PT759740E

PT759740E - Utilizacao de laminarina e de oligossacaridos derivados de laminarina em cosmetologia para o fabrico de um medicamento destinado ao tratamento da pele

Info

Publication number: PT759740E
Application number: PT95920137T
Authority: PT
Inventors: Jean-Claude Yvin; Florence Levasseur; Fabienne Hud Homme
Original assignee: Goemar Lab Sa
Priority date: 1994-05-11
Filing date: 1995-05-11
Publication date: 2002-01-30
Also published as: FR2719772A1; DE69522103D1; US5980916A; JPH10500126A; JP3701972B2; ES2161888T3; DK0759740T3; EP0759740A1; ATE203894T1; GR3037066T3; FR2719772B1; DE69522103T2; EP0759740B1; WO1995031177A1

Description

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DESCRIÇÃO “Utilização de laminarina e de oligossacáridos derivados de laminarina em cosmetologia para o fabrico de um medicamento destinado ao tratamento da pele” A presente invenção refere-se essencialmente à utilização da laminarina e de oliuossacáridos derivados da laminarina em cosmetologia e para n fabrico de um medicamento destinado ao tratamento da pele.

Sabe-se que a laminarina é um polímero de reserva das algas castanhas constituído por polissacáridos de estruturas ligeiramente diferentes consoante a natureza das algas.

De uma forma geral, a laminarina apresenta uma massa molecular inferior a cerca de 30000 dalions e é constituída por 20 a 60 unidades D-glucopiranósido repartidas ao longo de uma cadeia linear principal, na qual estas unidades são ligadas por ligações β(1-3) e por ramificações ligadas a essa cadeia principal por ligações β(1-6).

Algumas destas cadeias têm uma unidade terminal redutora constituída por uma unidade manitol. Nota-se igualmente a existência de unidades manose no seio dessa estrutura. A laminarina é geralmente extraída de algas marinhas macrófítas castanhas do tipo das feóficeas e em particular Fucáceas ou Laminárias.

Para obter a laminarina podem ser utilizados vários métodos de extraeção.

Reportar-nos-emos por exemplo ao descrito por Black et al., Appl. Chem. (1951), Volume 1, páginas 505 a 517.

De uma forma geral, a laminarina pode ser obtida a partir de algas castanhas por qualquer processo de extraeção que permita eliminar sucessivamente os constituintes diierentes da laminarina (polissacáridos parietais, sais, etc...).

Estes processos fazem apelo, nomeadamente, a etapas de trituração, de precipitações em meio ácido ou básico, de ultrafiltrações e de diálises. 2 87 154 ΕΡ Ο 759740/ΡΤ A laminarina também é comercializada por exemplo pela Sociedade SIGMA Chimie SAJRL. Várias publicações científicas descrevem as propriedades eliciadoras da laminarina, sugerindo a sua utilização para aumentar reacções de defesa de plantas.

Assim, NETZER et al. revelam que uma infecção pelo patogéneo S. oxisporum desencadeia a indução de laminarinase (Biological abstracts, Vol. 68, n° 1, 1979).

De igual modo, BONHOFF et al. revelam as propriedades da laminarina enquanto eliciador de fitoalexina e de calose (Biological abstracts, Vol. 86, n° 4, 1988).

Por outro lado, KUROSAKI et al. (Biological abstracts, Vol. 85, n° 2, 1988) e PEARCE (Biological abstracts, Vol. 74, n° 8, 1982) confirmam os efeitos eliciadores da laminarina, em particular relativamente à lenhifícação, precisando que estes efeitos são fracos quando comparados com os dos eliciadores conhecidos. O pedido de patente francesa n° 9208387 dos requerentes confirma as propriedades eliciadoras da laminarina e a sua utilização para aumentar as reacções de defesa das plantas, e revela ainda que a laminarina apresenta propriedades de eliciador da α-amilase na origem de uma actividade aceleradora da germinação dos grãos e do crescimento das plantas.

Sabe-se por outro lado que a laminarina sulfatada possui propriedades farmacológicas interessantes em particular anticoagulantes e hipocolesterolémicas. (K.C. Guven et al, “Introduction to Applied Physicology”, 1990, páginas 67 a 92).

