PT1951659E - Antagonistas do receptor do glucagon, preparação e utilizações terapêuticas - Google Patents

Description

ΡΕ1951659 1 DESCRIÇÃO "ANTAGONISTAS DO RECEPTOR DO GLUCAGON, PREPARAÇAO E UTILIZAÇÕES TERAPÊUTICAS"

Este Pedido de Patente reivindica vantagem sobre o Pedido de Patente Provisório dos Estados Unidos N.° 60/737 979 apresentado a 18 de Novembro de 2005.

Esta invenção relaciona-se com compostos que são antagonistas ou agonistas inversos do receptor do glucagon, e com suas composições farmacêuticas, e com as utilizações destes compostos e composições no tratamento do organismo humano ou animal. Os presentes compostos apresentam uma alta afinidade e fixação selectiva para o receptor do glucagon, e como tal são úteis no tratamento de perturbações que respondem à modulação dos receptores do glucagon, tais como as perturbações diabéticas e outras metabólicas relacionadas com o glucagon, e semelhantes. O glucagon é um agente hormonal chave que, em cooperação com a insulina, media a regulação homeostática da quantidade de glucose no sangue. O glucagon actua principalmente estimulando certas células (importantes de entre estas são as células do figado) para libertarem glucose quando os niveis de glucose no sangue caem. A acção do glucagon é oposta à da insulina, que estimula células 2 ΡΕ1951659 para tomarem e armazenarem glucose sempre que o nivel de glucose no sangue sobe. Tanto o glucagon como a insulina são hormonas péptidos. 0 glucagon é produzido nas células alfa dos ilhéus do pâncreas e a insulina é produzida nas células beta dos ilhéus. 0 glucagon exerce a sua acção fixando-se e activando o seu receptor, o qual é um membro do ramo Glucagon-Secretina da familia de receptores acoplados à proteína G com sete domínios transmembranares. 0 receptor funciona activando o sistema de segundo mensageiro adenilil-ciclase resultando num aumento nos níveis da cAMP. 0 receptor do glucagon, ou variantes do receptor que ocorram naturalmente, podem possuir actividade constitutiva intrínseca, in vitro, bem como in vivo (isto é, actividade na ausência de um agonista). Os compostos que actuem como agonistas inversos podem inibir esta actividade. A diabetes mellitus é uma perturbação comum do metabolismo da glucose. A doença é caracterizada por hiperglicemia e pode ser classificada como diabetes do tipo 1, a forma insulino-dependente, ou diabetes do tipo 2, que não é insulino-dependente por natureza. Os sujeitos com diabetes do tipo 1 são hiperglicémicos e hipoinsulinémicos, e o tratamento convencional para esta forma da doença é o fornecimento de insulina. No entanto, em alguns pacientes com diabetes do tipo 1 ou do tipo 2, níveis de glucagon absoluta ou relativamente elevados têm mostrado contribuírem para o estado hiperglicémico. Tanto em animais de controlo saudáveis como em modelos animais da diabetes do tipo 1 e do tipo 2, a remoção do glucagon circulante com anticorpos selectivos e específicos tem resultado na redução do nível glicémico. Ratinhos com uma delecção homo- 3 ΡΕ1951659 zigótica do receptor de glucagon apresentam uma tolerância aumentada à glucose. Da mesma forma, a inibição da expressão do receptor do glucagon utilizando oligonucleótidos anti-sentido melhora a sindrome diabética em ratinhos db/db. Estes estudos sugerem que a supressão do glucagon ou uma acção que antagonize o glucagon poderá ser um adjunto útil para o tratamento convencional da hiperglicemia em pacientes diabéticos. A acção do glucagon pode ser suprimida fornecendo um antagonista ou um agonista inverso, isto é, substâncias que inibem ou impedem as respostas constitutivas, ou induzidas pelo glucagon, mediadas pelo receptor do glucagon. Várias publicações divulgam péptidos tidos como actuando como antagonistas. Os antagonistas péptidos de hormonas péptidos são frequentemente potentes; no entanto eles são geralmente conhecidos por não serem disponiveis oralmente devido à degradação por enzimas fisiológicas e fraca distribuição in vivo. Desta forma, são geralmente preferidos antagonistas não péptidos de hormonas péptidos disponiveis oralmente. Têm aparecido em anos recentes um número de publicações relatando agentes não péptidos que actuam no receptor do glucagon. Por exemplo, as WO 03/048109, WO 2004/002480, WO 2004/056763, e Kurukulasuriya et al., "Biaryl amide glucagon receptor antagonists" Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, vol. 14, n.° 9, páginas 2047-2050, 2004, divulgam cada uma compostos não péptidos tendo alegadamente actividade antagonista do receptor do 4 ΡΕ1951659 glucagon. Apesar do número de tratamentos para doenças que envolvem o glucagon, as terapias correntes sofrem de um ou mais inconvenientes, incluindo uma eficácia pobre ou incompleta, efeitos secundários inaceitáveis, e contra-indicações para certas populações de pacientes. Assim, mantém-se uma necessidade de um tratamento melhorado utilizando agentes farmacêuticos alternativos ou melhorados que modulem a actividade do receptor do glucagon e tratem as doenças que possam beneficiar da modulação do receptor do glucagon. A presente invenção proporciona uma tal contribuição para a técnica baseada na descoberta que uma nova classe de compostos tem uma afinidade elevada, actividade inibidora selectiva e potente sobre o receptor do glucagon. A presente invenção é distinta nas estruturas particulares e nas suas actividades.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A representado presente invenção proporciona estruturalmente pela fórmula (I) um composto

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável em que: T é independentemente carbono (substituído com hidrogénio 5 ΡΕ1951659 ou os substituintes opcionais como aqui indicado), ou azoto;

Ri e R2 são independentemente -H ou -halogéneo; R3 é -alquilo(Ci-C8) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -alcenilo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 3 halogéneos); -cicloalquilo (C3-C7) , -alquil (Ci-Cô) -cicloalquilo- (C3-C7) , ou cicloalquil (C3-C7)-alquilo (Ci-Cô) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); r4 e R5 são independentemente -H, -halogéneo, -hidroxilo, hidroximetilo, -CN, -alcoxilo (C1-C7) , -alcenilo (C2-C7) , ou -alquilo (Ch-Cg) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); R6 e 6 ΡΕ1951659 em que a marca em zig-zag mostra o ponto de ligação à molécula parental; R7 e R8 são independentemente -H, -halogéneo, -alquilo (Οχ-Οβ) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -alcoxilo (Ci-C6) , -cicloalquilo (C3-C7) , -C(O)Ri0, -COORio, -OC(0)Rio, -OS(O)2Ri0/ -SRio, -S(0)Rio, -S(0)2RiO/ ou -O-al- cenilo (C2~C7) ;

Rg é independentemente -H, halogéneo, -CN, -cicloalquilo(C3-C7), -C (0)-Rio, -COORio, -OC(0)Rio, -OS(0)2Rio/ “SRio, -S(0)Rio, -S(0)2Rio/ °u -0-al- cenilo (C2 — C7) , -alcoxilo(C1-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alquilo(Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos);

Rio é independentemente em cada ocorrência 7 ΡΕ1951659 -hidrogénio, ou -alquilo(Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); e

Ru é independentemente -H, -alquilo(Ci-Cs) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alcenilo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); no entanto com a condição de que se Ru é -alquilo (Ci-Cs) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alcenilo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) então R3 é a mesma espécie de Ru; ou Ru e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam um anel cicloalquilo tendo cinco carbonos (em que opcionalmente o anel cicloalquilo tendo cinco carbonos pode conter uma ligação dupla). A presente invenção proporciona compostos que são úteis como antagonistas ou agonistas inversos do receptor do glucagon. A presente invenção proporciona ainda compostos que são antagonistas ou agonistas inversos selectivos do receptor do glucagon em relação ao receptor GLP-1. A presente invenção proporciona ainda uma composição farmacêutica que inclui um composto com a fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um veículo, diluente, ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis. A presente invenção proporciona ainda estes compostos e 8 ΡΕ1951659 composições no tratamento de perturbações que respondem à modulação dos receptores do glucagon, tais como as perturbações diabéticas e outras metabólicas relacionadas com o glucagon.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Numa forma de realização, a presente invenção proporciona compostos com a fórmula (I) como descrito aqui em detalhe. Embora todos os compostos da presente invenção sejam úteis, alguns dos compostos são particularmente interessantes e são preferidos. A seguinte listagem evidencia vários grupos de compostos preferidos. Será entendido que cada uma das listagens pode ser combinada com outras listagens para criar grupos adicionais de compostos preferidos como aqui indicado.

Numa outra forma de realização a invenção proporciona um composto com a fórmula (I) em que T é independentemente carbono (substituído com hidrogénio ou os substituintes opcionais como aqui indicado), ou azoto;

Ri e R2 são -H; R3 é -alquilo(Ci-C8) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), 9 ΡΕ1951659 -alcenilo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); -cicloalquilo (C3-C6) , -alquil (Ci-C6) -cicloalquilo (C3-C6) , ou -cicloal-quil (C3-C6)-alquilo (Οχ-Οδ) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); R4 e R5 são independentemente -H, -halogéneo, ou -alquilo (Οχ-Οβ) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos);

Re é

em que a marca em zig-zag mostra o ponto de ligação à molécula parental; R7 e Rg são independentemente -H, -halogéneo, -alquilo(C1-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -alcoxilo (C1-C3) ; 10 ΡΕ1951659 R9 é independentemente -H, halogéneo, ou -alquilo (Ci-Cô) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); e

Ru é independentemente -H, -alquilo(Ci-C8) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alcenilo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); no entanto com a condição de que se Ru é -alquilo (C1-C8) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alcenilo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) então R3 é a mesma espécie de Ru; ou Ru e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam um anel cicloalquilo tendo cinco carbonos (em que opcionalmente o anel cicloalquilo tendo cinco carbonos pode conter uma ligação dupla).

Numa outra forma de realização a invenção proporciona um composto com a fórmula (I) em que Ri e R2 são -Η; T é carbono: R3 é -alquilo(Ci-Cs) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), 11 ΡΕ1951659 -alcenilo(C2-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); -cicloalquilo (C3-C6) , -alquil (C1-C6) -cicloalquilo (C3-C6) , ou -cicloalquil (C3-C6) -alquilo (Ci-Ce) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); R4 e R5 são independentemente -H, -halogéneo, ou -CH3 (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos);

Re é

em que a marca em zig-zag mostra o ponto de ligação à molécula parental; R7 e Rs são independentemente -H, ou -halogéneo; e R9 é independentemente -alquilo (CR-Ce) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); e 12 ΡΕ1951659

Rn é independentemente -H, -alquilo(Ci-C8) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alcenilo(C2-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) ; no entanto com a condição de que se Rn é -alquilo (C2-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alcenilo(C2-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) então R3 é a mesma espécie de Rn; ou Rn e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam um anel cicloalquilo tendo cinco carbonos (em que opcionalmente o anel cicloalquilo tendo cinco carbonos pode conter uma ligação dupla).

Numa outra forma de realização a invenção proporciona um composto com a fórmula (I) em que T é independentemente carbono (substituído com hidrogénio ou os substituintes opcionais como aqui indicado);

Ri e R2 são -H; R3 é -alquilo(C1-C8) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -cicloalquilo (C3-Ce) , ΡΕ1951659 13 -alquil (Ci-Ce) -cicloalquilo (C3-C6) , ou -cicloalquil (C3-C6) -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); R4 e R5 são -CH3 (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) e cada um ocupa uma posição adjacente a R6 no anel fenilo ao qual Rê está ligado; R6 é

em que a marca em zig-zag mostra o ponto de ligação à molécula parental; R7 e R8 são -H; e R9 é independentemente -alquilo (Ci-Ce) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) ; e Ru é -H.

Numa outra forma de realização a invenção proporciona um composto com a fórmula (I) em que Ri e R2 são independentemente hidrogénio ou halogéneo; R3 é metilo, etilo, propilo, 2-propenilo, isopropilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, 3,3-dimetilbutilo, 2-metilpropilo, 3-metil-butilo, terc-butilo, 4-metilpentilo, 2,2-dimetil-propilo, 3-trifluoropropilo, 4-trifluorobutilo, ciclopro-pilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ou ciclo-hexilo; R4 e R5 14 ΡΕ1951659 são independentemente hidrogénio, metilo, etilo, terc-butilo, ciclo-hexilo, pentilo, isopropoxilo, cloreto, fluo-reto, brometo, hidoxilo, trifluorometilo, -CN, metoxilo, hidroximetilo, 4-metilpentiloxilo, ou pentiloxilo; R7 e Rs são independentemente hidrogénio, fluoreto, cloreto, metilo, etilo, pentilo, isopropilo, terc-butilo, trifluoro-metilo, acetilo, 2-metilpropilp, metoxilo, ciclo-hexilo, ou trifluorometoxilo; Rg é hidrogénio, brometo, fluoreto, metilo, terc-butilo, trifluorometilo, ou isopropilo; Rn é -H, metilo, etilo, propilo, ou 2-propenilo, (com a condição de que quando Rn é metilo, etilo, propilo, ou 2-propenilo, então R3 é a mesma espécie de Rn) , ou Rn e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam ciclopentilo, ou ciclopent-3-enilo. São proporcionadas outras formas de realização da invenção em que cada uma das formas de realização aqui descritas acima é adicionalmente limitada como descrito nas preferências seguintes. Especificamente, cada uma das preferências abaixo está combinada independentemente com cada uma das formas de realização acima, e a combinação particular proporciona outra forma de realização na qual a variável indicada na preferência é limitada de acordo com a preferência.

Preferencialmente T é azoto. Preferencialmente T é carbono (substituído com hidrogénio ou os substituintes opcionais como aqui indicado). Preferencialmente T é carbono (substituído com hidrogénio). 15 ΡΕ1951659

Preferencialmente Ri é -H. Preferencialmente Ri é flúor. Preferencialmente Ri é cloro. Preferencialmente R2 é -H. Preferencialmente R2 é flúor. Preferencialmente R2 é cloro. Preferencialmente Ri e R2 são -H. Preferencialmente Ri é flúor e R2 é flúor.

Preferencialmente R3 é -alquilo(Ci-Cs) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos). Preferencialmente R3 é etilo, propilo, isopropilo, butilo, terc-butilo, 3-metil-butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, 3,3-dime-tilbutilo, 2-metilpropilo, 4-metilpentilo, 2,2-dimetilpro-pilo, 3,3-trifluoropropilo, ou 4-trifluorbutilo. Preferencialmente R3 é isopropilo, butilo, terc-butilo, 3-metil-butilo, pentilo, 3,3-dimetilbutilo, 2-metilpropilo, 4-metilpentilo, 2,2-dimetilpropilo, 3,3,3-trifluoropropilo, ou 4,4,4-trifluorobutilo. Preferencialmente R3 é isopropilo, 3-metil-butilo, trifluoropropilo, ou 4,4,4-trifluorobutilo.

Preferencialmente R3 é -alcenilo(C2-C7) . Preferencialmente R3 é -alcenilo (C2-C3) . Preferencialmente R3 é 2-propenilo. Preferencialmente R3 é -cicloalquilo(C3-C7). Preferencialmente R3 é ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopen-tilo, ou ciclo-hexilo. Preferencialmente R3 é ciclopropilo. Preferencialmente R3 é ciclobutilo. Preferencialmente R3 é ciclopentilo. Preferencialmente R3 é ciclo-hexilo.

Preferencialmente R3 é -alquil (Ci-C6) -cicloalquilo (C3-C7) . Preferencialmente R3 é -alquil (Ci-C3) -cicloalquilo (C3-C6) . Preferencialmente R3 é -alquil (C1-C3) -ciclopro- 16 ΡΕ1951659 pilo. Preferencialmente R3 é -alquil(C1-C3)-ciclobutilo. Preferencialmente R3 é -alquil(C1-C3)-ciclopentilo. Prefere-cialmente R3 é -alquil (C1-C3)-ciclo-hexilo .

Preferencialmente R3 é -cicloalquil(C3-C7)-alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos). Preferencialmente R3 é -ciclopropil-alquilo(Ci-Ce) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos). Preferencialmente R3 é -ciclobutil-alquilo(C1-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) . Preferencialmente R3 é -ci-clopentil-alquilo(Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos). Preferencialmente R3 é -ciclo-hexil-alqui-lo (C1-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos).

Preferencialmente R4 é -H, -halogéneo, -hidro-xilo, hidroximetilo, ou -alquilo (Ci-Cõ) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos). Preferencialmente R4 é -H, -halogéneo, ou -alquilo(C1-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) . Preferencialmente R4 é -H, -halogéneo, ou -CH3. Preferencialmente R4 é -H. Preferencialmente R4 é flúor, cloro, ou bromo. Preferencialmente R4 é -ch3.

Preferencialmente R5 é -H, -halogéneo, -hidro-xilo, hidroximetilo, ou -alquilo(C1-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos). Preferencialmente R5 é -H, -halogéneo, ou -alquilo(C1-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos). Preferencialmente R5 é -H, -halogéneo, ou —CH3. Preferencialmente R5 é -H. Preferencialmente R5 é flúor, cloro, ou bromo. Preferencialmente R5 é -CH3. 17 ΡΕ1951659

Preferencialmente R4 e R5 são -H. Preferencialmente R4 é halogéneo e R5 é -H. Preferencialmente R4 é -H e Rs é -CH3. Preferencialmente R4 e R5 são -CH3. Preferencialmente R4 e R5 são -CH3 e cada um ocupa uma posição adjacente a R6 no anel fenilo ao qual R6 está ligado.

Preferencialmente R7 é -halogéneo, -alquilo (Οχ-Οε) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -alco-xilo (Ci-C6) , -cicloalquilo (C3-C7) , -C(0)R4o, -COOR10, -0C (0)-

Rio, -OS (0)2^10/ -SRio, -S(0)Rio, -S(0)2Rio/ ou -0-alcenilo(C2-C7) . Preferencialmente R7 é -halogéneo, -alquilo (0χ-0ε) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) , ou -al-coxilo (Οχ-Οε) . Preferencialmente R7 é -H ou -halogéneo. Preferencialmente R7 é -H.

Preferencialmente Rs é -halogéneo, -alquilo(0χ-0ε) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) , -alcoxi-lo (0χ-0ε) , -cicloalquilo (C3-C7) , -C(0)Rxo, -COOR10, -OC(O)Rx0, -OS(0)2Rio, -SRio, -S(O)Rx0, -S(O)2R10, ou -0-alcenilo (C2-C7) .

