PL99448B1 - Sposob otrzymywania koncentratu bacillus stearothermophilus w formie suszonej - Google Patents
Sposob otrzymywania koncentratu bacillus stearothermophilus w formie suszonej Download PDFInfo
- Publication number
- PL99448B1 PL99448B1 PL19260976A PL19260976A PL99448B1 PL 99448 B1 PL99448 B1 PL 99448B1 PL 19260976 A PL19260976 A PL 19260976A PL 19260976 A PL19260976 A PL 19260976A PL 99448 B1 PL99448 B1 PL 99448B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- bacillus stearothermophilus
- drying
- concentrate
- hours
- liter
- Prior art date
Links
- 241000193385 Geobacillus stearothermophilus Species 0.000 title claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 14
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 title claims description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 5
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 claims description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 4
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims description 3
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 claims 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims 1
- 210000004215 spore Anatomy 0.000 description 13
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 210000004666 bacterial spore Anatomy 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 1
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania koncentratu bakterii Bacillus stearothermophilus w postaci liofilizowanej lub w proszku. Koncentrat sporów Bacillus stearothermophilus moze byc stosowany jako drobnoustrój testowy przy oznaczaniu antybiotyków metodami dyfuzyjnymi lub ze wzgledu na duza opornosc termiczna moze sluzyc do oznaczania skutecznosci zabiegów sterylizacyjnych. Czulosc bakterii Bacillus stearothermophilus na antybiotyki jest wysoka. Równiez wysokie tempo wzrostu form wegetatywnych i przetr- walnikowych predysponuje do stosowania jako bakterii testowej przyoznaczaniu antybiotyków. Bacillus stearo¬ thermophilus w temperaturze 55—65°C rosnie z szybkoscia wystarczajaca do okreslania stref zahamowania wzrostu przy metodach dyfuzyjnych, juz w czasie okolo 2 godzin. Przetrwalniki Bacillus stearothermophilus gina dopiero przy ogrzewaniu w temperaturze 120—122°C przez 15 minut, dzieki czemu moga sluzyc do kontroli skutecznosci sterylizacji.Znane sa sposoby otrzymywania przetrwalników Bacillus stearothermophilus poprzez zmyw z hodowli powierzchniowych. W tym celu agaryzowane podloze, zawierajace hydrolizat bialkowy, autolizat drozdzowy i glukoze, zaszczepia sie powierzchniowo w butlach Roux. Nastepnie butle inkubuje sie w temperaturze 50—70°C w czasie od kilku do kilkunastu dni. Po zakonczeniu hodowli wyrosniete na powierzchni podloza kolonie bakterii Bacillus stearothermophilus zmywa sie woda jalowa, po czym zmyw ogrzewa sie celem zniszczenia form wegetatywnych bakterii. Do zmywu dodaje sie czynnika ochronnego i poddaje liofilizacji lub suszeniu. Zjednej butli Roux, zawierajacej 1500 mililitrów podloza, mozna uzyskac 10 mililitrów zmywu, zawierajacego okolo 108 przetrwalników w 1 mililitrze. Jest to metoda bardzo pracochlonna, czasochlonna i malo efektywna. Cykl kazdy trwa od kilku do kilkunastu dni.Celem wynalazku jest opracowanie metody, pozwalajacej na zwiekszenie efektywnosci hodowli Bacillus stearothermophilus i uzyskanie liofilizowanego lub suszonego rozpylowo standardowego koncentratu przetrwal¬ ników.Wedlug wynalazku przetrwalniki Bacillus stearothermophilus otrzymuje sie metoda hodowli wglebnej nar-/ 2 99448 podlozu plynnym. W tym celu zawiesina bakterii, otrzymana na podlozu agaryzowanym, zaszczepia sie podloze plynne, zawierajace hydrolizat bialkowy 0,1-3,0%, autolizat