PL98154B1 - Sposob otrzymywania n-acylowych pochodnych estrow i/lub oksymow oraz hydrazonow dezalanylotetainy - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób' otrzymywa¬ nia N-acylowych pochodnych estrów i/lub oksy¬ mów oraz hydrazonów dezalanylotetainy o wzorzo ogólnym 1, w którym R1 oznacza atom wodoru, grupe alkilowa, arylowa lub aralkilowa, R2 ozna¬ cza grupe acylowa lub alkilowa, R3 oznacza grupe acylowa, korzystnie a-aminoacylowa lub acyloami- noacylowa, zas Z oznacza atom tlenu, reszte hy- droksyloaminowa lub hydrazynowa, wzglednie ich alkilowe, arylowe lub aralkilowe pochodne.Dotychczas nie sa znane tego typu zwiazki, jak równiez sposób ich otrzymywania.Celem wynalazku jest opracowanie sposobu otrzymywania N-acylowych pochodnych estrów i/lub oksymów oraz hydrazonów dezalanylotetainy, które zachowujac wlasnosci antybiotyczne posiada¬ lyby zwiekszona trwalosc, umozliwiajaca stosowa¬ nie ich jako leki.Sposób otrzymywania N-acylowych pochodnych estrów i/lub oksymów oraz hydrazonów dezalany¬ lotetainy o wzorze 1, w którym R1 oznacza atom wodoru, grupe alkilowa, arylowa lub aralkilowa, a R2 oznacza grupe acylowa lub alkilowa, R3 ozna¬ cza grupe acylowa, korzystnie a-aminoacylowa lub acyloaminoacylowa, zas Z oznacza atom tlenu, re¬ szte hydroksyloaminowa lub hydrazynowa, wzgled¬ nie ich alkilowe lub aralkilowe pochodne, wedlug wynalazku charakteryzuje sie tym, ze na pochod¬ ne dezalanylotetainy o wzorze 2, w którym R1, R2 i Z maja podane wyzej znaczenie, dziala sie po- chodnymi kwasów karboksylowych, zdolnymi do zacylowania grupy aminowej w pochodnych deza¬ lanylotetainy, np. chlorkami kwasowymi, miesza¬ nymi bezwodnikami lub N-karboksybezwodnikami a-aminokwasów. Dezalanylotetaina w skrócie DAT jest mieszanina dwóch stereoizomerycznych sub¬ stancji, zwanych dezalanylotetainami A i B, otrzy¬ mywanych z tetainy, która jest równiez mieszanina dwóch stereoizomerycznych substancji, zwanych tetaina A i^B.Oba skladniki mieszanin posiadaja te same gru¬ py funkcyjne i wykazuja podobna reaktywnosc chemiczna. Pólsyntetyczne pochodne mozna otrzy¬ mac w identyczny sposób zarówno ze skladników A i B, jak tez i z ich mieszaniny.Badajac w 1973 roku dzialanie tetainy na Esche- richia coli i Staphylococus aureus stwierdzilismy, ze jest ona nowym, specyficznym inhibitorem syn¬ tezy prekursorów mureiny. Podobne wyniki osiag¬ neli Kenig, Vandamme i Abraham w 1976 roku badajac dzialanie bacylizyny. Sposród innych an¬ tybiotyków tylko D-cykloseryna, O-karbamylo-D- -seryna i fosfonomycyna sa równiez aktywne na tym stadium biosyntezy mureiny. Tetaina hamu¬ je inkorporacje L-alaniny do kwasu urydynodwu- fosforo-N-acetylomuraminowego. Ta reakcja syn¬ tezy prekursorów mureiny nie jest hamowana przez zaden inny antybiotyk. Unikalne dzialanfe tetainy oraz szerokie spektrum jego dzialania sklo¬ nilo nas do prac nad otrzymywaniem analogów, 98 15498 które zachowujac jej wlasnosci biologiczne bylyby bardziej trwale. Do analogów tych naleza N-acylo- we pochodne dezalanylotetainy.Przedstawione pochodne sa nowymi zwiazkami, totez dowodem na ich uzytecznosc jest udowodnie¬ nie wiekszej trwalosci w stosunku do dotychczas znanej tetainy. Podane w przykladach zwiazki badalismy chromatograficznie podczas przechowy¬ wania w roztworach wodnych w temperaturze 36°C przez okres 2 tygodni, stosujac tetaine jako substancja standardowa. Stwierdzilismy przy tym, ze ulegaja one znacznie wolniej niz tetaina auto- lizie lub przegrupowaniu wewnatrzczasteczkowe- mu, o czym swiadczyla mniejsza ilosc produktów rozpadu. Wniosek ten potwierdzila autobiografia przy zastosowaniu jako szczepu wzorcowego Shi- gella shigae. Ten sam szczep bakteryjny posluzyl do oznaczen metoda cylinderkowa ilosciowych zmian aktywnosci wybranych zwiazków w stosun¬ ku do tetainy.Badania te wykazaly, ze fenyloalanylodezalany- lotetaina jest 3 razy, alanylotetaina — 1,5 razy i fenyloalanylotetaina — 2 razy bardziej trwala niz tetaina. N-acylowe pochodne dezalanylotetainy charakteryzuja sie obecnoscia na widmie IR syg¬ nalów przy 3300 (broad), 1715-10, 1675-70, 1610-1600, 1400-1390 cm—1, zas miareczkowanie argentome- tryczne tych pochodnych wykazuje w czasteczce obecnosc jednego atomu