PT88432B

PT88432B - Processo para a preparacao de acidos 4-oxo-3-quinolinocarboxilicos uteis como agentes anti-bacterianos

Info

Publication number: PT88432B
Application number: PT88432A
Authority: PT
Original assignee: Sterling Drug Inc
Priority date: 1987-09-09
Filing date: 1988-09-06
Publication date: 1992-10-30
Also published as: PH25930A; PT88432A; AU599829B2; NO883898L; US4839355A; NO883898D0; NZ225927A; IL87553A0; JPH01139583A; FI884107A0; FI884107A; EP0306860A3; KR890005127A; MY103393A; EP0306860A2; DK494088D0; AU2171888A; DK494088A; IL87553A

Description

presente invento refere-se a um processo para a preparação de novos ácidos 4-oxo-3-quinolinocarboxílicos substituídos, sendo os referidos compostos úteis como agentes anti-bacterianos.

Os ácidos 4-oxo-3-quinolinocarboxílicos an ti-bacteriamente activos são conhecidos na técnica anterior que inclui as seguintes referências.

A patente norte-americana N5 3.753.993, de Lesher e Carabateas, concedida em 21 de Agosto de 1973, des creve o ácido 7-(2,6-dimetil-4-piridinil)-1-etil-I,4-dihidro-4-oxo-3-quinolinocarboxilico.

pedido de Patente Europeia da Sterling Drug Inc., publicado em 30 de Abril de 1986 sob ο N2 179*239 descreve o ácido 7--(2,6-dimetil-4-piridinil)-l-etil-6-fluo ro-1,4-dihidro-4-oxo-3-quinolinocarboxílico.

A patente norte-americana No. 4,382.892,

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Case 4726/b

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de Hayakawa et al., concedida em 10 de Maio de 1983, descreve o ácido 9”fluoro-3-metil-10-(4-metil-l-piperazinil)-7oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de7 /~1,Y-benzoxazina-ó-car boxílico:

também conhecido sob o nome genérico ofloxacin.

A patente norte-americana No. 4.540.694, de D.T. Chu, concedida em 10 de Setembro de 1985, descreve um gene de 1-pirodino-quinobenzoxazinas substituídas que têm a fórmula geral

I ²⁵

em que X é halogéneo ou hidrogénio; é um substituinte, e R^ é hidrogénio ou um grupo protector carboxi. A memória da patente sugere a substituição sobre o anel piridina incluindo grupos alquilo mas não existem exemplos específicos

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Case U726/B

dos mesmos.

A patente norte-americana de Gilligan et al., N? 4.636.506, concedida em 13 de Janeiro de 1987, descreve um gene de compostos da fórmula

em que:

é hidrogénio, um catiâo ou alquilo farmaceuticamente aceitável com 1 a 3 átomos de carbono;

Y é escolhido do grupo que consiste em alquilo e haloalquilo com 1 a 3 átomos de carbono, alquilo, vinilo, ciclopropilo, hidroxietilo, fenilo, 4-hidroxifenilo e 4-fluorofenilo;

Rg é 3-piridilo ou 4-piridilo que pode ser substituído por vários grupos que nâo incluam alquilo;

é fluoro; ou R^ e Y podem ser combinados para formar uma ponte da fórmula -Χ(ϋΗ₂)_η-0ΗΕ^ ou -X-(CH₂)_n-C(C=CH₂)- em que

X é CH₂, 0, S, NH ou NCH^; n é O, 1 ou 2, e

R^ é escolhido do grupo que consiste em hidrogénio, alquilo e haloalquilo de 1 a 3 átomos de carbono, hidroximetilo, hidroxietilo, aminometilo e fenilo.

Os únicos compostos específicos descritos

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Case 4726/B

em que e Y são combinados respectivamente as seguintes são os Exemplos 7 © 8 que têm estruturas:

presente invento refere-se a compostos da fórmula geral:

J ²⁵

em que:

R é hidrogénio ou alquilo inferior;

R' é escolhido do grupo que consiste em hidrogénio, fluoro e -SR··', em que R ’ é benzilo, fenilo ou alquilo inferior;

R é alquilo com 1 a 3 átomos de carbono;

X é 0 ou S;

e aos seus sais de adição de ácido farmaceuticamente acei- 4 60.173

Case 4726/B táveis; e a sais de metal alcalino ou de amina de compostos em que R é hidrogénio.

Compostos particularmente preferidos são aqueles em que R é hidrogénio ou fluoro, compostos esses que possuem notável actividade anti-bacteriana.

Composições para combater bactérias compreendem uma quantidade anti-bacterianicamente eficaz de um com posto de Fórmula I em que R é hidrogénio e R* é hidrogénio ou fluoro em mistura com um veículo ou diluente adequado.

Pode preparar-se um composto de Fórmula I em que R’ é H ou F, eXéO mediante um processo que compreendes (a) fazer reagir um composto da fórmula

em que R é alquilo inferior, com um composto da fórmula:

em que Alk é alquilo com 1 a 6 átomos de carbono, na presen- 5 60.173

Case 4726/B ça de um catalisador complexo de paládio; e, caso se deseje, (b) hidrolizar o éster resultante para produzir o correspondente ácido carboxílico em que R é hidrogénio.

Pode-se preparar um composto de Fórmula I em que R e R* são ambos hidrogénio mediante:

(a) fazer reagir um composto de Fórmula I, em que R' é fluoro, com um sulfureto, RSH, na presença de hidreto de sódio para produzir um composto de Formula I em que R» é -SR»; e (b) aquecer o composto com níquel de Raney para substituir o grupo -SR por hidrogénio.

Pode-se preparar um composto de acordo com a reivindicação 1 em que R' é H ou F e X é S, que compreende (a) fazer reagir um composto da fórmula

em que R é alquilo inferior, com sulfureto ácido na presença de hidreto de sódio; e, caso se deseje, (b) hidrolizar o éster resultante para produzir o correspondente ácido carboxílico em que R é hidrogénio.

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Case 4726/B

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Pode-se combater as bactérias contactando o local onde se encontram as referidas bactérias, incluindo a administração a um hospedeiro mamífero, com uma composição que contém uma quantidade anti-bacterianicamente eficaz de um composto da Formula I em que R é hidrogénio e R* é hidrogénio ou fluoro.

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA INCLUSIVÉ DE FORMAS DE REALIZAÇÃO

PREFERIDAS

Nas definições de R e R* na Formula I acima, o termo alquilo inferior significa alquilo que tem de preferência de um a seis átomos de carbono que pode ser de cadeia linear ou ramificada.

presente invento também contempla sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de Formula I. A natureza do sal de adição de ácido é imaterial desde que o mesmo seja derivado de um ácido cujo anião é essencialmente inócuo para os organismos animais. Exemplos de sais de adição de ácido apropriados incluem o cloridrato, bromidrato, sulfato, metanosulfonato, maleato, citrato, tartarato, p-toluenosulfonato, ciclohexanosulfamato, e análogos,

Os compostos de Formula I em que R· é hidr<> génio podem também ser preparados na forma dos seus sais de metal alcalino ou de amina, de preferência sais de sódio, de potássio, de etilenodiamina ou de N-metilglucamina.

