

Os compostos da presente invenção possuem um ou mais centros quirais e cada centro pode existir na configuração R(D) ou S(L). A presente invenção inclui todas as formas 12

de enantiómeros, epímeros e tautómeros bem como as suas misturas adequadas. 0 isõmero S na posição é o mais preferido.

Alguns dos compostos novos acima referidos po dem ser preparados de acordo com procedimentos bem conhecidos para a preparação de compostos a partir dos seus aminoácidos constituintes. Outros compostos novos da presente invenção são preparados por um processo em fases ou por um procedimento de acoplamento por fragmentação dependendo do produto final particular pretendido.

Um processo para preparar um composto com a fórmula I compreende: a) fazer-se reagir um amino ácido N-protector com uma amina de sejada para produzir a amida correspondente, b) desproteger-se o grupo N-protector da referida amida e acoplar-se com um ácido pretendido para se obter um dipeptidi-lo do tipo amida, e c) desprotegerem-se ainda as funções de cadeia lateral da amida para se obter o composto pretendido com a fórmula I e converter-se, se desejado, num seu sal farmaceuticamente aceitável.

Um processo alternativo para preparar um composto com a fórmula I em que C é FCS ou FCO compreende: a) fazer-se reagir um éster de amino ácido com uma protecção TROC na cadeia lateral com aminoácido N-protegido para produzir um éster dipéptido que é em seguida hidrolizado para o ácido de dipéptido correspondente. b) acoplar-se o produto obtido na fase a) com uma amina escolhida no grupo consistindo em FCF ou FCO para se obter o composto protegido com TROC da Reivindicação 1, e c) desproteger-se ainda, se desejado, para se obter um composto da Reivindicação 1 e converter-se, se desejado, num seu 13 r * Λ . sal farmaceuticamente aceitável.

Este esquema é ilustrado no Esquema II seguin te.

Os seguintes esquemas ilustram novos processos para a preparação de certos compostos da presente invenção.

De acordo com o Esquema I seguinte, faz-se re agir a <X,-BOC, (2 1 - (Z)-amino-4'-tiazolil) alamina (1) com CST-AEM (2) para se obter uma amida (3). A reacção tem lugar num solven te inerte como por exemplo CH2C12 ou DMF com HOBT DCC a temperaturas entre -20 e 30°C. O grupo protector de BOC de (3) é removido com HC1 gasoso ou TFA num solvente inerte como por exemplo CH2C12 para se obter a amina (4). Esta amina (4) é acoplada com SMO-PHE (5) num solvente inerte como por exmeplo CB^C^ ou DMF com HOBT ou DCC a temperaturas entre -20 e 30 C para se obter (6), que é um composto da presente invenção. Além disso, a hidrogenôlise de (6) (remoção de Z) por agitação em metanol numa atmosfera de hidrogénio na presença de 10-20% de paládio num catalisador de carbono, com ou sem a presença do ácido p-tolue-nossulfónico, forma (7) que é um composto da presente invenção. O Esquema I pode ser modificado para incluir o grupo protector (TROC) em vez de (Z) de modo a melhorar a via sintético e conduzir à preparação de compostos contendo FCO e FCF. O grupo protector de TROC ê útil dado que é mais fácil de remover ao passar-se da fase (6) para (7). O grupo FCO ou FCS é mais estável nesta situação.

- 14 -

ESQUEMA I BOC-ATM(Z)-CST-AEM 3

BOOATM(Z) + CST-AEM 1 2 -a- ATM (Z) - CST - AEM + SMO - PHE -►* 4 5 SMO-PHE-ATM-CST-AEM 7

SMO - PHE - ATM(Z) - CST - AEM 6

ESQUEMA II ácido(P3) + ATM(TROC)-OBzl '1 (P3)-ATM(TROC)-OBzl ' (P3)-ATM(TROC) + (Pl-Pl’)amina (P3)-ATM(TROC)-(Pl-Pl1) (P3)-ATM-(pl-Pl1 ) 15

A estratégia da construção de cadeias de di-péptidos e escolha e remoção de grupos protectores é discutida no Capítulo 1, "The Peptide Bond", em "The Peptides. Analysis, Synthesisf Bilogy", E. Gross. e J. Meienhofer, Eds., Academic Press, Nova Iorque, NI, 1979, Vol. 1, pp. 42-44. 0 método de DCC/HOBT de acoplamento é bem conhecido e é discutido no Capítulo 5, "The Carbodiimide Method" por D. H. Rich e J. Singh em "The Peptides. Analysis, Synthesis, Biology, " E. Gross e J. Meinhofer, Eds., Academic Press, Nova Iorque, NI, 1979, Vol. 1, pp. 241-261. O acoplamento de dipéptido depende da activa-ção do terminal do carboxi do aminoácido protegido com amino e sua condensação com outro péptido contendo um grupo amino termi nal livre. Além do processo de acoplamento de DCT acima discuti do, outros processos de activação do grupo carboxilo de um aminoácido protegido incluem: 1) o método de azida - descrito no Capítulo 4 da referência acima citada. 2) o método do anidrido misto - descrito no Capítulo 6 da referência acima citada. 3) o método do éster activo - descrito no Capítulo 3 da referência acima citada. 0 termo alquilo inferior refere-se a radicais alquilo de cadeia linear ou ramificada contendo 1 a 6 átomos de carbono incluindo mas não limitado a metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, iso-butilo, sec-butilo, 2-metilhexilo, n--pentilo, 1-metilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 2-metilpentilo, 2,2 -dimetilpentilo, n-hexilo e semelhantes. 0 termo alcanoilo inferior significa grupos alcanoilo com 1 a 4 átomos de carbono.

Os compostos dá presente invenção são úteis 16

no tratamento da hipertensão associada com a renina, deficiência cardíaca congestiva, hiperaldosteronismo, e outras doenças parecidas. Eles são úteis como agentes do tratamento do glauco-ma. Eles são também úteis como meios de diagnóstico para determinar a presença da hipertensão associada com a renina ou hiper aldosteronismo.

As composições farmacêuticas que compreendem uma quantidade eficaz do composto em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável constituem parte da presente invenção. Um aspecto importante da presente invenção refere-se a um método de tratamento da hipertensão associada com a renina, de um mamífero que compreende administrar-se uma composição farmacêutica contendo uma quantidade eficaz de um composto da invenção em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável,ao mamífero.

Constitui outro aspecto igualmente importante da presente invenção um método para o tratamento do hiperaldosteronismo num mamífero que compreende administrar-se uma composição farmacêutica contendo uma quantidade eficaz de um composto da invenção em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável, ao mamífero.

Um aspecto adicional da presente invenção refere-se a um método de tratamento da deficiência cardíaca congestiva num mamífero que compreende administrar-se uma composição farmacêutica contendo uma quantidade eficaz de um composto em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável, ao ma mífero.

Ainda outro aspecto da presente invenção é um processo para preparar um composto com a fórmula I de acordo com a reivindicação 1. A eficiência dos compostos acima mencionados é determinada por um ensaio de actividade inibidora da renina in vitro. Esta actividade é determinada por um radioimunoensaio 17

padrão para a angiotensina I. Neste ensaio a enzima, renina, in cubada durante 2 horas a 37°C na presença de um substrato, an-giotensinogénio, dá origem ao produto, angiotensina I. Adicionam-se os compostos de ensaio â mistura de incubação. Refere-se a actividade relativa como o valor de IC,-q que é concentração molar do composto de ensaio que causa 50% de inibição da activi dade da renina.

Os compostos da presente invenção têm as vantagens de uma maior estabilidade em relação â hidrólise da qui-motripsina, que é descrita em J. Med Chem, Vol. 31, NQ. 2, página 292, 1988. Esta propriedade torna os compostos mais estáveis in vivo è portanto elas apresentam uma maior duração da ac tividade in vivo.

Os compostos desta invenção também demonstraram actividade in vivo representada pela diminuição da pressão artetial em macocos conscientes. A eficiência in vivo é determi nada pelo seu efeito na pressão sanguínea em macacos Rhesus ou Cnomolgus não anestesiados, com baixo teor de sódio, normotensi vos.

Descreve-se a seguir o ensaio. Os macacos foram aclimatados a uma dieta com baixo teor de sódio e treinados para permanecer quietos num dispositivo de restrição de movimento. Em seguida, implantaram-se cirurgicamente acessos vasculares para administração intravenosa dos compostos de ensaio e a medição da pressão sanguínea. Deixou-se pelo menos uma semana para repouso e recuperação da cirurgia antes de se efec-tuar a redução do sódio como administração de furosamida (1 mg/ /kg/dia, IM), durante 4 dias consecutivos. No sétimo dia os ani mais foram removidos da sua jaula e colocados no dispositivo de restrição. Após um período de climatização de 20 a 30 minutos, retirou-se uma amostra de sangue de controlo (arterial) para de terminação da actividade da renina no plasma (PRA). Em seguida administrou-se por infusão intravenosa num período de 10 minutos ou o veículo (etanol absoluto, 0,2 ml/kg) ou o composto de ensaio (5 mg/kg). 18

Monitorou-se continuamente a pressão sanguínea durante o período total pré- e após-dose. Tomaram-se amostras de sangue a meio do período de infusão e a 0, 15, 30 e 60 minutos após a infusão.

Os compostos da presente invenção também possuem a vantagem de maior selectividade em relação a enzima reni na comparando-se com outras enzimas de aspartil protease.

TABELA II

Inibição In Vitro de Renina IC50 (nM' ou % de inibição

Composto ã contração_ 0,38 0,76 0% a 10"8 15% a IO-8 480 44% a IO-6 49,9% a 10"6 3,4 0,34 66 11,4% a 10 25,5% a 10 0,58 164 0,58 0,27 15,3 NA a 10 NA a 10 SMO-PHE-ATM-CAD (Isómero A) SMO-PHE-ATM-CAD (Isõmero B) (amostra impura)

SMO-PHE-ATM(Z)-CAD

BOC-PHE-ATM-CST-AEM

SMO-PHE-ATM-STA-MBA

BOC-PHE-ATG-STA-MBA SMO-PHE-ATM-CST-AEM (Isómero A) SMO-PHE-ATM-CST-AEM (Isómero B) SMO-TYR(OME) -ATM-CAD (Isómero A)- SMO-TYR(OME)-ATM-CAD (Isómero B) SMO-PHE-AYM(Z)-CST-AEM (Isómero A) SMO-PHE-ATM(Z)-CST-AEM (Isómero B)

SMO-PHE-ATG-CAD

SMO-PHE-ATM(Z)-FCS-AEM

SMO-PHE-ATM-FCS-AEM

SMO-PHE-ATM-CDH

SMO-PHE-ATE-CAD

SMO-PHE-ATE(Z)-CAD

SMO-PHE-ATG(Z)-FCS-AEM 19

TABELA II (continuação)

SMO-PHE-ATM-FCO-AEM SMO-PHE-ATM-CST-BHEAEA 3,6 SPI-PHE-ATM-CAD 0,16

TABELA III

Estabiliade In Vitro Quimotripsina

Percentagem do Parente Restante (3 hr) Apenas tampão + tampão quimotripsina 100 100 100 100

SMO-PHE- (S) ATM-CAD SMO-TYR(OME)-ATM-CAD (Isómero A)

TABELA IV

Redução da Pressão Sanguínea por Inibidores da Renina

SMO-PHE-(S)ATM-CAD (queda em mm Hg na P. S. média

Dose PO n a 1 hr 2 hr 4 hr 6 hr Max 10 mg/kg 4 14 20 15 12 23 30 mg/kg 6 30 34 29 29 38 Como se pode observar das tabelas acima apre sentadas, os compostos da presente invenção têm um efeito significativo na actividade da renina e são assim úteis para o tratamento da hipertensão, hiperaldosteronismo e deficiência cardíaca congestiva. | Os compostos da presente invenção, quando en- • saiados para a medida do efeito na pressão intraocular em coe- 20

lhos como descrito por Tinjum, A. M., Acta Ophthalmologica 50, 677 (1972), devem inibir a actividade anti-glaucoma.

