PT1018345E

PT1018345E - Composições secas solúveis em água

Info

Publication number: PT1018345E
Application number: PT99926788T
Authority: PT
Inventors: Chikamasa Yamashita; Masaaki Odomi
Original assignee: Otsuka Pharma Co Ltd
Priority date: 1998-06-26
Filing date: 1999-06-24
Publication date: 2009-01-23
Also published as: EP1018345A4; US6337067B1; KR100652943B1; ATE416790T1; JP4332694B2; DE69940051D1; EP1018345A1; KR20010023269A; WO2000000221A9; ES2317695T3; CN100341575C; CA2301889C; US6479048B2; HK1028738A1; CN1272795A; ID24279A; WO2000000221A1; AU760940B2; DK1018345T3; AU4392899A

Description

1 DESCRIÇÃO "COMPOSIÇÕES SECAS SOLÚVEIS EM ÁGUA"

DOMÍNIO TÉCNICO A invenção presente dia respeito à utilização de um inibidor que inibe eficazmente a formação de espumas (formação de bolhas) provocada quando se dissolve uma composição seca, e a uma composição seca solúvel em água que inclui o inibidor de formação de espumas de modo a ê significativamente inibida a formação de espumas (formação de bolhas).

ESTADO DA TÉCNICA ANTERIOR

Nas composições secas contendo substâncias proteicas farmacologicamente activas a título de ingredientes activos, têm sido convencionalmente utilizados diversos sacáridos a título de estabilizadores dos ingredientes activos (vejam-se as Publicações Não Examinadas de Patentes Japonesas Nos. 92619/1983, 48933/1985 e 138222/1990).

As composições secas convencionais de substâncias proteicas farmacologicamente activas contendo sacáridos, no entanto, tendem a " dar espumas intensas quando são dissolvidas na altura da sua utilização, dependendo da quantidade de sacáridos contida nelas. A formação de espumas pode provocar problemas tais como uma avaliação ou 2 identificação errónea de materiais estranhos insolúveis, a introdução de bolhas numa seringa em conjunto com a solução aquando da preparação de uma solução para injecção, ser necessário um maior período de tempo para a preparação da solução, etc.

Para além disto, no caso em que se liofilizam as soluções das composições medicinais que contenham sacãridos, os bolos de material liofilizado que se obtêm são susceptíveis a um encolhimento, de que resulta uma deterioração da sua aparência como fãrmacos. Para além disto, quando se mistura uma quantidade excessiva de sacãridos com uma preparação, é inevitavelmente necessário um período prolongado para a liofilização.

Os WO 97/23.239 e WO 94/11.465 descrevem composições farmacêuticas secas que incluem aminoãcidos, por exemplo com objectivos de estabilização.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

Um objecto da invenção presente é inibir de forma eficaz a formação de espumas provocada quando se dissolve uma composição seca convencional contendo um sacãrido. Outro objecto da invenção presente é proporcionar uma composição seca em que a formação de espumas que se observa em geral na altura em que se voltam a dissolver as composições secas esteja eficazmente inibida. 3

