PT900200E - Composições farmacêuticas para prevenção e tratamento de perturbações do sitema nervoso central - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS PARA PREVENÇÃO E TRATAMENTO DE PERTURBAÇÕES DO SITEMA NERVOSO CENTRAL"

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a compostos que possuem propriedades farmacêuticas, e em particular, a compostos úteis para prevenir e tratar as perturbações do sistema nervoso central (SNC). A presente invenção refere-se a um método para tratar doentes que sofrem ou que são susceptíveis dessas perturbações, e em particular, a um método para tratar doentes que sofrem dessas perturbações que são associadas com disfunção do sistema de neurotrans-missores. A presente invenção também refere-se a composições de matéria úteis como composições farmacêuticas na prevenção e tratamento de perturbações do SNC que têm sido atribuídas à disfunção do sistema de neurotransmissores.

As perturbações do SNC são um tipo de perturbação neurológica. As perturbações do SNC podem ser induzidas por fármacos; podem ser atribuídas a predisposição genética, infecção ou trauma; ou podem ser de etiologia desconhecida. As perturbações do SNC compreendem as perturbações neuro-psiquiátricas, as doenças neurológicas e as doenças mentais; e incluem as doenças neurodegenerativas, os distúr- 2 ΡΕ0900200 bios do comportamento, os distúrbios cognitivos e os distúrbios cognitivos afectivos. Existem várias perturbações do SNC cujas manifestações clinicas foram atribuídas à disfunção do SNC (i.e., as perturbações resultantes de níveis inapropriados de libertação de neurotransmissores, as propriedades inapropriadas dos receptores dos neurotransmissores, e/ou a interacção inapropriada entre os neurotransmissores e os receptores dos neurotransmissores). Várias perturbações do SNC podem ser atribuídas a uma deficiência colinérgica, uma deficiência dopaminérgica, uma deficiência adrenégica e/ou uma deficiência serotonérgica. As perturbações do SNC de ocurrência relativamente comum incluem a demência pré-senil (a doença de Alzheimer de início precoce), a demência senil (a demência do tipo Alzheimer), o Parkinsonismo que inclui a doença de Parkinson, a coreia de Huntington, a discinesia tardia, a hipercinesia, a mania, o transtorno do défice de atenção, a ansiedade, a dislexia, a esquizofrenia e o síndrome de Tourette. A demência senil do tipo Alzheimer ((DSTA) é uma doença neurodegenerativa debilitante, atormentando principalmente os idosos; caracterizada por um progressivo declínio intelectual e da personalidade, assim como perda da memória, da percepção, do raciocínio, da orientação e do julgamento. Uma característica da doença é um declínio observado na actuação dos sistemas colinérgicos, e especialmente, uma severa depleção dos neurónios colinérgicos (i.e., neurónios que libertam acetilcolina, que se acredita ser um neurotransmissor envolvido em mecanismos da aprendi- ΡΕ0900200 zagem e da memória). Ver, Jones, et al., Intern. J. Neurosci., Vol. 50, p. 147 (1990); Perry, Br. Med. Buli., Vol. 42, p. 63 (1986) e Sitaram, et al., Science, Vol. 201, p. 274 (1978) . Tem sido observado que os receptores da acetilcolina nicotinica, que ligam a nicotina e outros ago-nistas nicotínicos com elevada afinidade, são deplectados durante a progressão da DSTA. Ver, Giacobini, J. Neurosci. Res., Vol. 27, p. 548 (1990); e Baron, Neurology, Vol. 36, p. 1490 (1986). Como tal, pareceria desejável fornecer compostos terapêuticos que ou activam directamente os receptores nicotínicos em vez da acetilcolina ou actuam para minimizar a perda desses receptores nicotínicos.

Certas tentativas têm sido feitas para tratar a DSTA. Por exemplo, a nicotina tem sido sugerida possuir uma capacidade para activar os receptores nicotínicos colinér-gicos sob administração intensa, e desencadear um aumento no número desses receptores após administração crónica a animais. Ver, Rowell, Adv. Behav. Biol., Vol. 31, p. 191 (1987); e Marks, J. Pharmacol. Exp. Ther., Vol. 226, p. 817 (1983). Também tem sido proposto que a nicotina pode actuar directamente para desencadear a libertação de acetilcolina nos tecidos do cérebro, para melhorar as funções cognitivas, e para aumentar a atenção. Ver, Rowell, et al., J. Neurochem., Vol. 43, p. 1593 (1984); Sherwood, Human Psychopharm., Vol. 8, pp. 155-184 (1993); Hodges, et al., Bio. Of Nic., Edit by Lippiello, et al., p. 157 (1991); Sahakian, et al., Br. J. Psych., Vol. 154, p. 797 (1989); e Patente U.S. NoSs 4.965.074 de Leeson e 5.242.935 de 4 ΡΕ0900200

Lippiello et al. Outros métodos para tratar a DSTA têm sido propostos, que incluem Patente U.S. NoS= 5.212.188 de Caldwell et al. e 5.227.391 de Caldwell et al. e Pedido de Patente Europeia N° 588.917. Um outro tratamento proposto para a DSTA é Cognex, que é uma cápsula que contém clori-drato de tacrina, disponível de Parke-Davis Division of Warner-Lambert Company, que declaradamente preserva níveis existentes de acetilcolina em doentes tratados com ela. A doença de Parkinson (DP) é uma doença neurode-generativa debilitante, presentemente de etiologia desconhecida, caracterizada por tremores e rigidez muscular. Uma caracteristica da doença parece envolver a degeneração dos neurónios dopaminérgicos (i.e., que segregam dopamina) . Um sintoma da doença tem sido observado ser uma perda concomitante de receptores nicotínicos que estão associados com esses neurónios dopaminérgicos, e que se acredita modularem o processo da secreção da dopamina. Ver, Rinne, et al., Brain Res., Vol. 54, pp. 167-170 (1991) e Clark, et al., Br. J. Pharm., Vol. 85, pp. 827-835 (1985). Também tem sido proposto que a nicotina pode melhorar os sintomas da DP. Ver, Smith et al. , Rev. Neurosci., Vol. 3(1), pp. 25-43 (1982) .

Certas tentativas têm sido feitas para tratar a DP. Um tratamento proposto para a DP é Sinemet CR, que é um comprimido de libertação controlada que contém uma mistura de carbidopa e levodopa, disponível de The DuPont Merck Pharmaceutical Co. Um outro tratamento proposto para a DP é 5 ΡΕ0900200

Eldepril, que é um comprimido que contém cloridrato de selefilina, disponível de Somerset Pharmaceuticals, Inc. Um outro tratamento proposto para a DP é Parlodel, que é um comprimido que contém mesilato de bromocriptina, disponível de Sandoz Pharmaceuticals Corporation. Um outro método para tratar a DP e uma variedade de outras doenças neuro-degenerativas foi proposto na Patente U.S. N°. 5.210.076 de Berliner et al. O síndrome de Tourette (ST) é uma perturbação neuropsiquiátrica autossomal dominante caracterizada por uma gama de sintomas neurológicos e de comportamento. Sintomas tópicos incluem (i) o início da perturbação antes da idade de 21 anos, (ii) tiques múltiplos motores e fónicos embora não necessariamente concorrentemente, (iii) variância na fenomenologia clínica dos tiques, e (iv) ocurrência de tiques quase diários durante todo um período de tempo que excede um ano. Os tiques motores geralmente incluem piscar os olhos, contracção espasmódica da cabeça, encolher os ombros e caretas faciais; enquanto que os tiques fónicos ou vocais incluem pigarrear, fungar, gritar, estalidos com a língua e proferir palavras fora do contexto. A patologia do ST presentemente é desconhecida, todavia acredita-se que a disfunção de neurotransmissão está implicada com a perturbação. Ver, Calderon-Gonzalez et al., Intern. Pediat., Vol. 8(2), pp 176-188 (1993) e Oxford Textbook of Medicine, Eds. Weatherall et al., Chapter 21.218 (1987) . 6 ΡΕ0900200

Tem sido proposto que a farmacologia da nicotina é benéfica em suprimir os sintomas associados com o ST. Ver, Devor et al. , The Lancet, Vol. 8670, p. 1046 (1989) ; Jarvik, British J. of Addiction, Vol. 86, pp. 571-575 (1991); McConville et al. , Am. J. Psychiatry, Vol. 148(6), pp. 793-794 (1991); Newhouse et al., Brit. J. Addic., Vol. 86, pp. 521-526 (1991); McConville et al. , Biol. Psychiatry, Vol. 31, pp. 832-840 (1992); e Sanberg et al., Proceedings from Intl. Symp. Nic., S39 (1994). Também tem sido proposto tratar o ST usando Haldol, que é haloperidol disponível de McNeil Pharmaceutical; Catapres, que é clonidina disponível de Boehringer Ingelheim Pharmaceu-ticals, Inc.; Orap, que é pimozida disponível de Gate Pharmaceuticals; Prolixin, que é flufenazina disponível de Apothecon Division of Bristol-Myers Squibb Co., e Klonopin, que é clonazepam disponível de Hoffmann-LaRoche Inc. O transtorno do défice de atenção (TDA) é um transtorno que afecta principalmente crianças, embora o TDA possa afectar adolescentes e adultos. Ver, Vinson, Arch. Fam. Med., Vol. 3(5), pp. 445-451 (1994); Hechtman, J. Psychiatry Neurosci, Vol. 19(3), pp. 193-201 (1994); Faraone et al., Biol. Psychiatry, Vol. 35(6), pp. 398-402 (1994) e Malone at al., J. Child Neuro., Vol. 9(2), pp. 181-189 (1994). Os doentes que sofrem do transtorno tipicamente têm dificuldade em concentrar-se, escutar, aprender e completar tarefas e são agitados, inquietos, impulsivos e facilmente distraídos. O transtorno do défice de atenção com hiperactividade (TDAH) inclui os sintomas do 7 ΡΕ0900200 TDA assim como um nível elevado de actividade (e.g., impaciência e movimento). Tentativas para tratar o TDA têm envolvido a administração de Dexedrina, que é uma cápsula de libertação controlada que contém sulfato de dextroan-fetamina, disponível de SmithKline Beecham Pharmaceuticals; Ritalin, que é um comprimido que contém cloridrato de metilfenidato, disponível de Ciba Pharmaceutical Company; e Cylert, que é um comprimido que contém premolina, disponível de Abbott Laboratories. Além disso, tem sido relatado que a administração de nicotina a um indivíduo melhora a atenção selectiva e prolongada desse indivíduo. Ver, Warburton et al., Cholinergic control of cognitive resources, Neuropsychobiology, Eds. Mendlewicz, et al., pp. 43-46 (1993) . A esquizofrenia é caracterizada por sintomas psicóticos que incluem delírios, comportamento catatónico e alucinações proeminentes, e em última análise resulta em um declínio profundo no afecto psicossocial do doente que sofre disso. Tradicionalmente, a esquizofrenia tem sido tratada com Klonopin, que é disponível como um comprimido que contém clonazepam, disponível de Hoffmann-LaRoche Inc.; Torazina, que é disponível como um comprimido que contém clorpromazina, disponível de SmithKline Beecham Pharmaceuticals; e Clozaril, que é um comprimido que contém cloza-pina, disponível de Sandoz Pharmaceuticals. Esses neuro-lépticos acredita-se serem eficazes como resultado da sua interacção com os caminhos dopaminérgicos do SNC. Além disso, uma disfunção dopaminérgica possuída por indivíduos 8 ΡΕ0900200 que sofrem de esquizofrenia foi proposta. Ver, Lieberman et al., Schizophr. Buli., Vol. 19, pp. 371-429 (1993) e Glassman, Amer. J. Psychiatry, Vol. 150, pp. 546-553 (1993). A nicotina tem sido proposta como sendo eficaz em produzir disfunção dos neurotransmissores associada com esquizofrenia. Ver, Merriam et al., Psychiatr. Annals, Vol. 23, pp. 171-178 (1993) e Adler et al., Biol. Psychiatry, Vol. 32, pp. 607-616 (1992). A nicotina tem sido proposta possuir um número de efeitos farmacológicos. Alguns desses efeitos podem estar relacionados com efeitos após a libertação de neurotransmissores. Ver, por exemplo, Sjak-shie et al. , Brain Res., Vol. 624, pp. 295-298 (1993), onde os efeitos neuroprotec-tores da nicotina são propostos. A libertação de acetilcolina e dopamina por neurónios após a administração de nicotina tem sido relatada por Rowell et al., J. Neurochem., Vol. 43, pp. 1593-1598 (1984); Rapier et al., J. Neurochem., Vol. 50, pp. 1123-1130 (1988); Sandor et al., Brain Res., Vol. 567, pp 313-316 (1991) e Vizi, Br. J. Pharmacol., Vol. 47, pp. 765-777 (1973). A libertação de norepinefrina por neurónios após a administração de nicotina tem sido relatada por Hall et al., Biochem. Pharmacol., Vol. 21, pp. 1829-1838 (1972). A libertação de serotonina por neurónios após a administração de nicotina tem sido relatada por Hery et al., Arch. Int. Pharmacodyn. Ther., Vol. 296, pp. 91-97 (1977). A libertação de glutamato por neurónios após a administração de nicotina tem sido relatada por Toth et al., Neurochem Res., Vol. 17, 9 ΡΕ0900200 ρρ. 265-271 (1992) . Por esse motivo, seria desejável fornecer uma composição farmacêutica que contém um componente activo que possui farmacologia nicotinica, composição farmacêutica que é capaz de desencadear a libertação de neurotransmissores em um doente a fim de prevenir ou tratar uma perturbação neurológico. Além disso, a nicotina declaradamente potência o comportamento farmacológico de certas composições farmacêuticas usadas para o tratamento de certas perturbações do SNC. Ver, Sanberg et al., Pharmacol. Biochem. & Behavior, Vol. 46, pp. 303-307 (1993); Harsing et al., J. Neurochem., Vol. 59, pp. 48-54 (1993) e Hughes, Proceedings from Intl. Symp. Nic., S40 (1994) . Além disso, vários outros efeitos farmacológicos benéficos da nicotina têm sido propostos. Ver, Decina et al., Biol. Psychiatry, Vol. 28, pp. 502-508 (1990); Wagner et al. , Pharmacopsychiatry, Vol. 21, pp. 301-303 (1988);

