PT2588457E - Derivados de pirazoloquinolinas como inibidores de dna-pk - Google Patents

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Description

DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE PIRAZOLOQUINOLINAS COMO INIBIDORES DE DNA-PK" A invenção é relativa a compostos com as Fórmulas (I), (II) e (III)
em que Rl, R2, R3, R4, R5, R8, R9, RIO e X apresentam o significado indicado nas reivindicações, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as suas misturas em todas as relações. É possível empregar os compostos com a Fórmula (I) na inibição de serina treonina proteína cinases, e na sensibilização de células cancerígenas relativamente a agentes oncológicos e/ou a radiação ionizante. A invenção também tem por objeto a utilização dos compostos com a Fórmula I na profilaxia, na terapia e no controlo da evolução do cancro, de tumores, metástases ou distúrbios de angiogénese, em combinação com radioterapia e/ou um agente oncológico. A invenção é ainda relativa a um processo para a produção dos compostos com a Fórmula (I) através da transformação dos compostos com a Fórmula (II) ou (III) e eventualmente transformação de uma base ou de um ácido dos compostos com a Fórmula (I) num dos seus sais. A proteína cinase dependente do ADN (DNA-PK) é uma serina/treonina proteína cinase, que é ativada em ligação com o ADN. Dados bioquímicos e genéticos mostram que a DNA-PK (a) consiste numa subunidade catalítica, que se designa por DNA-PKcs, e (b) dois componentes reguladores (Ku70 e Ku80) . Em termos funcionais, a DNA-PK é um componente decisivo, por um lado, da reparação de quebras de cadeia dupla de ADN (DSBs) e, por outro, da recombinação somática ou V(D)J. Além disso, as DNA-PK e os seus componentes são relacionados com uma série de outros processos fisiológicos, dentre os quais a modulação da estrutura de cromatina e a manutenção dos telómeros (Smith & Jackson (1999) Genes and Dev 13: 916; Goytisolo et al. (2001) Mol. Cell. Biol. 21: 3642; Williams et al. (2009) Cancer Res. 69: 2100). O material genético na forma do ADN encontra-se continuamente sujeito ao ataque de espécies reativas de oxigénio (ROS), que surgem sobretudo como produtos secundários do metabolismo oxidativo. As ROS são capazes de causar danos ao ADN na forma de quebras de cadeia simples. Podem ocorrer quebras de cadeia dupla se as quebras que ocorreram de cadeia simples tiverem tido lugar em estreita proximidade. Além disso, é possível originar quebras de cadeia simples e de cadeia dupla, se a forquilha de replicação do ADN ocorrer em modelos de base danificados. Além disso, influências exteriores ao corpo, como a radiação ionizante (por exemplo, radiação gama ou de iões pesados), e determinados medicamentos oncológicos (por exemplo, a bleomicina) são capazes de provocar quebras de cadeia dupla de ADN. As DSB podem ainda ocorrer como produtos intermédios da recombinação somática, um processo que é significativo para a formação de um sistema imunitário funcional de todos os animais vertebrados. Se as quebras de cadeia dupla de ADN não forem reparadas ou forem mal reparadas, poderão surgir mutações e/ou aberrações cromossómicas, que poderão ter por consequência a morte celular. De modo a contrariar os riscos graves resultantes de quebras de cadeia dupla de ADN, as células eucarióticas desenvolveram vários mecanismos para os superar. Os eucariontes superiores fazem sobretudo uso neste caso da denominada ligação terminal não homóloga (non-homologous end-joining, NHEJ), na qual a proteína cinase dependente de ADN assume o papel-chave. Estudos bioquímicos demonstraram que a DNA-PK é ativada de forma mais eficaz pelo aparecimento de DNA-DSBs. As linhas celulares, cujos componentes de DNA-PK estão mutados e não são funcionais, dão mostras de ser sensíveis a radiação (Smith e Jackson, 1999). A DNA-PK pertence, devido ao seu domínio catalítico, que se encontra na subunidade catalítica C-terminal de aproximadamente 500 aminoácidos (DNA-PKcs), à família das cinases relacionadas com a fosfatidilinositol-3 cinase (PIKK), em que a DNA-PK não representa uma cinase lipídica (Hartley et al. (1995) Cell 82: 849; Smith & Jackson (1999) Genes and Dev 13:916; Lempiáinen & Halazonetis (2009) EMBO J. 28 : 3067) . A proteína cinase ATM (cinase mutada da ataxia telangiectasia) também pertence à família PIKK. Esta também tem um significado central no reconhecimento de danos ao ADN. Os doentes que padecem de ataxia telangiectasia mostram, entre outros, uma maior sensibilidade relativamente a radiação ionizante. (Lavin & Shiloh (1997) Annu. Rev. Immunol. 15: 177; Rotman & Shiloh (1998) Hum. Mol. Genet. 7: 1555).
Izzard et al. (1999) Cancer Res. 59: 2581 descreve que ο inibidor da cinase PI3 LY294002 inibe em experiências in vitro a função da DNA-PK. 0 valor IC50 (concentração aquando de 50% de inibição da atividade enzimática) encontra-se com pouca eficácia em 1,25 μΜ (ATP 5,0 mM) .
Embora se tenha comprovado que o inibidor LY294002 faça com que as células de mamíferos fiquem mais sensíveis a radiação, ou seja, reforce a citotoxicidade da radiação ionizante, em princípio uma aplicação na radioterapia, por exemplo, de tumores cancerígenos sólidos, apenas foi possível detetar a nível celular, no caso do LY294002, um ligeiro aumento da sensibilidade em relação à radiação ionizante (Rosenzweig et al. (1999) Clin. Cancer Res. 3: 1149). KuDOS Pharmaceuticals Ltd. otimizaram a estrutura condutora LY294002 e propuseram diferentes inibidores da DNA-PK. A introdução de um grupo dibenzotiofenilo levou ao inibidor NU-7441, de um composto competitivo com ATP com um valor IC50 de 20,0 nM (Hardcastle et al. (2005) J. Med. Chem. 48: 7829). KU-0060648 reúne propriedades inibidoras relativamente à DNA-PK com um melhor perfil de solubilidade em meio aquoso, mas contudo também se inibe de modo potente as cinases da família da isoenzima PI3K através do KU-0060648. A necessidade existente há muito tempo de um inibidor de DNA-PK potente e seletivo não foi assim satisfeita até à data. A invenção tem por objetivo superar as desvantagens mostradas no estado da técnica e desenvolver inibidores eficazes da DNA-PK, que sejam seletivos relativamente a cinases aparentadas da família PIKK e também que tenham baixo peso molecular e que permitam, em particular, uma aplicação eficaz na terapia oncológica como sensibilizante a radioterapia e a quimioterapia - com o objetivo de melhorar a eficácia terapêutica com uma redução em simultâneo dos efeitos secundários.
Atinge-se o objetivo da invenção de acordo com as reivindicações principais. As reivindicações dependentes contêm formas de execução preferidas. Em conformidade com a invenção, prepara-se os compostos com a Fórmula (I)
(D em que
Rl significa Y, -Alk-OY, -Alk-NYY ou -Alk-Ar, R2 significa Y, -Alk-OY, -Alk-NYY, -C (Y) (R6) (R7) , C(Hal) (R6) (R7) , -S02A, -S02A ou -POOH-Ar, R3 significa H, Hal, CN, -Alk-CN, -Alk-NYY, Het1 ou Het2, R4 significa Hal, Y, Cyc, CN, -Alk-CN, -Alk-COOY, -Alk- CO-NYY ou Het1, R5 significa Hal, Y, ΟΥ, NYY, -NY-COY, COOY, -CO-NYY, - CO-NY-Alk-OY, -Alk-CO-NYY, -Alk-OY, -Alk-NYY, Ar, Het1 ou Het2, R3, R5 significam em conjunto também -Alk-CO-NY-, R6 significa Hal, Y, -COOY, -CO-NYY, -CO-NY-OY, -CO-NY- C(=NH)-NYY, -CO-NY-Alk-OY, -CO-NY-Alk-NYY, -C0-NY-Alk-S02-NYY, -CO-NY-Alk-Ar, -CO-NY-Alk-Het2 ou -CO-NY-O-Alk-CN, R7 significa Ar, Het1 ou -Het1-Het1, X significa CH2, 0, S ou Het1, Y significa H ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com Ι-ΙΟ átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-7 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou de forma independente entre si um ou dois grupos CH2 adjacentes podem estar substituídos por um grupo -CH=CH- e/ou -C=C-, Alk significa alquileno com 1-6 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-4 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou OY,
Cyc significa alquilo cíclico com 3-7 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-4 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou OY,
Ar significa fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal, A, CN, OY, NYY, -NY-COY, COOY, Het1, Het2, -Alk-OY, -Alk-NYY, -Alk-Het1 ou Alk-Het2,
Het1 significa um heteroarilo monocíclico ou bicíclico com 2-9 átomos de C e 1-4 átomos de N, de 0 e/ou de S, não substituído ou que pode estar monossubstituído por Hal, A, CN, OY, NYY, -NY-COY, COOY, -Alk-OY ou -Alk-NYY,
Het2 significa um heterociclo saturado monocíclico com 2-7 átomos de C e 1-4 átomos de N, de 0 e/ou de S, que pode não estar substituído ou pode estar monossubstituído por A, e Hal significa F, Cl, Br ou I, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações.
De forma surpreendente, verificou-se que os compostos de acordo com a invenção são providos de propriedades inibidoras em relação a serina-treonina proteína cinases. Os compostos com a Fórmula (I) estão concebidos, graças à sua estrutura nuclear da pirazoloquinolina, à qual adere pelo menos uma substituição alcoxi, preferencialmente duas substituições alcoxi, e um fenilo opcionalmente substituído, de modo a que ocorra uma inibição potente e seletiva da DNA-PK. Os compostos de acordo com a invenção abrem assim novas possibilidades em termos de ação anticancerígena dos agentes oncológicos. É significativo que os compostos com a Fórmula (I) desempenham um papel terapêutico como sensibilizadores de radioterapia e de quimioterapia no tratamento do cancro.
Até à data conhece-se apenas do WO 1992/07844 que os derivados de 2,4-diaminoquinazolina são reforçantes dos meios quimioterapêuticos no tratamento oncológico. Os derivados abordam a multirresistência das células tumorais na sequência da sobrexpressão do gene mdrl, cujo produto genético de uma bomba de glicoproteínas de efluxo P mantém baixa a concentração intracelular de substância ativa. Genericamente, encontram-se também descritos inibidores da fosfatidilinositol-3 cinase no WO 2009/155527, que não apresentam a estrutura concretizada de acordo com a Fórmula (I) de acordo com a invenção nem a substituição alcoxi. Nenhum dos dois documentos do estado da técnica revela dados físicoquímicos e farmacológicos. Também pouco se conhece em termos de um medicamento comercializado. Em contrapartida, a presente invenção revela que os compostos com a Fórmula (I) são capazes de inibir especificamente as serina-treonina proteína cinases, como a DNA-PK. Os compostos de acordo com a invenção e os seus sais possuem as seguintes propriedades farmacológicas valiosas, tendo ao mesmo tempo uma boa compatibilidade.
No âmbito da invenção, os compostos com a Fórmula (I) são definidos de modo a que os mesmos também englobem derivados, sais, hidratos, solvatos, precursores dos compostos, tautómeros e formas oticamente ativas (como, por exemplo, estereoisómeros, diastereómeros, enantiómeros, racematos) de utilização em farmácia. Os solvatos dos compostos são adições de moléculas de solventes inertes aos compostos, que se formam devido à sua força de atração contrária. Os solvatos são, por exemplo, mono-hidratos ou di-hidratos ou alcoolatos. Os derivados de utilização em farmácia tratam-se, por exemplo, dos sais dos compostos de acordo com a invenção e também dos denominados percursores dos compostos. Os precursores tratam-se, por exemplo de compostos derivados de grupos alquilo ou acilo, açúcares ou oligopéptidos, com a Fórmula (I), que no organismo se dissociam rapidamente nos compostos eficazes de acordo com a invenção. A estes também pertencem os derivados poliméricos biodegradáveis dos compostos de acordo com a invenção, como descrito, por exemplo, em Int. J. Pharm. 115, 61-67 (1995). Qualquer composto que possa ser transformado in vivo num meio bioativo, ou seja, compostos com a Fórmula (I), é um percursor no sentido da presente invenção. Qualquer composto biologicamente ativo, que resulte do metabolismo in vivo de um composto de acordo com a invenção, é um metabólito no sentido da presente invenção. Os compostos com a Fórmula (I) podem ter um ou mais centros quirais e encontrar-se por isso em diferentes formas estereoisoméricas. A Fórmula (I) compreende todas estas formas. A invenção também tem por objeto a utilização de misturas dos compostos com a Fórmula (I), por exemplo, misturas de dois diastereómeros, por exemplo, na relação de 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 ou 1:1000. Com particular preferência trata-se neste caso de misturas de compostos estereoisoméricos.
Anterior e posteriormente, os radicais Rl, R2, R3, R4, R5, R6, R7, X, Y, A, Aik, Cyc, Ar, Het1, Het2 e Hal têm os significados indicados na Fórmula (I), se nada for expresso em contrário. No caso da existência múltipla de radicais individuais dentro de um composto ou de um radical, os radicais assumem, de forma independente entre si, os significados indicados, se nada for expresso em contrário.
Por exemplo, os radicais YY no radical Rl, onde aparecem várias vezes, são idênticos ou diferentes, mas são preferencialmente selecionados em cada caso de forma independente entre si sob os significados anterior e/ou posteriormente indicados (por exemplo, metilo e/ou etilo), se nada for expresso em contrário. As designações presentemente empregues para definir os compostos encontram-se em geral sujeitas às regras da organização IUPAC para compostos químicos e em particular compostos orgânicos. As designações para explicar os compostos acima referidos da invenção têm sempre os significados que se seguem, desde que a descrição ou as reivindicações não indiquem o contrário. 0 conceito "não substituído" significa que um radical, um grupo ou um resíduo não tem substituintes. 0 conceito "substituído" significa que um radical, um grupo ou um radical tem um ou mais substituintes. "Alquilo" ou "A" designa, no sentido da invenção, um radical hidrocarboneto acíclico, saturado ou insaturado, não ramificado (linear) ou ramificado e que tem preferencialmente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 átomos de C, ou seja, Ci-io-alcanilo. Os exemplos de radicais alquilo são metilo, etilo, propilo, isopropilo, 1,1-dimetilpropilo, 1,2-dimetilpropilo ou 2,2-dimetilpropilo, 1-etilpropilo, 1-etil-l-metilpropilo, l-etil-2-metilpropilo, 1,1,2-trimetilpropilo ou 1,2,2-trimetilpropilo, butilo, isobutilo, see.-butilo, terc.-butilo, 1-metilbutilo, 2-metilbutilo ou 3-metilbutilo, 1,1-dimetilbutilo, 1,2-dimetilbutilo, 1,3-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 2,3-dimetilbutilo ou 3,3-dimetilbutilo, 1-etilbutilo ou 2-etilbutilo, pentilo, isopentilo, neopentilo, terc.-pentilo, 1-metilpentilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo ou 4-metilpentilo, hexilo.
Numa forma de execução preferida da invenção, "A" significa alquilo ramificado ou não ramificado com 1-10 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-7 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou, de forma independente entre si, um ou dois grupos CH2 adjacentes podem estar substituídos por um grupo -CH=CH- e/ou -ΟΞΟ-. Prefere-se em particular como "A" alquilo não ramificado ou ramificado com 1-6 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-5 átomos de H podem estar substituídos por Hal. Total preferência é dada a C1-4-alquilo, em que, de forma independente entre si, 1-3 átomos de H podem estar substituídos por Hal. Um Ci-4-alquilo deste tipo é, por exemplo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo, terc.-butilo, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, pentafluoroetilo, 1,1,1-trifluoroetilo ou bromometilo, com máxima preferência metilo, etilo ou difluorometilo. Subentende-se que os respetivos significados de "A" se encontram de forma independente entre si nos radicais de uma Fórmula de acordo com a invenção. "Cicloalquilo" ou "Cyc" designa, no sentido da invenção, grupos hidrocarboneto saturados e semi-insaturados não aromáticos cíclicos com 1 a 3 anéis, que compreendem 3 a 20, preferencialmente 3 a 12, com particular preferência 3 a 9 átomos de C. A ligação à cadeia principal da Fórmula (I) pode ocorrer por meio de qualquer elemento do anel do grupo cicloalquilo. Os exemplos de cicloalquilo apropriado são ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclo-octilo, ciclodecilo, ciclopentenilo, ciclo-hexenilo e ciclo-octadienilo.