Os inventores levaram a cabo um estudo extensivo para conseguirem os objectos acima. Em consequência, os inventores verificaram que um grupo de aminoácidos tem características que conduzem a uma inibição eficaz da formação de espumas aquando da dissolução das composições secas convencionais contendo sacáridos, em particular, de composições secas contendo sacáridos e substâncias proteicas farmacologicamente activas, e que seja possível preparar uma composição seca pretendida isenta dos problemas mencionados acima utilizando os aminoácidos a título de inibidores de espumas. A invenção presente foi conseguida com base nos novos factos listados acima. A invenção presente proporciona especificamente um inibidor de espumas contendo aminoácidos hidrofóbicos a título de ingrediente essencial, que é adequado para inibir a formação de espumas habitualmente observada quando se dissolve uma composição seca convencional contendo um sacárido. A invenção inclui os seguintes modos de concretização: 1. A utilização de um sal de um aminoácido hidrofóbico tendo um índice de hidropatia com um dos valores seguintes, não inferior a 2, não inferior a 2,8, não inferior a 3,8 ou de 3,8-4,5, a título de inibidor de espumas. 4 2. A utilização tal como se definiu acima, em que o aminoãcido hidrofõbico seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por valina, leucina, isoleucina e fenilalanina. 3 . A utilização tal como se definiu acima, em que a concentração de aminoãcido hidrofóbico seja de entre 1-100 %, em peso, com base em 100 %, em peso, do sacárido contido na composição seca. 4. A utilização tal como se definiu acima, em que o sacárido seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o grupo constituído por sacarose, maltose, lactose, trehalose, manitol, xilitol, dextrana e sulfato de condroitina. 5. A utilização tal como definida acima cuja composição seca objecto seja uma composição liofilizada. A invenção presente proporciona para além disto uma composição seca solúvel em água contendo uma substância proteína farmacologicamente activa, um sacárido e um aminoácido hidrofóbico com um índice de hidropatia não inferior a cerca de 2, em que a concentração do aminoãcido hidrofóbico seja de entre 0,05 %, em peso, e menos do que 4 0 %, em peso, com base na quantidade total de composição 5 seca. Incluem-se nas composições secas solúveis em água da invenção, os seguintes tipos de concretização. a. Uma composição seca solúvel em água na qual um aminoãcido hidrofóbico tenha um índice de hidropatia com um valor qualquer não inferior a 2,8, não inferior a 3,8 ou de 3,8 a 4,5 b. Uma composição seca solúvel em água na qual o sacãrido seja pelo menos uma espécie de entre o conjunto constituído por sacarose, maltose, lactose, trehalose, manitol, xilitol, dextrana e sulfato de condroitina. c. Uma composição seca solúvel em água que contenha pelo menos uma substância farmacologicamente activa seleccionada de entre o conjunto constituído por polipéptidos antivirais, polipéptidos imunomoduladores e polipéptidos hematínicos. d. Uma composição seca solúvel em água na qual a substância farmacologicamente activa seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por polipéptidos antivirais, polipéptidos imunomoduladores e polipéptidos hematínicos, e o sacãrido seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por dissacãridos, álcoois de açúcares e polissacáridos. 6 e. Uma composição seca solúvel em água na qual a concentração do aminoãcido hidrofóbico esteja compreendida entre 1-10 %, em peso, com base num peso de 100 %, em peso, do sacãrido contido na composição seca solúvel em água. f. Uma composição seca solúvel em água na qual a concentração do aminoãcido hidrofóbico esteja compreendida entre 0,1-30 %, em peso, com base na quantidade total de composição seca. g. Uma composição seca solúvel em água na qual a concentração do aminoãcido hidrofóbico esteja compreendida entre 2-50 %, em peso, com base em 100 %, em peso, do sacãrido.' h. Uma composição seca solúvel em água na qual a concentração do aminoãcido hidrofóbico esteja compreendida entre 0,5-30 %, em peso, com base na quantidade total da composição seca. i. Uma composição seca solúvel em água na qual a substância farmacologicamente activa seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por constituído por polipéptidos antivirais, polipéptidos imunomoduladores e polipéptidos hematínicos, e o sacãrido seja pelo menos uma espécie 7 selecciònada de entre o conjunto constituído por dissacãridos, álcoois de açúcares e polissacãridos. j . Uma composição seca solúvel em água na qual a substância proteica farmacologicamente activa seja interleuquina e/ou interferão, e o sacárido seja um dissacãrido. k. Uma composição seca solúvel em água na qual a uma composição liofilizada. l. Uma composição seca solúvel em água que seja substancialmente isenta de albuminas do soro humano, mas contenha um aminoácido polar com um índice de hidropatia não superior a 0, e um tensioactivo.

De acordo com a invenção, é possível inibir eficazmente a ocorrência de espumas que tenham tendência a ocorrer quando se dissolve uma composição seca contendo um sacárido e preparar uma solução excelente no que toca à sua limpidez. Para além disto, mesmo no caso em que se empregue uma liofilização a. título de passo de desidratação, é possível impedir efectivamente o encolhimento dos bolos liofilizados, obtendo-se deste modo produtos secos excelentes no que toca à sua aparência.

Para além disto, nas composições secas da invenção, em particular nos produtos liofilizados, o 8 conteúdo em humidade é diminuído de modo satisfatório durante um período de tempo mais curto do que o necessário para os produtos liofilizados convencionais que não contenham um aminoácido hidrofóbico com um índice de hidropatia não inferior a cerca de 2. Deste modo, a invenção presente permite diminuir o período de desidratação, no processe total de se preparar uma composição seca, o que é vantajoso na produção industrial. A invenção será descrita em mais pormenor adiante neste documento. (1) Inibidor de espumas A invenção presente proporciona um inibidor de espumas que contém a título de ingrediente essencial um aminoácido hidrofóbico. 0 inibidor de espumas tem as características de inibir eficazmente a formação de espumas habitualmente induzida na altura de se dissolver uma composição seca, em particular uma composição seca contendo um sacãrido.

Os aminoácidos hidrofóbicos utilizados na invenção são aqueles que têm um índice de hidropatia de pelo menos 2 (veja-se "A Simple Method for Displaying the Hydropathic Character of a Protein", Jack Kyte e Russel F. Doolittel, J. Mol. Biol., (1982), 157, 105-132). Quaisquer aminoácidos que possuam a propriedade física acima podem ser usados na invenção, quer sejam ou não aminoácidos constituintes das proteínas. Os aminoácidos podem ser de 9 preferência aqueles que apresentem um indice de hidropatia de cerca de 2,8 ou um valor superior, tais como a valina, a leucina, a isoleucina e a fenilalanina; mais preferivelmente aqueles que apresentem um índice de hidropatia de cerca de 3,8 ou maior tais como a valina, a leucina e a isoleucina; e ainda mais preferivelmente aqueles que possuam um índice de hidropatia de cerca de 3,8-4,5 tais como a leucina.

