PL90346B1

PL90346B1 -

Info

Publication number: PL90346B1
Application number: PL1972156670A
Authority: PL
Priority date: 1971-07-14
Filing date: 1972-07-13
Publication date: 1977-01-31
Also published as: ES404618A1; SU589918A3; AT327376B; US3859282A; CS167994B2; ATA594972A; ZA724841B

Description

Przedmiotem niniejszego wynalazku jest nowy sposób wytwarzania estru kwasu 3-podstawionego-metylo-7- -acyloamido-7-metoksy/lub wodoro/-cefemo-2-karboksylowego-4 o wzorze ogólnymi, w którym R oznacza grupe acylowa, Rt oznacza atom wodoru lub grupe metoksylowa, R2 oznacza grupe zabezpieczajaca, aX oznacza atom chlorowca, grupe azydowa, cyja nowa, nizsza a IkoksyIowa, hydroksylowa, ewentualnie zabezpie¬ czona, karbamoiloksylowa, nizsza alkanoiloksylowa, aroiloksylowa, mono-lub polihydroksyfenylowa, 0-dwukar- bonylometylowa, tioheterocykliczna, trzeciorzedowa aminowa, tiokarbonylotioheterocykliczna lub acyloamino- wa.Pochodne o strukturze A2 wykorzystuje sie jako produkty posrednie w procesie wytwarzania znanych pochodnych cefalosporyny, oraz nowych pochodnych cefalosporyny posiadajacych w pozyqi 7 podstawiona grupe metoksylowa w miejsce atomu wodoru wystepujacego w znanych pochodnych. Wytworzone z nowych produktói posrednich pochodne cefalosporynowe o strukturze A3, wykorzystuje sie jako antybiotyki, skutecz¬ nie dzialajace przeciwko drobnoustrojom Gram-dodatnim i Gram-ujemnym.Cefalosporyny o strukturze A3 posiadajace grupe metoksylowa w pozyqi 7, wykazuja skuteczne dzialanie przeciwbakteryjne przeciw bakteriom Gram-ujemnym, takim jak: Escherichia coli, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Proteus morganii, Salmonella schottmuelleri, Klebsiella pneumaniae, AD, Klebisiella pneumoniae B i Paracolobactrum arizoniae, oraz bakteriom Gram-dodatnim, takim jak: Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes i Diplococcus pneumoniae.Pochodne 7-metoksycefalosporyny moga byc wykorzystywane równiez do usuwania podatnych na te antybiotyki mikroorganizmów ze sprzetu farmaceutycznego, medycznego i dentystycznego, oraz moga znajdo¬ wac jako srodki bakteriobójcze, zastosowanie w przemysle, na przyklad, w zasadowych farbach wodnych oraz w wodzie sitowej z fabryk papieru dla powstrzymania rozwoju szkodliwych bakterii.Sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze zwiazki o wzorze ogólnym 2, w którym R, R1 i R2 maja wyzej podane znaczenie, a R oznacza grupe aminowa lub nizsza alkilowa poddaje sie reakcji ze zwiazkiem2 90 346 0 wzorze ogólnym HX, w którym X oznacza atom chlorowca, taki jak brom/ chlor, jod itp. albo oznacza (pupe azydowa, nizsza alkanoiloksylowa, aro iloksyIowa, mono- lub polihydroksyfenyIowa lub ^-dwukarbonylornetyIo¬ wa. W przypadku, gdy X oznacza wyzej wymienione grupy inne niz atom chlorowca a zwiazek HX stanowi zwiazek zawierajacy aktywny wodór, reakcje korzystnie prowadzi sie w obecnosci katalizatora, takiego jak kwas nie dajacy podstawienia nukleofilowego lub kwas Lewisa.Jezeli zadanym produktem sa zwiazki o wzorze 1, w których R, R1 i R2 maja wyzej podane znaczenie, ale X oznacza nizsza grupe alkoksylowa, cyjanowa, hydroksylowa, ewentualnie zabezpieczona, nizsza alkanoiloksylo¬ wa, aroiloksylowa, karbamoiloksylowa, tioheterocykliczna, trzeciorzedowa aminowa, heterocykliczna tiokarbo- nylotio, sposób wedlug wynalazku prowadzi sie, poddajac reakcji zwiazek o wzorze 2, w którym wszystkie symbole maja wyzej podane znaczenie, ze zwiazkiem o wzorze ogólnym HX, w którym X oznacza atom chlorowca, po czym otrzymany produkt poddaje sie reakcji ze zwiazkiem o wzorze ogólnym M/X/2, w którym X ma wyzej podane znaczenie, inne niz atom chlorowca, a M oznacza atom wodoru lub kation metalu alkalicznego, ziem alkalicznych lub metalu grupy I B, zas Z oznacza liczbe calkowita równa wartosciowosci atomu M.Oba te mozliwe warianty sposobu wedlug wynalazku ilustruja schematy 1 i 2, w których symbole maja wyzej podane znaczenie.Reakcje ze zwiazkiem posiadajacym aktywny wodór mozna prowadzic w obecnosci katalizatora, którym . moze byc kwas nie dajacy podstawienia nukleofilowego lub kwas Lewisa. Zwiazki posiadajace czynny wodór sa dobrze znane w chemii. Podane nizej przyklady sa zaledwie ilustracja rodzaju zwiazków, które mozna tu zastosowac. Moga to byc, na przyklad, takie kwasy nieorganiczne jak: kwas azotowodorowy i podobne, kwasy organiczne, takie, jak nizszy kwas alkanokarboksylowy, taki, jak: kwas octowy, kwas propionowy, kwas maslowy 1 podobne, kwasy arylokarboksylowe, takie jak kwas benzoesowy i podobne, kwasy chlorowcooctowe, takie jak kwas trójfluorooctowy i podobne, monohydroksybenzeny lub polihydroksybenzeny, takie jak: fenol, rezorcyna i podobne lub estry alkilowe kwasu 3-ketoalkoksykarboksylowego-1 takie, jak na przyklad, ester mniejsza grupa alkilowa kwasu 3-keto-nizszy kwas alkanokarboksylowy, taki jak ester etylowy kwasu 3-ketopropanokarboksylo- wego-1, ester metylowy kwasu 3-ketopropanokarboksylowego-1, ester etylowy kwasu 3-ketobutanokarboksylo- wego-1 i podobne.W celu zwiekszenia aktywnosci posiadajacych aktywny wodór zwiazków do reakcji wprowadza sie katalizator, na przyklad: kwas nie dajacy podstawienia nukleofilowego taki, jak kwas nadchlorowy, kwas benzenosulfonowy i podobne lub kwas Lewisa, taki jak trójfluorek boru, chlorek glinu i podobne.Reakcje mozna prowadzic zarówno z kwasem ehlorowcowodorowym, jak i z innymi zwiazkami posiadaja¬ cymi aktywny wodór, w jakimkolwiek, obojetnym lub zasadniczo obojetnym rozpuszczalniku, w którym rozpuszczalne sa reagujace substancje. Takim rozpuszczalnikiem moze byc: chlorek metylenu, czterowodorofu- ran, chloroform, czterochlorek wegla, benzen, heksan, eter dwuetylowy i podobne. Reakcje mozna prowadzic w temperaturze od okolo —70°C do