Numa forma de execução preferida da invenção, "Cyc" é alquilo cíclico com 3-7 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-4 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou OY. Dá-se particular preferência a alquilo cíclico com 3-5 átomos de C. A cadeia principal com a Fórmula (I) é neste caso qualquer estrutura genérica ou não genérica, a que pode ligar-se qualquer radical no sentido da invenção, como, por exemplo, Cyc, Ar, Het1 ou Het2, de modo a conseguir um composto de acordo com a invenção com a Fórmula (I). 0 conceito "Alk" designa, no sentido da invenção, alquileno, alcenilo ou alcinilo não ramificado ou ramificado, com 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de C, ou seja, Ci-6-alquilenos, C2-6_alcenilos e C2-6_alcinilo. Os alcenilos têm pelo menos uma ligação dupla C-C e os alcinilos pelo menos uma ligação tripla C-C. Os alcinilos podem ainda apresentar pelo menos uma ligação dupla C-C. Os exemplos de alquilenos apropriados são metileno, etileno, propileno, butileno, pentileno, hexileno, isopropileno, isobutileno, see.-butileno, 1-metilbutileno, 2-metilbutileno ou 3-metilbutileno, 1,1-dimetilpropileno, 1,2-dimetilpropileno ou 2,2-dimetilpropileno, 1-etilpropileno, 1-metilpentileno, 2-metilpentileno, 3-metilpentileno ou 4-metilpentileno, 1,1-dimetilbutileno, 1,2-dimetilbutileno, 1,3-dimetilbutileno, 2,2-dimetilbutileno, 2,3-dimetilbutileno ou 3,3-dimetilbutileno, 1-etilbutileno ou 2-etilbutileno, 1- etil-l-metilpropileno, l-etil-2-metilpropileno, 1,1,2-trimetilpropileno ou 1,2,2-trimetilpropileno. Os exemplos de alcenilos apropriados são alilo, vinilo, propenilo (-CH2CH=CH2; -CH=CH-CH3; -C (=CH2) -CH3) , 1-butenilo, 2-butenilo ou 3-butenilo, isobutenilo, 2-metil-l-butenilo ou 2-metil- 2- butenilo, 3-metil-l-butenilo, 1,3-butadienilo, 2-metil- 1,3-butadienilo, 2,3-dimetil-l,3-butadienilo, 1-pentenilo, 2-pentenilo, 3-pentenilo ou 4-pentenilo e hexenilo. Os exemplos de alcinilos apropriados são etinilo, propinilo (- CH2-CaCH; -CHC-CH3) , 1-butinilo, 2-butinilo ou 3-butinilo, pentinilo, hexinilo ou pent-3-en-l-in-ilo, em particular propinilo.
Numa forma de execução preferida da invenção, "Aik" é alquileno com 1-6 Átomos de C, ou seja, metileno, etileno, propileno, butileno, pentileno ou hexileno, em que, de forma independente entre si, 1-4 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou OY. Prefere-se em particular que "Alk" seja alquileno com 1-3 átomos de C, em que 1-2 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou OH. Os exemplos particulares neste caso são metileno, etileno e propileno. Subentende-se que os respetivos significados de "Alk" se encontrem de forma independente entre si nos radicais de uma fórmula de acordo com a invenção. 0 conceito "arilo", "carboarilo" ou "Ar" designa, no sentido da invenção, um sistema hidrocarboneto monocíclico ou policíclico aromático com 3 a 14, preferencialmente 4 a 10, com particular preferência 5 a 8 átomos de C, que podem estar eventualmente substituídos. O conceito "arilo" compreende os sistemas nos quais o ciclo aromático constitui parte de um sistema bicíclico ou policíclico saturado, semi-insaturado e/ou aromático, por exemplo, se o ciclo aromático for um "arilo", "cicloalquilo", "heteroarilo" ou "heterociclilo" fundido através de um elemento de anel opcional do radical arilo. A ligação à cadeia principal da Fórmula (I) pode ser concretizada através de qualquer elemento do anel do grupo arilo. Os exemplos de "arilo" apropriado são fenilo, bifenilo, naftilo, 1-naftilo, 2-naftilo, antracenilo, indanilo, indenilo, 1,2,3,4-tetra-hidronaftilo, em particular fenilo, o-tolilo, m-tolilo ou p-tolilo, o-etilfenilo, m-etilfenilo ou p-etilfenilo, o-propilfenilo, m-propilfenilo ou p-propilfenilo, o-isopropilfenilo, m-isopropilfenilo ou p- isopropilfenilo, o-terc.-butilfenilo, m-terc.-butilfenilo ou p-terc.-butilfenilo, o-trifluorometilfenilo, m-trifluorometilfenilo ou p-trifluorometilfenilo, o-fluorofenilo, m-fluorofenilo ou p-fluorofenilo, o-bromofenilo, m-bromofenilo ou p-bromofenilo, o-clorofenilo, m-clorofenilo ou p-clorofenilo, o-hidroxifenilo, m-hidroxifenilo ou p-hidroxifenilo, o-metoxifenilo, m-metoxifenilo ou p-metoxifenilo, o-metilsulfonilfenilo, m-metilsulfonilfenilo ou p-metilsulfonilfenilo, o-nitrofenilo, m-nitrofenilo ou p-nitrofenilo, o-aminofenilo, m-aminofenilo ou p-aminofenilo, o-metilaminofenilo, m-metilaminofenilo ou p-metilaminofenilo, o-dimetilaminofenilo, m-dimetilaminofenilo ou p-dimetilaminofenilo, o-aminossulfonilfenilo, m-aminossulfonilfenilo ou p-aminossulfonilfenilo, o-metilaminossulfonilfenilo, m-metilaminossulfonilfenilo ou p-metilaminossulfonilfenilo, o-aminocarbonilfenilo, m-aminocarbonilfenilo ou p-aminocarbonilfenilo, o-carboxifenilo, m-carboxifenilo ou p-carboxifenilo, o-metoxicarbonilfenilo, m-metoxicarbonilfenilo ou p-metoxicarbonilfenilo, o-etoxicarbonilfenilo, m-etoxicarbonilfenilo ou p-etoxicarbonilfenilo, o-acetilfenilo, m-acetilfenilo ou p-acetilfenilo, o-formilfenilo, m-formilfenilo ou p-formilfenilo, o-cianofenilo, m-cianofenilo ou p-cianofenilo, 2,3-difluorofenilo, 2,4-difluorofenilo, 2,5-difluorofenilo, 2.6- difluorofenilo, 3,4-difluorofenilo ou 3,5-difluorofenilo, 2,3-diclorofenilo, 2,4-diclorofenilo, 2,5-diclorofenilo, 2,6-diclorofenilo, 3,4-diclorofenilo ou 3,5-diclorofenilo, 2,3-dibromofenilo, 2,4-dibromofenilo, 2,5-dibromofenilo, 2,6-dibromofenilo, 3,4-dibromofenilo ou 3,5-dibromofenilo, 2,3,4-triclorofenilo, 2,3,5-triclorofenilo, 2.3.6- triclorofenilo, 2,4,6-triclorofenilo ou 3,4,5-triclorofenilo, p-iodofenilo, 4-fluoro-3-clorofenilo, 2- fluoro-4-bromofenilo, 2,5-difluoro-4-bromofenilo ou 2,5- dime til-4-clorofenilo.
Numa forma de execução preferida, "Ar" é fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal, A, CN, ΟΥ, NYY, -NY-COY, COOY, Het1, Het2, -Alk-OY, -Alk-NYY, -Alk-Het1 ou Alk-Het2. Prefere-se em particular que "Ar" signifique fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal. 0 conceito "heteroarilo" designa no sentido da invenção um radical hidrocarboneto aromático monocíclico ou policíclico, de 2 a 15 elementos, preferencialmente de 2 a 9, com particular preferência de 5, 6 ou 7 elementos, que compreende pelo menos 1, se adequado também 2, 3, 4 ou 5 heteroátomos, em particular nitrogénio, oxigénio e/ou enxofre, sendo os heteroátomos idênticos ou diferentes. 0 número de átomos de nitrogénio é preferencialmente 0, 1, 2, 3 ou 4, e o dos átomos de oxigénio e de enxofre é, de forma independente entre si, 0 ou 1. O conceito "heteroarilo" compreende os sistemas nos quais o ciclo aromático é parte de um sistema bicíclico ou policíclico saturado, semi-insaturado e/ou aromático, por exemplo, se o ciclo aromático estiver fundido através de um "arilo", "cicloalquilo", "heteroarilo" ou "heterociclilo" através de um elemento opcional de anel do radical heteroarilo. A ligação à cadeia principal da Fórmula (I) pode ser concretizada através de qualquer elemento de anel do grupo heteroarilo, desde que pareça fazer sentido em termos químicos, preferindo-se uma ligação através dos átomos de C. "Heteroarilo" significa, independentemente de outras substituições, por exemplo, 2-furilo ou 3-furilo, 2-tienilo ou 3-tienilo, 1-pirrolilo, 2-pirrolilo ou 3-pirrolilo, 1-imidazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo ou 5-imidazolilo, 1- pirazolilo, 3-pirazolilo, 4-pirazolilo ou 5-pirazolilo, 2- oxazolilo, 4-oxazolilo ou 5-oxazolilo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo ou 5-isoxazolilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo ou 5-tiazolilo, 3-isotiazolilo, 4-isotiazolilo ou 5-isotiazolilo, 2-piridilo, 3-piridilo ou 4-piridilo, 2-pirimidinilo, 4-pirimidinilo, 5-pirimidinilo ou 6-pirimidinilo, 1,2,3-triazol-l-ilo, 1,2,3-triazol-4-ilo ou 1.2.3- triazol-5-ilo, 1,2,4-triazol-l-ilo, 1,2,4-triazol-3-ilo ou 1,2,4-triazol-5-ilo, 1-tetrazolilo ou 5-tetrazolilo, 1.2.3- oxadiazol-4-ilo ou 1,2,3-oxadiazol-5-ilo, 1,2,4-oxadiazol-3-ilo ou 1,2,4-oxadiazol-5-ilo, 1,3,4-tiadiazol-2-ilo ou 1,3,4-tiadiazol-5-ilo, 1,2,4-tiadiazol-3-ilo ou 1.2.4- tiadiazol-5-ilo, 1,2,3-tiadiazol-4-ilo ou 1,2,3- tiadiazol-5-ilo, 3-piridazinilo ou 4-piridazinilo, pirazinilo, 1-indolilo, 2-indolilo, 3-indolilo, 4-indolilo, 5-indolilo, 6-indolilo ou 7-indolilo, 4-isoindolilo ou 5-isoindolilo, 1-benzimidazolilo, 2-benzimidazolilo, 4-benzimidazolilo ou 5-benzimidazolilo, 1-indazolilo, 2- indazolilo, 3-indazolilo, 4-indazolilo, 5-indazolilo, 6-indazolilo ou 7-indazolilo, 1-benzopirazolilo, 3-benzopirazolilo, 4-benzopirazolilo, 5-benzopirazolilo, 6-benzopirazolilo ou 7-benzopirazolilo, 2-benzoxazolilo, 4-benzoxazolilo, 5-benzoxazolilo, 6-benzoxazolilo ou 7- benzoxazolilo, 3-benzisoxazolilo, 4-benzisoxazolilo, 5- benzisoxazolilo, 6-benzisoxazolilo ou 7-benzisoxazolilo, 2-benzotiazolilo, 4-benzotiazolilo, 5-benzotiazolilo, 6- benzotiazolilo ou 7-benzotiazolilo, 2-benzoisotiazolilo, 4-benzoisotiazolilo, 5-benzoisotiazolilo, 6-benzoisotiazolilo ou 7-benzoisotiazolilo, 4-benzo-2,1,3-oxadiazolilo, 5- benzo-2,1,3-oxadiazolilo, 6-benzo-2,1,3-oxadiazolilo ou 7-benzo-2,1,3-oxadiazolilo, 2-quinolilo, 3-quinolilo, 4- quinolilo, 5-quinolilo, 6-quinolilo, 7-quinolilo ou 8-quinolilo, 1-isoquinolilo, 3-isoquinolilo, 4-isoquinolilo, 5-isoquinolilo, 6-isoquinolilo, 7-isoquinolilo ou 8- isoquinolilo, 3-cinolinilo, 4-cinolinilo, 5-cinolinilo, 6- cinolinilo, 7-cinolinilo ou 8-cinolinilo, 2-quinazolinilo, 4-quinazolinilo, 5-quinazolinilo, 6-quinazolinilo, 7-quinazolinilo ou 8-quinazolinilo, 5-quinoxalinilo ou 6-quinoxalinilo, 2-2H-benzo[1,4]-oxazinilo, 3-2H-benzo [ 1,4]-oxazinilo, 5-2H-benzo[1,4]-oxazinilo, 6-2H-benzo [ 1,4]-oxazinilo, 7-2H-benzo[1,4]-oxazinilo ou 8-2H-benzo[1,4]-oxazinilo, 1,3-benzodioxol-5-ilo, 1,4-benzodioxan-6-ilo, 2.1.3- benzotiadiazol-4-ilo ou 2,1,3-benzotiadiazol-5-ilo, 2.1.3- benzoxadiazol-5-ilo, imidazolilo, triazinilo, ftalazinilo, indolizinilo, pteridinilo, carbazolilo, fenazinilo, fenoxazinilo, fenotiazinilo ou acridinilo.
Os radicais heterocíclicos também podem estar total ou parcialmente hidroqenados. Portanto, heteroarilo não substituído também pode siqnificar, por exemplo, 2,3-di-hidro-2-furilo, 2,3-di-hidro-3-furilo, 2,3-di-hidro-4-furilo ou 2,3-di-hidro-5-furilo, 2,5-di-hidro-2-furilo, 2,5-di-hidro-3-furilo, 2,5-di-hidro-4-furilo ou 2,5-di-hidro-5-furilo, tetra-hidro-2-furilo ou tetra-hidro-3-furilo, 1,3-dioxolan-4-ilo, tetra-hidro-2-tienilo ou tetra-hidro-3-tienilo, 2,3-di-hidro-l-pirrolilo, 2,3-di-hidro-2-pirrolilo, 2,3-di-hidro-3-pirrolilo, 2,3-di-hidro-4-pirrolilo ou 2,3-di-hidro-5-pirrolilo, 2,5-di-hidro-l-pirrolilo, 2,5-di-hidro-2-pirrolilo, 2,5-di-hidro-3-pirrolilo, 2,5-di-hidro-4-pirrolilo ou 2,5-di-hidro-5-pirrolilo, 1-pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo ou 3-pirrolidinilo, tetra-hidro-l-imidazolilo, tetra-hidro-2-imidazolilo ou tetra-hidro-4-imidazolilo, 2,3-di-hidro-l-pirazolilo, 2,3-di-hidro-2-pirazolilo, 2,3-di-hidro-3-pirazolilo, 2,3-di-hidro-4-pirazolilo ou 2,3-di-hidro-5-pirazolilo, tetra-hidro-l-pirazolilo, tetra-hidro-3-pirazolilo ou tetra-hidro-4-pirazolilo, 1,4-di-hidro-l-piridilo, 1,4-di-hidro-2-piridilo, 1,4-di-hidro-3-piridilo ou 1,4-di-hidro-4-piridilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-l-piridilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-2-piridilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-3- piridilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-4-piridilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-5-piridilo ou 1,2,3,4-tetra-hidro-6-piridilo, 1-piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo ou 4-piperidinilo, 2-morfolinilo, 3-morfolinilo ou 4-morfoninilo, tetra-hidro-2-piranilo, tetra-hidro-3-piranilo ou tetra-hidro-4-piranilo, 1,4-dioxanilo, 1,3-dioxan-2-ilo, 1.3- dioxan-4-ilo ou 1,3-dioxan-5-ilo, hexa-hidro-1-piridazinilo, hexa-hidro-3-piridazinilo ou hexa-hidro-4-piridazinilo, hexa-hidro-l-pirimidinilo, hexa-hidro-2-pirimidinilo, hexa-hidro-4-pirimidinilo ou hexa-hidro-5-pirimidinilo, 1-piperazinilo, 2-piperazinilo ou 3-piperazinilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-l-quinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-2-quinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-3-quinolilo, 1.2.3.4- tetra-hidro-4-quinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-5-quinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-6-quinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-7-quinolilo ou 1,2,3,4-tetra-hidro-8-quinolilo, 1.2.3.4- tetra-hidro-1-isoquinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-2-isoquinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-3-isoquinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-4-isoquinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-5-isoquinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-6-isoquinolilo, 1,2,3,4-tetra-hidro-7-isoquinolilo ou 1,2,3,4-tetra-hidro-8-isoquinolilo, 2-3,4-di-hidro-2H-benzo[1,4]oxazinilo, 3-3,4-di-hidro-2H-benzo[1,4]oxazinilo, 5-3,4-di-hidro-2H-benzo[1,4]oxazinilo, 6-3,4-di-hidro-2H-benzo[1,4]oxazinilo, 7-3,4-di-hidro-2H-benzo[1,4]oxazinilo ou 8-3,4-di-hidro-2H-benzo[1,4]oxazinilo, 2,3-metilenodioxifenilo, 3,4-metilenodioxifenilo, 2,3-etilenodioxifenilo, 3,4-etilenodioxifenilo, 3,4-(difluorometilenodioxi)-fenilo, 2.3- di-hidrobenzofuran-5-ilo ou 2,3-di-hidrobenzofuran-6-ilo, 2,3-(2-oxo-metileno-dioxi)-fenilo, ou também 3,4-di-hidro-2H-l,5-benzodioxepin-6-ilo ou 3,4-di-hidro-2H-l,5-benzodioxepin-7-ilo, 2,3-di-hidrobenzofuranilo ou 2,3-di-hidro-2-oxo-furanilo.
Prefere-se que "heteroarilo", no âmbito de "Het1", signifique um heterociclo monociclico ou biciclico aromático com 2-9 átomos de C e 1-4 átomos de N, de 0 e/ou de S, não substituído ou que pode estar monossubstituído por Hal, A, CN, ΟΥ, NYY, -NY-COY, COOY, -Alk-OY ou -Alk-NYY. Prefere-se em particular que "Het1" signifique heteroarilo monociclico ou biciclico com 2-9 átomos de C e 1-3 átomos de N e/ou de S, não substituído ou que pode estar monossubstituído por Hal, A, CN ou NYY. É dada total preferência a que "Het1" signifique pirazol, pirrol ou tiazol. Subentende-se que os respetivos significados de "Het1" sejam se encontrem, de forma independente entre si, nos radicais de uma fórmula de acordo com a invenção. 0 conceito "heterociclo" designa, no sentido da invenção, um sistema monociclico ou policíclico com 3 a 20 átomos de anel, preferencialmente 3 a 14 átomos do anel, com particular preferência 3 a 10 átomos do anel, compreendendo átomos de C e 1, 2, 3, 4 ou 5 heteroátomos, em particular nitrogénio, oxigénio e/ou enxofre, sendo os heteroátomos idênticos ou iguais. O sistema cíclico pode ser saturado ou monoinsaturado ou poli-insaturado. O conceito "heteroarilo" compreende os sistemas nos quais o ciclo aromático é parte de um sistema biciclico ou policíclico saturado, semi-insaturado e/ou aromático, por exemplo, se o ciclo aromático for um "arilo", "cicloalquilo", "heteroarilo" ou "heterociclilo" fundido através de um elemento de anel opcional do heterociclo. A ligação à cadeia principal com a Fórmula (I) pode ser concretizada por qualquer elemento de anel do heterociclo. Os exemplos de heterociclos apropriados são pirrolidinilo, tiapirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, oxapiperazinilo, oxapiperidinilo, oxadiazolilo, tetra-hidrofurilo, imidazolidinilo, tiazolidinilo, tetra-hidropiranilo, morfolinilo, tetra-hidrotiofenilo, di-hidropiranilo.