Os aminoãcidos hidrofóbicos que se vão utilizar na invenção podem assumir a forma de dipéptidos, tripéptidos, sais ou amidas. Incluem-se nos exemplos de dipéptidos dos aminoãcidos hidrofóbicos a leucil-valina, a isoleucil-valina, a isoleucil-leucina, a leucil-glicina, etc. Incluem-se nos exemplos dos tripéptidos dos aminoãcidos hidrofóbicos a isoleucil-leucil-valina, a leucil-glicil-glicina, etc. Incluem-se nos exemplos dos sais dos aminoãcidos hidrofóbicos os seus sais com um metal alcalino tal como o sódio, o potássio, etc. ou com um metal alcalinoterroso tal como o cálcio, etc.; e um sal de adição destes com um ácido inorgânico tal como um ácido fosfórico, ácido clorídrico, etc. ou com um ácido orgânico tal como um ácido sulfõnico, etc. Incluem-se nos exemplos mais específicos dos aminoãcidos hidrofóbicos um sal ácido hidrofóbico da amida L-leucica, o bromidrato da L- isoleucil^-naftilamida, a L-valina-p-naftilamida, etc.

Estes aminoãcidos hidrofóbicos (incluindo aqueles que assumem a forma de um sal ou de uma amida) podem ser 10 utilizados por si sõs, mas podem utilizar-se dois ou mais tipos destes em combinação. O objecto dos inibidores de espumas da invenção são composições secas contendo sacãridos.

Os sacãridos que se vão utilizar na invenção não são limitados, e incluem-se nos exemplos deles os que são convencionalmente utilizados como estabilizadores ou a título semelhante nas composições medicinais secas, em especial as composições medicinais contendo substâncias proteicas farmacologicamente activas. Mais especificamente, incluem-se nos exemplos dos sacãridos dissacáridos tais como a sacarose, a maltose, a lactose, a trehalose, etc.; álcoois de açúcares tais como o manitol, o xilitol, etc.; e polis sacãridos tais como a dextrana 40, a dextrana 70, o sulfato de condroitina, etc. Estes sacãridos podem estar contidos numa composição seca por si sós, mas podem usar-se dois ou mais diferentes em combinação. Os sacãridos preferíveis para serem utilizados na invenção são dissacáridos tais como a sacarose, a maltose, a lactose, a trehalose, etc.; entre os quais é mais preferida a sacarose.

As concentrações dos sacãridos na composição seca não são limitadas desde que as espumas sejam provocadas aquando da dissolução das composições secas convencionais. Embora as concentrações ' variem dependendo do tipo de sacárido contido, a concentração de um dissacãrído tal como a sacarose, por exemplo, pode específica e habitualmente 11 ser de 10-90 %, em peso, em alguns casos 20-80 %, em peso, ou em alguns casos 40-80 %, em peso, com base em 100 %, em peso, da composição seca.

Os inibidores de espumas da invenção são adequadamente utilizados nas composições secas que contêm substâncias proteicas farmacologicamente activas a titulo de ingredientes activos.

As substâncias proteicas farmacologicamente activas a utilizar na invenção podem ser proteínas ou péptidos (incluindo polipéptidos) que possuem actividades farmacológicas, e incluem-se nos exemplos delas proteínas tais como um enzima, hemoglobina, imunoglobulina, uma hormona, um factor de coagulação do sangue, etc.; e polipéptidos tais como polipéptidos antivirais (por exemplo os interferões, -a, . -β, -γ, etc.), polipéptidos imunomoduladores (por exemplo interleuquinas 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, etc..), polipéptidos hematínicos (por exemplo eritropoietina, factor estimulante de colónia de granulócitos, factor estimulante de macrófagos e factor estimulante de colónias de granulócitos e de macrófagos), etc. Estes polipéptidos podem estar contidos na composição seca por si sós, mas também poderão utilizar-se dois ou mais deles em combinação.

As proteínas e os péptidos acima incluem respectivamente aqueles que existam na natureza, os produzidos por uma técnica de recombinação genética ou por síntese química. 12 A concentração da substância proteica farmacologicamente activa na composição seca não é limitada. Podem ser especificamente exemplos da concentração, embora a concentração varie na dependência do tipo de substância proteica farmacologicamente activa que se utilizar, tipicamente não mais do que 20 %, em peso, em alguns casos 0,00001-10 em peso, em alguns casos 0,0001-10 %, em peso, em alguns casos 0,001-10 %, em peso, e em alguns casos 0,001-5 %, em peso, com base em 100 %, em peso, da composição seca.

As composições secas objecto dos inibidores de espumas da invenção podem além disto conter albuminas de soro humano, aminoãcidos polares ou sais destes compostos (por exemplo aminoãcidos com um índice de hidropatia não superior a 0 ou os seus sais}, sais inorgânicos, gelatinas, tensioactivos, tampões, etc.