Preferencialmente R8 é -halogéneo, -alquilo (Οχ-Οε) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alcoxilo(Οχ-Οε) . Preferencialmente Rs é -H ou -halogéneo. Preferencialmente Rs é -H. Preferencialmente R7 é -H e Re é -H.

Preferencialmente R9 é -alquilo(Οχ-Οε) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos). Preferencialmente R9 é metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, terc-buti-lo, trifluorometilo, 3-metil-butilo, pentilo, hexilo, 3,3- 18 ΡΕ1951659 dimetilbutilo, 2-metilpropilo, 4-metilpentilo, 2,2-dimetil-propilo, 3-trifluoropropilo, ou 4-trifluorobutilo. Preferencialmente Rg é isopropilo, terc-butilo, ou trifluoro-metilo.

Preferencialmente R7 é -H e R3 é -H, e Rg é isopropilo, terc-butilo, ou trifluorometilo.

Preferencialmente Rio é independentemente em cada ocorrência -alquilo(Ci-Cê) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos).

Preferencialmente Rn é -H. Preferencialmente Rn é -alquilo (Ci-Cg) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alcenilo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) ; com a condição de que se Rn é -alquilo(C2~C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alcenilo(Ci-C8) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), então R3 é a mesma espécie de Rn. Preferencialmente Rn e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam um anel cicloalquilo tendo cinco carbonos (em que opcionalmente o anel cicloalquilo tendo cinco carbonos pode conter uma ligação dupla). Preferencialmente Rn é -H, metilo, etilo, propilo, ou 2-propenilo, (com a condição de que quando Rn é metilo, etilo, propilo, ou 2-propenilo, então R3 é a mesma espécie de Rn) . Preferencialmente Rn e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam ciclopentilo, ou ciclopent-3-enilo. 19 ΡΕ1951659

Formas de realização adicionais da invenção incluem os compostos com as fórmulas XI a X22. Uma forma de realização adicional da invenção é quaisquer novas preparações de intermediários aqui descritas que sejam úteis para preparar os antagonistas ou agonistas inversos do receptor do glucagon com as fórmulas (I), ou XI a X22.

Quadro 1 Número da Fórmula Estrutura XI ϊ I X2 jLp f rl i 11 íj^°H } % X3 X4 F%JL X~JL X5 1 o | 20 ΡΕ1951659 (continuação)

Número da Fórmula Estrutura X6 JLf F'^j] I o o X7 F F X8 F F F 9 ? X9 o X# o 1Σ o X X10 7γ^ r o o Xll /S^jj 0 o Jl ^ J J H 21 ΡΕ1951659 (continuação) Número da Fórmula Estrutura X12 9 0 N^^QH XI3 9 0 ιτχκ^π F F XI4 /y% S 9 o XI5 F F mCl _9 _ ? LI H XI 6 F F F |Ã f ? L JL Λ 11 h 22 ΡΕ1951659 (continuação)

Número da Fórmula Estrutura X17 '?dÒL0 XI8 F F 1 ? 9 XI9 p f ΛΑ; | 0 0 X2 0 X21 fí tp^°« nJ10-Jv> X22 F F ori 1 si rnr^oH F-j-F F

Devido à sua interacção com o receptor do 23 ΡΕ1951659 glucagon, os compostos presentes são úteis no tratamento de uma larga gama de condições e perturbações nas quais uma interacção com o receptor do glucagon é benéfica. Estas perturbações e condições são aqui definidas como "perturbações diabéticas e outras metabólicas relacionadas com o glucagon". Um perito na técnica é capaz de identificar "perturbações diabéticas e outras metabólicas relacionadas com o glucagon" pelo envolvimento da sinalização mediada pelo receptor do glucagon tanto na patofisiologia da perturbação, como na resposta homeostática à perturbação. Assim, os compostos podem encontrar utilidade por exemplo para prevenir, tratar, ou aliviar, doenças ou condições ou sintomas associados ou sequelas, do sistema endocrinológico, do sistema nervoso central, do sistema nervoso periférico, do sistema cardiovascular, do sistema pulmonar, e do sistema gastrointestinal, ao mesmo tempo que reduzem e ou eliminam um ou mais dos efeitos secundários indesejados associados aos tratamentos correntes. "Perturbações diabéticas e outras metabólicas relacionadas com o glucagon" incluem, mas não estão limitadas a, diabetes, diabetes do tipo 1, diabetes do tipo 2, hiperglicemia, hiperinsulinemia, paragem das células beta, melhoria da função das células beta pelo restauro da resposta de primeira fase, hiperglicemia prandial, prevenção da apoptose, anomalia da glicemia em jejum (AGJ), sindrome metabólico, hipoglicemia, hiper-/hipocalemia, normalização dos niveis de glucagon, melhoria da razão LDL/HDL, redução do petiscar, perturbações da alimentação, perda de peso, sindrome do ovário 24 ΡΕ1951659 policístico (SOP), obesidade como consequência da diabetes, diabetes auto-imune latente em adultos (LADA), insulite, transplante de ilhéus, diabetes pediátrica, diabetes gesta-cional, complicações tardias da diabetes, micro-/macro-albuminúria, nefropatia, retinopatia, neuropatia, úlceras diabéticas dos pés, mobilidade intestinal reduzida devida à administração de glucagon, síndrome do intestino curto, antidiarreico, aumento da secreção gástrica, fluxo sanguíneo diminuído, disfunção eréctil, glaucoma, tensão pós-cirúrgica, melhoria da lesão nos tecidos dos órgãos causada por reperfusão do fluxo sanguíneo após isquemia, lesão cardíaca isquémica, insuficiência cardíaca, insuficiência cardíaca congestiva, acidente vascular cerebral, enfarte do miocárdio, arritmia, morte prematura, anti-apoptose, cura de ferimentos, tolerância diminuída à glucose (IGT), sín-dromes de resistência à insulina, síndrome X, hiperlipi-demia, dislipidemia, hipertrigliceridemia, hiperlipopro-teinemia, hipercolesterolemia, arteriosclerose incluindo aterosclerose, glucagonomas, pancreatite aguda, doenças cardiovasculares, hipertensão, hipertrofia cardíaca, perturbações gastrointestinais, obesidade, diabetes como consequência da obesidade, dislipidemia diabética, etc.

Adicionalmente, a presente invenção proporciona um composto com a fórmula (I), ou um seu sal farmaceu-ticamente aceitável, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto com a fórmula (I), ou um seu sal farma-ceuticamente aceitável, e um veículo, diluente, ou exci-piente farmaceuticamente aceitável; para utilização na 25 ΡΕ1951659 inibição do receptor do glucagon; para utilização na inibição de uma resposta celular mediada pelo receptor do glucagon num mamifero; para utilização na redução do nivel glicémico num mamifero; para utilização no tratamento de uma doença resultante de glucagon excessivo; para utilização no tratamento de perturbações diabéticas e outras metabólicas relacionadas com o glucagon num mamifero, e para utilização no tratamento da diabetes, obesidade, hi-perglicemia, aterosclerose, doença cardíaca isquémica, acidente vascular cerebral, neuropatia, e cura de ferimentos. Assim, a presente invenção abrange a administração profiláctica e terapêutica de um composto com a fórmula (I). A presente invenção proporciona ainda a utilização de um composto com a fórmula (I), ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para tratar uma doença resultante de glucagon excessivo; para o fabrico de um medicamento para tratar perturbações diabéticas e outras metabólicas relacionadas com o glucagon num mamífero; e para o fabrico de um medicamento para prevenir ou tratar a diabetes, obesidade, hipergli-cemia, aterosclerose, doença cardíaca isquémica, acidente vascular cerebral, neuropatia, e cura inadequada de ferimentos . ou excipiente farmaceuticamente

Adicionalmente, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica que inclui um composto com a fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um veículo, diluente, ΡΕ1951659 aceitável; adaptada para utilização na inibição do receptor do glucagon; adaptada para utilização na inibição das respostas celulares mediadas pelo receptor do glucagon; adaptada para utilização na redução do nivel glicémico num mamífero; adaptada para utilização no tratamento de perturbações diabéticas e outras metabólicas relacionadas com o glucagon num mamífero; e adaptada para utilização na prevenção ou tratamento da diabetes, obesidade, hiperglice-mia, aterosclerose, doença cardíaca isquémica, acidente vascular cerebral, neuropatia, e cura de ferimentos. 0 composto ou sal da presente invenção proporciona ainda um agente de diagnóstico para identificar pacientes tendo um defeito no receptor do glucagon, como terapia para aumentar as secreções ácidas gástricas, e para inverter a hipomobilidade intestinal devida à administração de glucagon. A invenção também proporciona um método para o tratamento de perturbações ou doenças, em que é benéfica uma acção antagonística do glucagon, incluindo o método a administração a um sujeito com necessidade disso de uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a invenção. Noutra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de um medicamento para o tratamento de quaisquer condições ou doenças mediadas pelo glucagon. Noutra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de um medicamento para o tratamento da hiper-glicemia. Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de 27 ΡΕ1951659 um medicamento para baixar a glucose sanguínea num mamifero. Os presentes compostos são eficazes a baixar a glucose sanguínea, tanto no estádio de jejum como pós-prandial. Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento da IGT. Numa outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento da diabetes do tipo 2. Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de uma composição farmacêutica para o retardamento ou prevenção da progressão da IGT para a diabetes do tipo 2. Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de uma composição farmacêutica para o retardamento ou prevenção da progressão da diabetes do tipo 2 não necessitando de insulina para a diabetes do tipo 2 necessitando de insulina. Numa outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento da diabetes do tipo 1. Um tal tratamento é normalmente acompanhado pela terapia com insulina. Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento da obesidade. Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de perturbações do metabolismo dos lípidos. Numa ainda outra forma de 28 ΡΕ1951659 realização da invenção, os presentes compostos são utilizados para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de uma perturbação da regulação do apetite ou do dispêndio de energia. Numa forma de realização adicional da invenção, o tratamento de um paciente com os presentes compostos é combinada com dieta e/ou exercício.

Num aspecto adicional da invenção os presentes compostos são administrados em combinação com uma ou mais substâncias activas adicionais em quaisquer proporções adequadas. Tais substâncias activas adicionais podem, por exemplo, ser seleccionadas a partir de agentes antidia-béticos, antiobesidade, agentes anti-hipertensivos, agentes para o tratamento de complicações resultantes de ou associados à diabetes e agentes para o tratamento de complicações e perturbações resultantes de ou associadas à obesidade. A listagem seguinte evidencia vários grupos de combinações. Será entendido que cada um dos agentes nomeados pode ser combinado com outros agentes nomeados para criar combinações adicionais.

Assim, numa forma de realização adicional da invenção, os presentes compostos podem ser administrados em combinação com um ou mais antidiabéticos.

Os agentes antidiabéticos adequados incluem insulina, análogos da insulina e derivados tais como os divulgados na EP 792 290 (Novo Nordisk A/S), por exemplo NeB29-tetradecanoilo des(B30) insulina humana, EP 214 826 e 29 ΡΕ1951659 ΕΡ 705 275 (Novo Nordisk A/S) , por exemplo AspB28 insulina humana, US 5 504 188 (Eli Lilly) , por exemplo LisB28 ProB29 insulina humana, EP 368 187 (Aventis), por exemplo Lantus®, as quais são todas aqui incorporadas como referência, GLP-1 e derivados de GLP-1 tais como os divulgados na WO 98/08871 (Novo Nordisk A/S), que é aqui incorporada como referência, bem como agentes hipoglicémicos oralmente activos.

Os agentes hipoglicémicos oralmente activos incluem preferencialmente imidazolinas, sulfonilureias, biguanidas, meglitinidas, oxadiazolidinodionas, tiazolidi-nodionas, sensibilizadores da insulina, secretagogos da insulina, tais como glimepirida, inibidores da a-gluco-sidase, agentes actuando sobre o canal do potássio dependente de ATP das células β por exemplo abridores do canal de potássio tais como aqueles divulgados nas WO 97/26265, WO 99/03861 e WO 00/37474 (Novo Nordisk A/S) que são aqui incorporadas como referência, ou mitiglinida, ou um bloqueador do canal de potássio, tal como o BTS-67582, nateglinida, antagonistas do glucagon tais como aqueles divulgados nas WO 99/01423 e WO 00/39088 (Novo Nordisk A/S e Agouron Pharmaceuticals, Inc.)/ que são aqui incorporadas como referência, antagonistas do GLP-1, inibidores do DPP-IV (dipeptidil peptidase-IV), inibidores da PTPase (proteína tirosina fosfatase), inibidores de enzimas hepáticas envolvidas na estimulação da gluconeogénese e/ou glicoge-nólise, moduladores da recaptura da glucose, activadores da glucocinase (GK) tais como aqueles divulgados nas WO 00/58293, WO 01/44216, WO 01/83465, WO 01/83478, WO 30 ΡΕ1951659 01/85706, WO 01/85707, e WO 02/08209 (Hoffman-La Roche) ou aqueles divulgados nas WO 03/00262, WO 03/00267 e WO 03/15774 (AstraZeneca), que são aqui incorporadas como referência, inibidores da GSK-3 (glicogénio sintase cinase-3), compostos que modificam o metabolismo dos lipidos tais como agentes antilipidémicos tais como os inibidores HMG CoA (estatinas), compostos que baixem a toma de comida, ligandos PPAR (receptor activado pelo proliferador de peroxissoma) incluindo os subtipos PPAR-alfa, PPAR-gama e PPAR-delta, e agonistas RXR (receptor retinóide X) , tais como os ALRT-268, LG-1268 ou LG-1069.

Noutra forma de realização, os presentes compostos são administrados em combinação com insulina ou um análogo ou derivado da insulina, tais como o NeB29-tetra-decanoil des(B30)insulina humana, AspB28-insulina humana, LisB28ProB29-insulina humana, Lantus®, ou uma preparação em mistura incluindo um ou mais destes.

Numa forma de realização adicional da invenção, os presentes compostos são administrados em combinação com uma sulfonilureia tal como glibenclamida, glipizida, tol-bautamida, cloropamidem, tolazamida, glimeprida, glicazida e gliburida.

Numa outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são administrados em combinação com uma biguanida, por exemplo, metformina. 31 ΡΕ1951659

Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são administrados em combinação com uma meglitinida, por exemplo, repaglinida ou nateglinida.

Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são administrados em combinação com um sensibilizador da insulina de tiazolidinodiona, por exemplo, troglitazona, ciglitazona, piolitazona, rosi-glitazona, isaglitazona, darglitazona, englitazona, CS-011/CI-1037 ou T 174 ou os compostos divulgados nas WO 97/41097, WO 97/41119, WO 97/41120, WO 00/41121 e WO 98/45292 (Dr. Reddy's Research Foundation), que são aqui incorporadas como referência.

Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos podem ser administrados em combinação com um sensibilizador da insulina, por exemplo, tais como os GI 262570, YM-440, MCC-555, JTT-501, AR-H039242, KRP-297, GW-409544, CRE-16336, AR-H049020, LY510929, MBX-102, CLX-0940, GW-501516 ou os compostos divulgados nas WO 99/19313, WO 00/50414, WO 00/63191, WO 00/63192, WO 00/63193 tais como o ragaglitazar (NN 622 ou (-)DRF 2725) (Dr. Reddy's Research Foundation) e nas WO 00/23425, WO 00/23415, WO 00/23451, WO 00/23445, WO 00/23417, WO 00/23416, WO 00/63153, WO 63196, WO 00/63209, WO 00/63190 e WO 00/63189 (Novo Nordisk A/S), que são aqui incorporadas como referência.

Numa forma de realização adicional da invenção 32 ΡΕ1951659 os presentes compostos são administrados em combinação com um inibidor da α-glucosidase, por exemplo, voglibose, emiglitato, miglitol ou acarbose.

Noutra forma de realização da invenção, os presentes compostos são administrados em combinação com um agente actuando sobre o canal de potássio dependente de ATP das células β, por exemplo, tolbutamida, glibenclamida, glipizida, glicazida, BTS-67582 ou repaglinida.

Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos podem ser administrados em combinação com nateglinida.

Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são administrados em combinação com um agente antilipidémico ou um agente anti-hiperlipidémico, por exemplo colestiramina, colestipol, clofibrato, gemfibrozil, lovastatina, pravastatina, simvastatina, pita-vastatina, rosuvastatina, probucol, dextrotiroxina, fenofi-brato ou atorvastina.

Numa ainda outra forma de realização da invenção, os presentes compostos são administrados em combinação com compostos que baixam a tomada de comida.

Noutra forma de realização da invenção, os presentes compostos são administrados em combinação com mais do que um dos acima mencionados compostos, por exemplo em 33 ΡΕ1951659 combinação com metformina e uma sulfonilureia tal como a gliburida; uma sulfonilureia e acarbose; nateglinida e metformina; repaglinida e metformina, acarbose e metformina; uma sulfonilureia, metformina e troglitazona; insulina e uma sulfonilureia; insulina e metformina; insulina, metformina e uma sulfonilureia; insulina e troglitazona; insulina e lovastatina; etc.

Numa outra forma de realização da invenção, os presentes compostos podem ser administrados em combinação com um ou mais agentes antiobesidade ou agentes reguladores do apetite.

Tais agentes podem ser seleccionados a partir do grupo consistindo de agonistas do CART (transcripto regulador da cocaina anfetamina), antagonistas do NPY (neuro-péptido Y) , agonistas da MC4 (melanocortina 4), agonistas da MC3 (melanocortina 3) , antagonistas da orexina, agonistas do TNF (factor de necrose tumoral), agonistas do CRF (factor de libertação da corticotropina), antagonistas da CRF BP (proteína de fixação do factor de libertação da corticotropina), agonistas da urocortina, agonistas adrenérgicos do β3 tais como os CL-316243, AJ-9677, GW-0604, LY362884, LY377267 ou os agonistas do AZ-40140 MSH (hormona estimulante dos melanócitos), antagonistas da MCH (hormona concentradora dos melanócitos), agonistas da CCK (colecistoquinina), inibidores da recaptura da serotonina tais como a fluoxetina, seroxat ou citalopram, inibidores da recaptura da serotonina e noradrenalina, compostos 34 ΡΕ1951659 mistos de serotonina e noradrenérgicos, agonistas da 5HT (serotonina), agonistas da bombesina, antagonistas da galanina, hormona do crescimento, factores de crescimento tais como a prolactina e o lactogéneo placentário, compostos libertadores da hormona do crescimento, agonistas da TRH (hormona libertadora da tireotropina), moduladores da UCP 2 ou 3 (proteina de desacoplamento 2 ou 3) , agonistas da leptina, agonistas DA (bromocriptina, doprexina), inibidores da lipase/amilase, moduladores do PPAR (receptor activado pelo proliferador de peroxissoma), moduladores do RXR (receptor retinóide X) , agonistas TR β, inibidores da AGRP (proteina relacionada a Agouti), antagonistas da his-tamina H3, antagonistas opióides (tais como a naltrexona), exendina-4, GLP-1 e factor neurotrófico ciliar (tal como a axoquina), antagonista do receptor canabinóide por exemplo CB-1 (tal como o rimonabante). Noutra forma de realização o agente antiobesidade é a dexanfetamina ou anfetamina. Noutra forma de realização o agente antiobesidade é a leptina. Noutra forma de realização o agente antiobesidade é fenfluramina ou exfenfluramina. Numa ainda outra forma de realização o agente antiobesidade é a sibutramina. Numa forma de realização adicional o agente antiobesidade é o orlistat. Noutra outra forma de realização o agente antiobesidade é mazindol ou fentermina. Numa ainda outra forma de realização o agente antiobesidade é fendimetra-zina, dietilpropiona, fluoxetina, bupropiona, topiramato ou ecopipam.