Para preparar as composições farmacêuticas a partir dos compostos descritos nesta invenção, os veículos far-maceuticamente aceitáveis e inertes podem ser sólidos ou líquidos. As preparações com a forma sólida incluem pós, comprimidos, grânulos dispersáveis, cápsulas, hóstias e supositórios. Um veí culo sólido pode ser uma ou mais substâncias que também actuam como diluentes, agentes aromatizantes, solubilizantes, lubrificantes, agentes de suspensão, ligantes ou agentes desintegran-tes de comprimidos; pode também ser um material encapsulante.

Nos pós, o veículo é um solido finamente dividido que está em mistura com o composto finamente dividido. No comprimido o composto activo é misturado com um veículo que possui as proprieda des ligantes necessárias em proporções adequadas e compactado para a forma e dimensão pretendida. O pó e comprimido contêm preferivelmente de 5 a 10 a cerca de 70% do ingrediente activo. Os veículos sólidos adequados são o carbonato de magnésio, es-tearato de magnésio, talco, açúcar, tragacanto, metilcelulose, uma cera de baixo ponto de fusão, manteiga de cacau, e produtos semelhantes. O termo "preparação" pretende incluir a formulação do composto activo com o material encapsulante como veículo pro porcionando uma cápsula em que o componente activo (com ou sem outros veículos) é rodeado pelo veículo, que por sua vez está em associação com ele. As hóstias são de modo semelhante incluí das. Os comprimidos, pós, hóstias e cápsulas podem ser utilizados como formas de dosagem sólida adequadas para administração oral. O composto da presente invenção pode ser admi nistrado oralmente, bucalmente, parentericamente, por inalação de pulverização, rectalmente ou topicamente em formulações de unidades de dosagem contendo veículos adjuvantes e diluentes convencionais não tóxicos e farmaceuticamente aceitáveis na for ma pretendida. 0 termo parentérico aqui utilizado inclui injec-ções sub-cutâneas, intravenosas, intramusculares, intrasternal 21

.SSES^rac por injecção ou infusão.

Para preparar supositórios, funde-se em primeiro lugar uma cera de baixo ponto de fusão como por exemplo uma mistura de glicéridos de ácidos gordos ou manteiga de cacau e dispersa-se o ingrediente activo de forma homogénea por agita ção. A mistura homogénea e fundida é em seguida vasada para mol des com a dimenzão conveniente, deixada arrefecer, e em seguida solifificada.

As formas de preparação líquidas incluem soluções, suspensões e emulsões. Como exemplo podem ser mencionadas soluções em água ou água/propileno glicol para injecção pa-rentérica. As preparações líquidas podem também ser formuladas em solução aquosa de polietilenoglicol. As suspensões aquosas adequadas para utilização oral podem ser obtidas dispersando o componente activo finamente dividido em água com um material viscoso, isto é, gomas sintéticas ou naturais, resinas, metilce lulose, carboximetilcelulose de sódio e outros agentes de suspensão bem conhecidos.

Incluem-se também formas de preparações sólidas que pretendem ser convertidas, pouco tempo antes da utiliza ção, em formas de preparação líquida para administração oral ou parentérica. Essas formas líquidas incluem soluções, suspensões e emulsões. Estas formas de preparação sólida particulares são mais convenientemente proporcionadas sob a forma de uma unidade de dosagem e como tal são utilizadas para proporcionar uma unidade de dosagem líquida única. Alternativamente pode proporcionar-se um sólido suficiente de modo a que após a conversão para a forma líquida, se possam obter doses líquidas individuais múl tiplas medindo volumes pré-determinados da preparação de forma líquida com uma seringa, colher de ché ou outro recipiente volumétrico. Quando se preparam deste modo doses líquidas múltiplas, prefere-se manter a parte não utilizada das referidas doses líquidas a uma baixa temperatura (isto é, com refrigeração) de modo a atrasar a possível decomposição. As preparações de 22

forma sólida que são para serem convertidas em forma líquida podem conter, para além do material activo, aromatizantes, corantes, estabilizantes, tampões, edulcorantes artificiais e na turais, dispersantes, espessantes, agentes solubilizantes e produtos semelhantes. 0 líquido utilizado para preparar a forma de preparação líquida pode ser água, água isotónica, etanol, glicerina, propileno glicol e produtos semelhantes, bem como as suas misturas. 0 líquido utilizado será naturalmente escolhido tendo em consideração a via de administração, por exemplo as preparações líquidas contendo grandes quantidades de etanol não são adequadas para o uso parentérico. A preparação farmacêutica está, de preferência, numa forma unidade de dosagem. Nesta forma, a preparação é subdividida em doses unitárias contendo quantidades adequadas do componente activo. A forma de unidade de dosagem pode ser uma preparação embalada, contendo a embalagem quantidades discretas da preparação, por exemplo, comprimidos, cápsulas e pôs embalados em frascos ou ampolas. A forma de unidade de dosagem pode também ser uma cápsula, hóstia, ou o próprio comprimido, ou pode ser um número adequado destas formas embaladas. A quantidade de composto activo numa dose uní tária da preparação pode variar ou ajustar-se de 1 mg a 500 mg, preferivelmente 5 a 100 mg de acordo com a aplicação particular e a potência do ingrediente activo. As composições podem, se de sejado, conter também outros agentes terapêuticos compatíveis.

Na utilização terapêutica como inibidores da renina, a gama de doses para mamíferos varia para um indivíduo com 70 kg de 1 a 2500 mg por dia ou preferivelmente 25 a 750 mg por dia opcionalmente em porções divididas. As dosagens diárias podem, contudo, variar dependendo das necessidades do paciente, severidade da condição a tratar, e do composto utilizado. A determinação da dosagem adequada para uma situação particular per tence ao especialista. Geralmente, inicia-se o tratamento com • pequenas dosagens que são inferiores à dose óptima do composto. 23

Em seguida aumenta-se a dosagem por pequenos incrementos até se conseguir o efeito óptimo nas circunstâncias. Por conveniência, a dosagem diária total pode ser dividida e administrada em porções durante o dia se desejado.

Na utilização terapêutica como agente anti--glaucoma, o composto pode também ser administrado como aplicação tópica à córnea de uma solução contendo o composto em quantidades conhecidas dos especialistas neste tratamento. A presente invenção inclui combinações dos no vos compostos inibidores da renina com a fórmula I com 1 ou mais agentes anti-hipertensivos escolhidos no grupo consistindo em diuréticos, agentes bloqueantes, #- e/ou /9-adrenérgicos, agentes bloqueantes do canal do cálcio, agentes activadores do sistema nervoso central, agentes bloqueantes dos neurónios adre nérgicos, vasodilatadores, agentes inibidores da conversão da angiotensina, e outros agentes anti-hipertensivos.

Os seguintes exemplos são proporcionados para permitir ao especialista a prática da presente invenção. Estes exmeplos não pretendem de qualquer forma limitar o âmbito da in venção mas apenas ilustrá-la. EXEMPLO 1

SMO-PHE-ATM(Z)-CAD

Agitou-se a 0°C uma mistura de SMO-PHE (0,786 G) , HOBT (0,339 g), e DCC (0,516 g) e tratou-se com ATM(Z)-CAD (1,4 g). Aqueceu-se a mistura para a temperatura ambiente e agitou-se durante a noite. Filtrou-se a mistura reaccional para se separar o precipitado e evaporou-se o filtrado em vazio. Dis solveu-se o resíduo em acetato de etilo (100 ml) e lavou-se sucessivamente com ácido cítrico 1M (100 ml), bicarbonato de sódio saturado (100 ml) e solução salina saturada (100 ml). Secou se a fase orgânica em MgSO^ e evaporou-se em vazio para se ob- 24

bter uma espuma amarela. Cromatografou-se a espuma em gel de sí lica para se obterem 1,5 g do produto sob a forma de uma mistura de 2 diastereómeros; pf 95-97°C.

Analisada para C41H58N6O9S2*0,5 CHC13

Calculada: C, 55,82; H, 6,61; N, 9,43

Determinada: C, 56,06; H, 6,68; N, 9,15 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLO 2

SMO-TYR (OME) -ATM (Z) -CAD

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 1, a partir de SMO-TYR(OME) (0,860 g), HOBT (0,338 g), DCC (0,516 g) e ATM(Z)-CAD (1,4 g). Obtiveram-se 13 g do produto sob a forma de uma mistura de diastereómeros, pf 101-107°C.

Analisada para C42H56N6°9S2* 0'^ éter

Calculada: C, 58,06; H, 7,21: N, 9,23

Determinada: C, 58,39; H, 6,93; N, 9,05 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLO 3

BOC-PHE-ATM(Z)-CST-AEM

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 1 a partir de BOC-PHE (0,451 g), HOBT (0,230 g), DCC (0,351 g) e ATM(Z)-CST-AEM (1,2 g). Obtiveram-se 1,2 g do produto. Este material foi utilizado para preparar o produto do Exemplo 4. A es trutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLO 4

BOC-PHE-ATM-CST-AEM

Preparou-se uma suspensão de BOC-PHE-ATM(Z)- 25

-CST-AEM (1.05 g) com 20% de Pd/C (0,3 g) e ácido p-toluenossul fónico (0,476 g) em metanol (25 ml) numa atmosfera de hidrogénio. Agitou-se a mistura durante 2 horas, filtrou-se para se sa-parar o catalisador e evaporou-se em vazio. Dissolveu-se o resí duo em acetato de etilo (75 ml). Lavou-se a fase orgânica com carbonato de sódio (75 ml) e cloreto de sódio (50 ml), em segui da secou-se em MgSO^ e evaporou-se em vazio. Co-evaporou-se o resíduo uma vez com metanol (10 ml) para se obterem 0,63 g do produto sob a forma de uma mistura de diastereómeros, pf 95-103 °C.

Analisada por C37H,-7N7O7S*0,9 MeOH

Calculada: C, 58,90? H, 7,90? N, 12,69

Determinada: C, 59,15? H, 8,05? N, 12,37 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLO 5 e 6 SMO-PHE-ATM-(Z)-CST-AEM Isómero A (5) e Isómero B (6)

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 1 a partir de SMO-PHE (0,817 g), HOBT (0,351 g), DCC (0,536 g) e ATM-(Z)-CST-AEM (1,7 g). Obtiverara-se 2,0 g do produto sob a forma de diastereómeros que foram separados por cromatografia em gel de sílica. O isómero com eluição mais rápida é o Isómero A.

Isómero A (5) (0,64 g), pf 102-110°C.

Analisada por C^H^NgO^^^O^ CHCl^

Calculada: C, 54,70? H, 6,45? N, 11,49

Determinada: C, 54,66? H, 6,64? N, 11,37

Isómero B (6) (0,63 g), pf 105-110°C.