Foi descoberto, e isto constitui o fundamento da presente invenção, que a laminarina, os oligossacáridos derivados da laminarina e as composições que os contêm apresentam efeitos estimulantes, regeneradores, revitalizantes e energéticos sobre os fibroblastos da derme humana, tecido de sustentação da pele e sobre os queratinócitos da epiderme cutânea humana, células alvo dos produtos cosméticos ou farmacêuticos, nomeadamente dermatológicos.

Estes efeitos foram demostrados pelo estudo da estimulação da neosíntese de proteínas em culturas de células da pele. , ,./:¾ 87 134 fSríS.;

EP 0 759 740/PT 3 í:.

As culturas de células permitem com efeito medir a tolerância e actividade dos produtos a testar, na medida em que, em condições apropriadas de cultura, essas células conservam funções próximas das expressas in vivo.

Parece, sem que constitua uma interpretação teórica, que os efeitos de estimulação obtidos são dev idos aos dois mecanismos seguintes: - por um lado, a laminarina, os oligossacáridos derivados da laminarina e as composições que os contem teriam um efeito nutritivo e levariam às células elementos ausentes do meio de cultura ou presentes em quantidade insuficiente; - por outro lado, esses produtos teriam um efeito semelhante ao de uma hormona (“hormoiie lihe”). isto c. cies transmitiriam às células sinais que modificariam a actividade destas últimas.

Constatou-se que os efeitos de estimulação da laminarina, os oligossacáridos derivados da laminarina e as composições que os contêm se manifestam a concentrações fracas, compatíveis com as que podem ser utilizadas numa formulação cosmética ou farmacêutica.

Assim, de acordo com um primeiro aspecto, o presente pedido visa cobrir a utilização em cosmetologia da laminarina e de oligossacáridos derivados da laminarina como agente estimulante, regenerador, revitalizante e com actividade energética sobre os fibroblastos e os queratinócitos. A expressão “oligossacáridos derivados da laminarina” utilizada no âmbito da presente descrição e reivindicações, designa qualquer produto susceptível de ser obtido a partir da laminarina por um processo comportando a sua hidrólise química ou enzimática. A hidrólise química será geralmente realizada por acção sobre a laminarina, de um ácido como por exemplo ácido sulfúrico 0,1 M a uma temperatura compreendida entre 50°C e 100"C e de preferência a cerca de 80°C, numa duração compreendida entre 3 horas e 8 horas, de preferência 6 horas.

Esta hidrólise será eventualmente seguida por uma neutralização por adição de uma base forte até à obtenção de um pH compreendido entre 6 e 8, depois por uma etapa de dessalificação por passagem do produto assim neutralizado por uma resina permutadora de 4 87 154 ΕΡ Ο 759 740 / ΡΤ iões e eventualmente por uma etapa de redução sob a forma de pó por liofilização ou atomização. A hidrólise cnzimática será geralmente realizada por acção, sobre a laminarina, de uma enzima do tipo Endo β-glucanase tal como a laminarinase que pode ser de origem animal, vegetal, bacteriana ou fúngica.

Os parâmetros de hidrólise (pH, temperatura, duração, concentrações do substrato e da enzima) poderão ser facilmente determinadas pelo perito na arte em função das condições óptimas de actividade da enzima.

Após inactivação da enzima, que pode ser realizada a 100°C durante 10 minutos, o produto obtido será eventualmente submetido a uma ultrafiltração tangencial de 50000 Daltons, depois a uma etapa de dessalificação sobre resina permutadora de iões e eventualmente a uma redução sob a forma de pó por liofilização ou atomização.

De uma forma geral, a laminarina e os oligossacáridos derivados da laminarina utilizados como agente estimulante, regenerador, revitalizante e com actividade energética sobre os fibroblastos e os queratinócitos no âmbito da presente invenção permite o fabrico de composições cosméticas.

De acordo com uma característica particular, esta composição cosmética compreende, expressa em percentagem ponderai, de 0,00001% a 10% de laminarina ou oligossacáridos derivados da laminarina.

Vantajosamente, esta quantidade estará compreendida entre 0,1% e 5%.

Uma tal composição cosmética pode-se apresentar sob a forma de uma solução aquosa, de emulsão simples ou múltipla ou ainda sob a forma sólida, nomeadamente de pó, comprimido ou gélula.