Os compostos de Formula I são preparados de acordo com os esquemas de reacção seguinte:

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Case 4726/b

ESQUEMA DE REACÇÃO A

CHgCOOH

COOAlk *

Ψ

BuLi

oh-ch₂

VII

VI

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Case 4726/b

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II (R’ = F)

I (R’ = F, X = O)

H^O (base ou ácido)

V

I (R = H, R» = F, X = O)

Esquema de Reacção A acima ilustra a preparação de ácido 10-(2,6-dimetil-A-piridinil)-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/^_1,2,3-de/ [£1,h/benzoxazino-6-carboxílico. 1,4-Dibromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzeno (iii) á metalizado com butil-lxtio e depois feito reagir com dióxido de carbono para dar ácido 4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzáico (iv), Este último é convertido no seu ácido clorí drico (v) que reage com uma metade éster de ácido malónico na presença de butil-lítio para proporcionar um 4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzoilacetato de alquilo (Vi). 0 benzoilacetato (VI) é então tratado com quantidades molares equivalentes de dimetilformamida (DMF), dimetil acetal e 2-amino-l-alcanol para produzir um N-(l-hidroxi-2-alquil)-3-amino-2-(4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzoil)-propeonato (Vil) de alquilo. Este último é então ciclizado por aquecimento com uma base, de preferência carbonato de potássio, pa _ 9 60.173

Case U726/B

ra dar um composto de Fórmula II (R’ = F). 0 10-bromo-8,9-difluoro-3-alquil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/ 1,2,3-de7 / l,47benzoxazina-6-carboxilato de alquilo (li) é então feito reagir com uma 2,6-dimetil-4-(trialquilestanil)piridina na presença de um catalisador complexo de paládio produzindt) -se assim um composto de Fórmula I em que R’ « F e X = 0. Este último pode então ser convertido no ácido livre (i; R » = H, R· = F, X = O) por meio de uma reacção de hidrólise con vencional com base ou ácido.

Na conversão de II para I, o processo é rea lizado utilizando aproximadamente quantidades equimolares de II e o composto organotin num dissolvente inerte a uma tempe^ ratura entre cerca de 50° C e 100° C, convenientemente à tem peratura de refluxo do dissolvente. A reacção está completa num período que varia de 1 a 24 horas. Alternativamente, os reagentes e catalisador podem ser aquecidos num vaso pressurizado numa atmosfera inerte (por exemplo argon ou azoto) a uma temperatura entre cerca de 125 e 175° C até a reacção ejs tar completa (l-5 horas). 0 catalisador complexo de paládio, presente até uma quantidade de cerca de 5 mole por cento, po de ser qualquer dos catalisadores conhecidos para efectuar a ligação cruzada de compostos organotin com halogenetos orgânicos cf. Kosugi et al., Buli, Chem. Soc. Japan 59, 677-679 (ΐ9θ627» por exemplo, PdCl₂(PPh^)₂, Pd^Ph^)^, PdCl₂/~p(o-tolil)₃_7₂, PdCl₂ + 2p(oEt)₃ e PdCl₂(PhCN)₂. Um catalisador preferido é diclorobis(trifènilfosfina)paládio /~PdCl₂-(PPh₃)₂_7.

Nos compostos de Fórmula I, a posição 3 que suporta um grupo alquilo é um centro assimétrico; portanto, os compostos podem ser obtidos como formas racémicas ou como enantiómeros opticamente activos (R e S) dependendo da natureza estereoquímica do 2-amino-l-alcanol utilizado na conver são de VI a VII (Esquema de Reacção A).

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Case 4726/B

ESQUEMA DE REACÇÃO B

O esquema de reacção acima ilustra a preparação de ácido 10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-alquil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/^—1♦2,3-d_e/ ,^/benzoxazina-6-carboxílico (ij R e R* = Η,Χ e o). 0 material de partida é um composto de Fórmula I em que R· = F preparado de acordo com o Esquema de Reacção A. A reacção pode ser realiza da quer sobre o éster (R « alquilo) ou o ácido livre (r «

H). 0 composto difluoro é feito reagir com um tiol (R^MSH) na presença de hidreto de sódio para dar o correspondente composto em que o substituinte 8-fluoro é substituído por R”-S-, Quando este último composto é aquecido com níquel de

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Case 4726/B

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Raney num dissolvente tal como etanol, o grupo tiol é removi do para dar I (R» = Η, X a o).

Os compostos de Formula I em que R· = H e X — 0 podem alternativamente ser preparados por um processo que evita a remoção do substituinte 8-fluoro (Esquema de Reacção B). 0 processo alternativo envolve a utilização ácido 2,3,4,5-tetrafluorobenzóico comercialmente disponível como um material de partida de acordo com o seguinte Esquema de Reacção C,

ESQUEMA DE REACÇAO C

----------->

COOAlk

NaN₃

Ψ

— 12 —

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Case 4-726

I (R e R· = Η, X = ο)

Ácido 2,3,4,5-tetrafluorobenzóico é transformado por meio de uma série de reacções análogas às do Esquema de Reacção A em 9,10-difluoro-3-alquil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-d.e/ 2, l,47benzoxazina-6-carboxilato de alquilo (VIIl). A substituição do substituinte 10-fluoro por bromo, necessário para a reacção de ligação com estanho, é efectuada por conversão de VIII do composto 10-azido (IX), redução do composto 10-amino (x) e reacção deste último com nitrito n-butilo e brometo cúprico para produzir o composto 10-bromo (li; R « H) . A reacção de ligação com 2,6-dimetil-4-(trialquilestanil)piridina deu então o éster de I (R* a» = Η, X = O) que é hidrolizado até ao ácido livre I (R e R’ » = Η, X = O).

Os compostos de Fórmula I em que X = S são preparados como ilustrado pelo Esquema de Reacção D seguinte, partindo do ácido 2,3,4,5-tetrafluorobenzóico comercialmente disponível.

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Case 4726/B

ESQUEMA DE REACÇÃO D

-^Ll2^CO3

CHgOH

O

C-COOÁlk ii

CH-R i

CH₂0H

XIII

XII

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Case 4726/B

ESQUEMA DE REACÇÃO D (Cont.)

XIV

XV h₂s

NaH

Ψ

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Case 4726/B

SET. 1888

O substituinte 4-fluoro de ácido 2,3,4,5-te trafluorobenzóico foi substituído por bromo por uma série de reacções análogas à sequência VIII—* IX—X—-¼ II no Esquema de Reacção C, para produzir ácido 4-bromo-2,3»5-triflurobenzóico (XI). Este último é então convertido até uma série de reacções análogas à sequência IV—jk V—> VI—► VII do Esquema de reacções A para dar um N-(l-hidroxi-2-alquil)-3-amino-2-(4-bromo-2,3,5-trifluorobenzoil)propenoato (XIl). A cristalização selectiva de XII com carbonato de lítio dá um 7-bromo-6,8-difluoro-1,4-dihidro-l-(2-hidroxi-2-alquil)quinolina-3-carboxilato de alquilo (XIIl). A ligação com 2,6-dimetil-4-(trialquilestanil)piridina dá então 6,8-difluoro-7-(2,6-dimetil-4-piridinil)-1,4-dihidro-l-(2-hidroxi-2-alquil)quinolina-3- carboxilato de alquilo (XIV). Este último é então convertido no seu mesilato (XV) com cloreto de metanosulfoni lo. 0 mesilato é ciclizado com sulfureto ácido e hidreto de sódio para formar o éster I (R· = Η, X = S) o qual por hidrcS lise é convertido no ácido livre (i; R e R’ = H, X - S). A ciclização tem lugar saturando uma solução ou suspensão de XV com sulfureto ácido, depois tratando o mesmo com hidreto de sódio em excesso enquanto se arrefece a reacção num banho de gelo seco e deixando depois aquecer a reacção até à temp£ ratura ambiente.

composto de Fórmula I em que R » H, R’ « as F e X = S pode ser preparado partindo do composto III do Esquema de Reacção A e procedendo como no Esquema de Reacção

D.

As estruturas dos compostos foram estabelecidas pelos modos de síntese, por análises elementares e por infra-vermelhos, ressonância magnética nuclear, e/ou espectro de massa.

Os exemplos seguintes ilustrarão melhor o presente invento.

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Case 4726/B

Exemplo 1

a) Ácido 4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzéico L n-Butil-lítio (42 ml, 2,4M em hexano) foi lentamente adicionado a uma solução de 30,78 g de 1,4-dibromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzeno em 200 ml de tetrahidrofurano arrefecido até -70° C sob atmosfera de azoto. Diéxido de car bono sólido (cerca de 12 g) foi então adicionado à mistura agitada que foi então deixada gradualmente aquecer até 0 C, ponto no qual foram adicionados 16 ml 6M de ácido clorídrico e l6 ml de água. A mistura de reacção foi concentrada e o resíduo extraído com dicloreto de metileno. O extracto foi lavado com solução de cloreto de sédio concentrada, secado (sulfato de magnésio) e concentrado até à secura para dar 22,23 g (81,5$) de ácido 4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzéico, p.f. 128-135° C.

b) Cloreto de 4-bromo-2«3.5.6-tetrafluorobenzoilo £)~Nj.