okolo 100°C. Zwykle reakcje prowadzi sie w granicach temperatur od okolo 0°C do temperatury okolo 5°C. Czas trwania reakcji zmienia sie w zaleznosci od temperatury, w której reakcja zachodzi, od okolo 5 minut do okolo 25 godzin, jednakze w temperaturach od okolo 0°C do okolo 5°C reakcja zwykle przebiega do konca w ciagu 15 godzin.Jako wymienione grupy X stosuje sie korzystnie atom chlorowca, taki, jak atom bromu, chloru, jodu i podobne, grupe azydowa, mniejsza grupe alkanoiloksylowa, taka jak acetoksylowa, proplonytófciylowa, butyloksyIowa i podobne, grupe aryloksyIowa taka jak benzoiloksylowa i podobne, grupe monohydroksyfenylo- wa lub grupe polihydroksyfenylowa taka jak 4-hydroksyfenylowa, 2,4-dwuhydroksyfenylowa r podobne lub grupe 1-alkoksykarbonylo-2-hydroksyalkilowa, na przyklad zwiazek 1 -mniejsza grupa alkoksykarbonylowa-2-hy- droksy mniejsza grupa alkilowa, o wzorze R6CO-, R4OOC-CH-COR5, w którym R4 i R5 oznaczaja te same lub rózne grupy alkilowe, na przyklad, mniejsze grupy alkilowe na przyklad, mniejsze grupy alkilowe zawierajace od 1.-4 atomów wegla, takie jak: grupa metylowa, etylowa, n-propylowa, n-butylowa i podobne lub oznaczaja /J-dwuketon taki jak acetyloaceton.Grupa acylowa, R, moze oznaczac jakakolwiek grupe acylowa znana obecnie w chemii cefalosporyny. Na przyklad R moze oznaczac grupe acylowa o ogólnym wzorze, w którym R* oznacza grupe benzylowa, p-hydroksybenzylowa, a-aminobenzylowa, a-karboksybenzylowa, a-azydobenzylowa, allllotiornetylowa, butylo- tiometylowa, D-/lub L/-4-amino-butylokarboksylowa-4, a-chloro-4-heptylowa, etylowa, 3-/lub 5/-nitrobenzylo- wa, fenetylowa, 0J3-dwufenetylowa, tienylowa, fenylotiometylowa, a-tienylowa, a-amino-2-tienylometylowa, a-metyloaminobenzylowa, a-/N-metylosulfamylo/benzylowa, D/-/-a-guanidyno-2-tienylometylowa, D/7- a-guani- dynobenzylowa, 4-guanidynofenoksymetylowa, 4-guanidynometylóbenzylowa, cyjanometylowa, 2,6-dwumeto- ksy-4-guanidynofenylowa, 2-/lub 3/-furylometylowa, 1-H-tetrazolilo-1-metylowa i podobne, Korzystnie jest, przeprowadzajac opisana wyzej reakcje, zabezpieczyc grupe karboksykwa-4 oraz inne, wymagajace zabezpieczania grupy danej czasteczki, na przyklad, inne grupy karboksylowe, aminowe lub90 346 3 hydroksylowe. Stosujac zabezpieczenie takich grup uzyskuje sie maksymalna wydajnosc reakcji. Korzystnie jest, ocz*ywiscie, stosowac jako grupy zabezpieczajace takie grupy, które mozna latwo usuwac. Przykladami grup zabezpieczajacych (R2 we wzorach) sa; grupa trójchloroetylowa, t-butylowa, benzoilometylowa, p-metoksyben- zylowa, benzylowa, benzhycirylowa, metoksymetylowa i podobne. Grupy aminowe mozna zabezpieczac grupa trójchloroetoksykarbonylowa, t-butoksykarbonylowa, p-chlorobenzoiloksykarbonylowa i podobnymi.Przy stosowaniu drugiego wariantu sposobu wedlug wynalazku pochodne 3-halometylowe otrzymane zgodnie ze schematem 1 przeprowadza sie wedlug schematu 2 w inne pochodne o ogólnym wzorze 1, podstawio¬ ne w pozycji 3. Takwiec grupe metyfowa, wprowadza sie na drodze reakcji pochodnej 3-hllometylowej z woda, nizszym alkanolem takim jak: metanol, etanol, propanol i podobne, cyjankiem metalu, takim jak cyjanek miedziawy i podobne, sola metalu alkalicznego i kwasu karboksylowego, na przyklad, sola metalu alkalicznego z nizszym kwasem alkanokarboksylowym, takim jak: kwas octowy, propionowy, n-maslowy i podotfhe, sola metalu alkalicznego z kwasem arylokarboksylowym, na przyklad sola metalu alkalicznego z kwasem benzoeso¬ wym i podobnymi lub sola metalu alkalicznego lub metalu ziem alkalicznych z kwasem karbarninowym, taka jak: karbaminian wapnia, karbaminian sodu, karbaminian potasu ipodobne. tt * Reakcje mozna prowedzic w temperaturze od okolo 20°C do okolo 100°C, zwykle prowadzi sie ja W granicach temperatur od okolo 0°C do 25°C. W reakcji mozna uzyc jakiegokolwiek obojetnego lub zasadniczo obojetnego rozpuszczalnika, takiego jak: dwumetyloformamid, p-dioksan, suIfotlenek dwumetyIowy, acetonitryl, tetrahydrofuran i podobne. Reakcje te ilustruje schemat 2, w którym R, R2 i chlorowiec maja podane poprzednio znaczenie, a X1 oznacza nizsza grupe a I koksyIowa* taka jak: grupa metoksylowa, etoksylowa, n-propoksylowa i poclobne, grupe cyjanowa, hydroksylowa, mniejsza grupe alkanoiloksylowa taka jak: grypa acetoksylowa, propionyloksylowa, butanoiloksylcwa i podobne, grupe; aryloksylowa, taka jak na przyklad, benzoiloksylowa lub podobne, grupe karbamyloksylowa, grupe heterocykliczna z atomem siarki w pierscieniu, na przyklad; pierscien piecioczlonowy zawierajacy dwa atomy azotu i jeden atom siarki taki jak: 5-metylo-2-tio- -1,3,4-tradiazolilowy, pierscien bedacy amina trzeciorzedowa taki jak pirydyna i podobne, pierscien heterocykli¬ czny tiokarbonylosiarkowy, na przyklad: 6-cio czlonowy pierscien tiokarbonylosiarkowy zawierajacy atom azotu, tak jak: tiokarbonylotiopiperydyna, natomiast M oznacza wodór, kation pochodzacy z atomu metalu alkalicznego .lub atomu metalu ziem alkalicznych, takiego jak: sód, potas, wapn i podobne lub kationu , pochodzacego z atomu metalu grupy I B, takiego jak miedz i podobne, m oznacza liczbe calkowita 6 lub 1, a Z oznacza liczbe calkowita, równa wartosciowosci M.Uzywane powyzej grupy blokujace i zabezpieczajace (R2), mozna usunac w kazdej chwili sposobem, pozwalajacym uzyskac te pochodne, w których R2 oznacza atom wodoru. Na przyklad, po usunieciu grupy estrowej powstaje wolny kwas. Grupy te mozna usuwac dobrze znanymi w chemii sposobami. Na przyklad, grupe trójchloroetoksykarbonylowa usuwa sie na drodze reakcji z pylem cynkowym lub chlorkiem chromu, przy uzyciu takich alkoholi jak: metanol, etanol, propanol, but9nol i podobne, lub kwasu — octowego, lub mieszaniny kwasu cetowego z woda jako rozpuszczalnikiem. W