Numa concepção da invenção, "Het2" é um heterociclo saturado monocíclico com 2-7 átomos de C e 1-4 átomos de N, átomos de 0 e/ou átomos de S, não substituído ou que pode estar monossubstituído por A. Prefere-se que "Het2" signifique um heterociclo saturado monocíclico com 2-5 átomos de C e 1-2 átomos de N e/ou de 0, não substituído ou que pode estar monossubstituído por A. Entende-se que os respetivos significados de "Het2" se encontrem, de forma independente entre si, nos radicais de uma fórmula de acordo com a invenção. 0 conceito "halogéneo", "átomo de halogéneo", "substituinte de halogéneo" ou "Hal" designa, no sentido da invenção, um ou mais átomos de flúor (F), bromo (Br), cloro (Cl) ou iodo (I). As designações "di-halogéneo", "tri-halogéneo" e "per-halogéneo" são relativas a dois, três ou quatro substituintes, em que cada substituinte pode ser selecionado, de forma independente entre si, do grupo de F, Cl, Br ou I. "Halogéneo" significa preferencialmente F, Cl ou Br. F e Cl são com particularmente preferidos, em particular se os halogéneos estiverem substituídos num grupo alquil-(haloalquilo) ou alcoxi (por exemplo, CF3 e CF30) . 0 radical Rl significa preferencialmente H ou A, com particular preferência A. 0 radical R2 significa preferencialmente H, A ou -CH(R6)(R7). 0 radical R3 significa preferencialmente CN ou Het1, com particular preferência CN ou pirazol, com total preferência CN. 0 radical R4 significa preferencialmente H, A ou CN, com particular preferência A. 0 radical R5 significa preferencialmente H, A, Hal, COOY,
Alk-OA, Ar ou Het2, com particular preferência H, Hal, Alk- OA ou Het2.
Se os radicais R3 e R5 formarem em conjunto urn radical, encontrar-se-ão preferencialmente junto a átomos de C adj acentes. 0 radical R6 significa preferencialmente -CO-NYY, -CO-NY- OY, -CO-NY-C(=NH)-NYY ou -CO-NY-Alk-OY. 0 radical R7 significa preferencialmente Ar ou Het1, com particular preferência Ar. 0 radical X significa preferencialmente 0 ou Het1, com particular preferência 0, pirazol ou pirrol, com total preferência 0.
Em conformidade com isso, a invenção tem por objeto os compostos com a Fórmula (I), nos quais pelo menos um dos radicais referidos tem um dos significados anteriormente indicados. Os radicais não designados em detalhe no contexto de uma forma de execução com a Fórmula (I), a respetiva fórmula parcial ou qualquer radical dai deverão ter o significado indicado na Fórmula (I), como revelado no presente documento, de modo a atingir o objetivo da invenção. Isto significa que os radicais referidos podem assumir o conjunto de significados que lhes são atribuídos, como anterior ou posteriormente descritos, inclusive quaisquer formas de execução preferidas, sem se ficar a estas limitado e independentemente do seu aparecimento noutro determinado contexto. Subentende-se em particular que qualquer forma de execução de um determinado radical pode ser combinada com qualquer forma de execução de outro ou outros radicais.
Noutra concepção preferida da presente invenção, prepara-se derivados de pirazoloquinolina com a Fórmula parcial (IE)
(IE) em que Rl a R5 e X apresentam o significado acima indicado.
Numa concenção particularmente preferida da presente invenção, prepara-se derivados de pirazoloquinolina com a Fórmula parcial (IA)
(IA) em que
Rl, R4 significam Y, R2 significa Y ou -CH(R6)(R7), R5 significa Hal, Y, COOY, Alk-OA ou Het2, R6 significa -CO-NYY, -CO-NY-OY, -CO-NY-C(=NH)-NYY ou -CO-NY-Alk-OY, R7 significa Ar ou Het1, Y significa H ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com 1-4 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-3 átomos de H podem estar substituídos por Hal,
Alk significa alquileno com 1-3 átomos de C, em que 1-2 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou OH,
Ar significa fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal,
Het1 significa heteroarilo monocíclico ou bicíclico com 2-9 átomos de C e 1-3 átomos de N e/ou de S, não substituído ou que pode estar monossubstituído por Hal, A, CN ou NYY,
Het2 significa um heterociclo saturado monocíclico com 3-5 átomos de C e 1-2 átomos de N e/ou de 0, não substituído ou que pode estar monossubstituído por A, e Hal significa F, Cl, Br ou I, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações.
Totalmente preferidos são os compostos com as Fórmulas (I), (IA) e (IE), que se encontram apresentados na Tabela 1.
Os compostos com a Fórmula (I) e as respetivas fórmulas parciais e também as matérias-primas para a sua produção são produzidos por métodos de si conhecidos, como descritos na literatura (por exemplo, em obras padrão como Houben-Weil, Metoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Estugarda) e/ou conhecidos do especialista, e sob as condições de reação conhecidas e apropriadas para as referidas transformações. Neste caso, também é possível recorrer a variantes de si conhecidas mas não referidas em detalhe no presente documento. 0 tempo de reação encontra-se, em função das condições aplicadas, entre alguns minutos e 14 dias, a temperatura de reação entre cerca de -15°C e 150°C, normalmente entre 10°C e 100°C, em particular entre cerca de 20°C e 70°C. A transformação tem lugar num solvente inerte e normalmente na presença de um meio de ligação ácida, preferencialmente de uma base orgânica, como DIPEA, trietilamina, dimetilanilina, piridina, quinolina, piperidina ou dietanolamina. Também poderá ser favorável a adição de um hidróxido, carbonato ou bicarbonato de metal alcalino ou de metal alcalinoterroso, ou de outro sal de um ácido fraco de metais alcalinos ou de metais alcalinoterrosos, de preferência de potássio, de sódio, de cálcio ou de césio. Como bases adequam-se os óxidos metálicos, tais como óxido de alumínio, hidróxidos de metais alcalinos (dentre os quais hidróxido de potássio, hidróxido de sódio e hidróxido de lítio), hidróxidos de metais alcalinoterrosos (por exemplo, hidróxido de bário e hidróxido de cálcio) e alcoolatos de metais alcalinos (por exemplo, etanolato de potássio e propanolato de sódio). Como solventes inertes adequam-se, por exemplo, os hidrocarbonetos, tais como hexano, éter de petróleo, benzeno, tolueno ou xileno; hidrocarbonetos clorados, tais como tricloroetileno, 1,2-dicloroetano, tetracloreto de carbono, clorofórmio ou diclorometano; álcoois como metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol ou terc.-butanol; éteres como éter dietilico, éter di-isopropílico, tetra-hidrofurano (THF) ou dioxano; éteres glicólicos como éter etilenoglicolmonometilico ou etilenoglicolmonoetilico (metilglicol ou etilglicol), éter etilenoglicoldimetilico (diglima); cetonas como a acetona ou a butanona; amidas como acetamida, dimetilacetamida ou dimetilformamida (DMF); nitrilos como o acetonitrilo; sulfóxidos como o sulfóxido de dimetilo (DMSO); dissulfureto de carbono; ácidos carboxilicos, tais como o ácido fórmico ou o ácido acético; nitrocompostos como nitrometano ou nitrobenzeno; ésteres como acetato de etilo ou misturas dos solventes referidos. É dada particular preferência a éteres glicólicos, como o éter etilenoglicolmonometilico, THF, diclorometano e/ou DMF. 0 processo e o posterior processamento final da mistura de reação podem em principio ser realizados como reação descontinua ou por reação continua. A reação continua compreende, por exemplo, a reação num reator de caldeiras de agitação continuo, uma cascata de caldeiras de reação, um reator de circulação externa ou reator de fluxo transversal, uma conduta de corrente ou num microrreator. 0 processamento final das misturas de reação ocorre facultativamente, em função do necessário, por meio de filtração através de fases sólidas, cromatografia, separação entre fases não miscíveis (por exemplo, extração), adsorção em suportes sólidos, separação por destilação de solventes e/ou misturas azeotrópicas, destilação seletiva, sublimação, cristalização, cocristalização ou por nanofiltração em membranas. É possível obter os compostos com a Fórmula (IE) preferencialmente ao transformar um composto com a Fórmula (IIA) ou então um composto com a Fórmula (III) . 0 objeto da presente invenção também consiste assim num processo para a produção de compostos com a Fórmula (IE), as respetivas fórmulas parciais e/ou os seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as suas misturas em todas as relações, com as seguintes etapas:
(a) transformação de um composto com a Fórmula parcial (HA) (IIA) em que
Rl, R2 significam, de forma independente entre si, A ou -Alk-Ar, R5 significa Hal, Y, COOY, -Alk-OA ou Het2, Y significa H ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com Ι-ΙΟ átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-3 átomos de H podem estar substituídos por Hal,
Alk significa alquileno com 1-3 átomos de C, em que 1-2 átomos de H podem estar substituídos por Hal,
Ar significa fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal,
Het2 significa um heterociclo saturado monocíclico com 3-5 átomos de C e 1-2 átomos de N e/ou de 0, que pode não estar substituído ou pode estar monossubstituído por A, e Hal significa F, Cl, Br ou I, no meio ácido com um redutor e com um composto E-NO2, em que E significa um elemento do l.° grupo principal, obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IB)
(IB) em que Rl, R2 e R5 apresentam o significado acima indicado na Fórmula parcial (IIA) e, eventualmente, (b') transformação dos compostos com a Fórmula parcial (IB) com um composto Hal-R4, em que R4 e Hal apresentam o significado acima indicado, obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IC)
(IC) em que Rl, R2 e R5 apresentam o significado indicado na Fórmula parcial (IIA), e R4 apresenta o significado acima indicado, (b") transformação de Rl, -0-R2, R4, R5 e/ou do grupo CN dos compostos com a Fórmula parcial (IC), obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IE)
(IE) em que Rl, R2, R3, R4, R5 e X apresentam o significado acima indicado, e/ou (b"') transformação de uma base ou de um ácido dos compostos com a Fórmula parcial (IE) ou as Fórmulas parciais (IB) ou (IC) num dos seus sais fisiologicamente inócuos.
Outro objeto da presente invenção é um processo alternativo para a produção dos compostos com a Fórmula (I), respetivas fórmulas parciais e/ou os seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, com as seguintes etapas: (a) transformação de um composto com a Fórmula (III)
(Ml) em que
Rl, R2 significam, de forma independente entre si, A ou -Alk-Ar, R4 significa Y, RIO significa Hal, Y significa H ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com 1-4 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-3 átomos de H podem estar substituídos por Hal,
Alk significa alquileno com 1-3 átomos de C, em que 1-2 átomos de H podem estar substituídos por Hal,
Ar significa fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal, e
Hal significa F, Cl, Br ou I, com um composto com a Fórmula (IV) em que (iv) D significa ácido bórico, éster de boro, composto de estanho orgânico ou trifluorometanossulfonato de boro, e R3 e R5 apresentam o significado acima indicado, obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (ID)
(ID) em que Rl, R2 e R4 apresentam o significado dado na Fórmula (III), e R3 e R5 apresentam o significado acima dado, e eventualmente (b') transformação de Rl, -0-R2, R3, R4 e/ou R5 dos compostos com a Fórmula parcial (ID), obtendo-se os compostos com a Fórmula (I)
(I) em que Rl, R2, R3, R4, R5 e X apresentam o significado acima dado, e/ou (b") transformação de uma base ou de um ácido dos compostos com a Fórmula (I) ou fórmula parcial (ID) num dos seus sais fisiologicamente inócuos. A invenção é igualmente relativa a compostos intermédios com a Fórmula (II)
(II) em que R8 significa CN ou =0, e R9 significa NCç ou NYY, e
Rl, R2, R5 e Y apresentam o significado acima indicado, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive as suas misturas em todas as relações.
Numa forma de execução preferida da presente invenção, prepara-se os compostos intermédios com a Fórmula parcial (I IA) (MA) em que
Rl, R2, independentemente um do outro, significam A ou -Alk-Ar, R5 significa Hal, Y, COOY, Alk-OA ou Het2,
Y significa H ou A A significa alquilo não ramificado ou ramificado com 1-4 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-3 átomos de H podem estar substituídos por Hal,
Alk significa alquileno com 1-3 Átomos de C, em que 1-2 átomos de H podem estar substituídos por Hal,
Ar significa fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal,
Het2 significa um heterociclo saturado monocíclico com 3-5 átomos de C e 1-2 átomos de N e/ou átomos de 0, que pode estar não substituído ou que pode estar monossubstituído por A, e
Hal significa F, Cl, Br ou I, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive as respetivas misturas em todas as relações. A invenção também tem por objeto um processo para a produção de compostos intermédios com a Fórmula (II) e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, com as seguintes etapas: (a) transformação de um composto com a Fórmula (V) (V) em que Rl, R2, R9 e Hal apresentam o significado acima dado, com um composto com a Fórmula (VI)
(VI) em que R5 e R8 apresentam o significado acima dado, mediante obtenção dos compostos com a Fórmula (II)
(II) em que Rl, R2, R5, R8 e R9 apresentam o significado acima indicado, e eventualmente (b) transformação de uma base ou de um ácido dos compostos com a Fórmula (II) num dos respetivos sais. A invenção é ainda relativa a compostos intermédios com a Fórmula (III)
(Ill) em que RIO significa H ou Hal, e
Rl, R2, R4 e Hal apresentam o significado acima indicado, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive as suas misturas em todas as relações.
Numa forma de execução preferida da presente invenção, prepara-se os compostos intermédios com a Fórmula (III), em que
Rl, R2 significam, de forma independente entre si, A ou -Alk-Ar, R4 significa Y, RIO significa Hal, Y significa H ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com 1-4 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-3 átomos de H podem estar substituídos por Hal,
Alk significa alquileno com 1-3 átomos de C, em que 1-2 átomos de H podem estar substituídos por Hal,
Ar significa fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal, e
Hal significa F, Cl, Br ou I, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive as suas misturas em todas as relações.
Ainda outro objeto da invenção é um processo para a produção de compostos intermédios com a Fórmula (III), as suas fórmulas parciais e/ou os seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, com as seguintes etapas: (a) Transformação de um composto com a Fórmula (VII)
(VII) em que Rl e R2 apresentam o significado acima indicado, no meio ácido com um composto E-NO2, em que E significa um elemento do l.° grupo principal, obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IIIA)
(IMA) em que Rl e R2 apresentam o significado acima indicado, e eventualmente (b' ) halogenação dos compostos com a Fórmula parcial (IIIA) , obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IIIB)
(NIB) em que R1, R2 e Hal apresentam o significado acima dado, (b") transformação dos compostos com a Fórmula (IIIA) ou (IIIB) com um composto Hal-R4, em que R4 e Hal apresentam o significado acima indicado, obtendo-se os compostos com a Fórmula (III)
(III) em que Rl, R2, R4 e RIO apresentam o significado acima dado, e/ou (b"') transformação de uma base ou de um ácido dos compostos com a Fórmula (III) num dos respetivos sais.
Os compostos de partida são em geral conhecidos. Caso sejam novos, os mesmos poderão ser produzidos por métodos de si conhecidos. Os compostos com as Fórmulas (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser preparados por métodos conhecidos. Se pretendido, as substâncias de partida poderão ser formadas in situ, não sendo isoladas da mistura de reação, mas sim logo transformadas nos compostos de acordo com a invenção. Também é possível realizar a reação por etapas.
Os compostos de acordo com a invenção referidos podem ser empregues na sua forma salina final. Por outro lado, a presente invenção também compreende a utilização destes compostos na forma dos seus sais farmaceuticamente inócuos, que podem derivar de diferentes ácidos e bases orgânicos e inorgânicos por procedimentos conhecidos da especialidade. As formas salinas farmaceuticamente inócuas dos compostos com as Fórmulas (I), (II) e (III) e as suas formas parciais são produzidas em grande parte de modo convencional. Se os compostos contiverem um grupo de ácido carboxilico, será possivel produzir um dos seus sais apropriados, ao transformar o composto com uma base apropriada no respetivo sal de adição básica. Estas bases são, por exemplo, hidróxidos de metais alcalinos (por exemplo, hidróxido de potássio, hidróxido de sódio e hidróxido de litio), hidróxidos de metais alcalinoterrosos (por exemplo, hidróxido de bário e hidróxido de cálcio), alcoolatos de metais alcalinos (por exemplo, etanolato de potássio e propanolato de sódio) e diferentes bases orgânicas como piperidina, dietanolamina e N-metilglutamina. Uma base com as Fórmulas (I), (II) e (III) e as respetivas fórmulas parciais pode ser transformada com um ácido no sal de adição ácida correspondente, por exemplo, através da transformação de quantidades equivalentes da base e do ácido num solvente inerte, como, por exemplo, etanol, e concentração por evaporação depois. Nesta transformação entram em linha de conta em particular ácidos que dão origem a sais fisiologicamente inócuos, como, por exemplo, halogenetos de hidrogénio (por exemplo, cloreto e hidrogénio, brometo de hidrogénio ou iodeto de hidrogénio), outros ácidos minerais e os seus sais (por exemplo, sulfato, nitrato ou fosfato e semelhantes), sulfonatos de alquilo e de monoarilo (por exemplo, etanossulfonato, toluenossulfonato e benzenossulfonato) e outros ácidos orgânicos e os seus sais correspondentes (por exemplo, acetato, trifluoroacetato, tartrato, maleato, succinato, citrato, benzoato, salicilato, ascorbato e semelhantes. Os sais com ácidos fisiologicamente inócuos, por exemplo, os picratos, podem ser empregues no isolamento e/ou na purificação dos compostos com a Fórmula (I).