tlenu oksiranowego, co w pelni okresla czystosc uzyskanych pochodnych.Zaleta sposobu wedlug wynalazku jest mozliwosc uzyskania pochodnych o zwiekszonej trwalosci, za¬ chowujacych aktywnosc antybiotyczna.Przyklad I. 11,4 mg O-metylooksymu deza¬ lanylotetainy B rozpuszcza sie w 1 ml dwumetylo- formamidu i w temperaturze 0°C przy silnym mieszaniu dodaje sie 5,75 mg N-karboksybezwod¬ nika D-alaniny, utrzymujac przy pomocy stopnio¬ wo dodawanej N-metylomorfoliny pH 8,5 do 9.Po 3 godzinach rozpuszczalnik odparowuje sie pod zmniejszonym cisnieniem, a pozostalosc rozpuszcza w alkoholu metylowym i wytraca eterem etylo¬ wym. Otrzymany O-metylooksym D-alanylodezala- nylotetainy B odwirowuje sie i przemywa eterem etylowym. Wydajnosc 10 mg.Przyklad II. 11 mg dwuestru a,a'-dwuhy- droksydwumetyloeterowego dezalanylotetainy B rozpuszcza sie w 1 ml dwumetyloformamidu i do¬ daje przy silnym mieszaniu 10,3 mg chlorowodor¬ ku chlorku kwasu D-a-amino-a-fenylooctowego i 0,007 ml trójetyloaminy. Po godzinie rozpuszczal¬ nik odparowuje sie pod zmniejszonym cisnieniem a otrzymany surowy dwuester a,a'-dwuhydroksy- dwumetyloeterowy D-a-amino-a-fenyloacetylodeza- lanylotetainy B oczyszcza sie przy pomocy chro¬ matografii jonowymiennej. Wydajnosc 12 mg.Przyklad III. 10 mg dezalanylotetainy roz¬ puszcza sie w 0,5 ml wody i przy silnym miesza¬ niu w temperaturze 4°C dodaje 9,5 mg N-karbo- ksybezwodnika L-fenyloalaniny rozpuszczonego w 0,5 ml tetrahydrofuranu. Po 10 godzinach rozpu¬ szczalniki odparowuje sie pod próznia. Otrzymuje sie jako produkt glówny L-fenyloalanylodezalany- lotetaine.Przyklad IV. 34,2 mg estru acetoksymetylo- 154 4 wego tetainy rozpuszcza sie w 3 ml metanolu i w temperaturze 0°C dodaje sie 10 mg bezwodnika octowego oraz 10,1 mg trójetyloaminy. Po godzinie rozpuszczalnik odparowuje sie i otrzymany suro- wy ester acetoksymetylowy acetylotetainy oczy¬ szcza sie przy pomocy chromatografii kolumnowej na zelu krzemionkowym w ukladzie benzen : octan etylu 4 : 1. Wydajnosc 31 mg.Przyklad V. 15,2 mg kwasu fenoksyoctowego io rozpuszcza sie w 2 ml octanu etylu, chlodzi do temperatury —10°C, dodaje 10,1 mg metylomorfo- liny oraz 13,6 mg chloromrówczanu izobutylu. Po minutach w tej samej temperaturze dodaje sie roztwór 37,1 mg estru acetoksymetylowego oksymu tetainy w 2 ml dwumetyloformamidu i prowadzi reakcje 1 godzine w temperaturze —10°C i 1 go¬ dzine w temperaturze pokojowej. Nastepnie odpa¬ rowuje sie rozpuszczalniki pod zmniejszonym ci¬ snieniem i otrzymany surowy ester acetoksymety- •• Iowy oksymu fenoksyacetylotetainy oczyszcza sie przy pomocy chromatografii kolumnowej na zelu krzemionkowym w ukladzie benzen : octan etylu 4 : 1. Wydajnosc 35 mg.Tym samym sposobem otrzymano szereg N-acy- lowych pochodnych estrów i/lub oksymów oraz hydrazonów dezalanylotetainy, zestawionych w po¬ nizszej tabeli.Lp. 1. 2. 3. 4. . 6.N-acylowe pochodne estrów i lub oksymów oraz hydrazonów deza¬ lanylotetainy Ester piwaliloksymetylowy feny- loacetylotetainy Ester piwaliloksymetylowy furylo- acetylotetainy Ester piwaliloksymetylowy tieny- loacetylotetainy Ester piwaliloksymetylowy L-fe- nyloalanylodezalanylotetainy Ester piwaliloksymetylowy L-feny- loalanylotetainy Ester acetoksymetylowy fenoksy- acetylodezalanylotetainy Sposób otrzymy¬ wania V V V I I V PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe "Sposób otrzymywania N-acylowych pochodnych 50 estrów i/lub oksymów oraz hydrazonów dezalany¬ lotetainy o wzorze ogólnym 1, w którym R1 ozna¬ cza atom wodoru, grupe alkilowa, arylowa lub aralkilowa, a R2 oznacza grupe acylowa lub alki¬ lowa, R3 oznacza .grupe acylowa, korzystnie a-ami- 55 noacylowa lub acyloaminoacylowa, zas Z oznacza atom tlenu, reszte hydroksyloaminowa lub hydra- zynowa, wzglednie ich alkilowe, arylowe lub aral- kilowe pochodne, znamienny tym, ze na pochodne dezalanylotetainy o wzorze 3, w którym R1, Rz 60 i z maja podane wyzej znaczenie, dziala sie po¬ chodnymi kwasów karboksylowych, zdolnymi do zacylowania grupy aminowej w pochodnych deza¬ lanylotetainy, np. chlorkami kwasowymi, miesza¬ nymi bezwodnikami lub N-karboksybezwodnikami 65 a-aminokwasów.98 154 N O V CH, R-HN-CH-COO-CHFS-O-R' SIZQt\ o CH2 kn-ch-coo-chr-o-fC wzo't2 PL