Estas composições serão preparadas de acordo com os métodos habitualmente utilizados nos domínios cosmético ou farmacêutico.

Por exemplo, a laminarina ou os oligossacáridos derivados da laminarina poderão ser dissolvidos numa fase aquosa para a preparação de uma solução aquosa.

M Í.ÍÂ&& 87 154 ΕΡ Ο 759 740 / ΡΤ

Esta solução poderá eventualmente permitir a obtenção de uma emulsão por mistura com diferentes compostos tais como tensioactivos ou emulsionantes, óleos ou ácidos gordos, alcoóis gordos, ceras, gelificantes, umectantes, glicerina ou glicóis.

De modo facultativo, estas composições poderão ainda compreender uma substância adicional escolhida de entre os conservantes e os perfumes.

De acordo com um segundo aspecto, o presente pedido visa cobrir a utilização da laminarina ou de oligossacáridos derivados da laminarina no fabrico de um medicamento destinado ao tratamento da pele.

De acordo com uma característica particular, esse medicamento apresentar-se-á sob a forma sólida, nomeadamente de pó, comprimido, gélula ou de xarope bebível ou de creme para aplicação tópica.

Estas formas farmacêuticas serão preparadas de acordo com os métodos usuais. O princípio activo constituído por uma quantidade farmaceuticamente eficaz de laminarina ou de oligossacáridos derivados da laminarina será incorporado em excipientes habitualmente empregues nessas composições farmacêuticas, tais como talco, goma arábica, lactose, amido, estearato de magnésio, polividona, derivados da celulose, corpos gordos de origem animal ou vegetal, e diversos agentes molhantes, dispersantes ou emulsionantes assim como conservantes, aromas e corantes.

De acordo com um terceiro aspecto, o presente pedido visa cobrir uma composição cosmética ou farmacêutica, nomeadamente dermatológica, caracterizada por compreender, como ingrediente activo, uma quantidade eficaz de oligossacáridos derivados da laminarina, em associação com um suporte ou veículo cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.

De acordo com uma característica particular, esta composição cosmética compreende, expressa em percentagem ponderai, de 0,00001% a 10% de oligossacáridos denvados da laminarina.

Vantajosamente, esta quantidade estará compreendida entre 0,1% e 5% em peso. 87 154 ΕΡ Ο 759 740 / ΡΤ 6

Estas composições podem ser preparadas de acordo com os métodos habitualmente utilizados nos domínios cosmético ou farmacêutico e relembrados anteriormente. E feita referência às figuras 1 e 2. A presente invenção será ilustrada em mais detalhe com o auxílio dos exemplos não limitativos que se seguem. A laminarina pode ser extraída, de acordo com o processo mencionado no pedido de patente francês n° 92.08387. Os exemplos 1 e 2 seguintes ilustram outros processos de obtenção da laminarina ou de oligossacáridos derivados da laminarina.

Exemplo 1

Processo dc extraccão da laminarina a partir de uma alga castanha

Submete-se 105 g de algas secas do tipo Laminaria digitata a uma extraeção com 1,5 L de ácido sulfúrico 0,09 M. A extraeção é realizada em banho-maria a uma temperatura de cerca de 70°C durante 2H30. O extracto é filtrado sob vácuo num filtro Whatman GF/A e depois num filtro Millipore de 0,45 pm. O líquido assim obtido é submetido a uma ultrafiltração tangencial a 5000 Daltons. Para este efeito, utilizou-se um sistema Pellicon comercializado pela Sociedade MILLIPORE, equipado com um cartucho de porosidade 5000 Daltons, associado a uma bomba Procou igualmeiile comercializada pela Sociedade MILLIPORE. A operação é realizada mantendo uma pressão de 3 bar sobre o cartucho de filtração. 87 154

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Obtém-se assim um filtrado com cerca de 1,3 litros e com pH 3 a 5, que é em seguida submetido a uma liofilização para conduzir a 5,5 g de pó seco correspondente à laminarina pura a 90%.