dodatku, takie grupy zabezpieczajace, jak grupe * wa, fenyloalkilowa lub t-butyIowa, mozna usuwac przez reakcje z wodorem w obecnosci katalizatora (takiego jak pallad na weglu) albo z silnym kwasem organicznym lub nieorganicznym, takim jak: kwas solny,kwas siarkowy, eter trójfluoroborowy, kwas mrówkowy, kwas trójfluorooctowy, kwas trójchforooctowy, kwas nitrobenzoesowy (podobne.Podane nizej przyklady ilustruja nowy sposób wedlug wynalazku, lecz nie ograniczaja zakresu wynalazku.W praktyce mozna zastosowac inne reagenty, podobne do tych, które sa opisane w podanych nizej przykladach, i mozna uzyskac podobne wyniki.Przyklad I. 1-tlenek estru benzhydrylowego kwasu 7-metoksy-3-metoksymetylo-7-/2-tienyloacetami- do/-cefemo-2-karboksylowego-4.Przejscie A. Ester benzhydrylowy kwasu 3-karbamyloksymetylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamldo/-cefe- mo-2-karboksykwego-4 1,0 g estru benzhydrylowego kwasu 3-karbamyloksymetylo-7-metoksy-7-/24ienyloacetamkto/-cefemo-3-ka- rboksylowego-4 wprowadza sie do kolumny wypelnionej 20,0 g Florisilu i zalanej benzenem, W ciagu nocy przez kolumne przepuszcza sie 10% roztwór octanu etylu w benzenie. Wytworzony izomer A2 ekiuje sie 40% benzenowym roztworem octanu etylu. Po odparowaniu uzyskuje sie czysty produkt o nastepujacych wlasnos¬ ciach fizycznych: Widmo NMR (rozpuszczalnik CDCI3/S = 6,32/2-H,d lAB - 1Hz); 5,10 (4-H, d, IAb * 2Hz); ,32 (6-H); 3,40 (7-OCH3,s); 4,52 (10-H2,s); 3,82 (13 Ha,s).Przejscie B. Ester benzhydrylowy kwasu 3-bromometylo-772-tienyloacetamido/-cefenrio-2-karboksylowe- go-4 Do mieszanego, utrzymywanego w lazni lodowej, w bezwodnym srodowisku, roztworu 0,0056 mola estru benzhydrylowego kwasu 3-karbonyloksymetylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/4 90 346 w 40,0 ml chlorku metylenu, wkrapla sie roztwór 0,0132 mola bromowodoru w 110,0 ml chlorku metylenu.Nastepnie mieszanine zateza sie do 30 ml i uzywa bezposrednio w nastepnym przejsciu.Przejscie C. Ester benzhydrylowy kwasu 7-metoksy-3-metoksymetylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-kar- boksylowego-4 Wytworzony w przejsciu B roztwór estru benzhydrylowego kwasu 3-bromometylo-7-metoksy-/2-tienyloace- tamido/-cefemo-2-karboksylowego-4 w chlorku metylenu/miesza sie w temperaturze 0°C z 29,5 g weglanu wapnia ido mieszaniny wkrapla 50,0 m metanolu. Mieszanine miesza sie dalej wciagu 1,5 godziny, nastepnie rozdziela sie pomiedzy chlorek metylenu i 5% wodny roztwór kwasnego weglanu sodowego. Warstwe organiczna przemywa sie woda, suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje, uzyskujac 3 g surowego produktu. Produkt ten oczyszcza sie na kolumnie chromatograficznej, uzyskujac 2,3 g czystego estru benzhydrylowego kwasu 7-meto ksy-3-metoksymetylo-7-/2-tienyloacetamido/-c efemo-2-karboksylowego-4. Widmo NMR: (rozpuszczalnik CDCI3) 6=6,2 (2-H,d, l=2Hz); 5,1 (4-H,d, l=2H2); 5,38 (6H,s); 3,39 (7-OCH3/s); 3,8 (10-H2,s); 3,1 (IO-OCH3S); 3,82 (13-H2, lAB - 10 H2).Przyklad II. 1-tlenek estru dwubenzhydrylowego kwasu 70/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-kar boksywaleryloamido/-3-cyjanometylo-7-metoksy-cefemo-2-karboksylowego-4.A. Ester dwubenzhydrylowy kwasu 7^-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywaleryloamido/-3- karbamyloksymetylo-7-metoksycefemo-2-karboksylowego-4. g estru dwubenzhydrylowego kwasu 7j3-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywaleryloamido/ -3karboksymetylo-7-metoksy-cefemo-3-karboksylowego A przepuszcza sie wolno przez kolumne wypelniona ' 200 g Florisilu, eluujac 10% benzenowym roztworem octanu etylu. Wytworzona pochodna o strukturze A2 wymywa sie z kolumny 40% roztworem benzenowym octanu etylu. Po odpedzeniu rozpuszczalnika uzyskuje sie 6,5 g praktycznie czystego estru dwubenzhydrylowego kwasu 7j3-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karbo . ksywaleryloamido/-3-karbamyloksymetylo-7 -metoksycefemo-2-karboksylowego-4. Pochodna ta daje pojedyncza plamke w chromatografii cienkowarstwowej.Widmo w ultrafiolecie: Xmx/CH3OH/247,5 e7200. Widmo NMR (rozp. CDCI3) 8- = 3,41 (7-CH30,s); 4,72 (10-H,s);5,34 (6-H,s); 6,3 (2-H,d,lAB = 1,5 H2);5,16 (4-H,d,lAB - 1,5H2).B. Ester dwubenzhydrylowy kwasu 7j3-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywaleryloamido/-3- /bromometylo/-7-metoksycefemo-2-k;u boksylowego-4.Do chlodzonego w lazni lodowej roztworu 15,0 g estru dwubenzhydrylowego kwasu 70-/D-5-trójchloroeto ^sykarbonyloamino-5-karboksywaleryloamidoA3-karbanrvloksymetylo-7-metoksycefemo-2-karboksylowego^ W 150 ml chlorkusmetylenu, wkrapla sie 60 ml 0,57 n roztworu bromowodoru w chlorku metylenu i mieszanine miesza sie wciagu 1 godziny w temperaturze od 0°C do 5°C. Reakcje przemywa sie, odpedzajac nadmiar bromowodoru azotem, i odsacza sie bialy osad bromku amonowego. Mieszanine reakcyjna ekstrahuje sie dwukrotnie zimna woda, suszy i odparowuje, uzyskujac 21,6 g surowego, wymienionego w tytule czesci B Zwiazku. Badania NMR wykazaly, ze w produkcie znajduje sie okolo 80% pozadanego zwiazku. Widmo NMR: (rozpuszczalnik CDCI3) 5 = 3,42 (7-CH30,s); 4,07 (10-H2,ql; 5,35 (6-H,s); 6,3 (2-H,d,lAB = 2H2); 5,35 (4-H,d), Ub=2H2).C. Ester dwubenzhydrylowy kwasu 7/3-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywaleryloamido/-A 3-cyjanometylo/-7-metoksycefemo-2-karboksylowego-4. ,0 g estru dwubenzhydrylowego kwasu 7j3-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywalerianomi do/73-bromomety1o/--7-metoksycefemo-2-karboksylowego-4 rozpuszcza sie 100 ml dwumetylosuIfotlenku. Roz¬ twór ochladza sie do temperatury okolo 10°C —15°C i dodaje don wolno 0,6 g cyjanku miedziowego.Nastepnie mieszanine pozostawia sie do ogrzania do temperatury pokojowej, po czym miesza sie ja wciagu