Analisada por C44Hg2N8°10S2*^^

Calculada: C, 54,70? H, 6,45? N, 11,49

Determinada: C, 54,46? H, 6,58? N, 11,56 * Ambos os isómeros apresentavam espectros de RMN e de massa con- 26

sistentes. EXEMPLO 7 SMO-PHE-ATM-CST-AEM (Isómero A)

Sintetisou-se o produto como no Exemplo 4 a partir de SMO-PHE-ATM(Z)-CST-AEM (Isómero A) (0,717 g), ácido p-toluenossulfónico (0,366 g) e 20% de Pd/C (0,3 g). Obtiveram--se 0,427 g do produto como sólido branco, pf 109-119°C.

Analisada para C26H5f.N8 °8S2 Calculada: C, 53,80; H, 7,35; N, 13,53 Determinada: C, 53,70; H, 7,33; N 13,48 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXCEMPLO 8 SMO-PHE-ATM(Z)-CST-AEM (Isómero B)

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 4 a partir de SMO-PHE-ATM(Z)-CST-AEM (Isómero B) 0,883 g) , ácido p--toluenossulfónico (0,453 g) e 20% de Pd/C (0,4 g). Obtiveram--se 0,544 g do produto sob a forma de uma espuma branca, pf 100-113°C.

Analisada para C36H56NgOgS2*l,3 MeOH

Calculada C, 53,67; H, 7,39; N, 13,43 Determinada:C, 54,01; H, 7,40; N, 13,19 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLOS 9 e 10 SMO-PHE-ATM-CAD (Método A) Isómero A, eluição rápida (9) Isómero B, eluição lenta (10) 27

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 4 a partir de SMO-PHE-ATM(Z)-CAD (4,8 g), ácido p-toluenossulfõnico (2,182 g), e 20% de Pd/C (0,4 g). Obtiveram-se 0,91 g de uma mistura de diastereómeros sob a forma de uma espuma branca, que foram separados por cromatografia em gel de sílica.

Isómero A (1,50 g) , pf 104-112°C.

Analisada para 0^3^52^6^7^2 *®* ^/4 EtOAc

Calculada: C, 55,37; H, 7,42; N, 11,17

Determinada: C, 55,40; H, 7,28; N, 10,94

Isómero B (1,30 g), pf 109-122°C

Analisada para C33H52N6°7S2 · 0, ÍCI^C^ · 0,4 EtOAc

Calculada: C, 55,37; H, 7,42; N, 11,17

Determinada: C, 55,09; H, 7,25; N, 10,86

Ambos os isómeros apresentavam espectros de RMN e de massa consistentes. EXEMPLO 9 (Método B)

SMO-PHE-ATM-CAD, Isómero A ou SMO-PHE-(S)ATM-CAD

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 1 a partir de SMO-PHE (0,628 g) , Et3N: (505 g), HOBT (0,270 g), DCC (0,413 g) e (S)-ATM-CAD·2HC1 (1,1 g). Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica para se obterem 0,375 g do composto puro como diastereómero único pf 106-113°C.

Analisada para C33H52N6°7S2" 0,3 EtOAc

Calculada: C, 55,86; H, 7,46; N, 11,43

Determinada: C, 55,51; H, 7,50; N, 11,37 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLO 9 (Método C)

• SMO-PHE-(S)ATM-CAD 28

Dissolveu-se uma solução de 10,60 g de SMO--PHE-(S)ATM(TROC)-CAD (12,0 mmol) em 250 ml (4:1) de THF (recentemente destilado))MeOH, num frasco de fundo redondo de 500 ml à temperatura ambiente numa atmosfera de azoto. A este frasco foram adicionados 6,41 g de cloreto de amónio, 10 equivalentes, e 1,57 g de pó de zinco, 2 equivalentes. Agitou-se vigorosamente a mistura reaccional à temperatura ambiente. Passadas 2 horas adicionaram-se mais e equivalentes de zinco. Passadas mais 2 horas, adicionaram-se mais 2 equivalentes para um total de 6 equivalentes de zinco. Passadas 5,5 horas filtrou-se a mistura reaccional e concentrou-se para se obterem 10,96 g de uma espuma branca. Cromatografou-se a mistura reaccional (Si02, 1:1 de acetato de etilo/CH2). Separou-se por filtração um sólido de 1,01 g a partir da amostra antes da introdução na coluna. Isolaram-se 6,47 g do produto. Espectro de massa m/e=709,2. EXEMPLOS 11 e 12

SMO-TYR(OME)-ATM-CAD

Isómero A, eluição rápida (11);

Isómero B, eluição lenta (12);

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 4 a partir de SMO-TYR(OME)-ATM(Z)-CAD (1,4 g), ácido p-toluenossul-fónico (0,610 g) e 20% de Pd/C (0,25 g). Obtiveram-se 1,1 g de uma mistura de diastereómeros sob a forma de uma espuma branca. Separaram-se os isómeros por cromatografia em gel de sílica,

Isómero A (0,330 g), pf 110-120°C.

Analisada para C2^Hg^NgOgS2·Μβ0Η·Η20

Calculada: C, 53,28; H, 7,66; N, 10,65

Determinada: C, 53,39; H, 7,23; N, 10,41

Isómero B (0,240 g), pf 106-116°C.

Analisada para Cg^H^^NgOgS^·1,5MeOH . Calculada: C, 54,17; H, 7,68; N, 10,68 ] Determinada: C, 54,24; H, 7,36; N, 10,67 29 1 k

Ambos os isómeros apresentavam valores consistentes dos espectros de RMN e de massa. EXEMPLO 13

SMO-PHE-ATM(Z)-STA-MBA

Preparou-se o produto como no Exemplo 1 a partir de SMO-PHE(0,517 g), HOBT (0,222 g), DCC (o,339 g), e ATM(Z)-STA-MBA (0,90 g). Obtiveram-se 1,1 g do produto sob a for ma de uma mistura de diastereómeros como espuma branca. pf 97-103°C.

Analisada para C4oH57N7°9S2·1,5MeOH calculada: C, 55,87; H, 7,11; N, 10,99

Determinada; C, 55,51; H, 6,71; N, 10,83 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLO 14

SMO-PHE-ATM-STA-MBA

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 4 a partir de SMO-PHE-ATM(Z)-STA-MBA (1,0 g), ácido p-toluenossulfó nico (0,228 g) e 20% de Pd/C (0,3 g). Obtiveram-se 0,399 g do produto sob a forma de uma mistura de diastereómeros, pf 97-108 °C.

Analisado para ’ 0,65Et20

Calculada: C,54,82; H, 7,65; N, 12,94

Determinada: C, 54,73; H, 7,57; N, 12,97 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLO 15

BOC-PHE-ATG(Z)-STA-MBA . Sintetizou-se o produto como no Exemplo 1 a j partir de ATG(Z)-STA-MBA (1,6 g), HOBT (0,419 g) , DCC (0,640 g) , 30 4 í^ssssçr:.:

"Γ::α e BOC-PHE (0,796 g). Obtiveram-se 1,6 g do produto sob a forma de uma mistura de diastereómeros como uma espuma amarelo clara, pf 108-118°C.

Analisada para C^gH56NgOgS (99%)

Calculada: C, 60,89; H, 7,16; N, 10,65

Determinado: C, 60,98; H, 7,19; N, 10,55 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLO 16

BOC-PHE-ATG-STA-MBA

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 4 a partir de BOC-PHE-ATG(Z)-STA-MBA (1,5 g), ácido p-toluenossulfó nico (0,38 g) e 10% de Pd/C. Obtiveram-se 0,31 g do produto sob a forma de uma mistura de diastereómeros como um sólido branco pf 174-176°C.

Analisada para C32H50N6°6S ^9%)

Calculada: C, 59,79; H, 7,72; N, 12,87

Determinada: C, 59,97; H, 7,99; N, 13,06 A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. EXEMPLO 17

TROC-SPI-PHE-(S)ATM(TROC)-CAD

Tratou-se uma solução de 2,10 g de (TROC) SPI-PHE (4,30 mmol) em 30 ml de DMF com 0,89 g de DCC (4,30 mmol) e 0,58 g de HOBT (4,30 mmol). Agitaram-se os materiais a 15°C durante 30 minutos. Em seguida adicionaram-se 2,50 g de (S)ATM(TROC)-CAD (4,25 mmol) em lo ml de MDF e removeu-se o banho de gelo. Continuou-se a agitar a mistura ã temperatura ambiente durante 48 horas. Filtrou-se a mistura reaccional e eva-porou-se em vazio. Retomou-se o resíduo em CI^C^ e lavou-se com 5% de ^200^ e NaCl saturado. Secou-se a fase orgânica em \ MgSO^ e evaporou-se. A cromatografia em gel de sílica eluindo 31

com gradiente de CHC13 linear até 2% de MeOH em CHC13 produziu 3,95 g do produto. A estrutura foi confirmada por espectrosco-pia de RMN. EXEMPLO 18

SPI-PHE-(S)ATM-CAD

Tratou-se com 3,50 g de pô de zinco uma solução de 2,00 g de TROC-SPI-PHE-(S)ATM-CAD 1,89 mmol) numa mistura 1:1 de 40 ml de HOAc:MeOH. Trataram-se com som estes materiais a temperatura ambiente em atmosfera de azoto durante 7 horas. Diluiu-se a mistura reaccional com Et20, filtrou-se e evaporou-se. Retomou-se o resíduo em EtOAc e lavou-se duas vezes com bicarbonato de sódio saturado. Secou-se a fase orgânica em MgSO^ e evaporou-se. A cromatografia em gel de sílica eluindo com gradiente de 2 a 8% de MeOH em CHC13 produziu 0,47 g do pro duto. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa.

Analisada para C33H53N7S20g * -*-'0 CH2C'L2 792,89:

Calculada: C, 51,54; H, 6,99; N, 12,37

Determinada: C, 51,21; H, 6,77; N, 12,26. EXEMPLO 19

SMO-PHE-(S)ATM(TROC)-CDH

Dissolveu-se uma solução de (BOC)-(S)ATM-(TROC)-CDH em CH2C12, e arrefeceu-se banho de gelo. Fez-se borbulhar HC1 durante 10 minutos, e agitou-se a mistura reaccional durante mais 20 minutos, em seguida concentrou-se para se obterem 0,91 g de uma espuma esbranquiçada. Redissolveu-se este pro duto em CH2Cl2 e arrefeceu-se, e adicionaram-se 0,42 g de SMO--PHE, 0,27 g de DCC, 0,8 g de HOBT, e 0,48 g de DMAP. Após ter estado à temperatura ambiente durante a noite, filtrou-se a mis tura reaccional e lavou-se sequencialmente com ácido cítrico a 5%, bicarbonato de sódio saturado, e cloreto de sódio saturado, e em seguida concentrou-se. Cromatografou-se o sólido (1,12 g) 32

(Si02, EtOAc), e recolheram-se 0,71 g do produto. Espectro de massa n/e = 872. EXEMPLO 20

