PL52606B1 - - Google Patents

Description

e) Amid L - cysteinylo - L- fenyloalanylo - L - izo¬ leucylo - L - glutaminylo - L - asparaginylo - L- cysteiriylo - L - propylo - L - oanitylo-glicyny.Roztwór 5 g amidu N-karbobenzoksy-S-benzylo- -L - cysteinylo - L - fenyloalanylo - L - izoleucylo- 5 -L - glutaminylo - L - asparaginylo - S - benzylo- -L - cysteinylo - L - prolylo - N - & - P - tolueno¬ sulfonylo - L - ornitylo ¦* glicyny w 1200 ml suche¬ go cieklego amoniaku zadaje sie mieszajac w tem¬ peraturze wrzenia roztworu taka iloscia sodu albo 10 potasu, az powstanie trwale niebieskie zabarwienie.Po dodaniu 3 g chlorku am'onu odparowuje sie roz¬ twór do sucha. Pozostalosc zawiera amid - L - cy¬ steinylo - L - fenyloalanylo - L - izoleucylo - L- -glutaminylo - L - asparaginylo - L - cysteinylo- 15 -L - propylo - L - ornitylo - glicyny, f) fe2-orn8-oksytocyna.Pozostalosc zawierajaca amid L-cysteinylo-L-fe- nylo - alanylo - L ^ izoleucylo - L - glutaminylo- -L - asparaginylo - L - cysteinylo - L - prolylo - L- 20 -ornitylo-glicyny rozpuszcza sie w 5 litrach 0,01 kwasu octowego i przy wartosci pH 6,5 — 8,0 utle¬ nia przez przepuszczanie powietrza albo tlenu w cia¬ gu jednej godziny w temperaturze 0—40°. Roztwór doprowadza sie do pH 4,0 —5,0 i odparowuje do 25 sucha po dodaniu 50 g chlorku sodu albo 0,64 g kwasu metanosulfonowego albo 0,76 g kwasu trój- fluorooctowego, przy czym otrzymuje sie suchy pro¬ szek, który jest trwaly. Mozna go przechowywac i przy uzyciu rozpuscic, otrzymujac klarowny roz- so twór. Mozna równiez zastosowac roztwór wprost, wzglednie po rozcienczeniu woda albo roztworem soli. W celu usuniecia nieorganicznych soli mozna wyzej wymieniony proszek po dodaniu kwasu trój- fluorooctowego poddac rozdzialowi przeciwprado- 35 wemu w mieszaninie drugorzedowego butanolu, wody i kwasu trójfluorooctowego (120/160/1). Po 200 stopniach przenoszenia substancja znajduje sie w rurkach 47—66, przy czym maksimum znajduje sie w rurce 56 (K=0,39). Po odparowaniu otrzymuje 40 sie z dobra wydajnoscia czynny polipeptyd w po¬ staci hygroskopijnego trójfluorooctanu, który mi¬ gruje przy chromatografii i przy elektroforezie pa¬ pierowej przy pH 5,8 i 40 V/cm: 49 mm w ciagu 60 minut (histydyna uzyta w celach porównawczych 45 wedruje 65 mm). Migracja w elektroforezie papie¬ rowej przy pH 1,9 i napieciu 40 V/cm wynosi 68 mm w ciagu 60 minut (w celach porównawczych uzyty tryptofan wedruje 66 mm). Rf przy chromatografii papierowej w ukladzie alkohol izoamylowy (pirydy- 50 na) woda 35/33/30 wynosi 0,25. Calkowita hydroliza (16 godzin, 110°, 6N/HC1) daje nastepujace amino¬ kwasy w równoczasteczkowych ilosciach: cystyna, kwas glutaminowy, kwas asparaginowy, prolina, ornityna, glicyna, fenyloalanina i izoleucyna. Pro- 56 dukt posiada nastepujace dzialanie biologiczne: 120 jednostek miedzynarodowych (mg na cisnienie krwi szczura, 0,6 na zahamowanie diurezy szczura i okolo 1 jednostki miedzynarodowej) mg na macice szczura. 60 Przyklad II. Postepuje sie jak w przykladzie I.Utlenia sie jednak pod koniec w temperaturze 0— 40°, dodajac 7,5 ml 1 normalnego roztworu nad¬ tlenku wodoru w wodzie przy pH 4,0—9,0 (zamiast utleniac w strumieniu powietrza albo tlenu). 65 Przyklad III. Postepuje sie jak w przykla-dzie I, lecz pod koniec procesu utlenianie prowadzi sie w temperaturze 0—35° przez dodanie 6,7 ml 1 normalnego wodnego roztworu zelazocyjanku po¬ tasu (pH 5,5—7,5).Dalsze przyklady dotycza sposobu otrzymywania preparatów farmaceutycznych z polipeptydów wy¬ twarzanych sposobem wedlug wynalazku.Przyklad IV. Roztwór do znieczulania infil¬ tracyjnego: fe2-orn8-oksytocyna 0,0005 g chlorowodorek 2-dwuetyloamino-2,6,- ace- toksylidydu (chlorek lidokainy) 5,0 g alkohol trójchloroizobutylowy 5,0 g alkohol etylowy 94P/a 5,0 g kwas octowy lodowaty 1,0 g octan sodowy trójwodny 2,0 g woda destylowana ad 1000 ml Otrzymywanie: kwas octowy lodowaty i octan sodu rozpuszcza sie w 900 ml destylowanej wody, dodaje silnie mieszajac roztwór alkoholu trójchlo- roizobutylowego w 94 procentowym alkoholu ety¬ lowym, miesza az calosc sie rozpusci, dodaje chlo¬ rek lidokainy i fe2-orn8-oksytocyne po uprzednim rozpuszczeniu, dopelnia woda do 1000 ml, saczy przez filtr bakteryjny i napelnia ampulki.Przyklad V. Roztwór do znieczulania przewo¬ dowego: fe2-orna-oksytocyna 0,001 g chlorowodorek p-aminobenzoilo-dwuety- loamino-etanolu (chlorowodorek nowo- kainy) 10,0 g fosforan dwusodowy bezwodny 2,0 g kwas cytrynowy jednowodny 3,0 g woda destylowana ad 1000 ml Otrzymywanie: rozpuszcza sie podczas mieszania w 900 ml wody kwas cytrynowy, fosforan dwusodo¬ wy oraz chlorowodorek nowokainy, dodaje fe2-orns- -oksytocyne, dopelnia do 1000 ml, saczy przez filtr membranowy, napelnia ampulki i sterylizuje przez ogrzewanie w ciagu 6 minut do temperatury 120°.Przyklad VI. Roztwór do znieczulania po¬ wierzchniowego : fe2-orn8-oksytocyna 0,002 g metylosulfonian estru (3-dwuetyloamino- -P-izobutylo-etylowego kwasu p-amino- benzoesowegb (metylosulfonian leucyno- kainy) 100 g kwas octowy lodowaty 20 g 8 octan sodowy trójwodny 20 g p-hydroksybenzoesan propylu 1,0 g p-hydroksybenzoesan metylu 2,0 g woda destylowana ad 1000 ml 5 Otrzymywanie: rozpuszcza sie w 800 ml wody de¬ stylowanej p-hydroksybenzoesan propylu i p-hydro¬ ksybenzoesan metylu jak równiez kwas octowy lodowaty i octan sodowy, dodaje metylosulfonian leucynokainy i po rozpuszczeniu fe2-orn8-oksytocyne 10 Po dopelnieniu do 1000 ml postepuje sie dalej ana¬ logicznie jak w przykladzie IV.Przyklad VII. Roztwór do znieczulania po¬ wierzchniowego : fe2-orn8-oksytocyna 0,001 g 15 chlorowodorek (±/-N-2-propyloaminopro- pionylo)-2-toluidyny (eksadryna) 30,0 g chloreksodowy 8,0 g octan sodowy trójwodny 1,0 g kwas octowy lodowaty 0,5 g 20 P-hydroksybenzoesan metylu 1,0 g woda destylowana ad 1000 ml Otrzymywanie: rozpuszcza sie w 800 ml wody p-hydroksybenzoesan metylu, dodaje chlorek sodo¬ wy i kwas octowy lodowaty oraz octan sodowy, 25 dodaje chlorowodorek (±/-N-/2-propyloaminopropio- nylo)-2-toluidyny, a po rozpuszczeniu fe2-orn8- oksytocyne. Po dopelnieniu woda do 1000 ml po¬ stepuje sie dalej analogicznie jak w przykladzie IV. PL