Exemplo 2

Processo de preparação de oligossacáridos derivados da laminarina

Submete-se 10 g da laminarina extraída de acordo com o Exemplo 1 à acção de 1 g de uma β(1-3) glucanase (laminarinase). A reacção enzimática é realizada em 1 L de meio tampão de acetato 0,05 M com pH 5. Põe-se esta mistura a incubar a 37°C durante 20 minutos. Em seguida efectua-se uma inactivação da enzima em banho-maria a 100°C durante 10 minutos. Após arrefecimento á temperatura ambiente, o produto é submetido a uma ultrafiltração tangencial a 50000 Daltons de maneira a eliminar a enzima inactivada.

Esta operação é realizada sobre uma membrana tubular carbono-cerâmica do tipo “Carbosep” com porosidade 50000 Daltons. A operação é realizada mantendo uma pressão de 1 bar sobre a coluna de filtração. Obtém-se assim um filtrado apresentando um volume de cerca de 0,9 litro, com pH 5 e com resistividade = 175 Ohms/cm.

Este é em seguida submetido a uma etapa de desclassificarão. Para este efeito, ele é tratado numa coluna de resina permutadora de catiões do tipo permutador forte tal como Amberlite IR 120® e em seguida numa coluna de resina permutadora de aniões do tipo permutador forte tal como Amberlite IRA 400®.

Obtém-se assim um produto apresentando uma resistividade de 2000 Ohms/cm, com um volume de 0,9 L. Após atomização, obtêm-se 3,6 g de oligossacáridos derivados da laminarina. A laminarina e os oligossacáridos derivados da laminarina obtidos nos exemplos 1 e 2 foram submetidos a uma cromatografia em fase líquida de elevado rendimento.

Os espectros de HPLC obtidos são apresentados respectivamente nas figuras 1 e 2.

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Precisa-se que esses espectros foram obtidos com uma injecção de 50 μΐ utilizando um cromatógrafo DIONEX® e um amperímetro como detector.

Exemplo 3

As propriedades dos produtos de acordo com a presente invenção foram postas em evidência cfectuando as experiências aqui descritas a seguir.

Experiência N° 1

Evidenciação das propriedades estimulantes da lamínarina em culturas de fibrohlastos da derme humana O efeito da laminarina obtida de acordo com o exemplo 1 foi estudada em culturas de fibroblastos da derme humana. A actividade da laminarina foi avaliada após 20 horas de incubação pela medição de um parâmetro funcional, a incorporação de Leucina radiomarcada no carbono 14 nas proteínas, reflecte a neosíntese de proteínas.

Os fibroblastos foram isolados a partir de remoções de pele efectuados quando de plastias mamárias em mulheres com 44 anos de idade. Estes fibroblastos foram obtidos por dissociação da epiderme e da derme pela tripsina.

Foram efectuadas em paralelo culturas testemunhos, na ausência de laminarina: J quer em meio “cultura-testemunhos”: - MCIF: meio de cultura para incubação de fibroblastos na presença de meio MEM (meio mínimo essencial) adicionado de 100 Ul/ml de penicilina e 100 pg/ml de estreptomicina. J quer em meio “cultura-testemunhos positivo”: - MCAJF meio de cultura para acoplamento de fibroblastos: meio MEM/M199 (designação dada ao meio de cultura Standard) nas proporções de 3/4:1/4 (V/V) adicionado de 100 Ul/ml de penicilina, de 100 pg/ml de estreptomicina e de 10% (V/V) de soro de vitela fetal (SVF). O meio completo (testemunhos positivos) provoca um aumento da incorporação da leucina nas proteínas de fibroblastos num factor igual a 1,7.

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Este valor situa-se na gama dos habitualmente obtidos em laboratório; ele demonstra a capacidade das células responderem a factores estimulantes. A laminarina obtida de acordo com o Exemplo 1 foi posta em presença dos fíbroblastos em proliferação durante 20 horas.

Os fíbroblastos foram incubados com a leucina radiam arca Ha nn 14C (marcação no l4C do carbono 1, actividade específica 1,92 GBq/mmole) durante 4 horas. O meio de cultura utilizado para a incorporação de l4C leucina nas proteínas é o meio MEM sem leucina adicionado de 100 Ul/rnl de penicilina, de 100 pg/ml de estreptomicina e de 9,6 10"6M de leucina radiomarcada (18,5 kBq/ml). Os tapetes celulares foram lavados a fim de eliminar o percursor não incorporado e em seguida contados por cintilação líquida. Os valores foram expressos em dpm/poço de cultura. A laminarina é directamente solubilizada no meio de incubação a doses de 0,1, 1, 10, 100 e 1000 pg/ml. Cada ensaio é repetido 4 vezes.