Adicionalmente, os presentes compostos podem ser 35 ΡΕ1951659 administrados em combinação com um ou mais agentes anti-hipertensivos. Os exemplos de agentes anti-hipertensivos são os bloqueadores β tais como alprenolol, atenolol, timolol, pindolol, propranolol e metoprolol, inibidores da SCE (enzima conversora da angiotensina) tais como benazepril, captopril, enalapril, fosinopril, lisinopril, quinapril e ramipril, bloqueadores do canal do cálcio tais como a nifedipina, felodipina, nicardipina, isradipina, nimodipina, diltiazem e verapamil, e bloqueadores α tais como a doxazosina, urapidil, prazosina e terazosina. Pode ser feita referência adicional a Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19 Edição, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1995.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com inibidores FAZ.

Os compostos da presente invenção podem também ser administrados em combinação com desacopladores químicos, inibidor da lipase sensível à hormona, imidazolinas, inibidores da ΙΙ-β-hidroxiesteróide de-hidrogenase, acti-vador da lipoproteina lipase, activadores AMPK, fármacos imunossupressores, nicotinamida, ASIS, anti-androgénios ou inibidores da carboxipeptidase.

Deverá ser entendido que qualquer combinação adequada dos compostos de acordo com a invenção com dieta e/ou exercício, um ou mais dos acima mencionados compostos são considerados como estando dentro do objectivo da presente invenção. 36 ΡΕ1951659

Os termos gerais utilizados na descrição dos compostos, composições, e métodos aqui descritos, têm os seus significados usuais. Ao longo do actual requerimento, os termos seguintes têm os significados indicados: "GLP-1" designa péptido 1 semelhante ao glucagon. 0 termo "receptor do glucagon" designa um ou mais receptores que interactuam especificamente com o glucagon para resultar num sinal biológico. 0 termo "receptor do GLP-1" designa um ou mais receptores que interactuam especificamente com o péptido 1 semelhante ao glucagon para resultar num sinal biológico. 0 termo "antagonista do receptor do glucagon" designa um composto da presente invenção com a capacidade para bloquear a produção de cAMP em glucagon resposta. 0 termo "agonista inverso do receptor do glucagon" designa um composto da presente invenção com a capacidade para inibir a actividade constitutiva do receptor do glucagon. 0 termo antagonista ou agonista inverso "selectivo" designa um composto tendo maior afinidade para o receptor do glucagon em comparação com a afinidade para o receptor GLP-1.

Nas fórmulas gerais do presente documento, os termos químicos gerais têm os seus significados usuais. Por exemplo: "Halogéneo" ou "halo" designa fluoreto, cloreto, brometo e iodeto. 37 ΡΕ1951659 0 termo "alquilo", a menos que indicado de outra forma, refere-se àqueles grupos alquilo com um número designado de átomos de carbono com uma configuração tanto de cadeia saturada linear como ramificada. Como aqui se utiliza, "alquilo (C1-C3) " são de um a três átomos de carbono, tais como metilo, etilo, propilo, n-propilo, isopropilo, e semelhantes e suas formas ramificadas ou isoméricas, e opcionalmente podem estar substituídos com um a três halogéneos ou um número designado de substituintes como evidenciado nas formas de realização aqui recitadas. "Alquilo (Ci-Cô) " são um a seis átomos de carbono tais como metilo, etilo, propilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo e terc-butilo, pentilo, isopentilo, hexilo, e semelhantes, e suas formas ramificadas ou isoméricas, e opcionalmente podem estar substituídos com um a três halogéneos ou um número designado de substituintes como evidenciado nas formas de realização aqui recitadas. "Alquilo(Ci-Cs)" são um a oito átomos de carbono, tais como metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, e semelhantes, e suas formas ramificadas ou isoméricas, e opcionalmente podem estar substituídos com um a três halogéneos como evidenciado nas formas de realização aqui recitadas. 0 termo "cicloalquilo(C3-C7)" refere-se a um carbociclo saturado ou parcialmente saturado contendo um ou mais anéis com desde 3 a 7 átomos de carbono. Os exemplos de cicloalquilo(C3-C7) incluem, mas não estão limitados a, 38 ΡΕ1951659 ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo e ciclo-heptilo. 0 termo "alcoxilo(Ci-Cô)" representa um grupo alquilo com um a seis átomos de carbono ligados através de uma ponte de oxigénio, tais como metoxilo, etoxilo, pro-poxilo, isopropoxilo, butoxilo, terc-butoxilo, pentoxilo, e semelhantes. 0 termo "alcoxilo(C1-C7)" representa um grupo alquilo com um a sete átomos de carbono ligados através de uma ponte de oxigénio, tais como metoxilo, etoxilo, propo-xilo, isopropoxilo, butoxilo, terc-butoxilo, pentoxilo, e semelhantes, e pode estar opcionalmente substituído com três halogéneos como evidenciado nas formas de realização aqui recitadas. 0 termo "alcenilo(C2-C7)" designa uma cadeia de hidrocarboneto com dois a sete átomos de carbono quer de cadeia linear como ramificada tendo pelo menos uma dupla ligação carbono-carbono a qual pode ocorrer em qualquer ponto ao longo da cadeia, tal como etenilo, propenilo, bu-tenilo, pentenilo, vinilo, alquilo, 2~butenilo e semelhantes, e opcionalmente pode estar substituído com um a três halogéneos como evidenciado nas formas de realização aqui recitadas. 0 termo "alcenilo(C2-C3)" designa uma cadeia de hidrocarboneto com dois a três átomos de carbono quer de cadeia linear como ramificada tendo pelo menos uma dupla ligação carbono-carbono a qual pode ocorrer em qualquer ponto ao longo da cadeia, tal como etenilo, ou propenilo. 39 ΡΕ1951659 0 termo "substituído opcionalmente", ou "substi-tuintes opcionais", como aqui se utiliza, significa que os grupos em questão estão quer não substituídos quer substituídos com um ou mais dos substituintes especificados. Quando os grupos em questão estão substituídos com mais do que um substituinte, os substituintes podem ser iguais ou diferentes. Além disso, quando se utilizam os termos "independentemente", "são independentemente", e "selec-cionados independentemente a partir de" quer indicar-se que os grupos em questão podem ser iguais ou diferentes. Alguns dos termos aqui definidos podem ocorrer mais do que uma vez nas fórmulas estruturais, e em tal ocorrência cada termo deverá ser definido independentemente dos outros. 0 termo "paciente" inclui animais humanos e não humanos tais como animais de companhia (cães e gatos e semelhantes) e gado~. Gado designa animais criados para a produção de alimentos. Animais ruminantes ou "cud-chewing" tais como vacas, touros, bezerros, novilhos, bois, carneiros, búfalos, bisontes, cabras e antílopes são exemplos de gado. Outros exemplos de gado incluem porcos e aves (aves domésticas) tais como frangos, patos, perus e gansos. Ainda outros exemplos de gado incluem peixe, marisco e crustáceos criados em aquacultura. Também estão incluídos animais exóticos utilizados na produção de alimentos tais como jacarés, búfalos asiáticos e ratites (por exemplo, emas, nandus ou avestruzes) . 0 paciente a ser tratado é preferencialmente um mamífero, em particular um ser humano. 40 ΡΕ1951659 O termo "resposta celular mediada pelo receptor do glucagon" inclui várias respostas das células de mamíferos à estimulação pelo glucagon ou à actividade do receptor do glucagon. Por exemplo, "respostas celulares mediadas pelo receptor do glucagon", inclui, mas não está limitado a, libertação de glucose a partir do figado, ou de outras células, em resposta à estimulação pelo glucagon ou à actividade de receptor do glucagon. Um perito médio na técnica pode facilmente identificar outras respostas celulares mediadas pela actividade do receptor do glucagon, por exemplo observando uma alteração na sensibilidade celular limite após pôr em contacto a célula com uma dose eficaz de glucagon.

Os termos "tratamento" e "tratar", como aqui se utiliza, inclui os seus significados geralmente aceites, isto é, a gestão e os cuidados com um paciente com o propósito de prevenir, proibir, restringir, aliviar, melhorar, abrandar, parar, retardar ou reverter a progressão ou gravidade de uma doença, perturbação, ou condição patológica, aqui descrita, incluindo o acalmar ou alivio de sintomas ou complicações, ou a cura ou eliminação da doença, perturbação ou condição. "Composição" designa uma composição farmacêutica e tem a intenção de abranger um produto farmacêutico incluindo o(s) ingrediente(s) activo(s) incluindo compostos com a fórmula (I), e o(s) ingrediente (s) inerte (s) que constituem o veiculo. Concordantemente, as composições 41 ΡΕ1951659 farmacêuticas da presente invenção abrangem qualquer composição preparada pela mistura de um composto da presente invenção e um veiculo farmaceuticamente aceitável. 0 termo "solvente adequado" refere-se a qualquer solvente, ou mistura de solventes, inerte para a reacção em curso que solubiliza suficientemente os reagentes para proporcionar um meio no qual se efectue a reacção desejada. 0 termo "forma de dosagem unitária" designa unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias para sujeitos humanos e outros animais não humanos, contendo cada unidade uma quantidade pré-determinada de material activo calculada para produzir o desejado efeito terapêutico, em associação com um veiculo farmaceuticamente adequado.

Os compostos da presente invenção podem ser quirais, e é intenção que qualquer enantiómero, quer puro, parcialmente purificado, ou misturas racémicas, estejam incluídas no objectivo da invenção. Adicionalmente, quando uma dupla ligação, ou um sistema em anel completamente ou parcialmente saturado, ou mais do que um centro de assimetria, ou uma ligação com rotatividade restringida está presente, podem ser formados diastereómeros. É intenção que quaisquer diastereómeros, como diastereómeros separados, puros ou parcialmente purificados ou suas misturas, estejam incluídos no objectivo da invenção. Adicionalmente, alguns dos compostos da presente invenção 42 ΡΕ1951659 podem existir em diferentes formas tautoméricas e é intenção que quaisquer formas tautoméricas, que os compostos sejam capazes de formar, estejam incluídas no objectivo da presente invenção. A invenção também inclui tautómeros, enantiómeros e outros estereoisómeros dos compostos com a fórmula (I) . Tais variantes estão contempladas como fazendo parte do objectivo da invenção.

Os compostos com a fórmula (I), quando existirem como mistura diastereomérica, podem ser separados em pares diastereoméricos de enantiómeros por, por exemplo, cristalização fraccionária a partir de um solvente adequado, por exemplo metanol ou acetato de etilo ou uma mistura deles. 0 par de enantiómeros assim obtido pode ser separado nos estereoisómeros individuais por meios convencionais, por exemplo pela utilização de um ácido opticamente activo como reagente resolvente. Alternativamente, qualquer enantiómero de um composto com a fórmula (I) pode ser obtido por síntese estereoespecífica utilizando materiais de partida ou reagentes opticamente puros de configuração conhecida ou através de síntese enantiosselectiva. 0 termo "enriquecimento enantiomérico" como aqui se utiliza, refere-se ao aumento na quantidade de um enantiómero em comparação com o outro. Um método conveniente de expressar o enriquecimento enantiomérico alcançado é o conceito de excesso enantiomérico, ou "ee", que é obtido utilizando a seguinte equação: 43 ΡΕ1951659 Ε1 -Ε2 ee = Λ ΤΧ100 Ε1 + Ε2 em que Ε1 é a quantidade do primeiro enantiómero e E2 é a quantidade do sequndo enantiómero. Assim, se a razão inicial entre os dois enantiómeros é 50:50, tal como está presente numa mistura racémica, e for alcançado um enriquecimento enantiomérico suficiente para produzir uma razão final de 70:30, o ee em relação ao primeiro enantiómero é de 40%. No entanto, se a razão final for de 90:10, o ee em relação ao primeiro enantiómero é 80%. É preferido um ee maior do que 90%, um ee maior do que 95% é

Resolutions. 1981, e E. L. o mais preferido e um ee maior do que 99% é especialmente preferido. 0 enriquecimento enantiomérico é facilmente determinado por um perito médio na técnica utilizando técnicas e procedimentos padronizados, tais como a cromatograf ia em fase gasosa ou em fase líquida de alta eficiência com uma coluna quiral. A escolha da coluna quiral apropriada, eluente e condições necessárias para efectuar a separação do par enantiomérico estão bem ao alcance dos conhecimentos de um perito médio na técnica. Adicionalmente, os estereoisómeros e enantiómeros específicos dos compostos com a fórmula (I), podem ser preparados por um perito médio na técnica utilizando técnicas e processos bem conhecidos, tais como aqueles divulgados por J. Jacques, et al., "Enantiomers, Racemates, and John Wiley and Sons, Inc., 44 ΡΕ1951659

Eliel and S. H. Wilen, "Stereochemistry of Organic Compounds." (Wiley-Interscience 1994), e o Pedido de Patente Europeia N.° EP-A-838448, publicado em 29 de Abril de 1998. Os exemplos de resolução incluem técnicas de recristalização ou cromatografia quiral. A menos que indicado de outra forma, um composto indicado como sendo "isómero 1" será o primeiro isómero eluido da coluna de separação quiral e "isómero 2" será o segundo.

Em geral, o termo "farmacêutico" quando utilizado como adjectivo designa substancialmente não tóxico para organismos vivos. Por exemplo, o termo "sal farmacêutico", como aqui se utiliza, refere-se a sais dos compostos com a fórmula (I), que são substancialmente não tóxicos para organismos vivos. Veja-se, por exemplo, Berge, S. M., Bighley, L. D., and Monkhouse, D. C., "Pharmaceutical Salts," J. Pharm. Sei., 66:1, 1977. A presente invenção também abrange sais farmaceuticamente aceitáveis dos presentes compostos, e a metodologia comum para os preparar é bem conhecida na técnica. Veja-se, por exemplo, P. Stahl, et al., "Handbook Of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use", (VCHA/Wiley-VCH, 2002); Berge, S. M., Bighley, L. D. and Monkhouse, D. C., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sei., 66:1, 1977.

Os compostos com a fórmula (I), podem ser preparados por um perito médio na técnica seguindo uma variedade de procedimentos, alguns dos quais estão ilustrados nos 45 ΡΕ1951659 procedimentos e esquemas evidenciados abaixo. A ordem particular dos passos necessários para produzir os compostos com a fórmula (I) está dependente do composto particular a ser sintetizado, do composto de partida, e das possibilidades relativas das espécies substituídas. Os reagentes ou materiais de partida estão facilmente disponíveis para um perito na técnica, e para a quantidade não disponível comercialmente, são prontamente sintetizados por um perito na técnica seguindo procedimentos padronizados comummente empregues na técnica, conjuntamente com os vários procedimentos e esquemas evidenciados abaixo.

Os seguintes Esquemas, Preparações, Exemplos e Procedimentos são proporcionados para melhor elucidarem a prática da presente invenção e não deverão ser interpretados de qualquer forma como limitando o objectivo dos mesmos. Os peritos na técnica reconhecerão que podem ser efectuadas várias modificações sem haver afastamento do espírito e objectivo da invenção. Todas as publicações mencionadas na especificação são indicativas do nível dos peritos na técnica para os quais esta invenção concerne. 0 tempo óptimo para realizar as reacções dos esquemas, Preparações, Exemplos e Procedimentos pode ser determinado monitorizando a progressão da reacção por via de técnicas cromatográficas convencionais. Além disso, é preferível conduzir as reacções da invenção sob uma atmosfera inerte, tal como, por exemplo, árgon, ou, particular- 46 ΡΕ1951659 mente, azoto. A escolha do solvente não é geralmente crítica, desde que o solvente empregue seja inerte para a reacção em curso e solubilize suficientemente os reagentes para efectuar a reacção desejada. Os compostos são preferencialmente isolados e purificados antes da sua utilização em reacções subsequentes. Alguns compostos podem cristalizar a partir da solução reaccional durante a sua formação e então recolhidos por filtração, ou o solvente reaccional pode ser removido por extracção, evaporação, ou decantação. Os intermediários e produtos finais com a fórmula (I) podem ser adicionalmente purificados, se desejado, por técnicas comuns tais como a recristalização ou cromatografia sobre suportes sólidos tais como o gel de sílica ou alumina. 0 perito compreenderá que nem todos os substi-tuintes são compatíveis com todas as condições reaccionais. Estes compostos podem ser protegidos ou modificados num ponto conveniente da síntese por métodos bem conhecidos na técnica.

Os termos e abreviaturas utilizados nos actuais Esquemas, Preparações, Exemplos e Procedimentos têm os seus normais significados, a menos que designado de outra forma. Por exemplo, como aqui se utiliza, os seguintes termos têm os significados indicados: "min" refere-se a minutos; "h" ou "hr" refere-se a horas; "TLC" refere-se a cromatografia em camada fina; "HPLC" refere-se a cromatografia líquida de alta eficiência; "Rf" refere-se a factor de retenção; "Rt" 47 ΡΕ1951659 refere-se a tempo de retenção; "δ" refere-se a parte por milhão para campo inferior a partir de tetrametilsilano; "MS" refere-se a espectroscopia de massa; "MS(ES)" refere-se a espectroscopia de massa com electronebulização; "UV" refere-se a espectrometria de ultra-violetas; "RMN de 1H" refere-se a espectrometria por ressonância magnética nuclear de protões. Adicionalmente, "RT" refere-se a temperatura ambiente; "DEAD" refere-se a dietilazodicarbo-xilato; "PPhs" refere-se a trifenilfosfina; "ADDP" refere-se a 1, 1' -(azodicarbonil)dipiperidina; "PBU3" refere-se a tributilfosfina; "OTF" refere-se a triflato; "LAH" refere-se a hidreto de alumínio e lítio; "DIBAL-H" refere-se a hidreto de di-isobutilalumínio; "KOtBu" refere-se a t-butóxido de potássio; "THF" refere-se a tetra-hidrofurano; "TBP" refere-se a tributilfosfina; "EDCl" refere-se a cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiamida; "DMAP" refere-se a dimetilaminopiridina; "HNMe(OMe)" refere-se a N,N-dimetil-hidroxiamina; "CDMT" refere-se a 2-cloro-4,6-dimetoxi-[1,3,5]triazina; "NMM" refere-se a N-metilmorfolina; "DCM" refere-se a diclorometano; "DMSO" refere-se a dimetilsulfóxido; "ET3N" refere-se a trietil-amina; "DMF" refere-se a dimetilformamida; "Et" numa fórmula refere-se a etilo, por exemplo Et20 refere-se a éter dietílico, e EtOAc refere-se a acetato de etilo; "PyBOP" refere-se a hexafluorofosfato de bromo-tris-pirrolidino-fosfónio; "Me" refere-se a metilo como em MeOH que é metanol; "Pd/C" refere-se a paládio em carbono a 10%. 48 ΡΕ1951659 A menos que indicado de outra forma, isómero 1 refere-se ao primeiro isómero a ser eluido numa separação quiral e isómero 2 refere-se ao segundo isómero a ser eluido numa separação quiral.