Pomerleau et al. , Addictive Behaviors, Vol. 9, p. 2 65 (1984); Onaivi et al. , Life Sei., Vol. 54(3), pp. 193-202 (1994) e Hamon, Trends in Pharmacol. Res., Vol. 15, pp. 36-39.

Seria desejável fornecer um método útil para a prevenção e tratamento de uma perturbação do SNC pela administração de um composto nicotinico a um doente susceptivel ou que sofre de uma tal perturbação. Seria altamente benéfico fornecer a indivíduos que sofrem de certas perturbações do SNC com interrupção dos sintomas dessas doenças pela administração de uma composição farmacêutica que possui farmacologia nicotinica e que possui um 10 ΡΕ0900200 efeito benéfico no funcionamento do SNC, mas que não fornece quaisquer significantes efeitos secundários associados (e.g., aumento do ritmo cardíaco e tensão arterial) concomitantes com a interacção desse composto com localizações cardiovasculares. Seria altamente desejável fornecer uma composição farmacêutica que imcorpora um composto que interactua com receptores nicotínicos que possuem o potencial de afectar o funcionamento do SNC, mas que não afecta significativamente esses receptores que possuem o potencial de induzir efeitos secundários indesejáveis (e.g. efeitos cardiovasculares apreciáveis com vasoconstritores e actividade apreciável nas sítios dos músculos esqueléticos.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a compostos de aminas olefínicas aril-substituídas e compostos de aminas acetilénicas aril-substituídas. Um composto representativo é (E)-N-metil-5-(3-piridinil)-4-penten-2-amina. A presente invenção refere-se aos usos dos compostos em causa para a preparação de medicamentos para fornecer prevenção ou tratamento de uma perturbação do sistema nervoso central (SNC). Os medicamentos podem ser usados em métodos que envolvem a administração a um doente de uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção. 11 ΡΕ0900200 A presente invenção, em um outro aspecto, refere-se a uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção. Essa composição farmacêutica incorpora um composto que possui a capacidade de interactuar com sítios relevantes dos receptores nicotínicos de um doente, e por isso possui a capacidade de actuar como uma terapêutica na prevenção ou tratamento de uma perturbação do SNC.

As composições farmacêuticas da presente invenção são úteis para a prevenção e tratamento de perturbações do SNC. As composições farmacêuticas fornecem benefício terapêutico a indivíduos que sofrem de certas perturbações do SNC e exibem manifestações clínicas dessas perturbações em que os compostos nessas composições possuem o potencial de (i) exibir farmacologia nicotínica e afectar os sítios dos receptores nicotínicos no SNC (e.g. actuam como um agonista farmacológico para activar os receptores nicotínicos) , e (ii) desencadear a secreção de neurotrans-missores, e por isso evitar e suprimir os sintomas associados com essas doenças. Além disso, os compostos espera-se possuírem o potencial de (i) aumentar o número de receptores nicotínicos colinérgicos do cérebro do doente, (ii) exibir efeitos neuroprotectores e (iii) não oferecer apreciáveis efeitos secundários adversos (e.g., aumentos significantes na tensão arterial e ritmo cardíaco, e efeitos significantes no músculo esquelético). As composições farmacêuticas da presente invenção acredita-se serem dignas de confiança e eficazes com respeito à prevenção e tratamento das perturbações do SNC. 12 ΡΕ0900200

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA DA FORMA DE REALIZAÇÃO REFERIDA A presente invenção, em um aspecto, refere-se a certos compostos que possuem a fórmula:

Onde X inclui N, C-H, C-F, C-Cl, C-Br, C-I, C-NR'R", C-CF3, C-CN, C-C2R', c-sch3, c-n3, C-S02CH3, C-OR', C-SR', C- C (=0)NR'R" , C-NR1C(=0)R1 , C-(C=0)R', C-C(=0)0R', -CCH2OR', C-OC (=0) R' , COC (=0) NR' R" e C-NR' C (=0) OR' onde R' e R" são individualmente hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono, preferencialmente metilo, etilo ou isopropilo, uma espécie que contém grupos aromáticos ou uma espécie que contém grupos aromáticos substituídos, n é um número inteiro que é 2, 3, 4, 5, 6 ou 7, e mais prefe rencialmente ainda é 2 ou 3; E' e E" individualmente representam hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono (e.g., de cadeia linear ou alquilo ramificado que inclui Ci-C5, por exemplo metilo, etilo ou isopropilo) ou alquilos inferiores halogeno-substituídos (e.g. de cadeia linear ou alquilo ramificado que inclui C2-C5 por exemplo trifluorometilo ou triclorometilo); pelo menos um dos E' é um substituinte não hidrogénio; Z' é 13 ΡΕ0900200 hidrogénio e Z" é metilo; A, A' e A" individualmente representam hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono (e.g. de cadeia linear ou alquilo ramificado, preferencialmente metilo ou etilo) ou halogénio (e.g. F, Cl, Br ou I); a linha tracejada na estrutura representa uma ligação C-C dupla ou uma ligação C-C tripla; m é 1 quando a linha tracejada é uma ligação C-C dupla, e 0 quando a linha tracejada é uma ligação C-C tripla; p é 1 quando a linha tracejada é uma ligação C-C dupla, e 0 quando a linha tracejada é uma ligação C-C tripla; a linha ondulada na estrutura representa uma forma cis (Z) ou trans (E) do composto quando a linha tracejada é uma ligação C-C dupla; e X' representa CH ou CE" quando a linha tracejada é uma ligação C-C dupla, e C quando a linha tracejada é uma ligação C-C tripla. Quando X representa um átomo de carbono ligado a uma espécie de substituinte, essa espécie de substituinte muitas vezes possui um valor de sigma m que é entre cerca de -0,3 e cerca de 0,75, e frequentemente entre cerca de -0,25 e cerca de 0,6 como determinado de acordo com Hansch et al., Chem. Rev., Vol. 91, pp. 165-195 (1991); Em certas circunstâncias quando X representa um átomo de carbono ligado a uma espécie de substituinte, a linha tracejada é uma ligação C-C dupla e o composto possui a forma trans (E), a espécie de substituinte é caracterizada como possuindo um valor de sigma m não igual a 0. Particularmente quando a linha tracejada é uma ligação C-C dupla, o composto possui a forma trans (E) , A, A', A" e Z' são todos hidrogénio, n é 2, e Z" é metilo, a espécie de substituinte é caracterizada como possuindo um valor de 14 ΡΕ0900200 sigma m não igual a 0. Particularmente quando a linha tracejada é uma ligação C-C dupla, o composto possui a forma trans (E) , A, A' , A" e Z" são todos hidrogénio, n é 2, e Z" é metilo, pelo menos um dos E' ou E" é alquilo inferior ou alquilo inferior halogeno-substituido. Além disso, é altamente preferido que A seja hidrogénio, é preferido que A' seja hidrogénio, e normalmente A" é hidrogénio. Geralmente, ambos A e A' são hidrogénio; algumas vezes A e A' são hidrogénio, e A" é metilo ou etilo; e muitas vezes A, A' e A" são todos hidrogénio. Dependendo na identidade e posicionamento de cada E' ou E" individual, certos compostos podem ser opticamente activos. Tipicamente, os valores de cada m e p, e a selecção de E', são tais que até cerca de 4, e frequentemente até 3, dos substituintes designados como E' e E" são substituintes não hidrogénio (i.e., substituintes por exemplo alquilo inferior ou alquilo inferior halogeno-substituido).

Compostos representativos são N-metil-5-(3-piridinil)-4-pentin-2-amina, N-metil-6-(3-piridinil)-5-hexin-3-amina, N-metil-1-(3-piridinil)-l-heptin-4-amina, N-metil-1-(3-piridinil)-l-octin-4-amina, N-metil-1-(3-piridinil)-l-nonin-4-amina, e N-metil-5-(3-piridinil)-3-metil-4-pentin-2-amina.

De interesse particular são os compostos que possuem a fórmula: 15 ΡΕ0900200

onde n, m, p, X, A, A', A", E', E", Z' e Z" são como defenidos atrás, e esses compostos podem possuir a forma cis (Z) ou trans (E).