Relativamente ao acima referido, subentende-se que a expressão "sal farmaceuticamente inócuo" se trata no presente contexto de uma substância ativa, que contém um composto com a Fórmula (I) na forma de um dos seus sais, em particular se esta forma salina conferir â substância ativa melhores propriedades farmacocinéticas do que a forma livre da substância ativa. A forma salina farmaceuticamente inócua da substância ativa também pode conferir a esta substância ativa apenas uma propriedades farmacocinética pretendida e até mesmo influenciar positivamente a farmacocinética desta substância ativa relativamente à sua eficácia terapêutica no corpo.
Os compostos de acordo com a invenção podem, devido à sua estrutura molecular, ser quirais e aparecer com isso em diferentes formas enantioméricas. Podem por isso encontrar-se na forma racémica ou oticamente ativa. Visto que a eficácia farmacêutica dos racematos ou dos estereoisómeros dos compostos com a Fórmula (I) pode variar, poderá ser desejável empregar os enantiómeros. Nestes casos, o produto final ou já o produto intermediário pode ser separado nos compostos enantioméricos, por meio de medidas químicas e físicas conhecidas do especialista, ou ser logo empregue como tal na síntese.
Descobriu-se de forma surpreendente, que os compostos de acordo com a invenção produzem uma inibição específica das serina-treonina proteína cinases. Outro objeto da invenção é assim relativo à utilização dos compostos com a Fórmula (I) ou as suas fórmulas parciais e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, na inibição de serina-treonina proteína cinases, preferencialmente PIKK, com particular preferência DNA-PK. 0 conceito "inibição" é relativo a cada redução da atividade que tem por base a ação dos compostos de acordo com a invenção específicos, ao estes últimos serem capazes de interagir com a molécula-alvo, de modo a permitir um reconhecimento, uma ligação e um bloqueio. Os compostos distinguem-se por uma elevada afinidade relativamente a pelo menos uma serina-treonina proteína cinase, garantindo-se com isso uma ligação fiável e preferencialmente um bloqueio total da atividade de cinase. Os compostos são com particular preferência monoespecíficos, de modo a garantir um reconhecimento exclusivo e direto da cinase selecionada. 0 conceito "reconhecimento" é neste caso relativo a todo o tipo de interação entre o compostos e as referidas moléculas-alvo, em particular ligações covalentes ou não covalentes, como, por exemplo, uma ligação covalente, interações hidrófobas/hidrófilas, forças de Waals, relação iónica, pontes de hidrogénio, interações ligando-recetor, emparelhamentos de bases de nucleótidos ou interações entre epítopo e ponto de ligação de anticorpos.
Os compostos de acordo com a invenção mostram uma atividade biológica vantajosa, detetável nos testes descritos no presente documento, como, por exemplo, ensaios de base enzimática. A medição da atividade de cinase é uma técnica bem conhecida do especialista. Os sistemas de teste genéricos para determinar a atividade de cinase com substratos, por exemplo, histona (Alessi et ai. (1996) FEBS Lett. 399(3): 333) ou com a proteína mielina básica encontram-se descritos na literatura (Campos-González &
Glenney (1992) JBC 267: 14535). Existem diversos sistemas de ensaio à disposição para identificar os inibidores de cinase. No Scintillation Proximity Assay (Sorg et ai. (2002) J Biomolecular Screening 7: 11) e no FlashPlate Assay, mede-se a fosforilação radioativa de uma proteína ou de um péptido como substrato com ATP. No caso da presença de um composto inibidor, não se deteta sinal radioativo ou deteta-se um pequeno sinal radioativo. Além disso, é possível empregar as tecnologias de Homogeneous Timeresolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (HTR-FRET) e de fluorescência polarizada (FP) como processos de ensaio (Sills et al. (2002) J Biomolecular Screening 25 191). Outros processos ELISA não radioativos empregam fosfoanticorpos específicos (fosfo-AK). O fosfo-AK liga apenas o substrato fosforilado. Esta ligação é detetável com um segundo anticorpo anti-ovelha conjugado com peroxidase através de quimioluminescência. A utilização acima referida dos compostos pode ocorrer em modelos in vitro ou in vivo. A suscetibilidade de uma determinada célula relativamente ao tratamento com os compostos de acordo com a invenção pode ser determinada por testes in vitro. Tipicamente, incuba-se uma cultura da célula com um composto de acordo com a invenção, com diferentes concentrações durante um período de tempo, que seja suficiente para permitir que os meios ativos induzam morte celular ou inibam a proliferação celular, a vitalidade celular ou a migração, habitualmente entre aproximadamente uma hora e uma semana. Para o teste in vitro, é possível empregar células de cultura de uma amostra de biopsia. A quantidade das células que permanecem após o tratamento é depois determinada. A utilização in vitro ocorre em particular em amostras de espécies de mamíferos, que padecem de cancro, tumores, metástases, distúrbios de angiogénese, doenças retrovirais, doenças imunitárias e/ou processos de envelhecimento patogénicos. 0 hospedeiro ou doente pode pertencer a qualquer espécie de mamífero, como, por exemplo, uma espécies de primata, em particular humano, mas também roedores (inclusive ratos, ratazanas e hamsters), coelhos, equinos, bovinos, cães, gatos, etc. Os modelos animais são de interesse para estudos experimentais, disponibilizando um modelo para o tratamento de uma doença nos humanos. 0 teste de vários compostos específicos permite a seleção da substância ativa, que parece ser a mais apropriada para o tratamento do doente. A dose in vivo do composto selecionado estará relacionada de modo vantajoso com a suscetibilidade da cinase e/ou a gravidade da doença do doente, em termos de dados in vitro, pelo que a eficácia terapêutica fica significativamente aumentada. A dose varia em função do composto específico empregue, da doença específica, do estado do doente, etc. Tipicamente, uma dose terapêutica é suficiente para reduzir consideravelmente a população celular indesejada no tecido alvo, mantendo-se ao mesmo tempo a capacidade de sobrevivência do doente. 0 seguidamente postulado pela invenção e as respetivas formas de execução relativamente à utilização dos compostos com a Fórmula (I) na produção de um medicamento para a profilaxia, a terapia e/ou o controlo da evolução é aplicável e sem restrições à utilização dos compostos na inibição da atividade de cinase, se assim parecer adequado.
Geralmente continua-se com o tratamento até se verificar uma redução considerável, por exemplo, uma redução de pelo menos de cerca de 50% de carga celular e pode ser continuado até que essencialmente já não se detetem células indesejadas no organismo. Nos testes deste tipo, os compostos de acordo com a invenção mostram e produzem um efeito inibidor, que é habitualmente documentado por valores IC5o num intervalo de valores apropriado, de preferência num intervalo micromolar e preferencialmente na gama nanomolar. A cinase é inibida em particular em 50%, se a concentração dos compostos for inferior a 1 μΜ, preferencialmente inferior a 0,5 μΜ, com particular preferência inferior a 0,1 μΜ. Esta concentração é designada por valor IC50. A invenção também tem por objeto um medicamento compreendendo pelo menos um composto com a Fórmula (I) ou com as respetivas fórmulas parciais e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações. Um objeto da invenção é ainda uma composição farmacêutica compreendendo, como substância ativa, uma quantidade eficaz de pelo menos um composto com a Fórmula (I) ou com as respetivas fórmulas parciais e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, em conjunto com substâncias auxiliares compatíveis a nível farmacêutico.
Um "fármaco", "medicamento" e uma "composição farmacêutica" ou "formulação farmacêutica" é neste caso qualquer meio que possa ser empregue na profilaxia, na terapia, no controlo da evolução ou no pós-tratamento de doentes, que mostrem pelo menos temporalmente uma modificação patogénica do estado geral ou do estado de partes individuais do organismo do doente, preferencialmente no seguimento de cancro, tumores, metástases, distúrbios de angiogénese, doenças retrovirais, doenças imunitárias e/ou processos de envelhecimento acelerados, com particular preferência no seguimento de cancro, tumores, metástases e/ou distúrbios de angiogénese.
De modo a aumentar a ação protetora ou terapêutica dos compostos de acordo com a invenção, é possível adicionar adjuvantes compatíveis em farmácia. No sentido da invenção, qualquer substância que, com os compostos de acordo com a invenção, permita, reforce ou modifique um efeito, é um "adjuvante". Os adjuvantes conhecidos são, por exemplo, compostos de alumínio, como, por exemplo, hidróxido de alumínio ou fosfato de alumínio, saponinas, como, por exemplo, QS 21, dipéptido de muramilo ou tripéptido de muramilo, proteínas, como, por exemplo, interferão qama ou TNF, MF 59, fosfatodibilcolina, esqualeno ou polióis. Do mesmo modo, a coaplicação de albumina de ovo em adjuvante de Freund completo pode provocar uma imunidade de mediação celular aumentada e suportar assim a ação de anticorpos neutralizantes formados. Além disso, é possível aplicar ADN tendo uma propriedade imunoestimulante, ou que codifique uma proteína com efeito adjuvante, como, por exemplo, uma citocina, em paralelo ou num construto. A aplicação do meio farmacêutico num célula respetivamente de um organismo pode ser realizada de acordo com a invenção de qualquer maneira que permita que as cinases entrem em contacto com os compostos contidos na composição, sendo em sequência disso induzida uma resposta. 0 meio farmacêutico da presente invenção pode ser aplicado por via oral, transdérmica, transmucosal, transuretral, vaqinal, retal, pulmonar, enteral e/ou parenteral. 0 tipo selecionado de administração tem a ver com a indicação da dose a ser ministrada, com os parâmetros específicos do indivíduo, etc. Em particular, os diferentes tipos de administração permitem uma terapia específica de local, o que minimiza os efeitos secundários e reduz a dose de substância ativa. As injeções totalmente preferidas são as injeções intradérmicas, subcutâneas, intramusculares ou intravenosas. É possível realizar a aplicação, por exemplo, com as denominadas pistolas de inoculação ou por meio de esguinchamento. Também é possível preparar a substância como aerossol, que é inalado pelo organismo, preferencialmente por um doente humano.
As formas de administração do meio farmacêutico são produzidas com os diluentes e/ou substâncias de suporte sólidos ou líquidos usuais e com as substâncias auxiliares usualmente empregues em conformidade com o tipo de aplicação pretendido, numa dosagem apropriada e de modo de si conhecido. Em princípio, os excipientes aceitáveis em farmácia e conhecidos do especialista podem portanto constituir parte do meio farmacêutico de acordo com a invenção, em que a quantidade do material excipiente, que é combinada com a substância ativa para produzir uma dosagem individual, varia em função do indivíduo a ser tratado e do tipo de administração. Estes aditivos compatíveis em farmácia compreendem sais, tampões, substâncias de carga, estabilizadores, formadores de complexos, antioxidantes, solventes, agentes de ligação, lubrificantes, revestimentos de comprimidos, aromatizantes, corantes, conservantes, agentes de fixação e outros do género. Os exemplos destes excipientes são água, óleos vegetais, álcoois benzílicos, alquilenoglicol, polietilenoglicol, triacetato de glicerina, gelatina, hidratos de carbono, como, por exemplo, lactose ou amido, estearato de magnésio, talco e vaselina. A formulação farmacêutica pode encontrar-se na forma de comprimido, comprimido revestido, drageia, pastilha, cápsula, pílula, pó, granulado, xarope, suco, gotas, solução, dispersão, suspensão, supositório, emulsão, implante, creme, gel, pomada, pasta, loção, soro, óleo, pulverização, aerossol, adesivo, emplastro ou ligadura.
Como forma de administração oral, prepara-se preferencialmente comprimidos, comprimidos revestidos, drageias, pastilhas, cápsulas, pílulas, pós, granulados, xaropes, sucos, gotas, soluções, dispersões ou suspensões -também na forma depot. Além disso, tem-se em consideração formas farmacológicas parenterais, como, por exemplo, supositórios, suspensões, emulsões, implantes ou soluções, preferencialmente soluções oleicas ou aquosas. Com vista à aplicação tópica, formula-se de modo usual a substância farmacológica com pelo menos uma substância de suporte de utilização em farmácia, como, por exemplo, celulose microcristalina, e eventualmente outras substâncias auxiliares, como, por exemplo, humectantes, na forma de formulações sólidas de aplicação sobre a pele, como, por exemplo, cremes, géis, pomadas, pastas, pós ou emulsões ou formulações líquidas a ser aplicadas sobre a pele, tais como, por exemplo, soluções, suspensões, loções, soros, óleos, pulverizações ou aerossóis. Preferencialmente, o meio farmacêutico encontra-se como solução injetável. Para a produção da solução injetável, é possível empregar meios aquosos, como, por exemplo, água destilada ou soluções salinas fisiológicas, indo estas últimas compreender sais de adição ácidos e alcalinos. 0 meio farmacêutico também se pode encontrar como composição sólida, por exemplo, no estado liofilizado, e pode ser depois preparado através da adição de um meio de dissolução, como, por exemplo, água destilada, antes da utilização. Os princípios da produção de liofilizados são familiares ao especialista. A concentração de compostos ativo na formulação pode ser de 0,1 a 100 porcento em peso. É decisivo que a composição farmacêutica compreende, como substância ativa, uma quantidade eficaz do composto juntamente com as substâncias auxiliares compatíveis a nível farmacêutico. Os conceitos "quantidade eficaz" ou "dose eficaz" são empregues no presente documento de forma recíproca e designam uma quantidade da substância ativa farmacêutica, que tem um efeito profilático ou terapêutico relevante numa doença ou numa alteração patológica na célula, no tecido, órgão ou mamífero. Uma "ação profilática" impede o desencadear de uma doença ou até mesmo da infeção com um agente patogénico após a penetração de diferentes representantes, de modo a reduzir fortemente a sua posterior proliferação ou até mesmo desativá-los completamente. Uma "ação profilática" compreende também o aumento da função fisiológica normal. Uma profilaxia é particularmente recomendável quando um indivíduo apresenta predisposições para o desencadear das doenças acima referidas, como, por exemplo, histórico familiar, um defeito genético e uma doença recentemente superada. Uma "ação relevante a nível terapêutico" liberta parcial ou totalmente de um, vários ou de todos os sintomas de doença e leva à regressão parcial ou total de um, vários ou de todos os parâmetros fisiológicos ou bioquímicos, relacionados com a doença ou com a alteração patológica ou que constituem a sua causa, levando ao estado normal. Também se subentende que o controlo da evolução é um tipo de tratamento terapêutico, caso se ministre os compostos em determinados intervalos, por exemplo, de modo a eliminar totalmente os sintomas de uma doença. A respetiva dose ou gama de dosagem para a administração dos compostos de acordo com a invenção é suficientemente grande para atingir o efeito profilático ou terapêutico pretendido da indução de uma resposta biológica ou médica. Em geral, a dose varia com a idade, a constituição e o sexo do doente e com a gravidade da doença. Subentende-se que a dose específica, a frequência e a duração da administração dependem ainda de uma série de fatores, como, por exemplo, a capacidade de seguir o objetivo e a capacidade de ligação dos compostos, hábitos de alimentação do indivíduo a ser tratado, do tipo de administração, da taxa de eliminação e da combinação com outros medicamentos. A dose individual pode ser ajustada tanto em relação à doença primária como em relação ao aparecimento de eventuais complicações. A dose precisa pode ser detetada por um especialista com meios e métodos conhecidos. Este aspeto da invenção é aplicável e sem restrições à composição farmacêutica compreendendo os compostos com a Fórmula (I), desde que pareça adequado.
Numa forma de execução da invenção, ministra-se os compostos numa dose de 0,01 mq a 1 q por unidade de dosaqem, preferencialmente entre 1 e 700 mq, com particular preferência de 5 a 100 mq. A dosaqem diária encontra-se em particular entre 0,02 e 100 mq/kq de peso corporal.
Para sustentar o efeito médico, a composição farmacêutica numa conceção da invenção também pode compreender outra ou outras substâncias ativas, sendo concebível uma administração em simultâneo ou consecutiva. A ação terapêutica da composição farmacêutica de acordo com a invenção pode consistir, por exemplo, em, através da inibição da DNA-PK como efeito secundário indesejado, determinados meios oncológicos atuarem melhor ou por se reduzir o número de efeitos secundários destes medicamentos por meio da redução da dose.
Numa forma de execução preferida da invenção, combina-se a composição farmacêutica de acordo com a invenção com um meio oncológico. Como empregue no presente documento, o conceito "meio oncológico" refere-se a qualquer meio ministrado a um doente com cancro, tumores, metástases e/ou distúrbios de angiogénese, com vista ao tratamento do cancro. O meio oncológico é com particular preferência selecionado do grupo compreendendo citocinas, quimiocinas, agentes pró-apoptóticos, interferões, compostos radioativos, moduladores dos receptores do estrogénio, moduladores dos receptores dos androgénios, moduladores dos recetores dos retinoides, citotóxicos, citostáticos, inibidores da prenil proteína transferase e inibidores de angiogénese, ou respetivas combinações. Prefere-se que o meio oncológico altere, em particular enfraqueça, o metabolismo de ácidos nucleicos e/ou o metabolismo das proteínas, a divisão celular, a replicação do ADN, a biossíntese de purina, de pirimidina e/ou de aminoácidos, a expressão genética, o processamento do ARNm, a síntese de proteínas, a apoptose, ou respetivas combinações. A invenção também pode ser concretizada na forma de kit, que contém os compostos de acordo com a invenção. 0 kit consiste em embalagens separadas de (a) uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, e de (b) uma quantidade eficaz de outra substância ativa. 0 kit contém recipientes apropriados, como, por exemplo, caixas ou caixotes, frascos individuais, saquetas ou ampolas. 0 kit pode, por exemplo, conter ampolas separadas, nas quais se encontra respetivamente uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula (I) e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, e de uma quantidade eficaz de outras substância ativa farmacológica, na forma dissolvida ou liofilizada. 0 kit da invenção também poderá conter um produto contendo instruções escritas ou informando o utilizador relativamente a instruções escritas, explicando como proceder com os compostos da invenção.