dalszych szesciu godzin. Nastepnie mieszanine rozdziela sie pomiedzy warstwe chlorku metylenu i wodna.Warstwe chlorku metylenu suszy sie nad bezwodnym siarczanem sodowym, odsacza i odpedza rozpuszczalnik przez odparowanie. Po oczyszczeniu na kolumnie chromatograficznej wypelnionej silikazelem H uzywajac jako cieczy wymywajacej chloroformu), uzyskuje sie wymieniony w tytule czesci C zwiazek. W chromatografii cienkowarstwowej pochodna ta daje pojedyncza plamke. Widmo w ultrafiolecie: Xmax/CH3OH/2480e6900.Widmo NMR: (rozpuszczalnik CDCI3) 5=3,42 (7-CH30,s); 3,17 (10-H2%s); 5,33 (6-H,s); 6,27 (2-J,d,lAB = 2H2);5,05 (4-H,d, lAB = 2H2).Przyklad III. 1-tlenek estru benzylowego kwasu 3-metoksy-metylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2- -karboksylowego-4.A. Ester benzylowy kwasu 3-acetoksymetylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-karboksylowego-4 100 g estru benzylowego kwasu 3-acetoksymetylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-karboksylowego-4 wprowadza sie do kolumny wypelnionej 2g Florisilu i zalanej benzenem. Wciagu nocy przez kolumne przepuszcza sie 10% roztwór octanu etylu w benzenie. Wytworzony izomer o strukturze A2 eluuje sie z kolumny90 346 5 mieszanina octanu etylu z benzenem w stosunku 3:10. Po odparowaniu rozpuszczalnika uzyskuje sie 82 mg czystego, wymienionego w tytule czesci A zwiazku. Analiza metoda chromatografii cienkowarstwowej wykazuje pojedyncza plamke zwiazku. Widmo MNR: (rozpuszczalnik CDCI3)£\= 5,58 (7-H,q); 5,2 (6-H,d); 6,37 (2-H,d, lAB - 1 riz); 5,01 (44,d, lAB = 1H2);4,58 (10-H2,s); 3,80 (13-H2s); 1,97 (0-C-CH3,s).B. Ester benzylowy kwasu 3-bromometylo-7-/2-tieny!oacetamido/-cefemo-2-karboksylowego-4 Do ochlodzonego w lazni lodowej, mieszanego roztworu 77 mg tj. 0,15 mmola estru benzylowego kwasu 3- -acetoksymetylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-karboksylowego-4 wkrapla sie 0,5 ml bromowodoru w 0,32 mmolach chlorku metylenu. Po 50 minutach reakcje przerywa sie przez odpedzenie azotem nadmiaru bromowodoru. Po usunieciu rozpuszczalnika uzyskuje sie wymieniony w tytule czesci B zwiazek, który mozna uzyc bezposrednio w przejsciu C.C. Ester benzylowy kwasu 3-metoksymetylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-karboksylowego-4 Ester benzylowy kwasu 3-bromometylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-karboksylowego-4 rozpuszcza sie w metanolu i po 20 minutach utrzymania w pokojowej temperaturze, mieszanine wlewa sie do rozcienczonego roztworu kwasnego weglanu sodowego i ekstrahuje.chlorkiem metylenu. Warstwe organiczna przemywa sie wodnym roztworem chlorku sodowego i suszy. Po odpedzeniu rozpuszczalnika uzyskuje sie 35 mg surowego produktu. Czysty ester benzylowy kwasu 3-metoksymetylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-karboksylowego-4 wydziela sie metoda chromatografii cienkowarstwowej, eluujac 15% roztworem octanu etylu w chloroformie.Widmo NMR: (rozpuszczalnik CDCI3)5=5,61 (7-H,q); 5,21 (6-H,d); 6,25 (2-H,d,lAB = 1H2); 5,02 (4H,d,lAB = 1H2); 5,17 (10-H2l czesciowo dostrzegalny); 3,82 (1-3-H2,s); 3,18 (OCH3,s).P r z y k l a d IV. 1-tlenek estru dwubenzhydrylowego kwasu 7j3-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5- -karboksywaleryloamido/-3-/4-hydroksybenzylo/-7-metoksycefemo-2-karboksylowego-4.A. Ester dwubenzydrylowy kwasu 7j3-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywaleryloamido/^-/4- -hydroksybenzylo/-7-metoksycefemó-2-karboksylowego-4 Roztwór 0,953 g tj. 1 mmola dwubenzhydrylowego kwasu 7|3-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karbo ksywaleryloamido/-3-karbonyloksymotylo-7-metoksycef emo-2-karboksylowego-4, 1,4 g tj. 1,1 mmola fenolu i 1,1 mmola 70% roztworu kwasu nadchlorowego w 20 ml chlorku metylenu i 11 ml czterowodorofuranu, miesza sie w ciagu 5 godzin w temperaturze .0°C. Nastepnie mieszanine przemywa sie roztworem kwasnego weglanu sodowego, potem woda i suszy nad siarczanem sodowym. Po odsaczeniu i odpedzeniu rozpuszczalnika uzyskuje sie surowy produkt, który oczyszcza sie, przepuszczajac przez kolumne wypelniona silikazelem i eluujac roztworem skladajacym sie z 7 czesci chloroformu i 2 octanu etylu. W wyniku tego uzyskuje sie wymieniony w tytule czesci A zwiazek, który daje pojedyncza plamke w analizie przeprowadzonej metoda chromatografii cienkowarstwowej.Widmo NMR: (rozpuszczalnik - CDCI3)5 = 5,78 (2-H,d.Pr z y k l a d V. Ester benzhydrylowy kwasu 3-azydometylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2- -karboksylowego-4.Mieszanine 0,212 g estru benzhydrylowego kwasu 3-karbamyloksymetylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetami- do/-cefemo-2-karboksylowego-4, 0,36 g kwasu nadchlorowego w 6,0 ml czterowodorofuranu i 28,0 ml 0,18 n kwasu azotowodorowego w chlorku metylenu, miesza sie wciagu dziewieciu godzin w atmosferze azotu..Nastepnie mieszanine przemywa sie 5% wodnym roztworem kwasnego weglanu sodowego, a potem nasyconym roztworem chlorku sodowego. Roztwór chlorku metylenu suszy sie nad bezwodnym siarczanem sodowym, przesacza i odpedza rozpuszczalnik przez odparowanie. Wytworzony, surowy produkt oczyszcza sie chromato¬ graficznie, przepuszczajac przez kolumne wypelniona silikazelem G. Uzyskuje sie praktycznie czysty, wymienio¬ ny w tytule zwiazek. Wartosci oznaczone: C - 58,4%; H-4,35%; N - 12,32%. Wartosci obliczone dla C28H25N505S2:C -58;4%;H- 4,72%; "N - 12,36%.