Compostos representativos são (E) e (Z)-N-metil-4-(3-piridinil)-2-metil-3-buten-l-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-5-hexen-3-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-2-metil-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-3-metil-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-3,1,1-trifluoro-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-4-metil-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-1-(3-piridinil)-l-octen-4-amina, (E) e (Z)-N-metil-1-(3-piridinil)-5-metil-l-hepten-4-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-2,4-dimetil-5-hexen-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-3-metil-5-hexen-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-5-hexen-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-5-metil-5-hexen-3-amina. Para esses Compostos representativos pelo menos um dos m ou p são e/ou pelo menos um dos E' é um substituinte não hidrogénio. 16 ΡΕ0900200 A maneira em que compostos de aminas alifáticas aril-substituídas da presente invenção são sintéticamente produzidos pode variar. A preparação de vários compostos de aminas alifáticas aril-substituídas pode ser levada a cabo usando os tipos de técnicas expostos por Rondahl, Acta Pharm. Suec., Vol. 13, pp. 229-234 (1976). Certos compostos do tipo metanicotina que possuem uma cadeia lateral saturada em vez de uma cadeia lateral olefínica podem ser preparados por hidrogenação dos correspondentes compostos do tipo metanicotina ou os correspondentes precursores acetilénicos. Por exemplo, um composto do tipo di-hidrometanicotina pode ser preparado por hidrogenação de um composto do tipo (E)-metanicotina usando os tipos de procedimentos descritos por Kamimura et al., Agr. Biol. Chem., Vol. 27, N°. 10, pp. 684-688 (1963). A maneira em que compostos de aminas acetilénicas aril-substituídas da presente invenção são sinteticamente produzidos pode variar. Por exemplo, um composto de amina acetilénica aril-substituída, por exemplo um composto do tipo N-metil-4-(3-piridinil)-3-butin-l-amina, pode ser preparado usando uma série de passos sintéticos: (i) conversão do 3-piridinocarboxaldeído a um 1,1-di-halogeno-2-(3-piridinil)-etileno usando um tetra-halogeneto de carbono e trifenilfosfina, (ii) elaboração da cadeia lateral deste intermediário por reacção com butil lítio e óxido de etileno, que fornece o 4-(3-piridinil-3-butin-l-ol, (iii) conversão deste intermediário no seu éster de metanossulfonato, e (iv) deslocamento de mesilato com 17 ΡΕ0900200 metilamina, que fornece um composto do tipo N-metil-4-(3-piridinil)-3-butin-l-amina. As técnicas sintéticas representativas para compostos acetilénicos aril-substituídos são apresentadas na Patente U.S. N°. 5.597.919 (N° . de Série do Pedido 08/364,979), registada a 6 de Janeiro de 1995. os óxidos de alquileno representativos que podem ser empregues incluem óxido de propileno, 1,2-epoxibutano, 1,2-epoxipentano, 1,2-epoxi-hexano, 1,2-epoxi-heptano, (E)-2,3-epoxibutano e (Z)-2,3-epoxibutano. 5-Substituído-3-piri-dinocarboxaldeídos, por exemplo 5-etoxi-3-piridinocarbo-xaldeído, também podem ser empregues. A maneira em que compostos de aminas olefinicas aril-substituídas da presente invenção são sinteticamente produzidos pode variar. Os compostos do tipo (E)-metani-cotina podem ser preparados usando as técnicas apresentadas por Lõffler et al., Chem. Ber., Vol. 42, pp. 3431-3438 (1909) e Laforge, J. A. C. S., Vol. 50, p. 2477 (1928) a partir de compostos do tipo nicotina substituída. Certos compostos do tipo metanicotina 6-substituída podem ser preparados a partir dos correspondentes compostos do tipo nicotina 6-substituída usando os métodos gerais de Acheson et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, Vol. 2, pp. 579-585 (1980). Os precursores requeridos para esses compostos, compostos do tipo nicotina 6-substituída, podem ser sintetizados a partir de ésteres do ácido nicotínico 6-substituído usando os métodos gerais expostos por Rondahl, Acta Pharm. Suec., Vol. 14, pp. 113-118 (1977) . A preparação de certos compostos do tipo metanicotina 5- 18 ΡΕ0900200 substituída pode ser realizada a partir dos compostos do tipo nicotina 5-substituída usando o método geral ensinado por Acheson et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, Vol. 2, pp. 579-585 (1980) . Os compostos do tipo nicotina 5-halogeno-substituída (e.g., compostos do tipo nicotina fluoro e bromo-substituída) e os compostos do tipo 5-aminonicotina podem ser preparados usando os procedimentos gerais expostos por Rondahl, Acta Pharm. Suec., Vol. 14, pp. 113-118 (1977) . Os compostos do tipo 5-trifluoro-metilnicotina podem ser preparados usando as técnicas e materiais apresentados em Ashimori et al., Chem. Pharm. Buli., Vol. 38(9), pp. 2446-2458 (1990) e Rondahl, Acta Pharm. Suec., Vol. 14, pp. 113-118 (1977).

Além disso, a preparação de certos compostos do tipo matanicotina pode ser realizada usando uma reacção de acoplamento catalisada com paládio de um halogeneto aromático e uma olefina terminal que contém um substituinte amina protegida, remoção do grupo protector para obter uma amina primária, e alquilação opcional para fornecer uma amina secundária ou terciária. Em particular, certos compostos do tipo metanicotina podem ser preparados sujeitando um composto de piridina 3-halogeno-substituída, 5-substituída ou um composto de pirimidina 5-halogeno-substituída a uma reacção de acoplamento catalisada com paládio usando uma olefina que possui uma funcionalidade amina protegida (e.g., essa olefina fornecida pela reacção de um sal de ftalimida com 3-halogeno-l-propeno, 4-halogeno-l-buteno, 5-halogeno-l-penteno ou 6-halogeno-l- 19 ΡΕ0900200 hexeno). Ver, Frank et al., J. Org. Chem., Vol. 43(15), pp. 2947-2949 (1978) e Malek et al., J. Org. Chem., Vol. 47, pp. 5395-5397 (1982) . Alternativamente, certos compostos do tipo metanicotina podem ser preparados por acoplamento de um resíduo de aminoácido N-protegido e modificado, por exemplo éster metílico do ácido 4-(N-metil-N-terc-butiloxicarbonilo)aminobutírico, com um composto de aril lítio, como pode ser derivado de um halogeneto de arilo apropriado e butil lítio. A cetona arílica N-protegida é depois reduzida quimicamente ao álcool correspondente, convertida no halogeneto de alquilo, e subsquentemente desidro-halogenada para introduzir a funcionalidade da olefina. A remoção do grupo N-protector depois fornece o composto do tipo metanicotina desejado.

Existe um número de métodos diferentes para fornecer compostos do tipo (Z)-metanicotina. Em um método, compostos do tipo (Z)-metanicotina podem ser sintetizados a partir de compostos do tipo nicotina como uma mistura de isómeros E e Z; e os compostos do tipo (Z)-metanicotina podem depois ser separados por cromatografia usando os tipos de técnicas expostas por Sprouse et al., Abstracts of Papers, p. 32, Coresta/TCRC Joint Conference (1972). Em um outro método, compostos do tipo metanicotina podem ser preparados pela hidrogenação controlada do composto acetilénico correspondente (e.g., um composto do tipo N-metil-4-(3-piridinil)-3-butin-l-amina). Por exemplo, certos compostos do tipo (Z)-metanicotina 5-substituída e certos compostos do tipo (Z)-metanicotina 6-substituída podem ser 20 ΡΕ0900200 preparados a partir de 5-substituído-3-piridinocarbo-xaldeídos e 6-substituído-3-piridinocarboxaldeídos, respec-tivamente. Técnicas sintéticas representativas para compostos do tipo (Z)-metanicotina são apresentadas no N° . de Série do Pedido da Patente U.S. 08/364.979 (Patente U.S. 5.597.919).

Existem ainda outros métodos pelos quais compostos de aminas olefinicas aril-substituidas da presente invenção podem ser sinteticamente produzidas. Um álcool olefínico, por exemplo 5-hexen-2-ol, é condensado com um halogeneto aromático, por exemplo 3-bromopiridina ou 3-iodopiridina. Tipicamente, os tipos de procedimentos apresentados em Frank et al., J. Org. Chem., Vol. 43, pp. 2947-2949 (1978) e Malek et al., J. Org. Chem., Vol. 47, pp. 5395-5397 (1982) que envolvem um acoplamento catalisado por paládio de uma olefina e um halogeneto aromático são usados. O álcool olefínico opcionalmente pode ser protegido como um éter t-butildimetilsilílico antes do acoplamento. A desililação depois produz o álcool olefínico. O produto da condensação do álcool depois é convertido em uma amina usando o tipo de procedimentos apresentados em deCosta et al., J. Org. Chem., Vol. 35, pp. 4334-4343 (1992). Tipicamente, o produto da condensação do álcool é convertido na amina olefínica aril-substituída por activação do álcool usando cloreto de metanossulfonilo ou cloreto de p-toluenossulfonilo, seguida por deslocamento por mesilato ou tosilato usando amoníaco, ou uma amina primária ou secundária Deste modo, quando a amina é amoníaco, um 21 ΡΕ0900200 composto de amina primária olefinica ari-substituida é fornecido; quanda a amina é uma amina primária por exemplo metilamina ou ciclobutilamina, um composto de amina secundária olefinica aril-substituida é fornecido; e quando a amina é uma amina secundária por exemplo dimetilamina ou pirrolidina, um composto de amina terciária olefinica aril-substituída é fornecido. Outros álcoois olefínicos representativos incluem o 4-penten-2-ol, o 4-penten-l-ol, o 5-hexan-3-ol, o 3-metil-3-buten-l-ol, o 2-metil-4-penten-2-ol, o 4-metil-4-penten-l-ol, o 4-metil-4-penten-2-ol, o 1-octen-4-ol, o 5-metil-l-hepten-4-ol, o 4-metil-5-hexen-2-ol, o 5-metil-5-hexen-2-ol, o 5-hexen-2-ol e o 5-metil-5-hexen-3-ol. Álcoois olefínicos trifluorometil-substituídos, por exemplo o 1,1,1-trifluoro-4-penten-2-ol, podem ser preparados a partir do l-etoxi-2,2,2-trifluoroetanol e do aliltrimetilsilano usando os procedimentos de Kubota et al., Tetrahedron Letters, Vol. 33(10), pp. 1351-1354 (1992), ou a partir do éster etílico do ácido trifluoro-acético e do aliltributilestanano usando os procedimentos de Ishihara et al., Tetrahedron Letters, Vol. 34(56), pp. 5777-5780 (1993). Certos álcoois olefínicos são opticamente activos, e podem ser usados como misturas enantioméricas ou como enantiómeros puros a fim de fornecer as formas opticamente activas correspondentes de compostos de aminas olefínicas aril-substituídas. Quando um álcool olefínico alílico, por exemplo álcool metalilíco, reage com um halogeneto aromático, um aldeído olefínico aril-substituído é produzido; e o aldeído resultante pode ser convertido em um composto de amina olefinica aril-substituida por 22 ΡΕ0900200 aminação redutora (e.g., por tratamento que usa uma alquilamina e o cianoboro-hidreto de sódio). Halogenetos aromáticos preferidos são compostos do tipo 3-bromopiridina e compostos do tipo 3-iodopiridina. Tipicamente, grupos substituintes desses compostos do tipo 3-halogenopiridina são tais que esses grupos podem sobreviver ao contacto com esses químicos (e.g., cloreto de tosilo e metilamina) e às condições de reacção experimentadas durante a preparação do composto de amina olefínica aril-substituída. Alternativamente, substituintes por exemplo -OH, NH2 e -SH podem ser protegidos como compostos de acilo correspondentes, ou substituintes por exemplo -NH2 podem ser protegidos como uma funcionalidade da ftalimida.