Em conformidade com a invenção, emprega-se os compostos com a Fórmula (I) ou as suas fórmulas parciais e/ou os seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, na profilaxia, na terapia e/ou no controlo da evolução de doenças que provocam, medeiam e/ou ampliam a atividade de serina-treonina proteína cinases. A presente invenção tem por isso por objeto também a utilização dos compostos com a Fórmula (I) ou as suas fórmulas parciais e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, na produção de um medicamento para a profilaxia, a terapia e/ou o controlo da evolução de doenças provocadas, mediadas ou ampliadas pela atividade de serina-treonina proteína cinases. Em conformidade com a invenção, os compostos com a Fórmula (I) ou as suas fórmulas parciais e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, adequam-se à utilização na profilaxia, na terapia e/ou no controlo da evolução de doenças provocadas, mediadas e/ou ampliadas pela atividade de serina-treonina proteína cinases. Na identificação de uma via de transmissão de sinal correspondente e para detetar interações entre diversas vias de transmissão de sinal, foram desenvolvidos modelos ou sistemas modelares apropriados, por exemplo, modelos de culturas de células (Khwaja et ai. (1997) EMBO 16: 2783) e modelos de animais transgénicos (White et ai. (2001) Oncogene 20: 7064). Na determinação de certas etapas na cascata de transmissão de sinal, é possível empregar compostos interativos, de modo a modular o sinal (Stephens et ai. (2000) Biochemical J 351: 95). Além disso, também é possível empregar os compostos de acordo com a invenção como reagentes no teste de vias de transmissão de sinal dependentes de cinases em animais e/ou em modelos de culturas de células ou nas doenças clínicas referidas no presente pedido. Como aqui referido, estas vias de sinal são relevantes para diferentes doenças. Em conformidade com isso, os compostos de acordo com a invenção podem ser empregue na profilaxia, na terapia e/ou no controlo da evolução de doenças dependentes de vias de sinal em que tomam parte serina-treonina proteína cinases.
Em conformidade com a invenção, os compostos com a Fórmula (I) ou as suas fórmulas parciais e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, adequam-se à utilização na profilaxia, na terapia e/ou no controlo da evolução de cancro, tumores, metástases, distúrbios de angiogénese, doenças retrovirais e/ou doenças imunitárias, em particular cancro, tumores, metástases e/ou distúrbios de angiogénese. Em conformidade com a invenção, os compostos com a Fórmula (I) ou as suas fórmulas parciais e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, também são adequados à utilização no abrandamento de processos de envelhecimento, ocorrendo o abrandamento com base na comparação do tempo de vida do hospedeiro tratado ou das suas células, culturas de células, tecido ou órgãos com estatísticas e/ou controlos positivos ou negativos correspondentes. Subentende-se que também o hospedeiro dos compostos farmacêuticos se encontra incluído no âmbito de proteção da presente invenção. 0 tumor é em particular selecionado do grupo de doenças do epitélio escamoso, bexiga, estômago, rins, cabeça, pescoço, esófago, colo do útero, tiroide, intestino, fígado, cérebro, próstata, trato urogenital, sistema linfático, laringe, pulmão, pele, sangue e sistema imunitário, e/ou o cancro é selecionado do grupo de leucemia monocítica, adenocarcinoma do pulmão, carcinoma do pulmão de pequenas células, cancro do pâncreas, glioblastoma, carcinoma do intestino, carcinoma da mama, leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfática aguda, leucemia linfática crónica, linfoma Hodgkin e linfoma não-Hodgkin.
Outra concepção da presente invenção é relativa a compostos de acordo com a invenção em combinação com radioterapia e/ou com pelo menos outra substância ativa, de preferência em combinação com radioterapia e/ou com um agente oncológico. Os métodos de radiação técnicos, que têm aplicabilidade clínica, compreendem preferencialmente radiação de protões (radiação eletromagnética de raios X/gama clássica), radiação de protões, radiação de iões pesados (carbono ionizado) e radiação de neutrões, sem se ficar a estes limitados. 0 especialista conhece estas radioterapias e outras terapias de radiação apropriadas no sentido da invenção, como, por exemplo, a partir de Herrmann et ai. (2006) Klinische Strahlenbiologie, Elsevier Munchen, 4.a edição, 67-68; Bhide & Nutting (2010) BMC Medicine 8: 25; Choi & Hung (2010) Current Urology Reports 11 (3) : 172. Como aplicação mais frequente, aperfeiçoou-se tecnicamente a radiação de protões pelo processo IMRT (radioterapia de intensidade modulada) e por processos imagiológicos (radioterapia conforme tridimensional) no planeamento e na realizada da radiação, com vista a uma focalização o mais precisa possível. Os compostos de acordo com a invenção conseguem, no caso das quimioterapias e radioterapias oncológicas existentes, efeitos sinérgicos e/ou restauram a eficácia de quimioterapias e radioterapias oncológicas existentes. A ação sinérgica da inibição do VEGF em combinação com radioterapia encontra-se descrita no estado da técnica (WO 00/61186). Como outras substâncias ativas farmacológicas, é dada particular preferência às quimioterapias que inibem a angiogénese e que inibem com isso o crescimento e a proliferação de células tumorais. Os exemplos disto são inibidores do receptor do VEGF, contendo ribozimas e antissentido, dirigidos a receptores do VEGF, e angiostatina e endostatina. Outros exemplos de agentes antineoplásicos, que podem ser empregues em combinação com os compostos de acordo com a invenção, contêm em geral agentes alquilantes, antimetabólitos, toxina Epidophyllo, uma enzima antineoplásica, um inibidor da topoisomerase, procarbazina, mitoxantrona ou complexos de coordenação de platina. Noutra forma de execução, o agente oncológico é com particular preferência selecionada do grupo de modulador dos recetores do estrogénio, modulador dos recetores dos androgénios, moduladores dos recetores de retinoides, citotóxico, citostático, inibidores da prenil proteína transferase e inibidores de angiogénese. De resto, o anteriormente defendido pela invenção e as respetivas formas de execução relativamente à composição farmacêutica são aplicáveis e sem restrições à segunda indicação médica, desde que pareça adequado. Uma forma de execução totalmente preferida compreende os compostos de acordo com a invenção em combinação com radioterapia e/ou um citostático.
Ainda outra concenção da invenção é relativa à utilização de pelo menos um composto com a Fórmula (I) e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, para a sensibilização das células cancerígenas relativamente a meios oncológicos e/ou a radiação ionizante, na condição de que a sensibilização in vivo não ocorra no corpo humano ou animal. A sensibilização tem lugar preferencialmente ex vivo ou in vitro, ao ministrar-se os compostos a células, culturas de células, tecidos ou órgãos, que compreendem serina-treonina proteína cinases. Aplica-se a utilização ex vivo em particular no caso de células animais provenientes de um organismo animal, afligido por uma doença, que é selecionada do grupo constituído por cancro, tumores, metástases e/ou distúrbios de angiogénese. As células tratadas ex vivo podem ser mantidas em cultura para posteriores estudos ou podem ser transferidas para um animal, podendo tratar-se do animal hospedeiro ou de outro animal. A sensibilização ex vivo de acordo com a invenção é sobretudo vantajosa para testar a eficácia específica dos compostos, de pode a ser possível, mediante avaliação destes dados ex vivo, definir em conformidade com isso qual a dose in vivo. Em resultado disso, aumenta-se de modo significativo o efeito terapêutico. A invenção contempla ainda um processo para a profilaxia, terapia e/ou controlo da evolução de cancro, tumores, metástases, distúrbios de angiogénese, doenças retrovirais, doenças imunitárias e/ou processos de envelhecimento, ministrando-se uma quantidade eficaz de pelo menos um composto de acordo com a invenção e/ou dos respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, num sujeito experimental a ser tratado. Os sujeitos experimentais a ser tratados preferidos no sendo da invenção são humanos ou animais, com particular preferência o ser humano. 0 especialista sabe neste caso que pode aplicar os compostos de acordo com a invenção, que obviamente também podem ser empregues como o meio farmacêutico de acordo com a invenção, em diversas dosagens num organismo, em particular num doente humano. A quantidade eficaz e o tipo de aplicação podem ser determinados pelo especialista através de experiências de rotina. A doutrina supracitada da invenção e as suas formas de execução são aplicáveis e isso sem restrições ao processo de tratamento, desde que pareça adequado.
Todos os elementos ou componentes referidos e outros são familiares ao especialista e podem conferir uma conceção especial ao reivindicado de acordo com a invenção em experiências de rotina. Todos os documentos citados na descrição deverão ser incluídos por este meio na sua globalidade na revelação da presente invenção como referência.
No âmbito da invenção aqui apresentada, preparou-se pela primeira vez novos compostos de pirazoloquinolina com a Fórmula (I) . Os compostos de acordo com a invenção controlam de modo afim e/ou seletivo serina-treonina proteína cinases, em particular DNA-PK. Os compostos com a Fórmula (I) e os seus derivados distinguem-se por uma grande especificidade e estabilidade, baixos custos de produção e um fácil manuseio. Com base nestas propriedades, tem-se um modo de ação reprodutível, inclusive a falta de reatividade cruzada e a interação fiável e segura com as estruturas alvo correspondentes. A invenção também compreende a utilização dos presentes derivados de pirazoloquinolina na inibição, na regulação e/ou na modulação da cascata de sinal de serina-treonina proteína cinases, em particular DNA-PK, e proporciona assim novas ferramentas para investigação e/ou diagnóstico.
Os medicamentos e as composições farmacêuticas, que contêm os referidos compostos, e a utilização destes compostos no tratamento de distúrbios mediados por cinases constituem ainda uma abordagem muito promissora para um largo espetro de terapias, sendo possível atingir um alívio direto e indireto de sintomas nos humanos e nos animais. Isto é particularmente vantajoso para o combate eficaz de doenças graves, como o cancro, seja como monoterapia ou em combinação com outras terapias antineoplásicas. A participação-chave da DNA-PK em processos de reparação do ADN e a prova de que os inibidores da DNA-PK tornam as células de mamíferos mais sensíveis a radiação permitem uma aplicação terapêutica dos inibidores específicos de DNA-PK ou DNA-PK/ATM ou ATM no quadro do tratamento, por exemplo, de tumores cancerígenos sólidos, através de radiação e/ou de uma quimioterapia dirigida a DNA-DSBs. Os compostos com a Fórmula (I), os seis sais, isómeros, tautómeros, enantiómeros, diastereómeros, racematos, derivados, profármacos e/ou metabólitos são eficazes não só no caso dos quadros clínicos referidos, mas também no diagnóstico e na terapia de todas as doenças relacionadas com a cascata de sinal da DNA-PK, sobretudo relativamente à inibição da proliferação celular e da migração celular. Além disso, os inibidores de acordo com a invenção podem ser empregues no tratamento de doenças retrovirais através de uma repressão da integração retroviral (R. Daniel (1999) Science 284: 644). Por fim, é possível empregar os inibidores de acordo com a invenção como imunomoduladores e moduladores da conservação talomérica. Os inibidores de baixo peso molecular são empregues individualmente e/ou em combinação com outras medidas de tratamento, como, por exemplo, intervenções cirúrgicas, imunoterapia, radioterapia e/ou quimioterapia. As últimas são relativas a uma terapia dirigida ao alvo com uma NME opcional (ou seja, NCE e/ou NBE) como monoterapia e/ou terapia de combinação on-target/off-target.
Devido à sua inibição surpreendentemente forte e/ou seletiva destas enzimas, que regulam a reparação de processos celulares de dsDNA (ADN de cadeia dupla), é possível ministrar os compostos da invenção com uma dosagem com vantagem baixa, atingindo eles, comparativamente a inibidores menos potentes ou menos seletivos do estado da técnica, uma eficácia biológica semelhante ou até mesmo superior. A dose reduzida também leva a menos efeitos secundários médicos ou mesmo nenhuns. Além disso, a inibição muito seletiva pelos compostos de acordo com a invenção também é refletida por uma redução de efeitos secundários indesejados, que é independente da dosagem.
Subentende-se que esta invenção não se encontra restringida aos compostos, composições farmacêuticas, utilizações e processos específicos, como descritos no presente documento, dado que estes podem variar. Subentende-se ainda que a terminologia presentemente empregue serve exclusivamente para fins de descrição de formas de execução particulares e que não deve limitar o âmbito de proteção da invenção. Como presentemente empregues na descrição, inclusive nas reivindicações anexas, as palavras no singular, como por exemplo, "um", "uma", "o" ou "a" têm a mesma equivalência no plural, se nada for expresso em contrário pelo contexto. Por exemplo, a referência a "um composto" compreende um composto individual ou vários compostos, que por sua vez podem ser idênticos ou diferentes, ou a referência a "um processo" compreende etapas e processos equivalentes, conhecidos do especialista.
Seguidamente, a invenção é descrita em maior detalhe com base em exemplos não restritivos de formas de execução concretas. Deverá ainda em particular interpretar-se os exemplos como não estando limitados às combinações características explicadas em concreto, mas sim que as características exemplificativas podem ser por sua vez combinadas livremente, desde que se atinja o objetivo da invenção.
Anterior e posteriormente, todas as temperaturas encontram-se indicadas em °C. Nos exemplos seguintes, "processamento final usual" significa: adiciona-se, se necessário, água, ajusta-se, se necessário e consoante a constituição do produto final, para valores de pH entre 2 e 10, extrai-se com acetato de etilo ou diclorometano, separa-se, seca-se a fase orgânica com sulfato de sódio, concentra-se por evaporação e purifica-se por cromatografia em silica gel e/ou por cristalização. Valores Rf em silica gel; agente de controlo da fluidez: acetato de etilo/metanol 9:1. A NMR (1 H) foi realizada com os seguintes parâmetros. Equipamento: Bruker Avance DRX 500, Bruker Avance 400,
Bruker DPX 300 Referência: TMS TD (Time Domaine = número de pontos de dados ou resolução digital): 65536 Solvente: DMSO d6 NS (Number of scans = frequência de varrimento): 32 SF (Spectrometer Frequence = frequência do espectrómetro) : 500 MHz
TE (Temperatura): 303 K
Realizou-se a HPLC-MS com os seguintes parâmetros. Equipamento: Agilent Technologies 1200 Series Métodos: ESIlROD.M e POLAR.M (3,8 min., gradiente de solventes)
Coluna: ChromolithSpeedROD RPl8e50-4.6
Solventes: acetonitrilo + 0,05% HCOOH/água totalmente
dessalinizada + 0,04% HCOOH Comprimento de onda de deteção: 220 nm Tipo de MS: API-ES EXEMPLO 1: Síntese de 4-(8-hidroxi-7-metoxi-3-metil-3H- pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo
Suspende-se 6-benziloxi-7-metoxi-3-nitro-lH-quinolin-4-ona (9,10 q, 27,89 mmoles, ver Acta Pharmacologica Sinica (2008) 29(12): 1529) em N,N-dimetilformamida seca (70 mL).
Em seguida, junta-se cloreto de fosforilo (2,82 mL, 30,68 mmoles) e aquece-se durante 30 min para os 100°C. Após arrefecimento, deita-se a mistura de reação sob agitação em 500 mL de água gélida e agita-se durante mais 30 min. O precipitado originado é aspirado, é lavado com água e é seco no vácuo, isolando-se 6-benziloxi-4-cloro-7-metoxi-3-nitro-quinolina (9,57 g, 27,76 mmoles) na forma de sólido bege claro com um ponto de fusão de 169, 6°C. MS: 345.1 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0.44 (ciclo-hexano/éster de etilo do ácido acético 2:1 teores de volume).
Sob uma atmosfera de nitrogénio, dissolve-se 4-cianofenilacetonitrilo (3,86 g, 27,12 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (185 mL) . Em seguida, adiciona-se sob arrefecimento em banho gélido, por porções, hidreto de sódio (dispersão a 60% em óleo parafínico, 2,17 g, 54,25 mmoles) e agita-se durante mais 30 min. Em seguida, adiciona-se uma suspensão de 6-benziloxi-4-cloro-7-metoxi-3-nitroquinolina (9,35 g, 27,12 mmoles) em N,N-dimetilformamida (50 mL) à temperatura ambiente e agita-se em seguida durante mais 2 h. Terminada a reação, deita-se em 2,5 L de água e neutraliza-se sob agitação forte com ácido clorídrico 1,0 M. Passados 30 min de agitação, acidula-se a suspensão para um pH de cerca de 2 e, passados mais 30 min, aspira-se o precipitado obtido, lava-se depois com água e seca-se durante a noite sob elevado vácuo. Em seguida, purifica-se o produto bruto em silica gel flash (gradiente de solventes ciclo-hexano/0-50% de vol. de éster de etilo do ácido acético), obtendo-se 4-[ (6-benziloxi-7-metoxi-3-nitro-quinolin-4-il)-cianometil]-benzonitrilo (11,31 g, 25,11 mmoles) como sólido com um ponto de fusão de 147, 9°C. MS: 451.1 (M+H+) , DC (HPTLC) (HPTLC) : Rf = 0.68 (ciclo-hexano/éster de etilo do ácido acético 1:1 teores de volume).