ESQUEMAS GERAIS A totalidade dos compostos da presente invenção pode ser preparada quimicamente, por exemplo, seguindo as vias de sintese evidenciadas nos Esquemas e/ou nas Preparações e Exemplos abaixo. No entanto, a discussão seguinte não está intencionada como limitadora do objectivo da presente invenção em qualquer forma. Por exemplo, os passos de sintese específicos para cada uma das vias descritas podem ser combinados de várias formas, ou em conjunção com passos de esquemas diferentes, para preparar compostos adicionais com a fórmula (I).

Esquema I

No Esquema I, Passo A, um 4-halofenol com a fórmula (1), (X = I ou Br) é acoplado com um ácido fenilborónico com a fórmula (2), utilizando uma reacção de 49 ΡΕ1951659

Suzuki para proporcionar o hidróxido de bifenilo com a fórmula (3). Será reconhecido por um perito na técnica que tais acoplamentos de Suzuki utilizando brometos de arilo e ácidos fenilborónicos pode ser efectuada utilizando uma larga variedade de condições reaccionais. As condições preferidas utilizam (oxidi-2,1-fenileno)bis(difenilfosfina) na presença de acetato de paládio(II) e fluoreto de potássio, num solvente inerte, tal como tetra-hidrofurano. A mistura reaccional é aquecida a uma temperatura de 50 °C à temperatura de refluxo do solvente durante cerca de 4 a 48 horas sob azoto. O produto pode ser purificado por cromatografia sobre gel de silica seguida de recristali-zação a partir de isopropanol/heptano.

Um outro conjunto de condições preferidas utiliza tetraquis(trifenilfosfina)paládio com fluoreto de potássio sob azoto. A reacção procede num solvente inerte tal como tolueno ou benzeno misturado com água, ou tolueno misturado com etanol, a uma temperatura de 40 °C à temperatura de refluxo da mistura reaccional durante cerca de 4 a 48 horas.

Ainda um outro conjunto de condições preferidas realiza o acoplamento de Suzuki com acetato de paládio(II) na presença de carbonato de potássio em água como solvente. A reacção prossegue a de 0 °C a 80 °C durante 4 a 24 horas e é deixada aberta para a atmosfera. ΡΕ1951659 50

Esquema II ch3ch2o2ç

Passo A (4)

Passo B

B r

H0 Λ ~ R1 (g)Rl1 R3

R4 (3)

No Esquema II, Passo A, um éster do ácido fenil-acético com a fórmula (4) é dialquilado para formar um éster do ácido fenilacético di-substituído com a fórmula (5), (em que Rn = R3) . O éster não substituído é tratado com dois equivalentes de uma base forte tal como hidreto de sódio, hidreto de potássio, di-isopropilamida de litio ou terc-butóxido de potássio na presença de um éter de coroa. 51 ΡΕ1951659

Outras bases potenciais incluem bis (trimetilsilil)amida de litio, sódio ou potássio. As condições preferidas são hi-dreto de sódio num solvente inerte tal como dimetilfor-mamida ou 1-metilpirrolidinona e seguida de alquilação com dois equivalentes de um halogeneto de alquilo (R3X) Tal como brometo de alilo, iodometano, iodoetano ou semelhantes. A reacção é realizada a uma temperatura de 0 °C até à temperatura ambiente durante cerca de 1 a 24 horas.

No Esquema II, Passo B, o éster di-substituído com a fórmula (5) é reduzido para um álcool com a fórmula (6) . São bem conhecidos dos peritos na técnica numerosos métodos para reduzir ésteres carboxilicos para álcoois e podem ser encontrados no texto de R. C. Larock em "Comprehensive Organic Transformations", VCH Publishers, 1989, p. 549 - 551. 0 método preferido é a redução com hidreto de di-isobutilaluminio num solvente inerte tal como diclorometano. A reacção é realizada a de 0 °C à temperatura ambiente durante de 30 minutos a 24 horas. A mistura reaccional é trabalhada com uma solução de ácido tartárico e extraída utilizando técnicas conhecidas na técnica, seguida de purificação utilizando cromatografia sobre gel de sílica.

No Esquema II, Passo C, um álcool com a fórmula (6) é acoplado numa reacção de Mitsinobu com um fenol com a fórmula (3) (em que R6 = Ph(R7) (R8) (R9) ) , para dar um éter com a fórmula (7) . São utilizados sistemas redox comuns, conhecidos dos peritos na técnica, tais como azodi-carboxilato de dietilo (DEAD) /trifenilfosfina, Ν,Ν,Ν',Ν'- 52 ΡΕ1951659 tetrametilazodicarboxamida (TMAD)/tributilfosfina ou 1,1'-(azodicarbonil)dipiperidina (ADDP)/tributilfosfina, para efectuar a transformação. As condições preferidas utilizam (ADDP)/trifenilfosfina, ou alternativamente (ADDP)/tribu-tilfosfina, num solvente inerte a de 0 °C até 100 °C durante de 2 a 24 horas. O produto é isolado por técnicas comuns aos peritos na técnica tais como cromatografia sobre gel de silica.

No Esquema II, Passo D, o brometo de fenilo com a fórmula (7) é carbonilado para formar um ácido benzóico com a fórmula (11) . O brometo de fenilo é tratado com dois equivalentes de terc-butil-litio a uma temperatura de -80 °C a -70 °C num solvente inerte tal como tetra-hidro-furano. O litiato de fenilo resultante é tratado com dióxido de carbono gasoso e deixado amornar até à temperatura ambiente. A mistura reaccional é trabalhada utilizando técnicas comuns para um perito na técnica, tais como a paragem da reacção com ácido e extracção com acetato de etilo, seguida de cromatografia sobre gel de silica.

No Esquema II, Passo E, um brometo de hidroxi-etilfenilo com a fórmula (6) é carbonilado para um ácido benzóico com a fórmula (8). O brometo de hidroxietilfenilo é tratado sequencialmente, a de -80 °C a -70 °C, com um equivalente de n-butil-litio e dois equivalentes de terc-butil-litio. O dianião é tratado com dióxido de carbono gasoso e deixado amornar até a temperatura ambiente. O isolamento é efectuado por paragem com ácido e extracção para um solvente orgânico, tal como acetato de etilo. A 53 ΡΕ1951659 purificação é realizada sobre uma coluna em fase inversa Cl8 .

No Esquema II, Passo F, um ácido benzóico com a fórmula (8) é convertido num éster metilico do ácido benzóico com a fórmula (9). As condições preferidas utilizam uma base inorgânica, tal como carbonato de potássio ou carbonato de césio num solvente inerte tal como dimetil-formamida com iodometano. A reacção é realizada a de 0 °C até 50 °C durante de 2 a 24 horas. O produto é isolado e purificado por técnicas extractivas e cromatográficas comuns.

No Esquema II, Passo G, um éster metilico do ácido hidroxietilbenzóico com a fórmula (9) é acoplado numa reacção de Mitsinobu para um fenol com a fórmula (3), para dar um éter com a fórmula (10), utilizando condições similares àquelas descritas para o Esquema II, Passo C, acima.

No Esquema II, Passo H, um éster metilico do ácido benzóico com a fórmula (10) é hidrolisado para formar um ácido benzóico com a fórmula (11). O éster é hidrolisado num solvente solúvel em água apropriado tal como etanol, metanol, dioxano, ou tetra-hidrofurano, sendo preferido o tetra-hidrofurano. O éster é tratado com uma base inorgânica tal como hidróxido de potássio, sódio ou litio, sendo preferido o hidróxido de litio, da temperatura ambiente à temperatura de refluxo do solvente durante de 2 a 48 horas. O ácido benzóico com a fórmula (11) é isolado 54 ΡΕ1951659 por neutralização com ácido clorídrico seguida de técnicas extractivas comuns.

Esquema III

No Esquema III, Passo A, um dialilo com a fórmula (10a) (Rn = R3 = alilo) é ciclizado numa reacção de metátese de fecho do anel para um ciclopenteno com a fórmula (12). 0 dialilo é tratado com um catalisador de Grubbs tal como 1,3-bis-(2,4,6-trimetilfenil)-2imidazolidinili-deno)dicloro(fenilmetileno)-(triciclo-hexilfosfina)ruténio num solvente inerte tal como diclorometano a de 0 °C até 50 °C durante de 30 minutos a 12 horas. O éster com a fórmula (12) é então hidrolisado como descrito no Esquema II, Passo H, para a fórmula (10).

Esquema IV

55 ΡΕ1951659

No Esquema IV, Passo A, o ácido benzóico com a fórmula (11) é acilado para dar a amida com a fórmula (14). Será reconhecido por um perito na técnica que há numerosas condições para a formação da ligação amida entre um ácido carboxilico e uma amina. Tais métodos podem ser encontrados no texto de R. C. Larock em "Comprehensive Organic Transf ormations", VCH Publishers, 1989, p, 972 - 976. As condições preferidas utilizam hidrato de 1-hidroxibenzo-triazole (HOBt), cloridrato de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodi-imida (EDC1) e uma base orgânica tal como di-isopropiletilamina ou trietilamina num solvente inerte tal como diclorometano, dimetilformamida, ou tetra-hidrofurano. 0 éster activo é tratado com uma amina com a fórmula (13) a de 0 °C até 50 °C, mas preferencialmente à temperatura ambiente, durante cerca de 4 a 48 horas.

Esquema V

No Esquema V, Passo A, um dialilo com a fórmula (16) ou ciclopenteno com a fórmula (18) é reduzido para um dipropilo com a fórmula (17) ou um ciclopentano com a fórmula (19). As ligações olefinicas são reduzidas 56 ΡΕ1951659 utilizando paládio em carbono a 5% ou 10% num solvente tal como acetato de etilo, tetra-hidrofurano, metanol ou etanol, sendo preferido o etanol. A mistura é colocada sob hidrogénio gasoso à pressão de 1 atm durante 4 a 24 horas. O produto reaccional em bruto é filtrado através de Celite® para remover o catalisador. O éster com a fórmula (17) é então hidrolisado para um ácido carboxilico como descrito no Esquema IV, Passo B para a fórmula (14).

Esquema V O. R2

Passo A H0.

PassoC H(20)

RI R2 R2 . π \ Passo B Ο. ccw^r: —- M_>~cosch3 R3MgX R3 M5' R3 «R (21) R1 (22) R1

No Esquema V, Passo A, um éster metilico do ácido 4-formil-benzóico com a fórmula (20) é feito reagir com um reagente de Grignard (RsMgX onde X = Cl ou Br) para dar um álcool secundário com a fórmula (21).

No Esquema V, Passo B, um álcool secundário com a fórmula (21) é oxidado para uma cetona com a fórmula (22) . Há numerosos métodos para oxidar álcoois secundários os 57 ΡΕ1951659 quais são reconhecidos por um perito na técnica. Tais métodos incluem, mas não estão limitados a, permanganato de potássio, óxido de manganésio(IV), tetróxido de ruténio, dicromato de pirídio, Oxone®, ácido o-iodobenzóico, perio-dinano de Dess-Martin, perrutenato de tetrapropilamónio (TPAP), e semelhantes. As condições preferidas utilizam clorocromato de piridinio num solvente inerte tal como diclorometano à temperatura ambiente durante cerca de 2 a 48 horas.

No Esquema V, Passo C, uma cetona com a fórmula (22) é convertida num éter enol com a fórmula (23) utilizando cloreto de (metoximetil)trifenilfosfónio. 0 ileto fosforoso é gerado com uma base forte, tal como terc-butóxido de potássio num solvente inerte tal como tolueno ou benzeno seguida da adição da cetona com a fórmula (22) a uma temperatura de desde 0 °C até à temperatura de refluxo do solvente, mas, preferencialmente, à temperatura ambiente. 0 produto é isolado com técnicas extractivas comuns, tais como a paragem com uma solução salina e extracção para um solvente inerte.

No Esquema V, Passo D, um éter enol com a fórmula (23) é hidrolisado para um aldeido com a fórmula (24). 0 perito competente reconhecerá que há uma variedade de maneiras para efectuar esta transformação com a utilização de ácido fórmico, acético, trifluoroacético ou p-tolue-nossulfónico. 0 método preferido utiliza ácido clorídrico concentrado num solvente inerte tal como tetra-hidrofurano. 0 produto é isolado por neutralização com uma base 58 ΡΕ1951659 inorgânica concentrada, tal como hidróxido de potássio, seguida de técnicas extractivas para dar o aldeído com a fórmula (24).

No Esquema V, Passo E, um aldeído com a fórmula (24) é reduzido para um álcool primário com a fórmula (25) . É bem conhecida dos peritos na técnica uma vasta lista de métodos para reduzir aldeídos e podem ser encontrados no texto de R. C. Larock em "Comprehensive

Organic Transformations", VCH Publishers, 1989, p. 528-534. 0 método preferido é a redução com boro-hidreto de sódio em etanol ou metanol desde a temperatura ambiente até 60 °C durante cerca de 30 minutos a 24 horas.

No Esquema V, Passo F, um éster metílico do ácido benzóico com a fórmula (25) é hidrolisado para um ácido benzóico com a fórmula (26) . O éster é hidrolisado num solvente solúvel em água apropriado tal como etanol, metanol, dioxano, ou tetra-hidrofurano, sendo preferido o tetra-hidrofurano. O éster é tratado com uma base inorgânica tal como hidróxido de potássio ou de sódio, sendo preferido o hidróxido de sódio, desde a temperatura ambiente até à temperatura de refluxo do solvente durante 2 a 48 horas. O ácido benzóico com a fórmula (26) é isolado por neutralização com ácido clorídrico seguida de técnicas extractivas comuns.

No Esquema V, Passo 3, um ácido benzóico com a fórmula (26) é acilado para dar a amida com a fórmula (27). Será reconhecido por um perito na técnica que há numerosas 59 ΡΕ1951659 condições para a formação da ligação amida entre um ácido carboxilico e uma amina. Tais métodos podem ser encontrados no texto de R. C. Larock em "Comprehensive Organic Transformations", VCH Publishers, 1989, p. 972-976. As condições preferidas utilizam 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina e uma base orgânica tal como 4-metilmorfolina num solvente inerte tal como diclorometano. Após agitação durante 2 a 24 horas, o éster activo é tratado com uma amina com a fórmula (13) desde 0 °C à temperatura de refluxo do solvente, mas, preferencialmente, à temperatura ambiente, durante cerca de 4 a 48 horas.

Esquema VI

I H

{31} R3

SSep D

(32) R3 60 ΡΕ1951659

No Esquema VI, Passo A, um álcool secundário com a fórmula (28) (em que X = Br ou I) é acoplado numa reacção de Mitsinobu com um fenol com a fórmula (29), utilizando condições similares às descritas para o Esquema III, Passo C.

No Esquema VI, Passo B, um éter 4-halofenílico com a fórmula (30), é acoplado com um ácido fenilborónico com a fórmula (2), utilizando uma reacção de Suzuki para proporcionar um éter bifenilico com a fórmula (31), utilizando condições similares às descritas para o Esquema I, Passo A.

Alternativamente, no Esquema VI, Passo C, um hidróxido de bifenilo com a fórmula (3), é acoplado utilizando condições de Mitsinobu descritas para o Esquema VI, Passo A, para dar um éter bifenilico com a fórmula (31).

No Esquema VI, Passo D, o éster com a fórmula (31) é hidrolisado para um ácido carboxilico com a fórmula (32) utilizando condições como as descritas no Esquema V, Passo F.

PREPARAÇÕES E EXEMPLOS

Os Exemplos aqui proporcionados são ilustrativos da invenção aqui reivindicada e não têm a intenção de limitarem o objectivo da invenção reivindicada em qualquer forma. Os nomes das preparações e exemplos foram derivados utilizando ChemDraw. 61 ΡΕ1951659

Os espectros de RMN de ΧΗ foram registados num espectrómetro Varian 400 MHz à temperatura ambiente. Os dados estão relatados como se segue: desvio quimico em ppm a partir do padrão interno tetrametilsilano na escala, multiplicidade (b = largo, s = singuleto, d = dubleto, t = tripleto, q = quarteto, qn = quinteto e m = multi-pleto), integração, constante de acoplamento (Hz) e designação. A informação de RMN de ΧΗ indica que foi obtido um espectro de RMN satisfatório a partir do composto descrito. Os dados de espectro de massa monoisotópico foram obtidos num instrumento Agilent G1956B MSD de quadripolo único utilizando ionização por electronebulização (ESI ou ES) . A cromatografia analítica em camada fina foi realizada em placas EM Reagent 0,25 mm de gel de sílica 60F. A visualização foi obtida com luz UV. Todos os exemplos eram racémicos a menos que indicado de outra forma.

Preparação 1 4'-Trifluorometil-bifenil-4-ol

Procedimento A. Uma solução de 4-bromofenol (16,3 g, 94,3 mmol), ácido 4-trifluorometilfenilborónico (19,7 g, 1,04 mmol), e fluoreto de potássio (11,0 g, 189 mmol) em tolueno:EtOH a 1:1 (378 mL) foi tratada com tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (5,45 g, 4,71 mmol), amornada até refluxo, e agitada de um dia para o outro. A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura 62 ΡΕ1951659 ambiente, diluída com água, e extraída EtOAc (3 x). Os extractos orgânicos combinados foram secados sobre Na2S04, filtrados, e concentrados. 0 sólido resultante foi triturado com hexanos e filtrado para proporcionar 8,27 g (37%) do composto do título na forma de um sólido branco. RMN de XH (CDC13) õ: 7,72-7, 65 (m, 4H) , 7,54-7,51 (m, 2H) , 6, 98-6, 94 (m, 2H) , 4,84 (s br, 1H) .