¦Przyklad VI. Ester benzylowy kwasu 7-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywaleryloami« do/-/3-hydroksymetylo/-7-metoksycefemo-2-karboksylowego-4 Roztwór 0,7 g estru benzylowego kwasu 7-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywalfiryloamido /-/3-bromometylo/-7-metoksycefemo-2-karboksylowego-4 w 5 ml buforu o pH 7,5 i 13,5 ml p-dioksanu, pozos¬ tawia sie w pokojowej temperaturze w ciagu 2,5 godziny. Nastepnie mieszanine ekstrahuje sie octanem etylu; warstwe organiczna przemywa sie nasyconym roztworem wodnym chlorku sodowego. Po osuszeniu, odparowuje sie rozpuszczalnik, a uzyskany produkt oczyszcza sie metoda chromatografii kolumnowej, na kolumnie wypelnionej silikazelem z 2% metanolem, eluujac mieszanina, skladajaca sie z równych ilosci heksanu i chloro¬ formu. Uzyskuje sie wymieniony w tytule zwiazek.Przyklad VII. Ester benzhydrylowy kwasu 3-acetoksymetylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefe- mo-2-karboksylowego-4.Roztwór 1 g estru benzhydrylowego kwasu 3-karbamyloksy-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2- -karboksylowego-4 w 10 ml kwasu octowego i 0,5 ml 70% roztworu kwasu nadchlorowego, pozostawia sie wciagu godziny w temperaturze pokojowej, a nastepnie mieszanine rozdziela sie pomiedzy woda i octan etylu.6 90 346 Warstwe organiczna przemywa sie roztworem kwasnego weglanu sodowego, a nastepnie woda. Wytworzony produkt oczyszcza sie metoda chromatograficzna na silikazelu.Przyklad VIII. Ester benzhydrylowy kwasu 3-acetoksymetylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamkJo/-cefe- mo-2-karboksylowego-4.Roztwór estru benzhydrylowego kwasu 3-bromometylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-karbo- ksylowego-4 w 5 ml chlorku metylenu dodaje sie do mieszaniny 0,5 g octanu potasowego w 10 ml kwasu octowego i miesza w ciagu nocy. Nastepnie mieszanine rozdziela sie miedzy octan etylu i wode. Warstwe organiczna suszy sie nad MgS04 i oczyszcza metoda chromatograficzna, uzyskujac pozadany produkt.Przyklad IX. Ester benzhydrylowy kwasu 7-metoksy-3-metylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-kar- boksylowego-4.Roztwór 1 g estru benzhydrylowego kwasu 7-bromometylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2- -karboksylowego-4 w 10 ml dioksanu i 1 ml kwasu octowego, wytrzasa sie z 1 g pylu cynkowego w ciagu dwóch godzin. Mieszanine przesacza sie i przesacz rozdziela pomiedzy chlorek metylenu i roztwór kwasnego weglanu sodowego. Po odparowaniu warstwy organicznej uzyskuje sie produkt, który nastepnie oczyszcza sie chromato¬ graficznie.Przyklad X. Ester benzhydrylowy kwasu 7-metoksy-37N-piperydynotiokarbonylotiometylo/-7-/2-tie- nyloacetamido/-cefemo-2-karboksylowego-4.Mieszanine 1,2 g estru benzhydrylowego kwasu 3-bromometylo-7-metoksy-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2- -karboksylowego-4, 50 ml toluenu i 1,5 g soli sodowej dwutiokarbaminu piperydyny wytrzasa sie, z jednoczes¬ nym szybkim mieszaniem, w ciagu pieciu godzin. Nastepnie mieszanine przesacza sie, przesacz zateza i uzyskany produkt oczyszcza chromatograficznie na silikazelu.Przyklad XI. Ester benzhydrylowy bromku kwasu 7-metoksy-3-/N-pirydylometylo/-7-/2-tienyloaceta- mido/-cefemo-2-karboksylowego-4.Do roztworu 1,0g estru benzhydrylowego kwasu 3-bromometylo-7-metoksy-/2-tienyloacetamido/-cefemo- -2-karboksylowego-4 w 10 ml benzenu, dodaje sie 1,0 ml pirydyny i mieszanine pozostawia wciagu nocy w temperaturze pokojowej. Benzen i nadmiar pirydyny usuwa sie pod zmniejszonym cisnieniem, uzyskujac pozadany produkt.Przyklad XII. Ester benzhydrylowy kwasu 3-karbamyloksy-metylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetami- do/-cefemo-2-karboksylowego-4.Do 25 g karbaminianu wapnia w 100 ml dwumetyloformamidu dodaje sie roztwór 5,0 g estru benzhydrylo¬ wego kwasu 3-bromometylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-2-karboksylowego-4 w 20 ml dwumetylo¬ formamidu i miesza sie wciagu nocy w temperaturze pokojowej. Nastepnie mieszanine rozciencza sie woda i ekstrahuje chlorkiem metylenu. Ekstrakt przemywa sie wodnym roztworem kwasnego weglanu sodowego, woda i suszy nad siarczanem magnezu. Po przesaczeniu i usunieciu rozpuszczalnika uzyskuje sie wymieniony w tytule czesci A zwiazek.Przyklad XIII. Ester benzhydrylowy kwasu 7-metoksy-3-karbamyloksymetylo-7-/2-tienyloacetami- do/-cefemo-3-karboksylowego-4.A. Ester benzhydrylowy kwasu 3-bromometylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-3-karboksylowe- go-4 Roztwór 0,2 g estru benzhydrylowego kwasu 3-bromometylo-7-metok$y-772-tienyloacetamido/-cefemo-2- •karboksylowego-4 w 20 ml etylodwuizopropyloaminy trzyma sie w ciagu trzech dni w temperaturze pokojowej.Nastepnie usuwa sie pod zmniejszonym cisnieniem etylodwuizopropyloamine i mieszanine oczyszcza sie metoda chromatograficzna na silikazelu, uzyskujac wymieniony w tytule czesci A zwiazek.B. Ester benzhydrylowy kwasu 7-metoksy-3-karbamyloksymetylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-3-karbok- bylowy-4 Do 5,0 g karbaminianu wapniowego zdyspergowanego w 20 ml dwumetyloformamidu dodaje sie roztwór estru benzhydrylowego kwasu 3-bromometylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-3-karboksylowego-4 * w 20 ml dwumetyloformamidu i mieszanine miesza w ciagu nocy w temperaturze pokojowej. Nastepnie mieszani¬ ne rozciencza sie woda i produkt ekstrahuje chlorkiem metylenu. Ekstrakt przemywa sie wodnym roztworem kwasnego weglanu sodowego, woda i suszy nad siarczanem magnezowym. Po przesaczeniu-rusunieciu rozpusz¬ czalnika uzyskuje sie wymieniony w tytule zwiazek.Przyklad XIV. Ester dwubenzhydrylowy kwasu 7/3-/D-5-amino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbamy- lok$ymetylo-7-metoksycefemo-3-karboksylowego-4.A. Ester dwubenzhydrylowy kwasu 7jS-/D-5-N-t-butoksykarbonyloamino-5-karboksywalery1oamido/-3-chlo- rometylo-7-metoksy-cefemo-3-karboksylowego-4 W 5 ml chlorku metylenu rozpuszcza sie 1 mmol estru dwubenzhydrylowego kwasu 70-/D-5-N-t-butoksykar