Os métodos de utilização dos inibidores de espumas da invenção 'não são limitados, e podem utilizar-se os inibidores de espumas de um modo tal que eles estejam contidos nas composições secas na altura em que são dissolvidas (re-dissolvidas) as composições. Em geral, o inibidor de espumas da invenção é adicionado a uma solução que contém um sacãrido e/ou uma substância proteica farmacologicamente activa antes de se preparar uma composição seca (produto seco) ou são adicionados a uma solução em conjunto com um sacãrido e uma substância proteica farmacologicamente activa. 13 A concentração do inibidor de espumas na composição seca não é limitada, mas pode, em termos de concentração do aminoácido hidrofóbico com base em 100 %, em peso, de composição seca, variar tipicamente entre 0,05 e menos de 40 %, em peso, preferivelmente cerca de 0,1-30 %, em peso, mais preferivelmente cerca de 0,5-30 %, em peso, mais preferivelmente ainda cerca de 1-25 %, em peso, e ainda mais preferivelmente cerca de 2-20 %, em peso. A concentração do aminoácido hidrofóbico por 100 %, em peso, do sacárido, na composição seca, em termos de aminoácido hidrofóbico, é habitualmente na gama de entre 1-100 %, em peso, preferivelmente cerca de 2-50 %, em peso, mais preferivelmente cerca de 3-25 %·, em peso. (2) Composição Seca Solúvel em Água A invenção presente proporciona também uma composição seca solúvel em água contendo o inibidor de espumas que se descreveu acima. A composição seca solúvel em água contém' especificamente pelo menos uma substância proteica farmacologicamente activa, um sacárido e um aminoácido hidrofóbico.

Incluem-se nos exemplos das substâncias proteicas farmacologicamente activas, diversas proteínas e péptidos {incluindo polipéptidos) tal como as que se descreveram acima. As substâncias proteicas farmacologicamente activas que são preferidas incluem as interleuquinas, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8, dos péptidos imunomoduladores, interferões, - 14 α, -β ou -γ de entre os polipéptidos antivirais bem como a eritropoietina. factor de estimulação de colónias de granulócitos, factor de estimulação de colónias de macrófagos e factor de estimulação de colónias de macrófagos e granulõcitos de entre os péptidos hematinicos. Estas substâncias proteicas farmacologicamente activas podem estar contidas nas composições secas por si sós, mas podem utilizar-se dois ou mais destes em combinação. A concentração da substância proteica farmacologicamente activa solúvel em água na composição seca ê tal como se descreveu acima; no entanto, pode alterar-se a concentração dependendo das doenças, da forma de administração dos fãrmacos, etc., de modo a que ela contenha quantidades clinicamente optimizadas dos fãrmacos. O conteúdo em interleuqina ou em interferão na quantidade total de composição seca pode ser, por exemplo, 1-10 x 109 Ul/mg, preferivelmente 1-10 x 108 Ul/mg, mais preferivelmente 1-10 x 107 Ul/mg, 10-8 x 107 Ul/mg e alguns casos, 100-6 x 107 Ul/mg em alguns casos, 100-4 x 107 Ul/mg em alguns casos, 100-3 x 107 Ul/mg em alguns casos, 100-2 x 107 Ul/mg em alguns casos, 100-1 x 107 Ul/mg em alguns casos, 100-2 x iò8 Ul/mg em alguns casos.

Os sacáridos que se utilizarão na invenção não são limitados, desde que eles possam ser tipicamente utilizados como estabilizadores ou de um modo semelhante nas composições medicinais que contenham substâncias proteicas farmacologicamente activas, e incluem-se nos exemplos destes compostos diversos sacáridos tais como os 15 que se descreveram acima. São sacãridos preferidos os dissacãridos tais como a sacarose, a maltose, a lactose, a trehalose, etc.; entre os quais a sacarose e mais preferível. Estes sacãridos são misturados com as composições secas por si sós, mas também se podem utilizar dois ou mais sacãridos deste tipo em combinação. Para além disto, a concentração do sacãrido na composição seca não é limitada, e incluem-se nos exemplos desta concentração aqueles que se mencionaram acima.

Incluem-se nos exemplos do aminoãcido hidrofóbico, tal como se descreveram acima, aqueles que têm um índice hidropãtico de cerca de 2 ou mais, preferivelmente de cerca de 2,8 ou mais, tal como a valina, a leucina, a isoleucina e a fenilalanina; aqueles que têm um índice de hidropatia de cerca de 3,8 ou mais tais como a valina, a leucina e a isoleucina; e aqueles que têm um índice de hidropatia de cerca de 3,8-4,5 tais como a leucina. Os aminoãcidos hidrofóbicos especificados acima podem funcionar como inibirdes de espumas para composições secas que contenham sacãridos. Os aminoãcidos hidrofóbicos podem estar contidos nas composições secas por si sós, mas podem ser utilizadas combinações de dois ou mais destes. Para além disto, a concentração do aminoãcido hidrofóbico na composição " seca não tem qualquer limitação, e os exemplos desta concentração podem ser tais como acima descritos, isto é, na gama de entre 0,05 %, em peso, e não mais do que 4 0 %, em peso, preferivelmente entre cerca de 0.1-30 %, em peso, cerca de 0,5-30 %, em peso, em alguns 16 casos, cerca de 1-25 %, em peso, em algum casos, e cerca de 2-20 %, em peso, em alguns casos. A concentração do aminoãcido hidrofóbico por 100 %, em peso, do sacãrido na composição seca, sob a forma de aminoácido hidrofóbico, é habitualmente de entre 1-100 %, em peso, preferivelmente cerca de 2-50 %, em peso, mais preferivelmente cerca de 3-25 %, em peso.