Uma mistura de 21,83 g de ácido 4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzóico e 16,7 g de pentacloreto fosforoso foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de três dias. A mistura de reacção foi depois destilada sob aspirador de vácuo para dar 20,44 g (88$) do cloreto de ácido.

c) 4-Bromo-2.3«5.6-tetrafluorobenzoilacetato de etilo /”VI; Alk « θ₂Η₅_7· n-Butil-lítio (l9² ml, 2,4m em hexano) foi adicionado lentamente a uma solução agitada de 30,24 g de mo noetilmalonato e 15 mg de 2,2’-bipiridina em 500 ml de tetra hidrofurano a -60 a -70° C sob atmosfera de azoto. Depois de ter sido adicionada cerca de metade do butil-lítio, a temperatura da mistura foi elevada até -20° a -25° C temperatura a qual o remanescente do butil-lítio foi adicionado. A mistu

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Case 4726/b

ra de reacção foi depois arrefecida de novo a -60° a -70° C e 33,4l g de cloreto de 4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzóxlo em 10 ml de tetrahidrofurano foram adicionados. A mistura de reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente, agitada durante a noite, e depois vazada em 460 ml de ácido clorídrico 1M. A camada orgânica foi separada, secada (sulfato de magnésio) e concentrada. 0 resíduo foi dissolvido em éter, lavado com solução aquosa de bicarbonato de potássio, secado (sulfato de magnésio), concentrado e destilado para dar 34,18 g de 4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzoilacetato, p.e. 112-117° C (0,8 mm).

d) (S)-2-(4-bromo-2.3.5.6-tetrafluorobenzoil)-M-(l-hidroxi-2-propil)-3-aminopropenoato de etilo / VII j Alk = = c₂h₅, R = ch₃_7.

Uma mistura de 19,99 g de 4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzilacetato de etilo e 7,8 ml de DMF dimetil acetal em 60 ml de tetrahidrof urano foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de l6 horas, A mistura foi então arrefecida num banho de gelo e foram adicionados 4,6 ml de (s)-2-amino-l-propanol, A solução clara resultante foi concentrada in vacuo. e o resíduo foi dissolvido em éter e cromatografado sobre uma coluna de gel de sílica utilizando éter como eluente. Foram obtidos 22,4 g de (s)-2-(4-bromo-2,3,5,6-tetrafluorobenzoil)-N-(l-hidroxi-2-propil)-N-(1-hidroxi-2-propil)-3-minopropenoato como um sólido amarelo claro, p.f. 127-134°C, Z“g<7d⁵= + 17,6° .

e) (S)-10-bromo-8,9-difluoro-3-me til-7-oxo-2,3-dihidro-7Hpirido/~l,2,3-de77l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo /“II; R = CgH^, R· = H, R” =

Uma mistura de 22,4 g de 2-(4-bromo-2,3,5»6 -tetrafluorobenzoil)-N-(l-hidroxi-2-propil)-3-aminopropenoa- 18 60.173

Case 4726/B

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J ²⁵

to e 44,3 g de carbonato de potássio em dimetilformamida foi aquecida ao ponto de ebulição, e depois diexada arrefecer até à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi vazada em água, extraída com clorofórmio, secada (sulfato de magnésio) e concentrada in vacuo. 0 resíduo foi cristalizado a partir de etanol para dar 14,47 g de (s)-10-bromo-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido / l,2,3-de//l,47benzoxazino-6-carboxilato como um sólido de cor creme, p.f. 247-249,5°C, = “74,5° (l $ em clorofórmio).

f ) 2,6-Dimetil-4-(trimetilestanil)piridina

A uma mistura de 100 g de sódio (30$ de dispersão em tolueno) e 400 ml de dimetoxietano (DME) arrefecida num banho de gelo-sal e sob atmosfera de azoto foi adicionada uma solução de 121 g de cloreto de trimetil estanho em 50 ml de DME durante um período de 2 horas enquanto se manteve a temperatura abaixo de 5°C. A mistura foi agitatada a 0-5°C durante 2,5 horas e depois foram adicionados 70 g de 4-cloro-2,6-dimetilpiridina em 50 ml de DME durante um período de 1,5 horas enquanto se manteve a temperatura a 0-10°C. A mistura de reacção foi agitada à ultima temperatura durante 1 hora e depois deixada repousar à temperatura ambiente durante a noite, A mistura foi filtrada e concentra da, e o resíduo tratado com éter e de novo filtrado e concen trado. 0 líquido laranja resultante foi destilado, reunido o material fervente a 130°C (20 mm) para dar 80 g de 2,6-dimetil-4-(trimetilestanil)piridina.

g) (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-8,9-difluoro-33—metil-7-OXO-2,3-dihidro-7H-pirido/‘~l, 2,3-de7/**1, ty-behzo:x.a.zl·na-6-carboxilato de etilo /~I; R = C₂H₅, R· - F, R” CH₃, X = Oj.

Uma mistura de l4,O8 g de (s)-10-bromo- 19 -6. SET. 1888

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Case 4726/B

J ²⁵

-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l, 2,3-de/ /“l,4-benzoxazina-6-carboxilato de etilo, 10,91 g de 2,6-dimetil-4-trimetilestanilpiridina e 6,3 ml de hexametilfosforamida em 200 ml de dioxano sob atmosfera de azoto foram adicionados 1,27 g de diclorobis(trifenilfosfina)paládio. A mistura de reacção foi aquecida ao refluxo durante 24 horas A maior parte do dissolvente foi então removida in vacuo e o resíduo foi extraído com acetato de etilo e água, e depois com clorofórmio. Os extractos orgânicos foram combinados e concentrados. 0 resíduo foi cromatografado sobre gel de sílica utilizando como eluente clorofórmio e clorofórmio contendo quantidades aumentadas de metanol (l-3$). Obtiveram-se assim 2,5 g de (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-8,9-difluoro -3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido-/~l, 2,3-de7/”l ,ψ-benzoxazina-6-carboxilato de etilo puro, sólido amarelo claro, p.f. 295-297°C, /<7^⁵ = -34,4° (l % em clorofórmio).

h) Ácido (S)-10-(2.6-dimetil-4-piridinil)-8.9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l, 2,3-d.eJ/~1, Y-benzoxazina-6-carboxílico /i; R = H, R' = F, R = CH^7

Uma solução de 1,20 g de (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-8,9-difluoro-3-metil-7-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de7/^-l,47benzoxazina-6-carboxilato em 15 ml de ácido clorídrico 1M foi aquecida ao refluxo durante 2 horas. A mistura de reacção foi arrefecida, vazada em solução de acetato de sódio e extraída com dicloreto de metileno. 0 extrato foi secado (sulfato de sódio) e concentrado, e o resíduo foi cristalizado de metanol para dar 0,5θ g de ácido (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/“l,2,3-de7/”l,47benzoxazina-6-carboxílico como um sólido incolor, p.f. 307-310 C, £¢..7^ b -39°,1 (l $ em clorofórmio).

Considera-se que por substituição do (s)- 20 60.173

Case 4726/B

-2-amino-l-propanol na etapa (d) acima por 2-amino-l-propanolracémico ou (R)-2-amino-l-propanol e realizando as reacções descritas nas etapas que se seguem (e)-(h) podem ser ob tidos, respectivamente, ácido 10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/“l,2,3-de 7 /”l,47benzoxazina-6-carboxílico racémico ou ácido (r)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de//l,4-benzoxazina-6-carboxílico

Exemplo 2

a) (θ)-10-(2«6-dimetil-4-piridinil)-8.9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/l, 2,3-de7/~l ,J/-b enzoxazina

-6-carboxilato de etilo /”1; R « θ2^5’ ^R* ^{= F}>

R » CH₃, X = Qj,

Uma mistura de 19,35 g de (s)-10-bromo-8,9-difluoro-3-me til-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/ 1,2,3-de/ /”l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo, 16,20 g de 2,6-dimetil-4-(trimetilestanil)piridina, 0,88 g de diclorobis(trifenilfosfina)paládio em 200 ml de etanol foi colocada num aparelho de Parr em aço inoxidável e o sistema fluxado com azoto e pressurizado até cerca de 56,24 kg/cm (80 psi) com azoto. 0 sistema foi aquecido a 150°C durante 4 horas.

