PL69090B1 - - Google Patents

Description

Pierwszenstwo: 02.1.1968 dla zastrz. 1 — 6 16.IX.1968 dla zastrz. 7 Szwajcaria Opublikowano: 31.XII.1973 69090 KI. 12p,4/01 MKP C07d 99/24 Wlasciciel patentu: Ciba-Geigy S.A., Bazylea (Szwajcaria) Sposób wytwarzania nowych pochodnych kwasu 7-aminocefalosporanowego Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych, terapeutycznie aktywnych pochodnych kwasu 7-aminocefalosporanowego, o wzorze 1, w którym Rx oznacza ewentualnie uwodorniona gru¬ pe imidazolowa lub imidazolilowa, zwiazana ato¬ mem azotu z grupa acetyloaminowa, a R-2 oznacza grupe wodorotlenowa zestryfikowana kwasem kar- boksylowym róznym od kwasu octowego, tv której atomy estrowe tlenu moga byc zastapione atomami siarki lub grupe karbamoiloksylowa ewentualnie podstawiona przy atomie azotu, w której atomy tlenu moga byc zastapione atomami siarki albo czwartorzedowa grupe aminowa, jak i ich ewen¬ tualnie wewnatrzczasteczkowych soli.Podane wyzej okreslenie „uwodornione pochod¬ ne'' imidazolu dotyczy imidazoliny lub imidazoli- dyny. Reszty imidazolowe moga zawierac jeden lub kilka ewentualnie jednakowych podstawników zwlaszcza takich, jak maloczasteczkowe rodniki al¬ kilowe, alkoksylowe lub grupy wodorotlenowe jak i maloczasteczkowe grupy alkilomerkaptanowe al¬ bo atomy chlorowca.Zestryfikowana grupa hydroksylowa R2, w któ¬ rej atomy tlenu moga byc zastepowane atomami ciarki, wywodzi sie z kwasu karboksylowego rózne¬ go od kwasu octowego i stanowi zwlaszcza grupe mono- albo dwucykliczna arylokarbonylohydroksy- lowa, lub tiokarbonylohydroksylowa, arylokarbony- lomerkaptanowa albo tiokarbonylomerkaptanowa, a •zwlaszcza benzylomerkaptanowa. 10 15 20 30 Jako dalsze przyklady R2 nalezy wymienic: (gru¬ pe oksykarbamylowa o wzorze: —O—CO—NH—R3, w którym R3 oznacza rodnik alifatyczny, aroma¬ tyczny, aryloalifatyczny albo heterocykliczny, zwla¬ szcza ewentualnie podstawiony a korzystnie rod¬ nik niskoalkilowy o prostym lub rozgalezionym lan¬ cuchu podstawiony jedna lub kilkoma grupami ni- skoalkoksylowymi lub atomami chlorowca, taki jak rodnik metylowy, etylowy, a zwlaszcza P-chloroetylowy, grupe merkaptokarbamylotiolowa o wzorze 2: w którym R3 ma wyzej podane znaczenie, zas R4 oznacza atom wodoru, albo R3, albo czwartorzedowa grupe aminowa, w której czwarto¬ rzedowy atom azotu stanowi np. czesc pierscienia aromatycznego, np. chinolinowego, izochinólinowe- go, albo pirymidynowego, a zwlaszcza ewentualnie podstawionego pierscienia pirydynowego, np. o wzorze 3, w którym R5 oznacza atom wodo¬ ru, albo jeden lub kilka maloczasteczkowych rod¬ ników alkoksykarbonylowych, karbamylowych, al¬ bo karboksylowych lub jeden albo kilka atomów chlorowca.Jako sól nowych zwiazków wymienia sie sole z metalami, zwlaszcza terapeutycznie uzyteczne so¬ le metali alkalicznych lub ziem alkalicznych, jak sód, potas, amon, wapn, albo sole zasad organicz¬ nych, jak np. trójetyloaminy, N-etylo-piperydyny, dwubenzyloetylenodwuarniny, prokainy. Jezeli sym¬ bol Rx albo R2 oznacza grupe zasadowa, wówczas 69 09069 090 3 moga równiez powstawac sole wewnatrzczasteczko- we.Nowe zwiazki wykazuja szczególnie dobre od¬ dzialywanie przeciwbakteryjne i jak wykazano w badaniach na zwierzetach, np. myszach, zwiazki te dzialaja skutecznie zarówno przeciwko bakte¬ riom gramo-dodatnim, jak i zwlaszcza gramoujem- nym, np. przeciwko odpornemu na penicyline Sta- phylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsielle pneumoniae, Salmonella typhosa i Bacterium