Procedimento B. Foram colocados 4-bromofenol (5 g, 28,9 mmol), ácido 4-trifluorometilfenilborónico (6,59 g, 34,7 mmol), carbonato de potássio (12 g, 86,7 mmol) e acetato de paládio(II) (0,324 g, 1,445 mmol) em água (50 mL) , e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro em recipiente aberto. A mistura foi filtrada através de Celite® e extraída com acetato de etilo (3 x 200 mL) . As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, HC1 a 1 N, com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secadas (MgS04) , e concentradas. 0 material resultante foi purificado por cromatografia sobre gel de sílica para render o composto do título na forma de um sólido branco (6,0 g, 87%) .

Preparação 2 2,6-Dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ol A uma solução de 4-iodo-3,5-dimetil-fenol (3,35 g, 13,5 mmol) em THF (81 mL) foram adicionados ácido 63 ΡΕ1951659 (4-trifluorometil)fenilborónico (3,35 g, 16,2 mmol), fluoreto de potássio (1,94 mg, 40,6 mmol), acetato de paládio(II) (152 mg, 0,67 mmol), e (oxidi-2,1-fenileno)bis-(difenilfosfina) (730 mg, 1,35 mmol). A mistura reaccional foi aquecida até refluxo de um dia para o outro. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, a mistura reaccional foi separada entre acetato de etilo e água. A fase aquosa foi extraida de novo com acetato de etilo, as fases orgânicas combinadas foram secadas e concentradas. O residuo resultante foi aplicado a gel de silica e eluido utilizando hexanos com um gradiente de acetato de etilo de desde 0% a 70% para dar o composto do titulo (3,3 g).

Preparação 3 Éster metílico do ácido 4-[1-alil-l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzóico

Passo A. Éster etílico do ácido 2-alil-2-(4-bromo-fenil)-pent-4-enóico.

Uma solução de éster etílico do ácido (4-bromo-fenil)-acético (2,014 g, 8,26 mmol) em DMF (40 mL) a 0 °C foi tratada com NaH (dispersão em óleo mineral a 60%, 0,739 g, 18,5 mmol), brometo de alilo (1,70 mL, 19,6 mmol), e amornada até à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reaccional foi colocada num banho de água fria, diluída com água (100 mL) , e extraída com EtOAc (3 x 75 mL) . Os extractos orgânicos combinados foram 64 ΡΕ1951659 lavados com água, uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secados sobre MgS04, filtrados, e concentrados para proporcionarem 2,64 g do composto do titulo na forma de um óleo limpido. 0 material em bruto foi tomado para o passo seguinte sem purificação adicional.

Passo B. 2-A1Í1-2-(4-bromo-fenil)-pent-4-en-l-ol.

Uma solução do éster etilico do ácido 2-alil-2-(4-bromo-fenil)-pent-4-enóico em bruto (2,64 g) em CH2CI2 (40 mL) a 0 °C foi tratada com hidreto de di-isobutilalumí-nio (em tolueno a 1 M, 17,5 mL) gota a gota durante 8 minutos, amornada até à temperatura ambiente, e agitada durante 45 minutos. A mistura reaccional foi arrefecida até 0 °C, a reacção foi parada com ácido tartárico a 1 M (25 mL), e agitada de um dia para o outro. A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com CH2CI2 (3 x 25 mL). Os extractos orgânicos combinados foram secados sobre MgSCb, filtrados, e concentrados. O resíduo foi carregado sobre gel de sílica e eluído com hexanos utilizando um gradiente de 0% de EtOAc para 50% de EtOAc para proporcionar 1,319 g (56% - 2 passos) do composto do título na forma de um óleo amarelo claro. RMN de 1H (CDCI3) õ: 7,47-7,43 (m, 2H) , 7,23-7,19 (m, 2H), 5,59 (ddt, J = 17,1, 10,2, 6,7 Hz, 2H) , 5,09-5,01 (m, 4H) , 3,76 (d, J = 6,8 Hz, 2H) , 2,48 (dd, J = 14,1, 6,8 Hz), 2,42 (dd, J = 13,6, 7,2 Hz, 2H) , 1,29 (t, J = 6, 1 Hz) . 65 ΡΕ1951659

Passo C. Ácido 4-(l-alil-l-hidroximetil-but-3-enil)-benzóico.

Uma solução de 2-alil-2-(4-bromo-fenil)-pent-4- en-l-ol (1,30 g, 4,64 mmol) em THF (46 mL) a -7 8 °C foi tratada com n-butil-lítio (2,0 mL, em hexanos a 2,5 M, 5,0 mmol) e agitada durante 30 minutos. A mistura reac-cional foi então tratada com terc-butil-litio (a 1,7 M em pentano, 6,0 mL, 10,2 mmol) gota a gota ao longo de 12 minutos. Após 14 minutos, foi feito borbulhar CO2 (g) através da solução e a mistura reaccional foi amornada até à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi vertida sobre HC1 a 1 N (25 mL) e extraída com EtOAc (3 x 50 mL). Os extractos combinados foram secados sobre MgS04, filtrados, e concentrados. O resíduo foi carregado numa coluna C18 e eluído com água utilizando um gradiente de 15% de acetonitrilo para 100% de acetonitrilo para proporcionar 0,793 g (69%) do composto do título na forma de um sólido branco. MS(ES): 245,1 [M-H]".

Passo D. Éster metílico do ácido 4-(l-alil-l-hidroximetil-but-3-enil)-benzóico.

Uma solução de ácido 4-(1-alil-l-hidroximetil-but-3-enil)-benzóico (0,793 g, 3,22 mmol) em DMF (11,0 mL) foi tratada com K2CO3 (0, 685 g, 4,96 mmol), e iodometano (0,25 mL, 4,02 mmol), e agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi vertida sobre água (25 mL) e extraída com EtOAc (3 x 25 mL) . Os extractos 66 ΡΕ1951659 combinados foram lavados com água, com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secados sobre MgSCq, filtrados, e concentrados. 0 resíduo foi carregado em gel de sílica e eluído com hexanos utilizando um gradiente de 0% para 75% de EtOAc para dar 0,774 g, (92%) do composto do título na forma de um xarope límpido. RMN de XH (CDC13 ) δ: 8,03-8, 00 (m, 2H) , 7, 44-7,41 (m, 2H) , 5, 65- 5,54 (m, 2H) , 5,11-5, 06 (m, 4H) , 5, 05-5,02 (m, 4H) , 3, 91 (s, 3H) , 3, 84 (d, 2H r J = 6,2 Hz) , 2,59- 2,46 (m, 4H) , 1,33 (t, 1H, J = 6,2 Hz) .

Passo E. Ester metílico do ácido 4-[l-alil-l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil)-benzóico.

Uma solução de éster metílico do ácido 4-(l-alil-l-hidroximetil-but-3-enil)-benzóico (0,768 g, 2,95 mmol), 2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ol (0,861 g, 3,23 mmol), e trifenilfosfina (1,180 g, 4,50 mmol) em tolueno (30 mL) foi tratada com 1,1'-(azodicarbonil)-dipiperidina (1,182 g, 4,68 mmol) e agitada de um dia para o outro a 80 °C. A mistura reaccional foi então arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com MeOH, e concentrada. O resíduo foi carregado em gel de sílica e eluído com hexanos utilizando um gradiente de 0% de EtOAc para 40% de EtOAc para proporcionar 0, 964 g (64%) do composto do título na forma de um xarope límpido. RMN de XH (CDCI3) δ: 8,02-8, 00 (m, 2H) , 7, 67 (d, J = 8,0 Hz, 2H) , 7,46-7,44 (m, 2H), 7,26 (d, J = 7,8 Hz, 2H) , 6,68 (s, 2H) , ΡΕ1951659 67 5,60-5,54 (m, 2H) , 5,08-5,00 (m, 4H) , 4,15 (s, (s, 3H) , 2,66 (d, J = 7,6 Hz, 4H) , 1, 99 (s, 6H) . 2Η) , 3, 91

Preparação 4 Éster etílico do ácido 4-[2-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloxi)-1,1-dimetil-etil)-benzóico 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 3, substituindo brometo de alilo com iodometano na Preparação 3, Passo A. RMN de ΧΗ (CDC13) δ: 8,02-7, 99 (m, 2H) , 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,53-7,49 (m, 2H) , 7,24 (d, J = 8,0 Hz, 2H) , 6,64 (s, 2H) , 3,98 (s, 2H) , 3,91 (s, 3H) , 1,96 (s, 6H) , 1,49 (s, 6H) .

Preparação 5

Ester metílico do ácido 4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-1-etil-propil)- benzóico 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 3, substituindo brometo de alilo com iodoetano na Preparação 3, Passo A. RMN de XH (CDC13) δ: 8,02-7, 98 (m, 2H) , 7, 66 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,44- -7,41 (m, 2H), 7,25 (d, J = 7, 8 Hz, 2H), 6,70 (s, 2H) , 4,16 (s, 2H) , 3,91 (s, 3H), 1,99 (s, 6H), 1, 95-1,89 (m, 4H), 0,74 (t, J= 6, 9 Hz, 6H) . ΡΕ1951659 68

Preparação 6

Ester metílico do ácido 4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluoro-metil-bifenil-4-iloximetil)-ciclopent-3-enil)-benzóico

Uma solução de éster metílico do ácido 4-[l-alil-1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil)-benzóico (6,0 mL de uma solução mãe a 0,11 M em CH2CI2, 0,578 g, 1,14 mmol) em CH2CI2 (570 mL) foi tratada com [1,3-bis-(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidinilide- no)dicloro(fenilmetileno)-(triciclo-hexilfosfina)ruténio] (0,101 g, 0,1192 mmol) a 35 °C durante 1 hora, arrefecida até à temperatura ambiente, e concentrada. O resíduo foi carregado em gel de sílica e eluído utilizando hexanos com um gradiente de acetato de etilo desde 0% até 40% para proporcionar o composto do título (0,458 g, 84%) na forma de um xarope incolor. RMN de XH (CDCI3) δ: 7, 98- 7, 96 (m, 2H) r 7,63 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7, 44-7,41 (m, 2H) , 7,20 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 6, 58 (s, 2H) , 5, 77 (s, 2H) , 3, 99 (s, 2H) , 3, 8 9 (s, 3H) , 2, 87 (d, J = 14, 3 H z, 2H), 2,77 (d, J = 14, 9

Hz, 2H), 1,92 (s, 6H) .

Exemplo 1

Acido 3-{4-[1-alil-l-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilaminoj-propiónico 69 ΡΕ1951659

Passo C. 4-[2-A1Í1-2-(4-bromo-fenil)-pent-4-eni-loxi]-4'-trifluorometil-bifenilo.

Uma solução de 2-alil-2-(4-bromo-fenil)-pent-4-en-l-ol (proveniente da Preparação 3, Passo B) (0,206 g, 0,734 mmol), 4'-trifluorometil-bifenil-4-ol (0,184 g, 0,772 mmol), e trifenilfosfina (0,286 g, 1,09 mmol) em tolueno (7,0 mL) foi tratada com 1,1'-(azodicarbonil)-dipiperidina (0,272 g, 1,08 mmol) e agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi então amornada até 80 °C durante 6 horas, arrefecida até à temperatura ambiente, diluida com MeOH, e concentrada. O residuo foi carregado em gel de silica e eluido com hexanos utilizando um gradiente de 0% de EtOAc para 50% de EtOAc para proporcionar 0,226 g, (61%) do composto do titulo na forma de um xarope amarelo. RMN de ΧΗ (CDCI3) δ: 7,66-7,61 (m, 4H) , 7,52- -7,50 (m, 2H) , 7,46- 7,44 (m, 2H) , 7,24-7,22 (m, 2H) , 7,00 -6, 98 (m, 2H) , . 5,56 (ddt , J = 17,1, 10,3, 7,2 Hz, 2H) , 5,05-4 , 99 (m, 4H) , 4, 12 (s, 2H) , 2,61 (d, J = 7,4 Hz, 4H) .

Passo D. Ácido 4-[1-alil-l-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzóico.

Uma solução de 4-[2-alil-2-(4-bromo-fenil)-pent- 70 ΡΕ1951659 4-eniloxi]-4'-trifluorometil-bifenilo (0,218 g, 0,434 mmol) em THF (4,0 mL) a -78 °C foi tratada com terc-butil-lítio (a 1,7 M em pentano, 0,55 mL, 0,935 mmol) gota a gota. Após 10 minutos, foi feito borbulhar dióxido de carbono gasoso através da solução e a mistura reaccional foi amornada até à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi diluída com água (10 mL) , acidificada com HC1 a 1 N (1,0 mL) , e extraída com EtOAc (3 x 20 mL) . Os extractos combinados foram secados sobre MgS04, filtrados, e concentrados. O resíduo foi carregado em gel de sílica e eluído com hexanos utilizando um gradiente de 0% de EtOAc até 100% de EtOAc para proporcionar 0,044 g (22%) do composto do título na forma de uma espuma branca. MS(ES): 465,2 [M-H]”.

Passo E. Éster metilico do ácido 3-{4-[1-alil-l-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilamino}-propiónico.

Uma solução de ácido 4-[ 1-alil-l-(4'-trifluoro-metil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzóico (0,044 g, 0,094 mmol), beta-alanina, sal cloridrato (0,0189 g, 0,135 mmol), e hidrato de 1-hidroxibenzotriazole (0,0193 g, 0,143 mmol) em DMF (2,0 mL) foi tratada com N, N-di-isopropil-etilamina (0,0480 mL, 0,275 mmol), e então com cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodi-imida (0,0278 g, 0,145 mmol) e foi agitada de um dia para o outro. A mistura reaccional foi diluída com água (5 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL) . Os extractos orgânicos combinados foram lavados com água, com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secados sobre MgS04, filtrados, e concentrados. O 71 ΡΕ1951659 resíduo foi carregado em gel de sílica e eluído com hexanos utilizando um gradiente de 10% de EtOAc até 75% de EtOAc para proporcionar 0,0298 g (58%) do composto do título na forma de uma película incolor. MS(ES): 552,2 [M+H]+.

Passo F. Ácido 3-{4-[1-alil-l-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilaminoj-propiónico.

Uma solução de éster metílico do ácido 3—{4— Ciai i 1 — 1 — (4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilamino}-propiónico (0,0279 g, 0,0506 mmol) em THF (1,0 mL) foi tratada com LiOH a 1 N (1,0 mL) e agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi acidificada com HC1 a 1 N (2,2 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL) . Os extractos combinados foram secados sobre MgS04, filtrados, e concentrados para proporcionar o ácido 3-{4-[1-alil-l-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilaminoj-propiónico (0,0189 g, 69%) na forma de um sólido branco. MS(ES): 538,3 [M+H] +.

Exemplo 2 Ácido 3—{4—[1—alil—1—(2,6—dimetil—4'—trifluorometil— bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilaminoj-propiónico

72 ΡΕ1951659

Passo A. Ácido 4-[1-alil-l-(2,6-dimetil-4'-tri-fluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzóico.

Uma solução de éster metílico do ácido 4-[l-alil-1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzóico (0,386 g, 0,758 mmol) em THF (8,0 mL) foi tratada com LiOH a 1 N (8,0 mL, 8,0 mmol), amornada até 70 °C, e agitada de um dia para o outro. A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente, acidificada com HC1 a 1 N (9,0 mL) , e extraida com EtOAc (3 x 20 mL) . Os extractos combinados foram secados sobre MgS04, filtrados, e concentrados para proporcionar 0,356 g (95%) do composto do titulo na forma de uma espuma branca. MS (ES) : 493,3 [M-H] ".

Passo B. Éster metílico do ácido 3-{4-[1-alil-l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilamino}-propiónico. A uma mistura de ácido 4-[ 1-alil-l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzóico (0,349 g, 0,705 mmol), cloridrato do éster metílico do ácido 3-amino-propiónico (0,112 g, 0,804 mmol), e hidrato de 1-hidroxibenzotriazole (HOBt, 0,121 g, 0, 898 mmol) em DMF (7,0 mL) foi adicionada N,N-di-isopro-piletilamina (0,38 mL, 2,2 mmol), depois cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodi-imida (EDC1, 0,180 g, 0,938 mmol) e foi agitada de um dia para o outro. A mistura ΡΕ1951659 reaccional foi vertida sobre água (25 mL) e extraída com EtOAc (3 x 25 mL). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com água, com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secados sobre MgS04, filtrados, e concentrados. 0 resíduo foi carregado em gel de sílica e eluído utilizando hexanos com um gradiente de acetato de etilo desde 0% até 75% para proporcionar 0,296 g (72%) do composto do título na forma de uma espuma branca. MS(ES): 580,4 [M+H] +.

Passo C. Ácido 3-{4-[1-alil-l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoil-amino}-propiónico.

Uma solução de éster metílico do ácido 3—{4— Ciai i 1 — 1 — (2, 6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloxime-til)-but-3-enil]-benzoilamino}-propiónico (0,0438 g, 0,0756 mmol) em THF (1,0 mL) foi tratada com LiOH a 1 N (1,0 mL) e agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi acidificada com HCl a 1 N, diluída com água (5 mL) , e extraída com EtOAc (3 x 10 mL) . Os extractos combinados foram secados sobre MgS04, filtrados, e concentrados para proporcionar 0,0105 g (24%) do composto do título na forma de um sólido branco. MS(ES): 566,4 [M+H]+.

Exemplo 3 Ácido 3-{4-[2-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloxi)-1,1-dimetil-etil]-benzoilamino}-propiónico 74 ΡΕ1951659

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 2, utilizando éster metílico do ácido 4-[2-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloxi)-1,1-dimetil-etil]-benzóico como material de partida. MS(ES): 514,3 [M+H]+.

Exemplo 4 Ácido 3-{4-[l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-1-etil-propil]-benzoilaminoj-propiónico

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 2 utilizando éster metílico do ácido 4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-1-etil-propil]-benzóico como material de partida. MS(ES): 542,4 [M+H]+. ΡΕ1951659 75

Exemplo 5 Ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)—ciclopent-3-enil]-benzoilaminoj-propiónico

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 2 utilizando éster metílico do ácido 4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-ciclopent-3-enil]-benzóico como material de partida. MS(ES): 538,3 [M+H]+.