Podem estar contidos na composição seca da invenção por si sós materiais conhecidos tais como estabilizadores, como por exemplo albuminas de soro humano, aminoãcidos polares com um índice de hidropatia não superior a 0 (.incluindo aqueles que se apresentem sob a forma de um sal ou de uma amida) , sais inorgânicos, gelatinas, tensioactivos, tampões, ou outros semelhantes, mas também se podem utilizar dois ou mais destes em combinação com a finalidade de estabilizar a solução antes da sua secagem, de estabilizar a composição seca depois da secagem e/ou de impedir que os ingredientes activos sejam absorvidos por um contentor, etc. A albumina de soro humana não é sempre necessária na invenção; no entánto, no caso em que ela está contida na composição seca, a sua concentração variará por exemplo tipicamente entre mais do que 0 e não mais do que 30 %, em peso, não mais do que 20 %, em peso, em alguns casos, e não mais do que 10 %, em peso, em alguns casos, com base em 100 %, em peso, da composição seca. 17

No caso em que não se adiciona albumina de soro humano à composição seca, é preferível adicionar-se pelo menos uma espécie seleccionada de entre os aminoácidos polares com um índice de hidropatia não superior a 0 {incluindo os que se apresentam sob uma forma de sal ou de amida), as gelatinas, os tensioactivos, etc.

Incluem-se nos exemplos dos aminoácidos polares com um índice de hidropatia não superior a 0, a glicina, a prolina, a alanina, a arginina, o ácido glutâmico. Podem utilizar-se os aminoácidos polares por si sós, mas também se podem utilizar dois tipos diferentes destes, em combinação. Os aminoácidos polares incluem também aqueles que se encontram sob a forma de um sal ou de uma amida. Incluem-se nos exemplos de um sal de um aminoãcido polar os sais desse aminoãcido com um metal alcalino tal como sódio ou potássio, etc. ou com um metal alcalino-terroso tal como cálcio, etc.; e um sal de adição destes com um ácido inorgânico tal como um ácido fosfórico, ácido clorídrico, etc. ou com um ácido orgânico tal como um ácido sulfónico, etc. São exemplos de aminoácidos polares preferidos a glicina, a prolina, a arginina, o ácido glutâmico e os sais destes, mais especificamente a glicina, o cloridrato de arginina e o glutamato de sódio. A concentração do aminoácido polar não tem qualquer limitação, por exemplo, pode variar tipicamente entre 0,1-50 %, em peso, em alguns casos 0,5-30 %, em peso, - 18 - em alguns casos 1-20 %, em peso, com base em 100 %, em peso, da composição seca. A título de tensioactivo, podem utilizar-se na invenção presente diversos tensioactivos que se utilizam nas preparações farmacêuticas típicas, tais como os tensioactivos aniõnicos, os tensioactivos catiónicos, os tensioactivos não iõnicos e os tensioactivos dipolares. Incluem-se nos exemplos de tensioactivos adequados os tensioactivos não iónicos tais como um éster alifático de polioxietilenossorbitan (por exemplo do tipo dos tensioactivos Tween), trioleato de sorbitan, etc. Neste documento, pode adicionar-se o tensioactivo à composição seca dependendo do tipo de substância proteica farmacologicamente activa na composição seca, isto é, o tensioactivo pode ser desnecessário dependendo do tipo de substância proteica ,'f armacologicamente activa na composição seca. No caso em que é necessário o tensioactivo, a concentração do tensioactivo na composição seca pode variar tipicamente entre 0,0001-20 %·, em peso, em alguns casos entre 0,001-10 %, em peso, e em alguns casos entre 0,001-5 %, em peso.

Os tampões a utilizar na invenção podem ser aqueles que tenham a sua capacidade tampão na gama de valores de pH de pH 6-8, preferivelmente pH 6,5-8, de modo a que uma solução da composição seca tenha um valor de pH adequado para injecção. Os tampões tipicamente utilizados para injecção são empregues, incluindo os tampões baseados em ácidos orgânicos e os tampões baseados em ácidos 19 inorgânicos. Os tampões preferíveis sao os tampões baseados em ácidos orgânicos tais como um tampão de citrato. A composição seca da invenção é preparada por qualquer método de secagem (por exemplo secagem por atomização, liofilização, etc.) sem limitações específicas.

Tomando a liofilização a título de exemplo específico, a composição seca da invenção presente pode ser preparada dissolvendo uma composição contendo pelo menos uma substância proteica farmacologicamente activa, um sacãrido e um aminoãcido hidrofõbico, com as concentrações descritas acima, numa solução para preparações medicinais, seguindo-se uma liofilização pelo método habitual de liofilização.

Dissolve-se a composição seca solúvel em água da invenção na altura' da sua utilização, tipicamente pela adição a ela de água para injecção (água destilada ou água esterilizada). A formação de espumas acontece em geral no caso de composições secas convencionais que não contêm nenhum aminoãcido hidrofõbico dissolvido; no entanto, na invenção presente, a formação de espumas está eficazmente inibida de modo a que se prepara uma solução para injecção com elevada limpidez. Em resultado disto, pode verificar-se sem erro quando exista qualquer substância estranha insolúvel, e, uma vez que não há na prática qualquer formação de espumas, a entrada de bolhas para uma seringa na altura de se puxar a solução para dentro da seringa não acontece com certeza., 20 O encolhimento do bolo de liofilização que é tipicamente provocado pela ausência de um aminoácido hidrofóbico é eficazmente suprimido na invenção presente mesmo através da composição seca solúvel em água preparada por liofilização, de modo que se consegue um melhor aspecto dos fãrmacos. Para além disto, ao misturar o aminoácido hidrofóbico com uma substância proteica farmacologicamente activa contendo também um sacárido, produz-se um efeito de se diminuir significativamente o período de tempo necessário para a liofilização, em comparação com o caso em que não se mistura qualquer aminoácido hidrofóbico na preparação da composição seca. Este efeito é notável em particular quando fazem parte da preparação um dissacárido tal como a sacarose,· e um tampão tal como um tampão de citrato.