A mistura de reacção foi aquecida e concentrada in vacuo. e o resíduo foi retomado em clorofórmio, filtrado e cromatografado sobre gel de sílica utilizando 5 % de metanol em clorofórmio para dar 14,90 g de (s)-10-(2,6-dimetil-4-piriridinil)-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pii’ido/””l,2,3-de7/l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo.

b) 0 produto da parte (a) (7,84 g) foi hidrolizado com ácido clorídrico de acordo com o processo do Exemplo l(h), e o produto foi recristalizado de metanol para dar 4,98 g de á30

60.173

Case 4726/B

-6.SET.1988

eido (S)-10-2,6-dimetil-4-piridinil)-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l, 2,3-de//~1,47benzoxazina-6carboxílico /i; R = H, R' = F, R» = CH^, X = 0_7, idêntico ao produto do Exemplo l(h).

Exemplo 3

I ²⁵

a) ( S )-8-(benziltio)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil) -9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/“l, 2,3-de7 /“‘l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo / I; R = =c₂h₅, r* = c₆h₅ch₂s, r« » ch₃, X = o_7.

A uma suspensão de 2,78 S <3e (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,J-deJ/“1,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo em 67 ml de tetrahidrofurano arrefecido num banho dé gelo foram adicionados 0,79 ml de benzil mercaptano, seguidos por 0,34 g de hidreto de sódio (60 $ em óleo, lavado com hexano antes da utilização), por porções, e a mistura foi agitada durante uma hora. Foi adicionada uma quantidade adicional de 0,079 ml de benzil mercaptano e a agitação continuada à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura de reacção foi diluída com solução saturada de sódio e extraída com acetato de etilo. 0 extracto foi lavado com água, secado (sulfato de sódio) e concentrado. 0 resíduo foi cristalizado a partir de acetato isopropílico para dar 1,98 g de (s)-8-(benziltio)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7-pirido/ 1,2,3-de7 /l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo, sólido amarelo, P.f. 175-178°C.

b) (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/ 1,2, 3-de,7/ l,47benzoxazina

-6-carboxilato de etilo /”l; R = CgH^, ⁼

R = CH₃, X = Oj.

Uma mistura de 1,Ç8 g de (s)-8-(benzil- 22 35

60.173

Case 4726/B

tio)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro -7H-pirido/ 1,2,3-de71,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo e 15 g de níquel de Raney em 75 ml de etanol absoluto foi aquecida ao refluxo durante 10 minutos. A mistura de reacção foi arrefecida, filtrada e concentrada in vacuo para dar 1,14 g de produto sólido, p.f. 268-271,5°C, Este último foi recristalizado de acetato de etilo e secado a 50°C (0,1 mm) para dar 0,52 g de (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/“l,2,3-de7/”l,4-7benzoxazina-6-carboxilato de etilo, p.f. 273-276°C.

c) Ácido (s)-10-(2.6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/*l, 2,3-de7/”l, 47 -benzoxazina-6-carboxílico /~I; R e R* = H, R · = = ch₃, X = o_7.

Uma mistura de 0,52 g de (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo^2,3-dihidro-7H-pirido/“l,2,3-de7/~l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo e 10 ml de ácido clorídrico 1M foi aquecida ao refluxo durante 1 hora. A mistura de reacção foi arrefecida, vazada em solução de acetato de sódio e extraída com clorofórmio. 0 extracto foi secado (sulfato de sódio) e concentrado, e o resíduo foi recristalizado de metanol para dar 300 mg de ácido (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de7 /l,47benzoxazina-6-carboxílico, pó incolor, p.f. 305-3O8°C, /^_7p⁵= -39,8°C.

Uma suspensão de uma amostra do ácido anterior em água foi tratada com um equivalente molar de hidróxido de sódio e a solução resultante secada por congelamento para se obter o sal de sódio do referido ácido na foi

- 23 -6. SET. 1988

60.173

Case 4726/B

ma de um hemi-hidrato, pó amarelo pálido, p.f. 3O8-311°C (decomposição).

Exemplo 4

Ácido (s)-8-(benziltio)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de7 /”l,47benzoxazina-6-carboxílico / I; R = H, R’ =5 C^H^CHgS,

R’’J = CH^ 7 preparado por hidrólise de l60 mg de éster etílico do Exemplo 3, parte (a) com ácido clorídrico, e foi obtido (lOO mg) na forma de um sólido amarelo pálido, p.f, 237,5-238,5°C (a partir de acetonitrilo) , /c<7p^ = -5,0%

É assim considerado que o ácido (S)-8-(benziltio)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/l,2,3-de//”l, ^Jbenzoxazina-6-carboxílico pode ser tratado com níquel de Raney em etanol para dar ácido (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de7/l,47benzoxazina-6-carboxílico, o composto do Exemplo 3(c).

Exemplo 5

a) Cloreto de 2,3,4,5-tetrafluorobenzoilo

Cloreto de tionilo (2,9 litros), 2,3 kg de ácido 2,3,4,5-tetrafluorobenzéico e 14,5 ml de dimetilformamida foram carregados a 90-95 ^c durante cerca de 90 minutos. Q cloreto de tionilo em excesso foi primeiramente removido à pressão atmosférica, depois in vacuo. 0 resíduo foi destilado num banho de vapor à pressão de bomba de água reunindo a fracção com p.d. de 65-7O°C a cerca de 15 mm resultando em 2,635 g (96,2$) de destilado amarelo pálido.

b) 2.3.4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo.

Numa atmosfera de azoto uma caldeira de

- 24 -6.SET.1888

60.173

Case 4726/B >

> ²⁵ galões foi carregada com 50,9 kg de tetrahidrofurano,

5,2 kg de malonato de monoetilo e cerca de 5 g de 2,2*-dipiridilo. Depois de arrefecimento da mistura a -36°C, forarc adicionados 4l,6 kg de n-butil-lítio (15% em hexano) durante 3 horas mantendo a temperatura a -25 a -35°C. A pasta resultante foi ainda arrefecida a -60°C e depois tratada durante cerca de 50 minutos com o cloreto de ácido da parte (a) a -62° até -54°C. A mistura verde/amarelo foi agitada durante duas horas à temperatura ambiente e deixada aquecer mais durante a noite. A mistura (-24°C) foi temperada (vácuo) em ácido clorídrico dilúido a temperatura ambiente (15 litros de ácido muriático e 6l litros de água desionizada).

A mistura temperada foi separada e a fase orgânica foi lavada com 2 x 40 litros de água desionizada. As fases aquosas combinadas foram extraídas de novo com 40 litros de hexano-éter (l : l). Todas as camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com 100 litros de solução de bicarbonato de sódio saturado; extraindo-se de novo a fase aquosa com 40 litros de hexano-éter (l í l). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas até um óleo in vacuo seguindo-se a dissolução em 20 litros de hexano e concentração repetida até à secura. 0 óleo quente foi finalmente dissolvido em 19 litros de hexano. A solução foi arrefecida até -5°C e os sólidos cristalizados foram filtrados utilizando 4,8 litros de hexano frio (-6°C) como lavado, O material foi secado in vacuo à temperatura ambiente dando 4.234 g de produto adequado para utilização na etapa seguinte. Uma s£ gunda colheita foi obtida concentrando o filtrado combinado e lavando e arrefecendo até uma temperatura baixa. 0 ren dimento combinado da primeira e segunda colheitas foi de 4.841 g (74,9 %).

c) (s)-9,10-difluoro-2,3-dihidro-3-metil-7-oxo-7H-pirido/“l,2,3-de7/~l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo

- 25 s» 6. SET 1888

60.173

Case 4726/b

¹ /VIII; R = CH₃_7.