pro- teus i dlatego tez zwiazki te mozna stosowac do zwalczania infekcji wywolywanych wymienionymi mikroorganizmami, jak i stosowac jako dodatki do pasz lub w celu konserwowania produktów zywno¬ sciowych, albo jako srodków dezynfekcyjnych.Szczególnie cenne sa zwiazki, o wzorze 1, w któ¬ rym Rx oznacza pierscien imidazolu ewentualnie podstawiony grupe metylowa w pozycji 2 lub 3, a R2 oznacza grupe wodorotlenowa zestryfikowana kwasem karboksylowym róznym od kwasu octowe¬ go lub oznacza rodnik P-chloroetylokarbamylowy albo rodnik pirydyniowy ewentualnie podstawiony w wyzej podany sposób.Sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze reakcji poddaje sie ewentualnie uwodorniony imi- dazol, ze zwiazkiem o wzorze 4, w którym Z oz¬ nacza reszte chlorowcoacylowa, a R2 ma wyzej po¬ dane znaczenie, albo zwiazek o wzorze 4, w któ¬ rym Z oznacza atom wodoru, a R2 ma wyzej po¬ dane znaczenie, lub oznacza grupe wodorotlenowa ewentualnie zestryfikowana kwasem octowym acy- luje sie reaktywna pochodna grupy o wzorze Rx—CH20— w którym RX oznacza ewentualnie uwo - dorniony rodnik imidazolu i w otrzymanym zwiaz¬ ku o wzorze 1, w którym Rj ma wyzej podane znaczenie, a R2 oznacza grupe wodrotlenowa ewen¬ tualnie zestryfikowana kwasem octowym, ewen¬ tualnie estryfikuje sie grupe wodorotlenowa kwa¬ sem karboksylowym róznym od kwasu octowego, w którym atomy tlenu mozna zastepowac atomami siarki, lub wymienia sie grupe acetylowa na inna grupe acylowa kwasu karboksylowego lub N-pod- stawiona grupe karbamoilowa, w których to gru¬ pach atomy tlenu moga byc zastapione atomami siarki lub na czwartorzedowa grupe aminowa i ewentualnie przeprowadza otrzymane zwiazki w ich sole z metalami, takie jak sole z metalami al¬ kalicznymi, metalami ziem alkalicznych lub w sole z amoniakiem albo z organicznymi zasadami lub otrzymane sole przeprowadza w wolne kwasy kar¬ boksylowe i ewentualnie w ich wewnetrzne sole.Reakcje ewentualnie uwodornionego imidazolu, ze zwiazkiem o wzorze 4, w którym Z oznacza grupe chlorowcoacetylowa, prowadzi sie korzystnie w rozpuszczalniku obojetnym wobec reagentów, ta¬ kim jak chlorek metylenu, chloroform, czterochlo¬ rek wegla, czterowodorofuran, dwuoksan, dwume- tyloformamid, albo acetonitryl oraz w obecnosci srodka wiazacego chlorowodór, np. slabej zasady nieorganicznej, jak np. weglanu, kwasnego wegla¬ nu lub octanu metalu alkalicznego badz tez trze¬ ciorzedowej aminy, a zwlaszcza etylodwuizopropy- laminy (zasady Hunig'a). W charakterze srodka wiazacego chlorowodór mozna stosowac równiez nadmiar imidazolu albo uwodornionego imidazolu. 4 Reakcja przebiega w temperaturze pokojowej w ciagu kilku godzin, a jesli to jest korzystne wów¬ czas mozne ja prowadzic w temperaturze obnizo¬ nej lub podwyzszonej temperaturze. 5 Acylowanie zwiazków o wzorze 4, w którym Z oznacza atom wodoru prowadzi sie w znany .spo¬ sób np. za pomoca halogenku kwasowego, korzyst¬ nie chlorku kwasowego, albo azydku kwasowego,, lub bezwodnika kwasowego, a zwlaszcza mieszane¬ go bezwodnika, np. mieszanego bezwodnika wy¬ tworzonego z mono zestryfikowanego kwasu we¬ glowego, kwasu piwalinowego, albo trójchloroocto- wego albo za pomoca wolnego kwasu w obecnosci srodka kondensacyjnego jak np. karbodwuimidu,. np. dwucykloheksylokarbodwuimidu.Acylowanie zwiazku oznaczonego wzorem 4 moz¬ na równiez prowadzic w ten sposób, ze zwiazek o wzorze 4, w którym Z oznacza atom wodoru naj¬ pierw przeprowadza sie w odpowiednia pochod¬ na krzemu lub cyny, po czym otrzymany