Em consequência, atentos os efeitos descritos acima, as composições secas solúveis em água preferidas da invenção são as composições liofilizadas preparadas por liofilização.

MELHOR MODO DE SE LEVAR A CABO A INVENÇÃO A invenção presente será ilustrada adiante mais em pormenor por intermédio dos Exemplos que se seguem. Note-se que a invenção presente não é limitada de forma alguma pelos Exemplos. As abreviaturas utilizadas nos Exemplos são tal como se definem em seguida: 21 IFN: interferão; IL: interleuquina; G-CSF: factor estimulante de colónias de granulócitos.

Exemplos la 4

Em todos os Exemplos, preparou-se uma mistura de uma tal forma que 0,25 mL de uma solução de IFN-a {título: 2 x 107 UI/mL) , 40 mg de sacarose e 5 mg de um aminoãcido (veja-se na Tabela 1 a receita para cada caso) são misturados para 1 frasco (com a capacidade de 1 mL) dissolvendo-os por adição de uma quantidade adequada de água destilada para injecção. Liofilizou-se a mistura utilizando um liofilizador contendo prateleiras (LYOVAC GT-4: LEYBOLD) de acordo com o método que se descreve adiante. <Método de Liofilização> 1. Arrefecem-se as prateleiras depressa de modo a diminuir a temperatura das prateleiras até -40°C. 2. Carregam-se os frascos sobre as prateleiras arrefecidas numa câmara de liofilização, para congelar as misturas dentro dos frascos. 22 3. Manteve-se a temperatura das prateleiras a -40°C durante três horas, e depois começou a diminuir-se a pressão. 4. Depois de a pressão ter sido reduzida atê 0,1 mbar, aumentou-se a temperatura das prateleiras até 20°C ao longo de 2 horas, e depois mantiveram-se estas mesmas condições durante as 8 horas seguintes. 5. Aumentou-se a temperatura das prateleiras até 4 0°C ao longo de 3 0 minutos, seguindo-se mais uma diminuição da' pressão, e depois mantiveram-se estas condições durante mais 2 horas. 6. Diminuiu-se a temperatura das prateleiras para 25 °C ao longo de 3 0 minutos, e depois mantiveram-se estas condições durante 1 hora para completar a liofilização. O aspecto das amostras liofilizadas foi observado bem como a sua formação de espumas, dissolvendo-se amostras com 1 mL da água destilada para injecção. Os resultados estão listados na Tabela 1. 23 cTabela 1>

Preparação índice de Hidropatia dos Aminoácidos Encolhimento Formação de Espumas 1. IFN-α + sacarose + isoleucina 4,5 + ± 2. IFN-α + sacarose + valina 4,2 ± ± Exemplos 3. IFN-α + sacarose + leucina 3,8 ± ± 4. IFN-oí + sacarose · + fenilalanina 2,8 + + 1. IFN-α + sacarose - +++ + + -S- 2. IFN-α + sacarose + glicina "tf O J ++ +++ Exemplos de comparação 3. IFN-oí + sacarose + prolina t£> H 1 ++ +++ 4. IFN-oí + sacarose + cloridrato de arginina -4,5 +++ +++ O encolhimento e a capacidade de formação de espumas foram avaliados ' de acordo com os seguintes critérios:

Encolhimento: ± o bolo liofilizado sofria um encolhimento muito moderado. 24 + o bolo liofilizado sofria um encolhimento moderado. ++ o bolo liofilizado sofria um encolhimento considerável. +++ o bolo liofilizado sofria um encolhimento muito forte.

Capacidade de formação de espumas: + formação de espumas muito moderada. + formação de espumas moderada. ++ formação de espumas considerável. +++ formação de espumas muito forte.

Tal como é aparente a partir da Tabela 1, as capacidades de formação de espumas dos bolos liofilizados contendo sacarose na altura de se dissolverem foram eficazmente suprimidas pela utilização dos aminoácidos hidrofóbicos com um índice de hidropatia não inferior a 2, e a aparência do produto era consideravelmente melhorada em consequência da supressão do encolhimento.

Exemplos 5-8

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 1-4, excepto que se utilizaram 0,25 mL dê uma solução de IL-1oí (título: 2 x 108 IU/mL) em vez da solução de IFN-a.

Exemplos 9-12 25

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 1-4, excepto que se adicionou também 1 mg de um tensioactivo não iónico (Tween 80) .

Exemplos 13-16

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 1-4, excepto que se adicionou também 3 mg de glicina que é um aminoãcido polar.

Exemplos 17-20

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nós Exemplos 1-4, excepto que se utilizaram 0,25 mL de solução de IFN-γ (titulo: 2 x 107 UI/mL) em vez da solução de IFN-α a granel, e se adicionou uma solução tampão 30 mM de citrato a título de tampão.