Os compostos da presente invenção podem ser empregues em uma forma de base livre ou em uma forma de sal (e.g., como sais farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo sais de cloreto, perclorato, ascorbato, sulfato, tartarato, fumarato, citrato, malato, lactato ou aspartato). Um método para fornecer o composto na forma de sal é apresentado na Patente U.S. N°. 5.597.919 (N°. de Série do Pedido 08/364.979). Um outro método para fornecer o composto em uma forma de sal do ácido fumárico envolve (i) dissolver um equivalente do composto em etanol, (ii) misturar a solução com dois equivalentes do ácido fumárico, (iii) concentrar a solução resultante até à secura, (iv) dissolver o sólido resultante em etanol, e depois (v) precipitar a forma de sal do monofumarato do etanol. Um outro método para fornecer o composto em uma forma de sal do ácido fumárico 23 ΡΕ0900200 envolve (i) adicionar uma solução de composto adequadamente puro dissolvido em tetra-hidrofurano a uma solução em refluxo de ácido fumárico em uma mistura de co-solventes tetra-hidrofurano/etanol para formar um precipitado, (ii) aplicar calor e etanol adicional à mistura para dissolver o precipitado, (iii) arrefecer a solução resultante, e inocular a solução se necessário, para causar precipitação do sal, e (iv) filtrar e recolher o sal. A presente invenção é útil em um método para proporcionar a prevenção de uma perturbação do SNC a um doente susceptivel dessa perturbação, e para proporcionar o tratamento a um doente que sofre de uma perturbação do SNC. Em particular, o método compreende administrar a um doente uma quantidade de um composto eficaz para proporcionar algum grau de prevenção da progressão da perturbação do SNC (i.e., proporcionar efeitos de protecção), melhoria dos sintomas da perturbação do SNC, e melhoria da reocorrência da perturbação do SNC. 0 método envolve administrar uma quantidade eficaz de um composto seleccionado das fórmulas gerais que estão apresentadas atrás. A presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica que incorpora um composto seleccionado das fórmulas gerais que estão apresentadas atrás. Compostos opticamente activos podem ser empregues como misturas racémicas ou como enantiómeros. As perturbações do SNC que podem ser tratadas de acordo com a presente invenção incluem a demência pré-senil (início precoce da doença de Alzheimer), a demência senil (demência do tipo Alzheimer), o Parkinsonismo que inclui a doença de 24 ΡΕ0900200

Parkinson, a coreia de Huntington, adiscinesia tardia, a hipercinesia, a mania, o transtorno do défice de atenção, a ansiedade, a dislexia, a esquizofrenia e o sindrome de Tourette. A composição farmacêutica também pode incluir vários outros componentes como aditivos ou adjuntos. Componentes ou adjuntos exemplares farmaceuticamente aceitáveis que são empregues em circunstâncias releventes incluem antioxidantes, agentes de captura de radicais livres, péptidos, factores de crescimento, antibióticos, agentes bacteriostáticos, imunossupressores, agentes tampão, agentes anti-inflamatórios, antipiréticos, aglutinantes de libertação controlada, anestésicos, esteróides e corticos-teróides. Esses componentes podem fornecer benefícios terapêuticos adicionais, actuar para afectar a acção terapêutica da composição farmacêutica, ou actuar com vista a prevenir quaisquer efeitos secundários potenciais que podem ser colocados como um resultado da administração da composição farmacêutica. Em certas circunstâncias, um composto da presente invenção pode ser empregue como parte de uma composição farmacêutica com outros compostos planeados para prevenir ou tratar uma perturbação particular do SNC. A maneira em que os compostos são administrados pode variar. Os compostos podem ser administrados por inalação (e.g., na forma de um aerossol quer nasalmente ou usando artigos de libertação do tipo apresentado na Patente 25 ΡΕ0900200 U.S. N°. 4.922.901 de Brooks et al.); topicamente (e.g., na forme de loção); oralmente (e.g., na forma liquida em um solvente por exemplo um liquido aquoso ou não aquoso, ou em um veiculo sólido); intravenosamente (e.g., em uma solução de dextrose ou salina); como uma prefusão ou injecção (e.g., como uma suspensão ou como uma emulsão em um liquido ou mistura de líquidos farmaceuticamente aceitáveis); ou por via percutânea (e.g., uso de um penso trandérmico). Embora seja possível administrar os compostos na forma de uma substância química activa em grande quantidade, é preferido apresentar cada composto na forma de uma composição ou formulação farmacêutica para administração eficiente e eficaz. Métodos exemplares para administrar esses compostos serão aparentes ao artífice experiente. Por exemplo, os compostos podem ser administrados na forma de comprimido, uma cápsula de gelatina dura ou como uma cápsula de libertação controlada. Como um outro exemplo, os compostos podem ser distribuídos transdermicamente usando os tipos de tecnologias de pensos disponíveis de Ciba-Geigy Corporation e Alza Corporation. A administração das composições farmacêuticas da presente invenção pode ser intermitente, ou a uma velocidade gradual, contínua, contante ou controlada a um animal de sangue quente, por exemplo um ser humano. Além disso, a hora do dia e o número de vezes por dia que a formulação farmacêutica é administrada pode variar. A administração preferencialmente é tal que os componentes activos da formulação farmacêutica interactuam com os sítios dos receptores no corpo do doente que efectuam o funcionamento do SNC. 26 ΡΕ0900200 A dose do composto é essa quantidade eficaz para prevenir a ocurrência dos sintomas da perturbação ou para tratar alguns sintomas da perturbação da qual o doente sofre. Por "quantidade eficaz", "quantidade terapêutica" ou "dose eficaz" quer dizer essa quantidade suficiente para desencadear os efeitos farmacológicos ou terapêuticos desejados, desse modo resultando em prevenção ou tratamento eficaz da perturbação. Desse modo, uma quantidade eficaz de composto é uma quantidade suficiente para passar através da barreira do sangue-cérebro do doente, para ligar os sítios relevantes dos receptores no cérebro do doente, e desencadear efeitos neurofarmacológicos (e.g., desencadear secreção de neurotransmissores, desse modo resultando na prevenção ou tratamento eficaz da perturbação). A prevenção da perturbação manifesta-se pelo atraso do início dos sintomas da perturbação. 0 tratamento da perturbação é manifestado por uma diminuição nos sintomas associados com a perturbação ou uma melhoria da reocorrência dos sintomas da perturbação. A dose eficaz pode variar, dependendo de factores por exemplo a condição do doente, a gravidade dos sintomas da perturbação, e o modo como a composição farmacêutica é administrada. Para doentes humanos, a dose eficaz de compostos típicos geralmente requer administração do composto em uma quantidade de pelo menos cerca de 1, muitas vezes pelo menos cerca de 10, e frequentemente pelo menos cerca de 25 mg/24 hr./doente. Para doentes humanos, a dose 27 ΡΕ0900200 eficaz de compostos típicos requer administração do composto que geralmente não excede cerca de 500, muitas vezes não excede cerca de 400, e frequentemente não excede cerca de 300 mg/24 hr./doente. Além disso, a administração da dose eficaz é tal que a concentração do composto no plasma do doente normalmente não excede 500 ng/ml, e frequentemente não excede 100 ng/ml.

Os compostos da presente invenção possuem a capacidade de passarem através da barreira do sangue-cérebro do doente. Como tal, esses compostos possuem a capacidade de entrar no sistema nervoso central do doente. Os valores de log P de compostos típicos úteis em levar a cabo a presente invenção geralmente são maiores que 0, muitas vezes são maiores que cerca de 0,5, e frequentemente são maiores que cerca de 1. Os valores de log P desses compostos típicos geralmente são menos que cerca de 3,0, e geralmente são menos que cerca de 2,5. Os valores de log P fornecem uma medida da capacidade de um composto para passar através de uma barreira de difusão, por exemplo uma membrana biológica. Ver, Hansch, et al. , J. Med. Chem., Vol. 11, p. 1 (1968).

Os compostos da presente invenção possuem a capacidade de ligar-se a, e causar activação de, receptores nicotínicos colinérgicos do cérebro do doente. Como tal, esses compostos possuem a capacidade de expressar farma-coligia nicotínica, e em particulr, actuar como agonistas nicotínicos. As constantes de ligação de receptores de 28 ΡΕ0900200 compostos típicos úteis em levar a cabo a presente invenção geralmente excedem cerca de 1 nM, e muitas vezes excedem cerca de 5 nM. As constantes de ligação de receptores desses compostos típicos geralmente são menos que cerca de 10 μΜ, muitas vezes são menos que cerca de 1 μΜ, e frequentemente são menos que cerca de 100 nM. As constantes de ligação de receptores fornecem uma medida da capacidade do composto de se ligar a metade dos relevantes sítios dos receptores de certas células do cérebro do doente. Ver, Cheng, et al. , Biochem. Pharmacol., Vol. 22, pp. 3099-3108 (1973) .

Os compostos da presente invenção possuem a capacidade de demomstrar uma função nicotínica por eficazmente desencadearem fluxo de iões através, e secreção de neurotransmissores de, preparações de extremidades dos nervos (i.e., sinaptossomas talâmicos ou estriados). Como tal, esses compostos possuem a capacidade de causar a neurónios revelantes tornarem-se activados, e libertar ou segregar acetilcolina, dopamina, e outros neurotransmissores. Geralmente, os compostos típicos úteis em levar a cabo a presente invenção eficazmente provêem activação relevante de receptores em quantidades de pelo menos cerca de 30 por cento, muitas vezes pelo menos cerca de 50 por cento, e frequentemente pelo menos cerca de 75 por cento, desse máximo fornecido por (S)-(-)-nicotina. Geralmente, os compostos típicos úteis em levar a cabo a presente invenção são mais potentes que a (S)-(-)-nicotina em desencadear activação relevante de receptores. Geralmente, compostos 29 ΡΕ0900200 típicos úteis em levar a cabo a presente invenção eficazmente provêem a secreção da dopmina em quantidades de pelo menos cerca de 50 por cento, muitas vezes pelo menos cerca de 75 por cento, e frequentemente pelo menos cerca de 100 por cento, desse máximo fornecido por (S)-(-)-nicotina. Certos compostos da presente invenção podem fornecer secreção da dopamina em uma quantidade que pode exceder essa máxima fornecida por S-(-)-nicotina. Geralmente, os compostos típicos úteis em levar a cabo a presente invenção são menos potentes que a (S)-(-)-nicotina em desencadear secreção de neurotransmissores, por exemplo secreção de dopamina.