SMO-PHE-(S)ATM-CDH

Dissolveu-se um composto de 0,68 g de SMO-PHE - (S) ATM(TROC)-CDH em 4 :1 THF/MeOH. Adicionaramrsse cloreto de amó nio (0,35 g) e 0,10 g de pó de zinco e agitou-se a mistura re-accional à temperatura ambiente. Passada 1 hora, adicionaram-se mais 0,10 g de zinco, e mais 0,10 g de zinco passadas 2 horas. Passadas cinco horas filtrou-se a mistura reaccional e concentrou-se. Dissolceu-se o resíduo em metanol e adicionaram-se 10 ml de HOAc, juntamente com 0,30 g de zinco, Aqueceu-se a mistura reaccional, passados 45 minutos adicionaram-se mais 0,30 g de zinco e continuou-se a agitar a mistura reaccional durante 1 hora. Após arrefecimento filtrou-se a mistura, diluiu-se com Et20 e deitou-se em solução de bicarbonato de sódio. Separaram--se as fases, lavou-se a fase aquosa com mais éter, e concentra ram-se as fases orgânicas combinadas para se obterem cerca de 1,3 g de um vidro. Repetiu-se esta sequência ácida, e processou -se por concentração do filtrado, dissolvendo em EtOAc e numa lavagem de bicarbonato de sódio. A concentração da fase orgânica produziu 0,41 g de um sólido que foi cromatografado (Si02, 95% CHCl^, 5% MeOH). Obtiveram-se 0,32 g de produto. Espectro de massa m/e = 695. EXEMPLO 21

SMO-PHE-(S)ATM(TROC)-CAD

Preparou-se uma suspensão moída de 32,93 g de (BOC)-(S)ATM(TROC)-CAD (47,8 mmol), em éter/metanol (300 ml/20 ml) e arrefeceu-se num banho de gelo e água. Fez-se borbulhar HC1 durante 20 minutos. Dissolveu-se novamente um precipitado . branco inicial durante esta altura. Armazenou-se a mistura re-* accional no frigorífico durante a noite. Concentrou-se a mistu- 33

ra reaccional, agitou-se vigorosamente a espuma com éter e filtrou-se o sólido branco resultante e secou-se para se obterem 27,5 g de pó (44,0 mmol, 92% sob a forma de cloridrato de amino, com os cálculos posteriores baseados nesta quantidade). Utilizou-se material sem purificação adicional. Esta amina foi suspensa em 500 ml de CH2C12, arrefeceu-se o frasco num banho de gelo e água, e adicionaram-se 13,83 g de SMO-PHE, 5,96 g de HOBT, 5,83 g de DMAP, e 9,06 g de DCC. Deixou-se a mistura regressar à temperatura ambiente durante a noite. Filtrou-se e la vou-se o filtrado sequencialmente com água, solução aquosa a 5% de ácido cítrico, bicarbonato de sódio saturado, e cloreto de sódio saturado, e em seguida secou-se em sulfato de sódio,e con centrou-se para se obterem 31,23 g de uma espuma branca. Croma-tografou-se esse material em dois lotes (SiC>2 eluindo com 2:1 de acetato de etilo/hexano). Obteve-se um total de 11,38 g do produto pretendido. Espectro de massa m/e = 885. EXEMPLO 22

SMO-PHE-(S)ATM(TROC)-FCS-AEM A SMO-PHE (0,87 g, 2,46 mmol) e HOBT (0,37 g, 2,76 mmol) em DMF anidro (20 ml) a 0°C foi adicionado DCC (0,57 g, 2,76 mmol) em DMF (5 ml) seguido de (S)ATM(TROC)-FCS-AEM (1,95 g, 2,76 mmol) em DMF (5 ml). Após agitar durante duas horas, deixou-se a mistura reaccional aquecer para a temperatura ambiente e agitou-se durante mais 16 horas. Removeu-se a dici-clohexilureia precipitada por filtração e evaporou-se o solvente a pressão reduzida. Retomou-se o resíduo bruto em acetato de etilo e lavou-se com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio seguido de solução salina. Após secagem (Na2SO^), filtração e evaporação do solvente cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica eluindo com 5% de metanol em diclorometano. A estrutura do produto principal (1,35 g, 49%), obtido sob a forma de uma espuma branca, foi confirmado por espectroscopia de RMN e de massa. • Analisada para C2gHggNg0^QS202F2·0,2CH2C12 34

calculada: C, 46,09; H, 5,42? N, 10,97? S, 6,28

Determinada: C, 45,77? H, 5,55? N, 10,82? S, 6,09 EXEMPLO 23

SMO-PHE-(S)ATM-FCO-AEM A SMO-PHE-(S)ATM(TROC)-FCS-AEM (1,95 g, 1,94 mmol) em CH2C12 anidro (40 ml) a 0 C foi adicionado acido diclo roacético (0,23 ml, 2,91 mmol) seguido de DCC (4,02 g, 19,4 mmol). Passadas duas horas a 0°C, deixou-se a mistura reaccio-nal aquecer para a temperatura ambiente e agitou-se durante mais 16 horas. Apõs re-arrefecimento para 0°C adicionou-se gota a go ta uma solução de ácido oxãlico (3,05 g) em metanol (30 ml) à mistura reaccional. Após a agitação durante 20 minutos, filtrou -se a suspensão e evaporou-se a pressão reduzida. Retomou-se o resíduo em acetato de etilo e refiltrou-se. Apõs evaporação, re petiu-se mais uma vez este procedimento. A evaporação a pressão reduzida produziu SMO-PHE-(S)ATM(TROC)-FCO-AEM como óleo amarelo viscoso.

Dissolveu-se este produto numa mistura de metanol e THF (1:4, 30 ml total). Adicionou-se pó de zinco activa do (325 malhas) (0,27 g, 3,86 mmol) e cloreto de amónio sólido em excesso (2 g) e agitou-se rapidamente a suspensão durante 30 horas. Adicionou-se mais pó de zinco (0,27 g) passadas 15 horas. Adicionou-se éter dietílico (30 ml) e filtrou-se a mistura reaccional e evaporou-se a pressão reduzida para se obter uma espuma branca. Dissolveu-se a espuma numa mistura de 4:1 de água e ácido fosfórico (200 ml) e lavou-se duas vezes com porções de acetato de etilo (50 ml). Extraiu-se a solução orgânica combinada uma vez com solução aquosa a 20% de H^PO^ (100 ml). Lavaram-se os extractos aquosos combinados uma vez com acetato de etilo e em seguida arrefeceu-se para 0°C e levou-se a pH 4,5 por adição cuidadosa de hidróxido de amónio (seguido por um medidor de pH). Extraiu-se em seguida a solução várias vezes com . acetato de etilo e secou-se (Na2S04). Apõs evaporação a pressão ] reduzida obteve-se o produto bruto com a forma de uma espuma 35

amarela (1,20 g). A cromatografia de coluna eluindo com 5 a 10% do ingrediente de metanol em acetato de etilo em gel de sílica, produziu o produto purificado. A combinação das fracções relevantes produziu um diasterómero importante (0,50 g) [indicava por HPLC >95% de pureza como uma mistura 98:2 de isómeros]. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. Converteu-se o composto no sal de ácido metanossulfónico:

Analisada para C_,Hc,No0oFoSo CH_SO_H1 23,2 H„0 e 36 56 8822 33 2

Calculada: C, 45,31; H, 6,41; N, 11,42; S, 9,81

Determinada: C, 45,31; H, 6,46; N, 11,18; S, 9,49 MH+; 827,0 EXEMPLO 24

SMO-PHE-ATG(Z)-CAD

Arrefeceu-se uma solução de 1,41 g (4,4 mmol) de SMO-PHE-0,53 g (4,4 mmol) de Et^N, 0,62 (4,4 mmol) de HOBT, e 2,5 g (4,4 mmol) de ATG(Z)-CAD.HC1 numa mistura de 40 ml de CH2CI2 e 5 ml de dMF que se arrefeceu em gelo e se tratou com 0,97 g (4,4 mmol) de DCC em 5 ml de CH2C12· Passadas 0,5 horas a 0UC deixou-se a mistura em agitação à temperatura ambiente du rante 48 horas. Separou-se a ureia por filtração e lavou-se o resíduo com CE^C^. Combinaram-se o filtrado e as lavagens, e lavaram-se sucessivamente com água, bicarbonato de sódio saturado e solução salina. A secagem e remoção do solvente a pressão reduzida produziu o produto bruto. Este produto foi purificado por cromatografia (SiC^, d^C^CH^OH 5%) para se obterem 3,4 g de produto. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. (Μ + 1 pico de ião a 829). EXEMPLO 25 36 1

SMO-PHE-ATG-CAD

Saturou-se com hidrogénio uma solução de 2 g 2 de SMO-PHE-ATG(Z)-CAD em MeOH (75 ml) contendo 0,87 g de ácido

p-toluenossulfõnico e 0,5 g de Pd/C a 20%. Eliminou-se o metanol e processou-se o resíduo em EtOAc. Lavou-se a solução com bicarbonato de sódio, seguido de solução salina, secou-se e des tilou-se para se obter uma espuma (1,6 g). Cromatografou-se (SÍO2 70 g; CE^C^/CH^OHa 5%) para se obterem 1,1 g do produto. O espectro de massa indica o pico do ião (M + 1) a 695. 0 en saio de RMN era consistente com o produto pretendido.

Analisada para C32H50N6°7S2’®^ H2°

Calculada: C, 54,60; H, 7,25; N, 11,94

Determinada: C, 54,60; H, 7,36; N, 12,17 EXEMPLO 26

SMO-PHE-(S)ATE(Z)-CAD

Adicionou-se a BOC-(S)ATE(Z)-CAD (2,38 g) a CH2Cl2 saturado com HCl a 0°C e agitou-se durante uma hora. Con centrou-se a mistura reaccional para se obterem 2,3 g de uma es puma amarelo pálido que foi utilizada sem purificação adicional. Dissolveu-se o cloridrato de amina em CE^C^ a 0°C e adicionaram-se a este produto 1,13 g de SMO-PHE, 0,74 g de DCC, 0,49 g de HOBT (1 equivalente de cada) e 1,00 g de DMAP (2,27 equivalentes) . Deixou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante a noite, em seguida filtrou-se e lavou-se sequencialmen te com uma solução aquosa a 5% de ácido cítrico, bicarbonato de sódio saturado, solução aquosa saturada de NaCl, e secou-se (MgSO^). Após concentração, cromatografou-se o resíduo (SiC^, 95% CHC13 5% MeOH) para se obterem 2,27 g de produto. Espectro de massa m/e = 857. EXEMPLO 27

SMO-PHE-(S)ATE-CAD

Dissolveu-se o SMO-PHE-(S)ATE(Z)-CAD (2,05 g) em metanol a que se adicionaram 0,40 g de 20% e 1,18 g de ácido j tosílico. Colocou-se esta mistura numa atmosfera de hidrogénio 37

com agitação durante 15 horas, em seguida filtrou-se e concentrou-se para se obterem 1,21 g de uma espuma esbranquiçada. Cro matografou-se este produto (SiC>2, EtOAc) , e isolaram-se 0,51 g do produto. Espectro de massam/e = 723,3. EXEMPLO 28

SMO-PHE-(S)ATM(Z)-FCS-AEM

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 1 a partir de 2,8 g de SMO-PHE-(S)ATM(Z), 0,554 g de HOBT, 0,846 g de DCC, e 1,5 g de FCS-AEM. A cromatografia (gel de sílica com 0 a >10% de gradiente de MeOH em CH2Cl2 produziu 2,0 g de produto.

pf = 96-109°C

Analisada para C^^HgQF2NgO^QS2·0,90Η^0Η

Calculada: C, 54,36; H, 6,46; N, 11,30

Determinada: C, 54.06; H, 6,38; N, 11,33 EXEMPLO 29

SMO-PHE-(S)ATM-FCS-AEM

Sintetizou-se o composto como no Exemplo 4 a partir de 1,6 g SMO-PHE-(S)ATM(Z)-FCS-AEM e 0,4 g de 20% Pd/C. A cromatografia em gel de sílica com um gradiente de 5 a 10% de metanol em CHCl^ produziu 0,561 g de produto.

pf = lo3-115°C

Analisada para C^gH^F^ 00 o 00 S2*0,6 CHC1 3 Calculada: C, 48,81; H, 6,11; N, 12,44 Determinada: C, 48,74; H, 6,25; N, 12,23. EXEMPLO 30

SMO-PHE-(S)ATM(Z)-CST-BHEAEA A BOC-ATM(Z)-CST-BHEAEA (3,2 g) em 60 ml de 38

CH^C]^ e 10 ml de metanol foi adicionado HC1 (g) durante 10 minutos. Evaporou-se a solução em vazio até â secura. Dissolveu--se o resíduo em DMP e tratou-se com etil diisopropil amina até se tornar básico ao papel de litmus húmido. Tratou-se a nova so lução com SMO-PHE (1,34 g), HOBT (0,61 g), e DCC (0,94 g). Filtrou-se a mistura e evaporou-se para se obterem 4,61 g de material bruto. Purificou-se o produto por cromatografia em gel de sílica. A eluição com 19:1, CE^C^sMeOH, produziu 1,18 g de pro duto puro MS (FAB) M+ = 945,4. A estrutura foi confirmada por ensaios de espectroscopia de IV, RMN e de massa. EXEMPLO 31

SMO-PHE-(S)ATM-CST-BHEAEA

Preparou-se o produto como no Exemplo 4 a par tir de SMO-PHE-ATM(Z)-CST-BHEAEA (1.06 g), p-TsOH (0,6 g), 20% Pd/C (0,6 g) em MeOH (40 ml). Obtiveram-se 0,34 g de produto após cromatografia em gel de sílica (19:1, C^C^íMeOH) . pf = 93-96°C.