Exemplos 21-24

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 1-4, excepto que se utilizaram 40 mg de trehalose em vez de 40 mg de sacarose.

Exemplos 25-28

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 1-4, excepto que se 26 adicionou a cada um dos Exemplos 1 mg de Tween 80, 3 mg de glicina e tampão citrato 30 mM a titulo de tampão.

Exemplos 29-32

Obtiv'eram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 25-28, excepto que se utilizou tampão fosfato 60 mM em vez da solução de tampão citrato 30 mM, a título de tampão.

Exemplos 33-36

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 25-28, excepto que se utilizou 0,1 mg de Pluronic F-68 (isto é: polioxietileno(160)polioxipropileno(30)glicol; Marca Registada: Adekapluronic F-68; Asahi Denka Kogyo K.K.) em vez de 1 mg do Tween 80.

Exemplos 37-40

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 1-4, excepto que se alterou a quantidade de sacarose de 40 mg para 50 mg, e se adicionou 0,1 mg de Tween 80 e solução de tampão citrato 30 mM.

Exemplo 41 27

Obteve-se uma composição liofilizada da mesma maneira que a descrita no Exemplo 1, excepto que se adicionaram 5 mg de valina, 0,1 mg de Tween 80, e solução de tampão citrato 30 mM.

Exemplo 42

Obteve-se uma composição liofilizada da mesma maneira que a descrita no Exemplo 3, excepto que se adicionaram 5 mg de valina, 0,1 mg de Tween 80, e solução de tampão citrato 45 mM.

Exemplos 43-46

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 25-28, excepto que se utilizou 25 mg de D-manitol em vez de 40 mg de sacarose.

Exemplo 47

Obteve-se uma composição liofilizada da mesma maneira que a descrita no Exemplo 2, excepto que se alterou a quantidade de valina de 5 mg para 15 mg, e se adicionou 1 mg de Tween 80, bem como solução de tampão citrato 25 mM.

Exemplo 48

Obteve-se uma composição liofilizada da mesma maneira que a descrita no Exemplo 3, excepto que se alterou a quantidade de leucina de 5 mg para 3 mg, e se adicionou 28 1 mg de Tween 80,5 mg de glicina e solução de tampão citrato 30 mM.

Exemplos 49-52

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 17-20, excepto que se adicionou 1 mg de Tween 80 e 3 mg de glicina.

Exemplos 53-56

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 43-46, excepto que se utilizou solução de tampão fosfato 60 mM em vez da solução de tampão citrato 30 mM.

Exemplos 57-60

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 25-28, excepto que se alterou a quantidade de solução de IFN-oí (título: 2 x 107 Ul/mL) de 0,25 mL para 1 mL.

Exemplos 61-64

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 25-28, excepto que se alterou a quantidade de solução de IFN-oí (título: 2 x 107 UI/mL) de 0,25 mL para 0,01 mL. 29

Exemplos 65-69

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 1-4, excepto que se alterou a quantidade de sacarose de 40 mg para 25 mg.

Exemplos 70-73

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 1-4, excepto que se alterou a quantidade de sacarose de 40 mg para 80 mg.

Exemplos 74-77

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 25-28, excepto que se utilizou 0,25 mL de uma solução de IFN-β (título: 2 x 107 Ul/mL) em vez da solução de IFN-a.

Exemplos 78-81

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 29-32, excepto que se utilizou 0,25 mL de uma solução de IFN-β (título: 2 x 107 UI/mL) em vez da solução de IFN-a.

Exemplos 82-85

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 33-36, excepto que se 30 utilizou 0,25 mL de uma solução de IFN-β (título: 2 x 107 UI/mL) em vez da solução de IFN-a,

Exemplos 86-89

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 25-28, excepto que se utilizou 0,25 mL de uma solução de IFN-y (título: 2 x 107 UI/mL) em vez da solução de IFN-a.

Exemplos 90-93

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 29-32, excepto que se utilizou 0,25 mL de uma solução de IFN-γ (título: 2 x 107 UI/mL) em vez da solução de IFN-a.

Exemplos 94-97

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 25-28, excepto que se utilizou 0,25 mL de uma solução de eritropoietina (título: 1 x 105 UI/mL) em vez da solução de IFN-a.

Exemplos 98-101

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 29-32, excepto que se utilizou 0,25 mL de uma solução de eritropoietina (titulo: 1 x 105 UI/mL) em vez da solução de IFN-a. 31

Exemplos 102-105

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 25-28, excepto que se utilizou 0,25 mL de uma solução de G-SCF (título: 1 x 107 Ul/mL) em vez da solução de iFN-a.

Exemplos 106-109

Obtiveram-se composições liofilizadas da mesma maneira que a descrita nos Exemplos 29-32, excepto que se utilizou 0,25 mL de uma solução de G-SCF (título: 1 x 107 UI/mL) em vez da solução de ifn-cí.

Os produtos liofilizados contendo os aminoãcidos hidrofóbicos obtidos nos Exemplos 5-109 acima, são respectivamente capazes de suprimir eficazmente a capacidade de formação de espumas durante a re-dissolução de produtos liofilizados, e de melhorar consideravelmente as aparências dos produtos, por impedirem o encolhimento dos bolos liofilizados.