drozdzowy 0,05-2,0%, glukoze 0,05-1,0% i prowadzi hodowle w temperaturze 50-70°C w stalym pH = 6,0-8,0 przy ciaglym napowietrzaniu jalowym powietrzem minimum w ilosci 0,1 litra powietrza na 1 litr pozywki w ciagu jednej minuty. Czas hodowli trwa od 6—24 godzin. Hodowla konczy sie w momencie ustalenia sie gestosci optycznej na niezmienionym poziomie, co odpowiada okolo 1 X iO2 bakterii w 1 mililitrze hodowli. Po zakonczeniu hodowli zageszcza sie zawartosc komórek poprzez wnowanie i przetrzymuje w temperaturze 50-70°C przez 24-48 godzin celem zwiekszenia liczby form przetrwalnikujacych, Nastepnie inaktywuje sie formy wegetatywne poprzez pasteryzacje w tempera¬ turze od 80-120°C w czasie od 2 sekund do 30 minut Po czym liofilizuje lub suszy rozpylowo z dodatkiem lub bez dodatku czynnika ochronnego w postaci np. cytrynianów, cukrów, itp. w ilosci 1 —40% w celu przedluzenia przezywalnosci drobnoustrojów w procesie utrwalania. Uzyskany ta metoda suszony koncentrat sporów zawiera okolo 1 X 101 ° zywych form przetrwalnikujacych w 1 gramie. Trwalosc koncentratu przechowywanego bez . dostepu powietrza, jest praktycznie nieograniczona.; Sposób wedlug wynalazku pozwala na skrócenie i zwiekszenie wydajnosci procesu okolo 150 krotnie.Dotychczas znana metoda z 1500 "mililitrów podloza uzyskuje sie okolo 10 mililitrów zmywu, zawierajacego okolo 108 przetrwalników, natomiast w proponowanym przez nas sposobie, te sama ilosc mozna otrzymac z 10 mililitrów podloza. Ponadto metoda jest uproszczona i znacznie mniejszajej pracochlonnosc.Przedmiot wynalazku przedstawiony jest w przykladzie wykonania standardowego liofilizowanego koncen¬ tratu przetrwalników Bacillus stearothermophilus varietes calidolactis. .P r z y k l a d.Hodowle bakterii Bacillus stearothermophilus varietes calidolactis prowadzi sie na wszystkich etapach technologicznych na pozywce plynnej lub z dodatkiem agaru o nastepujacym skladzie: hydrolizat bialkowy 0,5%, autolizat drozdzowy 0,5%, glukoza 0,5%, agar 1,5%. Powyzsze podloze z dodatkiem agaru rozlewa sie do probówek, zaszczepia czysta kultura bakterii Bacillus stearothermophilus varietes calidolactis i inkubuje w temperaturze 62—65°C przez 24 godziny. Wyrosniete na powierzchni podloza kolonie zmywa sie jalowym plynem fizjologicznym, dodajac 5 mililitrów plynu na 1 skos podloza.Z otrzymanej zawiesiny przygotowuje sie zaktywizowana kulture macierzysta, W tym celu przenosi sie ja do 1 litra pozywki plynnej o skladzie: hydrolizat bialkowy 0,5%, autolizat drozdzowy 0,5% i glukoza 0,5%, i napowietrza w ilosci 1 litra powietrza na 1 litr pozywki w czasie 1 minuty. Inkubacje prowadzi sie przez 8 godzin w temperaturze 62-65°C. Uzyskana w ten sposób aktywna kulture macierzysta zaszczepia sie w ilosci 3% jalowa pozywke plynna z dodatkiem mikroelementów: 20 mg MnCl* X 4H20 i po 10 mg MgCl2 X 6 H20 iFeCl2 X 6H20. Hodowle bakterii prowadzi sie wfermentorze produkcyjnym w temperaturze 53-55°C przy stalym pH=6,8 w czasie do 14 godzin przy ciaglym napowietrzaniu. Jalowe powietrze podaje sie w ciagu minuty minimum w ilosci odpowiadajacej objetosci pozywki w fermentorze. Wskaznikiem zakonczenia hodowli jest zmniejszenie tempa przyrostu gestosci optycznej i ustalenie sie na jej poziomie, odpowiadajacym zawartosci bakterii w ilosci okolo 109 w 1 mililitrze oraz osiagniecie poziomu 50% przetrwalników w stosunku do liczby bakterii. Parametry te osiaga sie w czasie do 20 godzin hodowli. Po zakonczeniu hodowli zawiesine komórek zageszcza sie 20-krotnie poprzez wirowanie, nastepnie rozciencza sie objetosciowo woda sterylna w stosunku 1:1. Rozcienczona zawiesine komórek inkubuje sie w temperaturze 62-65°C w czasie 48 godzin w celu uzyskania zwiekszonej ilosci form przetrwalnikowych bakterii. Po uplywie okresu inkubacji celem inaktywacji form wegetatywnych drobnoustrojów zawiesine bakterii pasteryzuje sie w temperaturze 95°C przez 15 minut.Nastepnie dodaje sie 3% laktozy, która spelnia role czynnika ochronnego, liofilizuje lub suszy na wiezy rozpylowej. PL