Claims (3)

1. Zastrzezenia patentowe 30 1. Sptosób wytwarzania nowego polipeptydu o wzorze 1, znamienny tym, ze nonapeptyd o wzorze 5 utlenia sie w roztworze wodnym lub wodno-organicznym przy wartosci pH = 4 — 9, a otrzymane zwiazki o wzorze 1 ewentualnie 35 przeprowadza sie znanym sposobem w sole addy¬ cyjne. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako srodek utleniajacy stosuje sie powietrze. 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako 40 srodek utleniajacy stosuje sie tlen, 4. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako srodek utleniajacy stosuje sie nadtlenek wodoru. 5. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako srodek utleniajacy stosuje sie zelazicyjanek po- 45 tasowy.KI. 12 q,6/01 52606 MKP C 07 c CCH 6n5 CH, CH, I Z CH -CH, CONHt CH- I CFL CONH, 1 2 CHZ I 3 I NHA-CH-CO-NH-CH-CQ-NH~CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO- CH, I * Cys fen Ile Gkt CH, Asp C^s CKr-CHi CH, CH2 CH2 CH2 I N—CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH -COINH, 2 z Pro Oi"n G-U k/zói' i CONH2 I CH, CONH, CH, S-R" I CH-CH, CH„ NHR.' I * CH2 I z CH„ NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-N—CH-CO-NH-CH--CO-NH-CH-C0NM Z 2.

2 G{u As-p C\/s ?i»o Wzór 2 0* 52606 MKP C 07 c CH, s-fc" I CH, CsHs CH, CH, I CH-CH3 R'-NH-CH-C0-NH-CH-C0-NH-CH-C0-OH Wzór 3 Ite CH* S-R" I CK I6 CH, .

3 CH2 I CH-cH3 CONH, CH2 CONH, I I * 3 CH2 CH2 I' ' I I I ' R-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO^ S--R" I CH2 c,s Fen me &t-u As-p Cys CH~CH2 CH, I NHR1 CH- I CH. I CH2 LN CH—C0-NH-CH-C0-NH-CH2—C0NH2 PtO Otn Grti SU CcH CH, 6n5 CH, •I 3 CH, CH, SH I nHj-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-nh-Ch-co-nh-ch-co- Cys -Fe-ti He CH-CH, I 3 C0NH2 CH2 CH2 CONH, I CH, Glu Asp Cys CK-CH, CH, IjlH* CH, I z CH, I 2 CH, i L 1—N — CH-C0-NH-CH-C0-NH-CH2-C0NH2 PtO Of-n GJi A/zoV 5" Zaklady Kartograficzne — Wroclaw,_ Zam. 663. Naklad 270 egz. PL