Os compostos da presente invenção, quando empregues em quantidades eficazes falta-lhes a capacidade de desencadear activação dos receptores nicotinicos do músculo humano em qualquer grau significante. Com relação a isso, os compostos da presente invenção demonstram pobre capacidade para causar fluxo de iões isotópicos de rubídio através de receptores nicotinicos em preparações de células derivadas de preparações de músculo. Desse modo, esses compostos exibem contantes de activação de receptores ou valores de EC50 (i.e., que fornecem uma medida da concentração de composto necessária para activar metade dos revelantes sítios dos receptores do músculo esquelético de um doente) que são extremamente altas (i.e., maiores que cerca de 1 mM) . Geralmente, compostos típicos úteis em levar a cabo a presente invenção activam o fluxo de iões isotópicos de rubídio em menos de 5 por cento desse máximo fornecido por (S)-(-)-nicotina. 30 ΡΕ0900200

Os compostos da presente invenção, quando empregues em quantidades eficazes são selectivos a certos receptores nicotinicos revelantes, mas não causam activação significante dos receptores associados com efeitos secundários indesejáveis. Por isto se entende que uma dose particular de composto que resulta na prevenção e/ou tratamento de uma perturbação do SNC, é essencialmente ineficaz em desencadear activação de certos receptores nicotinicos do tipo ganglionar. Esta selectividade dos compostos da presente invenção contra esses receptores responsáveis por efeitos secundários cardiovasculares é demonstrada por uma falta da capacidade desses compostos para activar a função nicotinica de tecido cromafim supra-renal. Como tal, esses compostos possuem pobre capacidade para causar fluxo de iões isotópicos de rubidio através de receptores nocotinicos em preparações de células derivadas da glândula supra-renal. Geralmente, compostos típicos úteis em levar a cabo a presente invenção activam o fluxo de iões isotópicos de rubidio em menos de 10 por cento, muitas vezes em menos de 5 por cento, desse máximo fornecido por S (-)nicotina.

Os compostos da presente invenção, quando empregues em quantidades eficazes são eficazes em fornecer algum grau de prevenção da progressão das perturbações do SNC, melhoria dos sintomas das perturbações do SNC, e melhoria até certo grau da reocorrência das perturbações do SNC. Contudo, essas quantidades eficazes desses compostos não 31 ΡΕ0900200 são suficientes para desencadear quaisquer efeitos secundários apreciáveis, como é demonstrado por efeitos diminuídos em preparações que se acredita reflectirem efeitos no sistema cardiovascular, ou efeitos no músculo esquelético. Como tal, a administração de compostos da presente invenção fornece uma janela terapêutica em que o tratamento de certas perturbações do SNC é fornecido, e os efeitos secundários são evitados. Isto é, uma dose eficaz de um composto da presente invenção é suficiente para proporcionar os efeitos desejados no SNC, mas é insuficiente (í.e., não está a um nível suficientemente elevado) para proporcionar efeitos secundários indesejáveis. Preferencialmente, a administração eficaz de um composto da presente invenção que resulta no tratamento das perturbações do SNC ocorre na administração de menos de 1/5, e muitas vezes menos de 1/10, essa quantidade suficiente para causar quaisquer efeitos secundários em grau significante. O exemplo que se segue é fornecido a fim de ilustrar mais longe várias formas de realização da invenção mas não devia ser interpretado como limitando o seu âmbito. A não ser que mencionado do contrário, todas as partes e percentagens são por peso.

EXEMPLO A amostra N°. 1 que não faz parte da presente invenção é 5-etoxi-metanicotina ou (E)-N-metil-4-[3-(5- 32 ΡΕ0900200 etoxipiridin)il]-3-buten-l-amina, que foi preparada essencialmente de acordo com as técnicas que se seguem: 3-Bromo-5-etoxipiridina 3,5-Dibromopiridina (98%) foi comprada na Lancas-ter Chemical Compny. Etóxido de sódio (96%) e N,N-dimetil-formamida (DMF) (99,9+%, grau HPLC) foram compradas de Aldrich Chemical Company. Sob uma atmosfera de azoto, uma mistura de 3,5-dibromopiridina (5,00 g, 21,1 mmol), etóxido de sódio (2,87 g, 42,2 mmol), e DMF (10 mL) foi agitada e aquecida a 65°C durante 15 h. A mistura foi despejada em água (70 mL), e éter dietilico anidro (155 mL) foi adicionado. Por causa de sólidos insolúveis, foi necessário filtrar ambas as fases. A camada aquosa foi separada e extraída com éter (2 x 25, 3 x 50 mL) . Os extractos combinados de éter foram secos (MgSCq) , filtrados, e concentrados por eveporação rotativa, produzindo um xarope castanho escuro. O resíduo castanho foi purificado por destilação no vácuo, produzindo 0,76 g (17,9%) de um óleo, p.e. 105°C a 5 mm Hg. ΧΗ RMN (CDC13) : δ 9,12 (br s, 1H) , 8,83 (br s, 1H), 8,42 (dd, 1H), 4,41 (q, 2H) , 1,42 (t, 3H) . 13C RMN (CDC13) : δ 142,72, 136, 50, 123, 78, 64,31, 14,57. (E)-4-[3-(5-Etoxipiridin)il]-3-buten-l-ol 3-Buten-l-ol (99%) foi comprado na Aldrich Chemical Company. Sob uma atmosfera de azoto, uma mistura de 3-buten-l-ol (144 mg, 2,0 mmol), 3-bromo-5-etoxipiridina (424 33 ΡΕ0900200 mg, 2,1 mmol), acetato de paládio (II) (5 mg, 0,02 mmol), tri-o-tolilfosfina (25 mg, 0,08 mmol), trietilamina (0,5 mL) , e acetonitrilo (1,0 mL) foi agitada e aquecida sob refluxo durante 21 h. Ao arrefecer, a mistura foi diluída com água (10 mL) e extraída com cloreto de metileno (2x5 mL) . Os extractos combinados de cloreto de metileno foram secos (Na2S04> , filtrados, e concentrados via evaporação rotativa para fornecer uma goma amarelo escuro (423 mg). A purificação por cromatografia em coluna de sílica gel, eluição com metanol (2—>8%) em acetato de etilo produziu 256 mg (66,3%) de um óleo quase incolor. 1H RMN (CDCI3) δ 8,15 (s, 1H), 8 ,12 (s, 1H), 7,14 (dd, 1H), 6,44 (d, 1H) , 6,32-6,22 (dt, 1H) , 4,06 (q, 2H), 3,77 (t, 2H), 2,49 (m, 2H), 1,42 (t, 3H) . 13C RMN (CDCI3) : δ 155,08, 140,48, 136,69, 133,46, 129,22, 129,00, 117, 43, 63,87 , 61,85, 36,43, 14,73. (E)-N-metil-4-[3-(5-etoxipiridin)il]-3-buten-l-amina

Sob uma atmosfera de azoto, uma solução fria (0°C), em agitação de (E)-4-[3-(5-etoxipiridin)il]-3-buten-l-ol (240 mg, 1,24 mmol), cloreto de metileno (1 mL) , e piridina (1 gota) foi tratada com cloreto de tosilo (260 mg, 1,36 mmol). A mistura foi deixada aquecer à temperatura ambiente. Depois de agitação durante 12 h, a solução foi concentrada por evaporação rotativa. O resíduo resultante foi dissolvido em metanol (3 mL) e metilamina aquosa a 40% (3 mL) foi adicionada. A solução foi agitada 5 h à temperatura ambiente e foi depois concentrada por 34 ΡΕ0900200 evaporação rotativa, produzindo o produto bruto (593 mg). 0 residuo foi repartido entre NaOH 1M (2 mL) e clorofórmio (5 mL). A camada de clorofórmio foi separada, lavada com água (2 mL) , seca (Na2SC>4) , filtrada, e concentrada via evaporação rotativa para fornecer um óleo escuro (276 mg) . 0 óleo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel, eluição com trietilamina-metanol (2,5:97,5). As fracções seleccionadas foram combinadas e concentradas via evaporação rotativa para fornecer 87 mg (34,0%) de um óleo castanho claro, que escureceu rapidamente. 1H RMN (CDCI3) : δ 8,14 (d, 1H, J=1,8 Hz), 8,12 (d, 1H, J=2,7 Hz), 7,13 (dd, 1H, J=2,8, 1,7 Hz), 6,40 (d, 1H, J=16,0 Hz), 6,29-6,19 (dt, 1H, J=16,0, 6,8 Hz), 4,06 (q, 2H, J=7,0 Hz), 2,72 (t, 2H, J=6,8 Hz), 2,44 (s, 3H), 2,43 (dt, 2H, J=6,8 Hz), 1,76 (br s, 1H) , 1,41 (t, 3H, J=7, 0 Hz). 13C RMN (CDC13) : δ 155,07, 140,48, 136,57, 133,59, 130,65, 128,09, 117,41, 63,85, 50,94, 36,14, 33,30, 14,72. A amostra N° . 2 é (E)-N—metil-5-(3-piridinil)-4-penten-2-amina, que é preparada essencialmente de acordo com as técnicas que se seguem: 5-(3-Piridinil)-4-penten~2-ol: 4-Penten-2-ol foi comprado na Aldrich Chemical Company. Sob uma atmosfera de azoto, uma mistura de 3-bromopiridina (3,0 g, 19 mmol), 4-penten-2-ol (1,69 g, 19,6 mmol), acetato de paládio (II) (42,6 mg, 0,19 mmol), tri-o-tolilfosfina (116 mg, 0,38 mmol), e trietilamina (3,85 g, 35 ΡΕ0900200 38 mmol) foi agitada a 90°C durante 16 h. Trietilamina (1,45 g, 14 mmol) foi adicionada à mistura castanha que foi deixada a agitar uma hora adicional. A mistura foi diluída com cloreto de metileno (20 mL) e água (20 mL) . A fase aquosa foi separada e extraída com cloreto de metileno (2 x 10 mL) . As fases orgânicas combinadas foram lavadas com 25 mL de água, secas com Na2S04, filtradas, e concentradas por evaporação rotativa para fornecer o composto como um óleo amarelo escuro (3,05 g, 98%). A purificação do material foi feita por cromatograf ia em coluna de sílica gel (225 g) eluição com EtOAc-MeOH (4:1). As fracções combinadas que contêm 5-(3-piridinil)-4-penten-2-ol, como determinadas por análise de TLC produziram 2,69 g (88,2%) de um óleo amarelo. TLC-(EtOAc-MeOH, 4:1): Ri=0,60. ΧΗ RMN (CDC13, 300 MHz) ) : δ 8,55 (d, 1H) , 8,42 (dd, 1H) , 7,67 e 7,64 (dt, 1H), 7,23-7,18 (m, 1H), 6,44 (d, 1H), 6,33 e 6,27 (dt, 1H), 3,95 (m, 1H), 2,47-2,3 (m, 2H), 1,25 (d, 3H). (E)-N-metil-5-(3-piridinil)-4-penten-2-amina