Suspende-se 4-[ (6-benziloxi-7-metoxi-3-nitro-quinolin-4-il)-cianometil]-benzonitrilo (5,0 g, 11,1 mmoles) em água (250 mL) e aquece-se até à ebulição. Em seguida, adiciona-se por porções permanganato de potássio (5,26 g, 33,3 mmoles), só sendo realizada a adição seguinte quando a anterior tiver descolorada (tempo necessário: cerca de 2,5 h) . Em seguida, aquece-se durante mais 2 h sob refluxo. Após arrefecimento para cerca de 60°C, procede-se a aspiração. O filtrado aquoso é descartado, o bolo de filtração é suspenso quatro vezes em N,N- dimetilformamida (250 mL de cada vez) e é aspirado (controlo de produto DC (HPTLC)). As soluções de DMF reunidas são aciduladas com ácido clorídrico 1,0 M para um pH de cerca de 4 (viragem) e concentra-se no vácuo até ao estado seco, obtendo-se um óleo. O resíduo é deitado em tetra-hidrofurano (5,0 mL) e é misturado em seguida com éster de etilo do ácido acético (100 mL) , agita-se durante 30 min e arrefece-se depois em banho gélido. O precipitado obtido é separado por filtração e é seco sob elevado vácuo, obtendo-se 4-(6-benziloxi-7-metoxi-3-nitroquinolino-4-carbonil)-benzonitrilo (3,61 g, 8,22 mmoles) como sólido com um ponto de fusão de 262°C. MS: 440.1 (M+H+) , DC (HPTLC) (HPTLC): Rf = 0.44 (ciclo-hexano/éster de etilo do ácido acético 1:1 de teores de volume).
Suspende-se 4- (6-benziloxi-7-metoxi-3-nitroquinolin-4- carbonil)-benzonitrilo (8,82 g, 20,07 mmoles), pó de ferro (11,21 g, 200,7 mmoles) e ácido clorídrico 2,0 M (22,76 mL) em metanol (455 mL) (motor de agitação) e aquece-se durante 18 h para os 66°C. Após terminada a reação (DC (HPTLC) controlo), aspira-se através de diatomito e lava-se depois com tetra-hidrofurano (500 mL). Concentra-se o filtrado no vácuo para metade do seu volume. Em seguida, adiciona-se solução de NaCl semissaturada (300 mL) e extrai-se duas vezes com éster de etilo do ácido acético (300 mL de cada vez). As fases orgânicas reunidas são secas com sulfato de sódio, são aspiradas e concentradas no vácuo até ao estado seco. O resíduo obtido é dissolvido em éster de etilo do ácido acético e é filtrado com um pouco de sílica gel flash. Concentra-se o filtrado no vácuo, suspende-se o resíduo em éster de etilo do ácido acético (70 mL) e etanol (20 mL), aspira-se em seguida e seca-se sob elevado vácuo, obtendo-se 4-(3-amino-6-benziloxi-7-metoxiquinolino-4- carbonil)-benzonitrilo (5,83 g, 14,23 mmoles) como sólido com um ponto de fusão de 192, 6°C. MS: 410.1 (M+H+) , DC (HPTLC): Rf = 0.36 (éster de etilo do ácido acético).
Uma solução de nitrito de sódio (483 mg, 6, 99 mmoles) em água (2,5 mL) é juntada por gotas, nos (-)10°C em 1,5 h, a uma suspensão de 4- (3-amino-6-benziloxi-7-metoxiquinolino-4-carbonil)-benzonitrilo (2,60 g, 6,35 mmoles) em ácido clorídrico concentrado (50 mL). Em seguida, agita-se durante mais 30 min. Depois, adiciona-se uma solução de di-hidrato de cloreto de estanho(II) (5,02 g, 22,23 mmoles) em ácido clorídrico concentrado (3,8 mL) nos (-)5°C. Agita-se a suspensão obtida durante 1 h à temperatura ambiente, dilui-se em seguida com água (500 mL), agita-se durante 30 min e aspira-se. 0 bolo de filtração é depois lavado com água e é seco sob elevado vácuo, obtendo-se 4-(8-benziloxi-7-metoxi-3H-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo (2,42 g, 5,95 mmoles) como sólido com um ponto de fusão de 222,8°C (decomposição). MS: 407.1 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0.27 (éster de etilo do ácido acético).
Dissolve-se 4- (8-benziloxi-7-metoxi-3i7-pirazolo [3,4- c]quinolin-l-il)-benzonitrilo (2,50 g, 6,15 mmoles) em N,N-dimetilformamida (72 mL) . Em seguida, adiciona-se K2CO3 (1,70 g, 12,3 mmoles) e iodometano (421 pL, 6,76 mmoles) à temperatura ambiente e agita-se a mistura de reação durante 18 h (controlo DC (HPTLC) ) . Deita-se em seguida em água (500 mL) e agita-se durante 30 min. Aspira-se o precipitado obtido e sujeita-se a cromatografia através de sílica gel flash (120 g, gradiente de solventes ciclo-hexano/0-100% de vol. de éster de etilo do ácido acético/0-40% de vol. de etanol). Suspende-se o resíduo das frações de produto em 2-propanol, aspira-se e seca-se sob elevado vácuo, obtendo-se 4-(8-benziloxi-7-metoxi-3-metil-3H-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il) -benzonitrilo (1,79 g, 4,27 mmoles) como sólido com um ponto de fusão de 230,4°C. MS: 421.1 (M+H+) , DC (HPTLC): Rf = 0.44 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume). (Nota: 4-(8-benziloxi-7-metoxi-3-metil-3i7- pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo/4-(8-benziloxi-7-metoxi-2-metil-2fl-pirazolo[3, 4-c]quinolin-l-il) -benzonitrilo cerca de 3:1, teores de produto bruto) A uma solução de 4- (8-benziloxi-7-metoxi-3-metil-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo (3,82 q, 9,09 mmoles) em ácido trifluoroacético (38 mL) , sob uma atmosfera de nitroqénio seca, é juntada lentamente por qotas com arrefecimento de banho qélido uma solução de tribrometo de boro 1,0 M em diclorometano (38,2 mL, 38,2 mmoles). Em sequida, aqita-se após terminada a adição durante mais 30 min. Após terminada a reação (controlo HPLC-MS), a mistura de reação é deitada com cuidado em água (800 mL) e é extraída duas vezes com éster de etilo do ácido acético (200 mL de cada vez). Lava-se as fases orgânicas reunidas com água (150 mL) e solução de NaHCCq semissaturada (200 mL) , em seguida seca-se com Na2S04 e aspira-se. O filtrado é concentrado no vácuo, é suspenso num pouco de etanol, é aspirado e é seco sob elevado vácuo, obtendo-se o composto de título 4-(8-hidroxi-7-metoxi-3-metil-3i7-pirazolo [3,4-c] quinolin-l-il) -benzonitrilo (2,86 g, 8,66 mmoles) como sólido com um ponto de fusão de 288, 9°C. MS: 331.1 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0.34 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume).
Os compostos, que foram produzidos de acordo com o Exemplo 1, encontram-se na seguinte Tabela 2.
EXEMPLO 2: Síntese de l-bromo-7,8-dimetoxi-3-metil-3fí- pirazolo[3,4-c]quinolina
A uma solução de 4-cloro-6,7-dimetoxi-3-nitroquinolina (7,5 q, 27,92 mmoles) em dioxano isento de áqua e de oxiqénio (200 mL, tratamento prévio: 30 min de passaqem de qás de nitroqénio), junta-se Zn(CH3)2(l,2 M em tolueno, 15,35 mL, 18,43 mmoles) e Pd(dppf)Cl2 (2,28 g, 2,92 mmoles). A mistura de reação é aquecida durante 8 h para os 80 °C, obtendo-se uma solução. Após arrefecimento para a temperatura ambiente, adiciona-se lentamente água (65 mL) e extrai-se com éster de etilo do ácido acético (60 mL). Após separação, lava-se a fase orgânica com um pouco de ácido clorídrico (1,0 M, 5 mL) . Extrai-se a fase aquosa três vezes com éster de etilo do ácido acético (60 mL de cada vez) . As fases orgânicas reunidas são secas com Na2SC>4, aspira-se e concentra-se no vácuo até ao estado seco. O resíduo é purificado por cromatografia com sílica gel flash (solvente ciclo-hexano/éster acético 2:1, teores de
volume), obtendo-se 6,7-dimetoxi-4-metil-3-nitroquinolina (5,82 g, 23,44 mmoles) como sólido. MS: 249.0 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0.45 (ciclo-hexano/éster de etilo do ácido acético 1:1, teores de volume).
Dissolve-se 6,7-dimetoxi-4-metil-3-nitroquinolina (5,80 g, 23,36 mmoles) em tetra-hidrofurano (60 mL) . Em seguida, junta-se paládio sobre carbono (5%, 2,90 g, humedecido com água) e agita-se em turbulência a suspensão durante 16 h numa atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente. Após terminada a reação, aspira-se através de diatomito e lava-se depois com tetra-hidrofurano. Concentra-se o filtrado no vácuo até ao estado seco, obtendo-se 3-amino-6,7-dimetoxi-4-metilquinolina (4,05 g, 18,56 mmoles) como sólido. MS: 219,0 (M+H+) , DC (HPTLC): Rf = 0.35 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume). A uma solução de 3-amino-6,7-dimetoxi-4-metilquinolina (2,70 g, 12,39 mmoles) em ácido acético glacial (90 mL) , junta-se nitrito de sódio (1,28 g, 18,60 mmoles), dissolvido em água (2,5 mL). A mistura de reação é agitada durante 3 h à temperatura ambiente. Após terminada a reação, procede-se a concentração no vácuo. O resíduo é deitado em água, é filtrado e é lavado depois com água. Concentra-se o filtrado no vácuo até ao estado seco. Aspira-se o resíduo obtido através de um pouco de sílica gel flash numa frita várias vezes com ciclo-hexano/éster de etilo do ácido acético 4:1 (teores de volume), com vista à separação de impurezas. Descarta-se o filtrado. Em seguida, lava-se o bolo de filtração com éster de etilo do ácido acético/0-10% de vol. de etanol e concentra-se o filtrado no vácuo até ao estado seco, obtendo-se 7, 8-dimetoxi-3i7-pirazolo[3,4-c]quinolina (2,29 g, pureza de 85%, 8,48 mmoles) como sólido. MS: 230,0 (M+H+) , DC (HPTLC): Rf = 0.45 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume).
Dissolve-se 7,8-dimetoxi-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolina (500 mg, 2,18 mmoles) em água (40 mL) . Em seguida, junta-se bromo por gotas (220 pL, 4,36 mmoles) com exclusão de luz à temperatura ambiente. Depois, agita-se a solução de reação durante 1 h. Após terminada a reação, concentra-se no vácuo até ao estado seco, obtendo-se l-bromo-7, 8-dimetoxi-3i7-pirazolo[3,4-c]quinolina (752 mg, pureza de 85%, 2,07 mmoles) como sólido. MS: 308,0/310,0 (M+H+, distribuição de isótopo de monobromo) , DC (HPTLC) : Rf = 0.50 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume). A uma solução de l-bromo-7, 8-dimetoxi-3i7-pirazolo [3,4-c]quinolina (300 mg, 972 pmoles) em N,N-dimetilformamida anidra (36 mL) , junta-se carbonato de potássio (270 mg, 1,95 mmoles) e iodeto de metilo (78 pL, 1,27 mmoles) à temperatura ambiente. A mistura de reação é em seguida agitada durante 18 h à temperatura ambiente. Após terminada a reação, deita-se em água (150 mL) e dilui-se com éster de etilo do ácido acético (150 mL). Separa-se as fases e extrai-se a fase aquosa várias vezes com éster de etilo do ácido acético. As fases orgânicas reunidas são secas com Na2S04, são aspiradas e o filtrado é concentrado no vácuo até ao estado seco, obtendo-se 282 mg (876 pmoles) de uma mistura do composto de titulo (Rf = 0,45) e l-bromo-7,8-dimetoxi-2-metil-2íí-pirazolo [3, 4-c] quinolina (Rf = 0,55) na relação de quantidade de 3:1. Com vista à purificação, dissolve-se a mistura de regioisómeros em éster de etilo do ácido acético quente, de modo a que seja suficiente um volume de solvente mínimo para toda a solução. Em seguida, arrefece-se lentamente para os 0°C, obtendo-se um precipitado de l-bromo-7, 8-dimetoxi-3-metil-3i7- pirazolo[3,4-c]quinolina puro (125 mg). Após a aspiração, dissolve-se de novo o filtrado concentrado no vácuo (mistura de regioisómeros de cerca de 1:1) em éster de etilo do ácido acético quente e junta-se à solução um pouco de ciclo-hexano. Passadas 24 h, o precipitado obtido é aspirado, obtendo-se mais l-bromo-7, 8-dimetoxi-3-metil-3íí-pirazolo[3,4-c]quinolina (31 mq). Os cristalizados reunidos são secos sob elevado vácuo, obtendo-se o composto de titulo l-bromo-7, 8-dimetoxi-3-metil-3i7-pirazolo [3, Ιο] quinolina (156 mq, 484 ymoles) com um ponto de fusão de 235,5°C. MS: 322,0/324,0 (M+H+, distribuição de isótopos de monobromo), DC (HPTLC): Rf = 0.45 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume).
Os compostos, que foram produzidos de acordo com as instruções de síntese dos Exemplos 1 e 2, encontram-se na sequinte Tabela 3.
EXEMPLO 3: Síntese de 2-[1-(4-cianofenil)-7-metoxi-3-metil-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-8-iloxi]-2-(4-fluorofenil)-acetamida
Dissolve-se 4- (8-hidroxi-7-metoxi-3-metil-3H-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo (97,7 mq, 296 ymoles) em N,N-dimetilformamida (3,7 mL) . Em seguida, junta-se carbonato de potássio (102 mg, 738 ymoles) e 2-bromo-2-(4-fluorofenil)-acetamida (170 mg, 733 ymoles) . A mistura de reação é agitada durante 18 h nos 120°C. Após terminada a reação, deita-se em água (50 mL) e extrai-se três vezes com éster de etilo do ácido acético (50 mL de cada vez) . As fases orgânicas reunidas são secas com Na2S04, são aspiradas e concentradas no vácuo. Em seguida, suspende-se o resíduo num pouco de 2-propanol, aspira-se e seca-se sob elevado vácuo, obtendo-se 2-[1-(4-cianofenil)-7-metoxi-3-metil-3i7-pirazolo [3,4-c]quinolin-8-iloxi] -2 - (4-fluorofenil)-acetamida (68 mg, 141 ymoles) como sólido com um ponto de fusão de 249,2°C. MS: 482.1 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0.31 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume). Os compostos, que foram produzido em termos de método em conformidade com as instruções de síntese do Exemplo 3, encontram-se na seguinte Tabela 4.
EXEMPLO 4: Síntese de 4-[8-(2-dimetilaminoetoxi)-7-metoxi- 3- metil-3H-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il]-benzonitrilo
Dissolve-se 4- (8-hidroxi-7-metoxi-3-metil-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo (132 mq, 398 pmoles) em tetra-hidrofurano (3,3 mL) . Em sequida, junta-se trifenilfosfano (251 mg, 956 pmoles) e 2-(dimetilamino)-etanol (56 pL, 558 pmoles). Sob arrefecimento, junta-se depois por gotas nos 5°C azodicarboxilato de di-isopropilo (125 pL, 637 pmoles). Após terminada a adição, agita-se durante mais 2 h à temperatura ambiente. Em seguida, concentra-se a solução de reação no vácuo até ao estado seco e sujeita-se a cromatografia através de sílica gel flash (gradiente de solventes ciclo-hexano/0-100% de vol. de éster de etilo do ácido acético/0-40% de vol. de etanol), obtendo-se, após concentração das frações de produto e secagem sob elevado vácuo, o composto de título 4- [8- (2-dimetilaminoetoxi) -7-metoxi-3-metil-3i7- pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il]-benzonitrilo (81 mg, 202 pmoles) como sólido com um ponto de fusão de 212,2°C. MS: 401.9 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0.09 (éster de etilo do ácido acético/etanol 1:1, teores de volume).
Os compostos, que são produzidos pelo método de acordo com as instruções de síntese do Exemplo 4, encontram-se na seguinte Tabela 5.
EXEMPLO 5: Síntese de 2-[1-(4-cianofenil)-7-metoxi-3-metil-3fí-pirazolo [3, 4-c]quinolin-8-iloxi] -N- [2 - (4-etilpiperazin-1-il)-etil]-2- (4-fluorofenil)-acetamida
Dissolve-se o éster de metilo do ácido [l-(4-cianofenil)-7-metoxi-3-metil-3fí-pirazolo [3,4-c] quinolin-8-iloxi] - (4-fluorofenil)-acético (260 mq, 524 pmoles) em tetra-hidrofurano e metanol (66 mL de cada vez) . Em seguida, junta-se lixívia de soda cáustica (1,0 M, 1,58 mL, 1,58 mmoles) por gotas. Agita-se a mistura de reação durante 18 h à temperatura ambiente. Após terminada a transformação, concentra-se no vácuo até ao estado seco e deita-se o resíduo obtido em água (100 mL). Através da adição de ácido clorídrico (1,0 M), acidula-se com cuidado para um pH de 5 e agita-se durante mais 30 min. Aspira-se o precipitado originado e lava-se depois com água. Suspende-se em seguida o bolo de filtração em 2-Propanol (5 mL), volta-se a aspirar e seca-se o resíduo sob elevado vácuo durante a noite, obtendo-se o ácido [1-(4-cianofenil)-7-metoxi-3-metil-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-8-iloxi]-(4-fluorofenil)-acético (235 mg, 488 ymoles) como sólido com um ponto de fusão de 211, 6°C. MS: 483.1 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0.11 (etanol). O ácido [1-(4-cianofenil)-7-metoxi-3-metil-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-8-iloxi]-(4-fluorofenil)-acético (190 mg, 394 ymoles) é dissolvido em cloreto de tionilo (2,0 mL) e é aquecido durante 2 h sob refluxo. Depois concentra-se no vácuo até ao estado seco e coevapora-se duas vezes com tolueno destilado anidro, obtendo-se cloreto do ácido [1-(4-cianofenil) -7-metoxi-3-metil-3i7-pirazolo [3,4-c] quinolin-8-iloxi]-(4-fluorofenil)-acético (195 mg, 389 mmoles). Em seguida, dissolve-se 35 mg (69,9 ymoles) do cloreto de ácido obtido em N,N-dimetilformamida anidra (2,0 mL) numa atmosfera de nitrogénio seca e mistura-se mediante arrefecimento em banho gélido com 2-(4-etilpiperazin-l-il)-etilamina (22 mg, 140 pmoles). Agita-se a solução de reação durante 2 h à temperatura ambiente. Em seguida, deita-se em água (30 mL) e extrai-se quatro vezes com éster de etilo do ácido acético (30 mL de cada vez). Lava-se as fases orgânicas reunidas duas vezes com água (20 mL de cada vez), seca-se em seguida com Na2SC>4, aspira-se e concentra-se o filtrado no vácuo até ao estado seco. O resíduo é dissolvido em sulfóxido de dimetilo e é sujeito a cromatografia (pHPLC, gradiente de solventes água/1-30% de vol. de acetonitrilo, 0,1% de vol. de ácido fórmico) , obtendo-se, após a liofilização, o composto de título 2 — [ 1 — (4-cianofenil) -7-metoxi-3-metil-3i7-pirazolo [3,4-c] quinolin-8-iloxi]-N-[2-(4-etilpiperazin-l-il)-etil]-2- (4- fluorofenil)-acetamida (21 mg, 33,8 ymoles) como liofilizado com uma gama de fusão de 110-112°C. MS: 622,3 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0,40 (metanol/base de Hunig 99:1, teores de volume).