bonyloamino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbanyloksymetylo-7-metoksy-cefemo-3-karboksylowego, mieszani¬ ne ochladza sie do temperatury 0°C i po dodaniu 1 mmola kolidyny wkrapla sie roztwór 0,6 mmola90346 7 pieciochlorku fosforu w 5 ml chlorku metylenu. Mieszanine miesza sie wciagu godziny w lazni lodowej w temperaturze 0°C i uzyskany roztwór ekstrahuje kwasnym weglanem sodowym, rozciencza kwasem solnym i nasyconym roztworem chlorku sodowego. Nastepnie mieszanine odparowuje sie do sucha i rozdziela metoda chromatografii kolumnowej na chlodzonym silikazelu, eluujac chloroformem. Wytworzony w ten sposób produkt jest wymienionym w tytule czesci A zwiazkiem.B.Ester dwubenzhydryIowy kwasu 7/3-/D-5-amino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbamyloksymetylo-7-met- oksy-cefemo-3-karboksylowego-4 Reakcje prowadzi sie zgodnie ze sposobem opisanym w czesci B przykladu XII, wprowadzajac w miejsce estru benzhydrylowego kwasu 3-bromometylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo-3-karboksylowego-4 równomolowa ilosc estru dwubenzhydrylowego kwasu 7j3-/D-5-N-t-butoksykarbonyloamino-5-karboksywaleryloa mido/-3-chlorometylo-7-metoksy-cefemo-3-karboksylowego-4.W wyniku tej reakcji uzyskuje sie wymieniony w tytule zwiazek.Przygotowywanie substancji wyjsciowych: Kwas 7-metoksy-3-metoksymetylo-7-/2-tienyloacetamido/-cefe- mo-3-karboksylowy-4.Przejscie A. Jednosodowa sól kwasu 7]3-/D-5-amino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbamyloksymetylo-7-m- etoksy-cefemo-3-karboksylowego-4.Zmodyfikowany sposób fermentacji. W aseptycznych warunkach otwiera sie liofilizowana rure zawierajaca hodowle MA—2908 Streptomyces lactamduras i kulture te przenosi sie do srodowiska o nastepujacym skladzie: Srodowisko XI. 1% melasy Blackstrap, 1% krajowych drozdzy piwnych, 2,5% agaru Difco o pH 7,0, reszte objetosci stanowi woda.Pochylone powierzchnie szczepi sie wciagu siedmiu dni w temperaturze 28°C. Jesli powierzchnie przechowuje sie w niskiej temperaturze, sa one stabilne w czasie dluzszym niz 13 tygodni.Przejscie 2. Stadia zarodkowe: Uklad dwuetapowy Pierwszy zarodek. Pierwszy zarodek przenosi sie, bezposrednio z powierzchni z przejscia 1, do 40 ml 1% wstepnie wysuszonych drozdzy NF o pH 7,0 (otrzymanych z Yeast Product Corporation) umieszczonych w 250 ml, zaopatrzonej w przegrody kolbie stozkowej. Kolby wstrzasa sie na wstrzasarce obrotowej o 2 calowym skoku z szybkoscia 220 obrotów na minute, w ciagu od dwóch do trzech dni, w temperaturze 28°C.Drugi zarodek. 2,5% szczepu z pierwszej fazy zarodkowej dodaje sie do kolby zawierajacej 2% autolizowa- nych d.ozdzy Fleischmanna S-150 o pH 7,0. W tym stadium wystepuje charakterystyczny lekki wzrost.Inkubacje, taka jak w etapie pierwszym, prowadzi sie w czasie nie przekraczajacym 48 godzin.Przejscie 3. Srodowisko wytwórcze Srodowisko wytwórcze zawiera, na litr wody destylowanej: 30 g rozpuszczalników gorzelnianych, 7,5 g wstepnie wysuszonych drozdzy N.F. i 0,25% objetosciowych srodka przeciwpianotwórczego Mobilpar-S. Srodo¬ wisko alkalizuje sie do pH 7,0 niewielka iloscia stezonego wodorotlenku sodowego, rozdziela do kolb stozkowych i utrzymuje pod zamknieciem w ciagu od 15 do 20 minut w temperaturze 121°C. Po ochlodzeniu, srodowisko szczepi sie 2,5% zarodka wytworzonego w przejsciu 2. Czas inkubowania moze zmieniac sie od 50 do 100 godzin ale korzystnie jest prowadzic inkubacje w czasie okolo 72 godzin. Objetosc srodowiska zawartego w poszczególnych kolbach moze wahac sie od 30 do 50 ml; zwykle umieszcza sie w kolbach po 40 ml srodowiska. Wielkosc szczepionki moze wahac sie od 1% do 5%, ale w praktyce stosuje sie zwykle szczepionke 2,5%.Przejscie 4. Analiza Po zakonczeniu fermentacji, komórki usuwa sie przez odwirowanie, a ciecz fermentacyjna rozciencza sie buforem fosforanowym o pH 7,0. Stezenie kwasu 7j3-/D-5-amino-5-karboksywaleryloamido/-3-/karbamyloksyme- tylo/-7-metoksycefemo-3-karboksylowego-4 w cieczy fermentacyjnej okresla sie na podstawie standardowej metody analizy krazka biologicznego. Do badania uzywa sie organizmu Vibrio percolaus (ATCC-8461). Krazek bibuly filtracyjnej zanurza sie w rozcienczonej cieczy fermentacyjnej i umieszcza na powierzchni zawierajacych agar plytek Petriego, które zaszczepia sie badanym organizmem Vibrio percolaus (ATCC 8461). Na plytkach Petriego umieszcza sie takze krazki zanurzone uprzednio w standardowym roztworze o znanym stezeniu kwasu 70- -/D-5-amino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbamyloksymetylo-7-metoksycefemo-3-karboksylowego-4. Krazki inkubuje sie wciagu nocy w temperaturze 28°C i notuje sie srednice stref inhibicji. Stezenie produktu w sfermentowanej cieczy oblicza sie metoda interpolacji z wykresu standardowej krzywej przedstawiajacej zaleznosc srednicy tej strefy od znanego stezenia produktu w roztworze standardowym. W ten sposób mozna obliczyc, ze Streptomyces lactamdurans MB-2908 wytwarza w zmodyfikowanym procesie fermentacji 78,6/xg/ml kwasu 7j3-/D-5-amino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbamyloksymetylo-7-metoksycefemo-3-karboks- ylowego-4.Przejscie 5. Wydzielanie Przesaczona ciecz fermentacyjna zakwasza sie do pH 7,0 rozcienczonym kwasem solnym. 