Os resultados obtidos são reagrupados no quadro seguinte:

Testemunhos Sem LAMINARINA em pg/ml laminarina 0,1 1 10 100 1000 Ensaio 1 818 872 877 1015 979 978 Ensaio 2 761 801 976 1188 1108 1070 Ensaio 3 739 848 926 973 980 974 Ensaio 4 769 875 888 1070 932 1053 Média 772 849 917 1062 1000 1019 ± + + + + ± ± Desvio padrão 33 34 45 93 76 50 % relativamente ao testemunho 100 110 119 138 130 132 A laminarina apresenta, nas condições experimentais testadas, uma actividade óptima à concentração de 10 pg/ml.

87 154 ΕΡ Ο 759 740 / ΡΤ 10 A laminarina aumenta a neosíntese de proteínas nos fíbroblastos, num factor de 1,3 a concentrações compreendidas entre 10 e 1000 pg/ml, num meio de cultura totalmente desprovido de soro de vitela fetal, o que demonstra o efeito estimulante da laminarina.

Experiência N° 2

Evidcnciação das propriedades estimulantes da laminarina em culturas de qucratinòcitos da epiderme humana O efeito da laminarina obtida de acordo com o Exemplo 1 foi estudada em culturas de qucratinòcitos da epiderme humana. A sua actividade foi avaliada após 20 horas de incubação pela medição de um parâmetro funcional, a incorporação de leucina radiomarcada no carbono 14 nas proteínas, reflecte a neosintesc dc proteínas.

Os qucratinòcitos foram isolados a partir de remoções de pele efectuados quando de plastias mamárias em mulheres com 34 anos de idade. Estes queratinócitos foram obtidos por dissociação da epiderme e da derme pela tripsina, eles foram cultivados com fíbroblastos de embriões dc ratinho (3T3) cuja capacidade de se dividirem foi bloqueada pela mitomicina C (modelo dc Green).

Foram efectuadas em paralelo culturas testemunhos, na ausência de laminarina: J quer em meio “cultura-testemunhos” (MCIQ) meio de cultura para a incubação de queratinócitos na presença de compostos MCAQ, meio sem factor de crescimento epidérmico EGF, nem soro de vitela fetal SVF, diluído a 1/1 Oe em meio MEM (Meio mínimo essencial), adicionado de 100 Ul/ml de penicilina e 100 pg/ml de estreptomicina. J quer em meio “cultura testemunhos positivos” MCAQ: meio de cultura para acoplamento de queratinócitos, isto é meio MEM/M199 (designação dada ao meio de cultura Standard) nas proporções de 3/4:1/4 (V/V) adicionado de 100 Ul/ml de penicilina, de 100 pg/ml de estreptomicina e de 10% (V/V) de soro de vitela fetal, de 10 ng/ml de factor de crescimento epidérmico (EOF), de 10 ng/ml de toxina colérica, de 5 pg/ml de insulina bovina, de 0,4 pg/ml de hidrocortisona, de 5 pg/ml de colina e de 8,5 pg/ml de inositol. A laminarina foi posta em presença dos queratinócitos em proliferação durante 20 horas. 87 154 ΕΡ Ο 759 740 / ΡΤ 11

Os queratinócitos foram incubados com a leucina radiomarcada no I4C durante 4 horas. O meio de cultura utilizado para a incorporação de l4C leucina nas proteínas é o meio MEM sem leucina adicionado de 100 Ul/ml de penicilina, de 100 pg/ml de estreptomicina e dc 9,6 10 6M de leucina radiomarcada (18,5 kBq/ml).

Os tapetes celulares foram lavados a fim de eliminar o percursor não incorporado e em seguida contados por cintilação líquida. Os valores foram expressos em dpm/poço de cultura. A laminarina é directamente solubilizada no meio de incubação a doses de 0,1, 1, 10, 100 e 1000 pg/ml. Cada ensaio é repetido 4 vezes.