produkt acyluje za pomoca kwasu lub zdolnej do reakcji pochodnej kwasu zawierajacej grupe Rj—S—CH2— —CO—, oraz ewentualnie odszczepia grupe krze¬ mowa lub cynowa, za pomoca alkoholu albo wody- (porównaj np. brytyjski opis patentowy 1073530,. oraz zgloszenie holenderskie 67.17107).W sposobie wedlug wynalazku ewentualnie uwo¬ dorniony imidazol korzystnie poddaje sie reakcji ze zwiazkiem o wzorze 4, w którym R2 ma wyzej podane znaczenie, a Z oznacza reszte chlorowco¬ acylowa taka jak bromoacetylowa.Jako imidazol lub imidazoline w sposobie we¬ dlug wynalazku, korzystnie stosuje sie imidazol lub imidazoline podstawiona niskoczasteczkowymi rod¬ nikami alkilowymi lub niskoczasteczkowymi rod¬ nikami alkoksylowymi.W przypadku wytwarzania zwiazków o wzorze^ 1, w którym R! ma wyzej podane znaczenie, a R2 oznacza grupe pirydyniowa, korzystnie poddaje sie reakcji zwiazek o wzorze 1, w którym R! ma wy¬ zej podane znaczenie, ze zwiazkiem pirydyniowym.Zwiazki o wzorze 1, w którym Ri ma wyzej po¬ dane znaczenie, a R2 oznacza niskoczasteczkowa grupe alkilooksykarbamylowa wytwarza sie przez poddanie reakcji soli sodowej kwasu o wzorze lr w którym Rj ma wyzej podane znaczenie, a R2 oznacza grupe wodorotlenowa i niskoalkiloizocyja- nianem.Jako niskoalkiloizocyjanian korzystnie stosuje sie izocyjanian, w którym rodnik niskoalkilowy pod¬ stawiony jest jedna lub kilkoma niskimi grupami alkoksylowymi lub atomami chlorowca i odpowied¬ nio uzyskuje sie zwiazki o wzorze 1, w którym Rx ma wyzej podane znaczenie, a R2 oznacza grupe karbamoiloksylowa o wzorze —O—CO—NHR3, w którym R3 oznacza niskoalkilowy rodnik ewentu¬ alnie podstawiony niskimi grupami alkoksylowy¬ mi lub atomami chlorowca.Jako niskoalkiloizocyjanian podstawiony chlorow¬ cem stosuje sie P-chloroetyloizocyjanian i otrzymu¬ je odpowiednio zwiazek o wzorze 1, w którym Rj ma wyzej podane znaczenie, a R2 oznacza gru¬ pe karbamoiloksylowa o wzorze —O—CO—NHR3,. w którym R3 oznacza rodnik fi-chloroetylowy.W sposobie wedlug wynalazku stosuje sie zwla- 15 20 25 30 35 40 45 50 55 6069 090 5 szcza takie surowce wyjsciowe, które prowadza do uzyskania wymienionych, szczególnie cennych pro¬ duktów koncowych.Pochodne cefalosporynowe sa stosowane jako zwiazki wyjsciowe, sa ogólnie znane lub mozna je wytwarzac wedlug znanych sposobów.Sposób wedlug wynalazku obejmuje równiez te metody postepowania, w których jako produkt wyj¬ sciowy stosuje sie zwiazek przejsciowy otrzymany w dowolnym etapie procesu lub stosuje sie zwia¬ zek w postaci soli.Nowe zwiazki mozna stosowac w lecznictwie w postaci preparatów farmaceutycznych, zawieraja¬ cych te zwiazki w mieszaninie z odpowiednim do stosowania miejscowego, dojelitowo albo pozaje- litowo farmaceutycznym nosnikiem organicznym lub nieorganicznym, stalym lub cieklym. Jako no¬ sniki odpowiednie sa te substancje, które nie re¬ aguja z nowa grupa zwiazków, jak np. woda, ze¬ latyna, laktoza, skrobia, alkohol, stearylowy, steary¬ nian magnezu, talk, olejki roslinne, alkohole ben¬ zylowe, guma, glikol propylenowy, glikole polial- kilenowe, wazelina, cholesterol, lub inne znane nos¬ niki farmaceutyczne.Preparaty farmaceutyczne mozna wytwarzac w postaci tabletek, drazetek, masci, kremów, kapsu¬ lek, badz tez w cieklej postaci jako roztwory, za¬ wiesiny albo emulsje. Preparaty ciekle sa ewentu¬ alnie sterylizowane i/lub zawieraja substancje po¬ mocnicze, jak srodki konserwujace, stabilizujace, zwilzajace albo emulgatory, srodki pomagajace roz¬ puszczaniu, albo sole