J ²⁵

Um frasco de 12 litros agitado foi carregado com 3,6 litros de tetrahidrofurano e 1.584 g de 2,3,4,5 -tetrafluorobenzoilacetato de etilo (endotérmico: temperatura de solução 5°θ) © 751 g de dimetilformamida dimetil acetal. A agitação sob atmosfera de azoto durante 24 horas à temperatura ambiente deu uma elevada temperatura de 27,5°θ dentro de 4,5 horas, A solução foi arrefecida até 4°C e mantida a 4-5°C enquanto se adicionava uma solução de 451 g de (s)-(+)-2-amino-l-propanol e 225 ml de tetrahidrofurano (necessários 40 minutos utilizando um banho de arrefecimento a -5°C), A siução foi agitada durante 1 hora a 5-10°C e depois concentrada in vacuo a uma temperatura de vaso de 5-15°C até um óleo amarelo viscoso. 0 óleo foi diluído com 5,4 litros de dimetilformamida e agitado vigorosamente enquanto se adicionaram 207 g de carbonato de potássio anidro. 0 frasco de reacção foi preparado para destilação e aquecido a l4O-l45°C durante 1 hora. A mistura foi arrefecida à temperatura ambiente e vazada em 54 litros de água. A filtração, lavagem com 6 litros de água fria e secagem in vácuo a 50°C deu 1.512 g de produto tampão amarelo. 0 produto bruto (2.783 g) foi passado através de um moinho para separar as massas antes de formarem pasta em etanol refluxado (5,6 litros) durante 1 hora. A suspensão foi arrefecida até 20°C e o sólido reunido e lavado com etanol frio (2,8 litros). Depois de secagem in vacuo um total de 1.556 g (55,9 $ de recuperação) estava pronto para utilização na etapa seguinte.

d) (s)-10-azido-9-fluoro-2,3-dihidro-3-metil-7-oxo-7H-pirido/l,2,3-de7/”l,47henzoxazina-6-carboxilato de etilo /“IX; R =

Dimetilformamida (3,9 litros) e azida de

- 26 60.173

Case 4-726/b ^-6. SE11888

sódio (188,3 g ) foram aquecidas a 9O-95°C num frasco de 5 litros durante 5 horas e a pasta resultante foi deixada arrefecer ligeiramente antes de se temperar a mistura em 31 litros de água desionizada à temperatura ambiente. A pasta fina foi agitada brevemente antes de se reunirem os cristais bronzeados utilizando mais 6 litros de água desionizada à temperatura ambiente para lavar o bolo do filtro. Os sólidos foram secados in vacuo a 4O-45°C resultando em 701 g de material utilizado directamente na etapa seguinte,

e) (s)-10-amino-9-fluox^,o-2,3-dihidro-3-metil-7-oxo-7H-pirido/~l,2,3-de7/~l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo /”X; R” Uma pasta de 701 g de (s)-10-azida-9-fluoro-2,3-dihidro-3-metil-7-oxo-7H-pirido/”l,2,3-de7 /Ϊ,4/ -benzoxazina-6-carboxilato de etilo em 6,0 litros de dimetilf ormamida foi carregada numa autoclave de cinco galões. Depois de colocar o vaso sob atmosfera de azoto, foi adicionada uma pasta de 45 g de paládio sobre carvão a 10% em 700 ml de dimetilformamida. A mistura foi hidrogenada a 33,75-35,15 kg/cm^ (48-50 psi) e 600 RPM). Uma elevação 10°C na temperatura foi observada durante os primeiros 30 minutos de reacção. A mistura de reacção foi filtrada e lavada com 2x3 litros de dimetilformamida. A concentração do filtrado sobre pressão de aspirador deu um resíduo escuro, muito espesso (volume 700 ml) Etanol (l,2 litros) foi adicionado e a suspensão foi refluxada brevemente. Depois de arrefecimento a 0°, o produto foi reunido, lavado com 3 x 300ml de etanol frio e secado durante dezoito horas a 80° in vacuo para dar 508 g de produto que mostrou ser 97,6 % puro por HPLC.

f) (S)-10-bromo-9-fluono-2,3-dihidro-3-metil-7-oxo-7H- 27 60.173

Case 4726/B

-pirido/~l,2,3-de7/”l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo /“II; R· = H, R” = CH₃_7.

Um frasco de 12 litros equipado com um agitador forte foi carregado com 4,3 litros de acetonitrilo,

443 g de brometo de cobre (li) e g de (s)-10-amino-9-fluoro-2,3-dihidro-3-metil-7-o^xo-7H/ 1,2,3-de// 1,4/benzoxazina-6-carboxilato de etilo. Depois de se estabelecer ume. atmosfera de azoto e se aquecer a mistura até 70°C, o aquecimento foi retirado. Foi adicionado nitrito de n-butilo (29O ml) a uma velocidade para atingir e manter o refluxo (necessários 20 minutos). Foi depois aplicado calor para manter o refluxo durante 2-3/4 horas. Utilizando vácuo por aspitador a pressão foi reduzida ligeiramente para destilar 2,4 litros de acetonitrilo enquanto se mantém uma temperatura de vaso de 70°C. 0 concentrado foi arrefecido até 5θ°θ e vazado lentamente numa mistura agitada de 12 litros de água fria e 2,1 litros de ácido clorídrico 12N. Passada 1 hora a pasta acídica foi filtrada e lavada com 4 litros de água. 0 bolo do filtro foi então lavado com hidróxido de aménio diluído (l parte de hidróxido de amónio para três partes de água). Uma lavagem final com 2 litros de água e secagem in vacuo a 6o°C deu 4θ6 g de produto bruto castanho claro. 0 produto bruto foi adicionado a 2,1 litros de metanol e refluxado durante 3 horas. 0 arrefecimento até 5°, lavagem com 0,2 litros de metanol frio e secagem in vauo a 50°C deu 318 g de produto.

g) 2.6-Dimetil-4-(tributilestanil)piridina.

Um frasco de 22 litros carregado com 740g de 4-bromo-2,6-lutidina e 10,0 litros de éter dietilico e arrefecido a -60°^ num banho de gelo seco/acetona sob atmofera de azoto. Uma solução de 4,0 moles de n-butil-lí35 tio foi adicionada gota a gota durante 1 hora mantendo a

60.173

Case 4726/b

J ²⁵ temperatura abaixo de -58°C para formar um precipitado amarelo-laranja. Depois de se continuar a agitação no frio durante 15 minutos, Ι.28Ο g de cloreto de tributil-estanho foram adicionados durante duas horas a uma temperatura de -6o°C a -57°C para formar uma solução. A reacção foi agitada a frio durante 45 minutos, a mesma foi lentamente (2 horas) aquecida até 20°C. Uma porção de super-Cel (100 g) foi adicionada e a mistura de reacção foi filtrada para remover o cloreto de lítio precipitado. 0 bolo foi lavado com éter dietílico (2 x 5θθ ^ml)· Depois de concentração até à secura, foram obtidos 1,575 g (99,7 de rendimento) do produto que foi utilizado sem posterior purificação.

h) (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-2,3-dihidro-3-metil-7-oxo-7H-pirido/“l,2,3-de//”l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo /”l; R’ = H, R” = CH^, X = 0/

Um frasco de 5 litros carregado com 355 g do bromoéster da parte (f), 423 g de 2,6-dimetil-4-(tributilestanil)piridina, 20,4 g de diclorobis(trifenilfosfina)paládio e 243 ml de dimetilformamida e aquecido lentamente a l40°C. 0 aquecedor foi removido permitindo que a reacção atingisse uma exotermia a l65°C. Depois de a reacção exotérmica ter baixado a reacção foi aquecida até acima de l40°C durante 2 horas. A mistura arrefecida foi dissolvida em 4 litros de uma mistura a 50$ de clorofórmio-água e filtrada para remover o catalisador dispendido. 0 bolo de filtro foi lavado com clorofórmio. A camada orgânica foi separada e secada sobre sulfato de magnésio. 0 agente de secagem foi filtrado e lavado com 5θθ ml de clorofórmio. 0 filtrado combinado e lavado foi concentrado para produzir um sólido cristalino que foi empastado durante 1 hora em 1,8 litros de éter dietílico. 0 sólido foi reunido e lavado com 4 x 4 250 ml de éter dietílico seguindo-se a secagem ao ar sob