Analisada para C3gH3gNgOgS21 2 0,85CHClg

Calculada: C, 48,50; H, 6,50; N, 12,28

Determinada: C, 48,56; H, 6,65; N, 12,07 A estrutura foi verificada por espectroscopia de IV, RMN e de massa. EXEMPLO 32 39 1

SMO-PHE-(S)ATM(TROC)-FCS-OET

Sintetizou-se o composto como no Exemplo 1 a partir de SMO-PHE (0,993 g), HOBT (0,43 g) e (S)ATM(TROC)-FCS--OET (1,97 g). Obtiveram-se após cromatografia em gel de sílica (6:4 de EtOAc:hexano), 1,53 g de produto sob a forma de uma espuma branca. MS, MT = 921. 2

Análises:

V

Calculada: C, 45,68; H, 5,15; N, 9,13

Determinada: C, 45,92; H, 5,26; N, 8,99

Os valores dos espectros de RMN e IV, eram consistentes com as estruturas atribuídas. EXEMPLO 33

SMO-PHE-(S)ATM(TROC)-FCO-OET

Sintetizou-se o composto como na primeira metade do Exemplo 23 a partir de SMO-PHE-(S)ATM(TROC)-FCS-OET (1,56 g) , DMSO (3,5 ml), ácido dicloroacético (0,073 ml) e DCC (3,65 g). Obtiveram-se após cromatografia em gel de sílica (EtOAc:hexano) 1,4 g de produto sob a forma de uma espuma branca. MS, M+ = 919. Os ensaios de RMN eram consistentes com a estrutura proposta. EXEMPLO 34

SMO-PHE-(S)ATM-FCO-OET

Preparou-se o composto como na segunda metade do Exemplo 23 a partir de SMO-PHE-(S)ATM(TROC)-FCO-OET (1,32 g), cloreto de amónio (0,7 g) e pó de zinco (0,4 g). Obtiveram-se, após cromatografia em gel de sílica (EtOAc;hexano (1:1)), 0,7 g de produto sob a forma de uma espuma branca. Os espectros de RMN, IV e de massa são todos consistentes com a estrutura.

Analises:

Calculada: C, 51,68; H, 5,98; N, 11,30

Determinada; C, 51,39; H, 6,05; N, 10,89 EXEMPLO 35

SMO-PHE-ATG(Z)-FCS-AEM, Isómero A O composto foi sintetizado como no Exemplo 1 a partir de SMO-PHE- (0,74 g), HOBT (0,32 g), DCC (0,5 g), e ATG(Z)-FCS-AEM, Isómero A (1,5 g). Obtiveram-se após cromatogra 40

fia em gel de sílica (3-10% MeOH em 1:1 (EtOAc:CH2Cl2) , 1,26 g de produto sob a forma de uma espuma.

Analisada para 0 ,2CH2C12

Calculada: C, 53,72; K, 6,05; N, 11,49

Determinada: C, 53,38; H, 6,03; N, 11,49 EXEMPLO 36

SMO-PHE-ATG-FCS-AEM, Isómero A

Sintetizou-se o composto como no Exemplo 4 a partir de SMO-PHE-ATG(Z)-FCS-AEM, Isómero A (1,0 g), 20% Pd/C (0,25 g), e ácido p-toluenossulfónico (0,6 ). Obtiveram-se 0,1 g de produto, após cromatografia em gel de sílica (5% de MeOH em 1:1 (EtOAc:CH2Cl2)).

Analisada para #H20

Calculada: C, 50,51; H, 6,50; N, 13,45

Determinada: C, 50,46; H, 6,55; N, 12,82

Os espectros de RMN e IV eram consistentes com a estrutura MS, M+ = 815. EXEMPLO 37

SMO-PHE-ATG(Z)-FCS-AEM, Isómero B

Sintetizou-se o composto como no Exemplo 1 a partir de SMO-PHE (0,84 g), HOBT (0,36 g), DCC (0,57 g), e ATG(Z)-FCS-AEM, Isómero B (1,7 g). Obtiveram-se 1,8 g de produto sob a forma de uma espuma após cromatografia em gel de sílica (3-10% de MeOH em 1:1 EtOAc:CH2C12).

Analisada para 0,2CH2C12

Calculada: C, 53,72; H, 6,05; N, 11,60

Determinada: C, 53,41; H, 6,19; N, 11,32

Os dados de RMN e IV eram consistentes com a estrutura. 41

Zrsnass*®**3*5'" EXEMPLO 38

SMO-PHE-ATG-FCS-AEM, Isómero B

Sintetizou-se o composto como no Exemplo 4 a partir de SMO-PHE-ATG(Z)-FCS-AEM, Isómero B (2,5 g), 20% Pd/C (0,5 g) e ácido p-toluenossulfónico (1,5 g). Obteve-se 1,0 g de produto sob a forma de uma espuma após cromatografia em gel de sílica.

Analises:

Calculada: C, 51,62; H, 6,38; N, 13,76

Determinada: C, 51,39; H, 6,56; N, 12,85

Os espectros de RMN e IV eram consistentes com a estrutura. MS, M+ = 815.

INTERMEDIÁRIOS PARA OS EXEMPLOS 1-38 A

ADMSA-PHE

Tratou-se uma solução de PHE (3,3 g) em NaOH IN (20 ml) com uma solução de cloreto de N,N-dimetilsulfamilo (2,3 ml) em THF (20 ml) e agitou-se vigorosamente a 25°C durante 3 horas. Tratou-se em seguida a mistura reaccional com mais NaOH IN (20 ml) e cloreto de N,N-dimetilsulfamilo (2,3 ml) e agitou-se durante mais 3 horas a 25°C. Finalmente adicionaram--se NaOH IN (20 ml) e éter dietílico (80 ml). Agitou-se a mistu ra e separou-se a parte aquosa e acidificou-se a pH 1 por adição de HCl IN (25 ml). Secou-se o produto em MgSO^, e evaporou--se para se obter uma goma que solidificou lentamente (4,0 g). Confirmou-se a estrutura por espectroscopia de RMN.

B

SMO-PHE

Preparado como acima referido, substituindo o 42

cloreto de morfolinossulfamilo (preparado de acordo com o proces so de R. Wegler e K. Bodenbenner, Annallen der Chemie, 624, 25 (1959)) para o cloreto de Ν,Ν-dimetilsulfamilo. 0 produto é um sólido, pf 151-153°C. DMSA-TYR(OME)

Preparado como acima referido substituindo TYR (OMe) por PHE. Isolou-se o produto sob a forma do seu sal de diciclohexilamina, pf 157-159°C. DMSA-TYR(OME)

Preparado como acima referido substituindo TYR (OME) por PHE. A estrutura foi confirmada por espectrosco-pia de RMN. BOC-ATG(Z)

Preparado como. indicado na referência J. Chem. Soc. Perkin Trans. i, p 1227 (1984). A uma solução de 2-aminotiazol-4-ilacetato de etilo (27,4 g) em água (200 ml) foi adicionado í^CO^ at® PH=9) (papel de litmus humedecido). Adicionou-se a esta solução B0C20 (26,0 g) em THF (150 ml) e ajustou-se cintinuamente o pH a 9 com I^COg. Agitou-se a mistura durante 24 horas. Extraiu-se em seguida a solução básica com acetato de etilo (2 x 400 ml). Lavaram-se as fases orgânicas com solução salina (3090 ml) e seca ram-se em MgSO^. A evaporação produziu um óleo castanho que foi recristalizado de acetato de etilo (100 ml) e éter de petróleo (600 ml). Obtiveram-se 23,5 g de um sólido de cor bege (acetato . de etil-N-BOC-2-aminotiazol-4-ilo). Dissolveu-se em seguida es- 43 *

te éster (15,07 g) numa mistura de THF (65 ml), CE^Cl^ (100 ml) e solução saturada de bicarbonato de sódio (700 ml). Adicionou--se a esta solução cloroformato de benzilo (21,3 g) e agitou-se vigorosamente a mistura durante 18 horas. Diluiu-se em seguida a solução com água (100 ml) e acetato de etilo (150 ml). Separou-se a fase orgânica, lavou-se com água (2 x 400 ml), e evapo rou-se a pressão reduzida para se obter um óleo que foi dissolvido em EtOH (150 ml) e tratou-se com uma solução de hidróxido de potássio (14 g) em água (100 ml). Agitou-se a mistura durante 1,5 horas e dilui-se com água (350 ml). Lavou-se a solução com éter (2 x 250 ml) e desprezou-se a solução etérea. Tornou--se a solução aquosa ácida (pH = 3, papel de litmus humedecido) com ácido cítrico e arrefeceu-se para se obter um precipitado. A recolha do sólido obtido produziu 16,8 g do produto.

F BOC-ATM(Z)

Preparado de modo semelhante ao BOC-ATG(Z) a partir de ATM-2HC1 foi preparado como indicado na referência chem. ber., Vol. 97, p 1767 (1964).

Dissolveu-se sódio metálico (0,64 g) em eta-nol (75 ml) e tratou-se a solução com acetamido malonato de die tilo (6,08 g) e agitou-se durante 0,5 horas. Tratou-se esta mis tura com 2-acetamidotiazol-4-il-l-clorometano (5,3 g) e iodeto de sódio (4,17 g). Agitou-se a mistura em azoto durante 24 horas. Separaram-se os sólidos da solução. Trituraram-se os sólidos com água (150 ml). Filtrou-se de novo a mistura para se obter um sólido que se lavou com água (2 x 150 ml). Dissolveu-se este sólido (2,75 g) em ácido clorídrico concentrado (40 ml) e aqueceu-se sob refluxo durante 3 horas.