2900 ml tej8 90 346 cieczy przepuszcza sie z szybkoscia 10 ml/minute przez kolumne wypelniona lÓOg zywicy bedacej silnie zasadowym anionitem osadzonym na formie styrenowodwuwinylobenzenowej (zywica Dowex 1 x 2, typu chlorowego). Splywajaca z kolumny ciecz wyczerpana zbiera sie w 500 ml frakcjach. Kolumne przemywa %\a woda i eluuje roztworem 3% chlorku amonowego w 90% metanolu. Eluaty zbiera sie we frakcjach po 100 ml.Frakcje cieczy wyczerpanej laczy sie, alkalizuje do pH od 7,2 do 8,0 rozcienczonym wodorotlenkiem sodowym iadsorbuje na 100 g zywicy bedacej silnie zasadowym anionitem osadzonym na formie styrenowo-dwuwinylo- benzenowej (zywica Dowex 1x2, typ chlorowy), przepuszczajac ciecz przez kolumne z szybkoscia 14 ml/minu¬ te. Kolumne przemywa sie woda i eluuje 5% roztworem wodnym chlorku sodowego. Eluaty zbiera sie w 50 ml frakcjach i zateza. Po zatezeniu ciecz rozciencza sie do 500 ml rozcienczonym kwasem solnym, obnizajac pH cieczy od 8,8 do 2,0, iadsorbuje na 25 ml silnie kwasowego kationitu typu siarczanowego, bedacego zywica osadzona na formie styrenowo-dwuwinylobenzenowej (zywica Dowex 50 x 2 typu wodorowego); adsorpcje prowadzi sie z szybkoscia 2,5 ml/minute. Kolumne przemywa sie 25 ml wody i eluuje 2% roztworem pirydyny do momentu gdy pH efluentów z kolumny wzrosnie do pH 7 (54 ml). Zebrane w ten sposób eluaty alkalizuje sie do pH 8,0 rozcienczonym wodorotlenkiem sodowym i zateza pod próznia az do usuniecia pirydyny. Uzyskuje sie sól jednosodowa kwasu 7 '7D-5-amino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbamyloksymetylo-7-metoksycefemo-3- •karboksylowego-4. Wartosci oznaczono: C - 39,31% H - 4,76% N - 11,16% S- 6,4%. Wartosci obliczone dla C16H2I N4S09Na: C - 41,0% H - 4,5% N - 12,0%, S- 6,8%.Przejscie B. Kwas 7-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbamyloksymet- ylo-7-metoksycefemo-3-karboksylowy-4 ,5 g soli jednosodowej kwasu 7VD-5-amino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbamyloksymetylo-7-metoks- ycefemo-3-karboksylowego-4 rozpuszcza sie w mieszaninie 80 ml acetonu i 240 ml 10% wodnego roztworu ortofosforanu dwupotasowego. Do roztworu wkrapla sie 25 g, tj. 118 mmoli chlorku trójchloroetoksykarbonylu w 80 ml acetonu. Podczas wkraplania, utrzymuje sie stala wartosc pH roztworu równa 9,1, przez stopniowe dodawanie 2,5 n roztworu wodorotlenku sodowego. Po 30 minutach mieszanine ekstrahuje sie octanem etylu, ekstrakt odrzuca sie, a warstwe wodna zakwasza do pH 2,5 stezonym kwasem solnym. Wytracony produkt ekstrahuje sie octanem etylu i suszy nad siarczanem sodowym. Po usunieciu pod próznia rozpuszczalnika uzyskuje sie wymieniony w tytule zwiazek w postaci oleju. Produkt ten uzywa sie do nastepnego przejscia bez oczyszczenia.Przejscie C. Ester dwubenzhydrylowy kwasu 7-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamlno-5-karboksywaleryloami do/-3-karbamyloksymetylo-7-metoksycefemo-3-karboksylowego-4 Do roztworu kwasu 77D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywaleryloamido/-3-karbamyloksym- etylo-9-metoksycefemo-3-karboksylowego-4 w 500 ml octanu etylu, dodaje sie 17 g dwufenylodwuazometanu w200 ml eteru, i mieszanine wytrzasa sie wciagu nocy, a nastepnie ekstrahuje kolejno roztworami kwasnego weglanu sodowego i chlorku sodowego. Po osuszeniu i odparowaniu rozpuszczalnika, uzyskuje sie surowy produkt, który oczyszcza sie metoda chromatograficzna na silikazelu. Do eluacji uzywa sie mieszaniny skladajacej sie z 2 czesci chloroformu i1 czesci octanu etylu. Tak otrzymany produkt daje jedna plamke w analizie metoda chromatografii cienkowarstwowej. Widmo w ultrafiolecie: Xmax 2650 67000 (CH3OH).Przejscie D. Ester dwubenzhydrylowy kwasu 7-[ /D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksywalerylo/- -2-tienyloacetylo/-amino]-3-karbamyloksymetylo- 7-metoksycefemo-3-karboksylowego-4.Mieszanine 6,0 g, tj. 6,3 mmola estru dwubenzhydrylowego kwasu 7-/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino- -5-karboksywalerylo-amido/-3-karbamyloksymetylo-7-metoksycefemo-3-karboksylowego-4, 4,7 g tj. 40 mmoli N-trójmetylosililotrójfluoroacetamidu, 3,42 ml tj. 25 mmoli chlorku 2-tienyloacetylu i 50 ml chloroformu, utrzymuje sie wciagu 16 godzin w temperaturze 47°C. Nastepnie, po odpedzeniu (przez odparowanie) rozpusz¬ czalnika, mieszanine ekstrahuje sie heksanem i oczyszcza metoda chromatograficzna na 1 kg silikazelu, eluujac % roztworem octanu etylu w chloroformie. Oczyszczony produkt daje zadowalajace widmo NMR, widmo w ultrafiolecie: Xmax 265 65810 (CH3OH), i daje pojedyncza plamke w analizie metoda chromatografii cienkowarstwowej.Przejscie E. Ester benzhydrylowy kwasu 3-karbamyloksymetylo-7-metoksy-7-/2-tienyloacetamido/-cefemo- -3-karboksylowego-4 4,2 g tj. 3,8 mmola estru dwubenzhydrylowego kwasu 7-[/D-5-trójchloroetoksykarbonyloamino-5-karboksy walei^lo/-2-tienyloacetylo/-amino]-3-karó rozpuszcza sie w 30 ml octanu etylu i dodaje do mieszaniny 30 ml 90% wodnego roztworu kwasu octowego i 12 g pylu cynkowego. Mieszanine miesza sie energicznie w ciagu 5 V** godziny w temperaturze pokojowej. Po odsaczeniu cynku, nadmiar kwasu octowego wymywa sie z roztworu woda. Wymieniony w tytule zwiazek wydziela sie w podobny sposób, jak podany powyzej w przejsciu D. Produkt ten daje pojedyncza plamke w analizie przeprowadzonej metoda chromatografii cienkowarstowowej (7% CH3OH w mieszaninie skladajacej sie z równych ilosci CHCI3 i n-heksanu). Widmo w podczerwieni (CHCI3) 1740,1800 era—1. Widmo w ultrafiolecie: Xmax263 6 5800,90 346 9 Uzywany w powyzszym opisie termin „Ftorisil" jest nazwa handlowa "aktywowanego krzemianu magnezowego.Postepujac zgodnie z przepisami podanymi w przykladach I i IV mozna, nowym sposobem wedlug niniejszego wynalazku, wytworzyc wszystkie podane tu produkty. A zatem, przez uzycie odpowiedniego kwasu chlorowcowodorowego w miejsce bromowodoru w przykladzie IV, przejscie A, odpowiedniego zwiazku zawierajacego aktywny wodór i postepowanie zgodne z przepisami podanymi w przykladzie I, przejscia od A do D i w przykladzie IV, przejscia A i B, mozna wytworzyc wszystkie podane w tabeli I produkty.W tablicy zestawiono przyklady otrzymanych sposobem wedlug wynalazków zwiazków o ogólnym wzorze 1, w którym symbole maja znaczenie podane w tablicy. PL PL PL PL PL PL