- 29 60.173

Case 4726/B

uma campânula. Um total de 327 g (85,9 % de rendimento) do produto foi utilizado na etapa seguinte se posterior purificação.

i) Ácido (S)-10-( 2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-me til-7-oxo-7H-pirido/*l, 2,3-de//”l, 4-/benzoxazina-6-carboxílico /“l; R e R' = H, R” = CH^, X = 0 7

Um frasco de 22 litros foi carregado com 698g do éster da parte (h), 10 litros de água desionizada e 915ml de ácido clorídrico concentrado e aquecido acima de 9C°C durante 2 horas para formar uma solução cinzento-esverdeada. Caevão activado (vegetal) (Darco G-60) (35 g) foi adicionado e a mistura foi filtrada a quente. 0 bolo foi lavado com 2,0 litros de água desionizada quente. A solução arrefecida foi primeiramente lavada com 3,0 litros de acetato de etilo e depois basificada com 2,0 litros de hidróxido de sódio a 35 $ formando um sólido em duas horas. 0 sal de sódio do produto foi dissolvido por aquecimento do sistema a 80°C e o produto foi precipitado com a adição de 200 ml de ácido acético glacial ao pH (5,5). Depois de agitação a 80 a 85°C durante uma hora o sólido foi reunido enquanto quente e lavado com 4 x 1,0 litros de água desionizada. 0 produto foi purificado como segue. Um frasco de 5 litros foi carregado com 2,5 litros de dimetilformamida e 730 g de produto bruto e a mistura foi aquecida a l40°C para formar uma solução e_s cura límpida. Depois de arrefecimento a 5°C o precipitado que se formou a 110°C foi reunido e lavado com 2,5 litros de água desionizada. Os sólidos foram secados in vacuo a 6o°C durante 64 horas dando 493 g de I (R e R’ = Η, X = O), idêntico ao produto do Exemplo 3(c).

Exemplo 6

a) Ácido 4-bromo-2.3,5-trifluorobenzéico / XI 7» 15θ- 30 60.173

Case 4726/B

-159° θ, foi preparado a partir do ácido 2,3,4,5-tetrafluor<> benzóico comercialmente disponível por um método análogo aos processos das etapas (d), (e) e (f) do Exemplo 5, Isto é, reacção com azida de sódio para formar ácido 4-azido-2,3,5-trifluorobenzóieo, redução deste último a ácido 4-amino-2,3,5-trifluorobenzóieo, p.f. 215-218° C, e substituição do grupo amino por bromo utilizando nitrito de t-butilo e bromje to cúprico.

b) 4-Bromo-2,3.5-trifluorobenzoilacetato de etilo, p.f.

51-59°θ, foi preparado por reacção de ácido 4-bromo-2,3,5-trifluorobenzóico com pentacloreto fosforoso como no Exemplo l(b) para formar o cloreto de ácido, e reacção deste último com n-butil-lítio e malonato de monoetilo de acordo com o processo do Exemplo l(c).

c) (R) -2-( 4-bromo-2. 3.5-trif luorobenzoil) -N- (l-hidroxi-2-.

-propil)-3-aminopropenoato de etilo foi preparado a partir de 4-bromo-2,3,5-trifluorobenzoilacetato de etilo, dimetilformamida e (R)-2-amino-l-propanol pelo processo do Exemplo l(d) e obtido com 91# de rendimento como um óleo laranja.

d) (R)-10-bromo-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/ 1,2,3-de/ /”*1,4Tbenzoxazina-6-carboxilato de etilo /“ii; r ® c₂h₅, r» = ch₃ J foi preparado por ciclização do composto da parte (c) acima com carbonato de potássio de acordo com o processo do Exemplo l(c). 0 produto bruto foi utilizado directamente na reacção seguinte.

e) (R)-10-(2« 6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3 -metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/ 1,2,3-de/ /~”l,4/benzoxazina-6-carboxilato de etilo R » ^C2^H5> ^R’ “ ^H» ^R ^{e CH}3 J foi preparado a partir do composto 10-bromo da parte (d) e 2,6-dimetil-4-tributilestanilpiridina na presença de catalisador de diclorobis(trifènilfosfina)paládio de acordo com o

- 31 60.173

Case A726/B •6. SE11888 processo do Exemplo 2, e foi obtido com cerca de 80$ de rendimento como um sólido, p.f. 267-273° C.

f) Ácido (r)-10-(2.4-dimetil-fy-piridjnil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/ 1,2,3-de/ ££ 1,h/benzoxazina-6-carboxílico / I; R e R' = H, R = CH^ J foi preparado por hidrólise do éster da parte (e) com ácido clorídrico de acordo com o processo do Exemplo l(h), e foi obtido como um sólido incolor, p.f. 308-312° C quando recristalizado a partir de metanol; = +40,7° (l# em clorofórmio).

> ²⁵

Exemplo 7

a) (S)-2-(4-bromo-2«3.5-trifluorobenzoil)-N-(1-hidroxi-2-propil)-3-aminopropenoato de etilo J_ XII; Alk e CgH^,

R = CH₃ J foi preparado a partir de 4-bromo-2,3,5-trifluoJ robenzoilacetato de etilo (Exemplo 6b), dimetilformamida e (S)-2-amino-l-propanol pelo processo do Exemplo l(d), e foi obtido com 7^$ de rendimento como um sólido, p.f. 1O4-1O8°C.

b) (S)-7-bromo-6.8-difluoro-l-(l-hidroxi-2-propil)-1.U-dihidro-4-oxo-3-quinolinocarboxilato de etilo ]_ XIII;

Alk * ^c2^H5» ^r” ^{e CII}3 _7.

Uma mistura de 6,30 g de (s)-2-(4-bromo-2,3,5-trifluorobenzoil)-N-(l-hidroxi-2-propil)-3-aminopropenoato de etilo e 1,13 g de carbonato de lítio foi aquecida a 85°C durante 18 horas. A mistura de reacção foi vazada em água e extraída com acetato de etilo. Os extractos foram secados sç bre sulfato de magnésio e concentrados. 0 resíduo foi recris talizado de acetonitrilo para dar 3,87 g (65$) de XIII, p.f. 187-189° C; Z“<7_D « -140,9° (clorofórmio).

c) (s)-7-(2.6-dimetil-4-piridinil)-6.8-difluoro-1-(1-hidroxi-2-propil)-1.4-dihidro-4-oxo-3-quinolinooarboxilato

-6.SET.1S88

60.173

Case 4726/b de etilo 2 XIV; Alk = CgH^, ^R ^{= CR}3 J °btido a partir de 3,77 g de (s)-7-bromo-6,8-difluoro-1-(l-hidroxi-2-propil)-l,4-dihidro-4-oxo-3-quinolinocarboxilato de etilo, 3,19 g de 2,6-d±met±l-4-(trimetilestanil)piridina e 250 mg de diclorobis (trifenilfosfina)paládio em 300 ml de etanol de acordo com o processo do Exemplo 2, dando 2,33 g de produto, sólido incolor, p.f. 191-193° C.

d) (s)-7-(2,6-dimetil-4-piridinil)-6,8-difluoro-l-2 1-(metilsulfoniloxi)-2-propil7-l,4-dihidro-4-oxo-3-quinolinocarboxilato de etilo 2~^xv» Alk ® θ₂ ^Η5» ^R ^{= CH}3 J·

Uma solução de 1,98 g de (s)-7-(2,6-dimetil-4-piridinil)-6,8-difluoro-1-(l-hidroxi-2-propil)-1,4-dihidro-4-oxo-4-quinolinocarboxilato e 1,33 ml de trietilamina em 25 ml de dicloreto de metileno foi arrefecida até -70° C, e foi adicionado 0,55 ml de cloreto de metanosulfonilo, A mistura foi agitada e deixada aquecer lentamente atá à temperatura ambiente, depois lavada com água e acetato de sódio aquoso, secada sobre sulfato de sódio e concentrada para dar 2,31 g de produto sólido, p.f. 180-183° C.

e) (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/~l,2,3-de7 2 l,47benzotiazina-6-carboxilato de etilo 2 *5 ^{R s C}2^H5* ^R* ^{= R}» ^R ^{= CH}3»

X « s/.