dla zmieniania cisnienia osmo- tycznego, badz tez substancje buforujace, jak i ewentualnie inne srodki cenne pod wzgledem te¬ rapeutycznym substancje. Preparaty wytwarza sie znanymi powszechnie metodami.Sposób wedlug wynalazku ilustruja nizej podane przyklady, w których temperature podano w stop¬ niach Celsjusza, a kwas 7-aminocefalosporanowy oznaczono symbolem 7-ACA.W chromatografii cienkowarstwowej na zelu krzemionkowym stosowano nastepujace uklady: Uklad 52=n-butanol-kwas octowy-woda (75 : 7,5)21) Uklad 101A=n-butanol-pirydyna-kwas octowy-wo- da (42 : 24 : 4 : 30).Przyklad I. 5,92 g (15 mM) bromoacetylo-7- -ACA rozpuszcza sie w 45 ml dwumetyloformami¬ du. Do tego dodaje sie roztworu 3,37 g (49,5 mM) imidazolu w 22,5 ml chlorku metylu. Calosc prze¬ plukuje sie 7,5 ml chlorku metylenu. Poniewaz mieszanina reakcyjna nagrzewa sie, kolbe nalezy wstawic na krótki przeciag czasu do wody z lo¬ dem. Po 6 godzinach dodaje sie 1,17 ml lodowate¬ go kwasu octowego i wyodrebnia kwas 7-[imidazo- lilo(l)-acetyloamino]-cefalosporanowy przy pomocy frakcjonowanego wytracania.W tym celu mieszanine reakcyjna zadaje sie 37,5 ml mieszaniny 4 objetosci chlorku metylenu i 1 objetosci czterowodorofuranu, w rezultacie cze¬ go powstaje osad, który oddziela sie przez odsa¬ czenie na nuczy.Do przesaczu stale mieszajac, dodaje sie 30 ml chlorku metylenu i 160 ml czterowodorofuranu i wytworznoy bezbarwny osad odsacza sie na nuczy i przemywa czterowodorofuranem. W celu usunie- 6 cia pozostalosci dwumetyloformamidu osad rozcie¬ ra sie z 75 ml mieszaniny: chlorek metylenu — cztCrowodorofuran (4 : 1), odsacza na nuczy i jesz¬ cze raz przemywa czterowodorofuranem. Po wysu- 5 szeniu pod obnizonym cisnieniem uzyskuje sie kwas 7-[imidazolilo-(l)-acetyloamino]-cefalosporanowy w postaci prawie bezbarwnego proszku.Substancja zabarwia sie w temperaturze 131° na zóltawy kolor i topnieje w temperaturze 141—150°, io z równoczesnym rozkladem w opróznionej z powie¬ trza kapilarze. [«] d=+127° ±lC (w wodzie, c=l). Rf52=0,03; R10lA = 0,50. 1,97 g kwasu 7-[imidazolilo(l)-acetyloamino]-cefa- 15 losporanowego rozpuszcza sie w 100 mililitrach wo¬ dy, ogrzewa do temperatury 37°, po czym odczyn roztworu doprowadza sie do wartosci pH 7,5, za pomoca 57,5 ml 0,1 N roztworu wodorotlenku so¬ du. Nastepnie dodaje sie 50 mg preparatu zawiera- 20 jacego zawiesine acetyloesterazy (z Bacillus subti- lis ATCC 6633, porównac Patent brytyjski 1 080 904) w 2 ml wody i zobojetnia wytwarzany kwas octowy, do wartosci pH 7,3 0,1 N roztworem wo¬ dorotlenku sodu, za pomoca automatycznego przy- 25 rzadu do miareczkowania. Po uplywie 4 godzin reakcja enzymatycznej hydrolizy zostaje zakonczo¬ na. Nastepnie roztwór doprowadza sie do wartosci pH 6,5, po czym saczy sie przez filtr G4 ze szkla spiekanego i liofilizuje. 30 W rezultacie uzyskuje sie 2,62 g soli sodowej kwasu 7-[imidazolilo(l)-acetyloamino] -O-desacety- lo-cefalosporanowego, w postaci zóltawej zy¬ wicy.Ten nieoczyszczony produkt zadaje sie mieszani- 35 na 22 ml bezwodnego dwumetyloformamidu i 6,15 ml trójetyloaminy, po czym dodaje, 3,7 ml (3-chlo- roetyloizocyjanianu i miesza w ciagu 0,5 godziny w temperaturze pokojowej. Nastepnie rozpuszczal¬ nik oddestylowuje sie pod obnizonym cisnieniem 4o i brazowa pozostalosc o charakterze zywicy rozcie¬ ra wielokrotnie z porcjami po 100 ml bezwodnego eteru. Nierozpuszczalna w eterze pozostalosc roz¬ puszcza sie w 60 ml wody i ekstrahuje 2 razy 300 ml porcjami, a nastepnie 2 razy 150 ml