Evaporou-se a solução em vazio e co-evaporou-se com etanol (2 x 50 ml). Triturou-se o sólido resultante com éter (100 ml) e filtrou-se para se obterem 1,91 g de um produto sob a forma de um sólido branco. 44

G

BOC-ATM(Z)-CAD

Preparou-se o composto como no Exemplo 1 a partir de BOC-ATM(Z) (6,3 g), HOBT (2,02 g), DCC (3,1 g), CAD· •HC1 (4,19 g) e Et^N: (1,5 g). Obtiveram-se 5,7 g de produto sob a forma de uma mistura de diastereómeros com o aspecto de uma espuma branca, pf 95-100°C. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa.

H

ATM(Z)-CAD

Preparou-se o composto saturando uma solução de BOC-ATM(Z)-CAD (5,35 g) em CH2C12 (70 ml) e MeOH (10 ml) com HC1 gasoso. Agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 2 horas e em seguida evaporou-se em vazio até à secura. Dissolveu-se o resíduo em EtOAc (75 ml) e lavou-se sucessivamente com bicarbonato de sódio saturado (2 x 100 ml) e solução salina saturada (100 ml) . Secou-se a fase orgânica em MgSC>4 e evaporou--se em vazio para se obterem 3,8 g do produto sob a forma de uma mistura de diastereómeros com o aspecto de uma espuma amarelo clara, pf 84-91°C. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa.

I

BOC-ATM(Z)-CST-AEM O composto foi sintetizado como no Exemplo 1 a partir de BOC-ATM(Z) (4,21 g), HOBT (1,35 g), DCC (2,06 g) e CST-AEM (3,27 g). Obtiveram-se 4,6 g do produto como uma mistura de diastereómeros com o aspecto de uma espuma branca, pf 97--100°C. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa.

J

ATM(Z)-CST-AEM - 45 -

0 composto foi preparado a partir de ATM(Z) --CAD de BOC-ATM(Z)-CST-AEM (4,4 g). Obtiveram-se 3,78 g do produto como uma mistura de diastereómeros com o aspecto de uma es puma branca, pf 80-83°C. A estrutura foi confirmada por espect' troscopia de RMN e demassa.

K

BOC-ATM(Z)-STA-MBA 0 composto foi sintetizado como no Exemplo 1 a partir de BOC-ATM(Z) (1,0 g), HOBT (0,338 g) DCC (0,516 g), e STA-MBA (0,733 g). Obtiveram-se 1,25 g do produto como uma mistura de diastereómeros com o aspecto de uma espuma branca. A es trutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa.

L

ATM(Z)-STA-MBA O composto foi sintetizado como o ATM(Z)-CAD a partir de BOC-ATM(Z)-STA-MBA (1,25 g). Obtiveram-se 0,9 g do produto como uma mistura de diastereómeros com o aspecto de uma espuma branca. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa.

M

BOC-ATG(Z)-STA-MBA O composto foi sintetizado como no Exemplo 1 a partir de BOC-ATG(Z) (6,1 g), HOBT (2,16 g), DCC (3,3 g), e STA-MBA (3,7 g). Obtiveram-se 8,8 g do produto como uma mistura de diastereómeros com o aspecto de uma espuma branca, pf 86-91 °C. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa.

N

ATG(Z)-STA-MBA 46

0 composto foi preparado como o ATM(Z)-CAD a partir de BOC-ATG(Z)-STA-MBA (3,17 g). Obtiveram-se 2,2 g do produto como uma mistura de diastereómeros com o aspecto de uma espuma amarela, pf 76-83°C. A estrutura foi confirmada por es-pectroscopia de RMN e de massa. 0 BOC-(S)ATM-OBZL.HC1

Tratou-se o éster a(-benzílico do ácido N-BOC--aspártico (40 g, 0,124 mol) em EtOAc (11) a 0°C com N-metil-morfolina (13,8 g, 0,136 mol) e cloroformato de isobutilo (18,6 g, 0,136 mol). Agitou-se a mistura a 0-10°C durante 3 horas. Se parou-se a mistura dos sólidos precipitados e tratou-se com uma solução de diazometano [(a<0,175 mol) recentemente destilado de diazaldeido (53 g)] em éter (^500 ml). Agitou-se a mistura durante 16 horas numa corrente de azoto. Lavou-se a solução com solução salina saturada (500 ml) e evaporou-se em vazio para se obter a diazocetona sob a forma de um óleo escuro. Dissolveu-se este óleo em éter (400 ml) e tratou-se cuidadosamente com HC1 gasoso. O tratamento com o gás parou quando o pH da solução atin giu o valor de 2 (papel de litmus humedecido) aproximadamente durante 2 a 8 minutos. A solução foi em seguida imediatamente tratada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio (600 ml). Lavaram-se as fases orgânicas com solução salina saturada (200 ml) e secaram-se em MgSO^. Evaporaram-se as fases orgânicas em vazio para se obterem 44,4 g ds clorocetona como um sólido escuro. Dissolveu-se este sólido em acetona (225 ml) e tra tou-se em porções com tioureia (7,6 g, 0,1 mol). Agitou-se a mistura ã temperatura ambiente durante 24 horas. Filtrou-se a mistura para recolher o sólido, lavou-se o sólido com acetona (2 x 75 ml) e secou-se em vazio para se obterem 20,6 g do produ to como um sólido branco, pf = 144-146°C. A estrutura foi con-’-firmada por espectroscopia de RMN e de massa.

• P • BOC-(S)ATM(Z) 47

Preparado de modo semelhante ao referido para BOC-ATM(Z) a partir de BOC-(S)ATM-0BZL.HC1 como na referência Chem. Ber., Vol. 97, p. 1767 (1964)

Q

BOC-(S)ATM(Z)-CAD

Adicionou-se BOC-(S)ATM(Z)-0BZL.HC1 (2,06 g) em metanol (35 ml) a uma solução de NaOH (0,6 g) em água (10 ml) Agitou-se a solução â temperatura ambiente durante 4 horas e em seguida levou-se o pH = 6 (Papel de litmus humedecido) com HC1 IN. evaporou-se a solução em vazio e dissolveu-se em DMF (20 ml). Tratou-se esta solução a 0°C sequencialmente com Et^N (1,51 g) , HOBT (o,667 g), DCC (1,03), e CAD (1,22 g). Agitou-se a mistura durante 72 horas. Filtrou-se a solução para se separarem os sólidos e evaporou-se o solvente em vazio. O resíduo obtido da evaporação foi dissolvido em EtOAc (100 ml) que foi lavado sequencialmente com solução saturada de bicarbonato de sódio (100 ml) e solução salina saturada. Secou-se a fase orgânica emMgSO^ e evaporou-se em vazio para se obter uma espuma amarela. A espu ma foi cromatografada em gel de sílica para se obter o produto sob a forma de um sólido branco, 1,2 g. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa.

R (S)ATM(Z)-CAD.2HC1 A BOC-(S)-ATM(Z)-CAD (1,1 g) numa mistura de CI^C^ (75 ml) e MeOH e (15 ml) foi adicionado HC1 (gás) e agitou-se a solução â temperatura ambiente durante 3 horas. Evaporou-se a solução em vazio para se obter o produto, que foi utilizado sem purificação adicional. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa.

S

\ BOC-(S)ATE-OBZL - 48 -

0 composto foi sintetizado como o intermediário OBOC-(S)-ATM-OBZL a partir de 42,2 g de N-BOC-GLU-OBZL, 18,6 g de cloroformato de i-butilo, 13,8 g de N-metil morfolina, e diazometano em excesso. A cromatografia em gel de sílica produziu 15,2 g do produto. A estrutura foi confirmada por espectros copia de RMN e de massa.

T

BOC-(S)ATE(Z)-OBZL 0 composto foi sintetizado como o intermediário BOC-(S)ATM(Z)-OBZL a partir de 14,7 g de BOC-(S)ATE-OBZL, e 15,4 g de Z-Cl. 0 processamento de extracção com EtOAc produziu após evaporação 18,9 g do produto. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN.

U BOC-(S)ATE(Z)

Agitou-se uma mistura de 18,9 g de BOC-(S)--ATE(z)“OBZL e 7 g de NaOH numa mistura de 100 ml de metanol e 20 ml de água durante 6 horas. Evaporou-se a mistura e tratou--se com 100 ml de NaOH IN, e em seguida lavou-se com 100 ml de éter dietílico. Tornou-se a mistura aquosa ácida com HC1 6N e extraiu-se com acetato de etilo (2 x 150 ml). A secagem em MgSO^ e a evaporação produziram 9,3 g do produto. A estrutura foi con firmada por espectroscopia.

BOC-(S)ATE(Z)-CAD

Sintetizou-se o composto da forma referida no Exemplo 1 a partir de 9,3 g de BOC-(S)ATE(Z), 2,7 g de HOBT, 4,12 g de DCC e 4,9 g de CAD. A cromatografia em gel de sílica com acetato de etilo produziu 7,6 g do produto. A estrutura foi . confirmada por espectroscopia de RMN e de massa. 49

w TR0C-PIP.HC1

Adicionou-se gota a gota uma solução de 2,37 ml de Cl3CCH2OCOCl (17,22 mmol) em 65 ml de CH2C12 a uma solução arrefecida de 15,00 g de piperazina (174,13 mmol, um excesso de 10 vezes) em 75 ml de MeOH em atmosfera de azoto e deixou -se em agitação ã temperatura ambiente durante 3 horas. Diluiu--se a mistura reaccional com MeOH e evaporou-se para se obter um sólido húmido. Retomou-se o resíduo em água e extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica em MgSO^ e evaporou--se. Dissolveu-se o óleo resultante em 40 ml de Et20 e tratou--se gota a gota com uma solução de HCl 1,0 M em 40 ml de Et20 em atmosfera de azoto para se obterem 2,45 g do produto sob a forma de um sólido branco. Pf 209-213°C.

X TR0C-SPI-C1

Misturou-se uma solução de 9,75 g de cloridra to de TROC-PIP (32,72 mmol) em 20 ml de água com 40 ml de CH2C12 e arrefeceu-se em gelo, tratou-se gota a gota com uma solução de 48,60 g de NaOCl a 5,25% (34,03 mmol) em água e agitou-se em gelo durante 50 minutos. Separou-se a fase orgânica e secou-se em MgSO^. Adicionou-se a solução resultante a uma solução a 78° C de 30,00 g de SC>2 em 20 ml de CH2C12, e condensou-se uma quan tidade catalítica de Cl2 (6 gotas) na mistura reaccional em atmosfera de azoto. Deixou-se a mistura aquecer à temperatura ambiente durante 24 horas. Evaporou-se o solvente, e repartiu-se o resíduo entre CH2C12 e K2P0^ 0,25 M, tampão pH = 7 e lavou-se com Na2S2C>3 a 10%. Secou-se a fase orgânica em MgSO^ e evaporou -se para se obterem 8,02 g do produto sob a forma de um sólido castanho dourado. A estrutura foi confirmada por espectroscopia cie RMN. 50 \ 1 Ί Jâ

γ

BOC-ATG(Ζ)-CAD

Arrefeceu-se em gelo uma solução de 2,2 g (8 mmol) de cloridrato de CAD, lg (10 mmol) de Et3N, 1,1 g, (8 mmol) de HOBT, e 3,3 g (8 mmol) de BOC-ATG(Z) em 45 ml de DMF e tratou-se com 1,7 g (8 mmol) de DCC em 10 ml de DMF. Passadas 0,5 horas a 0°C, deixou-se a mistura agitar à temperatura ambiente durante 48 horas. Destilou-se a DMF e tratou-se o resíduo com EtOAc. Separou-se a ureia por filtração e lavou-se o resíduo com mais quantidades de EtOAc. Combinaram-se os filtrados e as lavagens, e lavaram-se sucessivamente com água, bicarbonato de sódio saturado, e solução salina. A secagem e a remoção do solvente a pressão reduzida produziu o produto bruto. Pu rificou-se este produto por cromatografia (Si02,/CH30H a 10%) para se obterem 6 g do produto. Confirmou-se a estrutura por es pectroscopia de RMN.