Sob uma atmosfera de azoto, cloreto de metanossulfonilo (2,02 g, 17,7 mmol) foi adicionado gota a gota a uma solução gelada em agitação de 5-(3-piridinil)-4-penten-2-ol (2,62 g, 16,1 mmol), trietilamina (3,25 g, 32,1 mmol) e tetra-hidrofurano (THF) (5 mL). Depois de uma hora de agitação, THF adicional (12 mL) e cloreto de metanossulfonilo (184 mg, 1,6 mmol) foram adicionados. A mistura foi deixada a agitar 16 h adicionais. O material castanho escuro foi dissolvido em água (50 mL) , extraido 36 ΡΕ0900200 com CHCI3 (3 x 50 mL) , seco (Na2SC>4) , filtrado, e concentrado para fornecer um mesilato (3,12 g, 80,6%) como um óleo amarelo. Metilamina (102 mL) foi adicionada ao mesilato (2,55 g, 10,6 mmol), e a mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 17 h. A solução foi basificada com NaOH (uma pastilha) e extraída com éter dietílico (4 x 50 mL) . Os extractos de éter combinados foram secos (Na2SC>4), filtrados e concentrados em um xarope amarelo. Água (50 mL) foi adicionada ao resíduo. O pH foi ajustado a 8,27 com HC1 concentrado, e a solução foi extraída com CH2CH2 (3 x 25 mL) para remover impurezas. A camada aquosa foi separada, o pH foi ajustado a 13,0 usando uma solução de NaOH a 50% e a solução resultante foi extraída com éter metílico terc-butílico (EMTB) (5 x 25 mL) . As camadas de EMTB combinadas foram secas (Na2S04) , filtradas, e concentradas por evaporação rotativa para produzir 668 mg de um óleo amarelo. O óleo (500 mg) foi adicionalmente purificado por destilação a vácuo para fornecer 184,8 mg de um óleo, p.e. 80°C a 0,05 mm de Hg. Purificação adicional por ajustamento de pH e extracção com EMTB e processamento como descrito atrás produziu 127 mg (6,9 %) de um . óleo amarelo. 3H RMN (CDCI3 , 300 MHz) : δ 8, 55 (d, 1H , J =2, 1 Hz, H-2) , 8, 41 (dd f 1H, J= 1, 6, 4,8 Hz , H -6), 7,66 e 7, , 63 (dt, 1H, J=2 , 0, 8, 1 Hz, H -4) , 7,20 (m, 1H, J=4, 8, 1, 5, 8,1 H [z, H· -5) , 6,40 (d, 1H, J=15 ,9 Hz, H- 5'), 6,28 e 6, 23 (dt, 1H, J=15 , 9, 7, 0 Hz, H- -4') , 2, 68 (m, 1H, II 2 Hz, H- -2') , 2,41 (s, , 3H, N- -Cl3) , 2,39- -2,22 (m, 2H, II 2, 7, 0 Hz, H- 3') , 1,41 D (br s, 1H, - -NH) , 1,08 (d, 3H, II 2 Hz, H- -1' ). 13C RMN (CDCI3, 75 MHz ) : δ 148,2 (C -6) , 37 ΡΕ0900200 148,0 (C— 2) , 133,0 (C-3) , 132,5 (C-4), 130,0 (04'), 128,8 (C — 5'), 123,3 (C —5), 54,6 (C-2'), 40,5 (C-3'), 34,0 (C-l'), 19,9 (N-CH3) . El-MS: 175 (M+) . A amostra N°. 3 que não faz parte da presente invenção é 5-metoxi-metanicotina ou (E)-N-metil-4-[3(5-metoxipiridin)il]-3-buten-l-amina, que foi preparada essencialmente de acordo com as técnicas que se seguem: 3- Bromo-5-metoxipiridina

Este composto foi preparado usando o procedimento geral de Comins et al, J. Org. Chem., Vol. 55, pp. 69-73 (1990). 4- [(terc-Butildimetilsilil)oxi]-1-buteno

Sob uma atmosfera de azoto, a uma solução fria (0°C), em agitação de 3-buten-l-ol (2,16 g, 30,0 mmol), piridina (9 mL), e cloreto de metileno (30 mL) foi adicionado cloreto de terc-butildimetilsililo (4,53 g, 30,1 mmol) comprado na Aldrich Chemical Company. 0 banho de gelo foi removido e a mistura foi deixada a agitar 1 h à temperatur ambiente. A mistura, que contém um precipitado branco, foi despejada em água (60 mL) e agitada. A camada de cloreto de metileno foi separada da camada aquosa, e a camada aquosa extraída com cloreto de metileno (30 mL) . Os dois extractos orgânicos resultantes foram combinados, lavados duas vezes com água, secos (Na2S04) , filtrados, e 38 ΡΕ0900200 evaporados para fornecer 8,94 g do produto bruto. A destilação a vácuo produziu várias fracções, a fracção com p.e. 80-82°C a 35 mm de Hg foi recolhida para fornecer 3,14 g (56,3%) do produto como um óleo. ’ή RMN (CDCI3) : δ 5,88-5,73 (m, 1H) , 5, 08-4, 98 (m, 2H) , 3,64 (t, 2H) , 2,29-2,22 (m, 2H), 0,87 (s, 9H) , 0,03 (s, 6H) . (E)-4-[(terc-Butildimetilsilil)oxi]-1-[3-(5-metoxipiri-din)il]-1-buteno

Sob uma atmosfera de azoto, uma mistura de 4-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-1-buteno (745 mg, 4,0 mmol), 3-bromo-5-metoxipiridina (790 mg de 90% de pureza, 4,2 mmol), acetato de paládio (II) (10 mg, 0,045 mmol), tri-o-tolilfosfina (50 mg, 0,16 mmol), trietilamina (1,0 mL) , e acetonitrilo (2,0 mL) foi agitada e aquecida sob refluxo durante 20 h. Ao arrefecer, a mistura foi diluída com água (20 mL) e extraída com cloreto de metileno (2 x 15 mL). Os extracto de cloreto de metileno combinados foram lavados com água, secos (Na2SC>4) , filtrados, e concentrados via evaporação rotativa para fornecer um óleo castanho (1,25 g, rendimento quantitativo). (E)-4-[3-(5-Metoxipiridin)il]-3-buten-l-ol

Uma solução de (E)-4-[(terc-butildimetilsilil)-oxi]-1-[3-(5-metoxipiridin)il]-1-buteno (1,25 g, 4,00 mmol) em etanol (5 mL) foi tratada à temperatura ambiente com HC1 39 ΡΕ0900200 1Μ (5 mL) . A solução foi agitada durante 20 min a depois concentrada via evaporação rotativa. Depois de secagem adicional a alto vácuo, o resíduo foi tratado com uma solução aquosa, saturada de NaHC03 (5 mL) e repartido entre água (20 mL) e éter (30 mL). A camada aquosa foi separada, saturada com NaCl, e extraída com éter (20 mL). Os extractos de éter combinados foram secos (Na2S04) , filtrados, e depois concentrados por evaporação rotativa para fornecer um óleo amarelo, viscoso (632 mg) . O produto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel, eluição com metanol (3—>12%) em acetato de etilo. As fracções seleccionadas foram combinadas e concentradas via evaporação rotativa para fornecer 408 mg (56,9%) de um óleo quase incolor. ΧΗ RMN (CDCI3) : δ 8,14 (s, 1H) , 8,16 (s, 1H), 7,15 (dd, 1H), 6,32 (d, 1H), 6,33-6,23 (dt, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,77 (t, 2H), 2,53-2,48 (m, 2H). (E)-N-Metil-4-[3-(5-metoxipiridin)il]-3-buten-l-amina

Sob uma atmosfera de azoto, uma solução de (E)-4-[3-(5-metoxipiridin)il]-3-buten-l-ol (387 mg, 2,16 mmol), cloreto de metileno (1 mL) , e piridina (2 gotas) foi arrefecida a (0°C) . Cloreto de tosilo (433 mg, 2,27 mmol) foi depois adicionado, e a solução foi deixada a aquecer até à temperatura ambiente. Depois de agitação durante 12 h, a solução foi concentrada por evaporação rotativa até uma goma amarelo claro (897 mg) . 0 resíduo gomoso foi dissolvido em metanol (4 mL) e metilamina aquosa a 40% (4 mL) foi adicionada. A solução foi agitada 6 h à temperatura 40 ΡΕ0900200 ambiente e foi depois concentrada por evaporação rotativa. Secagem adicional a alto vácuo produziu uma goma castanha (936 mg) . 0 resíduo foi repartido entre NaOH 1M (25 mL) e éter-THF (1:1) (50 mL). A camada aquosa foi separada e extraída com éter-THF (1:1) (25 mL). Os extractos orgânicos combinados foram secos (Na2S04) , filtrados, e concentrados via evaporação rotativa para fornecer um óleo castanho escuro (432 mg). O óleo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel, eluição com trietilmina-metanol (2,5:97,5). As fracções seleccionadas foram combinadas e concentradas via evaporação rotativa para fornecer 180 mg (43,4%) de um óleo cor-de-laranja escuro. ΧΗ RMN (CDC13) : δ 8,16 (d, 1H, J=1,8 Hz), 8,13 (d, 1H, J=2,8 Hz) f 7,14 (dd, 1H, J=l, 9 Hz), 6,4] - (d, 1H, J = 16, ,0 Hz), 6,31-6, 21 (dt, 1H, \—1 II ,0, 6,9 Hz) , 3, 84 (s, 3H), 2, 73 (t, 2H, J=6, 8 Hz) , 2,45 (s, 3H) , 2,42 (dt, 2H, J=6,8, 1,] L Hz), 1,62 (br s , 1H) . 13C RMN (CDC13): δ 155,69, 140, 64, 136,19, 133,( 83, , 130 ,99, 127, 94, 116,70, 55, 51, 51,09, 36, 35, 33,51.

Para fins de comparação, a Amostra N°. C-l foi fornecida. Esta amostra é (S)-(-)-nicotina, que tem sido relatada ter demonstrado um efeito positivo no tratamento de várias perturbações do SNC.

Para fins de comparação, a Amostra N°. C-2 é (E)-metanicotina que foi fornecida usando geralmente as técnicas apresentadas por Laforge, J. A. C. S., Vol. 50, p. 2477 (1928). 41 ΡΕ0900200

Determinação da ligação de compostos a sítios relevantes dos receptores

Ratos (Sprague-Dawley) foram mantidos em um ciclo luz/escuro de 12 h e foi-lhes permitido acesso livre a água e alimento fornecido por Wayne Lab Blox, Madison, W1. Os animais usados nos presentes estudos pesaram 200 até 250 g. As preparações de membrana cerebral foram obtidas de tecido cerebral ou de machos ou de fêmeas.

Os ratos foram mortos por decapitação a seguir a anestesia com CO2 a 70%. Os cérebros foram removidos e colocados em uma plataforma gelada. O cerebelo foi removido e o restante tecido foi colocado em 10 volumes (peso:volume) de tampão gelado (Krebs-Ringers HEPES: NaCl, 118 mM; KC1, 4,8 mM; CaCl2, 2,5 mM; MgS04, 1,2 mM; HEPES, 20 mM; pH até 7,5 com NaOH) homogeneizado com um triturador de tecidos de vidro-Teflon. O homogenato resultante foi centrifugado a 18.000 x g durante 20 min. e o sedimento resultante foi ressuspenso em 20 volumes de água. Depois de 60 min. de incubação a 4°C, um novo sedimento foi recolhido por centrifugação a 18.000 x g durante 20 min. Depois de ressuspensão em 10 volumes de tampão, um novo sedimento final foi outra vez recolhido por centrifugação a 18.000 x g durante 20 min. Antes de cada passo de centrifugação, a suspensão foi incubada a 37°C durante 5 min. para promover hidrólise de acetilcolina endógena. O sedimento final foi coberto com tampão e armazenado a -70°C. No dia do ensaio, esse sedimento foi descongelado, resssuspenso em tampão e centrifugado a 18.000 x g durante 20 min. O sedimento 42 ΡΕ0900200 obtido foi ressuspenso em tampão até uma concentração final de aproximadamente 5 mg de proteína/mL. A proteína foi determinada pelo método de Lowry et al., J. Biol. Chem., Vol. 193, pp. 265-275 (1951), usando soroalbumina bovina como o padrão. A ligação de L-[3H]nicotina foi medida usando uma modificação do método de Romano et al. , Science, Vol. 210, pp. 647-650 (1980) como descrito previamente por Marks et al., Mol. Pharmacol., Vol. 30, PP. 427-436 (1986). A L-[3H]nicotina usada em todas as experiências foi purificada cromatograficamente pelo método de Romm, et al., Life Sei., Vol. 46, pp. 935-943 (1990). A ligação de L-[3H] nicotina foi medida usando uma incubação de 2 hr. a 4°C. As incubações continham cerca de 500 ug de proteína e foram conduzidas em tubos de ensaio de polipropileno de 12mm x 75 mm em um volume final de incubação de 250 uL. O tampão de incubação foi Krebs Ringers HEPES que contém 200 mM de tampão TRIS, pH 7,5. A reacção de ligação foi determinada por filtração da proteína que contém ligando fixado aos filtros de fibra de vidro (Sistemas de Micro-Filtração) que tinha sido embebida em tampão que contém 0,5 por cento de polietilenoimina. A filtração a vácuo foi -50 até -100 torr. Cada filtro foi lavado cinco vezes com 3 mL de tampão gelado. A aparelhagem de filtração foi arrefecida até 2°C antes de usar e foi mantida fria ao longo do precesso de filtração. A ligação não específica foi determinada por inclusão de 10 uM de nicotina não radioactiva nas incubações. 43 ΡΕ0900200 A inibição da ligação de L-[3H]nicotina por compostos do teste foi determinada por inclusão de uma das oito concentrações diferentes do composto do teste na incubação. Os perfis de inibição foram medidos usando 10 nM de L-[3H] nicotina e os valores de IC50 foram estimados como a concentração do composto que inibiu 50 por cento da ligação especifica de L-[3H]nicotina. As constantes de inibição (valores Ki), registadas em nM, foram calculadas a partir dos valores de IC50 usando o método de Cheng et al., Biochem. Pharmacol., Vol. 22, pp. 3099-3108 (1973).