APLICABILIDADE INDUSTRIAL

De acordo com a invenção presente, é efectivamente inibida a formação de espumas tipicamente provocada pela dissolução de composições secas contendo sacáridos, permitindo deste modo que se prepare uma solução excelente no que toca à sua limpidez. Para além disto, mesmo no caso de se utilizar a liofilização a título de 32 método de secagem, os bolos liofilizados obtidos nestes casos estão efectivamente impedidos de encolher, obtendo-se os produtos secos com uma aparência excelente. r ’ . · ·

Nas composições secas da invenção, em particular nas composições liofilizadas, o conteúdo em humidade é reduzido de modo satisfatório, durante um periodo de tempo mais curto do que o necessário para se obterem produtos liofilizados convencionais que não contenham os aminoácidos hidrofóbicos com um indicie de hidropatia não inferior a 2. O período necessário para a liofilização é portanto reduzido no processo de preparação de composições secas, em termos totais, o que é vantajoso na produção industrial.

Lisboa, 13 de janeiro de 2009

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Utilização de um aminoácido hidrofóbico com um índice de hidropatia não inferior a 2 para inibir a formação de espumas induzida aguando da dissolução de uma composição seca que contenha um sacãrido.

2. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o aminoácido hidrofóbico possua um indicie de hidropatia não inferior a 2,8.

3. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o aminoácido hidrofóbico possua um indicie de hidropatia não inferior a 3,8.

4. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o aminoácido hidrofóbico . possua um indicie de hidropatia de entre 3,8 e 4,5.

5. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o aminoácido hidrofóbico seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por valina, leucina, isoleucina e fenilalanina.

6. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que a concentração do aminoácido hidrofóbico se encontre na gama de 1 a 100 %, em peso, com base em 100 %, em peso, de sacãrido contido na composição seca.

7. Utilização de acordo com a reivindicação 6, 2 em que o sacãrido seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por sacarose, maltose, lactose, trehalose, manitol, xilitol, dextrana e sulfato de condroitina.

8. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que a composição seca seja uma composição liofilizada.

9. Uma composição seca solúvel em água, que contenha uma substância proteica farmacologicamente activa, sacárido, e um aminoãcido hidrofõbico com um índice de hidropatia não inferior a 3,8, e a concentração do aminoãcido hidrofóbico seja de entre 0,05 %, em peso, e não mais do que 40 %, em peso, com base na quantidade total de composição seca.

10. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 9, em que o aminoãcido hidrofóbico apresente'um índice de hidropatia de 3,8-4,5.

11. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 9, em que o sacãrido seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por sacarose, maltose, lactose, trehalose, manitol, xilitol, dextrana e sulfato de condroitina.

12. Uma composição seca solúvel em agua de acordo com a reivindicação 9, em que a substância proteica com actividade farmacológica seja pelo menos uma espécie de entre o conjunto constituído por polipéptidos antivirais, 3 polipéptidos imunomoduladores e polipéptidos hematínicos.

13. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 9, em que a substância proteica com actividade farmacológica seja pelo menos uma espécie de entre o conjunto constituído por polipéptidos antivirais, polipéptidos imunomoduladores e polipéptidos hematínicos, contendo pelo menos um sacãrido seleccionado de entre o conjunto constituído por dissacãridos, álcoois de açúcar e polissacãridos.

14. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 9, em que a concentração do aminoácido hidrofõbico seja de entre 1-100 %, em peso, com base em 100 %, em peso, do sacãrido contido na composição seca.

15. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 14, em que a concentração do aminoácido hidrofõbico se encontre numa gama de 0,1-30 %, em peso, com base na quantidade total da composição seca.

16. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 15, na qual a concentração do aminoácido hidrofóbico seja de entre 2-50 %, em peso, com base em 100 %, em peso, do sacárido contido na composição seca.

17. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 15, na qual a concentração do 4 aminoácido hidrofõbico se encontre na gama de entre 0,5-30 %, era peso, com base na quantidade total de composição seca.

18. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 15, na qual a substância proteica farmacologicamente activa seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por polipéptidos antivirais, polipéptidos imunomoduladores e polipéptidos hematínicos, e o sacãrido seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por dissacáridos, álcoois de açúcar e polissacãridos.

19. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 18, na qual a substância proteica farmacologicamente activa seja interleuquina e/ou interferão, e o sacárido seja um dissacárido.

20. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 9, em que a composição seca seja uma composição liofilizada.

21. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 20, em que a substância proteica farmacologicamente activa seja pelo menos uma espécie seleccionada de entre o conjunto constituído por polipéptidos antivirais, polipéptidos imunomoduladores e polipéptidos hematínicos.

22. Uma composição seca solúvel em água de 5 acordo com a reivindicação 21, na qual a substância proteica farmacologicamente activa seja interleuquina e/ou interferão, e o sacárido seja um dissacárido.

23. Uma composição seca solúvel em água de acordo com a reivindicação 9, que seja substancialmente isenta de albuminas de soro humano, mas contenha um aminoácido polar com um índice de hidropatia não superior a 0, e um tensioactivo. Lisboa, 13 de Janeiro de 2009