porcjami 45 estru octowego. Fazy organiczne przemywa sie 2- krotnie porcjami po 15 ml wody. Faze wodna przesacza sie przez kolumne z „Sephadexu" i prze¬ mywa woda. Stosuje sie kolumne o 2,1 cm sred¬ nicy i 9 cm wysokosci z Sephadexu CM 25C (po- 50 stac H+). Pierwsze 80 ml eluaty zawiera produkt uboczny. Nastepne 150 ml wycieku zawiera zólta¬ wy roztwór czynnika aktywnego. Roztwór przesa¬ cza sie przez cienka warstewke „Celitu" i liofilizu¬ je. W ten sposób uzyskuje sie wysokiej czystosci 55 preparat kwasu 0-desacetylo-0-(P-chloroetylokar- bamoilo)-7-[imidazolilo(l)-acetyloamino] -cefalospo- ranowego w postaci puszystego proszku o nizej po¬ danej charakterystyce.Widmo w nadfiolecie: 60 Preparat ten posiada 7.max 254 nm, e=8050 (w wo¬ dzie).Skrecalnosc optyczna wynosi: ^ = +154° ±1° (c= =0,83 w wodzie).Chromatogram cienkowarstwowy: B5 wartosc Rf:69 090 7 w ukladzie 101A=0,3; w ukladzie ester octowy-pi- irydyna-kwas octowy lodowaty-woda (62 : 21 : 6 :11) =0,07.Przyklad II. 11,75 g kwasu 3-(desacetoksyme- tylo)-3-benzoilotiometylo-7-bromoacetyloamino-ce- falosporanowego rozpuszcza sie w 45 ml dwumety- loformamidu z dodatkiem roztworu 5,25 g imidazo- lu w 12 ml dwumetyloformamidu. Roztwór zadaje sie 1,45 ml lodowatego kwasu octowego i pozostawia w temperaturze pokojowej bez dostepu swiatla. Po uplywie 23 godzin, intensywnie mieszajac i chlo¬ dzac w wodzie z lodem, dodaje sie powoli 56 ml Via N roztwór kwasu solnego. Otrzymany brazowy osad o konsystencji smaru odsacza sie przez cien¬ ka warstewke krzemionki („Hyflo"). Przesacz za¬ daje sie szybko dalszymi 570 ml Vi2 N roztworu kwasu solnego, przy badrzo intensywnym miesza¬ niu i oziebianiu w lodzie, po czym miesza sie i chlodzi w ciagu nastepnej 1 godziny. Wytworzony platkowaty osad kwasu 3-(desacetoksymetylo)-3- benzoilotiometylo-7-[imidazolilo-(l)-acetyloamino]- -cefalosporanowego, odsacza sie na nuczy i prze¬ mywa 10 ml wody. Otrzymuje sie produkt o ni¬ zej podanej charakterystyce: Rf52=0,13; Rf10iA=0,35. Widmo w nadfiolecie w roz¬ tworze 0,1 M kwasnego weglanu sodu: kmax = 243 nm (e = 14'200) ^mxa = 273 nm (e = 15'600) , Produkt wyjsciowy mozna wytworzyc w naste¬ pujacy sposób: Roztwór 17,5 g kwasu 3-(desacetoksymetylo)-3- -benzoilotiometylo)-7-amino-cefalosporanowego (po¬ równac brytyjski opis patentowy nr 650 444) i 12,5 ml trójetyloaminy w 1 litrze dwumetyloformamidu, wkrapla sie w ciagu 1 godziny do roztworu 9,2 ml bromku bromoacetylowego w 100 ml chlorku metylenu, utrzymanego w temperaturze od —13° do —15°C, w atmosferze azotu. Nastepnie pozwala sie na powolny wzrost temperatury do 10° w ciagu 1,5 godziny i przetrzymuje w tych warunkach mie¬ szanine w ciagu dalszych 30 minut, po czym odde- stylowuje sie wieksza czesc rozpuszczalnika pod obnizonym cisnieniem do 0,5—1 mm Hg przy ozie¬ bianiu mieszaniny suchym lodem z acetonem. Ole¬ isty produkt wlewa sie do fosforanowego roztwo¬ ru buforowego o pH=6 i wytrzasa z 1 litrem lo¬ dowatego kwasu octowego. Osad wytworzony na granicy faz odsacza sie lub odwirowuje, po czym odczyn mieszaniny doprowadza sie do wartosci pH 2; faze wodna nasyca sola kuchenna i oddziela fa¬ ze organiczna i faze wodna ekstrahuje sie kolejno 600 i 400 ml octanu etylu.Faze organiczna przemywa sie nasyconym roz¬ tworem soli kuchennej, suszy siarczanem sodu i kolejno saczy przez kolumne wypelniona 100 mg zelu krzemionkowego. Przesacze odparowuje sie do suchosci pod zmniejszonym cisnieniem, a pozosta¬ losc zadaje 30 ml etanolu i krystalizuje w tempe¬ raturze —20°. Otrzymuje sie 7,8 g kwasu 3-desace- toksymetylo)-3-benzoilotiometylo-7-bromoacetylo- aminocefalosporanowego o temperaturze topnienia 137—138° o nizej podanej charakterystyce: Rf52=0,55.Widmo w nadfiolecie (sól sodowa w wodzie) Xmax 243 nm (e=16'800) i 275 nm (e=20'600) 8 20 = —47 ±1° (c =l; w mieszaninie 0,1 M kwas¬ nego weglanu sodu z acetonem (1:1).Przyklad III. 5,13 g kwasu 3-(desacetoksyme- tylo)-3-benzoilotiometylo-7-[imidazolilo(l) - acetylo- 5 amino]-cefalosporanowego rozpuszcza sie w 45 ml pirydyny, po czym dodaje 45 ml dwuoksanu, a na¬ stepnie 26 ml 40% roztworu nadchloranu rteci i silnie mieszajac, w atmosferze azotu, utrzymuje w temperaturze 45° w ciagu 45 minut. Nastepnie io mieszanine oziebia sie, zadaje 13,8 ml kwasu mer- kaptobenzoesowego i wytrzasa w ciagu 5 minut, po czym oddestylowuje sie rozpuszczalnik pod ob¬ nizonym cisnieniem, a pozostalosc rozpuszcza w 250 ml wody i przesacza przez „Celit". Przesacz 15 przemywa sie kolejno 110 ml toluenu, 2-krotnie roztworem 68 ml „Amberlitu" L.A-2 w 140 ml to¬ luenu, oraz dwukrotnie 110 ml toluenu.Nastepnie faze wodna przesacza sie przez kolum¬ ne, wypelniona kolejno warstwami 10 ml „Sepha- 20 dex" CM C-25 (postac H+), 42 ml „Aloxu", 10,5 ml „Zeo-karb" 226 (posta+ H+), 42 ml „Aloxu", 10,5 ml „Dowexu-l" (postac octanowa) i 10 ml „Sepha- dexu" CM C-25 (postac H+). „Celit", fazy organicz¬ ne oraz kolumne ekstrahuje sie 2-krotnie porcjami 25 po 30 ml wody, po czym kolumne eluuje sie jesz¬ cze 300 ml wody. Polaczone eluaty zageszcza sie pod obnizonym cisnieniem, odsacza z niewielkiej ilosci osadu i odparowuje do suchosci. Pozostalosc ekstrahuje sie na cieplo 10 ml alkoholu, uzyskujac 30 w ten sposób czysty kwas 3-(desacetoksymetylo)-3- -pirydyniometylo-7-[imidazolilo(l)-acetyloamino]-ce- falosporanowy o nizej podanej charakterystyce: M d = +76° ±lG nadfiolecie w roztworze wodnym: 35 Xmax 257 mM (e=ll'650); Rf10iA = 0,05.Przyklad IV. 7,13 g kwasu 7-[imidazolilo(l)- -acetyloamino]-cefalosporanowego rozpuszcza sie w 200 ml wody i za pomoca 180 mg acetyloestarazy, w temperaturze 37°C, przeprowadza sie w kwas 7- 40 -[imidazolilo(l)-acetyloamino]-0-dezacetylocefalo- sporanowy wedlug sposobu opisanego w przykla¬ dzie I i otrzymuje 9,04 g soli sodowej tego kwasu. 7,32 g otrzymanego surowego produktu przenosi sie do mieszaniny 100 ml suchego dwumetylofor- 45 mamidu i 18 ml trójetyloaminy, po czym w ciagu 5 minut dodaje sie roztwór 9,4 ml (8,55 g) metylo- izocyjanianu w 30 ml dwumetyloformamidu i mie¬ sza w ciagu 50 minut w temperaturze otoczenia.Nastepnie roztwór przesacza sie, oddestylowuje roz-, 50 puszczalnik w wysokiej prózni i pozostaly smolisty brazowy osad wymywa 3 razy 350 ml porcjami ab¬ solutnego eteru, po czym nierozpuszczalna w ete¬ rze pozostalosc rozpuszcza sie w 200 ml wody o wartosci pH 7 i kolejno ekstrahuje octanem etylu 55 w porcjach 1500 ml, 1500 ml i 1000 ml i 750 ml, po czym organiczne fazy przemywa sie 2 razy 75 ml porcjami wody. Faze wodna razem z woda stosowana do mycia przepuszcza sie przez kolumne o pojemnosci 100 ml, wypelniona Sephadex'em, po 60 czym kolumne plucze sie woda.W powyzszej operacji stosuje sie kolumne o prze¬ kroju 3,0 cm i wysokosci 15 cm, oraz Sephadex CM25C (w postaci H+). Pierwsze 250 ml eluatu zawiera produkt uboczny, natomiast nastepne 300 65 ml eluatu w postaci zóltego roztworu, zawiera wla-69 090 9 10 sciwy produkt, który suszy sie za pomoca liofiliza¬ cji. W celu dalszego oczyszczenia liofilizat rozpusz¬ cza sie