Claims (1)
1. Zastrzezenie patentowe Sposób otrzymywania koncentratu Bacillus stearothermophilus w formie suszonej poprzez zmyw z hodowli powierzchniowych na podlozu agaryzowanym, inaktywacje form wegetatywnych, dodatek czynnika ochronne¬ go, liofilizacje lub suszenie, znamienny tym, ze zawiesine bakterii Bacillus stearothermophilus, otrzymana na podlozu agaryzowanym, zaszczepia sie podloze plynne, zawierajace hydrolizat bialkowy 0,1—3,0%, autolizat drozdzowy 0,05-2,0%, glukoze 0,05-1,0% i .prowadzi hodowle wlgebna w temperaturze 50-70°C w stalym pH = 6,0-8,0 przyciaglym napowietrzaniu jalowym powietrzem minimum w ilosci 0,1 litra powietrza na 1 litr pozywki w ciagu jednej minuty, w czasie od 6—24 godzin, nastepnie po zakonczeniu hodowli zawiesine komórek poddaje sie wirowaniu, przetrzymuje w temperaturze 50—70°C przez 24—48 godzin, po czym inaktywuje formy wegetatywne, a nastepnie liofilizuje lub suszy rozpylowo, ewentualnie z dodatkiem czynnika ochronnego. ._ .. \ Prac. Poligraf. UP PRL naklad 120+18 Cena 45 zl \. PL
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL19260976A PL99448B1 (pl) | 1976-09-22 | 1976-09-22 | Sposob otrzymywania koncentratu bacillus stearothermophilus w formie suszonej |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL19260976A PL99448B1 (pl) | 1976-09-22 | 1976-09-22 | Sposob otrzymywania koncentratu bacillus stearothermophilus w formie suszonej |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL99448B1 true PL99448B1 (pl) | 1978-07-31 |
Family
ID=19978689
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL19260976A PL99448B1 (pl) | 1976-09-22 | 1976-09-22 | Sposob otrzymywania koncentratu bacillus stearothermophilus w formie suszonej |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL99448B1 (pl) |
-
1976
- 1976-09-22 PL PL19260976A patent/PL99448B1/pl unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Phalip et al. | A method for screening diacetyl and acetoin‐producing bacteria on agar plates | |
| CN106957807B (zh) | 一种地衣芽孢杆菌菌株ta65及其在促进堆肥腐熟中的应用 | |
| CN105558897A (zh) | 一种臭鳜鱼的制作方法 | |
| CN108283310A (zh) | 一种萱草花酵素的制备方法以及酵素原液 | |
| CN109666599A (zh) | 一种罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基及发酵方法、应用 | |
| CN110004090B (zh) | 一种肠膜明串珠菌及其在发酵酸菜中的应用 | |
| CN100364454C (zh) | 一种生产风干牛肉的方法 | |
| CN102550294B (zh) | 一种姬菇菌种的液体发酵培养方法 | |
| CN105132311B (zh) | 利用谷胱甘肽废液生产功能微生物的方法 | |
| Upadhyay et al. | Anaerobic growth of psychrophilic bacteria | |
| US4210672A (en) | Preparation of yogurt | |
| CN101659983A (zh) | 一种芽孢杆菌活菌数量的检测方法 | |
| Sundaram et al. | Characterization of Azospirilla isolated from seeds and roots of turf grass | |
| CN103099162B (zh) | L-乳酸酸菜的制作方法 | |
| CN106434840A (zh) | 一种用于微生物法定量检测维生素b12的微孔板、其试剂盒及其制备方法 | |
| CN109295037A (zh) | 一种采用米曲霉发酵生产乳糖酶的方法及其所产乳糖酶 | |
| PL99448B1 (pl) | Sposob otrzymywania koncentratu bacillus stearothermophilus w formie suszonej | |
| CN108651645A (zh) | 制备发酵茶的方法，用该方法制备的发酵茶及其应用 | |
| CN109234165A (zh) | 一种耐低温酸菜乳酸菌菌种的分离方法 | |
| Grant et al. | Temperature-sensitive glucose fermentation in the obligately psychrophilic yeast Candida gelida | |
| CN103181415B (zh) | 一步发酵法生产水牛奶酪的方法 | |
| CN109321469A (zh) | 一株高产乳糖酶的米曲霉及其发酵产酶方法 | |
| CN108179130A (zh) | 一种高活性粪肠球菌微生物制剂干粉的制备方法 | |
| CN110734873B (zh) | 一种提高凝结芽孢杆菌芽孢数量的方法和应用 | |
| Yildiz et al. | Sporulation and thermal resistance of Bacillus stearothermophilus spores in milk |