Z ATG(Z)-CAD.HC1

Saturou-se uma solução de 6 g de BOC-ATG(Z)--CAD em 60 ml de CH2C12 com HC1 (g) , e deixou-se em repouso ã temperatura ambiente durante duas horas. Evaporou-se a solução para se obter uma espuma. A estrutura foi confirmada por espectro de RMN 1H e de massa (pico Μ + 1 a 533) . Este material foi utilizado tal e qual para acoplamento.

AA

BOC-(S)ATM(TROC)-FCS-AEM A BOC-(S)ATM(TROC) (2,60 g, 5,63 mmol) e HOBt (0,76 g, 5,63 mmol) em DMF anidra (30 ml) a 0°C foi adicionado DCC (1,16 g, 5,63 mmol) em DMF (10 ml) seguido de FCS-AEM (2,04 g, 5,63 mmol) em DMF (10 ml) e agitou-se a mistura reaccional a . 0°C durante 2 horas antes de se aquecer para a temperatura am- 51

biente. Passadas 16 horas filtrou-se a mistura reaccional e eva porou-se o solvente a pressão reduzida. Retomou-se o resíduo em acetato de etilo (50 ml) e lavou-se com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, água, e solução salina, respectivamen-te. Após secagem (Na2SC>4), evaporou-se o solvente e cromatogra-fou-se o material bruto em gel de sílica eluindo com um ingrediente de 3 a >5% de metanol em CH^C^· Obteve-se o produto co mo uma espuma branca (3,0 g, 66%) e a estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa; MS (FAB): MH+ 807,2.

BB

(S)ATM(TROC)-FCS-AEM

Submeteu-se o BOC-(S)ATM(TROC)-FCS-AEM (2,20 g, 0,27 mmol) , em mistura de CH^C^ (30 ml) e metanol (10 ml) a uma corrente de HC1 gasoso à temperatura ambiente durante 15 mi nutos. Após agitação durante mais vinte minutos, evaporou-se o solvente e retomou-se o resíduo em clorofórmio. Repetiu-se este procedimento por duas vezes mais antes da adição de acetato de etilo ao produto bruto. Lavou-se a solução com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio para se obter a base lovre. Se parou-se a fase aquosa e extraiu-se duas vezes com acetato de etilo. Lavaram-se os extractos orgânicos combinados com solução salina e secaram-se (Na2S04). Após evaporação do solvente obteve-se a amina livre como uma espuma branca (1,90 g, 99%). A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa; MS (FAB) M+ 707,0.

CC

BOC-FCS-AEM A BOC-FCS-(4,10 g, 12,0 mmol) e HOBt (1,58 g, 12.0 mmol) em DMF (100 ml) a 0°C foi adicionado DCC (2,41 g, 12.0 mmol) em DMF (20 ml). Passados 5 minutos, adicionou-se AEM (1,53 ml) em DMF (10 ml) e agitou-se a mistura reaccional duran | te 2 horas antes de se aquecer à temperatura ambiente e conti- 52

nuou-se a agitação durante mais 16 horas. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o solvente em alto vazio. Retomou-se o resíduo em acetato de etilo e lavou-se com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, água e solução salina respectivamente. Após secagem (Na2S0^), evaporou-se o solvente e purificou-se o produ to bruto por cromatografia de coluna em gel de sílica eluindo com 5% a 7% de metanol em diclorometano. Obteve-se o produto co mo uma espuma branca (3,38 g, 63%) e a estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN e de massa: MS(FAB) MH+ (464).

DD

BOC-(S)ATM(TROC)-OBZL

Arrefeceu-se num banho de acetona/gelo uma so lução de 9,56 g (25 mmol) de BOC-(S)ΑΤΜ-OBZL que se suspendeu em C^C^. Adicionaram-se a esta solução 7,74 g de DMAP (2,5 equivalentes) que se dissolveram. Adicionaram-se gota a gota 8,40 ml de TR0C-C1 (12,34 g, 2,3 equivalentes). Passadas 4 horas lava-se a solução sequencialmente com água, HC1 0,1N, solução aquosa saturada de NaCl, e seca-se (MgSO^) e em seguida con centra-se. Cromatografa-se o resíduo (400 g, S1O2 eluindo com hexano/acetato de etilo 1:1. Isola-se o produto como uma espuma incolor, 12,80 g. Espectro de massa m/e = 552.

EE BOC-(S)ATM(TROC)

Dissolveram-se 3,60 g de BOC-(S)ATM(TROC)--OBZL (17,6 mmol) em 100 ml de metanol â temperatura ambiente. Dissolveu-se KOH (1,16 g) (85%, 2,7 equivalentes) em 10 ml de água e adicionou-se ã solução. Agitou-se durante 3,5 horas. Adi cionaram-se mais 50 ml de água, concentrou-se parcialmente a mistura reaccional, e em seguida extraiu-se com EtOAc. Desprezaram-se as fases orgânicas. Tornou-se em seguida ácida a solução aquosa (HC1 6N, o que formou um precipitado), e extraiu-se • de novo com EtOAc. Lavaram-se estas fases orgânicas com solução . aquosa saturada de NaCl, secaram-se (MgSO^) e concentraram-se 53

para se obterem 2,54 g de produto sob a forma de um sólido bran co com a forma de cera. Espectro de massa m/e = 462.

FF

BOC-(S)ATM(TROC)-CAD

Dissolveu-se BOC-(S)ATM(TROC), 27,25 g (58,9 mmol), em EtOAc e arrefeceu-se num banho de gelo. Adicionou-se CAD (14,33 g, 58,9 mmol) formando-se uma suspensão 7,98 g de HOBT e 12,13 g de DCC (um equivalente de cada), e deixou-se a mistura reaccional voltar para a temperatura ambiente durante a noite. Filtrou-se a mistura reaccional e lavou-se o precipitado sequencialmente com solução aquosa a 5% de ácido cítrico, bicarbonato de sódio saturado, cloreto de sódio saturado, em seguida secou-se (MgSO^) e concentrou-se para se obterem 31,0 g do produto. Recristalizou-se este produto em 150 ml de EtOAc ebuliente. O primeiro lote produziu 20,50 g e o segundo lote 2,43 g de produto. Recuperaram-se mais 6,59 g de produto lavando o bolo do filtro original com acetona e concentrando este filtrado. Espectro de massa m/e = 689.

GG

BOC-(S)ATM(TROC)-CDH

Dissolveu-se o BOC-(S)ATM(TROC) (2,50 g, 5,4 mmol) em cloreto de metileno e arrefeceu-se a solução num banho de gelo. Adicionou-se CDH (1,25 g, 0,95 equivalentes), seguido de 0,70 g de HOBT, 1,06 de DCC, e 1,26 g de DMAP. Deixou-se a mistura voltar para a temperatura ambiente durante a noite, em seguida filtrou-se e lavou-se o filtrado sequencialmente com HC1 IN, bicarbonato de sódio saturado, cloreto de sódio saturado, e secou-se (sulfato de magnésio). Após concentração, cromatogra-fou-se o resíduo (Si02/ acetato de etilo) para se obterem 0,76 g de produto. Utilizou-se este produto sem purificação adicional na próxima reacção. 54

SMO-PHE-(S)ATM(Z)

Agitaram-se SMO-PHE-(S)ATM(Z)OBZL (5,6 g) e o,64 g de NaOH numa mistura de 70 ml de metanol e 15 ml de água durante 5 horas. Evaporou-se a mistura em vazio e repartiu-se o resíduo entre 100 ml de acetato de etilo e 100 ml de HCL 2N. Se pararam-se as fases orgânicas e secaram-se em sulfato de magnésio. A evaporação dos solventes produziu 4,5 g do produto.

II (S)ATM(Z)-OBZL.HC1

Dissolveu-se BOC-(S)ATM(Z)-OBZL (10,8 g) em 8 ml de álcool metílico e 50 ml de dicloreto de metileno e tratou-se com ácido clorídrico (g) ã temperatura ambiente durante 3 horas. A evaporação produziu 8,8 g do produto sob a forma de sal do ácido clorídrico. A estrutura foi confirmada por espectros copia de RMN, IV e de massa.

JJ

SMO-PHE-(S)ATM(Z)-OBZL

Sintetizou-se o composto como no Exemplo 1 a partir de 3,14 g de SMO-PHE, 1,35 g de HOBT, 2,06 g de DCC, 2,02 g de Et^N e 4,3 g de (S)ATM(Z)-OBZL. A cromatografia na preparação de Waters 500A e utilizando 5% de metanol/dicloreto de metileno produziu o produto sob a forma de um sólido amarelo, que foi utilizado tal e qual.

KK

TROC-SPI-PHE A uma suspensão de 5,09 g de PHE (30,81 mmol) em 20 ml de metanol foram adicionados 12,97 ml de 5% Me4N0H/me-tanol (30,81 mmol) e agitou-se a mistura até se obter uma solu- * ção. Diluiu-se a mistura com tolueno e evaporou-se para se ob- • ter uma espuma que foi seca a 0,05 mm à temperatura ambiente du 55

rante 2 horas. Ã suspensão da espuma era 30 ml de THF foram adicionadas 60 ml de i-PrOH e seco e 5,49 g de TROC-SPI-C1. Deixou -se a mistura a agitar â temperatura ambiente numa atmosfera de azoto durante 16 horas. Evaporou-se o solvente, e repartiu-se o resíduo entre dicloreto de metileno e ácido clorídrico IN e lavou-se com ácido clorídrico IN. Extraiu-se o produto da fase aquosa em soda cáustica 0,3N que imediatamente foi acidificada a pH = 1 com ácido clorídrico concentrado e reextraída com acetato de etilo. Lavaram-se as fases de acetato de etilo com ácido clorídrico IN, cloreto de sódio saturado, secaram-se em sulfato de magnésio e evaporaram-se para se obterem 3,59 g do produto, sob a forma de um sólido castanho dourado. A estrutura foi confirmada por espectroscopia de RMN.

LL

FCS-AEM

Adicionaram-se 6 ml de TFA à temperatura ambiente a BOC-FCS-AEM (5,17 g) em dicloreto de metileno seco (100 ml) e agitou-se a mistura reaccional durante 6 horas. Após concentração tratou-se o resíduo com solução saturada de bicarbonato de sódio e extraiu-se o produto em acetato de etilo e la vou-se com solução salina e secou-se (Na2S04). A secagem em vazio durante várias horas produziu o composto sob a forma de uma espuma branca, 3,65 g. A estrutura do composto foi confirmada por espectroscopia de RMN.

MM

BOC-(S)ATM(Z)-CYSTA-BHEAEA

Preparou-se o produto como no Exemplo 1 a partir de BOC-(S)ATM(Z) (5 g), HOBT (1,68 g), DCC (2,6 g) e CST--BHEAEA (4,1 g) em DMF (25 ml). Obtiveram-se 3,26 g do produto após cromatografia em gel de sílica (19:1, CH2Cl2:MeOH).