Determinação da Libertação de Dopamina A libertação de Dopamina foi medida pela preparação de sinaptossomas a partir da área estriada do cérebro de rato obtida de ratos Sprague-Dawley geralmente de acordo com os procedimentos apresentados por Nagy et al., J. Neurochem., Vol. 43, pp. 1114-1123 (1984) . Áreas estriadas de 4 ratos foram homogeneizadas em 2 mL de sacarose 0,32M tamponada com HEPES a 5 mM (pH 7,5), usando um moedor de tecido de vidro-Tefelon. O homogenato foi diluído até 5 mL com solução de homogeneização adicional e centrifugado a 1.000 x g durante 10 min. Este procedimento foi repetido no novo sedimento e o supernadante resultante foi centrifugado a 12.000 x g durante 20 min. Um gradiente descontínuo de Percoll de 3 camadas que consiste em 16 por cento, 10 por cento e 7,5 por cento de Percoll em HEPES-sacarose tamponada foi feito com o sedimento final disperso na camada superior. Depois de centrifugação a 15.000 x g 44 ΡΕ0900200 durante 20 min., os sinaptossomas foram recuperados a cima da camada de 16 por cento com uma pipeta de Pasteur, diluídos com 8 mL de tampão de perfusão (NaCl a 128 mM, KC1 a 2,4 mM, CaCl2 a 3,2 mM, KH2PO4 a 1,2 mM, MgSC>4 a 1,2 mM, HEPES a 25 mM pH 7,4, dextrose a 10 mM, ascorbato a 1 mM, pargilina a 0,01 mM) e centrifugados a 15.000 x g durante 20 min. 0 novo sedimento foi recolhido e ressuspenso em tampão de perfusão. A suspensão de sinaptossomas foi incubada durante 10 min. a 37°C. L-[3H]Dopamina (Amersham, 40-60 Ci/mmol) foi adicionada à suspensão para fornecer uma concentração final de 0,1 uM, e a suspensão foi incubada durante mais 5 min. Usando este método, 30 até 90 por cento da dopamina foi fixada nos sinaptossomas, como determinado por contagem de cintilações a seguir a filtração através de filtros de fibra de vidro embebidos com 0,5 por cento de polietilenoimina. Um sistema de perfusão contínuo foi usado para monitorizar a libertação a seguir a exposição a cada ligando. Os sinaptossomas foram carregados em filtros de fibra de vidro (Gelman tipo A/E). O tampão de perfusão gotejou nos filtros (0,2-0,3 mL/min.) e foi retirado através dos filtros com uma bomba peristáltica. Os sinaptossomas foram lavados com tampão de perfusão durante um mínimo de 20 min. antes da adição do ligando. Depois da adição de 0,2 mL de uma solução que contém várias concentrações de ligando, o perfusato foi recolhido em frascos-ampola de cintilação a intervalos de 1 min. e a dopamina libertada foi quantificada por contagem de cintilações. Os picos de radioactividade libertados acima da radiação de fundo foram somados e a libertação média 45 ΡΕ0900200 básica durante esse tempo foi subtraída do total. A libertação foi expressa como uma percentagem da libertação obtida com uma concentração igual de (S)-(-)-nicotina.

Determinação do Loq P

Os valores de log P (coeficiente de partição de log octanol/água) , que têm sido usados para avaliar as capacidades relativas de compostos para passar através da barreira do sangue-cérebro (Hansch, et al. , J. Med. Chem., Vol. 11. p. 1 (1968)), foram calculados de acordo com os métodos descritos por Hopfinger, Conformational Properties of Macromolecules, Academic Press (1973) usando o pacote de software de Cérius2 por Molecular Simulation, Inc.

Determinação da Interacção com o Músculo A activação do músculo humano foi estabelecida na linha clonal humana TE671/RD que é derivada de um rabdomiossarcoma embrional (Stratton et al., Carcinogen, Vol. 10, pp. 899-905 (1989)). Como evidenciado através dos estudos farmacológicos (Lukas, J. Pharmacol. Exp. Ther., Vol. 251, pp. 175-182 (1989)), electrofisiológicos (Oswald et al, Neurosci. Lett., Vol.96, pp. 207-212 (1989)), e de Biologia Molecular (Luther et al., J. Neurisci., Vol. 9, pp. 1082-1096 (1989)) estas células expressam músculo como receptores nicotínicos. A função do receptor nicotinico da acetilcolina (nAcChR) foi analisada usando efluxo de 86Rb+ de acordo com um método descrito por Lukas et al. , Anal. 46 ΡΕ0900200

Biochem, Vol. 175, pp. 212-218 (1988) . As curvas de dose- resposta foram traçadas e a concentração que resulta em metade da activação máxima de fluxo iónico específico através dos receptores nicotínicos determinada para músculo humano e preparações ganglionares de ratos (EC50). A activação máxima para compostos individuais (Emax) foi determinada como uma percentagem da activação máxima induzida pela (S)-(-)-nicotina.

Determinação da Interacção com Gânqlios

Os efeitos ganglionares foram estabelecidos na linha PC12 clonal de f eocromocitoma do rato, que é uma linha contínua de células clonais de origem cristã neural derivada de um tumor da medula supra-renal do rato que expressa receptores nicotínicos neurais do tipo ganglionar (ver Whiting et al., Nature, Vol. 327, pp. 515-518 (1987); Lukas, J. Pharmacol. Exp. Ther., Vol. 251, pp. 175-182 (1989) ; Whiting et al., Mol. Brain Res., Vol. 10, pp. 61-70 (1990) ). A discussão relativa à heterogeneidade de subtipos de receptores nicotínicos é apresentada em Lukas e al., Internatl. Review Neurobiol., Vol. 34, pp. 25-130 (1992). Os receptores nicotínicos da acetilcolina expressos em gânglios de ratos partilham um grau muito elevado de homologia com os seus homólogos humanos. Ver, Fornasari et al., Neurosci. Lett., Vol. 111, pp. 351-356 (1990) e Chini et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA, Vol. 89, pp. 1572-1576 (1992). Ambas as linhas de células clonais descritas atrás foram mantidas em fase de crescimento proliferativo de 47 ΡΕ0900200 acordo com protocolos de rotina (Bencherif et al. , Mol. Cell. Neurosci., Vol. 2, pp. 52-65 (1991) e Bencherif et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., Vol. 257, pp. 945-953 (1991)) . As células intactas em placas foram usadas para estudos funcionais. Rotineiramente, aliquotas de amostras foram reservadas para a determinação da concentração de proteínas usando o método de Bradford, Anal. Biochem., Vol. 72, pp. 248-254 (1976) com soroalbumina bovina como o padrão. A função do receptor nicotínico da acetilcolina (nAChR) foi testada usando efluxo de 86Rb+ de acordo com um método descrito por Lukas et al., Anal. Biochem, Vol. 175, pp. 212-218 (1988). As células foram colocadas em poços de 35 mm de diâmetro contidos em placas de 6 poços durante pelo menos 48 horas e carregadas durante pelo menos 4 horas a 37°C em um meio que contém soro, e 1 pCi/mL de 86Rb+. A seguir à remoção do meio de carregamento, as células foram rapidamente lavadas três vezes com solução de Ringer isenta de marcação e expostas, durante 4 minutos a 20°C, a 900 pL de solução de Ringer que contém a concentração indicada do composto a ser testado (para definir efluxo total) ou além disso a 100 μΜ de mecamilamina (para definir efluxo não específico) . O meio foi removido e 86Rb+ foi quantificado usando detecção de Cerenkov (ver Lukas et al., Anal. Biochem, Vol. 175, pp. 212-218 (1988)). O efluxo específico de iões foi determinado como a diferença em efluxo de isótopos entre amostras de efluxo total e não específico. As curvas de dose-resposta foram traçadas e a concentração 48 ΡΕ0900200 que resulta em metada da activação máxima de fluxo específico iónico através de receptores nicotínicos determinada para músculo humano e preparações ganglionares de ratos (EC50) . A activação máxima para compostos individuais (Emax) foi determinada como uma percentagem da activação máxima induzida pela (S)-(-)-nicotina.

Determinação do fluxo iónico a partir de sinaptossomas talâmicos

Os cérebros de ratos foram dissecados e o cérebro intermédio (tálamo e mesencéfalo) removido. 0 cérebro intermédio foi depois colocado em um tubo em gelo, homogeneizado, e centrifugado a 2800 rpm durante 10 minutos. O sobrenadante foi recolhido e centrifugado durante mais 20 minutos a 9650 rpm. 0 sedimento resultante foi ressuspenso por trituração em 7 00 uL de tampão de perfusão gelado. Os sinaptossomas foram depois carregados com 86Rb+. O efluxo iónico foi determinado usando os métodos de Marks et al. , J. Pharmacol. Exp. Ther., Vol. 264, pp. 427-436 (1993) . O efluxo total foi determinado subtraindo a libertação basal da libertação à estimulação (pico de libertação total). A razão do pico à linha de referência (Rp) foi calculada para cada concentração. Um controlo de tetrametilamónio (i.e., um agonista completo para o receptor de interesse) é usado em cada ensaio para comparar cada capacidade do agonista para estimular o efluxo de rubídio ao controlo. Os valores de Emax são apresentados como uma percentagem de Emax para o tetrametilamónio. ΡΕ0900200 49

Os dados são apresentados na Tabela I.