Claims

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania estru kwasu 3-podstawionego-metylo-7-acylo-amido-7-metoksy/lub wodoro/. cefemo~2-karboksylowego-4 o wzorze 1, w którym R oznacza grupe acylowa, R1 oznacza atom wodoru lub grupe metoksylowa, R2 oznacza grupe zabezpieczajaca a X oznacza atom chlorowca, grupe azydowa, cyjanowa, nizsza alkanoiloksylowa, aroiloksylowa, mono- lub polihydroksyfenyIowa, /3-dwukarbonylornetyIowa, znamienny tym, ze zwiazek o wzorze 2, w którym R, R1 i R2 maja wyzej podane znaczenie, a R3 oznacza grupe aminowa lub nizsza alkilowa poddaje sie reakcji ze zwiazkiem o wzorze ogólnym HX, w którym X ma wyzej podane znaczenie, ewentualnie w obecnosci kwasu nie dajacego podstawienia nukleofilowego lub kwasg Lewisa.

2. Sposób wedlug zastrz.1, znamienny tym, ze jako zwiazek o wzorze HX stosuje sie bromowodór, chlorowodór lub jodowodór.

3. Sposób wedlug zastrz. 1,znamienny tym, ze jako kwas nie dajacy podstawienia nukleofilowego lub Lewisa stosuje sie kwas nadchlorowy, benzenosulfonowy, siarkowy, fosforowy, polifosforowy, trójfluorek boru, trójchlorek boru lub chlorek glinu.

4. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze zwiazek o wzorze 14 poddaje sie reakcji z bromowodorem, przy czym otrzymuje sie zwiazek o wzorze 15.

5. Sposób wedlug zastrz.1, znamienny tym, ze zwiazek o wzorze 16 poddaje sie reakcji z bromowodorem, przy czym otrzymuje sie zwiazek o wzorze 17.

6. Sposób wedlug zastrz.1, znamienny tym, ze zwiazek o wzorze 18 poddaje sie reakcji z bromowodorem, przy czym otrzymuje sie zwiazek o wzorze 19.

7. Sposób wedlug zastrz. 1,znamienny tym, ze zwiazek o wzorze 20 poddaje sie reakcji z fenolem w obecnosci kwasu nadchlorowego, przy czym otrzymuje sie zwiazek o wzorze 21.

8. Sposób wedlug zastrz.1, znamienny tym, ze zwiazek o wzorze 22 poddaje sie reakcji z acetooctanem etylu w obecnosci trójtlenku boru, przy czym otrzymuje sie zwiazek o wzorze 23.

9. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze zwiazek o wzorze 24 poddaje sie reakcji z kwasem azotowodorowym w obecnosci kwasu nadchlorowego, przy czym otrzymuje sie zwiazek o wzorze 25.

10. Sposób wytwarzania estru kwasu 3-podstawionego-metylo-7-acylo-amido-7-metoksy/lub wodoro/-cefe- mo-2-karboksylowego-4 o wzorze 1, w którym R oznacza grupe acylowa, R1 oznacza atom wodoru lub grupe metoksylowa, R2 oznacza grupe zabezpieczajaca, a X oznacza nizsza grupe alkoksyIowa, cyjanowa, hydroksylo¬ wa/ewentualnie zabezpieczona, nizsza alkanoiloksylowa, aroiloksylowa, karbamoiloksylowa, tioheterocykliczna, trzeciorzedowa aminowa, heterocykliczna, tiokarbonylotio lub acyloaminowa, znamienny tym, ze zwiazek o wzorze 2, w którym R, R1 i R2 maja wyzej podane znaczenie, a R3 oznacza grupe aminowa lub nizsza alkilowa, poddaje sie reakcji ze zwiazkiem o wzorze ogólnym HX, w którym X oznacza atom chlorowca, po czym otrzymana pochodna chlorowcowa poddaje sie reakcji ze zwiazkiem o wzorze ogólnym M/X/z, w którym X ma wyzej podane znaczenie inne niz atom chlorowca, a M oznacza atom wodoru lub kation metalu alkalicznego, ziem alkalicznych lub metalu grupy IB, zas Z oznacza liczbe calkowita równa wartosciowosci atomu M.10 90 346 T a b I.i ca Przyklad nr XV XVI XVII XVIII XIX XX XXI XXII R wzór 4 wzór 5 wzór 6 wzór 7 wzór 5 wzór 8 wzór 9 wzór 4 R1 -OCH3 -OCH3 -OCH3 -OCH3 -OCH3 -OCH3 -OCH3 . -OCH3 R2 -CCI 3 wzór 10 wzór 11 -CH/0/a -CH/GV2 -CH/0/2 -CH/0/2 -CH/0/2 R3 ~NH2 -NH2 ~NH2 -NH2 -NH2 -NH2 . -NH2 -CH3 X Cl wzór 12 -OCO/CH2/2CH3 CH3~CO-CH-CO-OÓ wzór 13 -COCF3 I Br RNH J 1 -SD i? II C-OR2 II O O' "T XHOCR d2 2 Wzór 2 HX RNH- OCK3 o^NY^CH2hal° C-OR2 O Wzór 1a R' RNH rsi ^-N O Wzór 1 Yw C-OR II 0 2 2 rchemat 1 M(X0z RNH- ?CH3 o^Y^W C-OR2 O Wzór 3 Schemat 290 346 OCH, r^ CH2-C-NH J -N O II CH 2-0-C~NH2 COOCH()2 Uzdr 1*f '/ w s' OCH- CH2-C-NH CH2 — Br COOCH ()2 LlzcJr 15 CCL,-CHr c, ? -c--NH i Ln — \oM 9,K " COOH 9 -c --NH OCH3 O" o y N^v/\CH2-0-C-NH2 COOCH 2 Uzdr 16 ? CCl3-CH2-0-C-NH O OCH- CH-(CH2)3 COOH -C^ NH Y o" CH2Br COOCH t2 UzcSr 17 HUCH O II -G—NH O' N O CH2 — O — C-CH3 COOCH2 Uzdr 18 O--. O II- -C—NH S S -N CH2—Br COOCH2<|) Uzdr 1990 346 CCl3-CH2-0-C-NH cJh— (ch2)3 COOH 4- OCH- NH s—Nv ° T o CH2—0-C-NH2 COOCHcp, UJzdr 20 CCI —O-L-O-C-NH 3~^n2 0 OCH, CH~(CH2)5—C-NH COOH Ov Uzar 21 COOCH 2 CCL3—CH2-0 —C —NH OCH, CH- (CH„),—C— NH J * COOH Uzór 22 ^ ^ N\^^CH2--0—C-NH COOH CCI 3— CH2 —O.—C — NH OCH: CH— (CH0),— C-NH I l 3 COOH "u S CH , I 3 c=o CH 0 —CH ^ l C COOH ' \ O O-C H5- Uzór 23 '/ \\_„. ? OCH. CH2 —C — NH —D J N\z"^CH?-0 — C-NH. er y w,12 COOCH Uzcfr 24 ?2 // W v5" f OCH CH2—C —NH y -N Uzc(r 25 CH2-N3 COOCH <( PL PL PL PL PL PL