Analisada para C-jgH^gNgOgS.OjSCHC^ . Calculada: C, 52,34; H, 6,78; N, 9,95 56

Determinada: C, 52,52; H, 6,91; N, 9,91 NN

BOC-FCS-OET A uma solução de pó de zinco (15,3 g) em THF (300 ml) foi adicionado um cristal de e levou-se a mistura a refluxo. Adicionou-se a esta mistura, sequencialmente, acetato de bromodifluoro etilo (0,2 ml) seguido de uma mistura do mesmo éter (25,3 g) e (S)-BOC-ciclohexil alanol (20 g) em THF (100 ml) Filtrou-se a mistura para se separar o material insolúvel e eva porou-se o solvente a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo e ahustou-se o pH com solução de KHS04 1M até pH = 2. Esta solução foi filtrada para se separarem os sóli dos e separaram-se as fases orgânicas do filtrado. Extraiu-se a solução aquosa com acetato de etilo (2x) e lavaram-se as fases orgânicas combinadas com solução salina, secaram-se com sulfato de magnésio e evaporaram-se em vazio para se obter um sólido amarelo. Triturou-se o sólido com acetato de etilo a 20% em he-xano para se obter o produto sob a forma de um sólido branco, 6,5 g. Os ensaios de RMN e IV eram consistentes com a estrutura. 00 GCS-OET-HC1 A BOC-FCS-OET (5,3 g) em metanol (250 ml) foi adicionado ácido clorídrico gasoso, num tubo de dispersão de gás até a solução estar saturada. Agitou-se a solução a temperatura ambiente durante 2 horas e evaporou-se a pressão reduzida para se obter o produto sob a forma de sólido branco, 4,5 g. Os valo res dos ensaios de RMN eram consistentes com a estrutura.

PP

BOC-(S)ATM(TROC)-FCS-OET

Sintetizou-se o produto como no Exemplo 1 a 57

partir de BOC-(S)ATM(TROC) (5f90 g) , HOBT (1,73 g) DCC (2,64 g),

Et^N (1,43 ml), e FCS-OET-HC1 (4,03 g). Obtiveram-se, após cro matografia em gel de sílica (4% de metanol/dicloreto de metile-no) 2,55 g do produto. Os valores do espectro de RMN eram consistentes com as estruturas.

QQ

(S)ATM(TROC)-FCS-OET A BOC-(S)ATM(TROC)-FCS-OET (2,54 g) em metanol (25 ml) foi adicionado dicloreto de metileno (200 ml) e saturou-se a solução com ácido clorídrico gasoso. Deixou-se a mis tura em repouso durante a noite e em seguida evaporou-se a pres são reduzida. Repartiu-se este sólido entre acetato de etilo (250 ml) e solução saturada de bicarbonato sódio (200 ml). Lavou-se a fase orgânica com a solução salina e secou-se em sulfato de magnésio. A evaporação dos solventes produziu 1,97 g do produto.

Análises:

Calculada: C, 40,01; H, 4,88; N, 8,48

Determinada: C, 38,03; H, 4,94; N, 8,50

RR e SS

BOC-ATG(Z)-FCS-AEM (Isómero A) RR BOC-ATG(Z)-FCS-AEM (Isómero B) SS

Os compostos foram sintetizados como no Exemplo 1 a partir de BOC-ATG(Z) (3,3 g), HOBT (1,1 g), DCC (1,7 g), e FCS-AEM (2,9 g). Obtiveram-se após cromatografia em gel de sílica (3-5% de metanol/dicloreto de metileno), 1,9 g de Isómero A (eluição rápida) e 1,9 g de Isómero B (eluição lenta). Ambos os compostos deram espectros de RMN, IV e de massa consistentes com as estruturas.

TT

, ATG(Z)-FCS-AEM, Isómero A - 58 -

Claims (3)

1. fc h cr‘ l'L

   Jr 0 composto foi sintetizado como o intermediário H, a partir de BOC-ATG(Z)-FCS-AEM, Isõmero A (1,9 g). Obtiveram-se 1,5 g da base livre que foi usada tal e qual. UU ATG(Z)-FCS-AEM, Isómero B 0 composto foi sintetizado como o intermediário H, a partir de BOC-ATG(Z)-FCS-AEM, Isómero A (1,9 g). Obtiveram-se 1,7 g da base livre que foi usada tal e qual. REIVINDICAÇÕES ia - Processo para a preparação de um composto com a fórmula

   I ou em A de um seu sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável que é H, BOC, BBSP, Z, R

   0 II N-S-, II 0 0 / > " Q N-S-\ /11 59 %

   na qual R e são cada um independentemente hidrogénio ou alquilo inferior de cadeia linear ou ramificada que não é substi-tuido ou que é substituído por um ou dois grupos hidroxi, ou um ou dois grupos amino, ou Q N em que este grupo é um anel sa \ f turado contendo dois a cinco átomos de carbono em que Q é CH2, 0, S ou NR em que R é como acima definido, B esta ausente, é PHE, TYR ou TYR(OME) com a condição de que quando A for BBSP, B estar ausente, C é CST, FCS, FCO, CAD, CDH ou STA, D está ausente, é OH ou NR2R^ em que R2 e R^ são cada um independentemente hidrogénio ou alquilo inferior de cadeia linear ou ramificada ou quando R2 é hidrogénio, R^ pode também ser -(CH„) X em que m é um inteiro de zero a oito e X é -OH,
2. ^ - ^2 XO. ( ' Q N como atrás definido, OR^, NR,-Rg em que R^, R^ e Rg são cada um independentemente hidrogénio, alquilo inferior de cadeia linear ou ramificada substituído ou não substituído por um ou dois grupos hidroxi ou amino com a condição de que quando C for CAD, D estar ausente, E é hidrogénio, Z, BOC, TROC, ou alcanoilo inferior, n é um inteiro de 0 a 2, X e Y são cada um independentemente 0, S, N ou NH e pelo menos um de X e Y deve ser N, não podendo X e Y ser ambos N. caracterizado por: a) fazer-se reagir um aminoácido N-protegido com uma amina desejada para se obter a amida correspondente, b) desproteger-se o grupo N-protector da referida amida e acoplar-se com um ácido desejado para se obter uma amida do ti po dipeptidilo, e c) desproteger-se adicionalmente as funções da cadeia lateral na amida para se obter o composto com a fórmula I pretendido e converter-se, se desejado num seu sal farmaceuticamen-te aceitável. 60 - 23 -

   ^/_Tf Processo de acordo com a reivindicação 1, para se obter um composto em que C é PCS ou FCO caracterizado por: a) fazer-se reagir um éster de aminoácido com protecção TROC na cadeia lateral com um aminoácido N-protegido para se obter um éster de dipéptido que é em seguida hidrolisado para o correspondente ácido de dipéptido, b) acoplar-se o produto da fase a) com uma amina escolhida de entre o grupo consistindo em FCS ou FCO para se obter o com posto TROC-protegido da reivindicação 1, e c) desproteger-se adicionalmente, se desejado, para se obter o composto da reivindicação 1 e converter-se, se desejado, num seu sal farmaceuticamente aceitável.
3. - 3§ - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto em que

   Rv 0 \ « ^ o / \ II A é BOC, BBSP, N-S- ou Q N-S' / " R£ 0 > / II 0 B está ausente, é PHE OU TYR(OMe), C é CST, FCO, FCS ou CAD, D está ausente E é hidrogénio ou alcanoilo inferior, com a condição de que quando C for CAD, D estar ausente, e n é um. - 4ã - 61

   -¾¾¾ i0* ‘ν. J Processo de acordo com a reivindicação 1, ca-racterizado por se obter um composto em que Me Me \ 0 N-S-/ " 0 ou /—\ ? 0 N-S- \ / ” \-/ o B é PHE ou TYR(OMe). - 5§ - processo de acordo com a reivindicação 1, ca-racterizado por se obter um composto em que

   / \ 0 II A é 0 N- -s \-/ II 0 B é PHE / C é CST ou CAD, D está ausente e E é hidrogénio. - 6ã - processo de acordo com a reivindicação 1, ca-racterizado por se obterem compostos em que o péptido é escolhi do de entre: SMO-PHE-ATM(Z)-CAD, SMO-PHE-ATM-CST-AEM, 62

   SMO-TYR (OME) -ATM-CST-AEM, SMO-PHE-ATM-CAD (Isómero B), SMO-TYR(OME)-ATM-CADf SMO-PHE-ATG-CAD, BOC-PHE-ATG-STA-MBA, SMO-PHE-ATM-CST-BHEAEA, SMO-PHE-ATM-FCS-AEM, SMO-PHE-ATM-FCO-AEM, e SPI-PHE-ATM-CAD. - 7ã - Processo de acordo com a reivindicação 1, ca-cacterizado por se obter nomeadamente o composto SMO-PHE-(S)--ATM-CAD (Isómero A). - 8§ - Processo de acordo com a reivindicação 1, ca-racterizado por se obterem nomeadamente os seguintes compostos: BOC-ATM(Z)-CAD e ATM(Z)-CAD BOC-ATM(Z)-CST-AEM e ATM(Z)-CST-AEM. BOC-ATM(Z)-STA-MBA e ATM(Z)-STA-MBA. BOC-ATG(Z)-STA-MBA e ATG(Z)-STA-MBA. BOC-(S)ATM-0BZL.HC1 e BOC-(S)ATE-OBZL. BOC-(S)ATM(Z)-CAD e (S)ATM(Z)-CAD.2HC1. BOC-(S)ATE(Z)-OBZL, BOC-(S)ATE(Z) e BOC-(S)ATE(Z)-CAD. BOC-ATG(Z)-CAD e ATG(Z)-CAD.HC1. BOC-(S)ATM(TROC)-FCS-AEM e (S)ATM(TROC)-FCS-AEM. BOC-(S)ATM(TROC)-OBZL, BOC-(S)ATM(TROC) e BOC-(S)ATM(TROC)-CAD BOC-(S)ATM(TROC)-CDH. . SMO-PHE-(S)ATM(Z) , (S)ATM(Z)-OBZL.HC1 e SMO-PHE-(S)ATM(Z)-OBZL. 63

   BOC-(S)ATM(TROC)-FCS-OET, (S)ATM(TROC)-FCS-OET, BOC-ATG(Z)--FCS-AEM (Isómero A), BOC-ATG(Z)-FCS-AEM (Isómero B) , ATG(Z)-FCS-AEM (Isómero A) e ATG(Z)-FCS-AEM (Isómero B). - 9§ - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade inibidora eficaz da renina de um composto quando preparado de acordo com a reivindicação 1 em associação com um veículo farmaceuticamente aceitável. - 109 - processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade inibidora eficaz de hiperaldosteronismo de um composto quando preparado de acordo com a reivindicação 1 em associação com um veículo farmaceuticamente aceitável. - 119 - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade eficaz para o tratamento da deficiência cardíaca congestiva de um composto quando preparado de acordo com a reivindicação 1 em associação com um veículo farmaceuticamente aceitável. - 12â - 64 Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade eficaz para o tratamento do glaucoma de um composto quando preparado de acordo com a reivindicação 1 em associação com um veículo farmaceuticamente aceitável. - 138 - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade eficaz para o tratamento de doenças causadas por retrovírus incluindo HTLV-I, -II, -III de um composto quando preparado de acordo com a reivindicação 1 em associação com um veículo farmaceuticamente aceitável. A requerente reivindica as prioridades dos pedidos norte-americanos apresentados em 26 de Maio de 1989 e em 25 de Abril de 1990, sob os números de série 357,561 e 511,271, respectivamente. Lisboa, 25 de Maio de 1990

   65