Exemplo 6 Ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-ciclopentil]-benzoilaminoj-propiónico

Uma solução de ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-ciclopent-3-enil]- 76 ΡΕ1951659 benzoilamino}-propiónico (0,134 g, 0,250 iranol) em EtOH (3,0 mL) foi tratada com paládio em carbono a 10% (26,7 mg), sujeita a um jacto de hidrogénio, e agitada sob a pressão de 1 atm de um dia para o outro. A mistura foi então filtrada através de Celite® e concentrada para proporcionar 0,0350 g (26%) do composto do titulo na forma de um xarope limpido. MS(ES): 540,4 [M+H]+.

Exemplo 7 Ácido 3-{4—[1-propil-l-(4'-trifluorometil-bifenil—4-iloximetil)-butil]-benzoilamino}-propiónico

Passo A. Ester metilico do ácido 3-{4-[1-propil-1-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-butil]-benzoilamino}-propiónico.

Uma solução de éster metilico do ácido 3—{4— [1 — alil-1- (4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilamino}-propiónico (0,0731 g, 0,126 mmol) em EtOH (4,0 mL) foi tratada com paládio em carbono a 10% (16 mg), sujeita a um jacto de hidrogénio, e agitada sob a pressão de 1 atm de um dia para o outro. A mistura foi 77 ΡΕ1951659 então filtrada através de Celite® e concentrada para proporcionar 0,0703 g (96%) do composto do titulo na forma de um xarope limpido. MS(ES): 84,4 [M+H]+.

Passo B. Ácido 3-{4-[1-propil-l-(4'-trifluorome-til-bifenil-4-iloximetil)-butil]-benzoilaminoj-propiónico.

Uma solução de éster metílico do ácido 3 —{4 — [ 1 — alil-l-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilamino}-propiónico (0,0703 g, 0,120 mmol) em THF (2,0 mL) foi tratada com LiOH a 1 N (2,0 mL) e agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi acidificada com HC1 a 1 N (2,2 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL) . Os extractos combinados foram secados sobre MgS04, filtrados, e concentrados para proporcionar 0,0401 g (58%) do composto do título na forma de um sólido branco. MS(ES): 570,4 [M+H]+.

Preparação 7 Éster metílico do ácido 4-(3-metil-butiril)-benzóico

Passo A. Éster metílico do ácido 4-(l-hidroxi-3-metil-butil)-benzóico racémico.

Uma solução de éster metílico do ácido 4-formil-benzóico (32,4 g, 147 mmol) em THF anidro (800 mL) foi arrefecida até 0 °C enquanto era agitada sob azoto. Foi-lhe adicionado brometo de isobutil-magnésio (a 2,0 M em éter 78 ΡΕ1951659 dietílico, 110 mL, 221 mmol) lentamente ao longo de 10 minutos. A mistura reaccional foi deixada sob agitação a 0 °C durante 1 hora, e então deixada amornar até à temperatura ambiente. A reacção foi monitorizada por HPLC, e após o consumo completo do aldeido, a reacção foi parada cuidadosamente com HC1 a 1 N. A mistura reaccional foi diluida com éter dietilico e água, seguido de extracção. A fase orgânica foi lavada com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seguido de secagem sobre sulfato de sódio anidro. A solução foi filtrada e concentrada, depois purificada adicionalmente utilizando cromatografia "flash" em coluna utilizando acetato de etilo/hexanos para proporcionar 12 g (37%) de produto.

Passo B. Éster metílico do ácido 4-(3-metil-butiril)-benzóico. A uma solução de éster metílico do ácido 4-(l-hidroxi-3-metil-butil)-benzóico (19,72 g, 88,78 mmol) em diclorometano (300 mL) foi adicionado clorocromato de piridinio (22,03 g, 97,65 mmol). A mistura foi deixada sob agitação à temperatura ambiente, e a solução tornou-se negra ao longo do tempo. A reacção foi monitorizada por HPLC. Após a conversão estar completada, a mistura reaccional foi diluída com diclorometano e foi adicionado gel de sílica (2% em peso) à mistura. A mistura foi purificada por cromatografia "flash" em coluna utilizando diclorometano como fase móvel, produzindo 15,79 g (72%) de produto. MS(ES): 221,3 [M+l]+. 79 ΡΕ1951659

As cetonas no quadro abaixo foram preparadas seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 7, Passos A e B, utilizando tanto o reagente de Grignard disponível comercialmente, como gerando-o a partir do correspondente halogeneto, na Preparação 7, Passo A.

Prep. Grignard de Partida Ncme do Produto Estrutura 8 Brometo de n-hexilmagnésio Éster metílico do ácido 4-heptanoil-benzóico o 9 Cloreto de isobutilmagnésio Éster metílico do ácido 4-(3-metil-butiril)-benzóico 1 u ^Ao,ch, 10 Cloreto de n-butilmagnésio Éster metílico do ácido 4-butiril-benzóico 0 11 Brometo de 1,1,1-trifluoro-butano-4-magnésio Éster metílico do ácido 4- (5,5,5-trifluoro-penta-noil)-benzóico 12 Brometo de 3,3,3-trifluoropropil-magnésio Éster metílico do ácido 4- (4,4,4-trifluoro-butiril)-benzóico O 13 Cloreto de i s opropi1-magné s i o Éster metílico do ácido 4-isobutiril-benzóico 80 ΡΕ1951659

Preparação 14 Éster metílico do ácido 3-[4-(1-hidroximetil-heptil)-benzoilamino]-propiónico

Passo A. Éster metílico do ácido 4-(l-metoxi-metileno-heptil)-benzóico.

Suspendeu-se cloreto de (metoximetil)trifenil-fosfónio (10,34 g, 30,24 mmol) em tolueno anidro (75 mL) e foi-lhe adicionado cuidadosamente terc-butóxido de potássio (3,39 g, 30,24 mmol). A solução foi deixada sob agitação à temperatura ambiente durante 4 horas. Foi então dissolvido éster metilico do ácido 4-heptanoil-benzóico (5,0 g, 20,16 mmol) em tolueno anidro (25 mL) e adicionou-se à mistura reaccional por meio de uma cânula. A mistura reaccional foi deixada sob agitação à temperatura ambiente de um dia para o outro e a reacção foi monitorizada por TLC. Após o consumo completo do material de partida, a reacção foi cuidadosamente parada com uma solução saturada de cloreto de amónio, a mistura reaccional foi extraída com éter dietíli-co, lavada, secada, e concentrada. O composto do título foi purificado por cromatografia em coluna utilizando hexa-nos/acetato de etilo e utilizado directamente no passo seguinte.

Passo B. Éster metílico do ácido 4-(1-formil-heptil)-benzóico.

Dissolveu-se éster metílico do ácido 4 — (1 — 81 ΡΕ1951659 metoximetileno-heptil)-benzóico (3,5 g, 12,68 mmol) em tetra-hidrofurano (50 mL) e foi-lhe adicionado ácido clorídrico concentrado (5 mL). 0 sistema foi purgado de ar com azoto e aquecido até refluxo durante 6 horas. A reacção foi monitorizada por HPLC. A mistura reaccional foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente e então foi neutralizada com uma solução a 30% de hidróxido de potássio e bicarbonato. As duas fases foram separadas e a aquosa foi extraída uma segunda vez com éter dietílico. Os extractos orgânicos combinados foram lavados com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secados sobre sulfato de sódio, e concentrados. O material em bruto foi carregado numa coluna de gel de sílica e purificado utilizando hexanos/acetato de etilo. MS(ES): 261,2 [M+H]“.

Passo C. Éster metálico do ácido 4-(l-hidroximetil-heptil)-benzóico.

Dissolveu-se éster metilico do ácido 4-(l-formil-heptil)-benzóico (3,17 g, 12,1 mmol) em etanol (50 mL) e deixou-se em agitação sob azoto num banho de gelo a 0 °C. Foi adicionado à mistura boro-hidreto de sódio (0,457 g, 12,1 mmol) numa porção. A mistura reaccional foi deixada sob agitação a 0 °C durante uma hora, depois foi amornada lentamente até à temperatura ambiente durante várias horas e a reacção foi monitorizada por TLC. Após o consumo completo do material de partida, a reacção foi cuidadosamente parada com água e o etanol foi removido in vacuo. A mistura remanescente foi diluída com acetato de etilo. As 82 ΡΕ1951659 duas fases foram separadas, e a fase orgânica foi lavada, secada, e concentrada. 0 composto do titulo foi utilizado no passo seguinte sem purificação adicional. MS(ES): 265,2 [M+H]+.

Passo D. Ácido 4-(1-hidroximetil-heptil)-ben- zóico.

Dissolveu-se éster metilico do ácido 4-(l-hidro-ximetil-heptil)-benzóico (3,46 g, 12,1 mmol) em tetra-hi-drofurano (40 mL) e foi-lhe adicionado hidróxido de sódio a 5 N (10 mL) . A reacção pôde ser monitorizada por HPLC e estava completada dentro de 8 horas. A mistura reaccional foi neutralizada com HC1 a 5 N (10 mL), e diluída com éter dietílico e água. As duas fases foram separadas, e a fase orgânica foi lavada, secada, e concentrada para proporcionar o composto do título que foi utilizado sem purificação adicional. MS(ES): 249,3 [M+H]".

Passo E. Éster metilico do ácido 3—[4-(l-hidroximetil-heptil)-benzoilamino]-propiónico.

Combinaram-se ácido 4-(1-hidroximetil-heptil)-benzóico (500 mg, 2,00 mmol), 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina (362 mg, 2,06 mmol), e 4-metilmorfolina (230 pL, 2,10 mmol) em diclorometano anidro (10 mL) sob azoto. A mistura reaccional foi deixada sob agitação sob azoto à temperatura ambiente de um dia para o outro. Foi adicionado cloridrato do éster metilico de beta-alanina (306 mg, 83 ΡΕ1951659 2,20 mmol) à mistura reaccional, seguido de mais 4-metil-morfolina (460 yL, 4,2 mmol), e deixou-se sob agitação à temperatura ambiente. Foi adicionada alguma água (<10% em volume) para auxiliar a solubilidade. A reacção foi monitorizada por HPLC, e após 4 horas, a mistura reaccional foi diluida com mais diclorometano. A mistura reaccional foi diluida com água e enxaguada com HC1 a 1 N. Após a acidificação, as duas fases foram separadas. A fase orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada sobre sulfato de sódio anidro, e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromato-grafia em coluna "flash" com hexanos/acetato de etilo para proporcionar o composto do título. MS(ES): 334,2 [M+H]“.

Preparação 15 Éster metílico do ácido 3-[4-(l-hidroximetil-3-metil-butil)-benzoilamino]-propiónico O composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 14, utilizando éster metílico do ácido 4-(3-metil-butiril)-benzóico como material de partida. MS(ES): 306,2 [M+H]~.

Preparação 16 Éster metílico do ácido 3-[4-(1-hidroximetil-butil)-benzoilamino]-propiónico 84 ΡΕ1951659 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 14, utilizando éster metílico do ácido 4-butiril-benzóico como material de partida. MS(ES): 292,2 [M+H]“.

Preparação 17 Éster metílico do ácido 3-[4-(5,5,5-trifluoro-l-hidroximetil-pentil)-benzoilamino]-propiónico 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 14, utilizando éster metílico do ácido 4-(5,5,5-trifluoro-pentanoil)-benzóico como material de partida. MS(ES): 360,3 [M+H]”.

Preparação 18 Éster metílico do ácido 3-[4-(4,4,4-trifluoro-l-hidroximetil-butil)-benzoilamino]-propiónico 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 14, utilizando éster metílico do ácido 4-(4,4,4-trifluoro-butiril)-benzóico como material de partida. MS(ES): 346,3 [M+H] 85 ΡΕ1951659

Preparação 19 Éster etílico do ácido 3-[4-(l-hidroximetil-2-metil-propil)-benzoilamino]-propiónico 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 14, utilizando éster metílico do ácido 4-isobutiril-benzóico e cloridrato do éster etílico de beta-alanina como materiais de partida. MS(ES): 306,2 [M+H]".

Preparação 20 4'-terc-Butil-bifenil-4-ol 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 1, Procedimento B, utilizando ácido 4-terc-butil-fenil-borónico como material de partida.

Preparação 21 4'-terc-Butil-2,6-dimetil-bifenil-4-ol 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos na Preparação 1, Procedimento B, utilizando ácido 4-terc-butil-fenil-borónico e 3,5-dimetil-fenol como materiais de partida. 86 ΡΕ1951659

Exemplo δ Ácido 3-{4-[1-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-heptil]-benzoilaminoj-propiónico racémico

Passo A. Éster metilico do ácido 3-{4-[l-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-heptil]-benzoilaminoj-propiónico .

Uma solução de 4'-trifluorometil-bifenil-4-ol (213 mg, 0,90 mmol) e éster metilico do ácido 3—[4—(1— hidroximetil-heptil)-benzoilamino]-propiónico (240 mg, 0,72 mmol) em tolueno anidro (5 mL) foi desgaseifiçada e impregnada com azoto 3 vezes. Foi adicionada tributilfos-fina (270 pL, 1,07 mmol) à mistura reaccional sob azoto a 0 °C, seguida da adição de 1, 1'-(azodicarbonil)-dipiperidina (271 mg, 1,07 mmol). A mistura reaccional foi deixada amornar até à temperatura ambiente e foi agitada de um dia para o outro. A mistura foi carregada numa coluna de gel de silica e purificada utilizando hexanos/acetato de etilo. Algum éster racémico foi hidrolisado no passo seguinte, e o éster intermediário remanescente foi sujeito a cromato- 87 ΡΕ1951659 grafia quiral para resolução (veja-se o Exemplo 15, Passo C). MS(ES): 554,2 [M+H]

Passo B. Ácido 3-{4-[1-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloxi-metil)-heptil]-benzoilamino}-propiónico racémico.

Dissolveu-se éster metilico do ácido 3—{4 — [1— (4' — trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-heptil]-benzoilamino}-propiónico (50 mg, 0,09 mmol) em tetra-hidrofurano (1 mL) e foi-lhe adicionado hidróxido de sódio a 5 N (1 mL) . A reacção pôde ser monitorizada por HPLC. Após 3 horas a mistura reaccional foi neutralizada com HC1 a 5 N (1 mL) e diluida com éter dietilico e água. As duas fases foram separadas, e a fase orgânica foi lavada, secada, e concentrada para proporcionar o composto do titulo. MS(ES): 540,3 [M+H]".

Exemplo 9 Ácido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-bifenil-4-iloximetil)-heptil]--benzoilamino}-propiónico racémico

ΡΕ1951659 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 8, utilizando 4'-terc-butil-bifenil-4-ol e éster metílico do ácido 3-[4-(1-hidroximetil-heptil)-benzoilamino]-propiónico como materiais de partida. MS(ES): 528,3 [M+H]“.

Exemplo 10 Ácido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloximetil)-3-metil-butil]-benzoilamino}-propiónico racémico

O composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 8, utilizando 4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-ol e éster metílico do ácido -[4-(l-hidroximetil-3-metil-butil)-benzoilamino] -propiónico como materiais de partida. MS (ES) : 528,3 [M+H]".

Exemplo 11 Ácido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-bifenil-4-iloximetil)-butil]-benzoilamino}-propiónico racémico 89 ΡΕ1951659

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 8, utilizando 4'-terc-butil-bifenil-4-ol e éster metílico do ácido -[4-(1-hidroximetil-butil)-benzoilamino]-propiónico como materiais de partida. MS(ES): 486,2 [M+H]“.

Exemplo 12 Ácido 3—{4—[1—(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-butil]-benzoilamino}-propiónico racémico~

0 composto do titulo foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 8, utilizando 4'-trifluorometil-bifenil-4-ol e éster metílico do ácido -[4-(1-hidroximetil-butil)-benzoilamino]-propiónico como materiais de partida. MS(ES): 498,2 [M+H] . 90 ΡΕ1951659

Exemplo 13

Acido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-bifenil-4-iloximetil)-5,5,5-trifluoro-pentil]-benzoilaminoj-propiónico racémico

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 8, utilizando 4'-terc-butil-bifenil-4-ol e éster metílico do ácido 3-[4- (5,5,5-trifluoro-l-hidroximetil-pentil)-benzoil-amino]-propiónico como materiais de partida. MS(ES): 554,2 [M+H]

Exemplo 14 Ácido 3-{4-[l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-3-metil-butil]-benzoilaminoj-propiónico racémico

91 ΡΕ1951659 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 8, utilizando 2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ol e éster metílico do ácido -[4-(l-hidroximetil-3-metil-butil)-benzoilamino]-propiónico como materiais de partida. MS (ES) : 540,3 [M+H]

Exemplo 15 Ácido 3-{4-[1-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-heptil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 1

Passo C. Separação quiral. O éster metílico do ácido 3-{4-[1-(4'-trifluo-rometil-bifenil-4-iloximetil)-heptil]-benzoilamino}-propiónico racémico foi resolvido numa coluna Chiralpak AD-H (4,6 x 150 mm) utilizando álcool isopropílico/heptano (30/70) como eluente. As fracções apropriadas foram concentradas para proporcionarem um éster enantiómero puro (isómero 1, 98,6% de ee) . 92 ΡΕ1951659

Passo B. Ácido 3-{4-[1-(4'-trifluorometil-bife-nil-4-iloximetil)-heptil]-benzoilaminoj-propiónico, isóme-ro 1.

Dissolveu-se éster metilico do ácido 3-{4-[l-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-heptil]-benzoilaminoj-propiónico, isómero 1 (250 mg, 0,45 mmol) em tetra-hidro-furano (1 mL) e foi-lhe adicionado hidróxido de sódio a 5 N (1 mL) . A reacção pôde ser monitorizada por HPLC. Após um periodo de 3 horas, a mistura reaccional foi neutralizada com HC1 a 5 N (1 mL) e diluida com éter dietilico e água. As duas fases foram separadas, e a fase orgânica foi lavada, secada, e concentrada para proporcionar o composto do titulo. MS(ES): 540,3 [M+H]'.

Exemplo 16 Ácido 3-{4-[1-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-heptil]-benzoilaminoj-propiónico, isómero 2

O composto do titulo foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 15, utilizando o isómero 2 proveniente da separação quiral do Passo C. MS(ES): 540,3 [M+H]'. ΡΕ1951659 93

Exemplo 17 Ácido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloxi-metil)-3-metil-butil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 1

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 15, utilizando éster metílico do ácido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloximetil)-3-metil-butil]-benzoil-amino}-propiónico racémico. MS(ES): 528,3 [M+H]~.

Exemplo 18 Ácido 3-{4-[1-(4'-1erc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloxi-metil)-3-metil-butil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 2

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 15, 94 ΡΕ1951659 utilizando o isómero 2 proveniente da separação quiral do Exemplo 17. MS(ES): 528,3 [M+H]".