w 45 ml wody, i traktuje aktywnym we¬ glem (Norit), po czym przesacza przez Celit i prze¬ sacz doprowadza do wartosci pH 6, za pomoca nasyconego roztworu kwasnego weglanu sodu i otrzymany roztwór filtruje ponownie przez kolum¬ ne wypelniona 50 ml Sephadex'u CM 25 C (w po¬ staci H+), a nastepnie poddaje liofilizacji.Otrzymuje sie 1,9 g kwasu O-dezacetylo-O-mety- lokarbamoilo-7-[imidazolilo(l)-acetyloamino]-cefalo- sporanowego w postaci bardzo czystej jako bez¬ barwny proszek o nizej podanej charakterystyce: Widmo w ultrafiolecie A,max 260 nm (e=8050); M + 139 ±1° (c = skrecalnosc optyczna: = 0,94 w wodzie) Chromatogram cienkowarstwowy na zelu krze¬ mionkowym: Bf10iA = 0,25; Rf52=0,03.Przyklad V. 8,3 g kwasu 7-[imidazolilo(l)- -acetyloamino]-cefalosporanowego rozpuszcza sie w 230 ml wody i za pomoca 210 mg acetyloesterazy, w temperaturze 37°C, przeprowadza sie w kwas 7-[imidazolilo(l)-acetyloamino]-0-dezacetylo-cefalo- sporanowy, wedlug sposobu opisanego w przykla¬ dzie I i otrzymuje sie 10,5 g soli sodowej tego kwa¬ su.Otrzymany surowy produkt przenosi sie do mie¬ szaniny 110 ml suchego dwumetyloformamidu i 27 ml trójetyloaminy, po czym w ciagu 5 minut do¬ daje sie roztwór 18 ml etyloizocyjanianu w 50 ml dwumetyloformamidu i miesza w ciagu 50 minut, w temperaturze otoczenia. Nastepnie roztwór prze¬ sacza sie, oddestylowuje rozpuszczalnik w wyso¬ kiej prózni i pozostaly smolisty brazowy osad wy¬ mywa sie 3 razy 500 ml porcjami absolutnego ete¬ ru, po czym nierozpuszczalna w eterze pozostalosc rozpuszcza sie w 200 ml wody o wartosci pH 7 i kolejno ekstrahuje sie octanem etylu w porcjach 2000 ml, 1500 ml i 1500 ml, po czym organiczne fazy przemywa sie 2 razy 100 ml porcjami wody.Faze wodna, razem z woda stosowana do mycia, przepuszcza sie przez kolumne o pojemnosci 120 ml, wypelniona Sephadex'em, po czym kolumne plucze sie woda.W powyzszej operacji stosuje sie kolumne o prze¬ kroju 3,0 cm i wysokosci 18 cm, wypelniona Se- phadex'em CM 25 C (w postaci H+). Pierwsze 320 ml eluatu zawiera produkt uboczny, natomiast na¬ stepne 260 ml eluatu w postaci zóltawego roztwo¬ ru zawiera wlasciwy produkt, który suszy sie za pomoca liofilizacji. W celu dalszego oczyszczenia lio¬ filizowany produkt rozpuszcza sie w 45 ml wody i traktuje aktywnym weglem (Norit), po czym przesacza przez Celit i przesacz doprowadza do war¬ tosci pH 6, za pomoca nasyconego roztworu kwasnego weglanu sodu i otrzymany roztwór ponownie fil¬ truje przez kolumne wypelniona 80 ml Sephadex'u CM 25 C (w postaci H+), a nastepnie poddaje lio¬ filizacji. Otrzymuje sie 2,9 g kwasu O-dezacetylo- -0-etylokarbamoilo-7-[imidazolilo(l)-acetyloamino]- -cefalosporanowego w postaci bezbarwnego prosz¬ ku o nizej podanej charakterystyce.Widmo w ultrafiolecie: Xmax 258 nm (e=780) Skrecalnosc optyczna: [o] g = +1500° ±1° (c = = 0,98 w wodzie) Chromatogram cienkowarstwowy na zelu krze¬ mionkowym: 5 Rf101A= 0,32; Rf52= 0,04 PL PL

Claims (7)

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych pochodnych kwa- io su 7-aminocefalosporanowego, o wzorze 1, w któ¬ rym Rj oznacza ewentualnie uwodorniona grupe imidazolowa lub imidazolilowa zwiazana atomem azotu z grupa acetyloaminowa R2 oznacza grupe wodorotlenowa ewentualnie zestryfikowana kwa- 15 sem karboksylowym róznym od kwasu octowego, grupe karbamoiloksylowa ewentualnie podstawiona przy atomie azotu, w której atomy tlenu moga byc zastapione atomami siarki lub oznacza czwar¬ torzedowa grupe aminowa, jak i ich wewnetrznych 20 