Os resultados obtidos são reagrupados no quadro seguinte:

Testemunhos sem LAMINARINA em pg/ml laminarina 0,1 1 10 100 1000 Ensaio 1 5862 6033 6522 7462 7693 6264 Ensaio 2 5642 6733 7178 8159 8778 7723 Ensaio 3 5642 5869 7449 9909 7713 7386 Ensaio 4 5375 4966 5648 8241 7073 7811 Média 5630 5900 6699 8443 7814 7296 + + + + + ± + Desvio padrão 199 727 802 1038 708 712 % relativamente ao testemunho 100 105 119 150 139 130

,*

Assim, a laminarina aumenta a neosíntese de proteínas nos queratinócitos, num factor de 1,3 a 1,5 nas concentrações compreendidas entre 10 e 1000 pg/ml. Ela apresenta, nas condições experimentais testadas, uma actividade óptima à concentração de 10 pg/ml.

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Experiência Ν° 3

Evidenciação das propriedades estimulantes dos oligossacáridos derivados da laminarina em culturas de fibroblastos da derme humana

Nesta experiência, o efeito estudado é o dos oligossacáridos derivados da laminarina obtidos de acordo com o Exemplo 2.

As condições operatórias desta experiência são as mesmas da Experiência N° 1. Os oligossacáridos são directamente solubilizados no meio de incubação a doses de 0,1, 1, 10, 100 e 1000 pg/ml. Cada ensaio é repetido 4 vezes.

Os resultados obtidos são reagrupados no quadro seguinte:

Testemunhos sem laminarina OLIGOSSACÁRIDOS DERIVADOS DA LAMINARINA (pg/ml) 0,1 1 10 100 1000 Ensaio 1 818 798 861 1022 1014 1059 Ensaio 2 761 925 947 1074 1169 958 Ensaio 3 739 846 860 1146 1184 984 Ensaio 4 769 806 781 1163 1154 1129 Média 772 844 862 1101 1130 1032 ± ± ± + ± ± ± Desvio tipo 33 58 68 65 78 77 % relativamente ao testemunho 100 109 112 143 146 134

Estes resultados mostram que os oligossacáridos derivados da laminarina aumentam a neosíntese de proteínas nos fibroblastos da derme humana, num factor de 1,4 a concentrações compreendidas entre 10 e 1000 pg/ml. Os efeitos máximos são observados a 10 e 100 pg/ml. ν' / ' ' ^ 87 15Ί ΕΡ Ο 759 740/ΡΤ 13

Experiência Ν° 4

Evidenciação das propriedades estimulantes de oligossacáridos derivados da laminarina em culturas de queratinócitos da epiderme humana

As condições operatórias desta experiência são as mesmas da Experiência n° 2. Os oligossacáridos são directamente solubilizados no meio de incubação a doses de 0,1, 1, 10, 100 e 1000 pg/ml. Cada ensaio é repetido 4 vezes.

Os resultados obtidos são reagrupados no quadro seguinte: I estemunhos sem LAMINARINA em pg/ml laminarina 0,1 1 10 100 1000 Ensaio 1 5862 6652 7075 8124 9028 7503 Ensaio 2 5642 6551 7281 8239 9314 9181 Ensaio 3 5642 6701 7361 8862 9483 8611 Ensaio 4 5375 5627 6379 9973 8634 7697 Média 5630 6383 7024 8812 9115 8248 + f + + + + ± Desvio tipo 199 508 447 836 371 788 % relativamentc ao testemunho 100 113 125 157 162 146

Estes resultados mostram que os oligossacáridos derivados da laminarina aumentam a neosíntese de proteínas nos queratinócitos da epiderme humana, num factor de 1,6 a concentrações compreendidas entre 1 e 1000 pg/ml. Os efeitos máximos são observados a 10 e 100 pg/ml.