Os compostos, que são produzidos em conformidade com as instruções de síntese do Exemplo 5, encontram-se na seguinte Tabela 6.
EXEMPLO 6: Síntese de 4-(7,8-dimetoxi-3-etil-3fí- pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo
Dissolve-se 4- (7, 8-dimetoxi-3i7-pirazolo [3,4-c] quinolin-1-il)-benzonitrilo (132 mq, 400 pmoles) em N,N- dimetilformamida (5 mL). Em sequida, junta-se carbonato de potássio (111 mq, 800 pmoles) e iodeto de etilo (37 pL, 440 pmoles) . A mistura de reação é aqitada durante 3 h à temperatura ambiente. Em sequida, deita-se em áqua (100 mL) e extrai-se duas vezes com éster de etilo do ácido acético (100 mL de cada vez) . Lava-se as fases orqânicas reunidas uma vez com áqua (50 mL) , seca-se com Na2S04, aspira-se e concentra-se o filtrado no vácuo até ao estado seco. O resíduo é sujeito a cromatografia através de sílica gel flash (gradiente de solventes n-heptano/0-100% de vol. de éster de etilo do ácido acético/etanol 0-30% de vol.). Após a concentração das frações do produto, dissolve-se num pouco de tetra-hidrofurano e mistura-se com 2-propanol (5 mL) e concentra-se. O precipitado originado é aspirado e seco sob elevado vácuo, obtendo-se o composto de título 4-(7, 8-dimetoxi-3-etil-3i7-pirazolo [3,4-c]quinolin-l-il) -benzonitrilo (49 mg, 136 mmoles) como sólido com um ponto de fusão de 227,4°C. MS: 359, 0 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0,51 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume). Os compostos, que são produzidos em conformidade com as instruções de síntese do Exemplo 6, encontram-se na seguinte Tabela 7.
EXEMPLO 7A: Síntese de 4-(7,8-dimetoxi-3fí-pirazolo[3,ί ο] quinolin-l-il)-2-pirrolidinobenzonitrilo
Dissolve-se 2-bromo-4- (7, 8-dimetoxi-3íZ-pirazolo [3, ί ο] quinolin-l-il)-benzonitrilo (90 mg, 220 ymoles) em N,N-dimetilformamida (3,0 mL). Em seguida, junta-se pirrolidina (1,0 mL, 12,1 mmoles) e carbonato de potássio (61 mg, 440 ymoles). A mistura de reação é aquecida durante 20 min nos 180°C (micro-ondas). Com vista ao processamento final, extrai-se com éster de etilo do ácido acético e solução semissaturada de sal de cozinha. A fase orgânica é seca com Na2SC>4, é aspirada e é concentrada no vácuo até ao estado seco. O resíduo é purificado por cromatografia (pHPLC, gradiente de solventes água/1-30% de vol. de acetonitrilo, 0,1% de vol. de ácido fórmico), ocorrendo a precipitação de 4 - (7, 8-dimetoxi-3i7-pirazolo [3,4-c] quinolin-l-il) -2- pirrolidinobenzonitrilo (23 mg, 58 pmoles) como sólido com um ponto de fusão de 291°C (decomposição). MS: 400,2 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0,41 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume). EXEMPLO 7B: Síntese de 4-(7, 8-dimetoxi-3-metil-3i7- pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-2-metoximetilbenzonitrilo
Sob uma atmosfera de gás protetor de árgon, dissolve-se 2-bromo-4-(7,8-dimetoxi-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo (540 mg, 1,32 mmoles) em N,N-dimetilformamida (4,0 mL). Em seguida, junta-se fosfato de tripotássio (578 mg, 2,64 mmoles), KOH (67 mg, 1,19 mmoles), 1,2- dimetoxietano (9,0 mL) e água (50 pL) , éster de pinacol do ácido vinilborónico (942 pL, 5,28 mmoles) e dicloreto de trans-bis-(triciclo-hexilfosfano)-paládio-(II) (98 mg, 132 pmoles). Aquece-se a suspensão obtida durante 30 min para os 150°C (micro-ondas). Com vista ao processamento final, extrai-se com éster de etilo do ácido acético e solução semissaturada de sal de cozinha. A fase orgânica é seca com Na2S04, é aspirada e é concentrada no vácuo até ao estado seco. O resíduo é purificado por sílica gel flash (gradiente de solventes ciclo-hexano/0-80% de vol. de éster de etilo do ácido acético) , ocorrendo a precipitação de 4-(7, 8-dimetoxi-3íí-pirazolo [3,4-c] quinolin-l-il) -2-vinilbenzonitrilo (247 mg, 693 pmoles) como sólido. MS: 357,2 (M+H+) , DC (HPTLC): Rf = 0,47 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume).
Dissolve-se 4-(7,8-dimetoxi-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il) -2-vinilbenzonitrilo (247 mg, 693 pmoles) em N,N-dimetilformamida (1,5 mL), tetra-hidrofurano (6,0 mL) e etanol (9,0 mL) e arrefece-se para os (-)78°C. Em seguida, a solução de reação é tratada com ozono (fluxo de oxigénio do gerador de ozono: 50 L/h) durante 4 min, depois faz-se passar nitrogénio (2 min) . Após controlo de LC-MS (intermediário aldeído) , junta-se NaBH4 (24 mg, 624 pmoles) e agita-se a mistura de reação durante 20 min nos (-)78°C. Em seguida, remove-se o banho frio, ocorrendo o aquecimento da solução de reação para a temperatura ambiente. Com vista à purificação, extrai-se com éster de etilo do ácido acético e solução semissaturada de sal de cozinha. A fase orgânica é seca com Na2S04, é aspirada e é concentrada no vácuo nos 40°C até ao estado seco. O resíduo é purificado por cromatografia (pHPLC, gradiente de solventes água/ 1-30% de vol. de acetonitrilo, 0,1% de vol. de ácido fórmico) e liofiliza-se as frações de produto, ocorrendo a precipitação de 4-(7,8-dimetoxi-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-1-il)-2-hidroximetilbenzonitrilo (46 mg, 128 pmoles) como sólido. MS: 361,4 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0,38 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume).
Sob árgon, dissolve-se 4-(7, 8-dimetoxi-3i7-pirazolo [3, ίο] quinolin-l-il)-2-hidroximetilbenzonitrilo (78 mg, 216 pmoles) em N,N-dimetilformamida (1,0 mL) e adiciona-se em seguida iodeto de metilo (34 pL, 541 pmoles) e carbonato de potássio (60 mg, 433 pmoles). Agita-se a suspensão durante 1 h à temperatura ambiente. Com vista ao acabamento final, extrai-se com éster de etilo do ácido acético e solução de sal de cozinha semissaturada. Seca-se a fase orgânica com Na2S04, aspira-se e concentra-se no vácuo até ao estado seco. O resíduo é purificado por cromatografia (pHPLC, gradiente de solventes água/1-30% de vol. de acetonitrilo, 0,1% de vol. de ácido fórmico) e liofiliza-se as frações de produto, ocorrendo a precipitação de 4-(7,8-dimetoxi-3-metil-3i7-pirazolo [3,4-c]quinolin-l-il) -2-hidroximetilbenzonitrilo (41 mg, 110 pmoles) na forma de um sólido. MS: 375,2 (M+H+) .
Sob árgon, dissolve-se 4-(7,8-dimetoxi-3-metil-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-2-hidroximetilbenzonitrilo (17 mg, 44 pmoles) em Ν,Ν-dimetilformamida (2,1 mL) e adiciona-se em seguida iodeto de metilo (8,2 pL, 131 pmoles) e hidreto de sódio (a 95%, 2,4 mg, 96 pmoles).
Agita-se a solução de reação durante 2 h nos 0°C. Após a adição de um pouco de água, extrai-se para acabamento final com éster de etilo do ácido acético e solução de sal de cozinha semissaturada. Seca-se a fase orgânica com Na2SC>4, aspira-se e concentra-se no vácuo nos 40°C até ao estado seco. 0 residuo é sujeito a cromatografia (pHPLC, gradiente de solventes água/1-30% de vol. de acetonitrilo, 0,1% de vol. de ácido fórmico) e liofiliza-se as frações do produto, ocorrendo a precipitação de 4-(7,8-dimetoxi-3-metil-3i7-pirazolo [3,4-c] quinolin-l-il) -2-metoximetil-benzonitrilo (4 mg, 10,3 pmoles) na forma de um sólido incolor. MS: 389, 2 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0,41 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume).
Os compostos, que foram produzidos em conformidade com as instruções de síntese do Exemplo 7A e do 7B, encontram-se na seguinte Tabela 8.
EXEMPLO 8: Síntese de 1-[4-(4-etilpiperazin-l-il)-fenil]- 7,8-dimetoxi-3-metil-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolina
Dissolve-se l-bromo-7, 8-dimetoxi-3-metil-3íí-pirazolo [3, ίο] quinolina (30 mq, 93 pmoles) sob árqon em dioxano (1,0 mL). Em sequida, junta-se KOH (5,2 mq, 93 pmoles), éster de terc.-butilo do ácido 4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-fenil]-piperazino-l-carboxílico (83 mq, 214 pmoles), dicloreto de trans-bis-(triciclo-hexilfosfano)-paládio-(II) (10,4 mg, 14 pmoles) e água (50 pL) . Aquece-se em seguida a suspensão de reação durante 90 min para os 110°C (micro-ondas) . Em seguida, deita-se em água, agita-se durante 15 min e aspira-se o precipitado obtido. Trata-se depois o resíduo de filtração durante 18 h à temperatura ambiente em ácido fórmico (2,5 mL) , em seguida dilui-se com água e extrai-se duas vezes com éster de etilo do ácido acético. Lava-se as fases orgânicas reunidas com água, seca-se com Na2S04, aspira-se e concentra-se no vácuo até ao estado seco. O resíduo é purificado por cromatografia (pHPLC, gradiente de solventes água/1-30% de vol. de acetonitrilo, 0,1% de vol. de ácido fórmico) e liofiliza-se as frações de produto, ocorrendo a precipitação de 7,8-dimetoxi-3-metil-l-(4-piperazin-l-il)-fenil)-3fí-pirazolo[3,4- c]quinolina (22 mg, 55 pmoles) como sólido. MS: 404, 1 (M+H+) . DC (HPTLC) : Rf = 0,19 (metanol/base de Hunig de 99:1, teores de volume). A 7,8-dimetoxi-3-metil-l-(4-piperazin-l-il) -fenil)-3H- pirazolo[3,4-c]quinolina (28 mg, 70 pmoles), adiciona-se em Ν,Ν-dimetilformamida anidra (3,0 mL) carbonato de potássio (19 mg, 136 pmoles) e iodeto de etilo (6 pL, 74 pmoles) à temperatura ambiente. Em seguida agita-se a mistura de reação durante 18 h à temperatura ambiente. Após terminada a reação, deita-se em água e extrai-se duas vezes com éster de etilo do ácido acético. As fases orgânicas reunidas são secas com Na2SC>4, são filtradas e são concentradas no vácuo até ao estado seco. O resíduo é liofilizado a partir de água/acetonitrilo, obtendo-se o composto de título 1—[4— (4 — etilpiperazin-l-il)-fenil]-7,8-dimetoxi-3-metil-3H-pirazolo[3,4-c]quinolina (6,6 mg, 15,3 mmoles) como sólido. MS: 432,2 (M+H+) . DC (HPTLC): Rf = 0,35 (metanol/base de
Hunig 99:1, teores de volume).
Os compostos, que são produzidos de acordo com as instruções de síntese do Exemplo 8, encontram-se na seguinte Tabela 9.
Os compostos das Fórmulas estruturais abaixo referidas (Tab. 9a) podem ser produzidos pelo método de acordo com as instruções de síntese do Exemplo 8 - começando com o composto com a Fórmula 3-2.
0 composto da Fórmula estrutural abaixo indicada (Tab. 9b) pode ser produzido pelo método de acordo com as instruções de síntese dos Exemplos 1, 8 e 9 - começando com o composto com a Fórmula 3-2.
EXEMPLO 9: Síntese de 3-fluoro-4-(7-metoxi-3-metil-8- quinolin-3-il-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo
Dissolve-se 3-fluoro-4- (8-hidroxi-7-metoxi-3-metil-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo (192 mg, 550 gmoles), N-feniltrifluorometanossulfonimida (393 mg, 1,10 mmoles) e base de Hunig (374 gL, 2,20 mmoles) em N,N-dimetilformamida (22 mL) . Em seguida, agita-se durante 30 min à temperatura ambiente. Com vista ao acabamento, deita-se em água (100 mL) e agita-se durante mais 30 min. Em seguida, aspira-se o precipitado originado e lava-se depois com água. Suspende-se depois o bolo de filtração num pouco de 2-propanol, aspira-se de novo e seca-se sob elevado vácuo durante a noite à temperatura ambiente, obtendo-se o éster de [ 1-(4-ciano-2-fluorofenil)-7-metoxi-3-metil-3i7-pirazolo[3,4-c]quinolin-8-ilo] do ácido trifluorometanossulfónico (195 mg, 406 gmoles) como um sólido. MS: 481,0 (M+H+) , DC (HPTLC) : Rf = 0,56 (éster de etilo do ácido acético/etanol 2:1, teores de volume).
Dissolve-se o éster de [1-(4-ciano-2-fluorofenil)-7-metoxi-3-metil-3i7-pirazolo [3,4-c] quinolin-8-ilo] do ácido trifluorometanossulfónico (64 mg, 133 gmoles), 3-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-quinolina (272 mg, 1,07 mmoles), fosfato de tripotássio (58 mg, 267 gmoles) e dicloreto de trans-his-(triciclo-hexilfosfano)-paládio (II) (30 mg, 41 gmoles) em Ν,Ν-dimetilformamida isenta de oxigénio (3, 9 mL) . Em seguida, aquece-se durante 90 min para os 130°C (micro-ondas). Em seguida, aspira-se a mistura de reação, dilui-se o filtrado com água e agita-se durante 30 min à temperatura ambiente. Aspira-se o precipitado originado e lava-se depois com água. Dissolve-se o resíduo numa mistura de sulfóxido de dimetilo e tetra-hidrofurano e sujeita-se a cromatografia (pHPLC, gradiente de solventes água/1-30% de vol. de acetonitrilo, 0,1% de vol. de ácido fórmico), obtendo-se, após a liofilização, o composto de titulo 3-fluoro-4-(7-metoxi-3-metil-8-quinolin-3-il-3fí-pirazolo[3,4-c]quinolin-l-il)-benzonitrilo (28 mg, 61 pmoles) como liofilizado. MS: 460, 1 (M+H+) , DC (HPTLC) :
Rf = 0,32 (éster de etilo do ácido acético/etanol 8:1, teores de volume).
Os compostos, que foram produzidos de acordo com as instruções de síntese do Exemplo 9, encontram-se na seguinte Tabela 10.