soli, znamienny tym, ze poddaje sie reakcji ewen-- tualnie uwodorniony imidazol, ze zwiazkiem o wzo¬ rze 4, w którym Z oznacza reszte chlorowcoacylowa, a R2 ma wyzej podane znaczenie, albo zwiazek o wzorze 4, w którym Z oznacza atom wodoru, a 25 R2 rna wyzej podane znaczenie lub oznacza grupe wodorotlenowa ewentualnie zestryfikowana kwa¬ sem octowym, acyluje sie reaktywna pochodna grupy o wzorze R±—CH2—CO—, w którym Ri oz¬ nacza ewentualnie uwodorniony rodnik imidazolu 30 i w otrzymanym zwiazku o wzorze 1, w którym Rj ma wyzej podane znaczenie, a R2 oznacza gru¬ pe wodorotlenowa ewentualnie zestryfikowana kwa¬ sem octowym,, ewentualnie estryfikuje sie grupe wodorotlenowa kwasem karboksylowym róznym od 35 kwasu octowego, w którym atomy tlenu mozna zastepowac atomami siarki lub wymienia sie grupe acetylowa na inna grupe acylowa kwasu karboksylo- wego lub N-podstawiona grupe karbamoilowa, w których to grupach atomy tlenu moga byc zasta- 40 pione atomami siarki lub na czwartorzedowa gru¬ pe aminowa i ewentualnie przeprowadza otrzyma¬ ne zwiazki w ich sole z metalami takie jak sole z metalami alkalicznymi, metalami ziem alkalicz¬ nych lub w sole z amoniakiem albo z organiczny- 45 mi zasadami lub otrzymane sole przeprowadza w wolne kwasy karboksylowe i ewentualnie w ich wewnetrzne sole.

2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze poddaje sie reakcji ewentualnie uwodorniony imi- 50 dazol, ze zwiazkiem o wzorze 4, w którym R2 ma znaczenie jak w zastrz. 1, a Z oznacza reszte chlo¬ rowcoacylowa taka jak bromoacetylowa, oznacza rodnik bromoacetylowy, z ewentualnie uwodornio¬ nym imidazolem. 55

3. Sposób wedlug zastrz, 1 lub 2, znamienny tym, ze stosuje sie imidazol lub imidazoline podstawio¬ na niskoczasteczkowymi rodnikami alkilowymi lub niskoczasteczkowymi rodnikami alkoksylowymi.

4. Sposób wedlug zastrz. 1—3, znamienny tym, ze 60 reakcji poddaje sie zwiazek o wzorze 1, w którym Ri ma znaczenie jak w 1 zastrz., a R2 oznacza ze¬ stryfikowana grupe wodorotlenowa, ze zwiazkiem pirydyniowym i otrzymuje kwas 7-aminocefalospo- ranowy, w którym Rx ma wyzej podane znaczenie, 65 a R2 oznacza grupe pirydyniowa.69 090 11

5. Sposób wedlug zastrz. 1—4, znamienny tym, ze reakcji poddaje sie sól sodowa zwiazku o wzo¬ rze 1, w którym Rj ma znaczenie jak w 1 zastrz., a R2 oznacza grupe wodorotlenowa, z niskoalkilo- izocyjanianem i otrzymuje zwiazek o wzorze 1, w którym Rx ma wyzej podane znaczenie, a R2 oz¬ nacza niskoczasteczkowa grupe alkilooksykarbamy- lowa.

6. Sposób wedlug zastrz. 5, znamienny tym ,ze jako niskoalkiloizocyjaman stosuje sie izo¬ cyjanian, w którym rodnik niskoalkilowy podstawiony jest jedna lub kilkoma ni¬ skimi grupami alkoksylowymi lub atomami chlo- 10 12 rowca i uzyskuje zwiazki o wzorze 1, w którym R2 ma wyzej podane znaczenie, a R2 oznacza gru¬ pe karbamoiloksylowa o wzorze —C—CONHR3, w którym R3 oznacza niskoalkilowy rodnik ewentual¬ nie podstawiony niskimi grupami alkoksylowymi lub atomami chlorowca.

7. Sposób wedlug zastrz. 6, znamienny tym, ze jako niskoalkiloizocyjaman podstawiony chlorow¬ cem stosuje sie 0-chloroetyloizocyjanian i otrzymu¬ je zwiazek o wzorze 1, w którym Ri ma znacze¬ nie jak w zastrz. 1, a R2 oznacza grupe karbamo¬ iloksylowa o* wzorze —C—CO—NHR3, w którym R3 oznacza rodnik ft-chloroetyIowy. Rj-S—H2C-C-HN—CH O Wzór 1 / CH N -s-cs—n: Wzór 2 COO.H R CH^Ro -o. R, Wzor 3 Z-NH —CH y o l CH XCH, 4Z CHo—R< COOH y/zór 4 FZG w Pab., zam. 1582-73, naklad 110+20 egz. Cena zl 10,— PL PL