Exemplo 19 Ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-3-metil-butil]-benzoilaminoj-propiónico, isómero 1

0 composto do titulo foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 15, utilizando éster metilico do ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-3-metil-butil]-benzoilamino}-propiónico racémico. MS(ES): 540,3 [M+H]-.

Exemplo 20

Acido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-3-metil-butil]-benzoilaminoj-propiónico, isómero 2

95 ΡΕ1951659 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 15, utilizando o isómero 2 proveniente da separação quiral do Exemplo 19. MS(ES): 540,3 [M+H]".

Exemplo 21 Ácido 3—{4—[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-2-metil-propil]-benzoilaminoj-propiónico racémico

Passo A. Éster etílico do ácido 3-{4-[1-(4-bromo-3,5-dimetil-fenoximetil)-2-metil-propil]-benzoilaminoj-propiónico .

Uma solução de 4-bromo-3,5-dimetil-fenol (818 mg, 4,07 mmol) e éster etílico do ácido 3-[4-(l-hidroximetil-2-metil-propil)-benzoilamino]-propiónico (1,0 g, 3,26 mmol) em tolueno anidro (15 mL) foi desgaseifiçada e impregnada com azoto 3 vezes. Foi adicionada tributilfosfina (1,21 mL, 4.89 mmol) à mistura reaccional sob azoto a 0 °C, seguida da adição de 1-1'-(azodicarbonil)-dipiperidina (1,23 g, 4.89 mmol). A mistura reaccional foi deixada amornar até à temperatura ambiente e agitada de um dia para o outro. A mistura foi carregada numa coluna de gel de sílica e 96 ΡΕ1951659 purificada utilizando hexanos/acetato de etilo. MS (ES) : 488,2 [M+H]

Passo B. Éster etílico do ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico racémico. A uma solução de éster etílico do ácido 3—{4— [1 — (4-bromo-3,5-dimetil-fenoximetil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico (400 mg, 0,82 mmol) em tolue-no:água (1:1) (4 mL) foi adicionado tetraquis(trifenilfos- fina) paládio(0) (47 mg, 0,04 mmol) e ácido 4-trifluoro- metilfenilborónico (311 mg, 1,63 mmol). A mistura reacci-onal foi purgada com azoto e aquecida até refluxo e foi-lhe adicionado fluoreto de potássio (95 mg, 1,63 mmol). A reacção foi monitorizada por HPLC. Após 16 horas a mistura reaccional foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi diluída com acetato de etilo e então foi-lhe adicionada Celite®, seguida de água. Esta mistura foi então filtrada através de uma placa de Celite®. A solução foi vertida para um funil de separação e a fase orgânica foi lavada com hidróxido de sódio a 0,1 N, com água, e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidro e concentrada. O éster etílico do ácido 3 —{4 — [ 1 — (2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4iloximetil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico racémico (400 mg, 0,72 mmol) foi purificado por cromatografia em coluna "flash" utilizando hexanos/acetato de etilo, e algum do 97 ΡΕ1951659 éster intermediário foi sujeito a cromatografia quiral para resolução (veja-se o Exemplo 25, Passo D).

Passo C. Ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluoro-metil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico racémico.

Dissolveu-se éster etilico do ácido 3—{4—[1— (2,6— dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil ] -benzoilamino } -propiónico racémico (50 mg, 0,09 mmol) em tetra-hidrofurano (1 mL) e foi-lhe adicionado hidróxido de sódio a 5 N (1 mL) . A reacção pôde ser monitorizada por HPLC. Após um periodo de 3 horas, a mistura reaccional foi neutralizada com HC1 a 5 N (1 mL), e foi diluida com éter dietilico e água. As duas fases foram separadas, e a fase orgânica foi lavada, secada, e concentrada para proporcionar o composto do titulo sem purificação adicional. MS(ES): 526,2 [M+H]“.

Exemplo 22 Ácido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico racémico

98 ΡΕ1951659 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 21, utilizando éster etílico do ácido 3-{4-[1-(4-bromo-3,5-dimetil-fenoximetil)-2-metil-propil}-benzoilamino}-propiónico e ácido 4-terc-butilfenilborónico como materiais de partida. MS(ES): 514,2 [M+H]~.

Exemplo 23 Ácido 3-(4—{1—[6—(4-trifluorometil-fenil)-piridin-3-iloximetil]-butilj-benzoilamino)-propiónico racémico

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 21, utilizando éster metílico do ácido 3-[4-(1-hidroximetil-butil)-benzoilamino])-propiónico e 6-cloro-piridin-3-ol como materiais de partida no Passo A, seguidos de ácido 4-trifluorometilfenilborónico no Passo B. MS(ES): 499,2 [M+H] ΡΕ1951659 99

Exemplo 24 Ácido 3-{4-[l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-4,4,4-trifluoro-butil]-benzoilaminoj-propiónico racémico

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 21, utilizando éster metílico do ácido 3-[4-(4,4,4-trifluoro-l-hidroximetil-butil)-benzoilamino]-propiónico como material de partida e 4-iodo-3,5-dimetil-fenol em lugar de 4-bromo-3,5-dimetil-fenol. MS(ES): 580,2 [M+H]“.

Exemplo 25

Acido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil]-benzoilaminoj-propiónico, isómero 1

100 ΡΕ1951659

Passo D. Separação quiral. 0 éster etílico do ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil]-ben-zoilamino}-propiónico racémico foi resolvido numa coluna Chiralpak AD-H (4,6 x 150 mm) utilizando álcool isopro-pílico/heptano (30/70) como eluente. As fracções apropriadas foram concentradas para proporcionarem um éster enantiómero puro (isómero 1, >99% de ee).

Passo E. Ácido 3-{4-[1-(4'-trifluorometil-bife-nil-4-iloximetil)-heptil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 1.

Dissolveu-se éster etílico do ácido 3—{4—[1— (2,6 — dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil ]-benzoilamino}-propiónico, isómero 1 (250 mg, 0,462 mmol) em tetra-hidrofurano (1 mL) e foi-lhe adicionado hidróxido de sódio a 5 N (1 mL) . A reacção pôde ser monitorizada por HPLC. Após um período de 3 horas, a mistura reaccional foi neutralizada com HC1 a 5 N (1 mL) e foi diluída com éter dietílico a água. As duas fases foram separadas, e a fase orgânica foi lavada, secada, e concentrada. 0 composto do título foi proporcionado sem purificação adicional. MS(ES): 526,2 [M+H]”. ΡΕ1951659 101

Exemplo 2 6 Ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil]-benzoilaminoj-propiónico, isómero 2

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 25, utilizando o isómero 2 proveniente da separação quiral. MS (ES) : 526, 2 [M+H]

Exemplo 27 Ácido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil]-benzoilaminoj-propiónico, isómero 1

0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 25, utilizando éster etílico do ácido 3-{4-[1-(4'-terc-butil- 102 ΡΕ1951659 2,6-dimetil-bifenil-4-iloximetil)-2-metil-propil}-benzoil-amino}-propiónico racémico. MS(ES): 514,2 [M+H]“.

Exemplo 28

Acido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloxi-metil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 2

Quiral O ^Λοη 0 composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 25, utilizando o isómero 2 proveniente da separação quiral do Exemplo 27. MS(ES): 514,2 [M+H]”.

Exemplo 29 Ácido 3—{4—[1—(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-4,4,4-trifluoro-butil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 1

103 ΡΕ1951659 O composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 25, utilizando éster etílico do ácido 3—{4—[1-(2,6-dimetil-4'-tri-fluorometil-bifenil-4-iloximetil)-4,4,4-trifluoro-butil]-benzoilamino}-propiónico racémico. MS(ES): 580,3 [M+H]-.

Exemplo 30 Ácido 3-{4-[l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-4,4,4-trifluoro-butil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 2

O composto do título foi preparado seguindo essencialmente os procedimentos descritos no Exemplo 25, utilizando o isómero 2 proveniente da separação quiral do Exemplo 29. MS(ES): 580,3 [M+H]-. O composto com a fórmula (I) é formulado preferencialmente numa forma de dosagem unitária antes da administração. Portanto, uma ainda outra forma de realização da presente invenção é uma composição farmacêutica incluindo 104 ΡΕ1951659 um composto com a fórmula (I) e um ou mais veículos, dilu-entes ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em tal forma, a preparação é subdividida em doses unitárias de dimensão adequada contendo quantidades apropriadas dos componentes activos, por exemplo, uma quantidade eficaz para se obter o propósito desejado. Tais composições farmacêuticas e processos para as preparar são bem conhecidos na técnica. Veja-se, por exemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (A. Gennaro, et al., eds., 19a ed., Mack Publishing Com a fórmula., 1995). A dosagem particular de um composto com a fórmula (I) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável necessária para constituir uma quantidade eficaz de acordo com esta invenção, dependerá das circunstâncias particulares das condições a serem tratadas. Preferencialmente o composto é administrado oralmente. A quantidade da composição activa da invenção numa dose unitária de preparação pode ser geralmente variada ou ajustada desde cerca de 0,01 miligramas até cerca de 1000 miligramas, preferencialmente desde cerca de 0,01 miligramas até cerca de 950 miligramas, mais preferencialmente desde cerca de 0,01 miligramas até cerca de 500 miligramas, e tipicamente desde cerca de 1 até cerca de 250 miligramas, de acordo com a aplicação particular. A dosagem real empregue pode ser variada dependendo da idade do paciente, sexo, peso e gravidade da condição a ser tratada. Tais técnicas são bem conhecidas dos peritos na técnica. Geralmente, a forma de dosagem oral humana contendo os ingredientes activos pode ser administrada 1 ou 2 vezes por dia. As considerações tais como dosagem, via de ΡΕ1951659 administração, e frequência de dosagem são melhor decididas pelo médico assistente.

Existe evidência crescente que o glucagon desempenha um papel importante na homeostasia da glucose. Os compostos com a fórmula (I) são eficazes como antagonistas ou agonistas inversos do receptor do glucagon, e inibem, portanto, a actividade do receptor do glucagon. Mais particularmente, estes compostos são antagonistas ou agonistas inversos selectivos do receptor do glucagon. Como antagonistas ou agonistas inversos selectivos, os compostos com a fórmula (I) são úteis no tratamento de doenças, perturbações, ou condições que respondem à inactivação do receptor do glucagon, incluindo, mas não limitadas a, perturbações diabéticas e outras relacionadas com o glucagon. É esperado que antagonistas ou agonistas inversos selectivos do receptor do glucagon baixarão os niveis plasmáticos da glucose e dessa forma previnam ou tratem perturbações diabéticas e outras metabólicas relacionadas com o glucagon.

MÉTODOS FARMACOLÓGICOS

Na secção seguinte são descritos ensaios de fixação bem como ensaios funcionais úteis para avaliar a eficácia dos compostos da invenção. A fixação de compostos ao receptor do glucagon pode ser determinada num ensaio de fixação em competição utilizando o receptor do glucagon humano clonado, e a selectividade contra o receptor hGlpl. 0 antagonismo pode ser determinado como a capacidade dos 106 ΡΕ1951659 compostos para inibirem a quantidade de cAMP formada no ensaio na presença de 5 nM de glucagon.

Ensaio de Fixação do Receptor do Glucagon (hGlucR). O ensaio de fixação do receptor utiliza o receptor do glucagon humano clonado (Lok S., Kuijper J. L., Jelinek L. J., Kramer J. M., Whitmore T. E., Sprecher C. A., Mathews S., Grant F. J., Biggs S. H., Rosenberg G. B., et al, Gene 140(2), 203-209 (1994)) isolado a partir de membranas 293HEK. O ADNc das hGlucR foi subclonado no plasmideo de expressão phD (Trans-activated expression of fully gamma-carboxylated recomnbinant human protein C, an antithrombotic factor, Grinnell, B. W., Berg, D. T., Walls, J. and Yan, S. B. Bio/Technology 5: 1189-1192 (1987)). Este ADN de plasmideo foi transfectado em células 293 HEK e seleccionado com 200 yg/mL de Higromicina.

Foram preparadas membranas plasmáticas em bruto utilizando células provenientes da suspensão de cultura. As células foram lisadas em gelo em tampão hipotónico contendo Tris HCL a 25 mM, pH 7,5, MgCl2 a 1 mM, ADNsel, 20 μ/mL, e Roche Complete Inhibitors sem EDTA. A suspensão celular foi homogeneizada com um homogeneizador Dounce de vidro utilizando um pilão de Teflon durante 25 movimentos. O homogeneizado foi centrifugado a 4 graus Celsius a 1800 x g durante 15 minutos. O sobrenadante foi recolhido e a pastilha foi voltada a suspender em tampão hipotónico e 107 ΡΕ1951659 re-homogeneizado. A mistura foi centrifugada a 1800 x g durante 15 minutos. O segundo sobrenadante foi combinado com o primeiro sobrenadante. Os sobrenadantes combinados voltaram a ser centrifugados a 1800 x g durante 15 minutos para clarificarem. O sobrenadante clarificado foi transferido para tubos de alta velocidade e centrifugado a 25000 x g durante 30 minutos a 4 graus Celsius. A pastilha de membranas voltou a ser suspensa em tampão de homogeneização e guardada como alíquotas congeladas a -80 graus Celsius até serem necessárias. O glucagon foi marcado com iodo radioactivo pelo procedimento I-lactoperoxidase e purificado por HPLC de fase inversa num instrumento Perkin-Elmer/NEN (NEX207). A actividade especifica foi de 2200 Ci/mmol. A determinação de Kd foi realizada em competição homóloga em vez de fixação em saturação devido ao elevado conteúdo em propanol no material 125I-glucagon. O Kd foi estimado como sendo 3 nM e foi utilizado para calcular valores de Ki para todos os compostos testados.

Os ensaios de fixação foram levados a cabo utilizando um instrumento Scintillation Proximity Assay (Amersham) com esférulas WGA bloqueadas previamente com BSA (ICN) a 1% livre de ácido gordo. O tampão de fixação continha Hepes a 25 mM, pH 7,4, CaCL2 a 2,5 mM, MgCL2 a 1 mM, BSA (ICN) a 0,1% livre de ácido gordo, tween-20 a 0,003%, e Roche Complete Inhibitors sem EDTA. O glucagon foi dissolvido em HC1 a 0,01 N a 1 mg/mL e imediatamente 108 ΡΕ1951659 congelado a -80 graus Celsius em alíquotas de 30 yL. A alíquota de glucagon foi diluída e utilizada em ensaios de fixação no intervalo de uma hora. Os compostos de teste foram dissolvidos em DMSO e diluídos em série em DMSO. Transferiram-se 10 yL de compostos diluídos ou de DMSO para placas de ensaio opacas de fundo transparente Corning 3632, contendo 90 pL de tampão de fixação de ensaio ou glucagon frio (NSB a 1 pM final) . Foram adicionados 50 pL de 125I-glucagon (0,15 nM final na reacção) , 50 pL de membranas (300 pg/poço) , e 40 pL de esférulas WGA (150 mg/poço) , cobriram-se, e misturou-se por inversão. As placas foram lidas com um instrumento MicroBeta após 14 horas de tempo de repouso à temperatura ambiente.

Os resultados foram calculados como a percentagem da fixação específica do 125I-glucagon na presença de composto. A dose EC5o absoluta do composto foi derivada por regressão não linear da percentagem de fixação específica do 125I-glucagon em relação à dose de composto adicionado. A dose EC50 foi convertida em Ki utilizando a equação de Cheng-Prusoff (Cheng Y., Prusoff W. H., Biochem. Pharmacol. 22, 3099-3108, 1973).

Ensaio de Fixação do Receptor do Péptido 1 Semelhante ao Glucagon (Glpl-R). O ensaio de fixação do receptor utilizou o receptor do péptido 1 semelhante ao glucagon humano clonado (hGlpl-R) (Graziano Μ. P., Hey P. J., Borkowski D., Chicchi 109 ΡΕ1951659 G. G., Strader C. D., Biochem Biophys Res Commun. 15 de Out. de 1993; 196(1):141-6) isolado a partir de membranas 293HEK. O DNAc do hGlpl-R foi subclonado no plasmideo de expressão phD (Trans-activated expression of fully gamma-carboxylated recombinant human protein C, an antithrombotic factor. Grinnell, B. W., Berg, D. T., Walls, J. and Yan, S. B., Bio/Technology 5: 1189-1192 (1987)). Este ADN de plasmideo foi transfectado em células 293 HEK e selec-cionado com 200 yg/mL de Higromicina.

Foi preparada membrana plasmática em bruto utilizando células provenientes da suspensão de cultura. As células foram lisadas em gelo em tampão hipotónico contendo Tris HC1 a 25 mM, pH 7,5, MgCl2 a 1 mM, ADNse, 20 μ/mL, e Roche Complete Inhibitors sem EDTA. A suspensão celular foi homogeneizada com um homogeneizador Dounce de vidro utilizando um pilão de Teflon durante 25 movimentos. O homogeneizado foi centrifugado a 4 graus Celsius a 1800 x g durante 15 minutos. O sobrenadante foi recolhido e a pastilha foi voltada a suspender em tampão hipotónico e re-homogeneizado. A mistura foi centrifugada a 1800 x g durante 15 minutos. O segundo sobrenadante foi combinado com o primeiro sobrenadante. Os sobrenadantes combinados voltaram a ser centrifugados a 1800 x g durante 15 minutos para clarificarem. O sobrenadante clarificado foi transferido para tubos de alta velocidade e centrifugado a 25000 x g durante 30 minutos a 4 graus Celsius. A pastilha de membranas voltou a ser suspensa em tampão de homogeneização e guardada como alíquotas congeladas a -80 graus Celsius até serem necessárias. 110 ΡΕ1951659 O péptido 1 semelhante ao glucagon (Glp-1) foi marcado com iodo radioactivo pelo procedimento 125I-lactope-roxidase e purificado por HPLC de fase inversa num instrumento Perkin-Elmer/NEN (NEX308). A actividade especifica foi de 2200 Ci/mmol. A determinação de Kd foi realizada em competição homóloga em vez de fixação em saturação devido ao elevado conteúdo em propanol no material 125I-Glp-1. O Kd foi estimado como sendo 3 nM e foi utilizado para calcular valores de Ki para todos os compostos testados.