Uma mistura de 2,00 g de (s)-7-(2,6-dimetil-4-plridinil)—6,8—difluoro—1 metilsulf oniloxi) -2-propil_74

-1,4-dihidro-4-oxo-3-quinolinocarboxilato de etilo e 40 ml de tetrahidrofurano foi saturada com gás de sulfureto ácido. A mistura foi arrefecida num banhó de gelo seco/álcool isopropílico e 39θ mg de hidreto de sódio (a partir de uma mistura de 60$ em óleo; o óleo foi removido por lavagem com hexano) foram adicionados. 0 banho de arrefecimento foi remo- 33 60.173

Case 4726/B

vido e a mistura de reacção deixada repousar durante três horas. A mistura foi vazada em gelo-água, tornada neutra com ácido clorídrico e solução de acetato de sódio, e extraí da com clorofórmio foi lavado com solução de acetato de sódio e solução de cloreto de sódio, secado (sulfato de- sódio), filtrado e concentrado in vacuo para dar 1,84 g de pro duto sólido, p.f. 237-239°C quando recristalizado de acetona trilo.

f) Ácido (S) -10- (2,6-dime til-4-piridinil) -9-fluoro-3-me til-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de7/”l,47henzotiazina-6-carboxilico /“ij R e R* = H, R = CH^, X = S/.

Uma mistura de 0,95 g de (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido-/*l,2,3-de7/”l,47benzotiazina-6-carboxilato de etilo e lOml de ácido clorídrico 1M foi aquecida ao refluxo durante duas horas. A mistura de reacção foi vazada em gelo-água e extraída com clorofórmio. 0 extrato foi secado (sulfato de sódio)L filtrado e concentrado para dar 0,84 g de produto sólido que foi recristalizado de acetonitrilo para dar 0,62 g de ácido (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de//*1,4/benzotiazina-6-carboxílico, pó cristalino incolor, p.f. 328-331°C» /*7^= + 56,3°.

Exemplo 8

a) (S)-(4-bromo-2,3.5-trifluorobenzoil)-N-(l-hidroxi-2-butil)-3-aminopropeonato de etilo / XII; Alk e R” as = 7 foi P^reP^{arado a} partir de 4-bromo-2,3,5trifluorobenzoilacetato (Exemplo 6b), dimetilformamida e (s)-2-amino-l-butanol pelo processo do Exemplo l(d), e foi

- 34 60.173

Case 4726/b

-6.SET.1S88 obtido na forma de um óleo utilizado directamente na reacção seguinte.

b) (S)-7-bromo-6,8-difluoro-1-(l-hidroxi-2-butil)-1,4-di hidro-4-oxo-3-quinolinocarboxilato de etilo /“XIIIj Alk e R « 7 f°i P^reP^ara<*° a partir do produto bruto da parte (a) e carbonato de lítio de acordo com o processo do Exemplo 7(h), e foi obtido com um rendimento de 62 % como um sólido, p.f. 200-201°C quando recris talizado de acetonitrilo.

c) (s)-7-(2,6-dimetil-4-piridinil)-6,8-difluoro-1-(1-hidroxi-2-butil)-l,4-dihidro-4-oxo-3-quinolinocarboxilato de etilo /“XIV; Alk e R” = foi preparado a partir do produto da parte (b) e 2,6-dimetil-4-(trimetilestanil)piridina na presença de catalisador de paládio de acordo com o processo do Exemplo 2, e foi obtido com cerca de 60% de rendimento como um sólido incolor, p.f. 183-186°C.

d) Ácido (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-etil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/l, 2,3-de7/**l, 47 benzoxazina-6-carboxílico /i; ReR’ = H, R'· » preparado por ciclização do produto da parte (c) com carbonato de potássio aquecido juntamente em solução de dimetilformamida, e hidrolizando o éster resultante com ácido clorídrico. 0 produto foi obtido com cerca de 30% de rendimento na forma de placas incolores, p.f. 239-240°C quando recristalizado de metanol; /^,7^ = -70°,1 (l % em clorofórmio).

A actividade anti-microbiana in vitro dos compostos do presente invento foi determinada por um pro- 35 -6. SET 1888

60.173

Case 4-726/B

cesso de diluição em micro-placa. As culturas bacterianas foram desenvolvidas em caldo Meuller Hinton II (catião suplementado) (S. aureus, S. Faecalis. M, luteus. E. coli e P. aeruginosa), caldo de infusão de Núcleo do Cérebro (Brain Heart Infusion) (BHl) suplementado com soro de cavalo inactivado quente a 10 $ (S. pneumoniae) ou caldo

BHI suplementado com 5 mcg/ml de Hemin e 0,5 mcg/ml de vitamina K (B. fragilis) a 37°C durante 18-24 horas. As culturas foram desenvolvidas sob condições aeróbicas com a excepção de B. fragilis que foi desenvolvido 48 horas sob con dições anaeróbicas (atmosfera de 5 % de COg, 10$ de COg e 85 $ de Ng). As suspensões resultantes foram diluídas na proporção de l/lO no caldo apropriado ou utilizadas não diluídas para o inócuo. Soluções aquosas dos compostos do invento foram solubilizadas em dimetilsulfóxido (DMSO) na con centração desejada e 200 mel foram dispensados na primeira fila de reservatórios de uma micro-placa estéril. Os compos tos foram então diluídos em série duas vezes em DMSO para dar uma placa na gama de concentração de armazenagem de tra balho. A última fila de reservatórios foi deixada isenta de composto recebendo apenas DMSO para servir como um controle de crescimento. Cinco mel de cada reservatório da placa de armazenagem de trabalho foram transferidos para os correspondentes reservatórios de uma placa separada contendo 95 mcl/reservatório de caldo apropriado. Todas as diluições foram feitas quer com um aparelho diluidor automatizado quer manualmente. Os reservatórios de micro-placa contendo as concentrações de compostos desejadas e os controles de crescimento isentos de composto no caldo foram então inoculados utilizando o inoculador MIC 2000 que entrega 1,5 mel/ /reservatório para dar um nível de inoculação final de 10 microorganismos/reservatório ou 10^ microorganismos/ml. Foram inoculadas placas como descrito acima e lidas para desenvolvimento visível. A concentração inibidora mínima (MIC; expressa em mcg/ml) de cada compostos testado contra

60.173

Case 4726/B cada microorganismo de teste foi determinada como a mais baixa concentração de composto que evita o desenvolvimento microbiano visível.

Os compostos seguintes foram testados de acordo com o processo anterior:

A. Ácido (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-8,9-dif luoro-3-me til-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/l ,2,3-de7/”l,47benzoxazina-6-carboxílico (Exemplos 1H e 2b).

B. Ácido (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-me til-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pii’ido/~’l, 2,3-de7 / l,47benzoxazina-6-carboxílico (Exemplo 3c).

C, Ácido (S)-10-2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-etil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/“l,2,3-de7 /”l,47benzoxazina-6-carboxílico (Exemplo 8d).

