PL52594B1 - - Google Patents

Description

Opublikowano: 25.11.1967 52 594 KI. 30 h, 6 CM4 zjoo MKP A 01 k EzytelnTa] Twórca wynalazku: mgr in. Bronislaw Habaj Wlasciciel patentu: Instytut Przemyslu, Mleczarskiego, Warszawa (Pol¬ ska) Sposób wytwarzania peptonu do podlozy bakteriologicznych Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarza¬ nia peptonu do podlozy bakteriologicznych przy uzyciu bialek mleka z zakwasu kefirowego oraz grzybków kefirowych i zastosowaniu ich enzyma¬ tycznej hydrolizy przez enzymy proteolityczne.Wiadomym jest, ze wartosc i przydatnosc pepto¬ nu zalezy od wyjsciowego substratu jakimi sa bial¬ ka poddane hydrolizie oraz warunków i sposobu hydrolizy.Znany jest sposób otrzymywania peptonu bakte¬ riologicznego na zasadzie hydrolizy enzymatycz¬ nej, w którym surowcem wyjsciowym sa bialka kazeiny kwasowej, lecz okazalo sie, ze sa one ubozsze w niektóre aminokwasy, od bialek mleka nie poddawanego oddzielaniu kazeiny od innych bialek mleka jakimi sa albuminy i globuliny. Mle¬ ko odtluszczone uzywane do hodowli grzybków ke¬ firowych zawiera pelniejszy sklad aminokwasów, a miedzy nimi aminokwasy siarkowe jak cystyna, cysteina, metiomina.Mleko na którym hodowane sa grzybki kefiro¬ we, jak równiez same grzybki zawieraja komórki drozdzowe, które ulegaja autolizie i enzymatycznej hydrolizie wzbogacajac tym samym pepton w ami¬ nokwasy oraz w witaminy Bx i B2, których prak¬ tycznie pozbawiona jest czysta kazeina.Aminokwasy, a w szczególnosci peptydy siarko¬ we i witaminy sa niezbednymi skladnikami pepto¬ nu bakteriologicznego warunkujacymi wzrost drobnoustrojów oraz mozliwie pelne ich ujawnie- 20 30 nie sie przy kontroli produktów spozywczych w formie wzrostu na podlozu bakteriologicznym, któ¬ rego niezbednym skladnikiem jest pepton.Znane sposoby hydrolizy kazeiny przeprowadza sie za pomoca takich enzymów jak: trypsyna, pe¬ psyna, pankreatyna, papaina.Sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze czesciowo kwasna hydrolize bialek mleka wywo¬ lana przez mikroflore grzybków kefirowych uzu¬ pelnia sie lagodna hydroliza enzymatyczna za po¬ moca kompleksu enzymów trawiennych zawartych w gruczole wewnetrznego wydzielania jakim jest trzustka wolowa. Tkanka gruczolu trzustkowego ulega równiez hydrolizie przez enzymy rodzime gruczolu i w ten sposób uzupelnia sklad amino- kwasowy i peptydowy peptonu kefirowego w pro¬ dukty degradacji samej tkanki trzustki.Proces hydrolizy bialek kefirowych odbywa sie w ten sposób, ze zakwas kefirowy wraz z grzybka-; mi. poddaje sie hydrolizie za pomoca enzymów trzustki wolowej z dodatkiem korzystnie 20°/o roz¬ tworu Na2 C03, co najmniej 0,5% chloroformu oraz chlorku wapnia, w temperaturze do 45°C, w ciagu okolo 72 godzin przy wartosci pH w grani¬ cach 8,2 do 8,5, otrzymany hydrolizat ogrzewa sie do wrzenia doprowadzajac nastepnie pH za pomo¬ ca kwasu mlekowego do wartosci 6,8—7, po czym w celu oddzielenia bialek traktuje ponownie chlo¬ roformem i dekantuje badz filtruje a otrzymany przesacz oczyszcza weglem aktywnym i w znany 52 59452 594 3 4 sposób sterylizuje lub suszy w aparaturze rozpylo- wej.Wytworzony pepton zawiera do 17 wolnych ami¬ nokwasów, w tym 7 