Os ensaios de fixação foram levados a cabo utilizando um instrumento Scintillation Proximity Assay (Amersham) com esférulas de aglutinina de gérmen de trigo (WGA) bloqueadas previamente com BSA (ICN) a 1% livre de ácido gordo. O tampão de fixação continha Hepes a 25 mM, pH 7,4, CaCL2 a 2,5 mM, MgCL2 a 1 mM, BSA (ICN) a 0,1% livre de ácido gordo, tween-20 a 0,003%, e Roche Complete Inhibitors sem EDTA. O péptido 1 semelhante ao glucagon foi dissolvido em PBS a 1 mg/mL e imediatamente congelado a -80 graus Celsius em aliquotas de 30 yL. A aliquota de péptido semelhante ao glucagon foi diluida e utilizada em ensaios de fixação no intervalo de uma hora. Os compostos de teste foram dissolvidos em DMSO e diluídos em série em DMSO. Transferiram-se 10 yL de compostos diluídos ou de DMSO para placas de ensaio opacas de fundo transparente Corning 3632, contendo 90 yL de tampão de fixação de ensaio ou péptido 1 semelhante ao glucagon frio (NSB a 1 yM final) . Foram adicionados 50 yL de 125I-péptido 1 semelhante ao glucagon 111 ΡΕ1951659 (0,15 nM final na reacção) , 50 yL de membranas (600 pg/poço) , e 40 pL de esférulas WGA (150 pg/poço) , cobriram-se, e misturou-se por inversão. As placas foram lidas com um instrumento MicroBeta após 14 horas de tempo de repouso à temperatura ambiente.

Os resultados foram calculados como a percentagem da fixação especifica do 125I-péptido 1 semelhante ao glucagon na presença de composto. A dose EC5o absoluta do composto foi derivada por regressão não linear da percentagem de fixação especifica do 125I-péptido 1 semelhante ao glucagon em relação à dose de composto adicionado. A dose EC50 foi convertida em Ki utilizando a equação de Cheng-Prusoff (Cheng Y., Prusoff W. H., Biochem. Pharmacol. 2_2, 3099-3108, 1973).

Ensaio do Antagonista Funcional cAMP Estimulado por Glucagon. O ensaio funcional de cAMP utilizou a mesma linhagem celular do receptor do glucagon humano clonado isolado para o ensaio de fixação do hGlucR descrito acima. As células foram estimuladas com uma mistura de uma dose ECso de glucagon na presença de composto. A cAMP gerada nas células foi quantificada utilizando "Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assai", Alfa Screen, de Perkin Elmer (6760625R). De forma breve, a cAMP nas células compete para a fixação de cAMP biotinilada proveniente do estojo de componentes para uma esférula "Acceptor" revestida com 112 ΡΕ1951659 anticorpo anti-cAMP e uma esférula "Donor" revestida com estreptavidina. À medida que o nivel de cAMP na célula aumenta, ocorre a disrupção do complexo esférula Acceptor-cAMP biotinilada-esférula Donor e diminui o sinal. 0 glucagon foi dissolvido em HC1 a 0,01 N a 1 mg/mL e imediatamente congelado a -80 graus Celsius em aliquotas de 30 pL. A aliquota de glucagon foi diluída e utilizada no ensaio funcional no intervalo de uma hora. As células foram colhidas a partir de placas de cultura de tecidos sub-confluente com solução de dissociação de células livre de enzima, (Specialty Media 5-004-B). As células foram transformadas em pastilhas a baixa velocidade e lavadas 3 vezes com tampão de ensaio [Hepes a 25 mM em HBSS com Mg e Ca (GIBCO, 14025-092) com (ICN) a 0,1% livre de ácido gordo] e então diluídas para uma concentração final de 250 000 células por mL. Os compostos foram diluídos em série em DMSO e então diluídos em tampão de ensaio com uma concentração de 3 x de glucagon e DMSO a 3%. A ECso do glucagon foi pré-determinada a partir de uma dose que provoca a resposta total do glucagon, e representa a dose à qual o glucagon produz 80% da resposta máxima do glucagon. Foi preparada em Tampão de Ensaio uma mistura de cAMP biotinilada (1 unidade/poço no final) proveniente do "Alpha Screen Kit" e 3 x IMBX (1500 μΜ) . O ensaio funcional foi realizado em Placas Costar (3688) com 96 poços, de baixo volume, brancas, em poliestereno. A mistura de cAMP biotinilada/lBMX, 0,02 mLs, foi colocada em cada poço, seguida da adição de 0,02 mLs de 113 ΡΕ1951659 dose de resposta do glucagon, cAMP de curva padronizada, ou misturas de composto/glucagon. A reacção foi iniciada pela adição de 0,02 mLs de células (5000/poço no final). Após 60 minutos à temperatura ambiente, a reacção fooi parada pela adição de 0,03 mLs de Tampão de Lise [Hepes a 10 mM, pH 7,4, NP40 a 1%, e BSA (ICN) livre de ácido gordo a 0,01% contendo 1 unidade por cada poço de esférulas "Acceptor" e "Donor" provenientes do estojo de componentes Alpha Screen] . A adição de Tampão de Lise foi realizada sob uma luz verde para impedir a lixiviação das esférulas de detecção. As placas foram envolvidas em película e deixadas para equilibrarem de um dia para o outro à temperatura ambiente. As placas foram lidas num instrumento Packard Fusion™-a.

As unidades "Alpha Screen" foram convertidas em pmole de cAMP geradas por poço com base na curva padronizada da cAMP. As pmole de cAMP produzidas na presença de composto foram convertidas em % de uma resposta máxima com a dose de ECso do glucagon sozinho. Em cada experiência foi determinada a dose de glucagon necessária para produzir uma resposta de 50% de pmole de cAMP. Esta dose de EC5o foi utilizada para normalizar os resultados para um Kb utilizando uma equação modificada de Cheng-Prusoff (Cheng Y., Prusoff W. H., Biochem. Pharmacol. 22_, 3099-3108, 1973), onde Kb = (EC50 do composto)/[1 + (pM de glucagon utilizado/EC50 em pM para a dose de resposta do glucagon)].

Os compostos de acordo com a invenção têm preferencialmente um valor de Ki não maior do que 50 μΜ 114 ΡΕ1951659 conforme determinado pelo Ensaio de Fixação do Receptor de Glucagon (hGlucR) aqui divulgado. Mais preferencialmente, os compostos de acordo com a invenção têm um valor de Ki de menos do que 5 μΜ, preferencialmente de menos do que 500 nM e ainda mais preferencialmente de menos do que 100 nM como determinado pelo Ensaio de Fixação do Receptor de Glucagon (hGlucR) aqui divulgado. Geralmente, os compostos de acordo com a invenção apresentam uma maior afinidade para o receptor do glucagon em comparação com o receptor GLP-1, e, preferencialmente, têm uma maior afinidade de fixação para o receptor do glucagon do que para o receptor do GLP-1. A totalidade dos exemplos aqui proporcionados tem um valor de Ki de menos do que 5 μΜ.

Os resultados estão apresentados abaixo para o composto indicado.

Quadro 1:

Lisboa, 6 de Setembro de 2010

Claims (11)

1. ΡΕ1951659 1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto estruturalmente representado pela fórmula (I)

   0) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável em que: T é independentemente carbono (substituído com hidrogénio ou os substituintes opcionais como indicado), ou azoto; Ri e R2 são independentemente -H ou -halogéneo; r3 é -alquilo(Ci-Cg) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -alcenilo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -cicloalquilo (C3-C7) , -al-quil (Ci-C6)-cicloalquilo (C3-C7) , ou cicloalquil (C3-C7) -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); r4 e R5 são independentemente -H, -halogéneo, -hidroxilo, -hidroximetilo, -CN, -alcoxilo(C1-C7) , -alcenilo (C2-C7) , ou -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); ΡΕ1951659 2 Re é R7

   em que a marca em zig-zag mostra o ponto de ligação à molécula parental; R7 e R8 são independentemente -H, -halogéneo, -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halo-géneos), -alcoxilo (Ci-C6) / -cicloalquilo (C3-C7) , -C(0)Rio/ -COORio, -OC(0)Rio, -OS(O)2Ri0, -SRio, -S(0)Rio, -S(0)2Rio, ou -O-alcenilo (C2-C7) ; Rg é independentemente -H, halogéneo, -CN, -cicloalquilo (C3-C7) , -C(0)Rio, -COORio, -OC(0)Rio, -OS(0)2Rio, -SRio, -S (0) Rio, -S(0)2Rio, ou -O-alcenilo (C2-C7) , -alcoxilo (C1-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); Rio é independentemente em cada ocorrência -hidrogénio, ou -alquilo(Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); e Rn é independentemente -H, -alquilo (Ci-C8) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alceni-lo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); 3 ΡΕ1951659 no entanto com a condição de que se Rn é -alquilo (Ci-Cs) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) , ou -al-cenilo (C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) então R3 é a mesma espécie de Rn; ou Rn e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam um anel cicloalquilo tendo cinco carbonos (em que opcionalmente o anel cicloalquilo tendo cinco carbonos pode conter uma ligação dupla).
2. 2. Composto ou sal da Reivindicação 1, em que T é independentemente carbono (substituído com hidrogénio ou os substituintes opcionais como indicado), ou azoto; Ri e R2 são -H; R3 é -alquilo(Ci-Cs) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -alcenilo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -cicloalquilo (C3-Ce) , -al-quil (Ci-C6)-cicloalquilo (C3-C6) , ou -cicloalquil (C3-C6) -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) ; R4 e R5 são independentemente -H, -halogéneo, ou -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) ; 4 ΡΕ1951659 Re é

   R7 -R9 em que a marca em zig-zag mostra o ponto de ligação à molécula parental; R7 e R8 são independentemente -H, -halogéneo, -alquilo (C1-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halo-géneos) , -alcoxilo (C1-C3) ; R9 é independentemente -H, halogéneo, ou -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); e Rn é independentemente -H, -alquilo(Ci-Ce) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alceni-lo(C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); no entanto com a condição de que se Rn é -alquilo (Ci-Cs) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -al-cenilo (C2-C7) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) então R3 é a mesma espécie de Rn; ou Rn e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam um anel cicloalquilo tendo cinco carbonos (em que opcionalmente o anel cicloalquilo tendo cinco carbonos pode conter uma ligação dupla). 5 ΡΕ1951659
3. 3. Composto ou sal da Reivindicação 1, em que Ri e R2 são -H; r3 é -alquilo(Ci-Cs) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) , -alcenilo(C2-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -cicloalquilo (C3_Ce) , -al-quil (Ci-C6)-cicloalquilo (C3-C6) , ou -cicloalquil (C3-C6) -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) ; r4 e R5 são independentemente -H, -halogéneo, ou -CH3 (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); Re é

   R7~ R9 em que a marca em zig-zag mostra o ponto de ligação à molécula parental; R7 e Rg são independentemente -H, ou -halogéneo; Rg é independentemente -alquilo(C1-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); e Rn é independentemente -H, -alquilo (Ci-Cg) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -alceni- 6 ΡΕ1951659 lo (C2-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); no entanto com a condição de que se Rn é -alquilo (C1-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), ou -al-cenilo (C2-C3) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) então R3 é a mesma espécie de Rn; ou Rn e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam um anel cicloalquilo tendo cinco carbonos (em que opcionalmente o anel cicloalquilo tendo cinco carbonos pode conter uma ligação dupla).
4. 4. Composto ou sal da Reivindicação 1, em que T é independentemente carbono (substituído com hidrogénio ou os substituintes opcionais como indicado); Ri e R2 são -H; R3 é -alquilo (Ci-Cs) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos), -cicloalquilo (C3-C6) , -alquil (Ci-Cô)-cicloalquilo (03-0β) , ou -cicloalquil (C3-C6) -alquilo (Ci-C6) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); R4 e R5 são -CH3 (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos) e cada um ocupa uma posição adjacente a R6 no anel fenilo ao qual R6 está ligado; Re é 7 ΡΕ1951659

   em que a marca em zig-zag mostra o ponto de ligação à molécula parental; R7 e R.8 são -H; e R9 é independentemente -alquilo(Ci-Cô) (substituído opcionalmente com 1 a 3 halogéneos); e Rn é -H.
5. 5. Composto ou sal da Reivindicação 1, em que Ri e R2 são independentemente hidrogénio ou halogéneo; R3 é metilo, etilo, propilo, 2-propenilo, iso-propilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, 3,3-dimetilbutilo, 2-metilpropilo, 3-metil-butilo, terc-butilo, 4-metilpentilo, 2,2-dimetilpropilo, 3-trifluoropropilo, 4-trifluorobutilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ou ciclo-hexilo; R4 e R5 são independentemente hidrogénio, metilo, etilo, terc-butilo, ciclo-hexilo, pentilo, isopropoxilo, cloreto, fluoreto, brometo, hidoxilo, trifluorometilo, -CN, metoxilo, hidroximetilo, 4-metilpentiloxilo, ou pentilo-xilo; ΡΕ1951659 R7 e Rs são independentemente hidrogénio, fluore-to, cloreto, metilo, etilo, pentilo, isopropilo, terc-butilo, trifluorometilo, acetilo, 2-metilpropilo, metoxilo, ciclo-hexilo, ou trifluorometoxilo; Rg é hidrogénio, brometo, fluoreto, metilo, terc-butilo, trifluorometilo, ou isopropilo; e Rn é -H, metilo, etilo, propilo, ou 2-propenilo, (com a condição de que quando Rn é metilo, etilo, propilo, ou 2-propenilo, então R3 é a mesma espécie de Rn) , ou Rn e R3 conjuntamente com o carbono ao qual estão ligados formam ciclopentilo, ou ciclopent-3-enilo.
6. 6. Composto da Reivindicação 1, seleccionado a partir do grupo consistindo das fórmulas XI a X22;

   9 ΡΕ1951659 (continuação) Número da Fórmula Estrutura X3 X4 rr^°H X5 Lf F 1 0 ® X6 JLf FX^Yí5ÍSvj| I O O ^Q^n^oh X7 F F r^T] ] ? ϊ X8 FvT ftTí Q o l^Sr^ í^An^^QH IA ^JlJ H 10 ΡΕ1951659 (continuação) Número da Fórmula Estrutura X9 H X10 7VY j o o Xll X12 F P FV) o o X13 /v^ 9 0 rx^oH Ί F F F XI4 F F p^Y^j j 0 O 11 ΡΕ1951659 (continuação) Número da Fórmula Estrutura X15 F F 0 O F ii JL ^ ^A XI6 p F 0 o XI7 XI8 F A fVi I 9 5 XI 9 F r (?Vi ! S 2 X2 0 ><Ι^ώ0^Χ)^^οΗ 12 ΡΕ1951659

   ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
7. 7. Composto da Reivindicação 1 seleccionado a partir do grupo consistindo de: Ácido 3 —{4 —[1-alil-l - (4'-trifluorometil-bifenil-4-iloxime-til)-but-3-enil]-benzoilamino}-propiónico ; Ácido 3 —{4 —[1-alil-l-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bife- nil-4-iloximetil)-but-3-enil]-benzoilamino}-propiónico; Ácido 3-{4-[2-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilόχι) -1,1-dimetil-etil]-benzoilamino}-propiónico ; Ácido 3—{4—[1—(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-1-etil-propil]-benzoilamino}-propiónico; 13 ΡΕ1951659 Ácido 3—{4—[1—(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-ciclopent-3-enil]-benzoilamino}-propiónico; Ácido 3—{4—[1—(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-ciclopentil]-benzoilamino}-propiónico; Ácido 3-{4-[l-propil-l-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloxi-metil)-butil]-benzoilamino}-propiónico ; Ácido 3—{4—[1—(4’-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-he-ptil]-benzoilamino}-propiónico racémico; Ácido 3—{4—[1— (4'-terc-butil-bifenil-4-iloximetil)-heptil]--benzoilamino}-propiónico racémico; Ácido 3—{4—[1- (4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloxi-metil)-3-metil-butil]-benzoilamino}-propiónico racémico Ácido 3—{4—[1-(4'-terc-butil-bifenil-4-iloximetil)-butil]-benzoilamino}-propiónico racémico; Ácido 3—{4—[1—(41-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-butil] -benzoilamino}-propiónico racémico; Ácido 3—{4—[1— (41-terc-butil-bifenil-4-iloximetil)-5,5,5-trifluoro-pentil]-benzoilamino}-propiónico racémico; 14 ΡΕ1951659 Ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-3-metil—ibutil]-benzoilamino}-propiónico racémico; Ácido 3—{4—[1—(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-he- ptil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 1; Ácido 3-{4-[1-(4'-trifluorometil-bifenil-4-iloximetil)-he-ptil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 2; Ácido 3-{4-[1- (4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloxi-metil)-3-metil-butil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 1; Ácido 3-{4-[1- (4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloxi-metil)-3-metil-butil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 2; Ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-3-metil-butil]-benzoilamino}-propiónico, isóme ro 1 ; Ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-3-metil-butil]-benzoilamino}-propiónico, isóme ro 2 ; Ácido 3-{4-[1-(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico racémico; Ácido 3-{4-[1- (4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloxime-til)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico racémico; 15 ΡΕ1951659 Ácido 3-(4 —{1—[6-(4-trifluorometil-fenil)-piridin-3-iloxi-metil]-butil}-benzoilamino)-propiónico racémico; Ácido 3—{4—[1—(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-4,4,4-trifluoro-butil]-benzoilamino}-propiónico racémico; Ácido 3—{4—[1—(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico, isóme-ro 1 ; Ácido 3—{4—[1—(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico, isóme-ro 2; Ácido 3-{4-[1-(4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloxi-metil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 1; Ácido 3 —{4 — [1- (4'-terc-butil-2,6-dimetil-bifenil-4-iloxi- metil)-2-metil-propil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 2; Ácido 3—{4—[1—(2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-4,4,4-trifluoro-butil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 1; e Ácido 3-{4-[1- (2,6-dimetil-4'-trifluorometil-bifenil-4-ilo-ximetil)-4,4,4-trifluoro-butil]-benzoilamino}-propiónico, isómero 2; 16 ΡΕ1951659 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que o termo "isómero 1" se refere ao primeiro isómero eluido da coluna de separação quiral e "isómero 2" se refere ao sequndo.
8. 8. Composição farmacêutica que inclui um composto ou sal de qualquer das Reivindicações 1-7 e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
9. 9. Composto de qualquer uma das Reivindicações 1-7, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização como um medicamento.
10. 10. Composto com a fórmula (I), ou um seu sal, como reivindicado em qualquer uma das Reivindicações 1-7, para utilização no tratamento da diabetes, obesidade, hiperglicemia, aterosclerose, doença cardíaca isquémica, acidente vascular cerebral, neuropatia, e cura inadequada de ferimentos.
11. 11. Composto de acordo com a Reivindicação 10, ou um seu sal, para utilização no tratamento da Diabetes do Tipo 2. Lisboa, 6 de Setembro de 2010