D, Ácido (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de7 /~l,47benzotiazina-6-carboxílico (Exemplo 7f)·

Compostos da técnica anterior:

P. Ácido 9-fluoro-3-metil-10-(^-metil-l-piperazinil)-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de7/”Ϊ,47 benzoxazina-6-carboxílico·

Q. Ácido 7-(2,6-dimetil-4-piridinil)-l-etil-6-fluoro-1,4-dihidro-4-oxo-3-quinolinoearboxílico.

A Tabela I seguinte sumariza os resultados dosi compostos anteriores:

- 37 60.173

Case 4726/b

Tabela I

J ²⁵

In vitro (mcg/ml)

Composto	ML MIC	EC MIC	SA MIC	SF MIC	SP MIC	PA MIC	BF MIC
A	1	0,125	0,016	0,125	0,06	8	1
B	0,25	0,03	0,008	0,06	0,03	4	0,25
C	0r5	0,016	Z.0,004	0,125	0,06	4	0,5
D	0,06	0,06	0,004	0,06	0,016	2	0,06
P	2	0,008	0,25	2	0,25	0,5	o,5
Q	0,5	0,06	0,03	0,25	0,25	4	2

ML = Micrococcus luteus

EC = Escherichia coli

SA = Staphylococcus aureus

SF = Streptococcus faecalis

SP = Streptococcus pqeumoniae

PA = Pseudomonas aeruginosa

BF = Bacteroides fragilis

- 38 60.173

Case 4726/b

-6.SET.i388

Ver—se-à na Tabela acima que os compostos B e D são essencialmente mais activos que os compostos da técnica anterior (P e Q) contra todos os organismos excepto

E. coli e P. aeruginosa; e os compostos A e C apresentam uma actividade melhorada contra Staph. aureus , Strep. faecalis e Strep. pneumoniae. 0 aperfeiçoamento na actividade é particularmente marcado no caso do importante patogéneo Staph. aureus, onde o composto B é trinta vezes mais activo que o composto P e quatro vezes mais activo que o composto Q; e o composto D é sessenta vezes mais activo que o composto P e oito vezes mais activo que o composto Q.

A actividade anti-bacteriana in vivo dos compostos do presente invento foi determinada em ratos fêmea, com 18-20 gramas cada. SoluçSes aquosas dos compostos a ser testados foram preparados dissolvendo a forma de ácido livre em hidróxido de sódio diluído e diluindo a solução com água destilada até à desejada concentração.

Culturas de E. coli foram desenvolvidas em caldo de infusão de núcleo de cérebro, e os ratos foram inoculados intraperitonealmente com 0,5 ml de inócuo de te_s te bacteriano suspenso em salmoura. Culturas de Staph, aureus foram descongeladas de reservatórios de armazenamento com congelação e misturadas com mucin a 5 $>· Foi utilizada uma preparação de 0,5 ^ml para infectar ratos por inoculação o.p.

Os ratos foram medicados sub-cutaneamente (ac) ou oralmente (po) com 0,5 ml de solução do composto de teste meia-hora depois da infecção. As mortes foram registadas diariamente durante sete dias. Cinquenta por cen to dos valores da dose protectora (Ρϋ^θ) foram calculados utilizando a análise ’'probit”. Os resultados estão indicados na Tabela II seguintes

- 39 60.173

Case 4726/B

-6.SET.iS88

TABELA II

In vivo (Rato, mg/kg)

Composto	Staph. sc	aureus (ΡΌ„θ) po	E. coli sc	PO
A	0,05	0,13	^,7	12,3
B	0,02	0,03		3,0
C	0,2	0,4l	8,8	32,9
D	0,03	0,03	1,5	2,6
P	3,0	6,5	0,48	1,17
Q	0,71	1,38	5,39	8,24

Ver-se-à na Tabela II acima que, embora os compostos A, B e D sejam aproximadamente iguais em actividade ao composto Q e ligeiramente menos activo que o composto 0 contra E, coli, os novos compostos são marcadamente mais activos (15-200 vezes) que os compostos da técnica anterior contra Staph. aureus. 0 composto C é quinze e trin ta vezes mais activo que os compostos P e Q, respeetivamente, contra Staph. aureus mediante administração sub-cutânea.

Em macacos, o composto B deu elevados e prolongados níveis de soro depois de uma dosagem oral de 25mg/ /kgí concentração máxima de 25 /ug/^{ml a} 3,5 horas com me- 40 60.173

Case 4726/B tade de vida de 16 horas.

O composto do Exemplo 4, ácido (s)-8-(benziltio)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de//”l,47benzoxazina-6-carboxílico, também mostrou ter apreciável actividade anti-bacteriana in vitro, valores MIC (/ug/fiil) como segue:

M. luteus (32), E. coli (8), Staph aureus (l), Strep. faecalis (32), Strep. pneumoniae (8), e B. fragilis (32).

composto do Exemplo 6(e), (R)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluoro-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido/”l,2,3-de7/~l,47benzoxazina-6-carboxilato de etilo, embora menos activo que o (s)-isómero (composto B), mostrou ter uma actividade anti-bacteriana substancial in vivi tr o . valores MIC ( /rg/ml) como segue: E. coli (l,o), Staph. aureus (0,25) Strep. faecalis (4) Streo. pneumoniae (l) e B. fragilis (l6).

Os compostos do presente invento podem ser preparados para utilização por processos farmaceuticamente convencionais, isto é, dissolvendo ou suspendendo os mesmos num veículo farmaceuticamente aceitável, por exemplo água, álcool aquoso, glicol, solução de óleo ou emulsão óleo-água para administração parenteral ou oral ou aplicação tópica; ou por incorporação dos mesmos na forma de dosagem unitária como cápsulas ou comprimidos para administração oral, quer isoladamente quer em combinação com adjuvantes ou excipientes convencionais, por exemplo carbonato de cálcio, amido, lactose, talco, estearato de magnésio, goma de acácia, e análogos.

Cfe depósitos dos primeiros pedidos para o invento acima descrito foram efectuados nos Estados Unidos da América em 9 de Setembro de 1987 sob ο N8 094.611 e em

- 4l 60.173

Case 4726 /B

de Julho de 1988 sob o N? 220.717.

Claims

1* _ Processo para a preparação de um composto de fórmula geralί etn que;

em

R é hidrogénio ou alquilo inferior;

R’ é hidrogénio, fluor ou -SR¹’* que R’ é benzilo, fenilo ou alquilo inferior; R” é alquilo com 1 a 3 átomos de carbono; X é 0 ou S;

ou de um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável ou de um sal de metal alcalino ou de amina de um composto em que R é hidrogénio, caracterizado pors

- 42 60.173

Case 4726/B

a) se fazer reagir um composto de fórmula geral!

COOR em que R é alquilo inferior e R' é hidrogénio ou fluor, com um composto de fórmula geral:

-(Alk),

Sn

CH,

CH, em que Alk ó alquilo com 1 a 6 átomos de carbono para preparar um composto correspondente de Fórmula geral I em que X ó O; ou

b) se fazer reagir um composto de fórmula geral:

com sulfureto de hidrogénio para preparar um composto cor- 43 60.173

Case 4726/B respondente de fórmula geral I em que X é S;

se se desejar, hidrolizar o composto de fórmula geral I assim obtido para se obter o correspondente composto em que R é hidrogénio, se se desejar, fazer reagir um composto de fórmula geral I assim obtido em que R’ é fluor com um sulfureto, R”*SH, para produzir um composto de fórmula geral I em que R’ é SR”’, aquecendo, caso se deseje, o último composto com níquel de Raney para substituir o grupo -SR’ por hidrogénio, se se desejar, converter uma base livre obtida para se obter um sal de adição de ácido correspondente,e se se desejar, fazer reagir um composto obtido em que R é hidrogénio com uma base para se obter um sal de metal alcalino ou de amina do mesmo.

2& - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por os reagentes serem escolhidos de modo tal queR seja hidrogénio e R' seja hidrogénio ou fluor.

3a _ Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se preparar o ácido (s)-10-(2,6-dimetil-

4-piridinil)-8,9-difluoro-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido/”l,2,3-de7/”l,47benzoxazina-6-carboxílico.

45 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se preparar o ácido (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido/^-, 2,3-de7/”l,47henzoxazina-6-carboxílico .

5a _ Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se preparar o ácido (s)-10-(2,

6-dimetil-4-piridinil)-9-fluor-3-etil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido/”l,2,3-de7/“l,47benzoxazina-6-carboxílico.

65 - Processo de acordo com a reivindicação 1,

- 44 60.173

Case 4726/B caracterizado por se preparar o ácido (S)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluor-3-metil-7-oxo-8-(benziltio)-2,3-di-hidro-7H-pirido/”l,2,3-de7/”l,47benzoxazina-6-carboxi11co ·

7- - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se preparar o ácido (s)-10-(2,6-dimetil-4-piridinil)-9-fluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido/“l,2,3-de//“l,47benzoxazina-6-carboxílico.