TABELA I

Amostra N°. 1 2 3 C-l* C-2* Ki (nm) 9 82 7 4 26 Log P 2,37 2,24 1,84 0,17 1,39 Activação do Receptor Emax (%) 67 35 62 87 79 EC50 (nm) 269 1,700 470 591 732 Libertação de Dopamina Emax (%) 124 182 106 100 81 EC50 (nm) 287 21,400 2,341 100 1,158 Efeito do Músculo Emax (%) 0 4 0 100 0 EC50 (nm) NM NM NM 80,000 NM Efeito do Gânglio Emax (%) 0 6 0 100 0 EC50 (nm) NM NM NM 20,000 NM * não é um exemplo da NM não é significativo invenção , devido à falta de efeito

Os dados na Tabela I indicam que os compostos possuem a capacidade de passar a barreira sangue-cérebro em virtude dos seus valores favoráveis de log P, de se ligar a receptores nicotinicos de elevada afinidade do SNC como indicado pelas suas baixas constantes de ligação, e de 50 ΡΕ0900200 activar os receptores nicotínicos do SNC de um doente e de causar a libertação de neurotransmissores, desse modo demonstrando farmacologia nicotínica conhecida. Por conseguinte, os dados indicam que esses compostos possuem a capacidade de serem úteis no tratamento de perturbações do SNC que envolvem sistemas nicotínicos colinérgicos. Além disso, os dados indicam que os compostos não causam quaisquer efeitos apreciáveis em sítios dos músculos e localizações ganglionares, indicando desse modo uma ausência de efeitos secundários indesejáveis em doentes que recebem administração desses compostos.

Lisboa, 18 de Fevereiro de 2009

Claims (17)

1. ΡΕ0900200 1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto que possui a fórmula:

   onde X é N, C-H, C-F, c-ci, C-Br, C-I, C-NR' R" , C-CF3, C CN, c-c2r', c-sch3, c-n3, c-so2ch3, C-OR', C-SR', C C(=0)NR'R", C-NR'C(=0)R', C-(=0)0R', C-C(=0)0R', -CCH20R', C-OC(=0)R', COC(=0)NR'R" e C-NR'C(=0)OR' onde R' e R" são individualmente hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono, uma espécie que contém grupos aromáticos ou uma espécie que contém grupos aromáticos substituídos; n é 2, 3, 4, 5, 6 ou 7; Z' é hidrogénio e Z" é metilo; A, A' e A" individualmente representam hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono, ou halogénio; a linha tracejada na estrutura representa uma ligação C-C dupla ou uma ligação C-C tripla; m é 1 quando a linha tracejada representa uma ligação C-C dupla, e m é 0 quando a linha tracejada representa uma ligação C-C tripla; p é 1 quando a linha tracejada representa uma ligação C-C dupla, e p é 0 quando a linha tracejada representa uma ligação C-C tripla; a linha ondulada na estrutura representa uma forma cis (Z) ou trans (E) do composto quando a linha tracejada na estrutra é uma ligação C-C dupla; E' e E" individualmente 2 ΡΕ0900200 representam hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono ou alquilo halogeno-substituído que contém um até cinco átomos de carbono; pelo menos um dos E' é um substituinte não hidrogénio; e X' representa CH ou CE' quando a linha tracejada é uma ligação C-C dupla, e C quando a linha tracejada é uma ligação C-C tripla; ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
2. 2. Um composto de amina olefinica aril-substituída ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a reivindicação 1 que possui a fórmua

   onde X é N, C-H, C-F, C-Cl, C-Br, C-I, C-NR' R" , C-CF3, C CN, C-C2R', c-sch3, c-n3, c-so2ch3, C-0R', C-SR', C C(=0)NR'R", C-NR'C(=0)R', C-(=0)0R', C-C(=0)0R', -CCH20R', C-OC(=0)R', COC(=0)NR'R" e C-NR'C(=0)0R' onde R' e R" são individualmente hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono, uma espécie que contém grupos aromáticos ou uma espécie que contém grupos aromáticos substituídos; n é 2, 3, 4, 5, 6 ou 7; Z' é hidrogénio e Z" é metilo; A, A' e A" individualmente representam hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono, ou halogénio; m é 1 e p é 1; E' e E" individualmente representam hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono ou alquilo halogeno- 3 ΡΕ0900200 substituído que contém um até cinco átomos de carbono; pelo menos um dos E' é um substituinte não hidrogénio; e em que a estrutura representa uma forma cis (Z) ou trans (E) do composto.
3. 3. Um composto de amina olefínica aril-substi-tuída de acordo com a reivindicação 2, em que a unidade

   do referido composto compreende uma cadeia lateral N-metil-4-penten-2-amina.
4. 4. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou a reivindicação 2, em que até quatro dos E' e E" são substituintes não hidrogénio.
5. 5. Um composto de acordo com a reivindicação 4, em que até três dos E' ou E" são substituintes não hidrogénio. 6. 0 composto da Reivindicação 1, em que a linha tracejada é uma ligação C-C dupla e o composto possui uma forma trans (E). 7. 0 composto da Reivindicação 1, em que n é 2, 3 ou 4 . 4 ΡΕ0900200 8. 0 composto da Reivindicação 1, em que n é 2 ou 3; A e A' representam hidrogénio; e A" representa hidrogénio, metilo, etilo ou halogénio. 9. 0 composto da Reivindicação 8, em que a linha tracejada é uma ligação C-C dupla e o composto possui uma forma trans (E).
6. 10. O composto da Reivindicação 1, em que X é -CH. 11. 0 composto da Reivindicação 7, em que A, A' e A" cada um é hidrogénio. 12. 0 composto da Reivindicação 1, em que E' e E" são metilo. 13. 0 composto da Reivindicação 1, em que m=0 e p=0. 14. 0 composto da Reivindicação 1, em que n é 2 ou 3.
7. 15. Um composto de acordo com a reivindicação 1, em que a linha tracejada é uma ligação C-C dupla, o composto possui a forma trans (E) , A, A' e A" são todos hidrogénio, n é 2, e pelo menos um dos E' ou E" é alquilo que contém um até cinco átomos de carbono ou alquilo halogeno-substituído que contém um até cinco átomos de carbono. 5 ΡΕ0900200
8. 16. Um composto de acordo com a reivindicação 5, em que pelo menos um dos E' ou E" é metilo. 17. 0 composto de quaisquer uma das reivindicações 1-3, em que R' e R" são independentemente seleccionados do hidrogénio, metilo, etilo ou isopropilo.
9. 18. Um composto ou os seus sais farmaceuti- camente aceitáveis de acordo com a reivindicação 1 seleccionado do grupo que consiste em: (E) e (Z)-N-metil-4-(3-piridinil)-2-metil-3-buten-l-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-5-hexen-3-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-2-metil-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-3-metil-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-1,1,1-trifluoro-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-5-(3-piridinil)-4-metil-4-penten-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-2,4-dimetil-5-hexen-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-5-metil-5-hexen-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-5-hexen-2-amina, (E) e (Z)-N-metil-6-(3-piridinil)-5-metil-5-hexen-3-amina, (E) e (Z)-N-metil-1-(3-piridinil)-l-octen-4-amina, e (E) e (Z)-N-metil-1-(3-piridinil)-5-metil-l-hepten-4-amina.
10. 19. Um composto ou os seus sais farmaceuti- 6 ΡΕ0900200 camente aceitáveis de acordo com a Reivindicação 1 seleccionado do grupo que consiste em: N-metil-5-(3-piridinil)-4-pentin-2-amina, N-metil-6-(3-piridinil)-5-hexin-3-amina, N-metil-5-(3-piridinil)-3-metil-4-pentin-2-amina, N-metil-1-(3-piridinil)-l-heptin-4-amina, N-metil-1-(3-piridinil)-l-octin-4-amina, e N-metil-1-(3-piridinil)-l-nonin-4-amina.
11. 20. Um processo para preparar um composto de amina olefinica aril-substituida que possui a fórmula

    onde X é N, C-H, C-F, C-Cl, C-Br, C-I, C-NR'R", C-CF3, C-CN, C-C2R', c-sch3, c-n3, C-S02CH3, C-OR', C-SR', C- C (=0)NR'R" , C-NR'C(=0)R1 , C-(=0)0R', C-C(=0)0R', -CCH2OR', C-OC(=0)R', COC(=0)NR'R" e C-NR'C(=0)OR' onde R' e R" são individualmente hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono, uma espécie que contém grupos aromáticos ou uma espécie que contém grupos aromáticos substituídos; n é 2, 3, 4, 5, 6 ou 7; Z' é hidrogénio e Z" é metilo; A, A' e A" individualmente representam hidrogénio, alquilo que contém um até cinco átomos de carbono, ou halogénio; mélepél; E' e E" individualmente representam hidrogénio, alquilo que contém 7 ΡΕ0900200 um até cinco átomos de carbono ou alquilo halogeno-substituído que contém um até cinco átomos de carbono; pelo menos um dos E' é um substituinte não hidrogénio; e em que a estrutura representa uma forma cis (Z) ou trans (E) do composto, que compreende os passos de, a) reacção de um álcool olefinico seleccionado do grupo que consiste em 5-hexen-2-ol, 4-penten-2-ol, 5-hexen-3-ol, 2-metil-4-penten-2-ol, 4-metil-4-penten-2-ol, l-octen-4-ol, 5-metil-l-hepten-4-ol, 4-metil-5-hexen-2-ol, 5-metil-5-hexen-2-ol, 5-hexen-2-ol e 5-metil-5-hexen-3-ol, com um halogeneto aromático para fornecer um produto da condensação do álcool. b) converção do produto da condensação do álcool obtido do passo a) no referido composto de amina olefinica aril-substituida por activação do álcool usando cloreto de metanossulfonilo ou cloreto de p-toluenossulfonilo, seguida por deslocamento por mesilato ou tosilato usando metilamina, para fornecer o referido composto de amina olefinica aril-substituida .
12. 21. Um processo de acordo com a reivindicação 20, em que o álcool olifinico no passo a) é 4-penten-2-ol.
13. 22. Um processo de acordo com a reivindicação 20 ou a reivindicação 21, em que o halogeneto aromático no passo a) é uma 2-halogenopiridina ou uma 5-halogeno-pirimidina. ΡΕ0900200
14. 23. Uso de um composto de acordo com quaisquer uma das reivindicações 1-19, para a preparação de um medicamento para a prevenção ou tratamento de uma perturbação do sistema nervoso central.
15. 24. Uso de acordo com a reivindicação 23, em que a perturbação do sistema nervoso central é seleccionada da demência pré-senil, da demência senil, do Parkinsonismo, da coreia de Huntington, da discinesia tardia, da hiperci-nesia, da mania, do transtorno do défice de atenção, da ansiedade, da dislexia, da esquizofrenia e do síndrome de Tourette.
16. 25. Uso de acordo com a reivindicação 23, em que a perturbação do sistema nervoso central é seleccionada da demência pré-senil e da demência senil.
17. 26. Uma composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com quaisquer uma das reivindicações 1-19 em mistura adicionada com um veiculo farmaceuticamente aceitável. Lisboa, 18 de Fevereiro de 2009 1 ΡΕ0900200 REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO Esta. lista de referências citadas pelo requerente é apenas para conveniência do leitor. A mesma não faz parte do documento da patente Europeia. Ainda que tenha sido tomado o devido cuidado ao compilar as referências, podem não estar excluídos erros ou omissões e o IEP declina quaisquer responsabilidades a esse respeito. Documentos de patentes citadas na Descrição US 4965074 A, Leesoin: US 5242935 A, Lippielfo US 52121 88 A. Cafc&sreil US 5227391 A, Cafdweil EP 588917 A US 5210076 A, Beiiiner US 5597919 A US 08364979 B US 364979 A US 4322901 A, Brooks Literatura que não é de patentes citada na Descrição * JONES et aí, Intem. J. Neuroscí, 1990, voi. 50, '147 * PERRY. 8r. Med. BuiL 1986, vol. 42,63 * SÍTARAM et ai. 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