Apresentar-se-ão nos Exemplos 4 a 7 que se seguem diferentes composições cosméticas ou farmacêuticas contendo a laminarina ou oligossacáridos derivados da laminarina tal como preparados nos Exemplos 1 e 2. 14 87 154 ΕΡ Ο 759 740 / ΡΤ

Exemplo 4

Formulação de uma pomada farmacêutica com acção cicratizante na qual se integrou a laminarma

POMADA CICRATIZANTE % Óleo de parafina 95,1

Trioleato de sorbitano polioxietileno (200E) 2,5

Extracto de calêndula 1,0 Óleo essencial de Malaleuca Alternifolia 0,5

Laminarina 0,5

Conservante 0,4

Exemplo 5

Formulação de um creme cosmético com accão regeneradora contendo a laminarina como princípio activo

CREME REGENERANTE % Água purificada 69,4

Estearato de isocetilo 11,0

Extracto de algas 6,0 Álcool cetílico 4,0

Estearato de glicerol 3,5 Éter de polietilenoglicol do estearato de glicerol 3,5 Óleo de silicone 1,0

Laminarina 0,6

Carboxilato sódico de pirrolidona 0,5

Conservante 0,3

Perfume 0,2 15 87 134 ΕΡ Ο 759 740 / ΡΤ

Exemplo 6 Formulação de uma loção hidratante contendo oligossacáridos derivados de laminarina como princípio activo [,OCÂO HIDRATANTF. % Água 89,1 Extracto de algas 8,0 Glicerina 1,5 Oligossacáridos de laminarina preparados segundo o Exemplo 2 1,0 Conservante 0,3 Perfume 0,1

Exemplo 7 Formulação de um dentífrico marinho contendo oligossacáridos derivados de laminarina como princípio activo. DENTÍFRICO MARINHO % Água 47,6 Carbonato de cálcio 25,0 Alga vermelha 12,0 Extracto de alga 10,0 Carragcnano 2,0 Oligossacáridos de laminarina preparados segundo o Exemplo 2 1,0 Sílica 0,8 Laurilétersulfato de sódio 0,8 Metilparabeno 0,5 Aroma 0,3

Lisboa,

Por LABORATOIRES GOEMAR S.A. - O AGENTE OFICIAL -

Claims

,'-ff ,Λ 87 154 ΕΡ Ο 759 740/PT 1/2 REIVINDICAÇÕES 1 - Utilização em cosmetologia de laminarina e de oligossacáridos derivados da laminarina como agente estimulante, regenerador, revitalizante e com actividade energética sobre os fibroblastos e os queratinócitos.
2 Utilização de acordo com a reivindicação 1, numa composição compreendendo, expresso em percentagem ponderai, de 0,00001% a 10% de laminarina ou oligossacáridos derivados da laminarina.
3 - Utilização de acordo com a reivindicação 1, numa composição cosmética compreendendo, expresso em percentagem ponderai, entre 0,1% e 5% de laminarina ou oligossacáridos derivados da laminarina.
4- Utilização de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, numa composição cosmética apresentando-se sob a forma de uma solução aquosa, de emulsão simples ou múltipla.
5 - Utilização de laminarina e de oligossacáridos derivados da laminarina para o fabrico de um medicamento destinado ao tratamento da pele.
6 - Utilização de acordo com a reivindicação 5, caracterizada por o medicamento acima citado se apresentar sob a forma sólida, nomeadamente de pó, comprimido, gélula ou de xarope bebível ou de creme para aplicação tópica.
7 - Composição cosmética ou farmacêutica, nomeadamente dermatológica, caracterizada por compreender, como ingrediente activo, uma quantidade eficaz de oligossacáridos derivados da laminarina, em associação com um suporte ou veículo cosmeticamente ou farmaceuticamente aceitável.
8 - Composição de acordo com a reivindicação 7, caracterizada por compreender, expressos em percentagem ponderai, de 0,00001% a 10% de oligossacáridos derivados da laminarina.
9 - Composição de acordo com a reivindicação 8, caracterizada por compreender, expressos em percentagem ponderai, entre 0,1% e 5% de oligossacáridos derivados da laminarina. 87 154 ΕΡ Ο 759 740 / ΡΤ 2/2
10 - Composição de acordo com uma das reivindicações 7 a 9, caracterizada por se apresentar sob a forma de uma solução aquosa, de emulsão simples ou múltipla ou ainda sob a forma sólida, nomeadamente de pó, comprimido ou gélula. Lisboa, Por LABORATOIRES GOEMAR S.A. - O AGENTE OFICIAL -