niezbednych takich jak: lizy¬ na, treonina, metionina, walina, fenyloalanina, izo- 5 leucyna i leucyna.Przyklad. Zakwas kefirowy zawierajacy 3 do 4% grzybków kefirowych ogrzewa sie do tem¬ peratury 60—70°C. Po odstaniu oddziela serwatke tak aby pozostala gestwa kefirowa stanowila V* do ,0 Vn pierwotnej objetosci zakwasu. Uzyskana gestwe kefirowa zwana substratem poddaje sie dokladne¬ mu rozbiciu.za pomoca mieszadla mechanicznego, ochladzanaiejnperatury okolo 45°C i miesza z 20% wodnyni ro^tw^rem Na2C03 az do uzyskania war- ,S tosci pEfc=8,2. — 8,5. Nastepnie, w proporcji na 1 litr.^substratu dodaje sje 3 ml 1 M Ca Cl2, 100— 120 gl zrnteWWej'trzustki swiezo wydobytej po ubo¬ ju oraz- 5*jftl chloroformu. Proces hydrolizy odby¬ wa sie w temperaturze 40 do 45°C przy stalym 2Q mieszaniu przez pierwsze 5 godzin, a nastepnie w kilku minutowych odstepach od 1 do 2 godzin i trwa co najmniej 72 godziny przy ciaglym kory¬ gowaniu wartosci pH do poziomu 8,3—8,5 za po¬ moca 20°/o Na2 C03, przy czym w okresie pierw¬ szych 8 godzin regulacje te nalezy dokonywac co dwie godziny.Przebieg hydrolizy kontroluje sie przyrostem oraz zawartoscia azotu aminowego metoda formo- Iowa. Ilosc ml zuzytego 0,1 N NaOH pomnozona przez 1,4 daje zawartosc azotu aminowego w da- ° nej próbce, która z kolei przelicza sie na wartosci procentowe.W dalszym ciagu procesu wytwarzania otrzyma¬ ny hydrolizat ogrzewa sie w temperaturze wrzenia w ciagu 5 minut, nastepnie szybko ochladza do 35 temperatury 8GaC i zlewa do wysokich maeayn w celu osadzenia sie wytraconych eaesei bialek, a po 2 godzinach dekantuje i doprowadza za pomoca 2C°/o kwasu mlekowego do wartosci pH w grani¬ cach 6,8—7. Nastepnie na kazdy litr hydrolizatu dodaje sie 0,5% chloroformu, miesza i pozostawia 5 w temperaturze 10 do 15°C w celu osadzenia resz¬ tek bialka. Po 12 do 20 godzinach klarowania sa¬ czy sie otrzymany hydrolizat przez filtry Seitza z wkladka filtracyjna o gradacji K-00. Dalsze oczyszczenie od zawartosci zwiazków Maillarda, odbywa sie za pomoca 10 minutowego wytrzasania z dodatkiem 0,1% pylistego wegla aktywnego, po czym saczy przez filtr bibulowy. Uzyskany pepton rozlewa do butelek, sterylizuje w temperaturze 121°C przez 10 minut wzglednie suszy w aparatu¬ rze rozpylowej.Otrzymany w ten sposób pepton jest produktem wysoce przydatnym przy sporzadzaniu podlozy bakteriologicznych. PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób wytwarzania peptonu do podlozy bakte¬ riologicznych na drodze hydrolizy bialek, znamien¬ ny tym, ze zakwas kefirowy wraz z grzybkami poddaje sie hydrolizie za pomoca enzymów trzustki wolowej z dodatkiem korzystnie 20%-go roztworu Na2 COa, co najmniej 0,5% chloroformu oraz chlor¬ ku wapnia, w temperaturze do 45°C w ciagu okolo 72 godzin przy wartosci pH w granicach 8,2 do 8,5, otrzymany hydrolizat ogrzewa sie do wrzenia do¬ prowadzajac nastepnie pH za pomoca kwasu mle¬ kowego do wartosci 6,8—7, po czym w celu od¬ dzielenia bialek traktuje ponownie chloroformem i dekantuje badz filtruje a otrzymany przesacz oczyszcza weglem aktywnym po czym w znany sposób sterylizuje lub stug? w aparatur** fWgiy- towtj. 15 20 25 eitfc 3923/66 r. 273 e£z, Af PL