EXEMPLO 10: DNA-PK/Ensaio bioquímico O ensaio da cinase foi realizado com placas flash de microtítulo de 348 poços revestidas com estreptavidina. Para isso, incubou-se 1,5 pg de complexo proteico de DNA-PK e 100 ng de substrato biotinilado, como, por exemplo, PESQEAFADLWKK-biotina-NH2 ("Biotin-DNA-PK-Peptid"), num volume total de 36,5 pL (34,25 mM HEPES/KOH; 7,85 mM Tris-HC1; 68,5 mM KC1; 5 μΜ ATP; 6,85 mM MgCl2; 0,5 mM EDTA; 0,14 mM EGTA; 0,69 mM DTT; pH de 7,4) com 500 ng de ADN de timo de vitela, 0,1 45 pCi 33P-ATP e 1,8% DMSO por poço com ou sem o composto de teste, durante 90 min à temperatura ambiente. Interrompeu-se a reação com 50 pL/poço de EDTA 200 mM. Após a incubação durante mais 30 min à temperatura ambiente, removeu-se o líquido. Lavou-se cada poço três vezes com 100 pL de solução a 0,9% de sal de cozinha. Determinou-se uma reação inespecífica (valor em branco) com 10 μΜ de um inibidor de cinase próprio. Realizou-se a medição da reatividade com um TopCount. Calculou-se os valores IC5o em RS1. Literatura: Kashishian et al. (2003)
Molecular Cancer Therapeutics 1257. EXEMPLO 11: Fosforilação da DNA-PK celular na serina 2056
Fez-se a cultura de células HCT116 em meio alfa MEM com soro bovino fetal a 10%, piruvato de sódio 1 mM e glutamina 2 mM nos 37°C e C02 a 10%. Soltou-se as células com tripsina/EDTA do fundo do recipiente de cultura, centrifugou-se em frascos de centrifugação e deitou-se em meio fresco. Em seguida, determinou-se a densidade celular. Colocou-se 200.000 células em 1 mL de meio de cultura por cavidade de uma placa de cultura de células de 12 poços e deixou-se em cultura durante a noite. No dia seguinte, juntou-se bleomicina 10 pM e substâncias de teste em meio de cultura fresco às células e deixou-se estas em cultura durante mais seis horas. Em seguida ocorreu uma lise celular. Analisou-se o lisado celular por eletroforese de gel de poliacrilamida-SDS por meio de anticorpo especifico de DNA-PK (Abeam abl3852: DNA-PK total; abl8192: fosfo-serina 2056 DNA-PK) e Western Blotting. A reação enzimática progrediu com um reagente de quimioluminescência. A quimioluminescência foi registada com um sistema de documentação (VersaDoc™, Bio-Rad, EUA) e foi avaliada por densitometria com o software especifico do equipamento (Quantity One) . Os sinais com anticorpos específicos de fosfo-DNA-PK foram normalizados para o sinal com o anticorpo contra a proteína total DNA-PK. Determinou-se os valores IC50 e os dados de inibição percentuais por meio de referenciamento relativamente ao nível de sinal do grupo de controlo de veículo tratado com bleomicina. EXEMPLO 12: Teste do crescimento das colónias celulares
Fez-se a cultura da linha de células de carcinoma colorretal HCT116 em meio alfa MEM com 10% de soro bovino fetal, piruvato de sódio 1 mM e glutamina 2 mM nos 37 °C e CO2 a 10%. Soltou-se as células com tripsina/EDTA do fundo do recipiente de cultura, centrifugou-se em tubos de centrifugação e deitou-se em meio fresco. Determinou-se em seguida a densidade celular. Colocou-se 300 células em 2 mL de meio de cultura em placas de cultura de células de 6 poços e deixou-se em cultura durante a noite. No dia seguinte, tratou-se as células com substâncias de teste durante uma hora, antes de se ter tratado as placas de cultura de células como doses definidas de raios X (normalmente 0, 2.4, 4.8, 12 Gray; equipamento de radiação: Faxitron RX-650; Faxitron X-Ray LLC, EUA) . Para determinar as relações de eficácia de dosagem, tratou-se as células com diferentes concentrações de uma substância de teste. Após a radiação, deixou-se em cultura durante mais 24 horas na presença da substância de teste, sendo o meio de cultura depois trocado por meio de cultura sem substância de teste e fez-se a cultura das células durante mais 6-8 dias. Depois, corou-se as colónias celulares formadas com violeta de cristal e contou-se num contador de colónias (Gelcount, Oxford Optronics, UK). Determinou-se as curvas de eficácia da dosagem, em particular os valores IC5o, por meio da aplicação de uma função de ajuste de curva para relações de eficácia da dosagem não lineares.
EXEMPLO 13: Fosforilação da CHK2 celular na treonina 68
Fez-se a cultura de células HCT116 em meio alfa MEM com soro bovino fetal a 10%, piruvato de sódio 1 mM e glutamina 2 mM nos 37°C e CO2 a 10%. Soltou-se as células com tripsina/EDTA do fundo do recipiente de cultura, centrifugou-se em tubos de centrifugação e deitou-se em meio fresco. Determinou-se em seguida a densidade celular. Colocou-se 50.000 células em 0,1 mL de meio de cultura por cavidade de uma placa de cultura de células de 96 poços e deixou-se em cultura durante a noite. No dia seguinte, juntou-se bleomicina 10 μΜ e substâncias de teste em meio de cultura fresco âs células e fez-se a cultura das mesmas durante mais seis horas. Após a lise das células, ocorreu a deteção de fosfo-treonina 68 da cinase CHK2 nos lisados, com um sistema de deteção ELISA especifico da fosfo-CHK2 (Thr68) (ref. do catálogo 7037, cell Signaling Technologies, EUA) . Mediu-se a reação colorimétrica ELISA por espetrofotometria nos 450 nm. A extinção dos controlos não estimulados (controlo de veiculo sem bleomicina) foi subtraída aos valores de extinção dos grupos de tratamento. Os controlos, que foram tratados com bleomicina, foram igualados a 100% e todos os outros valores de extinção foram postos em relação com isso. Determinou-se os valores IC50 com o programa de estatística GraphPad Prism (GraphPad Software, EUA) ou Assay Explorer (Symyx Technologies Inc., EUA) .
EXEMPLO 14: Preparações farmacêuticas Exemplo A: Ampolas injetáveis
Ajusta-se uma solução de 100 g da substância ativa de acordo com a invenção e de 5 g de hidrogenofosfato dissódico em 3 L de água destilada duas vezes com ácido clorídrico 2 N, para um pH de 6,8, filtra-se de forma estéril, deita-se em ampolas injetáveis, liofiliza-se sob condições estéreis e fecha-se de forma estéril. Cada ampola injetável contém 5 mg da substância ativa de acordo com a invenção.
Exemplo B: Supositórios
Funde-se uma mistura de 20 g da substância ativa de acordo com a invenção com 100 g de lecitina de soja e 1400 g de manteiga de cacau, verte-se para moldes e deixa-se arrefecer. Cada supositório continha 20 mg da substância ativa de acordo com a invenção.
Exemplo C: Solução
Preparou-se uma solução de 1 g da substância ativa de acordo com a invenção, 9,38 g de NafhPCg * 2H2O, 28,48 g de Na2HP04 * 12H20 e 0,1 g de cloreto de benzalcónio em 940 mL de água destilada duas vezes. Ajusta-se o valor de pH para 6,8, enche-se até 1 L e esteriliza-se por irradiação. Foi possível utilizar esta solução na forma de gotas oftálmicas.
Exemplo D: Pomada
Misturou-se 500 mg da substância ativa de acordo com a invenção com 99,5 g de vaselina sob condições asséticas.
Exemplo E: Comprimidos
Uma mistura de 1 kg da substância ativa de acordo com a invenção, 4 kg de lactose, 1,2 kg de amido de batata, 0,2 kg de talco e 0,1 kg de estearato de magnésio foi comprimida de forma usual em comprimidos, passando cada comprimido a conter 10 mg da substância ativa de acordo com a invenção.
Exemplo F: Drageias
Em analogia com o Exemplo E, comprimiu-se comprimidos, os quais foram cobertos em seguida de forma usual com um revestimento de sacarose, amido de batata, talco, adraganta e corante.
Exemplo G: Cápsulas
Deitou-se 2 kg da substância ativa de acordo com a invenção de forma usual em cápsulas de gelatina dura, passando cada cápsula a conter 20 mg da substância ativa de acordo com a invenção.
Exemplo H: Ampolas
Uma solução de 1 kg da substância ativa de acordo com a invenção em 60 L de água destilada duas vezes foi filtrada de forma estéril, foi deitada em ampolas, foi liofilizada sob condições estéreis e fechada de modo estéril. Cada ampola continha 10 mg da substância ativa de acordo com a invenção.
Exemplo I: Pulverizador de inalação
Dissolveu-se 14 g da substância ativa de acordo com a invenção em 10 L de solução isotónica de NaCl e deitou-se a solução em recipientes de pulverização comerciais com mecanismo de bomba. A solução poderá ser pulverizada na boca ou no nariz. Um jato de pulverização (cerca de 0,1 mL) correspondia a uma dose de cerca de 0,14 mg.
Lisboa, 21 de Janeiro de 2015

Claims (14)

  1. REIVINDICAÇÕES 1. Compostos com a Fórmula (I)
    (D em que Rl significa Y, -Alk-OY, -Alk-NYY ou -Alk-Ar, R2 significa Y, -Alk-OY, -Alk-NYY, -C (Y) (R6) (R7) , -C (Hal) (R6) (R7), -S02A, -S02-Ar ou -POOH-Ar, R3 significa H, Hal, CN, -Alk-CN, -Alk-NYY, Het1 ou Het2, R4 significa Hal, Y, Cyc, CN, -Alk-CN, -Alk-COOY, -Alk-CO-NYY ou Het1, R5 significa Hal, Y, ΟΥ, NYY, -NY-COY, COOY, -CO-NYY, -CO-NY-Alk-OY, -Alk-CO-NYY, -Alk-OY, -Alk-NYY, Ar, Het1 ou Het2, R3, R5 significam em conjunto também -Alk-CO-NY-, R6 significa Hal, Y, -COOY, -CO-NYY, -CO-NY-OY, -CO-NY-C (=NH)-NYY, -CO-NY-Alk-OY, -CO-NY-Alk-NYY, -CO-NY-Alk-S02-NYY, -CO-NY-Alk-Ar, -CO-NY-Alk-Het2 ou -CO-NY-O-Alk-CN, R7 significa Ar, Het1 ou -Het1-Het1, X significa CH2, O, S ou Het1, Y significa H ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com Ι-ΙΟ átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1- 7 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou, de forma independente entre si, um ou dois grupo CH2 adjacentes podem estar substituídos por um grupo CH=CH- e/ou -CEC-, Alk significa alquileno com 1-6 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-4 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou OY, Cyc significa alquilo cíclico com 3-7 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1-4 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou OY, Ar significa fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal, A, CN, OY, NYY, -NY-COY, COOY, Het1, Het1, -Alk-OY, -Alk-NYY, -Alk-Het1 ou Alk-Het1, Het1 significa heteroarilo monocíclico ou bicíclico com 2- 9 átomos de C e 1-4 átomos de N, de 0 e/ou de S, não substituído ou que pode estar monossubstituído por Hal, A, CN, OY, NYY, -NY-COY, COOY, -Alk-OY ou -Alk-NYY, Het1 significa um heterociclo saturado monocíclico com 2-7 átomos de C e 1-4 átomos de N, de 0 e/ou de S, que pode não estar substituído ou pode estar monossubstituído por A, e Hal significa F, Cl, Br ou I, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações. 1 Compostos de acordo com a reivindicação 1 com a Fórmula parcial (IA)
    (ΙΑ) em que Rl, R4 significam Y, R2 significa Y ou -CH(R6)(R7), R5 significa Hal, Y, COOY, Alk-OA ou Het2, R6 significa -CO-NYY, -CO-NY-OY, -CO-NY-C(=NH)-NYY ou -CO-NY-Alk-OY, R7 significa Ar ou Het1, Y significa H ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com 1-4 átomos de C, em que, de forma independente entre si, 1- 3 átomos de H podem estar substituídos por Hal, Alk significa alquileno com 1-3 átomos de C, em que 1-2 átomos de H podem estar substituídos por Hal e/ou OH, Ar significa fenilo não substituído ou monossubstituído por Hal, Het1 significa heteroarilo monocíclico ou bicíclico com 2- 9 átomos de C e 1-3 átomos de N e/ou de S, não substituído ou que pode estar monossubstituído por Hal, A, CN ou NYY, Het2 significa um heterociclo saturado monocíclico com 3- 5 átomos de C e 1-2 átomos de N e/ou de 0, não substituído ou que pode estar monossubstituído por A, e Hal significa F, Cl, Br ou I, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações.
  2. 3. Compostos de acordo com a reivindicação 1 ou 2, selecionados do grupo:
    e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações.
  3. 4. Compostos intermédios com a Fórmula (II)
    (II) em que R8 significa CN ou =0, e R9 significa NO2 ou NYY, e Rl, R2, R5 e Y apresentam o significado dado na reivindicação 1, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive as respetivas misturas em todas as relações.
  4. 5. Compostos intermédios de acordo com a reivindicação 4 com a Fórmula parcial (IIA)
    (HA) em que Rl, R2 significam de forma independente entre si A ou -Alk-Ar, e Alk significa alquileno com 1-3 átomos de C, em que 1-2 átomos de H podem estar substituídos por Hal, e R5, A, Ar e Hal apresentam o significado dado na reivindicação 2, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive as respetivas misturas em todas as relações.
  5. 6. Compostos intermédios com a Fórmula (III)
    (III) em que RIO significa H ou Hal, e Rl, R2, R4 e Hal apresentam o significado indicado na reivindicação 1, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive as suas misturas em todas as relações.
  6. 7. Compostos intermédios de acordo com a reivindicação 6, em que Rl, R2 significam, de forma independente entre si, A ou -Alk-Ar, RIO significa Hal, e Alk significa alquileno com 1-3 átomos de C, em que 1-2 átomos de H podem estar substituídos por Hal, e R4, A, Ar e Hal apresentam o significado indicado na reivindicação 2, e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as suas misturas em todas as relações.
  7. 8. Processo para a produção dos compostos com a Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, as suas fórmulas parciais e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, com as seguintes etapas: (a) transformação de um composto com a Fórmula parcial (I IA)
    (ΜΑ) em que Rl, R2 e R5 apresentam o significado dado na reivindicação 5, no meio ácido com um redutor e com um composto E-NO2, em que E significa um elemento do l.° grupo principal, obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IB)
    (IB) em que Rl, R2 e R5 apresentam o significado indicado na reivindicação 5, e eventualmente (b') transformação dos compostos com a Fórmula parcial (IB) com um composto Hal-R4, em que R4 e Hal apresentam o significado dado na reivindicação 1, obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IC)
    (1C) em que Rl, R2 e R5 apresentam o significado indicado na reivindicação 5, e R4 apresenta o significado indicado na reivindicação 1, (b") transformação de Rl, -0-R2, R4, R5 e/ou do grupo CN dos compostos com a Fórmula parcial (IC), obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IE)
    (IE) em que Rl, R2, R3, R4, R5 e X apresentam o significado dado na reivindicação 1, e/ou (b"') transformação de uma base ou de um ácido dos compostos com a Fórmula parcial (IE) ou as Fórmulas parciais (IB) ou (IC) num dos seus sais fisiologicamente inócuos, ou (a) transformação de um composto com a Fórmula (III)
    (111) em que Rl, R2, R4 e RIO apresentam o significado dado na reivindicação 7, com um composto com a Fórmula (IV)
    (IV) em que D significa ácido bórico, éster de boro, composto de estanho orgânico ou trifluorometanossulfonato de boro, e R3 e R5 apresentam o significado dado na reivindicação 1, obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (ID)
    (ID) em que Rl, R2 e R4 apresentam o significado dado na reivindicação 7, e R3 e R5 apresentam o significado dado na reivindicação 1, e eventualmente (b') transformação de Rl, -0-R2, R3, R4 e/ou R5 dos compostos com a Fórmula parcial (ID), obtendo-se os compostos com a Fórmula (I)
    (I) em que Rl, R2, R3, R4, R5 e X apresentam o significado dado na reivindicação 1, e/ou (b") transformação de uma base ou de um ácido dos compostos com a Fórmula (I) ou com a Fórmula parcial (ID) num dos seus sais fisiologicamente inócuos.
  8. 9. Processo para a produção de compostos intermédios com a Fórmula (II) de acordo com a reivindicação 4, e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, com as seguintes etapas: (a) transformação de um composto com a Fórmula (V) (V) em que Hal significa F, Cl, Br ou I, e Rl, R2 e R9 apresentam o significado dado na reivindicação 4, com um composto com a Fórmula (VI)
    (VI) em que R5 e R8 apresentam o significado dado na reivindicação 4, mediante obtenção dos compostos com a Fórmula (II)
    (II) em que Rl, R2, R5, R8 e R9 apresentam o significado indicado na reivindicação, e eventualmente (b) transformação de uma base ou de um ácido dos compostos com a Fórmula (II) num dos respetivos sais.
  9. 10. Processo para a produção de compostos intermédios com a Fórmula (III) de acordo com a reivindicação 6, as suas fórmulas parciais e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, com as seguintes etapas: a) Transformação de um composto com a Fórmula (VII)
    (VII) em que Rl e R2 apresentam o significado indicado na reivindicação 6, no meio ácido com um composto E-NO2, em que E significa um elemento do l.° grupo principal, obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IIIA)
    (IMA) em que Rl e R2 apresentam o significado indicado na reivindicação 6 e, eventualmente, (b' ) halogenação dos compostos com a Fórmula parcial (IIIB) (IIIA) , obtendo-se os compostos com a Fórmula parcial (IIIB)
    em que Rl, R2 e Hal apresentam o significado dado na reivindicação 6, (b") transformação dos compostos com a Fórmula (IIIA) ou (IIIB) com um composto Hal-R4, em que R4 e Hal apresentam o significado indicado na reivindicação 6, obtendo-se os compostos com a Fórmula (III)
    (III) em que Rl, R2, R4 e RIO apresentam o significado dado na reivindicação 6, e/ou (b"') transformação de uma base ou de um ácido dos compostos com a Fórmula (III) num dos respetivos sais.
  10. 11. Utilização dos compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 3 e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, na produção de um medicamento para a inibição de serina-treonina proteína cinases, preferencialmente da PIKK, com particular preferência da DNA-PK.
  11. 12. Utilização de pelo menos um composto de acordo com uma das reivindicações 1 a 3 e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, na sensibilização de células cancerígenas relativamente a meios oncológicos e/ou a radiação ionizante, na condição de que a sensibilização in vivo não ocorra no corpo humano ou animal.
  12. 13. Medicamento compreendendo pelo menos um composto de acordo com uma das reivindicações 1 a 3 e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações.
  13. 14. Composição farmacêutica compreendendo, como substância ativa, uma quantidade eficaz de pelo menos um composto de acordo com uma das reivindicações 1 a 3 e/ou dos seus sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, em conjunto com substâncias auxiliares compatíveis a nível farmacêutico, em combinação com pelo menos um meio anticancerígeno.
  14. 15. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 3 e/ou os respetivos sais, tautómeros e/ou estereoisómeros fisiologicamente inócuos, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, com vista a ser empregues na profilaxia, na terapia e/ou no controlo da evolução de cancro, tumores, metástases e/ou distúrbios de angiogénese, em combinação com radioterapia e/ou pelo menos um meio anticancerigeno. Lisboa, 21 de Janeiro de 2015
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